Evolution of Avian coronavirus (AvCoV) in BHK-21 and VERO cells / Evolução de Coronavírus aviário (AvCoV) em células BHK-21 e VERO

Avian coronavirus (AvCoV) infects a range of tissues in chickens and several other avian species. Although the virus can be isolated in chicken embryos, only a few strains of the 6 genotypes/33 lineages can grow in cell lines, with the Beaudette strain (GI-1 lineage) being the most used for in vitro studies. Considering the differences between cell lines and chicken embryos as habitats for AvCoV, this study aimed to assess the diversity of the genes coding for the nonstructural protein 3 (nsp3) and spike envelope protein (S) after serial passages in BHK-21 and Vero cells. After 14 passages of an embryo-adapted Beaudette strain, the virus loads fluctuated in both cell lines, with the highest loads being 8.72 log genome copies/µL for Vero and 6.36 log genome copies/µL for BHK-21 cells. No polymorphisms were found for nsp3; regarding S, not only aa substitutions (Vero: 8th passage A150S, and 14th S150A; BHK-21: 4th S53F, 8th F53Y, and 8th S95R), but also minor variants could be detected on chromatograms with fluctuating intensities. As the regions of these aa substitutions are within the receptor-binding domain of S, it can be speculated that differences in cell receptors between Vero and BHK-21 cells and the speed of cell death led to the selection of different dominant strains, while the stability of nsp3 supports its function as a protease involved in AvCoV replication. In conclusion, AvCoV quasispecies evolution is influenced by the biological model under consideration, and a gradual transition is seen for minor and major variants.(AU)

O Coronavírus aviário AvCoV infecta uma variedade de tecidos de galinhas e de outras espécies aviárias. Apesar de este vírus poder ser isolado em ovos embrionados de galinha, apenas alguns dos 6 genótipos / 33 linhagens podem crescer em cultivo celular, sendo a cepa Beuadette (linhagem GI-11) a mais utilizada para estudos in vitro. Considerando as diferentes linhagens celulares e ovos embrionados como habitats para o AvCoV, este estudo teve por objetivo estudar a diversidade de genes que codificam para a proteína não-estrutural 3 (nsp3) e espícula (S) após passagens seriadas em células BHK-21 e VERO. Após 14 passagens, de uma amostra Beuadette adaptada a ovos embrionados, os títulos virais variaram em ambas as células, com os maiores títulos sendo de 8,72 log cópias genômicas/µL para Vero e 6,36 cópias genômicas/µL para BHK-21. Nenhum polimorfismo foi encontrando para nsp3. Considerando a proteína S, não somente foram encontradas substituições de aminoácidos (Vero: 8a passagem A150S e 14a passagem S150A; BHK-21: 4a passagem S53F, 8a passagem F53Y e S95R), mas também, variantes subconsensuais foram detectadas pelos cromatogramas com intensidades flutuantes. Uma vez que as regiões destes aa se encontram no domínio de ligação de receptor de S, pode-se especular que diferenças em receptores celulares entre Vero e BHK-21, além da velocidade da morte celular, levaram à seleção de diferentes cepas dominantes, enquanto que a estabilidade de nsp3 concorda com sua função como protease com papel na replicação de AvCoV. Como conclusão, a evolução de quase-espécies de AvCoV é influenciada pelo modelo biológico sob consideração e uma transição gradual é vista para variantes dominantes e subdominantes.(AU)

Evolution of Avian coronavirus (AvCoV) in BHK-21 and VERO cells / Evolução de Coronavírus aviário (AvCoV) em células BHK-21 e VERO

Avian coronavirus (AvCoV) infects a range of tissues in chickens and several other avian species. Although the virus can be isolated in chicken embryos, only a few strains of the 6 genotypes/33 lineages can grow in cell lines, with the Beaudette strain (GI-1 lineage) being the most used for in vitro studies. Considering the differences between cell lines and chicken embryos as habitats for AvCoV, this study aimed to assess the diversity of the genes coding for the nonstructural protein 3 (nsp3) and spike envelope protein (S) after serial passages in BHK-21 and Vero cells. After 14 passages of an embryo-adapted Beaudette strain, the virus loads fluctuated in both cell lines, with the highest loads being 8.72 log genome copies/µL for Vero and 6.36 log genome copies/µL for BHK-21 cells. No polymorphisms were found for nsp3; regarding S, not only aa substitutions (Vero: 8th passage A150S, and 14th S150A; BHK-21: 4th S53F, 8th F53Y, and 8th S95R), but also minor variants could be detected on chromatograms with fluctuating intensities. As the regions of these aa substitutions are within the receptor-binding domain of S, it can be speculated that differences in cell receptors between Vero and BHK-21 cells and the speed of cell death led to the selection of different dominant strains, while the stability of nsp3 supports its function as a protease involved in AvCoV replication. In conclusion, AvCoV quasispecies evolution is influenced by the biological model under consideration, and a gradual transition is seen for minor and major variants.(AU)

