Non-Status Epilepticus female rats show seizure-like behaviors in the chronic phase of Pilocarpine experimental model / Ratas sem Status Epilepticus apresentam comportamento do tipo crise epiléptica na fase crônica do modelo experimental da Pilocarpina

Only few studies have focus on animals that received Pilocarpine (Pilo) and did not develop behavioral status epilepticus (SE) and, whether they may become epileptic in the model's chronic phase. Previews works observed mossy fiber sprouting in the hippocampus of Non-SE (NSE) rats, while others observed spontaneous and recurrent seizures (SRS) 6 - 8 months after animals received Pilo. It is known that neuronal excitability is influenced by female hormones, as well as, the occurrence of SE in castrated and non-castrated female rats. However, it is not known whether females that received Pilo and did not show SE, may have SRS. The aim of this work was to investigate whether castrated and non-castrated female rats that did not show behavioral SE after Pilo, will develop SRS in the following one-year. For that, animals received 360 mg/kg of Pilo and were video monitored for 12 months. SE females from castrated and non-castrated groups became epileptic since the first month after drug injection. Epileptic behaviors were identified watching video monitoring recordings in the fast speed. Castrated and Non castrated NSE animals showed behaviors resembling seizures described by Racine Scale stages 1 - 3. Motor alterations showed by NSE groups could be observed only when recordings were analyzed in slow speed. In addition, behavioral manifestations as, rhythmic head movements, sudden head movements, whole body movements and immobility were also observed in both, SE and NSE groups. We concluded that NSE female rats may have become epileptic. Adding to it, slow speed analysis of motor alterations was essential for the observation of NSE findings, which suggests that possibly many motor alterations have been underestimated in epilepsy experimental research.

Poucos são os estudos com foco em animais que receberam Pilocarpina (Pilo) e não desenvolveram status epilepticus (SE) comportamental e, se os mesmos se tornarão epilépticos na fase crônica do modelo. Autores observaram o brotamento das fibras musgosas no hipocampo de ratos Não-SE (NSE), enquanto outros observaram crises espontâneas e recorrentes (CER) 6 - 8 meses após receberam a droga. A excitabilidade neuronal é influenciada pelos hormônios femininos e, da mesma forma, a ocorrência de SE em ratas castradas e não-castradas. Entretanto, não é sabido se as fêmeas que não apresentam SE terão CER. O objetivo deste trabalho foi investigar se fêmeas castradas e não castradas que não tiveram SE comportamental após a injeção de Pilo desenvolverão CER dentro de um ano. Para isto, os animais receberam 360 mg/kg de Pilo e foram videomonitorados por 12 meses. As fêmeas SE castradas e não-castradas se tornaram epilépticas desde o primeiro mês pós Pilo. O comportamento epiléptico foi identificado assistindo as gravações na velocidade rápida. As fêmeas NSE castradas e não-castradas apresentaram comportamentos similares aos estágios 1 - 3 da Escala de Racine. As alterações motoras nestes grupos (NSE) foram observadas apenas quando as videomonitoração foi analisada na velocidade lenta. Além destas, manifestações comportamentais como movimentos rítmicos da cabeça, movimentos súbitos da cabeça, movimentos de todo o corpo e imobilidade também foram observadas em ambos grupos, SE e NSE. Concluímos que as fêmeas NE podem ter se tornado epilépticas. Adicionado a isto, a análise das alterações motoras na velocidade lenta foi essencial para a observação dos achados das fêmeas NSE, o que sugere que possivelmente muitas alterações motoras têm sido subestimados na pesquisa em epilepsia experimental.

Non-Status Epilepticus female rats show seizure-like behaviors in the chronic phase of Pilocarpine experimental model / Ratas sem Status Epilepticus apresentam comportamento do tipo crise epiléptica na fase crônica do modelo experimental da Pilocarpina

Only few studies have focus on animals that received Pilocarpine (Pilo) and did not develop behavioral status epilepticus (SE) and, whether they may become epileptic in the model's chronic phase. Previews works observed mossy fiber sprouting in the hippocampus of Non-SE (NSE) rats, while others observed spontaneous and recurrent seizures (SRS) 6 - 8 months after animals received Pilo. It is known that neuronal excitability is influenced by female hormones, as well as, the occurrence of SE in castrated and non-castrated female rats. However, it is not known whether females that received Pilo and did not show SE, may have SRS. The aim of this work was to investigate whether castrated and non-castrated female rats that did not show behavioral SE after Pilo, will develop SRS in the following one-year. For that, animals received 360 mg/kg of Pilo and were video monitored for 12 months. SE females from castrated and non-castrated groups became epileptic since the first month after drug injection. Epileptic behaviors were identified watching video monitoring recordings in the fast speed. Castrated and Non castrated NSE animals showed behaviors resembling seizures described by Racine Scale stages 1 - 3. Motor alterations showed by NSE groups could be observed only when recordings were analyzed in slow speed. In addition, behavioral manifestations as, rhythmic head movements, sudden head movements, whole body movements and immobility were also observed in both, SE and NSE groups. We concluded that NSE female rats may have become epileptic. Adding to it, slow speed analysis of motor alterations was essential for the observation of NSE findings, which suggests that possibly many motor alterations have been underestimated in epilepsy experimental research.(AU)

