Production, partial purification, and characterization of a glucoamylase from Epicoccum nigrum

Starch processing industries use amylases, accounting for approximately 30% of the world's enzyme market. Previously, an amylase-producing strain of Epicoccum nigrumwas isolated from maize grains. Although E. nigrumamylase production is already reported in the literature, no published data on production optimization or characterization of the produced enzyme exists. The objectives of this work were to improve the amylase production by theE. nigrumPG 16 strain and to purify and characterize the produced enzyme. The E. nigrumPG 16 amylase production best conditions in submerged culture were: inoculum of 4% (v v-1) of a five-days-old stationary culture homogenate, agitation at 100 rpm, 25°C, natural light, 72 hours of incubation, starch as thecarbon source, and an initial medium pH of 7.0. A molecular exclusion chromatography profile has shown the production of only one amylase, which was partially purified with ammonium precipitation and dialysis. The enzyme optima pH and temperature are 6.0 and 50°C, respectively. The partially purified enzyme lostits activity when incubated for 30 min in temperatures above 40°C, presenting a T50of 46.25°C. The KMand Vmaxof the partially purified enzyme are 1.72 mg mL-1of starch and 0.15 mgmin-1of degraded starch, respectively. The ion Ca2+slightly activated the studied enzyme. The ions Cu2+, Zn2+, and Fe3+and the detergents SDS and Tween 80 acted as inhibitors of the studied enzyme. The partially purified enzyme released glucose from p-nitrophenyl α-D-glucopyranoside (p-NPG). Glucose was the enzyme's main product from starch hydrolysis, as evidenced by thin-layer chromatography. The E. nigrumPG 16 studied enzyme is a glucoamylase and represents an alternative for enzymatic starch hydrolysis.(AU)

Eurytrema coelomaticum infection: correlation between parasite burden and impairment of pancreatic exocrine enzyme secretion / Eurytrema coelomaticum: correlação entre carga parasitária e insuficiência pancreática exócrina

Eurytrema coelomaticum is a trematode reported in the pancreatic ducts of ruminants. It is conjectured that may cause disorders in the pancreas, as well as digestive and metabolic processes dependent on them. This study, determined if there is an impairment of exocrine pancreatic function, and correlated it with parasite burden. Pancreas, blood, and fecal samples were collected from 119 bovines at a abattoir. Stool samples were subjected to the gelatin and x-ray film digestion tests (to detect the presence of trypsin in feces). Using blood samples, the following biochemical tests were performed: amylase, lipase, glucose, fructosamine, cholesterol, triglycerides, total protein, albumin, and globulins. Analyses were correlated with pancreatic parasite burden. Cattle with a high parasitic load presented higher incidence of negative tests in both gelatin digestion and x-ray film digestion tests (P < 0.001) when compared to non-parasitized animals and those with a low parasitic load. Changes in those tests only occurred if the parasitemia was moderate or severe. The activity of the amylase and lipase enzymes was significantly higher in animals with low parasitemia (P < 0.05), compared to non-parasitized animals and with a high parasitic burden. In this study, in cases of high parasitemia, negative results were observed in both gelatin and x-ray film in the feces digestion tests. However, the low infection of E. coelomaticum, higher levels of serum amylase and lipase that also indicated loss of pancreatic exocrine functions were reported.

Eurytrema coelomaticum, um trematódeo de ductos pancreáticos de ruminantes. Conjectura-se que possa ocasionar transtornos nas funções pancreáticas, mais especificamente nos processos digestivos e metabólicos dependentes destas. Neste estudo, o objetivo foi determinar se há comprometimento da função pancreática exócrina, correlacionado-a a carga parasitária. Foram utilizados pâncreas e respectivas amostras de sangue e fezes de 119 bovinos. As amostras de fezes foram submetidas aos testes de digestão da gelatina em tubo e digestão de filme radiográfico, ambos para detecção de tripsina nas fezes. Foram realizados os seguintes exames bioquímicos em amostras de sangue: amilase, lipase, glicemia, frutosamina, colesterol, triglicerídeos, proteínas totais, albumina e globulinas. Após isto, as análises bioquímicas foram correlacionadas com a quantidade numérica de parasitas encontrados no pâncreas (post-mortem). Houve maior quantidade de testes negativos (digestão do filme radiográfico e prova de digestão da gelatina) nos animais com alta carga parasitária (P < 0.001), quando comparados aos animais não parasitados e com baixa carga parasitária. Portanto, os exames supracitados se alteram somente se a quantidade de parasitas for moderada ou severa. As atividades das enzimas amilase e lipase foram significativamente maiores nos animais que apresentavam baixa parasitemia (P < 0.05), em comparação com os animais com alta carga parasitária e não parasitados. Conclui-se que em quadros de alta parasitemia há alteração significativa nos testes de digestão nas fezes, e que em quadros de baixa parasitemia há alterações significativas nos valores de amilase e lipase séricas, ambos comprovando alterações pancreáticas importantes, de acordo com o quadro de parasitemia.

Uso do gérmen de milho desengordurado, com e sem adição de um complexo enzimático, em dietas para cães / [Use of defatted corngerm with and without the addition of an enzyme complex in dog diets]

Objetivou-se avaliar o coeficiente de digestibilidade aparente (CDA) dos nutrientes, a palatabilidade das dietas e as características fecais de cães alimentados com uma dieta controle e uma dieta contendo 20% de gérmen desengordurado (GD), com e sem adição de complexo enzimático (amilase, xilanase, betaglucanase e mananase). Para o experimento de digestibidade e das características fecais, foram utilizados 12 cães adultos, distribuídos em delineamento em blocos ao acaso, em esquema fatorial 2 x 2 (dieta x enzima). O segundo experimento avaliou a palatabilidade, por meio da primeira escolha e da razão de ingestão (RI) da dieta DC vs. 20% de GD, utilizando-se 16 cães. O teste de palatabilidade contou com três dias consecutivos, totalizando 48 repetições. A dieta com inclusão de 20% de GD teve os menores valores de CDA da MS, da EB e da EM (P<0,05). A inclusão do complexo enzimático melhorou o CDA da MS, da EB e da EM (P<0,05). Não foram observadas diferenças nas características fecais (P>0,05). Em relação à palatabilidade, os cães preferiram a dieta 20% de GD, tanto na primeira escolha como na RI (P<0,05). A inclusão de enzimas às dietas melhora a digestibilidade dos nutrientes e da EM, sendo um aditivo com potencial uso na alimentação de cães.(AU)

