Questing ticks in Atlantic rainforest (Mata Atlantica) fragments in the municipality of Divino, Minas Gerais state, Brazil / Carrapatos na fase de vida livre em fragmentos de Mata Atlântica do município de Divino, Minas Gerais, Brasil

The tick species and tick-borne pathogens present in a group of questing ticks collected from forest fragments in a rural area in the municipality of Divino, Minas Gerais state, Brazil were evaluated. The collected ticks were divided into two groups those collected from around the edges of the fragments and those collected from the interior of the forest. In all the fragments, the ticks were collected using a dragging and flagging technique and by harvesting them from white fabric gaiters. The larvae, nymphs, and adults were all morphologically identified using specific taxonomic keys. The larvae were identified to the genus level. DNA was extracted from the ticks and tested for the presence of Rickettsia spp., Borrelia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Babesia spp., and Theileria spp. using a conventional polymerase chain reaction (PCR). In total, 1,122 questing ticks (750 larvae, 367 nymphs, and five adults) and 18 larval clusters were evaluated. The main species found in the collected tick population were Amblyomma sculptum, A. auricularium, A. aureolatum, and A. pseudoconcolor, along with the larvae of Amblyomma spp. and Dermacentor spp. None of the tick samples gave a positive result when tested by PCR for the presence of DNA from Rickettsia spp., Borrelia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Babesia spp., or Theileria spp.(AU)

Neste estudo avaliou-se a presença de espécies de carrapatos e a detecção de agentes patogênicos a eles associados. Os carrapatos de vida livre foram coletados em fragmentos florestais da área rural do Município de Divino, Minas Gerais, Brasil. Os carrapatos coletados foram divididos em dois grupos, aqueles que foram coletados na área da margem do fragmento (Borda) e os coletados no interior da floresta (Mata). Em todos os fragmentos, os carrapatos foram coletados de acordo com a técnica de arraste aéreo ou no chão e com o uso de perneiras e de flanela. Tanto, as larvas, quanto as ninfas e os adultos foram morfologicamente identificados usando chaves taxonômicas específicas. No caso das larvas, estas foram identificadas até o nível de gênero. Foi realizada extração de DNA dos carrapatos e o DNA extraído foi testado para a presença de Rickettsia spp., Borrelia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Babesia spp., e Theileria spp. por meio de uma estratégia de reação em cadeia da polimerase convencional. No total, 1.122 carrapatos em fase de vida livre (750 larvas, 367 ninfas e 5 adultos) e 18 clusters de larvas foram usados no estudo. As principais espécies identificadas na população de carrapatos coletada foram: Amblyomma sculptum, Amblyomma auricularium, Amblyomma aureolatum e Amblyomma pseudoconcolor e larvas de Amblyomma spp. e Dermacentor spp. Como resultado da detecção de patógenos não foi possível achar DNA de nenhum dos agentes analisados, assim todas as amostras de DNA dos carrapatos testados foram negativas tanto para Rickettsia spp. quanto para Borrelia spp., Ehrlichia spp., Anaplasma spp., Babesia spp. e Theileria spp.(AU)

Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detection of IgY Anti-Borrelia anserina antibodies in Gallus gallus domesticus / Ensaio de imunoadsorção enzimático (ELISA) indireto para detecção de anticorpos IgY Anti-Borreliaanserina em Gallus gallus domesticus

This study aimed to promote the standardization of an indirect, enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the serological detection of B. anserina in Gallus gallusdomesticus. An aliquoted sera from vaccinated chicken with B. anserina antigen (GI), experimental infected chickens with B. anserina (GII) and rustic poultry rearing of G. gallus (GIII) were tested with in-house ELISA developed to detect serum antibodies against B. anserina in G. gallus domesticus. On average, the experimentally infected chickens became positive at 9 DPI a mean ± standard deviation (SD) ODI value of 163.11 ± 70.65. The highest observed Optical Density Index (ODI) was 372.54 ± 132.39, at 26 DPI, and the highest overall ODI value was 626.51. The vaccinated chickens became positive between 8 and 10 DPV, with an ODI of 245.59 at 10 DPV, with an overall maximum ODI of 543.13. A total of 108 blood samples were collected from poultry raised on rustic farms. Of the total samples collected, 58.33% (63/108) were considered positive for B. anserina. The maximum ODI found among these rustic chickens was 283.24. This stardardization provided a sensitivity and specificity of 100%.