Poucos são os estudos com foco em animais que receberam Pilocarpina (Pilo) e não desenvolveram status epilepticus (SE) comportamental e, se os mesmos se tornarão epilépticos na fase crônica do modelo. Autores observaram o brotamento das fibras musgosas no hipocampo de ratos Não-SE (NSE), enquanto outros observaram crises espontâneas e recorrentes (CER) 6 - 8 meses após receberam a droga. A excitabilidade neuronal é influenciada pelos hormônios femininos e, da mesma forma, a ocorrência de SE em ratas castradas e não-castradas. Entretanto, não é sabido se as fêmeas que não apresentam SE terão CER. O objetivo deste trabalho foi investigar se fêmeas castradas e não castradas que não tiveram SE comportamental após a injeção de Pilo desenvolverão CER dentro de um ano. Para isto, os animais receberam 360 mg/kg de Pilo e foram videomonitorados por 12 meses. As fêmeas SE castradas e não-castradas se tornaram epilépticas desde o primeiro mês pós Pilo. O comportamento epiléptico foi identificado assistindo as gravações na velocidade rápida. As fêmeas NSE castradas e não-castradas apresentaram comportamentos similares aos estágios 1 - 3 da Escala de Racine. As alterações motoras nestes grupos (NSE) foram observadas apenas quando as videomonitoração foi analisada na velocidade lenta. Além destas, manifestações comportamentais como movimentos rítmicos da cabeça, movimentos súbitos da cabeça, movimentos de todo o corpo e imobilidade também foram observadas em ambos grupos, SE e NSE. Concluímos que as fêmeas NE podem ter se tornado epilépticas. Adicionado a isto, a análise das alterações motoras na velocidade lenta foi essencial para a observação dos achados das fêmeas NSE, o que sugere que possivelmente muitas alterações motoras têm sido subestimados na pesquisa em epilepsia experimental.(AU)

Biocompatibility in vivo of elastic cartilage treated in alkaline solutions / [Biocompatibilidade in vivo de cartilagem elástica tratada em soluções alcalinas]

This study verified the in vivo biocompatibility of bovine elastic cartilage decellularized with alkaline solution in relation to the non-decellularized cartilage implanted in rats. Fifty Wistar rats were divided into two groups, with the experimental group (EG) receiving subcutaneous implants of cartilage treated in alkaline solution and the control group (CG) receiving subcutaneous implants of untreated cartilage. In both groups, the implants were removed on days 3, 7, 14, 21 and 42 with the preparation of histological slides stained with Hematoxylin and Eosin for the quantification of inflammatory cells, fibroblasts, angiogenesis, and cartilage degradation. The results showed that EG presented a less intense inflammatory infiltrate and better organization of collagen fibers compared to CG. It was concluded that the alkaline treatment provided better biocompatibility for elastic cartilage when implanted subcutaneously in rats.

Este estudo verificou a biocompatibilidade in vivo de cartilagem elástica bovina descelularizada com solução alcalina em relação à cartilagem não descelularizada implantada em ratos. Cinquenta ratos Wistar foram divididos em dois grupos; o grupo experimental (GE) recebeu implantes subcutâneos de cartilagem tratada em solução alcalina, e o grupo controle (GC) recebeu implantes subcutâneos de cartilagem não tratada. Em ambos os grupos, os implantes foram retirados nos dias três, sete, 14, 21 e 42, com a preparação de lâminas histológicas coradas com hematoxilina e eosina para a quantificação de células inflamatórias, de fibroblastos, de angiogênese e para a degradação da cartilagem. Os resultados mostraram que o GE apresentou infiltrado inflamatório menos intenso e melhor organização das fibras de colágeno em relação ao GC. Concluiu-se que o tratamento alcalino proporcionou melhor biocompatibilidade para a cartilagem elástica quando implantado por via subcutânea em ratos.

Tarantula cubensis extract (Theranekron®) inhibits inflammation in carrageenan-induced acute paw edema in rats / [Extrato de tarântula cubensis (Theranekron®) inibe a inflamação no edema induzido por algas vermelhas na pata de ratos]

The aim of this study was to investigate the anti-inflammatory effect of alcoholic extract of Tarantula cubensis alcoholic extract (TCAE) in experimentally induced inflammation in rats. Fifty-four adult Sprague-Dawley male rats were randomly divided into nine groups. Paw edema was induced by 0.2mL subplantar (s.p.) injection of 1% carrageenan (CAR) into the right hind paw. Rats were treated with the nonsteroidal anti-inflammatory drug (NSAID) indomethacin (INDO) (10mg/kg, p.o.) or TCAE at different doses (1, 10 or 100µg/kg) injected s.c. for systemic or s.p. for local anti-inflammatory effect. Saline was used as control. Changes in paw thickness, volume, and weight were calculated as percentages. Formalin-fixed paws were used for histopathological examination. We detected that TCAE applied s.c. at 10µg/kg and 100µg/kg doses resulted in thinner paw thickness, lower paw volume, and lower paw weights four hours after the induction of inflammation when compared with the INDO group (p<0.05). The paw edema inhibitory effect of TCAE applied at a dose of 10µg/kg, s.c. was 68% when compared with the INDO which had an inhibitory effect of 56%. These results were verified with similar histopathological findings. The anti-inflammatory feature of 10µg/kg of TCAE given systematically was similar to the effects of INDO. Our results suggest that TCAE has anti-inflammatory effects by reducing edema and decreasing inflammatory reaction. These results may be attributed to the inhibition of the production of proinflammatory mediators. Thus, TCAE may be considered as a potential anti-inflammatory agent for treating acute inflammatory conditions.

O objetivo deste estudo foi investigar o efeito anti-inflamatório do extrato alcoólico de Tarantula cubensis (TCAE) na inflamação induzida experimentalmente em ratos. Cinqüenta e quatro ratos Sprague-Dawley adultos machos foram divididos aleatoriamente em nove grupos. O edema da pata foi induzido pela injeção de 0,2mL de subplantar (s.p.) de 1% de carragena (CAR) na pata traseira direita. Ratos foram tratados com o medicamento antiinflamatório não esteróide (NSAID) indometacina (INDO) (10mg/kg, p.o.) ou TCAE em doses diferentes (1, 10 ou 100µg/kg) injetado s.c. para efeito sistêmico ou s.p. para efeito antiinflamatório local. A soro fisiológico foi usado como controle. As mudanças na espessura da pata, volume e peso foram calculadas como porcentagens. As patas fixadas com fórmalina foram usadas para exame histopatológico. Detectamos que o TCAE aplicado s.c. em doses de 10µg/kg e 100µg/kg resultou em menor espessura da pata, menor volume da pata e menor peso da pata quatro horas após a indução da inflamação quando comparado com o grupo INDO (p<0,05). O efeito inibidor do edema da pata de TCAE aplicado na dose de 10µg/kg, s.c. foi de 68% quando comparado com o INDO que teve um efeito inibidor de 56%. Estes resultados foram verificados com resultados histopatológicos semelhantes. A característica anti-inflamatória de 10µg/kg de TCAE dada sistematicamente foi semelhante aos efeitos do INDO. Nossos resultados sugerem que o TCAE tem efeitos anti-inflamatórios reduzindo o edema e diminuindo a reação inflamatória. Estes resultados podem ser atribuídos à inibição da produção de mediadores pró-inflamatórios. Assim, o TCAE pode ser considerado como um agente antiinflamatório potencial para o tratamento de condições inflamatórias agudas.