The objective was to evaluate the apparent digestibility coefficient (ADC) of nutrients, diet palatability and fecal characteristics of dogs fed diets containing degreased germ (DG), and a control diet (DC) - both with and without the addition of enzyme complex (amylase, xylanase, betaglucanase and mananase). For the digestibility and fecal characteristics experiment 12 adult dogs were used, distributed in a randomized block design, in a 2 x 2 factorial scheme (diet x enzyme). The second experiment evaluated palatability using the first choice and ingestion ratio (IR) of DC diet vs. 20%gD, using 16 dogs. The palatability test had three consecutive days, totaling 48 repetitions. The diet with inclusion of 20% DG had the lowest ADC values of DM, GE and ME (P <0.05). Inclusion of the enzyme complex improved ADC of DM, GE and ME (P <0.05). No differences in fecal characteristics were observed (P >0.05). Regarding palatability, dogs preferred the 20% DG diet in both first choice and IR (P <0.05). Inclusion of enzymes in diets improves nutrient digestibility and ME, being an additive with potential use in dog food.(AU)

Citral as food additive for common snook - zootechnical parameters and digestive enzymes / Citral como aditivo na ração para robalo flecha - parâmetros zootécnicos e enzimas digestivas

Essential oils of plants whose main compound is citral showed beneficial effects when added to fish feed. The objective of the present study was to evaluate the dietary effect of the addition of citral on zootechnical parameters and digestive enzyme activities of Centropomus undecimalis. Juveniles were fed for 45 days with diets containing different amounts of citral (0.0 - control, 0.5, 1.0, and 2.0 mL per kg of diet). The water quality parameters were kept stable during the experiment and no mortality was observed. At the end of the experimental period, the treatment 0.5 mL citral per kg of diet had the lowest weight gain and specific growth rate, and the highest feed conversion, while the same parameters did not differ between the other treatments. Pepsin activity was higher in the stomach of fish fed with 0.5 mL citral per kg of diet and amylase activity was higher in the intestine of fish fed with 0.5 and 2.0 mL citral per kg of diet compared to the control group. Intestinal lipase activity was higher in all groups that were fed with citral compared to the control group. Chymotrypsin and trypsin activities showed no difference between groups. Consequently, dietary addition of citral at any of the levels tested is not recommended for common snook.(AU)

Óleos essenciais de plantas, cujo composto majoritário é o citral, mostraram efeitos benéficos quando adicionados à ração para peixes. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da adição de citral sobre os parâmetros zootécnicos e atividades das enzimas digestivas de Centropomus undecimalis. Os juvenis foram alimentados por 45 dias com dietas contendo diferentes quantidades de citral (0,0 - controle, 0,5, 1,0 e 2,0 mL por kg de ração). Os parâmetros de qualidade da água foram mantidos estáveis ​​durante o experimento e nenhuma mortalidade foi observada. Ao final do período experimental, o tratamento 0,5 mL citral por kg de ração teve o menor ganho de peso e taxa de crescimento específico e a maior conversão alimentar, enquanto os mesmos parâmetros não diferiram entre os demais tratamentos. A atividade da pepsina foi maior no estômago de peixes alimentados com 0,5 mL de citral por kg de ração e a atividade de amilase foi maior no intestino de peixes alimentados com 0,5 e 2,0 mL citral por kg de ração comparado ao grupo controle. A atividade da lipase intestinal foi maior em todos os grupos que foram alimentados com citral, em comparação ao grupo controle. As atividades de quimotripsina e tripsina não mostraram diferença entre os grupos. Consequentemente, a adição de citral na ração em qualquer um dos níveis testados não é recomendada para robalo flecha.(AU)

The effect of exogenous enzymes on the performance and digestibility of nutrients in broiler / O efeito de enzimas exógenas no desempenho e digestibilidade de nutrientes em frangos de corte

Here we tested how feeding with exogenous enzymes affects the performance, carcass yield, and ileal digestibility in broilers from 21- to 42-days-old. The study included 1008 male broilers randomly distributed into six diets: positive control (PC), corn and soybean meal containing all the nutritional requirements; negative control (NC), with a 120 kcal.kg-1 reduction in metabolizable energy relative to the PC; enzyme complex one (NC + 100 ppm of endo-1,4-beta-xylanase); enzyme complex two (NC + 200 ppm of xylanase, amylase and protease); enzyme blend one (NC + 100 FXU kg-1 of xylanase and 200 FXU kg-1 of amylase); and enzyme blend two (NC + 100 FXU kg-1 of xylanase and 300 FXU kg-1 of amylase). The enzyme complex two (CN + 100 FXU.kg de xilanase e 300 FXU.kg de amilase) and enzyme blend two (NC + 100 FXU kg-1 of xylanase and 300 FXU kg-1 of amylase) had greater weight gain, feed conversion, carcass yield, and digestibility of nutrients than the NC (P < 0,05). We found that enzyme complex two and enzyme blend two valued their nutritional matrix promoting better performance and digestibility of broilers.

O trabalho foi realizado para avaliar o uso de enzimas sobre o desempenho, rendimento de carcaça e digestibilidade ileal em frangos de corte no período de 21 a 42 dias de idade. Foram utilizados 1008 frangos de corte, machos, distribuídos em seis dietas: controle positivo (CP) a base de milho e farelo de soja, contendo todas as exigências nutricionais, controle negativo (CN) com redução de 120 kcal.kg-1de energia metabolizável, complexo enzimático um (CN + 100 ppm de endo-1,4-beta-xilanase); complexo enzimático dois ( CN + 200 ppm de xilanase, amilase e protease); blend enzimático um (CN + 100 FXU. kg de xilanase e 200 FXU.kg de amilase e blend enzimático dois (CN + 100 FXU.kg de xilanase e 300 FXU.kg de amilase). O complexo enzimático dois (CN + 200 ppm de xilanase, amilase e protease) e blend enzimático dois (CN + 100 FXU.kg de xilanase e 300 FXU.kg de amilase) proporcionaram ganho de peso, conversão alimentar, rendimento de carcaça e digestibilidade de nutrientes superior ao controle negativo (P < 0,05). Concluiu-se que o complexo enzimático dois e blend enzimático dois valorizaram sua matriz nutricional promovendo melhor desempenho e digestibilidade em frangos de corte.

