Detection of enterotoxin and adhesin genes of Escherichia coli strains isolated from feces of healthy dogs / Detecção de genes de enterotoxinas e adesinas em cepas de Escherichia coliisoladas de fezes de cães saudáveis

This study aimed to investigate the presence of genes encoding the enterotoxins STa and Stx1 and the adhesins K99 and Intimin in E. coli strains isolated from feces of dogs who appeared to be healthy. Rectal swab samples were collected from 50 dogs who visited the Veterinary Hospital of the University of Brasilia and 48 E. coli isolates were obtained. No positive isolates were found for STa and K99. However, positive results were found in 21 isolates (43.7%) for Stx1 and 14 isolates (29%) for the Intimin gene (eae). The antimicrobial sensitivity profile was also assessed for the following antibiotics: sulfazothrim, azithromycin, enrofloxacin, ceftiofur, amoxicillin + clavulanate, doxycycline, ampicillin, and cephalexin. The antibiotics on which the isolates showed the highest resistance were ampicillin (25%), doxycycline (22.9%) and cephalexin (20.8%). As for sensitivity, the isolates were most sensitive to sulfazothrim (87.5%), azithromycin (85.41%) and enrofloxacin (77%). Healthy dogs can carry multidrug-resistant E. coli strains that can also carry enterotoxin and adhesin genes, thus indicating that, the proximity between dogs and humans may contribute to possible zoonotic transmission of these microorganisms.

Este estudo teve como objetivo investigar a presença de genes que codificam as enterotoxinas STa e Stx1 e as adesinas K99 e Intiminaem cepas de E. coliisoladas de fezes de cãesaparentementesaudáveis. Amostras de swab retal foram coletadas de 50 cães que visitaram o Hospital Veterinário da Universidade de Brasília e 48 isolados de E. coliforam obtidos. Não foram encontrados isolados positivos para STa e K99. No entanto, resultados positivos foram encontrados em 21 isolados (43,7%) para Stx1 e 14 isolados (29%) para o gene Intimina(eae). O perfil de sensibilidade antimicrobiana também foi avaliado para os seguintes antibióticos: sulfazotrim, azitromicina, enrofloxacina, ceftiofur, amoxicilina + clavulanato, doxiciclina, ampicilina,e cefalexina. Os antibióticos nos quais os isolados apresentaram maior resistência foramaampicilina (25%), doxiciclina (22,9%) e cefalexina (20,8%). Quanto à sensibilidade, os isolados foram mais sensíveis ao sulfazotrim (87,5%), azitromicina (85,41%) e enrofloxacina (77%). Cães saudáveis podem carrearcepas de E. colimultirresistentes que por sua vez também podem carreargenes codificadores de enterotoxina e adesina, indicando assim que a proximidade entre cães e humanos pode contribuir para a possível transmissão zoonótica desses microrganismos.

Detection of enterotoxin and adhesin genes of Escherichia coli strains isolated from feces of healthy dogs / Detecção de genes de enterotoxinas e adesinas em cepas de Escherichia coliisoladas de fezes de cães saudáveis

This study aimed to investigate the presence of genes encoding the enterotoxins STa and Stx1 and the adhesins K99 and Intimin in E. coli strains isolated from feces of dogs who appeared to be healthy. Rectal swab samples were collected from 50 dogs who visited the Veterinary Hospital of the University of Brasilia and 48 E. coli isolates were obtained. No positive isolates were found for STa and K99. However, positive results were found in 21 isolates (43.7%) for Stx1 and 14 isolates (29%) for the Intimin gene (eae). The antimicrobial sensitivity profile was also assessed for the following antibiotics: sulfazothrim, azithromycin, enrofloxacin, ceftiofur, amoxicillin + clavulanate, doxycycline, ampicillin, and cephalexin. The antibiotics on which the isolates showed the highest resistance were ampicillin (25%), doxycycline (22.9%) and cephalexin (20.8%). As for sensitivity, the isolates were most sensitive to sulfazothrim (87.5%), azithromycin (85.41%) and enrofloxacin (77%). Healthy dogs can carry multidrug-resistant E. coli strains that can also carry enterotoxin and adhesin genes, thus indicating that, the proximity between dogs and humans may contribute to possible zoonotic transmission of these microorganisms.(AU)