Este estudo teve como objetivo promover a padronização de um ensaio imunoenzimático indireto (ELISA) para a detecção sorológica de Borrelia anserina em Gallus gallus domesticus. Um frango vacinado com antígeno de B. anserina (GI), frangos infectados experimentalmente com B. anserina (GII) e frangos criados de forma rústica (GIII) foram testados com ELISA indireto in house desenvolvido para a detecção sorológica contra B. anserina em G. gallus domesticus. Em média, os frangos infectados experimentalmente tornaram-se positivos aos 9º dia pós-inoculação (DPI), um valor do índice de densidade óptica (ODI) médio ± desvio padrão (SD) de 163,11 ± 70,65. O maior ODI observado foi 372,54 ± 132,39, em 26ºDPI, e o maior valor geral de ODI foi 626,51. Os frangos vacinados tornaram-se positivos entre 8º e 10° DPV, com um ODI de 245,59 a 10 DPV, com um ODI máximo geral de 543,13. Um total de 108 amostras de sangue foram coletadas de aves criadas em fazendas rústicas. Do total de amostras coletadas, 58,33% (63/108) foram consideradas positivas para B. anserina. O ODI máximo encontrado entre essas galinhas rústicas foi 283,24. Essa padronização proporcionou sensibilidade e especificidade de 100%.

Experimental infection by Borrelia anserina strain PL in Gallus gallus / Infecção experimental de Borrelia anserina cepa PL em Gallus gallus

Avian borreliosis is a tick-borne acute septicemic disease that affects a variety of avian species and is caused by the bacterium Borrelia anserina. The present study aimed to establish the infection dynamics of B. anserina in experimentally infected Gallus gallus to determine its impact on the health and weight gain of the animals. Forty G. gallus were divided into four groups. Group 1 (G1) included 10 animals inoculated intramuscularly (IM) with 250µL of blood serum containing 3.7x106 spirochetes per milliliter. Group 2 (G2) included 10 animals inoculated IM with 250µL of saline 0.9%. Group 3 (G3) included 10 animals infested with four Argas miniatus nymphs (3rd instar) infected with B. anserina strain PL. Group 4 (G4) included 10 animals infested with four A. miniatus nymphs (3rd instar) free of infection by B. anserina. The number of spirochetes in the blood was directly proportional to the appearance of clinical signs and symptoms. This is the first study showing the experimental clinical evolution of the B. anserina PL strain in G. gallus. Additionally, the first assessments of spirochetaemia are presented, based on the direct count of bacteria in the serum by a Neubauer chamber, during the infection.(AU)

Borreliose aviária é uma doença septicêmica aguda transmitida por carrapatos que afeta uma variedade de espécies aviárias e é causada pela bactéria Borrelia anserina. O presente estudo teve como objetivo estabelecer a dinâmica da infecção de B. anserina em Gallus gallus experimentalmente infectados e determinar seu impacto na saúde e no ganho de peso dos animais. Quarenta G. gallus foram divididos em quatro grupos. O Grupo 1 (G1) incluiu 10 animais inoculados por via intramuscular (IM) com 250µL de soro sanguíneo contendo 3,7x106 espiroquetas por mL; Grupo 2 (G2) incluiu 10 animais inoculados IM com 250µL de soro fisiológico 0,9%; Grupo 3 (G3) incluiu 10 animais infestados com quatro ninfas de Argas miniatus (3º instar) infectadas com B. anserina cepa PL. O Grupo 4 (G4) incluiu 10 animais infestados com quatro ninfas de A. miniatus (3º instar) livres de infecção por B. anserina. O número de espiroquetas no sangue foi diretamente proporcional ao aparecimento de sinais e sintomas clínicos. Este é o primeiro estudo que mostra a evolução clínica experimental da cepa B. anserina PL em G. gallus. Além disso, são apresentadas as primeiras avaliações da espiroquetemia, baseadas na contagem direta da bactéria no soro por uma câmara de Neubauer, durante a infecção.(AU)