The effect of exogenous enzymes on the performance and digestibility of nutrients in broiler / O efeito de enzimas exógenas no desempenho e digestibilidade de nutrientes em frangos de corte

Here we tested how feeding with exogenous enzymes affects the performance, carcass yield, and ileal digestibility in broilers from 21- to 42-days-old. The study included 1008 male broilers randomly distributed into six diets: positive control (PC), corn and soybean meal containing all the nutritional requirements; negative control (NC), with a 120 kcal.kg-1 reduction in metabolizable energy relative to the PC; enzyme complex one (NC + 100 ppm of endo-1,4-beta-xylanase); enzyme complex two (NC + 200 ppm of xylanase, amylase and protease); enzyme blend one (NC + 100 FXU kg-1 of xylanase and 200 FXU kg-1 of amylase); and enzyme blend two (NC + 100 FXU kg-1 of xylanase and 300 FXU kg-1 of amylase). The enzyme complex two (CN + 100 FXU.kg de xilanase e 300 FXU.kg de amilase) and enzyme blend two (NC + 100 FXU kg-1 of xylanase and 300 FXU kg-1 of amylase) had greater weight gain, feed conversion, carcass yield, and digestibility of nutrients than the NC (P < 0,05). We found that enzyme complex two and enzyme blend two valued their nutritional matrix promoting better performance and digestibility of broilers.(AU)

O trabalho foi realizado para avaliar o uso de enzimas sobre o desempenho, rendimento de carcaça e digestibilidade ileal em frangos de corte no período de 21 a 42 dias de idade. Foram utilizados 1008 frangos de corte, machos, distribuídos em seis dietas: controle positivo (CP) a base de milho e farelo de soja, contendo todas as exigências nutricionais, controle negativo (CN) com redução de 120 kcal.kg-1de energia metabolizável, complexo enzimático um (CN + 100 ppm de endo-1,4-beta-xilanase); complexo enzimático dois ( CN + 200 ppm de xilanase, amilase e protease); blend enzimático um (CN + 100 FXU. kg de xilanase e 200 FXU.kg de amilase e blend enzimático dois (CN + 100 FXU.kg de xilanase e 300 FXU.kg de amilase). O complexo enzimático dois (CN + 200 ppm de xilanase, amilase e protease) e blend enzimático dois (CN + 100 FXU.kg de xilanase e 300 FXU.kg de amilase) proporcionaram ganho de peso, conversão alimentar, rendimento de carcaça e digestibilidade de nutrientes superior ao controle negativo (P < 0,05). Concluiu-se que o complexo enzimático dois e blend enzimático dois valorizaram sua matriz nutricional promovendo melhor desempenho e digestibilidade em frangos de corte.(AU)

Filamentous fungi producing enzymes under fermentation in cassava liquid waste / Fungos filamentosos produtores de enzimas sob fermentação em manipueira

The conversion of agroindustrial residues by microorganisms has been explored from fermentative processes to obtain several bioactive molecules. The objective of this work was to isolate and select filamentous fungi present in cassava liquid waste for the production of amylase, carboxymethylcellulose (CMCase), pectinase and xylanase using the same residue as induction substrate in fermentative processes. A total of 65 filamentous fungi were isolated and qualitative tests indicated that approximately 86% of these strains were able to produce at least one of the enzymes and 32% capable of producing the four enzymes. Fermentation assays in cassava liquid residue-containing medium showed 6 fungal lines as potential enzyme producers. The maximum activities of pectinase, xylanase, amylase and CMCase were respectively observed at 96 hours of fermentation by the strain by the strain Aspergillus sp. B5C; at 120 hours (163.6 ± 0.13 nKat mL-1), by Aspergillus sp. B4I; at 144 hours (99.8 ± 0.24 nKat mL-1), by Penicillium sp. B3A; and at 48 hours (55.5 ± 0.21 nKat mL-1), by Aspergillus sp. B4O. These results suggest that cassava liquid waste was source of filamentous fungi producing amylase, CMCase, pectinase and xylanase, as well as a promising alternative substrate for bioprocesses aiming the production of enzymes.

A conversão de resíduos agroindustriais por micro-organismos tem sido explorada a partir de processos fermentativos para obtenção de diversas moléculas bioativas. O objetivo deste trabalho foi isolar e selecionar fungos filamentosos presentes em manipueira para produção de amilase, carboximetilcelulase (CMCase), pectinase e xilanase utilizando o próprio resíduo como substrato indutor. Um total de 65 fungos filamentosos foi isolado e testes qualitativos indicaram que, aproximadamente, 86% dessas linhagens foram hábeis em produzir pelo menos uma das enzimas e 32% capazes de produzir as quatro enzimas. Ensaios fermentativos em meio contendo manipueira apontaram 6 linhagens fúngicas como potenciais produtoras de enzimas. As atividades máximas de pectinase, xilanase, amilase e CMCase foram observadas, respectivamente, às 96 horas de fermentação (67.4 ± 0,6 nKat mL-1), pela linhagem Aspergillus sp. B5C; às 120 horas (163.6 ± 0,13 nKat mL-1), por Aspergillus sp. B4I; às 144 horas (99.8 ± 0,24 nKat mL-1), por Penicillium sp. B3A; e às 48 horas (55.5 ± 0,21 nKat mL-1), por Aspergillus sp. B4O. Estes resultados sugerem a manipueira como fonte de fungos filamentosos produtores de amilase, CMCase, pectinase e xilanase, além de um promissor substrato alternativo para bioprocessos visando a produção dessas enzimas.

