Babesia bovis in large ruminants in Pakistan - molecular detection and haemato-biochemical alterations

Background: Babesiosis is endemic in Pakistan and is one of the most important bovine diseases that causes huge economic losses and high mortality in young animals. A hematobiochemical study was conducted to unveil the difference between diseased and healthy animals in selected districts i.e., Faisalabad (31° 25' 7.3740'' N and 73° 4' 44.7924'' E), Toba Tek Singh (30° 58' 9.7392'' N and 72° 27' 40.7484'' E) and Jhang (31° 16' 40.9656'' N and 72° 18' 42.3360'' E) of Punjab, Pakistan. Materials, Methods & Results: A total of 518 (Cattle = 360, Buffalo = 158) blood samples were collected. The samples were analyzed by polymerase chain reaction (PCR) targeting apocytochrome b-gene (Babesia bovis-gene) (CYTb) followed by haemato-biochemical analysis. Chi-square test for univariate analysis was used to analyze the data. In summer the PCR-based prevalence was 29.4 (53/180) and 24.05% (19/79) in cows and buffaloes, respectively. On the other hand, in winter results showed that 12.7 (23/180), 13.92 % (11/79) samples positive for Babesia genus from cows and buffaloes, respectively. The positive samples were further investigated for hematological and biochemical analysis. The results revealed that, the mean value of hematological parameters like RBCs, Hb, PCV, MCV and MCHC was significantly (P < 0.05) decreased in infected animals (cows and buffaloes) as compared to the non-infected ones. While the biochemical parameters like Alanine aminotransferase (ALT), Aspartate aminotransferase (AST), cholesterol and Lactate dehydrogenase were significantly (P < 0.05) increased in infected animals as compared to healthy animals. This study is the first molecular and hematobiochemical evidence of Babesia bovis in dairy herds of Punjab province, Pakistan. Discussion: Bovine babesiosis is one of the important tick-borne diseases (TBD) affecting dairy industry. In bovines, among 3 Babesia species that cause the disease B. bovis is more pathogenic with high mortality and morbidity. Pakistan is situated in tropical and sub-tropical region where the humidity is high in some part of countries. This high humidity mostly favors the reproduction of the ticks thus higher prevalence of TBDs in this region. Initially the babesiosis was diagnosed by light microscopy using thin blood smear stained with Giemsa stain. Many studies verified that PCR is a more specific and sensitive tool than conventional techniques for the detection of carrier / asymptomatic ruminants. The haemato-biochemical profile is another valuable footprint to track the disease. Keeping in view the above-mentioned fact the present project has been planned to evaluate the haemato-biochemical alteration between health and Babesia infected cattle along with the molecular detection of Babesia species involved in bovine babesiosis. The mean values of haematobiochemical parameters in clinically ill and healthy animals revealed that the mean values of hematological parameters like RBCs, Hb, PCV, and HCT were significantly decreased in diseased animals as compared to the healthy ones. All these might be due the fact that the parasite is intra-erythrocytic in nature and destruction of red blood cells results in significant (P < 0.05) decrease level of all the hematological parameters. The mean value of ALT in babesiosis infected cattle was significantly higher as compared to healthy cattle. The mean values of AST and LDH in babesiosis infected cows was significantly higher as compared to that in healthy cows. The elevation in liver enzymes in babesiosis may be due to the hepatic damage and lesions induced by the parasite during its multiplication in the blood followed by disturbed liver function. These enzymes are present in high concentrations in the muscles and liver. High level of these enzymes in the blood is indicator of organ necrosis or damage.

Genetic diversity of Babesia bovis studied longitudinally under natural transmission conditions in calves in the state of Rio de Janeiro, Brazil / Diversidade genética de Babesia bovis estudada longitudinalmente em condições de transmissão natural entre bezerros no estado do Rio de Janeiro, Brasil

Serum and DNA samples from 15 naturally infected calves in Seropédica, Brazil, were obtained quarterly from birth to 12 months of age, in order to longitudinally evaluate their humoral immune response against Babesia bovis and the merozoite surface antigen diversity of B. bovis. Anti-B. bovis IgG antibodies were detected by an indirect fluorescent antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Using DNA amplification, sequencing and phylogenetic analysis, the genetic diversity of B. bovis was assessed based on the genes that encode merozoite surface antigens (MSA-1, MSA-2b and MSA-2c). The serological results demonstrated that up to six months of age, all the calves developed active immunity against B. bovis. Among the 75 DNA samples evaluated, 0, 3 and 5 sequences of the msa-1, msa-2b and msa-2c genes were obtained, respectively. The present study demonstrated that the msa-2b and msa-2c gene sequences amplified from blood DNA of B. bovis-positive calves were genetically diversified. These data emphasize the importance of conducting deeper studies on the genetic diversity of B. bovis in Brazil, in order to design diagnostic antigens and vaccines in the future.(AU)

Para avaliar longitudinalmente a resposta imune humoral anti-B. bovis e a diversidade genética de antígenos de superfície de merozoítos de B. bovis, entre bezerros naturalmente infectados em Seropédica, Brasil, amostras de soro e DNA de 15 bezerros foram obtidas trimestralmente, desde o nascimento até 12 meses de idade. Anticorpos IgG para B. bovis foram detectados pelos testes de Imunofluorescência Indireta e Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto. Usando-se amplificação de DNA, sequenciamento e análises filogenéticas, a diversidade genética de B. bovis, com base nos genes que codificam antígenos de superfície de merozoítos (MSA-1, MSA-2b e MSA-2c) foi investigada. Os resultados da sorologia demonstraram que, até os seis meses de idade, todos os bezerros desenvolveram imunidade ativa contra B. bovis. Entre as 75 amostras de DNA avaliadas, foram obtidas 0, 3 e 5 sequências dos genes msa-1, msa-2b e msa-2c. O presente estudo demonstrou que sequências dos genes msa-2b e msa-2c amplificadas a partir de amostras de sangue positivas para B. bovis de bezerros de Seropédica, foram geneticamente distintas. O presente trabalho realça a importância de se realizar estudos aprofundados sobre a diversidade genética de B. bovis no Brasil, objetivando o desenvolvimento de antígenos para o diagnóstico e vacinas no futuro.(AU)