First serological detection of Borrelia spp. in dogs in western Cuba / Primeira detecção sorológica de Borrelia spp. em cães na região oeste de Cuba

This study aimed to verify the presence of IgG antibodies against Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l) in domestic dogs in western Cuba. Serum samples were analyzed by indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), using crude antigens of a B. burgdorferi strain of North American origin. To verify the presence of Borrelia spp., deoxyribonucleic acid (DNA) extracted from individual blood samples was analyzed by nested-PCR, with markers targeted for amplification of portions of the flagellin B gene (flaB) present in Borrelia spirochetes. Ticks were also collected through inspection of the animals. Sera from 93 of 176 (52.84%) dogs were reactive to the indirect ELISA. Geographic prevalence varied from 54.35% (25/46) in Boyeros, 44.44% (20/45) in Cotorro, 66.67% (22/33) in Habana del Este, and 50% (26/52) in San José de las Lajas. There was no statistical difference between these tested variables. No blood samples analyzed were positive for the Borrelia flaB gene.(AU)

Este estudo teve como objetivo confirmar a presença de anticorpos IgG contra Borrelia burgdorferi sensu lato (s.l) em cães na região oeste de Cuba. As amostras de soro foram analisadas por ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) indireto, usando-se antígenos brutos de uma cepa de B. burgdorferi de origem norte-americana. Para confirmar a presença de Borrelia spp., o ácido desoxirribonucleico (DNA), extraído de amostras individuais de sangue, foi analisado por PCR, utilizando-se marcadores direcionados para a amplificação de porções do gene da flagelina B (flaB) presente nas espiroquetas de Borrelia. Os carrapatos também foram coletados através da inspeção dos animais. Os soros de 93 de 176 (52,84%) cães foram reativos ao ELISA indireto. A prevalência geográfica variou de 54,35% (25/46) em Boyeros, 44,44% (20/45) em Cotorro, 66,67% (22/33) em Habana del Este e 50% (26/52) em San José de las Lajas. Não houve diferença estatística entre essas variáveis testadas. Nenhuma amostra de sangue analisada foi positiva para o gene Borrelia flaB.(AU)

Rodents as potential reservoirs for Borrelia spp. in northern Chile / Roedores como potenciais reservatórios de Borrelia spp. no norte do Chile

Small mammals play an essential role in the transmission and maintenance cycles of Borrelia spirochetes. In Chile, recent studies have characterized novel Borrelia genotypes in ticks collected from small mammals, a fact that suggests these vertebrates are hosts for spirochetes from this genus. Considering this evidence, the goal of this study was to determine the presence of Borrelia DNA in small mammals inhabiting northern Chile. In winter of 2018, 58 small mammals were captured in five localities. Blood samples were collected from rodents and DNA was extracted to determine the presence of Borrelia DNA by PCR targeting the flaB gene and rrs–rrlA intergenic spacer (IGS). From three individuals (5%), belonging to two rodent species of Cricetidae family (Phyllotis xanthopygus and Oligoryzomys longicaudatus), we retrieved three flaB and two IGS Borrelia genotypes. Phylogenetic analyses performed with both Maximum Likelihood and Bayesian inferences showed that our sequences grouped with homologous genotypes from the relapsing fever and Lyme borreliosis groups. Our findings suggest that P. xanthopygus and O. longicaudatus rodents may play a role as reservoirs for borrelial spirochetes in Chile.(AU)