Filamentous fungi producing enzymes under fermentation in cassava liquid waste / Fungos filamentosos produtores de enzimas sob fermentação em manipueira

The conversion of agroindustrial residues by microorganisms has been explored from fermentative processes to obtain several bioactive molecules. The objective of this work was to isolate and select filamentous fungi present in cassava liquid waste for the production of amylase, carboxymethylcellulose (CMCase), pectinase and xylanase using the same residue as induction substrate in fermentative processes. A total of 65 filamentous fungi were isolated and qualitative tests indicated that approximately 86% of these strains were able to produce at least one of the enzymes and 32% capable of producing the four enzymes. Fermentation assays in cassava liquid residue-containing medium showed 6 fungal lines as potential enzyme producers. The maximum activities of pectinase, xylanase, amylase and CMCase were respectively observed at 96 hours of fermentation by the strain by the strain Aspergillus sp. B5C; at 120 hours (163.6 ± 0.13 nKat mL-1), by Aspergillus sp. B4I; at 144 hours (99.8 ± 0.24 nKat mL-1), by Penicillium sp. B3A; and at 48 hours (55.5 ± 0.21 nKat mL-1), by Aspergillus sp. B4O. These results suggest that cassava liquid waste was source of filamentous fungi producing amylase, CMCase, pectinase and xylanase, as well as a promising alternative substrate for bioprocesses aiming the production of enzymes.(AU)

A conversão de resíduos agroindustriais por micro-organismos tem sido explorada a partir de processos fermentativos para obtenção de diversas moléculas bioativas. O objetivo deste trabalho foi isolar e selecionar fungos filamentosos presentes em manipueira para produção de amilase, carboximetilcelulase (CMCase), pectinase e xilanase utilizando o próprio resíduo como substrato indutor. Um total de 65 fungos filamentosos foi isolado e testes qualitativos indicaram que, aproximadamente, 86% dessas linhagens foram hábeis em produzir pelo menos uma das enzimas e 32% capazes de produzir as quatro enzimas. Ensaios fermentativos em meio contendo manipueira apontaram 6 linhagens fúngicas como potenciais produtoras de enzimas. As atividades máximas de pectinase, xilanase, amilase e CMCase foram observadas, respectivamente, às 96 horas de fermentação (67.4 ± 0,6 nKat mL-1), pela linhagem Aspergillus sp. B5C; às 120 horas (163.6 ± 0,13 nKat mL-1), por Aspergillus sp. B4I; às 144 horas (99.8 ± 0,24 nKat mL-1), por Penicillium sp. B3A; e às 48 horas (55.5 ± 0,21 nKat mL-1), por Aspergillus sp. B4O. Estes resultados sugerem a manipueira como fonte de fungos filamentosos produtores de amilase, CMCase, pectinase e xilanase, além de um promissor substrato alternativo para bioprocessos visando a produção dessas enzimas.(AU)

Different feeding habits influence the activity of digestive enzymes in freshwater fish / Diferentes hábitos alimentares influenciam a atividade das enzimas digestivas em peixes de água doce

The aim of this study was to verify the activity of some digestive enzymes in four fish species with different feeding habits. Knowledge of these enzymatic activities can help us to understand the species" digestive processes. The species chosen for this study were Ctenopharyngodon idella (herbivore), Rhamdia quelen (omnivore), Leporinus obtusidens (omnivore) and Hoplias malabaricus (carnivore). The digestive tract of these species was divided into four portions to estimate enzymatic activity: stomach, anterior, mid and posterior intestine. Ctenopharyngodon idella had the highest amylase and maltase activities in all portions of the gut, followed by L. obtusidens . The highest trypsin activity was observed in all gut portions of H. malabaricus, followed by the mid intestine of L. obtusidens and the anterior intestine of C. idella . The highest chymotrypsin activity was found in all portions of C. idella followed by the anterior intestines of R. quelen, L. obtusidens and H. malabaricus . In the stomach, acid protease activity was significantly lower in R. quelen and L. obtusidens compared to H. malabaricus. Ctenopharyngodon idella showed high activity of enzymes that hydrolyze carbohydrates, represented in this study by amylase and maltase and H. malabaricus showed higher protease activity and low amylase activity.

O objetivo deste estudo foi verificar a atividade de algumas enzimas digestivas em quatro espécies de peixes com hábitos alimentares diferentes. O conhecimento das atividades dessas enzimas pode nos ajudar a compreender os processos digestivos das espécies. As espécies escolhidas para este estudo foram Ctenopharyngodon idella (herbívoro), Rhamdia quelen (onívoro), Leporinus obtusidens (onívoro) e Hoplias malabaricus (carnívoro). O trato digestivo dessas espécies foi dividido em quatro partes para estimar a atividade enzimática: estômago, intestino anterior, médio e posterior. Ctenopharyngodon idella teve a maior atividade da amilase e maltase em todas as porções do intestino, seguido por L. obtusidens . A maior atividade da tripsina foi observada em todas as porções do intestino de H. malabaricus , seguido pelo intestino médio de L. obtusidens e o intestino anterior de C. idella . A maior atividade de quimotripsina foi encontrada em todas as partes do intestino do C. idella , seguida pelo intestino anterior de R. quelen, L. obtusidens e H. malabaricus . No estômago, a atividade de protease ácida foi significativamente menor em R. quelen e L. obtusidens comparado com H. malabaricus. Ctenopharyngodon idella mostrou alta atividade de enzimas que hidrolisam carboidratos, representadas neste estudo por amilase e maltase e H. malabaricus mostrou maior atividade de proteases e baixa atividade de amilase.