Murine animal models for in vivo studies of Zika and Chikungunya viruses

Arboviruses are worldwide distributed arthropod-borne viruses representing a constant threat to public health. Among these arboviruses, the Chikungunya (CHIKV) and Zika (ZIKV) viruses have a high prevalence in Brazil being responsible for recent outbreaks resulting mainly in irreparable socioeconomic damages such as the high rate of cases of comorbidities and microcephaly in newborns, respectively. Therefore, it is necessary to understand the biology of these arboviruses and develop effective treatments against them; moreover, appropriate mice animal models are strongly encouraged. Here we reviewed the scientific literature aiming to improve the search for the best murine animal model, specific for the arboviruses, specifically, CHIKV and ZIKV. In this way, we performed a comparison between the various mice models currently available, among them: genetically modified immunosuppressed animals, as the A129 and AG129 which are knockout animals for the α/ß and α/ß/γ receptors, respectively, neonatal immunocompetent models C57BL/6 strains used between 6-8 days old for neuropathogenesis studies or 1 day old for vaccine safety studies and finally immunosuppressed induced by dexamethasone or interferon 1 blocker for pathogenesis studies. Mice models are the first option after in vitro analysis, as they are small animals, which facilitates handling and maintenance, in addition to being more inexpensive and abundantly available in different genetic strains, both wild and modified. If the results of this stage are promising, the studies move forward to the use of models with animals of greater complexity, such as rats, non-human primates and finally humans. For this review, we searched through articles in PubMed, Scopus and ScienceDirect databases using the criteria of date publications, titles, abstracts and complete manuscripts. The correct choice of these models during experimental planning is essential, since increases the confidence and the rational use of animals in experimentation in accordance to current bioethics guidelines.

Evaluation of mesenchymal cells and dapsone for the treatment of dermonecrotic wounds caused by Loxosceles laeta venom in rabbits / Avaliação de células mesenquimais e dapsona para o tratamento de feridas dermonecróticas causadas pelo veneno de Loxosceles laeta em coelhos

This study aimed to evaluate the efficacy of mesenchymal stem cells (MSC), alone or associated with dapsone (DAP), in treating dermonecrotic wounds caused by Loxosceles laeta venom. Twenty-five male rabbits were distributed into five groups. Negative control received ultrapure water (C-), whilst all other groups were injected with 20 μg of L. laeta venom. After 4 hours, each group received one of the following treatments: PBS (C+), DAP, MSC, and DAP+MSC. Animals were evaluated daily and photographic records made for analysis of wound area. Twelve days after, animals were euthanized and skin samples removed for histological analysis. We observed that DAP showed the best percentage of wound contraction at day 3. In the treatments using MSCs, a negative value of wound contraction was observed for the isolated MSCs, as well as a lower contraction value for the association of the MSC + DAP when compared to PBS, probably, by the increase in initial infammation after the application of stem cells, due to the fact that MSCs secrete a broad spectrum of bioactive molecules such as cytokines and growth factors that favor regeneration. Histologically, it was observed that animals of C+ showed extensive areas of necrosis, ulcers, neutrophilic infiltrate, and mineralization. Collagen deposition showed increase in MSC+DAP treatment, however vascularization remained unchanged. This is the first report using MSC and MSC+DAP as a treatment for cutaneous loxoscelism and more studies are needed to determine its use as an alternative therapy for dermonecrotic lesions caused by Loxosceles spider.

Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia das células-tronco mesenquimais (CTMs), isoladas ou associadas à dapsona (DAP), no tratamento de feridas dermonecróticas causadas pelo veneno de Loxosceles laeta. Vinte e cinco coelhos machos foram distribuídos em cinco grupos. O controle negativo recebeu água ultrapura (C-), enquanto todos os outros grupos foram injetados com 20 μg de veneno de L. laeta. Após 4 horas, cada grupo recebeu um dos seguintes tratamentos: PBS (C+), DAP, CTMs e DAP + CTMs. Os animais foram avaliados diariamente durante 12 dias, e feitos registros fotográficos para análise da ferida e no 12º dia, foram eutanasiados e, retiradas amostras de pele para análise histológica. Observou-se que a DAP apresentou o melhor percentual de contração da ferida no terceiro dia. Nos tratamentos com CTMs, observou-se uma contração negativa da ferida tanto para as CTMs isoladas, bem como a associação CTMs + DAP em relação ao PBS, possivelmente, pelo aumento da infamação inicial após a aplicação de células-tronco. Isso é devido ao fato de que as CTMs secretam um amplo espectro de moléculas bioativas como citocinas e fatores de crescimento que favorecem a regeneração. Histologicamente, observou-se que os animais de C+ apresentaram extensas áreas de necrose, úlceras, infiltrado neutrofílico, além de mineralização. Houve aumento de deposição de colágeno no tratamento CTMs + DAP, no entanto, a vascularização permaneceu inalterada. Este é o primeiro relato usando CTMs e CTMs + DAP como tratamento para loxoscelismo cutâneo e mais estudos são necessários para determinar seu uso como terapia alternativa para lesões demonecróticas causadas pela aranha Loxosceles.