Pequenos mamíferos possuem um papel essencial na transmissão e manutenção de espiroquetas do gênero Borrelia. No Chile, estudos recentes têm descrito novos genótipos de Borrelia em carrapatos, parasitando pequenos mamíferos. Isso sugere que esses vertebrados podem atuar como possíveis reservatórios dessas espiroquetas. Considerando-se essa evidência, o objetivo deste estudo foi determinar a presença de DNA de Borrelia em pequenos mamíferos da região norte do Chile. Durante o inverno de 2018, 58 pequenos mamíferos foram capturados em cinco localidades. Amostras de sangue obtidas a partir dos indivíduos capturados foram submetidas à extração de DNA e ensaios de PCR, para a detecção de Borrelia spp. baseados no gene flaB e espaçador intergênico rrs–rrlA (IGS). A partir de três espécimes (5%) pertencentes a duas espécies de roedores da família Cricetidae (Phyllotis xanthopygus e Oligoryzomys longicaudatus) obtiveram-se três genótipos de Borrelia para o gene flaB e dois para IGS. Análises filogenéticas inferidas, usando-se os métodos Bayesiano e de Máxima Verossimilhança, indicaram que as sequências geradas neste estudo agrupam-se com borrelias do grupo da Febre Recorrente e Borreliose de Lyme. Os achados deste estudo sugerem que roedores P. xanthopygus e O. longicaudatus poderiam atuar como possíveis reservatórios para Borrelia spp. no Chile.(AU)

Hemoparasites in ticks of wild birds of Serra dos Órgãos National Park, state of Rio de Janeiro, Brazil / Hemoparasitos em carrapatos de aves silvestres do Parque Nacional da Serra dos Órgãos, estado do Rio de Janeiro, Brasil

The aim of this study is to detect the presence of tick-borne agents of genera Rickettsia, Borrelia, Babesia, Ehrlichia and Anaplasma in ticks collected from native wild birds in the state of Rio de Janeiro. Birds were captured and observed carefully to find the ectoparasites. DNA detection of hemoparasites was performed by means of the polymerase chain reaction (PCR). The sequences obtained were analyzed and their homologies were compared to the available isolates in the GenBank platform database. A total of 33 birds were captured from 20 different species, of which 14 were parasitized by Amblyomma longirostre (n = 22). There was absence of DNA from agents of the genera Babesia, Anaplasma and Ehrlichia in the evaluated samples. The phylogenetic analysis indicated that one sample had 100% identity with Rickettsia bellii (KJ534309), the other two samples showed 100% identity with Rickettsia sp. Aranha strain and strain AL (EU274654 and AY360216). The positive sample for R. bellii was also demonstrated to be positive for Borrelia sp., which presented a similarity of 91% with Borrelia turcica (KF422815). This is the first description of Borrelia sp. in ticks of the genus Amblyomma in South America.(AU)

Este trabalho teve como objetivo detectar evidências moleculares da presença de agentes dos gêneros Rickettsia, Borrelia, Babesia, Anaplasma e Ehrlichia transmitidos por carrapatos coletados de aves silvestres no estado do Rio de Janeiro. Aves foram capturadas e observadas cuidadosamente a procura de ectoparasitos. A detecção de DNA de hemoparasitos foi realizada por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR). As sequências obtidas foram analisadas e sua homologia comparada aos isolados disponíveis na base de dados da plataforma GenBank. Foram capturadas 33 aves, de 20 espécies diferentes das quais 14 estavam parasitadas por Amblyomma longirostre (n = 22). Houve ausência de DNA de agentes dos gêneros Babesia, Anaplasma e Ehrlichia nas amostras avaliadas. A análise filogenética indicou que uma amostra apresentou 100% de identidade com Rickettsia bellii (KJ534309), as outras duas amostras apresentaram 100% de identidade com Rickettsia sp. cepa Aranha e Cepa AL (EU274654 e AY360216.). A amostra positiva para R. bellii também apresentou positividade para Borrelia sp. que apresentou similaridade de 91% com Borrelia turcica (KF422815). Esta é a primeira descrição de Borrelia sp. em carrapatos do gênero Amblyomma na América do Sul.(AU)

Morphological, molecular and phylogenetic characterization of Borrelia theileri in Rhipicephalus microplus / Caracterização morfológica, molecular e filogenética de Borrelia theileri em Rhipicephalus microplus