Este estudo teve como objetivo investigar a presença de genes que codificam as enterotoxinas STa e Stx1 e as adesinas K99 e Intiminaem cepas de E. coliisoladas de fezes de cãesaparentementesaudáveis. Amostras de swab retal foram coletadas de 50 cães que visitaram o Hospital Veterinário da Universidade de Brasília e 48 isolados de E. coliforam obtidos. Não foram encontrados isolados positivos para STa e K99. No entanto, resultados positivos foram encontrados em 21 isolados (43,7%) para Stx1 e 14 isolados (29%) para o gene Intimina(eae). O perfil de sensibilidade antimicrobiana também foi avaliado para os seguintes antibióticos: sulfazotrim, azitromicina, enrofloxacina, ceftiofur, amoxicilina + clavulanato, doxiciclina, ampicilina,e cefalexina. Os antibióticos nos quais os isolados apresentaram maior resistência foramaampicilina (25%), doxiciclina (22,9%) e cefalexina (20,8%). Quanto à sensibilidade, os isolados foram mais sensíveis ao sulfazotrim (87,5%), azitromicina (85,41%) e enrofloxacina (77%). Cães saudáveis podem carrearcepas de E. colimultirresistentes que por sua vez também podem carreargenes codificadores de enterotoxina e adesina, indicando assim que a proximidade entre cães e humanos pode contribuir para a possível transmissão zoonótica desses microrganismos.(AU)

Minimum bactericidal concentration of commercial disinfectants on Staphylococcus spp. isolated from mastitis in goats and detection of the icaD gene / Concentração bactericida mínima de desinfetantes comerciais frente à Staphylococcus spp. isolados de mastite em caprinos e detecção do gene icaD

This study aimed to evaluate the in vitro efficacy of commercial disinfectants on Staphylococcus spp., isolated from mastitis cases in goats, and to associate the observed resistance with the presence of the icaD gene. Broth microdilution was employed to evaluate the in vitro antimicrobial activity of the disinfectants, whereas the Congo Red technique was used for the evaluation of biofilm production and amplification of the icaD gene. All evaluated samples were sensitive to disinfectants, with the following ranges of activity: quaternary ammonium (0.13 - 21.33 µg/ml), chlorhexidine (4.00 - 313.00 µg/ml) and iodine (190.00 - 12500.00 µg/ml); however, the sodium hypochlorite-based disinfectant showed no bactericidal activity in the concentration range from 15.0 to 0.03 µg/ml. The icaD gene presented a frequency of 14.7% in the isolate samples. Fishers exact test showed a significant effect of the relation between the minimum bactericidal concentration value of the quaternary ammonium-based disinfectant and the presence/absence of the icaD gene (P <0.01). Commercial disinfectants with quaternary ammonium, chlorhexidine and iodine active ingredients presented in vitro activity even at concentrations lower than those recommended by the manufacturers. Therefore, the periodic evaluation of the sensitivity profile of the disinfectants must be performed.(AU)

O presente trabalho objetivou avaliar a eficácia in vitro de desinfetantes comerciais frente à Staphylococcus spp. isolados de casos de mastite em cabras e, relacionar a resistência observada com a presença do gene icaD. A microdiluição em caldo foi utilizada para avaliar a atividade antimicrobiana in vitro dos desinfetantes, enquanto a técnica de vermelho congo para a avaliação da produção de biofilme e amplificação do gene icaD. Todas as amostras avaliadas foram sensíveis aos desinfetantes, com as seguintes faixas de atividade: amônia quaternária (0,13 - 21,33 µg/ml), clorexidina (4,00 - 313,00 µg/ml) e iodo (190,00 - 12500,00 µg/ml), no entanto o desinfetante a base de hipoclorito de sódio não apresentou atividade bactericida na faixa de concentração 15,0 a 0,03 µg/ml. O gene icaD apresentou frequência de 14,7% nos isolados. O teste exato de Fisher apontou efeito significativo da relação entre o valor da concentração bactericida mínima do desinfetante à base de amônia quaternária e a presença/ausência do gene icaD (P<0,01). Os desinfetantes comerciais com os princípios ativos amônia quaternária, clorexidina e iodo, apresentaram atividade in vitro até mesmo em concentrações inferiores às preconizadas pelos fabricantes o que torna necessária a realização periódica da avaliação do perfil de sensibilidade dos desinfetantes.(AU)

Minimum bactericidal concentration of commercial disinfectants on Staphylococcus spp. isolated from mastitis in goats and detection of the icaD gene / Concentração bactericida mínima de desinfetantes comerciais frente à Staphylococcus spp. isolados de mastite em caprinos e detecção do gene icaD