Potential use of bacterial pigments as anticancer drugs and female reproductive toxicity: a review / Uso potencial de pigmentos bacterianos como drogas anticâncer e toxicidade reprodutiva feminina: uma revisão

Natural bioactive compounds obtained from microorganisms, have awakened particular interest in the industry nowadays. This attention comes when natural resources depletion is pronounced, and the acquisition of both new plant origin resources and bioactive products, represents a challenge for the next generations. In this sense, prospecting for large-scale production and use of bacterial pigments is a necessary strategy for the development of novel products. A wide variety of properties have been attributed to these substances and, among them, their therapeutic potential against important diseases, such as cancer. There is consensus that available chemotherapy protocols are known to detrimentally affect cancer patients fertility. Hence, considerable part of the deleterious effects of chemotherapy is related to the drugs cytotoxicity, which, in addition to cancer cells, also affect normal cells. Therefore, the intrinsic properties of bacterial pigments associated with low cytotoxicity and relevant cell selectivity, certified them as potential anticancer drugs. However, little information is available about reproductive toxicity of these new and promising compounds. Thus, the present review aims to address the main bacterial pigments, their potential uses as anticancer drugs and their possible toxic effects, especially on the female gonad.

Os compostos bioativos naturais obtidos de microrganismos têm despertado especial interesse da indústria nos últimos anos. Esta atenção ocorre em um momento em que o esgotamento de recursos naturais é pronunciado, e a aquisição de novos insumos e produtos bioativos de origem vegetal representa um desafio para as próximas gerações. Neste sentido, a prospecção para a produção e uso em larga escala dos pigmentos bacterianos tem representado uma importante estratégia para o desenvolvimento de novos produtos. Uma grande variedade de propriedades foi atribuída a estas substâncias, entre elas, o potencial terapêutico contra doenças importantes, como o câncer. Existe um consenso de que os protocolos quimioterápicos disponíveis são conhecidos por afetarem negativamente a fertilidade de pacientes com câncer. Grande parte dos efeitos deletérios da quimioterapia está relacionado à citotoxicidade das drogas usadas para este fim, que além das células cancerosas, afetam as células normais. Nesse sentido, as propriedades naturais atribuídas aos pigmentos bacterianos associadas à baixa citotoxicidade e relevante seletividade, os qualificaram como potenciais drogas anticâncer. No entanto, pouco se tem de informação a respeito da toxicidade reprodutiva destes novos e promissores compostos. Dessa forma, a presente revisão tem o objetivo de abordar os principais pigmentos bacterianos, suas utilizações potenciais como drogas anticâncer, bem como os seus possíveis efeitos tóxicos, sobretudo, sobre a gônada feminina.

Study on the mechanisms of Suaeda rigida polysaccharides on the heart inhibition and skeletal muscle promotion in the frog / [Estudo sobre os mecanismos dos polissacarídeos de Suaeda rigida na inibição do coração e promoção da musculatura esquelética no sapo]

The objectives of this study were to investigate the effects of different concentrations of Suaeda rigida polysaccharides (SRPs) on the physiological characteristics of the frog heart and gastrocnemius muscle, compare their similarities and differences, and analyze the mechanisms. CaCl2 and acetylcholine (Ach) were selected respectively to be co-incubated with the high concentration SRPs to observe the effects on the heart contraction of frog. The effects of different concentrations of the SRPs on the activities of acetylcholinesterase (A-CHE), Na+-K+-ATPase and Ca2+-Mg2+-ATPase in the isolated frog heart were detected by UV-Vis spectrophotometry. The gastrocnemius muscle was immersed in the high concentration of SRPs for 10 min, and the systolic indexes were recorded. The effects of SRPs on the Ach content and A-CHE activity at the sciatic nerve-gastrocnemius junction were determined by UV-Vis spectrophotometry and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The results showed that the SRPs had significant inhibitory effects on the contractile amplitude of isolated heart and the contractile amplitude induced by CaCl2 and Ach, respectively (P<0.01). The activity of Ca2+-Mg2+-ATPase was significantly promoted, and the activity of A-CHE was significantly inhibited (P<0.01). The contraction amplitude, contraction rate, relaxation rate of gastrocnemius muscle and the Ach content at the junction of sciatic nerve-gastrocnemius muscle were significantly increased (P<0.01), and the activity of A-CHE at the junction was significantly inhibited (P<0.01) by the SRPs. All the results suggested that the SRPs could inhibit the contraction of heart and promote the contraction and relaxation of skeletal muscle. The mechanism was related to blocking the fast INa channel, inhibiting the ICa-L and activating the M receptors of myocardial membrane and then inhibiting external Ca2+ influx, increasing Ca2+-Mg2+-ATPase activity, decreasing a-che activity.

Os objetivos deste estudo foram investigar os efeitos de diferentes concentrações de Suaeda rigida polissacarídeos (SRPs) sobre as características fisiológicas do coração de rã e do músculo gastrocnêmio, comparar suas semelhanças e diferenças, e analisar os mecanismos. CaCl2 e acetilcolina (Ach) foram selecionados respectivamente para serem co-incubados com os SRPs de alta concentração para observar os efeitos sobre a contração do coração de rã. Os efeitos das diferentes concentrações dos SRPs sobre as atividades da acetilcolinesterase (A-CHE), Na+-K+-ATPase e Ca2+-Mg2+-ATPase no coração isolado de rã foram detectados pela espectrofotometria UV-Vis. O músculo gastrocnêmio foi imerso na alta concentração de SRP por 10 min, e os índices sistólicos foram registrados. Os efeitos das SRPs no conteúdo de Ach e na atividade de A-CHE na junção nervo-gastrocnêmio ciático foram determinados pela espectrofotometria UV-Vis e pelo ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA). Os resultados mostraram que os SRPs tiveram efeitos inibidores significativos sobre a amplitude contrátil do coração isolado e a amplitude contrátil induzida por CaCl2 e Ach, respectivamente (P<0,01). A atividade do Ca2+-Mg2+-ATPase foi significativamente promovida e a atividade do A-CHE foi significativamente inibida (P<0,01). A amplitude de contração, a taxa de contração, a taxa de relaxamento do músculo gastrocnêmio e o conteúdo de Ach na junção do músculo nervo ciático-gastrocnêmio foram significativamente aumentados (P<0,01), e a atividade do A-CHE na junção foi significativamente inibida (P<0,01) pelas SRPs. Todos os resultados sugeriram que os SRPs poderiam inibir a contração do coração e promover a contração e o relaxamento do músculo esquelético. O mecanismo estava relacionado ao bloqueio do canal INa rápido, inibindo a ICa-L e ativando os receptores M da membrana miocárdica e depois inibindo o influxo externo de Ca2+, aumentando a atividade de Ca2+-Mg2+-ATPase, diminuindo a atividade a-che.