This study aimed to perform a morphological, molecular and phylogenetic characterization of Borrelia theileri obtained from infected Rhipicephalus microplus in Brazil. Fifty engorged R. microplus females from cattle in the municipality of Seropédica, Rio de Janeiro, were analyzed for spirochetes by hemolymph smear. Macerated eggs and positive ticks, as well as blood from the bovine infested by these ticks, were analyzed the glpQ, flaB and hpt genes by PCR. The PCR products were purified and sequenced for analysis and construction of a phylogenetic tree. Only 2% (1/50) of the ticks generated a positive result by both smear and PCR. The spiral forms (n = 50) had (media ± SD) a mean length of 19.17 ± 4.12 µm, diameter of 0.2935 ± 0.0469 and number of turns 8.44 ± 2.59. Sequence alignments of the three evaluated genes exhibited 98% similarity to B. theileri isolates, occurring in a clade highly related to B. theileri strain KAT. Egg maceration samples were positive for the three evaluated genes, whereas bovine blood was negative by PCR. This is the most detailed characterization of B. theileri in the Americas to-date, presenting morphological, molecular and phylogenetic data, including the transovarial transmission of the spirochete in the host tick.(AU)

O estudo teve como objetivo realizar a caracterização morfológica, molecular e filogenética de Borrelia theileri obtida de Rhipicephalus microplus naturalmente infectado em bovino no estado do Rio de Janeiro, Brasil. Um total de 50 fêmeas de R. microplus ingurgitadas foram analisadas para espiroquetas por meio de esfregaço de hemolinfa. Ovos macerados e carrapatos, assim como sangue de bovinos infectados por esses carrapatos, foram analisados os genes glpQ, flaB e hpt por PCR. Os produtos de PCR foram purificados e sequenciados para análise e construção de uma árvore filogenética. Apenas 2% (1/50) dos carrapatos geraram um resultado positivo tanto pelo esfregaço como pela PCR. As formas espirais (n = 50) apresentaram (média ± DP) comprimento médio de 19,17 ± 4,12, diâmetro de 0,2935 ± 0,0469 e número de voltas de 8,44 ± 2,59. Os alinhamentos das sequências dos três genes avaliados exibiram 98% de similaridade aos isolados de B. theileri, ocorrendo em um clado altamente relacionado à linhagem de B. theileri KAT. As amostras de maceração de ovos foram positivas para os três genes avaliados, enquanto o sangue bovino foi negativo pela PCR. Esta é a mais completa caracterização de B. theileri nas Américas, apresentando dados morfológicos, moleculares e filogenéticos, incluindo a transmissão transovarial da espiroqueta no carrapato hospedeiro.(AU)

Parasitismo em aves silvestres residentes e migratórias da Ilha da Marambaia, Estado do Rio de Janeiro / Parasitism in migratory and resident wild birds of Marambaia island, Rio de Janeiro state

O objetivo desta pesquisa foi buscar a presença de microrganismos em esfregaços sanguíneos de aves silvestres residentes ou migratórias da Ilha da Marambaia, município de Mangaratiba, estado do Rio de Janeiro, durante o ano de 2009. Para execução da pesquisa, 86 indivíduos referentes a 22 espécies foram capturados através de rede de neblina e após manuseio liberados ao seu habitat natural. Foi coletado sangue periférico das aves e realizado esfregaços sanguíneos. Como resultados foi diagnosticado a ocorrência de 11 (12,80%) indivíduos positivos para Plasmodium sp., um (1,16%) para microfilária e 16 (18,60%) para Borrelia sp. Foram encontrados carrapatos Amblyomma sp. (Família Ixodidae) parasitando as aves amostradas, o que sugere existir uma interação parasito-vetor-hospedeiro entre esse e o gênero Borrelia. Este estudo deve ser ampliado para outras regiões e o seu conhecimento dará maiores subsídios para outras pesquisas, voltadas principalmente para a preservação de aves em ambiente por elas escolhidos como seu habitat.(AU)