Caracterização histoquímica no diagnóstico da babesiose bovina por Babesia bovis / Histochemical characterization in the diagnosis of bovine babesiosis by Babesia bovis

A babesiose é uma doença hemolítica transmitida por carrapatos e causada por protozoários intraeritrocitários do gênero Babesia. Esta é uma doença de incidência elevada na Região Sul do Brasil e responsável por perdas econômicas consideráveis. O diagnóstico clínico-patológico pode ser feito através da demonstração do parasito pelo exame de esfregaços sanguíneos ou de tecidos frescos. Entretanto, com frequência, somente órgãos fixados em formol são remetidos para laboratórios de patologia, o que impossibilita a realização do esfregaço. O principal objetivo deste estudo foi encontrar técnicas histoquímicas alternativas e capazes de aprimorar a evidenciação de Babesia bovis intraeritrocitária em tecidos fixados em formol. Para este estudo, foram analisadas retrospectivamente amostras de tecidos de 50 casos de necropsias de bovinos, as quais haviam sido fixadas em formol e processadas rotineiramente para histopatologia. Os casos foram divididos em um grupo controle, constituído por 12 casos de babesiose cerebral com substância cinzenta encefálica róseo-cereja característica (grupo A), e 38 casos sugestivos de tristeza parasitária bovina (grupo B), conforme os protocolos de necropsias. Foram testadas as técnicas histoquímicas de Azul Alciano, Azul de Metileno, Azul de Toluidina, Giemsa, Gram (método de McCallum-Goodpasture), Grocott, Ácido Periódico de Schiff e Ziehl-Neelsen. Dentre estas, observou-se que as técnicas de Azul de Metileno e Azul de Toluidina permitiram observar características morfológicas e tintoriais de maneira mais nítida, auxiliando na identificação de B. bovis. Adicionalmente, foram estabelecidos vários parâmetros clínico-epidemiológicos e anatomopatológicos da babesiose por B. bovis.(AU)

Babesiosis is a hemolytic tick-borne disease caused by intraerythrocytic protozoal parasites of the genus Babesia. This is a disease of high incidence in the southern Brazil and responsible for considerable economic losses. Clinical-pathological diagnosis can be made by demonstrating the parasite by examining blood smears or fresh tissues. However, frequently, only formalin-fixed organs are sent to pathology laboratories, which makes it impossible to perform the smears. The main objective of this study was to find alternative histochemical techniques capable to improve the identification of intraerythrocytic Babesia bovis in histological sections. For this study, tissue samples from 50 bovine necropsy cases were retrospectively analyzed, which had been fixed in formalin and routinely processed for histopathology. The cases were divided into a control group, consisting of 12 cases of cerebral babesiosis with characteristic pink-cherry gray matter (group A), and 38 cases suggestive of cattle tick fever (group B), according to necropsy protocols. Histochemical techniques of Alcian Blue, Methylene Blue, Toluidine Blue, Giemsa, Gram (McCallum-Goodpasture method), Grocott, Periodic Acid of Schiff and Ziehl-Neelsen were tested. Among these, it was observed that the techniques of Methylene Blue and Toluidine Blue allowed to observe morphological and dye characteristics in a clearer way, aiding in the identification of B. bovis. In addition, several clinical-epidemiological and anatomopathological parameters of babesiosis caused by B. bovis were established.(AU)

Caracterização histoquímica no diagnóstico da babesiose bovina por Babesia bovis / Histochemical characterization in the diagnosis of bovine babesiosis by Babesia bovis

A babesiose é uma doença hemolítica transmitida por carrapatos e causada por protozoários intraeritrocitários do gênero Babesia. Esta é uma doença de incidência elevada na Região Sul do Brasil e responsável por perdas econômicas consideráveis. O diagnóstico clínico-patológico pode ser feito através da demonstração do parasito pelo exame de esfregaços sanguíneos ou de tecidos frescos. Entretanto, com frequência, somente órgãos fixados em formol são remetidos para laboratórios de patologia, o que impossibilita a realização do esfregaço. O principal objetivo deste estudo foi encontrar técnicas histoquímicas alternativas e capazes de aprimorar a evidenciação de Babesia bovis intraeritrocitária em tecidos fixados em formol. Para este estudo, foram analisadas retrospectivamente amostras de tecidos de 50 casos de necropsias de bovinos, as quais haviam sido fixadas em formol e processadas rotineiramente para histopatologia. Os casos foram divididos em um grupo controle, constituído por 12 casos de babesiose cerebral com substância cinzenta encefálica róseo-cereja característica (grupo A), e 38 casos sugestivos de tristeza parasitária bovina (grupo B), conforme os protocolos de necropsias. Foram testadas as técnicas histoquímicas de Azul Alciano, Azul de Metileno, Azul de Toluidina, Giemsa, Gram (método de McCallum-Goodpasture), Grocott, Ácido Periódico de Schiff e Ziehl-Neelsen. Dentre estas, observou-se que as técnicas de Azul de Metileno e Azul de Toluidina permitiram observar características morfológicas e tintoriais de maneira mais nítida, auxiliando na identificação de B. bovis. Adicionalmente, foram estabelecidos vários parâmetros clínico-epidemiológicos e anatomopatológicos da babesiose por B. bovis.(AU)

Babesiosis is a hemolytic tick-borne disease caused by intraerythrocytic protozoal parasites of the genus Babesia. This is a disease of high incidence in the southern Brazil and responsible for considerable economic losses. Clinical-pathological diagnosis can be made by demonstrating the parasite by examining blood smears or fresh tissues. However, frequently, only formalin-fixed organs are sent to pathology laboratories, which makes it impossible to perform the smears. The main objective of this study was to find alternative histochemical techniques capable to improve the identification of intraerythrocytic Babesia bovis in histological sections. For this study, tissue samples from 50 bovine necropsy cases were retrospectively analyzed, which had been fixed in formalin and routinely processed for histopathology. The cases were divided into a control group, consisting of 12 cases of cerebral babesiosis with characteristic pink-cherry gray matter (group A), and 38 cases suggestive of cattle tick fever (group B), according to necropsy protocols. Histochemical techniques of Alcian Blue, Methylene Blue, Toluidine Blue, Giemsa, Gram (McCallum-Goodpasture method), Grocott, Periodic Acid of Schiff and Ziehl-Neelsen were tested. Among these, it was observed that the techniques of Methylene Blue and Toluidine Blue allowed to observe morphological and dye characteristics in a clearer way, aiding in the identification of B. bovis. In addition, several clinical-epidemiological and anatomopathological parameters of babesiosis caused by B. bovis were established.(AU)