Pain-related toxins in scorpion and spider venoms: a face to face with ion channels

Pain is a common symptom induced during envenomation by spiders and scorpions. Toxins isolated from their venom have become essential tools for studying the functioning and physiopathological role of ion channels, as they modulate their activity. In particular, toxins that induce pain relief effects can serve as a molecular basis for the development of future analgesics in humans. This review provides a summary of the different scorpion and spider toxins that directly interact with pain-related ion channels, with inhibitory or stimulatory effects. Some of these toxins were shown to affect pain modalities in different animal models providing information on the role played by these channels in the pain process. The close interaction of certain gating-modifier toxins with membrane phospholipids close to ion channels is examined along with molecular approaches to improve selectivity, affinity or bioavailability in vivo for therapeutic purposes.(AU)

Valuation of angiogenesis in bovine xenografts implanted in intracorporal sites of rabbits as models of in-vivo bioreactors / Avaliação da angiogênese em xenoenxertos bovinos implantados em sítios intracorpóreos de coelhos como modelos de biorreatores in vivo

The aim of this study was to evaluate neovascularization of bovine xenografts implanted in intracorporeal sites of rabbits (bioreactors). 30 rabbits were used, divided into 6 groups, according to the evaluation time (7, 15, 30, 45, and 60 days); each animal received xenogenic implants in 3 different intracorporeal sites (A1 - omentum bag; A2 - intermuscular space of quadriceps femoris; A3 - subperiosteal of ilium bone). Histological assessments graded the presence of angiogenesis, the number of inflammatory cells, newly formed bone tissue, and the presence of giant cells. Histological analyses showed intense angiogenesis in all implanted xenografts. Presence of inflammatory infiltrate and giant cells at the A1 implant site and presence of bone neoformation at the A3 implant site were noted. Degeneration of implants and formation of a fibrous capsule were noted. When comparing the interaction of the site with the days of evaluation, statistical analysis showed a significant difference (p≤0.05) in any time of neovascularization analysis. The vascular endothelial growth factor (VEGF) and inflammatory cells of the omentum in its structure, may have contributed to the greater presence of neovessels and inflammatory cells, a fact that may indicate functionality as a possible bone substitute.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a neovascularização de xenoenxertos bovinos implantados em sítios intracorpóreos de coelhos (biorreatores). Foram utilizados 30 coelhos, os quais foram divididos em seis grupos, de acordo com o tempo de avaliação (sete, 15, 30, 45 e 60 dias); cada animal recebeu implantes xenogênicos em três diferentes sítios intracorpóreos (A1 - bolsa de omento; A2 - espaço intermuscular do quadríceps femoral; A3 - subperiosteal do osso ílio). Avaliações histológicas classificaram a presença de angiogênese, o número de células inflamatórias, de tecido ósseo neoformado e a presença de células gigantes. As análises histológicas mostraram intensa angiogênese em todos os xenoenxertos implantados. Observou-se presença de infiltrado inflamatório e células gigantes no local do implante A1 e presença de neoformação óssea no local do implante A3. Ao mesmo tempo, a degeneração dos implantes e a formação de uma cápsula fibrosa foram observadas. Ao comparar a interação do local com os dias de avaliação, a análise estatística mostrou diferença significativa (P≤0,05) em qualquer momento da análise de neovascularização. O fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e as células inflamatórias do omento em sua estrutura podem ter contribuído para a maior presença de neovasos e células inflamatórias, fato que pode indicar funcionalidade como possível substituto ósseo.(AU)

Anatomical and morphometric study of goat middle ear ossicles (Capra aegagrus hircus) / [Estudo anatômico e morfométrico dos ossículos da orelha média de caprinos (Capra aegagrus hircus)]

The social and economic roles of goat farming in Northeastern Brazil, allied to the fact that the use of goat middle ear ossicles for research and human ear surgery training has not yet been proposed, justify the study of their applicability as an experimental model. The middle ears of 19 goats (Capra aegagrus hircus) from the bone collection of the Laboratory and Didactic Anatomy Museum of Domestic and Wild Animals of the Federal University of Vale do São Francisco (UNIVASF) were dissected. The malleus, incus, and stapes were evaluated regarding their macroscopic morphology and biometry (length, width, and height). Ossicle morphology was similar to sheep, human, and bovine morphology. The malleus was 1.3 times heavier and 2.2 times longer than the incus, and 9.0 times heavier and 3.7 times longer than the stapes. The size relationship was positive between the stapes and the malleus and negative between the stapes and the incus. It is concluded that the middle ear size and the anatomical similarities with human ossicles make goats a useful model for experimental scientific studies, reconstructive surgery practice of the ossicular chain, and human ear surgery training.(AU)

Tanto o papel social quanto o econômico da caprinocultura na região Nordeste do Brasil, somados ao fato de que o uso de ossículos da orelha média de caprinos para estudos e treinamento cirúrgico otológico humano ainda não foi proposto, justificam o estudo de sua aplicabilidade como modelo experimental. Foram dissecadas as orelhas médias de 19 caprinos (Capra aegagrus hircus), provenientes do ossuário do Laboratório e Museu Didático de Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres - Universidade Federal do Vale do São Francisco. Martelos, bigornas e estribos tiveram a morfologia macroscópica e a biometria (comprimento, largura e altura) avaliadas. A morfologia dos ossículos assemelhou-se a de ovinos, humanos e bovinos. O martelo foi 1,3 vez mais pesado e 2,2 vezes mais comprido que a bigorna e 9,0 vezes mais pesado e 3,7 vezes mais comprido que o estribo. A relação de tamanho entre o estribo e o martelo foi positiva, e entre o estribo e a bigorna negativa. Conclui-se que o tamanho da orelha média e as semelhanças anatômicas com os ossículos humanos tornam os caprinos um modelo útil para estudos científicos experimentais, prática cirúrgica reconstrutiva da cadeia ossicular e treinamento cirúrgico otológico humano.(AU)