Different feeding habits influence the activity of digestive enzymes in freshwater fish / Diferentes hábitos alimentares influenciam a atividade das enzimas digestivas em peixes de água doce

The aim of this study was to verify the activity of some digestive enzymes in four fish species with different feeding habits. Knowledge of these enzymatic activities can help us to understand the species" digestive processes. The species chosen for this study were Ctenopharyngodon idella (herbivore), Rhamdia quelen (omnivore), Leporinus obtusidens (omnivore) and Hoplias malabaricus (carnivore). The digestive tract of these species was divided into four portions to estimate enzymatic activity: stomach, anterior, mid and posterior intestine. Ctenopharyngodon idella had the highest amylase and maltase activities in all portions of the gut, followed by L. obtusidens . The highest trypsin activity was observed in all gut portions of H. malabaricus, followed by the mid intestine of L. obtusidens and the anterior intestine of C. idella . The highest chymotrypsin activity was found in all portions of C. idella followed by the anterior intestines of R. quelen, L. obtusidens and H. malabaricus . In the stomach, acid protease activity was significantly lower in R. quelen and L. obtusidens compared to H. malabaricus. Ctenopharyngodon idella showed high activity of enzymes that hydrolyze carbohydrates, represented in this study by amylase and maltase and H. malabaricus showed higher protease activity and low amylase activity. (AU)

O objetivo deste estudo foi verificar a atividade de algumas enzimas digestivas em quatro espécies de peixes com hábitos alimentares diferentes. O conhecimento das atividades dessas enzimas pode nos ajudar a compreender os processos digestivos das espécies. As espécies escolhidas para este estudo foram Ctenopharyngodon idella (herbívoro), Rhamdia quelen (onívoro), Leporinus obtusidens (onívoro) e Hoplias malabaricus (carnívoro). O trato digestivo dessas espécies foi dividido em quatro partes para estimar a atividade enzimática: estômago, intestino anterior, médio e posterior. Ctenopharyngodon idella teve a maior atividade da amilase e maltase em todas as porções do intestino, seguido por L. obtusidens . A maior atividade da tripsina foi observada em todas as porções do intestino de H. malabaricus , seguido pelo intestino médio de L. obtusidens e o intestino anterior de C. idella . A maior atividade de quimotripsina foi encontrada em todas as partes do intestino do C. idella , seguida pelo intestino anterior de R. quelen, L. obtusidens e H. malabaricus . No estômago, a atividade de protease ácida foi significativamente menor em R. quelen e L. obtusidens comparado com H. malabaricus. Ctenopharyngodon idella mostrou alta atividade de enzimas que hidrolisam carboidratos, representadas neste estudo por amilase e maltase e H. malabaricus mostrou maior atividade de proteases e baixa atividade de amilase. (AU)

Simultaneous production of amylases and proteases by Bacillus subtilis in brewery wastes

The simultaneous production of amylase (AA) and protease (PA) activity by Bacillus subtilis UO-01 in brewery wastes was studied by combining the response surface methodology with the kinetic study of the process. The optimum conditions (T = 36.0 °C and pH = 6.8) for high biomass production (0.92 g/L) were similar to the conditions (T = 36.8 °C and pH = 6.6) for high AA synthesis (9.26 EU/mL). However, the maximum PA level (9.77 EU/mL) was obtained at pH 7.1 and 37.8 °C. Under these conditions, a considerably high reduction (between 69.9 and 77.8%) of the initial chemical oxygen demand of the waste was achieved. In verification experiments under the optimized conditions for production of each enzyme, the AA and PA obtained after 15 h of incubation were, respectively, 9.35 and 9.87 EU/mL. By using the Luedeking and Piret model, both enzymes were classified as growth-associated metabolites. Protease production delay seemed to be related to the consumption of non-protein and protein nitrogen. These results indicate that the brewery waste could be successfully used for a high scale production of amylases and proteases at a low cost.(AU)

Evaluation of the supplementation of a feed additive as a potential protector against the adverse effects of 2. 5 ppm T-2 toxin on growing broiler chickens / Avaliação da suplementação de um aditivo alimentar como um protetor potencial contra os efeitos adversos de 2, 5ppm de toxina T-2 em frangos em crescimento

A trial was conducted to evaluate a feed additive containing epoxidase activity from a bacterium (Mycofix-S) as a potential protection against the adverse effects of 2.5 ppm dietary T-2 toxin in male growing broiler chickens. A total of 144 one-day-old Ross 308 male chicks were individually wing-banded and allotted into each of the four experimental groups. Group 1: negative control, no T-2 toxin or additive; group 2: Mycofix-S, 2.5 g/kg; group 3: positive control, 2.5 ppm T-2 toxin; group 4: 2.5 ppm T-2 toxin + 2.5 g/kg Mycofix-S. Feed and water were provided ad libitum for 28 days (days 1 to 28 of age). Each experimental treatment was replicated 6 times, with 6 birds per replicate pen. Response variables included performance parameters, serum activity of alkaline phosphatase (ALP) and amylase, relative weight of selected organs and histology of the upper digestive system. T-2 toxin at 2.5 ppm significantly (P = 0.016) decreased the 28-day body weight gain and cumulative feed intake without affecting feed conversion. The feed additive counteracted these adverse effects. Serum enzyme activities were not significantly (P>0.05) affected for the four experimental groups but when data from the groups receiving T-2 toxin was pooled and compared against the pooled data from groups without the toxin a significant decrease in amylase activity was observed in chickens receiving T-2 toxin. The histological examination of the upper digestive system revealed lesions in mouth, esophagus, proventriculus, gizzard and duodenum in the chickens fed T-2 toxin without the additive. Chickens fed T-2 toxin plus the additive showed lesions in the same tissues except in the duodenum. The results of the present study show that the addition of 2.5 g/kg of the feed additive tested protects against adverse effects on performance and also the integrity of the duodenal mucosa.(AU)