Dynamics of natural infection by Babesia bovis and Babesia bigemina in dairy cattle from an enzootic instability area in Northeastern Brazil

This study aimed to determine the dynamics of natural infection in the transmission of Babesia spp. to cattle in an enzootic instability area in Northeastern Brazil. Blood samples were collected from 30 calves located on two dairy farms to determine the packed cell volume (PCV) and the timing of the primo-infection using polymerase chain reaction (PCR) and their association with climatic factors and management practices. On Farm A, the determination of primo-infection was observed on average at 249.4 (±24.42) days of age for B. bigemina and at 252.6 (±17.07) days of age for B. bovis; there was no significant difference between the times of infection (P> 0.05). The infection coincided with a period of high rainfall in the region. On Farm B, primo-infection infection was not observed. There was no infection by Babesia spp. on Farm B due to the intensive use of acaricides that led to an absence of ticks. There was no significant difference between the average PCV of animals from Farms A and B (P> 0.05). The management practices on the properties, in addition to the weather conditions influenced the exposure of the animals to disease vectors and may have contributed to the maintenance of this enzootic area in Northeastern Brazil.(AU)

Este estudo teve como objetivo determinar a dinâmica da infecção natural na transmissão de Babesia spp. em bovinos de uma área de instabilidade enzoótica no Nordeste do Brasil. Foram coletadas amostras de sangue de 30 bezerras, proveniente de duas propriedades leiteiras para determinação do volume globular e da primo-infecção por meio da reação em cadeia da polimerase associando aos fatores climáticos e medidas de manejo. Na fazenda A, o período médio da primo-infecção para B. bigemina, determinado por meio da PCR, foi de 249,4 (±24,42) dias de idade, enquanto que para B. bovis foi aos 252,6 (±17,07) dias de idade, não existindo diferença estatística. A infecção coincidiu com o período de alta precipitação pluviométrica na região. Não houve infecção por Babesia spp. na fazenda B, na qual o uso intensivo de acaricidas determinou ausência de carrapatos. Não houve diferença significativa entre médias de VG dos animais das fazendas A e B. O manejo adotado nas fazendas estudadas, associado às condições climáticas, interferem na exposição dos animais aos vetores, podendo favorecer a manutenção de uma área de instabilidade enzoótica no Nordeste do Brasil.(AU)

Babesiose cerebral em bezerros / Cerebral babesiosis in calves

Babesiose cerebral é uma enfermidade causada pelo protozoário Babesia bovis. O agente faz parte do complexo Tristeza Parasitária Bovina, uma das mais importantes doenças parasitárias em bovinos. O presente estudo relata um surto causado por B. bovis em vinte bezerros de aproximadamente 7 a 25 dias de idade. O surto ocorreu entre março e junho de 2015, na região sul do Brasil, área de instabilidade enzoótica para a Tristeza Parasitária Bovina. O diagnóstico foi realizado pela epidemiologia, lesões macroscópicas e pela presença de numerosas formas parasitárias de Babesia bovis em capilares encefálicos, observados em imprints corados por Giemsa. Surtos de babesiose por B. bovis cerebral nos primeiros dias de vida de bezerros é incomum, porém não pode ser desconsiderada em surtos com alta letalidade em áreas de instabilidade enzoótica.(AU)

Cerebral babesiosis is a protozoan disease caused by Babesia bovis. This parasite belongs to the bovine parasitic complex of tick-borne diseases that affect livestock worldwide. The present study reports an outbreak caused by B. bovis affected twenty 7-25 day-old calves. Outbreak occurred from May to July 2015 in the south of Brazil, where there is an area of enzootic instability for cattle tick fever. The macroscopic lesions were anemia, hemoglobinuria, splenomegaly, hepatomegaly, yellow liver and cherry-pink discoloration of cerebral and cerebellar cortex. The diagnosis was based on epidemiology, necropsy and microscopic findings in the brain that showed B. bovis in the capillary vessels of the brain in imprints stained by Giemsa. Cases of cerebral babesiosis by Babesia bovis in such young calves are uncommon but should be considered as a diagnosis possibility when there is high mortality rate in areas ofen zootic instability.(AU)

Babesiose cerebral em bezerros / Cerebral babesiosis in calves

Babesiose cerebral é uma enfermidade causada pelo protozoário Babesia bovis. O agente faz parte do complexo Tristeza Parasitária Bovina, uma das mais importantes doenças parasitárias em bovinos. O presente estudo relata um surto causado por B. bovis em vinte bezerros de aproximadamente 7 a 25 dias de idade. O surto ocorreu entre março e junho de 2015, na região sul do Brasil, área de instabilidade enzoótica para a Tristeza Parasitária Bovina. O diagnóstico foi realizado pela epidemiologia, lesões macroscópicas e pela presença de numerosas formas parasitárias de Babesia bovis em capilares encefálicos, observados em imprints corados por Giemsa. Surtos de babesiose por B. bovis cerebral nos primeiros dias de vida de bezerros é incomum, porém não pode ser desconsiderada em surtos com alta letalidade em áreas de instabilidade enzoótica.(AU)

Cerebral babesiosis is a protozoan disease caused by Babesia bovis. This parasite belongs to the bovine parasitic complex of tick-borne diseases that affect livestock worldwide. The present study reports an outbreak caused by B. bovis affected twenty 7-25 day-old calves. Outbreak occurred from May to July 2015 in the south of Brazil, where there is an area of enzootic instability for cattle tick fever. The macroscopic lesions were anemia, hemoglobinuria, splenomegaly, hepatomegaly, yellow liver and cherry-pink discoloration of cerebral and cerebellar cortex. The diagnosis was based on epidemiology, necropsy and microscopic findings in the brain that showed B. bovis in the capillary vessels of the brain in imprints stained by Giemsa. Cases of cerebral babesiosis by Babesia bovis in such young calves are uncommon but should be considered as a diagnosis possibility when there is high mortality rate in areas ofen zootic instability.(AU)