This study aimed to evaluate the in vitro efficacy of commercial disinfectants on Staphylococcus spp., isolated from mastitis cases in goats, and to associate the observed resistance with the presence of the icaD gene. Broth microdilution was employed to evaluate the in vitro antimicrobial activity of the disinfectants, whereas the Congo Red technique was used for the evaluation of biofilm production and amplification of the icaD gene. All evaluated samples were sensitive to disinfectants, with the following ranges of activity: quaternary ammonium (0.13 - 21.33 µg/ml), chlorhexidine (4.00 - 313.00 µg/ml) and iodine (190.00 - 12500.00 µg/ml); however, the sodium hypochlorite-based disinfectant showed no bactericidal activity in the concentration range from 15.0 to 0.03 µg/ml. The icaD gene presented a frequency of 14.7% in the isolate samples. Fisher’s exact test showed a significant effect of the relation between the minimum bactericidal concentration value of the quaternary ammonium-based disinfectant and the presence/absence of the icaD gene (P <0.01). Commercial disinfectants with quaternary ammonium, chlorhexidine and iodine active ingredients presented in vitro activity even at concentrations lower than those recommended by the manufacturers. Therefore, the periodic evaluation of the sensitivity profile of the disinfectants must be performed.

O presente trabalho objetivou avaliar a eficácia in vitro de desinfetantes comerciais frente à Staphylococcus spp. isolados de casos de mastite em cabras e, relacionar a resistência observada com a presença do gene icaD. A microdiluição em caldo foi utilizada para avaliar a atividade antimicrobiana in vitro dos desinfetantes, enquanto a técnica de vermelho congo para a avaliação da produção de biofilme e amplificação do gene icaD. Todas as amostras avaliadas foram sensíveis aos desinfetantes, com as seguintes faixas de atividade: amônia quaternária (0,13 - 21,33 µg/ml), clorexidina (4,00 - 313,00 µg/ml) e iodo (190,00 - 12500,00 µg/ml), no entanto o desinfetante a base de hipoclorito de sódio não apresentou atividade bactericida na faixa de concentração 15,0 a 0,03 µg/ml. O gene icaD apresentou frequência de 14,7% nos isolados. O teste exato de Fisher apontou efeito significativo da relação entre o valor da concentração bactericida mínima do desinfetante à base de amônia quaternária e a presença/ausência do gene icaD (P<0,01). Os desinfetantes comerciais com os princípios ativos amônia quaternária, clorexidina e iodo, apresentaram atividade in vitro até mesmo em concentrações inferiores às preconizadas pelos fabricantes o que torna necessária a realização periódica da avaliação do perfil de sensibilidade dos desinfetantes.

Associação dos quadros anatomopatológicos de colibacilose aviaria com genes de virulência de Escherichia coli / Association of anatomopathological findings of avian colibacillosis with Escherichia coli virulence genes

Escherichia coli patogênica para aves é responsável por infecções que contribuem com grandes perdas econômicas na indústria avícola. Esse patotipo pode determinar diversos quadros anatomopatológicos, com destaque para aerossaculites, hepatites, onfalites e pericardites. A manifestação de diferentes quadros anatomopatológicos em aves com colibacilose pode estar associada à presença de diferentes combinações de genes de virulência. Dentre os genes de virulência mais detectados em Escherichia coli patogênica para aves destacam-se as estruturas antigênicas (antígeno somático O, capsular K, fimbrial F e flagelares H), vat, colicina V, irp2, tsh, papC, iucD, iss e astA.A presença de determinadas combinações de genes de virulência conferem as cepas maior facilidade em sobreviver, aderir, colonizar e até mesmo de desenvolver quadros septicêmicos.

Escherichia coli pathogenic to birds is responsible for infections that contributes to great economic losses in the poultry industry. This pathotype can determine various pathological injuries, especially aerossaculites, hepatitis, onfalites and pericarditis. The manifestation of different pathological findings in birds with colibacillosis may be associated with the presence of different combinations virulence genes. Among the virulence genes most frequently detected in Escherichia coli pathogenic for birds are the antigenic structures (somatic O, capsular K, fimbrial F and flagellar H), vat, colicin V, irp2, tsh, papC, IUCD, iss and astA .The presence of certain combinations of virulence genes confer the higher strains to survive, adhere, colonize and develop septic.