Comparison of random regression models, traditional animal model and with the inclusion of molecular markers in the estimation of genetic parameters in Colombian Holstein cattle / Comparação entre modelos de regressão aleatória, modelo animal tradicional e com a inclusão de marcadores moleculares na estimativa de parâmetros genéticos em bovinos da raça Holandesa Colombiana

The use of molecular markers to identify desirable genes in animal production is known as marker-assisted selection. The traditional genetic evaluation model uses the BLUP methodology; when genetic markers are included in the evaluation model, the methodology is known as M-BLUP. In contrast, random regression models (RRM), unlike the models based on production at 305 days, consider factors that change for each animal from one test to another. The objective of this study was to compare variance components, genetic parameters and breeding values for milk production, protein percentage and somatic cell score in Colombian Holstein cattle using BLUP, M-BLUP and RRM. For the estimation of genetic parameters and values, 2003 lactations corresponding to 1417 cows in 55 herds were used, and effects of the order of delivery, herd, and contemporary group were included. The three traits presented greater heritability under the MBLUP model: 0.44 for protein percentage, 0.27 for milk production and 0.28 for somatic cell score. This was because the genetic variance was greater when M-BLUP was used, which allowed a greater accuracy of the breeding value estimation in the three traits. Therefore, the model that includes information on molecular markers is more suitable for genetic evaluation in Colombian Holstein cattle.(AU)

O uso de marcadores moleculares para identificar genes desejáveis na produção animal é conhecido como seleção assistida por marcadores. O modelo tradicional de avaliação genética utiliza a metodologia BLUP, e quando os marcadores genéticos são incluídos no modelo de avaliação, a metodologia é conhecida como M-BLUP. Por outro lado, os modelos de regressão aleatória (RRM), ao contrário dos modelos baseados em produções a 305 dias, consideram fatores que mudam para cada indivíduo de um controle para outro. O objetivo deste estudo foi comparar componentes de variância, parâmetros e valores genéticos para produção de leite, percentagem de proteína e escore de células somáticas em gado holandês de Colômbia utilizando BLUP, M-BLUP e RRM. Para a estimativa de parâmetros e valores genéticos, foram utilizadas 2.003 lactações correspondentes a 1.417 vacas de 55 rebanhos e efeitos da ordem de parto, rebanho e grupo contemporâneo. Os três traços apresentaram maior hereditariedade no modelo MBLUP, 0,44 para percentagem de proteína, 0,27 para produção de leite e 0,28 para escore de células somáticas. Isso por causa da variância genética foi maior quando o M-BLUP foi utilizado, o que permitiu estimar maior precisão do valor genético nos três traços, portanto, o modelo que inclui informações sobre marcadores moleculares é mais adequado para avaliação genética em gado holandês colombiano.(AU)

3D anatomical model for teaching canine lumbosacral epidural anesthesia

Purpose. To develop a 3D anatomical model for teaching canine epidural anesthesia (3DMEA) and to assess its efficacy for teaching and learning prior to the use of live animals.. Methods. The creation of 3DMEA was based on 3D optical scanning and 3D printing of canine bone pieces of the fifth to the seventh lumbar vertebrae, sacrum and pelvis. A total of 20 male dogs were scheduled for castration. 20 veterinary students watched a video showing epidural anesthesia in dogs before the clinical attempt and were assigned to control or 3DMEA groups. Students in the 3DMEA group trained in the model after the video. For the clinical trial, the epidural procedure was performed by students under the veterinary supervision. When observed the absence of response to nociceptive stimuli, the epidural was considered successful. Then, all students answered a questionnaire evaluating the main difficulty founded in the technique and its degree of difficulty.. Results. The 3DMEA group reported a lower degree of difficulty to perform the epidural anesthesia technique when compared with the control group (p=0.0037). The 3DMEA reproduced the anatomical structures, allowing the perception of the distance of needle in relation to the iliac prominences during epidural anesthesia. Its mobility allowed simulation of the animal in standing position and sternal recumbency.. Conclusion. The use of 3DMEA demonstrated greater efficacy in the execution of the technique, being effective in the teaching and learning process before the epidural anesthesia in live animals.(AU)

Protocolo de vocalização ultrassônica em camundongos: uma ferramenta para avaliação do comportamento social / Ultrasonic vocalization protocol in mice: a tool for assessing social behavior

O estudo de desarranjos do neurodesenvolvimento, sejam estes herdados ou adquiridos, necessita da integração cada vez mais aprofundada entre pesquisa básica e abordagem clínica. Apesar da análise do comportamental humano ser essencial para caracterizar e motivar a inovação científica nas várias condições clínicas e/ ou de disfunção social, os estudos comportamentais bem controlados utilizando modelos animais favorecem a ponte do conhecimento entre o laboratório e o clínico populacional. No comportamento social fino e adaptado às espécies animais de experimentação científica, estudos de comunicação ultrassônica em camundongos vem sendo de extrema importância para esclarecimento de achados comportamentais de linguagem em correspondentes em condições humanas. O presente estudo busca consolidar um paradigma de investigação comportamental em linguagem utilizando um modelo murino de linhagem selvagem C57/BL6 no contexto de vocalização ultrassônica na separação materna estabelecida em filhotes pré-adolescentes. Além da determinação e aplicação do protocolo experimental aqui relatado, os resultados demonstraram que não houve diferenças nas idades analisadas e corroboram com os dados descritos em literatura uma vez que ocorreu uma inclinação para comunicação de baixa complexidade.