Longitudinal evaluation of humoral immune response and merozoite surface antigen diversity in calves naturally infected with Babesia bovis, in São Paulo, Brazil / Avaliação longitudinal da resposta immune humoral e diversidade de antígenos de superfície de merozoítos em bezerros naturalmente infectados com Babesia bovis, em São Paulo, Brasil

Babesiosis is an economically important infectious disease affecting cattle worldwide. In order to longitudinally evaluate the humoral immune response against Babesia bovis and the merozoite surface antigen diversity of B. bovis among naturally infected calves in Taiaçu, Brazil, serum and DNA samples from 15 calves were obtained quarterly, from their birth to 12 months of age. Anti-B. bovis IgG antibodies were detected by means of the indirect fluorescent antibody test (IFAT) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The polymerase chain reaction (PCR) was used to investigate the genetic diversity of B. bovis, based on the genes that encode merozoite surface antigens (MSA-1, MSA-2b and MSA-2c). The serological results demonstrated that up to six months of age, all the calves developed active immunity against B. bovis. Among the 75 DNA samples evaluated, 2, 4 and 5 sequences of the genes msa-1, msa-2b and msa-2c were obtained. The present study demonstrated that the msa-1 and msa-2b genes sequences amplified from blood DNA of calves positive to B. bovis from Taiaçu were genetically distinct, and that msa-2c was conserved. All animals were serologically positive to ELISA and IFAT, which used full repertoire of parasite antigens in despite of the genetic diversity of MSAs.(AU)

A babesiose é uma doença infecciosa economicamente importante que afeta o gado bovino em todo o mundo. Para avaliar longitudinalmente a resposta imune humoral contra B. bovis e a diversidade genética de antígenos de superfície de merozoítos de B. bovis, entre bezerros naturalmente infectados em Taiaçu, Brasil, amostras de soro e DNA de 15 bezerros, foram obtidos trimestralmente, desde o nascimento até aos 12 meses de idade. Os anticorpos IgG para B. bovis foram detectados pelos testes de Imunofluorescência Indireta e Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto. A Reação em Cadeia da Polimerase foi utilizada para investigar a diversidade genética de B. bovis, com base em genes que codificam antígenos de superfície de merozoítos (MSA-1, MSA-2b e MSA-2c). Os resultados da sorologia demonstraram que até seis meses de idade todos os bezerros desenvolveram imunidade ativa contra B. bovis. Entre as 75 amostras de DNA avaliadas, foram obtidas 2, 4 e 5 sequências dos genes msa-1, msa-2b e msa-2c. O presente trabalho demonstrou que as sequências dos genes msa-1 e msa-2b amplificadas do DNA do sangue de amostras positivas a B. bovis de bezerros de Taiaçu foram geneticamente distintas, e msa-2c conservadas. Todos os animais foram soropositivos ao ELISA e ao IFAT, os quais utilizaram o repertório completo de antígenos parasitários, apesar da diversidade genética dos MSAs.(AU)

Soroprevalência de Trypanosoma vivax, Anaplasma marginale e Babesia bovis em rebanhos leiteiros / Seroprevalence of Trypanosoma vivax, Anaplasma marginale, and Babesia bovis in dairy cattle

In order to determine the prevalence of IgG against Trypanosoma vivax, Anaplasma marginale, and Babesia bovis in dairy cattle in southern Minas Gerais, four hundred cows from 40 dairy farms  were randomly selected and distributed in 14 municipalities. Seroprevalence was determined by indirect immunofluorescence assay (IFA). Interviews were conducted to characterize producers and dairy production. Univariate analysis was carried out using chi-square (x2) or Fishers exact test. The multiple model was constructed with variables associated with p 0.25 by x2 test using generalized estimating equations (GEE). True prevalence at herd level was 49.6% (31.767.5), 100% (92.1100), and 100% (86.5100) for T. vivax, A. marginale, and B. bovis, respectively. At individual level, true seroprevalence was 9.9% (6.713.1), 96.2% (92.199.6), and 93.7% (89.497.2), respectively, for T. vivax, A. marginale, and B. bovis. Among the factors adjusted by logistic regression GEE  model, total farm area (p= 0.021, OR= 0.308, Ic95%= 0.1140.836) and fly season (p= 0.016, OR= 2.133, Ic95%= 1.1533.948) remained associated with seropositivity for T. vivax. As the State of Minas Gerais is considered non-endemic for T. vivax, producers and veterinarians should be informed about the risk of occurrence of bovine trypanosomiasis.

Com o objetivo de determinar a prevalência de anticorpos IgG anti-Trypanosoma vivax, Anaplasma marginale e Babesia bovis em bovinos leiteiros no Sul de Minas Gerais, quatrocentas fêmeas bovinas adultas provenientes de 40 propriedades leiteiras foram selecionadas aleatoriamente e distribuídas por 14 municípios localizados na região Sul de Minas Gerais. A soroprevalência foi determinada pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Foram realizadas entrevistas para caracterizar os produtores e a produção leiteira. As análises estatísticas foram realizadas no software PASW 18. Foi realizada análise univariada pelo Qui-quadrado (x2 ) ou Teste Exato de Fisher. Com as variáveis associadas com p 0,25 pelo teste x2 construiu-se o modelo múltiplo por meio de Equações de Estimação Generalizadas (GEE). A soroprevalência verdadeira em nível de rebanho foi 49,6% (31,7 67,5), 100% (92,1100) e 100% (86,5100) para T. vivax, A. marginale e B. bovis, respectivamente. Em nível individual, a soroprevalência verdadeira foi 9,9% (6,713,1), 96,2% (92,199,6) e 93,7% (89,497,2), respectivamente, para T. vivax, A. marginale e B. bovis. Dentre os fatores ajustados pelo modelo de regressão logística GEE, as variáveis área total da fazenda (p= 0,021; OR= 0,308; IC95%= 0,114 0,836) e época com maior número de moscas (p= 0,016; OR= 2,133; IC95%= 1,153 3,948) se mantiveram associadas à soropositividade para T. vivax. Devido ao fato de o Estado e Minas Gerais ser considerado área não endêmica para a T. vivax, é importante que produtores eveterinários sejam informados quanto ao risco de ocorrência da tripanossomíase bovina.