Associação dos quadros anatomopatológicos de colibacilose aviaria com genes de virulência de Escherichia coli / Association of anatomopathological findings of avian colibacillosis with Escherichia coli virulence genes

Escherichia coli patogênica para aves é responsável por infecções que contribuem com grandes perdas econômicas na indústria avícola. Esse patotipo pode determinar diversos quadros anatomopatológicos, com destaque para aerossaculites, hepatites, onfalites e pericardites. A manifestação de diferentes quadros anatomopatológicos em aves com colibacilose pode estar associada à presença de diferentes combinações de genes de virulência. Dentre os genes de virulência mais detectados em Escherichia coli patogênica para aves destacam-se as estruturas antigênicas (antígeno somático O, capsular K, fimbrial F e flagelares H), vat, colicina V, irp2, tsh, papC, iucD, iss e astA.A presença de determinadas combinações de genes de virulência conferem as cepas maior facilidade em sobreviver, aderir, colonizar e até mesmo de desenvolver quadros septicêmicos.(AU)

Escherichia coli pathogenic to birds is responsible for infections that contributes to great economic losses in the poultry industry. This pathotype can determine various pathological injuries, especially aerossaculites, hepatitis, onfalites and pericarditis. The manifestation of different pathological findings in birds with colibacillosis may be associated with the presence of different combinations virulence genes. Among the virulence genes most frequently detected in Escherichia coli pathogenic for birds are the antigenic structures (somatic O, capsular K, fimbrial F and flagellar H), vat, colicin V, irp2, tsh, papC, IUCD, iss and astA .The presence of certain combinations of virulence genes confer the higher strains to survive, adhere, colonize and develop septic.(AU)

Virulence genes in Escherichia coli isolated from feces and urine of cats / Genes de virulência em Escherichia coli isolados de fezes e de urina de gatos

Determinadas linhagens de Escherichia coli comportam-se como patógenos em gatos, causando doenças gastrointestinais e extraintestinais. Neste estudo, foram utilizadas 205 cepas de E. coli isoladas de amostras de fezes provenientes de 19 gatos diarreicos e de 21 gatos não diarreicos, e três amostras de urina provenientes de gatos com infecção do trato urinário (ITU). Essas cepas foram testadas pela técnica de reação em cadeia da polimerase com múltiplos iniciadores para a detecção da presença de genes codificadores de adesinas (pap, sfa e afa), assim como para a detecção dos genes produtores da toxina Shiga-like (stx1 e stx2) e do gene da intimina (eae). Oitenta e dois isolados possuíam genes codificadores de adesinas, dos quais 11 apresentaram o gene pap, 41 apresentaram o gene sfa e 27 apresentaram uma combinação dos genes pap + sfa. Nenhuma das cepas examinadas apresentou os genes stx1, stx2 ou afa. Três isolados provenientes de um gato diarreico apresentaram uma combinação dos genes sfa + eae. Animais de companhia (pets) são reservatórios naturais para diversos organismos, especialmente linhagens ExPEC, as quais são potencialmente capazes de infectar seres humanos, o que representa um motivo de grande preocupação.(AU)

Virulence genes in Escherichia coli isolated from feces and urine of cats / Genes de virulência em Escherichia coli isolados de fezes e de urina de gatos

Determinadas linhagens de Escherichia coli comportam-se como patógenos em gatos, causando doenças gastrointestinais e extraintestinais. Neste estudo, foram utilizadas 205 cepas de E. coli isoladas de amostras de fezes provenientes de 19 gatos diarreicos e de 21 gatos não diarreicos, e três amostras de urina provenientes de gatos com infecção do trato urinário (ITU). Essas cepas foram testadas pela técnica de reação em cadeia da polimerase com múltiplos iniciadores para a detecção da presença de genes codificadores de adesinas (pap, sfa e afa), assim como para a detecção dos genes produtores da toxina Shiga-like (stx1 e stx2) e do gene da intimina (eae). Oitenta e dois isolados possuíam genes codificadores de adesinas, dos quais 11 apresentaram o gene pap, 41 apresentaram o gene sfa e 27 apresentaram uma combinação dos genes pap + sfa. Nenhuma das cepas examinadas apresentou os genes stx1, stx2 ou afa. Três isolados provenientes de um gato diarreico apresentaram uma combinação dos genes sfa + eae. Animais de companhia (pets) são reservatórios naturais para diversos organismos, especialmente linhagens ExPEC, as quais são potencialmente capazes de infectar seres humanos, o que representa um motivo de grande preocupação.(AU)