O Coronavírus aviário AvCoV infecta uma variedade de tecidos de galinhas e de outras espécies aviárias. Apesar de este vírus poder ser isolado em ovos embrionados de galinha, apenas alguns dos 6 genótipos / 33 linhagens podem crescer em cultivo celular, sendo a cepa Beuadette (linhagem GI-11) a mais utilizada para estudos in vitro. Considerando as diferentes linhagens celulares e ovos embrionados como habitats para o AvCoV, este estudo teve por objetivo estudar a diversidade de genes que codificam para a proteína não-estrutural 3 (nsp3) e espícula (S) após passagens seriadas em células BHK-21 e VERO. Após 14 passagens, de uma amostra Beuadette adaptada a ovos embrionados, os títulos virais variaram em ambas as células, com os maiores títulos sendo de 8,72 log cópias genômicas/µL para Vero e 6,36 cópias genômicas/µL para BHK-21. Nenhum polimorfismo foi encontrando para nsp3. Considerando a proteína S, não somente foram encontradas substituições de aminoácidos (Vero: 8a passagem A150S e 14a passagem S150A; BHK-21: 4a passagem S53F, 8a passagem F53Y e S95R), mas também, variantes subconsensuais foram detectadas pelos cromatogramas com intensidades flutuantes. Uma vez que as regiões destes aa se encontram no domínio de ligação de receptor de S, pode-se especular que diferenças em receptores celulares entre Vero e BHK-21, além da velocidade da morte celular, levaram à seleção de diferentes cepas dominantes, enquanto que a estabilidade de nsp3 concorda com sua função como protease com papel na replicação de AvCoV. Como conclusão, a evolução de quase-espécies de AvCoV é influenciada pelo modelo biológico sob consideração e uma transição gradual é vista para variantes dominantes e subdominantes.(AU)

Enteropatógenos de potencial zoonótico identificados em aves silvestres / Enteric pathogens with zoonotic potential identified in wild birds / Patógenos entéricos de potencial zoonótico identificados en aves silvestres

Os enteropatógenos podem ser considerados um dos principais grupos de micro-organismos patogênicos para humanos e animais. Podem estabelecer infecção nos suscetíveis devido a contaminação de água, alimentos ou pelo contato estreito com animais, incluindo as aves silvestres ou com o ambiente de criação. O acesso das aves da fauna silvestre ao ambiente próximo aos domicílios favorece a contaminação peridomiciliar pelas fezes dos passeriformes e psitaciformes. Locais como parques e praças podem se tornar propícios para veiculação destes patógenos devido a deficiente higienização e livre acesso destas aves silvestres. Neste artigo foram revisados alguns enteropatógenos de origem bacteriana e viral que podem ser considerados de alto risco para infecção humana levando-se em consideração a relevância das aves silvestres neste contexto.(AU)

Entheric pathogens can be considered one of the main pathogenic groups of microorganisms in humans and animals. It can stablish infection in susceptible due to contamination of water, food, or by close contact with animals, including wild birds or the breeding environment. The access of wild birds to the environment close to residences predispose peridomestic contamination by feces of passeriforms and psittaciformes. Places like parks and squares can become propitious for propagation of these pathogens due to poor hygiene and free access of wild birds. In this article some enteric pathogens of bacterial and viral origin was revised, which can be considered of high risk for human infection considering the relevance of wild birds in this context.(AU)

Los patógenos entéricos pueden ser considerados como uno de los grupos principales de microorganismos patogénicos para el ser humano y los animales. Pueden establecer la infección en susceptibles debido a la contaminación del agua, los alimentos o por el contacto cercano con los animales, incluyendo los pájaros salvajes o con el ambiente de la creación. El acceso a las aves de vida silvestre para el medio ambiente cerca de los hogares peridomésticos favorece la contaminación por heces de aves paseriformes y psitaciformes. Los lugares como parques y plazas pueden llegar a ser propicio para la propagación de estos patógenos debido a la falta de higiene y el libre acceso de las aves silvestres. En este artículo algunos patógenos entéricos del origen bacteriano y viral fueron revisados que pueden ser considerados de alto riesgo de contaminación humana, teniendo en cuenta la relevancia de las aves silvestres en este contexto.(AU)

Enteropatógenos de potencial zoonótico identificados em aves silvestres / Enteric pathogens with zoonotic potential identified in wild birds / Patógenos entéricos de potencial zoonótico identificados en aves silvestres

Os enteropatógenos podem ser considerados um dos principais grupos de micro-organismos patogênicos para humanos e animais. Podem estabelecer infecção nos suscetíveis devido a contaminação de água, alimentos ou pelo contato estreito com animais, incluindo as aves silvestres ou com o ambiente de criação. O acesso das aves da fauna silvestre ao ambiente próximo aos domicílios favorece a contaminação peridomiciliar pelas fezes dos passeriformes e psitaciformes. Locais como parques e praças podem se tornar propícios para veiculação destes patógenos devido a deficiente higienização e livre acesso destas aves silvestres. Neste artigo foram revisados alguns enteropatógenos de origem bacteriana e viral que podem ser considerados de alto risco para infecção humana levando-se em consideração a relevância das aves silvestres neste contexto.

Entheric pathogens can be considered one of the main pathogenic groups of microorganisms in humans and animals. It can stablish infection in susceptible due to contamination of water, food, or by close contact with animals, including wild birds or the breeding environment. The access of wild birds to the environment close to residences predispose peridomestic contamination by feces of passeriforms and psittaciformes. Places like parks and squares can become propitious for propagation of these pathogens due to poor hygiene and free access of wild birds. In this article some enteric pathogens of bacterial and viral origin was revised, which can be considered of high risk for human infection considering the relevance of wild birds in this context.

Los patógenos entéricos pueden ser considerados como uno de los grupos principales de microorganismos patogénicos para el ser humano y los animales. Pueden establecer la infección en susceptibles debido a la contaminación del agua, los alimentos o por el contacto cercano con los animales, incluyendo los pájaros salvajes o con el ambiente de la creación. El acceso a las aves de vida silvestre para el medio ambiente cerca de los hogares peridomésticos favorece la contaminación por heces de aves paseriformes y psitaciformes. Los lugares como parques y plazas pueden llegar a ser propicio para la propagación de estos patógenos debido a la falta de higiene y el libre acceso de las aves silvestres. En este artículo algunos patógenos entéricos del origen bacteriano y viral fueron revisados que pueden ser considerados de alto riesgo de contaminación humana, teniendo en cuenta la relevancia de las aves silvestres en este contexto.