Soroprevalência de Trypanosoma vivax, Anaplasma marginale e Babesia bovis em rebanhos leiteiros / Seroprevalence of Trypanosoma vivax, Anaplasma marginale, and Babesia bovis in dairy cattle

In order to determine the prevalence of IgG against Trypanosoma vivax, Anaplasma marginale, and Babesia bovis in dairy cattle in southern Minas Gerais, four hundred cows from 40 dairy farms  were randomly selected and distributed in 14 municipalities. Seroprevalence was determined by indirect immunofluorescence assay (IFA). Interviews were conducted to characterize producers and dairy production. Univariate analysis was carried out using chi-square (x2) or Fishers exact test. The multiple model was constructed with variables associated with p 0.25 by x2 test using generalized estimating equations (GEE). True prevalence at herd level was 49.6% (31.767.5), 100% (92.1100), and 100% (86.5100) for T. vivax, A. marginale, and B. bovis, respectively. At individual level, true seroprevalence was 9.9% (6.713.1), 96.2% (92.199.6), and 93.7% (89.497.2), respectively, for T. vivax, A. marginale, and B. bovis. Among the factors adjusted by logistic regression GEE  model, total farm area (p= 0.021, OR= 0.308, Ic95%= 0.1140.836) and fly season (p= 0.016, OR= 2.133, Ic95%= 1.1533.948) remained associated with seropositivity for T. vivax. As the State of Minas Gerais is considered non-endemic for T. vivax, producers and veterinarians should be informed about the risk of occurrence of bovine trypanosomiasis.(AU)

Com o objetivo de determinar a prevalência de anticorpos IgG anti-Trypanosoma vivax, Anaplasma marginale e Babesia bovis em bovinos leiteiros no Sul de Minas Gerais, quatrocentas fêmeas bovinas adultas provenientes de 40 propriedades leiteiras foram selecionadas aleatoriamente e distribuídas por 14 municípios localizados na região Sul de Minas Gerais. A soroprevalência foi determinada pela reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Foram realizadas entrevistas para caracterizar os produtores e a produção leiteira. As análises estatísticas foram realizadas no software PASW 18. Foi realizada análise univariada pelo Qui-quadrado (x2 ) ou Teste Exato de Fisher. Com as variáveis associadas com p 0,25 pelo teste x2 construiu-se o modelo múltiplo por meio de Equações de Estimação Generalizadas (GEE). A soroprevalência verdadeira em nível de rebanho foi 49,6% (31,7 67,5), 100% (92,1100) e 100% (86,5100) para T. vivax, A. marginale e B. bovis, respectivamente. Em nível individual, a soroprevalência verdadeira foi 9,9% (6,713,1), 96,2% (92,199,6) e 93,7% (89,497,2), respectivamente, para T. vivax, A. marginale e B. bovis. Dentre os fatores ajustados pelo modelo de regressão logística GEE, as variáveis área total da fazenda (p= 0,021; OR= 0,308; IC95%= 0,114 0,836) e época com maior número de moscas (p= 0,016; OR= 2,133; IC95%= 1,153 3,948) se mantiveram associadas à soropositividade para T. vivax. Devido ao fato de o Estado e Minas Gerais ser considerado área não endêmica para a T. vivax, é importante que produtores eveterinários sejam informados quanto ao risco de ocorrência da tripanossomíase bovina.(AU)

Babesiose bovina associada à endocardite vegetativa: relato de caso / Babesiosis associated vegetative endocarditis: Case Report

A babesiose bovina é uma hemoparasitose provocada por um protozoário Babesia spp. que causa diversos sinais clínicos, entre eles a redução no ganho de peso, o aborto, a anemia intensa, a febre e hemoglobinúria, sendo responsável por altos indices de morbidade e letalidade, de acordo com a categoria animal acometida, trazendo grandes perdas econômicas relacionadas aos custos com tratamentos nos rebanhos acometidos. O presente trabalho tem objetivo relacionar casos de babesiose bovina aos achados de necropsia de endocardite vegetativa na tricuspide. Entre os meses de outubro de 2015 e julho de 2016, 14 animais apresentaram sinais clínicos da doença, destes, quatro vieram a óbito. As 11 vacas adultas apresentaram redução na produção de leite, redução do apetite, emagrecimento, febre, anemia, variação no volume globular de 15% a 28%, além de alta infestação por carrapatos. Os animais enfermos foram tratados com dipropionato de imidocarb na dose única de 4mg/kg. A uma das vacas ainda foi fornecido o tratamento de suporte com fluidoterapia, vitamina B12, transfusão sanguínea e transfaunação, no entanto, não houve resposta ao tratamento. Este animal apresentou uma piora gradativa no estado geral, diarreia, não se mantinha em estação, mesmo com auxílio, vindo a óbito dois dias após a terapia de suporte. Dos pacientes que vieram a óbito, foi realizada a necropsia de três animais (A, B e C), nos quais foi possível observar entre os achados: anemia na carcaça e hepatoesplenomegalia. Na vaca A, além desses achados havia áreas de hemorragia na serosa do abomaso e no pericardio. Na vaca B observou-se efusão peritoneal (ascite), áreas hemorrágicas na serosa do rúmen, cardiomegalia, efusão pleural e degeneração gelatinosa das gorduras. Nas vacas A e B foi observado proliferação de tecido vegetativo na válvula da tricuspide, com tamanho de aproximadamente 7x5 centimetros, com superficie enrugada e margens irregulares em forma de couve flor e coloração esbranquiçada, caracterizando a endocardite. O diagnóstico de babesiose foi realizado a partir dos sinais clinicos, de dados hematológicos, dos achados de necropsia e do esfregaço sanguíneo onde foi encontrada a variedade Babesia bigemina. Os achados patológicos foram essenciais para o diagnóstico da endocardite, pois este é considerado o teste ouro para tal enfermidade. Nos bovinos a válvula tricuspide geralmente é a mais acometida, sendo característico da endocardite a proliferação de tecido nessa válvula. Sabe-se que a endocardite é a principal doença do endocárdio de bovinos, estando constantemente associada a infecções nos cascos, glândulas mamária, metrite, retículo pericardite, ou outras enfermidades que possam levar a uma bacteremia crônica, e, ocasionalmente, afecções parasitárias. Existem sinais clínicos da babesiose que são comuns a endocardite, como a febre intermitente, a taquicardia, dispneia e sopro cardíaco. No entanto, nem sempre os animais acometidos pela endocardite apresentam um quadro de falhas cardíacas, manifestando-os nos casos mais severos e avançados. Acredita-se que a via hematógena seja a principal forma de disseminação de bactérias que causam a endocardite nos bovinos, sendo a Trueperella (Archanobacterium) pyogenes e o Streptococcus sp., os principais microrganismos responsáveis pela enfermidade. A debilidade extrema dos animais pode ter causado um quadro de imunossupressão nos animais mortos na propriedade, possibilitando a bacteremia e então a lesão valvular dos animais. Todavía, mais estudos precisam ser realizados para determinar se há uma relação entre babesiose e a endocardite, assim como outros fatores predisponentes.