Foi realizado um experimento com o objetivo de avaliar um aditivo alimentar contendo atividade de epoxidase de uma bactéria (Mycofix-S) como proteção potencial contra os efeitos adversos de uma dieta com 2,5ppm de toxina T-2 em frangos de corte machos. Um total de 144 pintos machos Ross 308 de um dia de idade foram marcados na asa individualmente e alocados em um de quatro grupos experimentais: grupo 1: controle negativo, sem toxina T-2 ou aditivo; grupo 2: 2,5g/kg de Mycofix-S; grupo 3: controle positivo, 2,5ppm de toxina T-2; grupo 4: 2,5ppm de toxina T-2 + 2,5g/kg de Mycofix-S. Alimento e água foram fornecidos ad libitum por 28 dias (dias um a 28 de idade). Cada tratamento experimental foi replicado seis vezes, com seis pintos por gaiola de replicação. As variáveis de resposta incluíram parâmetros de desempenho, atividade sérica de fosfatase alcalina (ALP) e amilase, peso relativo de órgãos selecionados e histologia do sistema digestivo superior. A toxina T-2 a 2,5ppm diminuiu significativamente (P = 0.016) o ganho de peso corporal aos 28 dias e o consumo de alimento acumulado, sem afetar a conversão alimentar. O aditivo diminuiu os efeitos adversos. As atividades séricas das enzimas não foram afetadas significativamente (P>0.05) nos quatro grupos experimentais, porém, quando os dados dos grupos que receberam a toxina T-2 foram combinados e comparados com o pool de dados dos grupos sem toxina, foi observado um decréscimo significativo da atividade de amilase nos frangos que receberam a toxina T-2. O exame histológico do sistema digestivo superior revelou lesões em boca, esôfago, pró-ventrículo, moela e duodeno nos frangos alimentados com toxina T-2 sem aditivo. Frangos alimentados com toxina T-2 mais aditivo mostraram lesões nos mesmos tecidos, exceto no duodeno. Os resultados do presente estudo mostram que a adição de 2,5g/kg do aditivo alimentar testado protege contra os efeitos adversos sobre o desempenho e a integridade da mucosa duodenal.(AU)

Evaluation of the supplementation of a feed additive as a potential protector against the adverse effects of 2.5 ppm T-2 toxin on growing broiler chickens / Avaliação da suplementação de um aditivo alimentar como um protetor potencial contra os efeitos adversos de 2.5 ppm de toxina T-2 em frangos em crescimento

A trial was conducted to evaluate a feed additive containing epoxidase activity from a bacterium (Mycofix-S) as a potential protection against the adverse effects of 2.5 ppm dietary T-2 toxin in male growing broiler chickens. A total of 144 one-day-old Ross 308 male chicks were individually wing-banded and allotted into each of the four experimental groups. Group 1: negative control, no T-2 toxin or additive; group 2: Mycofix-S, 2.5 g/kg; group 3: positive control, 2.5 ppm T-2 toxin; group 4: 2.5 ppm T-2 toxin + 2.5 g/kg Mycofix-S. Feed and water were provided ad libitum for 28 days (days 1 to 28 of age). Each experimental treatment was replicated 6 times, with 6 birds per replicate pen. Response variables included performance parameters, serum activity of alkaline phosphatase (ALP) and amylase, relative weight of selected organs and histology of the upper digestive system. T-2 toxin at 2.5 ppm significantly (P = 0.016) decreased the 28-day body weight gain and cumulative feed intake without affecting feed conversion. The feed additive counteracted these adverse effects. Serum enzyme activities were not significantly (P>0.05) affected for the four experimental groups but when data from the groups receiving T-2 toxin was pooled and compared against the pooled data from groups without the toxin a significant decrease in amylase activity was observed in chickens receiving T-2 toxin. The histological examination of the upper digestive system revealed lesions in mouth, esophagus, proventriculus, gizzard and duodenum in the chickens fed T-2 toxin without the additive. Chickens fed T-2 toxin plus the additive showed lesions in the same tissues except in the duodenum. The results of the present study show that the addition of 2.5 g/kg of the feed additive tested protects against adverse effects on performance and also the integrity of the duodenal mucosa.(AU)

Foi realizado um experimento com o objetivo de avaliar um aditivo alimentar contendo atividade de epoxidase de uma bactéria (Mycofix-S) como proteção potencial contra os efeitos adversos de uma dieta com 2,5ppm de toxina T-2 em frangos de corte machos. Um total de 144 pintos machos Ross 308 de um dia de idade foram marcados na asa individualmente e alocados em um de quatro grupos experimentais: grupo 1: controle negativo, sem toxina T-2 ou aditivo; grupo 2: 2,5g/kg de Mycofix-S; grupo 3: controle positivo, 2,5ppm de toxina T-2; grupo 4: 2,5ppm de toxina T-2 + 2,5g/kg de Mycofix-S. Alimento e água foram fornecidos ad libitum por 28 dias (dias um a 28 de idade). Cada tratamento experimental foi replicado seis vezes, com seis pintos por gaiola de replicação. As variáveis de resposta incluíram parâmetros de desempenho, atividade sérica de fosfatase alcalina (ALP) e amilase, peso relativo de órgãos selecionados e histologia do sistema digestivo superior. A toxina T-2 a 2,5ppm diminuiu significativamente (P = 0.016) o ganho de peso corporal aos 28 dias e o consumo de alimento acumulado, sem afetar a conversão alimentar. O aditivo diminuiu os efeitos adversos. As atividades séricas das enzimas não foram afetadas significativamente (P>0.05) nos quatro grupos experimentais, porém, quando os dados dos grupos que receberam a toxina T-2 foram combinados e comparados com o pool de dados dos grupos sem toxina, foi observado um decréscimo significativo da atividade de amilase nos frangos que receberam a toxina T-2. O exame histológico do sistema digestivo superior revelou lesões em boca, esôfago, pró-ventrículo, moela e duodeno nos frangos alimentados com toxina T-2 sem aditivo. Frangos alimentados com toxina T-2 mais aditivo mostraram lesões nos mesmos tecidos, exceto no duodeno. Os resultados do presente estudo mostram que a adição de 2,5g/kg do aditivo alimentar testado protege contra os efeitos adversos sobre o desempenho e a integridade da mucosa duodenal.(AU)

Glycogen-rich clear cell carcinoma of the feline mammary gland: case report / Carcinoma de células claras rico em glicogênio da glândula mamária felina: relato de caso

The aim of this report is to describe the first histopathological, immunohistochemical, and clinical characteristics of a feline glycogen-rich clear cell carcinoma (GRCCC). A Persian queen was admitted with mammary gland tumors and underwent radical unilateral mastectomy. Overall survival was considered 33 days and death was due to clinical evolution of the disease. Microscopic evaluation demonstrated epithelial cells arranged in a predominantly solid pattern, tumor cells presented an ample, granular, and foamy clear cytoplasm, and moderate cellular pleomorfism. The presence of cytoplasmatic glycogen was confirmed through diastase digestion followed by PAS staining. Histopathological and histochemical findings lead to the diagnosis of GRCCC with regional metastases.(AU)