Neurodevelopmental disorders can be inherited or acquired and requires deeper integration between basic and clinical research. The access and analysis of human behavior patterns are essential to push for scientific innovation in various clinical conditions and/or social dysfunction, but clinical and psychological approach can be challenging to achieve in these conditions. Thus, behavioral studies using animal models in experimental settings favor and advance the understanding of neurodevelopmental disarrangements in human population. In this regard, social behavior testing in fine and elaborate cognitive skills such as ultrasonic vocalization in mice have been extremely important to study behavioral findings of language dysfunction in human condition. Therefore, the present study seeks to consolidate a behavioral investigation paradigm in language using a murine model of wild line C57/BL6 in the context of ultrasonic vocalization in the maternal separation established in pre-adolescent subjects. Besides the establishment and application of the experimental design reported here, the results showed a trend for low complexity communication manifested by the pre-adolescent offspring with no differences regarding age or sex in tested animals.

Reference values for biochemical parameters in Balb/c mice bred in the Faculdade de Medicina do Abc housing facilities, Santo André/SP, Brazil / Valores de referência de parâmetros bioquímicos de camundongos (Mus mus musculus) das linhagens Balb/c mantidos no biotério da Faculdade de Medicina do Abc, Santo André/SP, Brasil

The reference for biochemical parameters of laboratory animals, used in scientific research is based on the international literature. Comparing a few parameters evaluated in different studies with Balb/c mice, it was possible to observe that the reference values for these biochemical parameters vary enormously. It depends on several variables, such as sex, lineage and genotype, and are also influenced by other factors such as age, accommodation, animal handling, diet offered, sanitary conditions of the housing facilities, among others. The objective of this study is to establish a list of blood biochemical parameters of Balb/c mice (male and female) kept in the Housing facilities of Centro Universitário Saúde ABC. Thirty male and female animals weighing approximately 30g with 90 days of age were used. The animals were euthanized and blood was collected through caudal vena cava puncture, placed in collection tubes and the total cholesterol, triglycerides, transaminases (AST and ALT), urea, creatinine and glycemia parameters were determined. We did not observe a significant difference when comparing males and females in triglycerides, creatinine, urea and glycemia levels. However a significant difference was observed in the cholesterol, ALT and AST parameters. With these results, we were able to establish reference values for the Balb/c mice for comparison with future experiments, using a human semi-automatic analyzer.

A referência dos parâmetros bioquímicos dos animais de laboratório, utilizados para pesquisa científica é baseada na literatura internacional. Comparando-se alguns parâmetros avaliados em diferentes estudos com camundongos Balb/C pudemos observar que os valores de referência dos parâmetros bioquímicos variam enormemente, dependendo de diversas variáveis, como sexo, linhagem e genótipo e ainda sofrem influência de outros fatores como idade, condição de alojamento, manejo dos animais, dieta oferecida, padrão sanitário do biotério onde são mantidos, dentre outros. Desta forma o presente trabalho objetivou estabelecer uma lista de parâmetros bioquímicos do sangue de camundongos da linhagem Balb/C (machos e fêmeas) criados no Biotério da FMABC. Foram utilizados 30 animais machos e fêmeas, com peso +-30g e idade 90 dias. Os animais foram eutanasiados e o sangue foi coletado por meio da veia cava caudal, acondicionado em tubos de coleta e as dosagens de colesterol total, triglicérides, transaminases (AST e ALT), uréia, creatinina e glicemia foram analisados. Não observamos diferença significativa quando comparado machos e fêmeas em: Triglicérides, Creatinina, Uréia e Glicemia. Entretanto, observou-se diferença significativa nos parâmetros de colesterol, ALT e AST. Com estes resultados, pudemos então, estabelecer valores de referência para os camundongos Balb/C para comparação com futuros experimentos utilizando um analisador humano semi-automático.

Use of thermography in skin grafts after the application of therapeutic ultrasound in Wistar rats

Purpose To analyze changes in the thermal pattern in the skin graft receptor bed, after the use of therapeutic ultrasound through the thermographic images. Methods Eighteen Rattus norvegicus albinus Wistar, separated into two groups: GST groups (without tumor and without treatment with ultrasound) and GT (with tumor and treatment with ultrasound). In the GT group, induction of carcinogenesis was performed by single intradermal application of 0.05 ml DMBA at 0.5%, diluted in acetone. Subsequently, a technique of reconstructive grafting surgery of the mesh type was performed in both groups and treatment with therapeutic ultrasound was performed in the GT group the alternate day protocol at 3, 6, 10 and 15 days after the procedure. The thermographic evaluation occurred on days 3, 6, 10 and 15 after the grafting. Results There was a significant difference between the statistical evaluation of the temperature of the control group when compared to the treated group, on the different evaluation days (p <0.0001). Conclusion The thermographic analysis of the images was effective in evaluating the healing process, being the use of thermography feasible to evaluate changes in the thermal standard in the surgical bed, besides the beneficial effects of the US.(AU)

Reference values for biochemical parameters in Balb/c mice bred in the Faculdade de Medicina do Abc housing facilities, Santo André/SP, Brazil / Valores de referência de parâmetros bioquímicos de camundongos (Mus mus musculus) das linhagens Balb/c mantidos no biotério da Faculdade de Medicina do Abc, Santo André/SP, Brasil

The reference for biochemical parameters of laboratory animals, used in scientific research is based on the international literature. Comparing a few parameters evaluated in different studies with Balb/c mice, it was possible to observe that the reference values for these biochemical parameters vary enormously. It depends on several variables, such as sex, lineage and genotype, and are also influenced by other factors such as age, accommodation, animal handling, diet offered, sanitary conditions of the housing facilities, among others. The objective of this study is to establish a list of blood biochemical parameters of Balb/c mice (male and female) kept in the Housing facilities of Centro Universitário Saúde ABC. Thirty male and female animals weighing approximately 30g with 90 days of age were used. The animals were euthanized and blood was collected through caudal vena cava puncture, placed in collection tubes and the total cholesterol, triglycerides, transaminases (AST and ALT), urea, creatinine and glycemia parameters were determined. We did not observe a significant difference when comparing males and females in triglycerides, creatinine, urea and glycemia levels. However a significant difference was observed in the cholesterol, ALT and AST parameters. With these results, we were able to establish reference values for the Balb/c mice for comparison with future experiments, using a human semi-automatic analyzer.(AU)