Serological detection of Anaplasma marginale, Babesia bovis and Babesia bigemina in beef cattle of the northern and central-western regions of Brazil / Detecção sorológica de Anaplasma marginale, Babesia bovis e Babesia bigemina em bovinos de corte das regiões Norte e Centro-Oeste do Brasil

The objective of this study was to assess the occurrence of antibodies against Anaplasma marginale, Babesia bovis and Babesia bigemina in beef cattle of the northern and central-western regions of Brazil. A total of 1703 blood samples were collected from cattle from 100 farms distributed among 37 municipalities in the states of Mato Grosso, Pará and Tocantins. The search for antibodies was conducted using an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and antibodies were observed for B. bovis, B. bigemina and A. marginale in cattle from Mato Grosso, Tocantins and Pará at rates of 99%, 90% and 41%; 99%, 70% and 52%; and 97%, 97% and 75%, respectively. The results show that the analyzed regions exhibit enzootic stability for infection with B. bovis and B. bigemina, whereas the same result was not observed with A. marginale.(AU)

O objetivo deste estudo foi verificar a ocorrência de anticorpos contra Anaplasma marginale, Babesia bovis e Babesia bigemina em bovinos de corte das regiões Norte e Centro Oeste do Brasil. Foram selecionadas randomicamente 1703 amostras de sangue de bovinos em 100 propriedades rurais distribuídos em 37 municípios dos estados do Mato Grosso, Pará e Tocantins. A pesquisa de anticorpos foi realizada por meio do Ensaio de Imunoadsorção Enzimático (ELISA) Indireto. A ocorrência de anticorpos observada para B. bovis, B. bigemina e A. marginale em bovinos dos estados do Mato Grosso, Tocantins e Pará foi 99%, 90% e 41%; 99%, 70% e 52% e 97%, 97% e 75%, respectivamente. Os resultados mostram que as regiões analisadas apresentam estabilidade enzoótica para a infecção por B. bovis e B. bigemina, não sendo observado o mesmo para Anaplasma marginale.(AU)

Molecular and serological detection of Babesia Bovis and Babesia Bigemina in cattle in the Rio de Janeiro, Brazil / Detecção molecular e sorológica de Babesia Bovis e Babesia Bigemina em bovinos no Rio de Janeiro, Brasil

Bovine babesiosis is an important disease of cattle where Rhipicephalus microplus acts as a vector for the two causal organisms Babesia bovis and Babesia bigemina. A total of 22 calves were randomly monitored during three years by semi-nested PCR assay and ELISA test to determine prevalence of B. bovis and B. bigemina. The overall prevalence of B. bovis and B. bigemina was 30% and 35% by nested PCR (nPCR), and 70% and 75% by ELISA, respectively. Statistical analysis of the characteristics of animals showed that age and tick infestations (p<0.05) might play an important role in the spread of babesiosis as animal less than 6 months old. A high correlation (Kappa index of 0.70 for B. bovis and 0.65 for B. bigemina, respectively) between serological and molecular tests suggests that the combination of the utilized techniques in the present study is suitable for babesiosis diagnosis in an endemic unstable area.(AU)

A babesiose bovina é uma importante doença do gado, onde Rhipicephalus microplus atua como um vetor para os dois organismos causais Babesia bovis e Babesia bigemina. Um total de 22 animais foram aleatoriamente e monitorados durante três anos, por nested PCR e teste de ELISA para determinar a prevalência de B. bovis e B. bigemina. A prevalência global de B. bovis e B. babesia foi de 30% e 35%, em nPCR, e 70% e 75% por ELISA, respectivamente. A análise estatística das características dos animais mostrou que a idade e carrapatos (p <0,05) podem desempenhar um papel importante na propagação de babesiose em animais com menos de 6 meses de idade. Uma correlação elevada (índice Kappa de 0,70 para B. bovis e B. babesia 0,65, respectivamente) entre os testes sorológicos e moleculares sugere que a combinação das técnicas utilizadas no presente estudo é adequado para o diagnóstico da babesiose numa área de instabilidade endémica.(AU)

Babesia bovis: expression of adhesion molecules in bovine umbilical endothelial cells stimulated with plasma from infected cattle / Babesia bovis: expressão de moléculas de adesão em células endoteliais de cordão umbilical de bovinos estimuladas com plasma de bovinos infectados

Ten male, 12-month-old Jersey with intact spleens, serologically and parasitologically free from Babesia were housed individually in an arthropod-free isolation system from birth and throughout entire experiment. The animals were randomly divided into two groups. Five animals (group A) were intravenously inoculated with 6.6 X10(7) red blood cells parasitized with pathogenic sample of Babesia bovis (passage 7 BboUFV-1), for the subsequent "ex vivo" determination of the expression of adhesion molecules. Five non-inoculated animals (group B) were used as the negative control. The expression of the adhesion molecules ICAM-1, VCAM, PECAM-1 E-selectin and thrombospondin (TSP) was measured in bovine umbilical vein endothelial cells (BUVECs). The endothelial cells stimulated with a pool of plasma from animals infected with the BboUFV-1 7th passage sample had a much more intense immunostaining of ICAM-1, VCAM, PECAM-1 E-selectin and TSP, compared to the cells which did not received the stimulus. The results suggest that proinflammatory cytokines released in the acute phase of babesiosis may be involved in the expression of adhesion molecules thereby implicating them in the pathophysiology of babesiosis caused by B. bovis.(AU)