O objetivo deste relato de caso é descrever as características clínicas, histopatológicas e imuno-histoquímicas do primeiro carcinoma mamário de células claras rico em glicogênio em felino. Uma gata persa foi atendida com tumores na glândula mamária e foi submetida à mastectomia radical unilateral. A sobrevida livre de doença foi considerada 33 dias, e o óbito foi devido à evolução da doença. A avaliação microscópica demonstrou células epiteliais arranjadas em um padrão predominantemente sólido, as células tumorais apresentaram um citoplasma claro, amplo, granular e espumoso e pleomorfismo celular moderado. A presença do glicogênio citoplasmático foi confirmada pela digestão pela diástase, seguida da coloração de PAS. Achados histopatológicos e histoquímicos levaram ao diagnóstico de carcinoma de células claras rico em glicogênio felino com metástase regional.(AU)

Glycogen-rich clear cell carcinoma of the feline mammary gland: case report / Carcinoma de células claras rico em glicogênio da glândula mamária felina: relato de caso

The aim of this report is to describe the first histopathological, immunohistochemical, and clinical characteristics of a feline glycogen-rich clear cell carcinoma (GRCCC). A Persian queen was admitted with mammary gland tumors and underwent radical unilateral mastectomy. Overall survival was considered 33 days and death was due to clinical evolution of the disease. Microscopic evaluation demonstrated epithelial cells arranged in a predominantly solid pattern, tumor cells presented an ample, granular, and foamy clear cytoplasm, and moderate cellular pleomorfism. The presence of cytoplasmatic glycogen was confirmed through diastase digestion followed by PAS staining. Histopathological and histochemical findings lead to the diagnosis of GRCCC with regional metastases.(AU)

O objetivo deste relato de caso é descrever as características clínicas, histopatológicas e imuno-histoquímicas do primeiro carcinoma mamário de células claras rico em glicogênio em felino. Uma gata persa foi atendida com tumores na glândula mamária e foi submetida à mastectomia radical unilateral. A sobrevida livre de doença foi considerada 33 dias, e o óbito foi devido à evolução da doença. A avaliação microscópica demonstrou células epiteliais arranjadas em um padrão predominantemente sólido, as células tumorais apresentaram um citoplasma claro, amplo, granular e espumoso e pleomorfismo celular moderado. A presença do glicogênio citoplasmático foi confirmada pela digestão pela diástase, seguida da coloração de PAS. Achados histopatológicos e histoquímicos levaram ao diagnóstico de carcinoma de células claras rico em glicogênio felino com metástase regional.(AU)

Suplementação de enzimas amilase, fitase e protease para codornas japonesas em postura / Supplementation of laying japanese quail with amylase, phytase and protease

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da suplementação das enzimas amilase, fitase e protease de formas isoladas e em associação, em dietas para codornas japonesas em postura. Foram utilizadas 300 codornas, distribuídas em um delineamento inteiramente ao acaso, com cinco tratamentos e seis repetições de dez aves por unidade experimental. Os tratamentos foram: uma dieta controle e dietas formuladas com a suplementação de 300 ppm de amilase, 300 ppm de protease e 500 FTU/kg de fitase e com a associação de enzimas. Nas fórmulas com inclusão de enzimas houve aplicação de redução na exigência nutricional de um ou mais dos seguintes componentes: proteína, aminoácidos digestíveis, energia, cálcio e fósforo, valorizando o uso das enzimas. As avaliações foram realizadas em quatro períodos de 21 dias cada. Foram avaliados desempenho (produção média de ovos, consumo de ração, peso médio dos ovos e conversão alimentar), qualidade dos ovos (proporção dos constituintes do ovo e peso específico dos ovos) e digestibilidade dos nutrientes da ração (coeficiente de metabolizabilidade aparente da matéria seca e da proteína bruta). Não houve efeito significativo dos tratamentos nas variáveis analisadas (P>0,05), indicando que as enzimas têm efeito benéfico, isoladamente ou em associação, mantendo o desempenho e qualidade dos ovos de codornas japonesas...

The objective of this study was to evaluate the effects of supplementation of diets for laying Japanese quail with amylase, phytase and protease alone or in combination. Three-hundred quail were assigned to a completely randomized design consisting of five treatments and six repetitions, with 10 animals per experimental unit. The treatments were: a control diet and diets supplemented with 300 ppm amylase, 300 ppm protease and 500 phytase units (FTU)/kg and the combination of these enzymes. In the diets containing the enzymes, the nutritional requirements of one or more of the following components were reduced: protein, digestible amino acids, energy, calcium and phosphorus, giving priority to the use of enzymes. The evaluations were performed over four periods of 21 days each. Performance (mean egg production, feed intake, mean egg weight, and feed conversion), egg quality (proportion of egg constituents and specific egg weight), and dietary nutrient digestibility (apparent digestibility coefficient of dry matter and crude protein) were evaluated. There was no significant effect of the treatments on the variables analyzed (P>0.05), indicating that the enzymes, alone or in combination, have beneficial effects, maintaining performance and egg quality of Japanese quail...

Suplementação de enzimas amilase, fitase e protease para codornas japonesas em postura / Supplementation of laying japanese quail with amylase, phytase and protease

O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da suplementação das enzimas amilase, fitase e protease de formas isoladas e em associação, em dietas para codornas japonesas em postura. Foram utilizadas 300 codornas, distribuídas em um delineamento inteiramente ao acaso, com cinco tratamentos e seis repetições de dez aves por unidade experimental. Os tratamentos foram: uma dieta controle e dietas formuladas com a suplementação de 300 ppm de amilase, 300 ppm de protease e 500 FTU/kg de fitase e com a associação de enzimas. Nas fórmulas com inclusão de enzimas houve aplicação de redução na exigência nutricional de um ou mais dos seguintes componentes: proteína, aminoácidos digestíveis, energia, cálcio e fósforo, valorizando o uso das enzimas. As avaliações foram realizadas em quatro períodos de 21 dias cada. Foram avaliados desempenho (produção média de ovos, consumo de ração, peso médio dos ovos e conversão alimentar), qualidade dos ovos (proporção dos constituintes do ovo e peso específico dos ovos) e digestibilidade dos nutrientes da ração (coeficiente de metabolizabilidade aparente da matéria seca e da proteína bruta). Não houve efeito significativo dos tratamentos nas variáveis analisadas (P>0,05), indicando que as enzimas têm efeito benéfico, isoladamente ou em associação, mantendo o desempenho e qualidade dos ovos de codornas japonesas...(AU)