The study intended to analyze the population of migratory and resident wild bird species from Marambaia island, located in the municipality of Mangaratiba, Rio de Janeiro state, regarding the presence of microorganisms in blood smears during the year of 2009. In order to achieve the goal, 86 individuals of 22 bird species were captured using mist nets; peripheral blood was collected and blood smears performed. The birds were released after examined and sampled in situ. The diagnostic results were 11 (12.80%) birds positive for Plasmodium sp., one (1.16%) for microfilaria and 16 (18.60%) for Borrelia sp. Ticks identified as Amblyomma sp. (Ixodidae) were observed parasiting the sampled birds, suggesting that a relationship parasite-vector-host exists between these ticks and the Borrelia genus. This study should be expanded to other regions so that its results may favour other surveys, focused on conservation of wild birds in their habitat.(AU)

Parasitismo em aves silvestres residentes e migratórias da Ilha da Marambaia, Estado do Rio de Janeiro / Parasitism in migratory and resident wild birds of Marambaia island, Rio de Janeiro state

O objetivo desta pesquisa foi buscar a presença de microrganismos em esfregaços sanguíneos de aves silvestres residentes ou migratórias da Ilha da Marambaia, município de Mangaratiba, estado do Rio de Janeiro, durante o ano de 2009. Para execução da pesquisa, 86 indivíduos referentes a 22 espécies foram capturados através de rede de neblina e após manuseio liberados ao seu habitat natural. Foi coletado sangue periférico das aves e realizado esfregaços sanguíneos. Como resultados foi diagnosticado a ocorrência de 11 (12,80%) indivíduos positivos para Plasmodium sp., um (1,16%) para microfilária e 16 (18,60%) para Borrelia sp. Foram encontrados carrapatos Amblyomma sp. (Família Ixodidae) parasitando as aves amostradas, o que sugere existir uma interação parasito-vetor-hospedeiro entre esse e o gênero Borrelia. Este estudo deve ser ampliado para outras regiões e o seu conhecimento dará maiores subsídios para outras pesquisas, voltadas principalmente para a preservação de aves em ambiente por elas escolhidos como seu habitat.(AU)

The study intended to analyze the population of migratory and resident wild bird species from Marambaia island, located in the municipality of Mangaratiba, Rio de Janeiro state, regarding the presence of microorganisms in blood smears during the year of 2009. In order to achieve the goal, 86 individuals of 22 bird species were captured using mist nets; peripheral blood was collected and blood smears performed. The birds were released after examined and sampled in situ. The diagnostic results were 11 (12.80%) birds positive for Plasmodium sp., one (1.16%) for microfilaria and 16 (18.60%) for Borrelia sp. Ticks identified as Amblyomma sp. (Ixodidae) were observed parasiting the sampled birds, suggesting that a relationship parasite-vector-host exists between these ticks and the Borrelia genus. This study should be expanded to other regions so that its results may favour other surveys, focused on conservation of wild birds in their habitat.(AU)

Serosurvey of Borrelia in dogs, horses, and humans exposed to ticks in a rural settlement of southern Brazil / Soroprevalência e fatores associados a Borrelia em cães, equinos e humanos expostos a carrapatos em um assentamento rural do sul do Brasil

Abstract The aims of the present study were to serosurvey dogs, horses, and humans highly exposed to tick bites for anti-Borrelia burgdorferi s.l. antibodies, identify tick species present, and determine risk factors associated with seropositivity in a rural settlement of Paraná State, southern Brazil. Eighty-seven residents were sampled, along with their 83 dogs and 18 horses, and individual questionnaires were administered. Immunofluorescence antibody test (IFAT) was performed on serum samples and positive samples were subjected to western blot (WB) analysis. Anti-B. burgdorferi antibodies were found in 4/87 (4.6%) humans, 26/83 (31.3%) dogs, and 7/18 (38.9%) horses by IFAT, with 4/4 humans also positive by WB. Ticks identified were mostly from dogs and included 45/67 Rhipicephalus sanguineus, 21/67 Amblyomma ovale, and 1/67 A. cajennense sensu lato. All (34/34) horse ticks were identified as A. cajennense s.l.. No significant association was found when age, gender, or presence of ticks was correlated to seropositivity to Borrelia sp. In conclusion, although anti-Borrelia antibodies have been found in dogs, horses and their owners from the rural settlement, the lack of isolation, molecular characterization, absence of competent vectors and the low specificity of the commercial WB kit used herein may have impaired risk factor analysis.(AU)