Dez bezerros machos, da raça Jersey, com 1 ano de idade com baços "in situ", sorológica e parasitologicamente livres de Babesia, foram mantidos em baias individuais no isolamento a prova de artrópodes do Depto de Veterinária desde o nascimento e ao longo de toda a experimentação. Os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos. Cinco animais (grupo A) foram inoculados por via intravenosa com 6,6 x10(7) hemácias parasitados com amostra patogênica de Babesia bovis (BboUFV - 1 7ª passagem) , para a determinação subseqüente "ex vivo" da expressão de moléculas de adesão . Cinco animais não inoculados (Grupo B ) foram utilizados como controlo negativo . A expressão de moléculas de adesão ICAM - 1, VCAM , PECAM - 1, E - selectina e trombospondina ( TSP ) foi medida em células endoteliais da veia umbilical de bovinos (BUVECs). As células endoteliais estimuladas com um pool de plasma proveniente de animais infectados com BboUFV - 1 7ª passagem tinham uma imunocoloração muito mais intensa de ICAM - 1 , VCAM , PECAM - 1 de E - selectina e de TSP , em comparação com as células que não receberam o estímulo . Os resultados sugerem que as citocinas pró-inflamatórias liberados na fase aguda da babesiose pode estar envolvida na expressão de moléculas de adesão , implicando , assim, elas na fisiopatologia da babesiose causada por B. bovis.(AU)

Assessing bovine babesiosis in Rhipicephalus (Boophilus) microplus ticks and 3 to 9-month-old cattle in the middle Magdalena region, Colombia

Babesia sp. is a protozoan hemoparasite that affects livestock worldwide. The Colombian Middle Magdalena is an enzootic region for babesiosis, but there is no previous research providing detail on its transmission cycle. This study aims to assess some Babesia sp. infection indicators in cattle and ticks from the area, by using direct microscopic and molecular techniques to detect the infection. In the cattle, 59.9% and 3.4 % positivity values for B. bigemina and mixed infection (B. bovis + B. bigemina) were found respectively. In ticks, the positivity of B. bigemina reached 79.2% and 9.4% for the mixed infection. The degree of infestation in the region was 3.2 ticks per bovine. There was positive correlation between tick control acaricide frequencies and infestation in bovines. This leads us to infer that control periodicity greater than 90 days, in stable zones, is an abiotic factor that benefits the acquisition of protective immunity in calves, the natural control of the infection and eventual disease absence. It is necessary to monitor the disease by applying new entomological and parasitological indicators showing the complexity of this phenomenon.(AU)

Serological occurrence of Babesia bovis, Babesia bigemina and Anaplasma marginale in cattle and water buffaloes of Pará, Brazil / Ocorrência sorológica de Babesia bovis, Babesia bigemina e Anaplasma marginale em bovinos e bubalinos no estado do Pará, Brasil

Among the major diseases that affect cattle and water buffaloes, the tick-borne diseases are detaches. Bovine babesiosis caused by Babesia bigemina and Babesia bovis, and anaplasmosis, caused by Anaplasma marginale rickettsia, are of great economic importance to cattle diseases. The aim of this study was to compare the serologic occurrence for the agents of tick fever in cattle and water buffaloes in the middle region southeast of the state of Pará, northern Brazil. Blood samples were collected from 679 beef cattle (Nelore) and 430 water buffaloes (Mediterranean and Murrah) in eight cities of middle region southeast of Pará, Brazil. The research of antibodies IgG against A. marginale, B. bigemina and B. bovis was performed through of the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (iELISA). Cattle compared to buffaloes showed higher occurrence of antibodies against B. bovis (97,34% and 33.95%), B. bigemina (97,34% and 27.21%) and A. marginale (74,52% and 47.90%), respectively. The probability of cattle are serologically positive to A. marginale, B. bovis and B. bigemina was 1,5 (74,52/47,90%), 3,58 (97,34/27,21%) and 2,87 (97,34/33,95%) times higher than that buffaloes, respectively. These results suggest that buffaloes may be more resistant to vectors being subjected to a lower rate of infection than cattle.(AU)

Dentre as principais enfermidades que acometem bovinos e bubalinos, destacam-se as doenças transmitidas por carrapatos. As babesioses bovinas, causadas por Babesia bigemina e Babesia bovis, e a anaplasmose, causada pela rickettsia Anaplasma marginale, são doenças de grande importância econômica para a bovinocultura. O objetivo deste trabalho foi comparar a ocorrência sorológica para os agentes da Tristeza Parasitária em bovinos e bubalinos na mesorregião sudeste do estado do Pará, região norte do Brasil. Foram efetuadas coletas de sangue de 679 bovinos de corte (Nelore) e 430 bubalinos (Mediterrâneo e Murrah) em oito cidades da mesorregião do sudeste do estado do Pará, Brasil. A pesquisa de anticorpos da classe IgG contra A. marginale, B. bigemina e B. bovis foi realizada por Ensaio de Imunoadsorção Enzimático Indireto (iELISA). Bovinos, quando comparados a bubalinos, apresentaram maior ocorrência de anticorpos contra B. bovis (97,34% e 33.95%), B. bigemina (97,34% e 27.21%) e A. marginale (74,52% e 47.90%), respectivamente. O número de bovinos soropositivos para A. marginale, B. bovis e B. bigemina foi 1,5 (74,52/47,90%), 3,58 (97,34/27,21%) e 2,87 (97,34/33,95%) vezes maior do que os bubalinos, respectivamente. Os resultados permitem concluir que, habitando a mesma mesorregião e sendo submetidos a mesma pressão de vetores e agentes, os bubalinos apresentaram ocorrência...(AU)

Prevalência sorológica e molecular de Babesia bovis e Babesia bigemina em búfalos (Bubalus bubalis) na Ilha de Marajó, Pará / Molecular and serological prevalence of Babesia bovis and Babesia bigemina in water buffaloes (Bubalus bubalis) on Marajo Island, State of Pará, Brazil

The aim of the study was to estimate the prevalence of Babesia bovis and Babesia bigemina in water buffaloes of the Marajó Island, State of Pará, Brazil. We used an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (iELISA), with total antigen containing proteins outer surface, and polymerase chain reaction (qPCR), involving the use of SYBR Green based on amplification of a small fragment of the cytochrome b gene. The prevalence of positive animals in iELISA to B. bovis B. bigemina and mixed infection was 24.87% (199/800), 20.75% (166/800) and 18.75% (150/800), respectively. Using the PCR, the presence of B. bovis was detected in 15% (18/199) and B. bigemina in 16% (19/199) of animals, and of these, 58% (11/19) presented co-infected by the two agents. The results show a low prevalence of antibodies anti-B. bovis and anti-B. bigemina in water buffaloes from Marajó Island. However, it was observed that the agents of bovine babesiosis circulate in buffaloes, and these may act as reservoirs.(AU)