A referência dos parâmetros bioquímicos dos animais de laboratório, utilizados para pesquisa científica é baseada na literatura internacional. Comparando-se alguns parâmetros avaliados em diferentes estudos com camundongos Balb/C pudemos observar que os valores de referência dos parâmetros bioquímicos variam enormemente, dependendo de diversas variáveis, como sexo, linhagem e genótipo e ainda sofrem influência de outros fatores como idade, condição de alojamento, manejo dos animais, dieta oferecida, padrão sanitário do biotério onde são mantidos, dentre outros. Desta forma o presente trabalho objetivou estabelecer uma lista de parâmetros bioquímicos do sangue de camundongos da linhagem Balb/C (machos e fêmeas) criados no Biotério da FMABC. Foram utilizados 30 animais machos e fêmeas, com peso +-30g e idade 90 dias. Os animais foram eutanasiados e o sangue foi coletado por meio da veia cava caudal, acondicionado em tubos de coleta e as dosagens de colesterol total, triglicérides, transaminases (AST e ALT), uréia, creatinina e glicemia foram analisados. Não observamos diferença significativa quando comparado machos e fêmeas em: Triglicérides, Creatinina, Uréia e Glicemia. Entretanto, observou-se diferença significativa nos parâmetros de colesterol, ALT e AST. Com estes resultados, pudemos então, estabelecer valores de referência para os camundongos Balb/C para comparação com futuros experimentos utilizando um analisador humano semi-automático.(AU)

Protocolo de vocalização ultrassônica em camundongos: uma ferramenta para avaliação do comportamento social / Ultrasonic vocalization protocol in mice: a tool for assessing social behavior

O estudo de desarranjos do neurodesenvolvimento, sejam estes herdados ou adquiridos, necessita da integração cada vez mais aprofundada entre pesquisa básica e abordagem clínica. Apesar da análise do comportamental humano ser essencial para caracterizar e motivar a inovação científica nas várias condições clínicas e/ ou de disfunção social, os estudos comportamentais bem controlados utilizando modelos animais favorecem a ponte do conhecimento entre o laboratório e o clínico populacional. No comportamento social fino e adaptado às espécies animais de experimentação científica, estudos de comunicação ultrassônica em camundongos vem sendo de extrema importância para esclarecimento de achados comportamentais de linguagem em correspondentes em condições humanas. O presente estudo busca consolidar um paradigma de investigação comportamental em linguagem utilizando um modelo murino de linhagem selvagem C57/BL6 no contexto de vocalização ultrassônica na separação materna estabelecida em filhotes pré-adolescentes. Além da determinação e aplicação do protocolo experimental aqui relatado, os resultados demonstraram que não houve diferenças nas idades analisadas e corroboram com os dados descritos em literatura uma vez que ocorreu uma inclinação para comunicação de baixa complexidade.(AU)

Neurodevelopmental disorders can be inherited or acquired and requires deeper integration between basic and clinical research. The access and analysis of human behavior patterns are essential to push for scientific innovation in various clinical conditions and/or social dysfunction, but clinical and psychological approach can be challenging to achieve in these conditions. Thus, behavioral studies using animal models in experimental settings favor and advance the understanding of neurodevelopmental disarrangements in human population. In this regard, social behavior testing in fine and elaborate cognitive skills such as ultrasonic vocalization in mice have been extremely important to study behavioral findings of language dysfunction in human condition. Therefore, the present study seeks to consolidate a behavioral investigation paradigm in language using a murine model of wild line C57/BL6 in the context of ultrasonic vocalization in the maternal separation established in pre-adolescent subjects. Besides the establishment and application of the experimental design reported here, the results showed a trend for low complexity communication manifested by the pre-adolescent offspring with no differences regarding age or sex in tested animals.(AU)

The effect of probiotics on ntestinal motility in an experimental short bowel model

Purpose To investigate the effect of probiotics on spontaneous contractions of smooth muscle isolated from jejunum and ileum of rat model. Methods Four rat groups were created (n=8, in each) including control (Group 1), control+probiotic (Group 2), short bowel (Group 3), and short bowel+probiotic (Group 4). Groups 1 and 2 underwent sham operation, Groups 3 and 4 underwent massive bowel resection. Bifidobacterium Lactis was administered in Groups 2 and 4 daily (P.O.) for three weeks. On postoperative week 3, rats were sacrificed, and jejunum and ileum smooth muscle were isolated for organ bath. Muscle contraction changes were analyzed before and after addition of antagonists. Results Short bowel group exhibited increased amplitude and frequency of spontaneous contractions. The addition of probiotics significantly decreased enhanced amplitude and frequency of bowel contraction in short bowel group and returned to control values. L-NNA increased amplitude and frequency of contractions in all groups. While indomethacin and nimesulide increased the amplitude in all groups, the frequency was only increased in jejunum. Hexamethonium and tetrodotoxin did not change the contraction characteristics in all groups. Conclusion We suggest that early use of probiotics may significantly regulate bowel motility, and accordingly improve absorption of nutrients in short bowel syndrome.(AU)

Viral infections of pigs used for medical education: a Japanese experience

Infectious viruses pose a threat to all living organisms, including humans, and can cause significant morbidity. Previous experience with pigs in medical education and research, rather than in domestic control settings, has led to a unique perspective on viral infections in swine. In this article, common porcine infectious diseases have been listed, based mainly on the authors experience thus far. For example, young domestic pigs that were used in surgical training and infected with hepatitis E were subjected to quarantine and isolation treatment, and attempts were made to develop a DNA vaccine for swine influenza arising from swine-to-human transmission. More recent research has focused on preventing infection by the African swine virus, a current threat. We hope that this article of porcine infectious diseases identified at the School of Medicine will help develop a breakthrough with regard to coronavirus disease.(AU)