The objective of this study was to evaluate the effects of supplementation of diets for laying Japanese quail with amylase, phytase and protease alone or in combination. Three-hundred quail were assigned to a completely randomized design consisting of five treatments and six repetitions, with 10 animals per experimental unit. The treatments were: a control diet and diets supplemented with 300 ppm amylase, 300 ppm protease and 500 phytase units (FTU)/kg and the combination of these enzymes. In the diets containing the enzymes, the nutritional requirements of one or more of the following components were reduced: protein, digestible amino acids, energy, calcium and phosphorus, giving priority to the use of enzymes. The evaluations were performed over four periods of 21 days each. Performance (mean egg production, feed intake, mean egg weight, and feed conversion), egg quality (proportion of egg constituents and specific egg weight), and dietary nutrient digestibility (apparent digestibility coefficient of dry matter and crude protein) were evaluated. There was no significant effect of the treatments on the variables analyzed (P>0.05), indicating that the enzymes, alone or in combination, have beneficial effects, maintaining performance and egg quality of Japanese quail...(AU)

Effect of enzymes addition on the total tract apparent digestibility of piglet diets / Efeito da adição de enzimas na digestibilidade total aparente de dietas para leitões desmamados

The experiment was realized to evaluate the effect of inclusion of amylase and protease alone or in combination on digestibility of piglets diets contend hard-endosperm corn. Sixteen castrated piglets weaned at 25 days were individually penned in metabolic crates and distributed in four diets using a balanced two period changeover design. The experimental diets were isonutritive and supplemented with 0.06% of amylase and 0.012% of protease alone or in combination. The results showed the amylase or protease alone or in combinations had no influence (P>0.05) on coefficients of digestibility in none of the two periods studied. The average of coefficients of digestibility were 87.9, 88.2, 85.3, 77.7, 97.3, and 90.9% to dry matter, organic matter, crude protein, ash, starch and gross energy, respectively. In conclusion, addition of amylase and protease alone or in combination have no influence on digestibility of piglets diets contend hard-endosperm corn.(AU)

O estudo foi realizado com o objetivo de avaliar o efeito de amilase e protease, adicionadas de forma individual ou combinadas (amilase + protease) sobre a digestibilidade de nutrientes em dietas para leitões contendo milho duro. Dezesseis leitões machos castrados e desmamados aos 25 dias foram alojados individualmente em gaiolas de metabolismo. Os animais foram distribuídos em quatro dietas por meio de delineamento change over balanceado com dois períodos. As dietas foram isonutritivas e diferiram apenas na adição de enzimas: 1) sem enzimas; 2) 0,06% de amilase; 3) 0,012% de protease; e 4) 0,06% de amilase e 0,012% de protease. Não foram observados efeitos (P>0,05) da adição individual ou combinada de amilase e protease nos coeficientes de digestibilidade (CD) dos nutrientes avaliados. Os CD médios foram de 87,9, 88,2, 85,3, 77,7, 97,3 e 90,9%, para a matéria seca, matéria orgânica, proteína bruta, matéria mineral, amido e energia bruta, respectivamente. Conclui-se que a adição de amilase e protease, individual ou combinada, não influencia a digestibilidade dos nutrientes de dietas para leitões contendo milho duro.(AU)

Concomitant production of detergent compatible enzymes by Bacillus flexus XJU-1

A soil screened Bacillus flexus XJU-1 was induced to simultaneously produce alkaline amylase, alkaline lipase and alkaline protease at their optimum levels on a common medium under submerged fermentation. The basal cultivation medium consisted of 0.5% casein, 0.5% starch and 0.5% cottonseedoil as an inducer forprotease, amylase, and lipase, respectively. The casein also served as nitrogen source for all 3 enzymes. The starch was also found to act as carbon source additive for both lipase and protease. Maximum enzyme production occurred on fermentation medium with 1.5% casein, 1.5% soluble starch, 2% cottonseed oil, 2% inoculum size, initial pH of 11.0, incubation temperature of 37 °C and 1% soybean meal as a nitrogen source supplement. The analysis of time course study showed that 24 h was optimum incubation time for amylase whereas 48 h was the best time for both lipase and protease. After optimization, a 3.36-, 18.64-, and 27.33-fold increase in protease, amylase and lipase, respectively was recorded. The lipase was produced in higher amounts (37.72 U/mL) than amylase and protease about 1.27 and 5.85 times, respectively. As the 3 enzymes are used in detergent formulations, the bacterium can be commercially exploited to secrete the alkaline enzymes for use in detergent industry. This is the first report for concomitant production of 3 alkaline enzymes by a bacterium.

Biochemical values of red-tailed boa (Boa constrictor) / Valores bioquímicos de jiboia (Boa constrictor)

It was determined the average values of the following blood biochemical indicators of boas (Boa constrictor): glucose, urea, creatinine, aspartate aminotransferase (AST), alanine transaminase (ALT), amylase and lipase, and compared the results obtained concerning sex. A total of 12 Boa constrictor specimens were used, seven males and five females. The average of the biochemical indicators between males and females had no significant difference. The traditional biochemical techniques have been useful to determine these indicators to this species(AU)

Foram determinados os valores médios dos indicadores bioquímicos sanguíneos: glicose, ureia, creatinina, aspartato aminotransferase (AST), alanina aminotransferase (ALT), amilase e lipase de jiboias (Boa constrictor) e comparados os valores das concentrações encontradas entre os grupos de machos e fêmeas. Foram utilizados 12 espécimes de Boa constrictor, dos quais sete machos e cinco fêmeas. A comparação das médias dos indicadores bioquímicos entre os grupos de machos e fêmeas indicou ausência de influência significativa de fatores sexuais. As técnicas bioquímicas tradicionais foram adequadas para a determinação desses indicadores para esta espécie(AU)