O objetivo do estudo foi testar a prevalência sorológica e molecular de Babesia bovis e Babesia bigemina em búfalos da Ilha de Marajó, Pará. Foi utilizado ensaio de imunoadsorção enzimático indireto (iELISA) com antígeno total contendo proteínas de superfície externa e reação em cadeia da polimerase (qPCR), envolvendo o uso de SYBR Green com base na amplificação de um pequeno fragmento de gene do citocromo b. A prevalência de animais positivos no ELISA para B. bovis, B. bigemina e para infecção mista foi de 24.87% (199/800), 20.75% (166/800) e 18.75% (150/800), respectivamente. Na PCR foi detectado a presença de B. bovis em 15% (18/199) e de B. bigemina em 16% (19/199) dos animais, sendo que destes, 58% (11/19) apresentavam-se co-infectados pelos dois agentes. Os resultados mostram uma baixa prevalência de anticorpos anti-B. bovis e anti-B. bigemina em búfalos da Ilha do Marajó. Porém, observou-se que os agentes da babesiose bovina circulam em búfalos, podendo estes atuar como reservatórios.(AU)

Causas de aborto bovino diagnosticadas no Setor de Patologia Veterinária da UFRGS de 2003 a 2011 / Causes of bovine abortion diagnosed by the Sector of Veterinary Pathology of the Federal University of Rio Grande do Sul in the years 2003-2011

The main causes of abortion in cattle diagnosed from January 2003 to December 2011 are described. A total of 490 fetuses from several Brazilian states were evaluated. Specific causes of abortion were found in 46.7% of the cases,and protozoan abortions, especially by Neospora caninum, were detected in 33% (162/490). Bacterial abortions corresponded to 6.3 % (31/490), followed by fungal ones to 0.8% (4/490). In two aborted fetuses (0.4 %), a co-infection with two agents could be identified. Non-infectious diseases could be associated with 3% of the abortions and congenital malformations with 2.6%.(AU)

Descrevem-se as causas de aborto bovino diagnosticadas no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul no período de janeiro de 2003 a dezembro de 2011. Um total de 490 fetos bovinos foi analisado neste período. Causas específicas de aborto foram encontradas em 46,7% dos casos. Infecções por protozoários, em especial Neospora caninum acometeram 33% dos casos (162/490). Bactérias com 6,3% (31/490), seguidas por fungos com 0,8% (4/490) dos casos, foram causas adicionais de abortos. Em dois fetos (0,4%), coinfecções por dois agentes foram identificadas. Causas não-infecciosas foram observadas em 3% dos abortos e Malformações congênitas em 2,6%.(AU)

Risk factors associated with the frequency of antibodies against Babesia bovis and Babesia bigemina in cattle in southern Mozambique / Fatores de risco associados à frequência de anticorpos contra Babesia bovis e B. bigemina em bovinos da região sul de Moçambique

The study aimed to evaluate the risk factors associated with the frequency of IgG antibodies against Babesia bovis and B. bigemina in cattle in southern Mozambique. Eight hundred and nine serum samples were collected from cattle in three provinces namely Maputo, Gaza and Inhambane, and tested by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (i-ELISA) to assess the humoral immune response towards B. bovis and B. bigemina. The chi-square test at 5 percent significance was used to determine whether there was an association between gender, age and geographic origin of seropositive animals. The overall prevalence was 78.8 percent (548/695) for B. bovis and 76.0 percent (528/695) for B. bigemina. The origin of the animals showed a significant association (p<0.05) with seropositivity to both agents, while gender and age was not associated (p>0.05). Maputo province had the highest rate of positive animals, with 93.7 percent (118/126) for B. bovis and 97.6 percent (123/126) for B. bigemina. In Gaza province 77.3 percent (321/415) of the animals were positive for B. bovis and 67.5 percent (280/415) for B. bigemina, while in the province of Inhambane the levels of seropositivity were 70.8 percent (109/154) and 81.2 percent (125/154) for B. bovis and B. bigemina respectively. In the present study, the frequency of cattle positive for B. bovis and B. bigemina was shown to increase among older age groups, suggesting that infection and re-infection persisted even after the primary infection. Thus, this region is considered to be in a state of enzootic stability with regards to B. bovis and B. bigemina.(AU)

Foram avaliados os fatores de risco associados a frequência de anticorpos da classe IgG contra Babesia bovis e B. bigemina em bovinos da região sul de Moçambique. Oitocentos e nove amostras de soros foram coletadas de bovinos em três províncias nomeadamente Maputo, Gaza e Inhambane e testados por ensaio de imunoadsorção enzimático indireto (i-ELISA) para avaliar a resposta imune humoral contra B. bovis e B. bigemina. O teste de Qui-quadrado a 5 por cento de significância foi utilizado para verificar a associação entre as variáveis sexo, faixa etária e origem geográfica com a soropositividade dos animais. A prevalência geral foi de 78,8 por cento (548/695) para B. bovis e 76,0 por cento (528/695) para B. bigemina. A origem dos animais apresentou associação (p<0,05) com a soropositividade a ambos os agentes, enquanto variável sexo não apresentou associação (p>0,05). A província de Maputo apresentou a maior taxa de animais positivos, com 93,7 por cento (118/126) para B. bovis e 97,6 por cento (123/126) para B. bigemina. Na província de Gaza a soropositividade foi de 67,5 por cento (280/415) para B. bigemina e 77,3 por cento (321/415) para B. bovis enquanto que na província de Inhambane a positividade foi de 81,2 por cento (125/257) e 70,8 por cento (109/257) para B. bigemina e B. bovis, respectivamente. Na presente pesquisa, a freqüência de bovinos positivos para B. bovis e B. bigemina aumentou nas faixas etárias superiores, sugerindo que as infecções e as re-infecções persistem mesmo após primo-infecção. A região estudada apresenta-se na condição de estabilidade enzoótica para os agentes estudados.(AU)