Resumo Os objetivos do presente estudo foram realizar um levantamento sorológico de cães, cavalos e humanos altamente expostos a picadas de carrapatos para anticorpos anti-B. burgdorferi s.l., identificar as espécies de carrapatos presentes, e determinar os fatores de risco associados a soropositividade em um assentamento rural do Estado do Paraná, sul do Brasil. Oitenta e sete residentes foram amostrados junto com seus respectivos 83 cães e 118 cavalos e questionários individuais foram aplicados. O teste de imunofluorescência indireta (IFI) foi realizado nas amostras sorológicas e as positivas foram submetidas a análise por western blot (WB). Anticorpos anti-B. burgdorferi foram detectados em 4/87 (4,6%) humanos, 26/83 (31,3%) cães e 7/18 (38,9%) cavalos pela IFI, com 4/4 humanos também positivos pelo WB. Os carrapatos identificados foram em sua maioria de cães e incluíram 45/67 Rhipicephalus sanguineus, 21/67 Amblyomma ovale e 1/67 A. cajennense sensu lato. Todos (34/34) carrapatos dos cavalos foram identificados como A. cajennense s.l.. Não foram observadas diferenças estatísticas entre idade, sexo ou presença de carrapatos e soropositividade para Borrelia sp. Em conclusão, embora anticorpos anti-Borrelia tenham sido encontrados em cães, equinos e seus proprietários do assentamento rural, a ausência de isolamento, caracterização molecular, ausência de vetores competentes e baixa especificidade do kit comercial de WB utilizado podem ter limitado a análise de fatores de risco.(AU)

Detection of Borrelia-specific 16S rRNA sequence in total RNA extracted from Ixodes ricinus ticks / Detecção de sequência 16S rRNA, específica de Borrelia, em RNA total extraído de Ixodes ricinus

A reverse transcriptase - polymerase chain reaction based assay for Borrelia species detection in ticks was developed. The method was based on amplification of 552 nucleotide bases long sequence of 16S rRNA, targeted by Borrelia specific primers. In the present study, total RNA extracted from Ixodes ricinus ticks was used as template. The results showed higher sensitivity for Borrelia detection as compared to standard dark-field microscopy. Method specificity was confirmed by cloning and sequencing of obtained 552 base pairs long amplicons. Phylogenetic analysis of obtained sequences showed that they belong to B. lusitaniae and B. afzelii genospecies. RT-PCR based method presented in this paper could be very useful as a screening test for detecting pathogen presence, especially when in investigations is required extraction of total RNA from ticks.(AU)

Para a detecção de espécies de Borrelia em carrapatos, desenvolveu-se a técnica da transcrição reversa, seguida da reação em cadeia da polimerase (RT-PCR). A técnica baseou-se na amplificação de 552 bases de nucleotídeos de 16S rRNA, utilizando-se primers específicos de Borrelia. O RNA total extraído de amostras de carrapatos Ixodes ricinus foi usado como modelo. Verificou-se maior sensibilidade da RT-PCR, para a detecção de Borrelia, em comparação com a microscopia de campo escuro padrão. A especificidade da técnica foi confirmada por clonagem e sequenciamento dos 552 pares de base obtidos. A análise filogenética das sequências obtidas revelou que pertencem a B. lusitaniae e genospecies B. afzelii. A RT-PCR apresentada neste trabalho poderá ser muito útil como teste de triagem para detectar a presença do patógeno. Especialmente quando em investigações, é necessária a extração total de RNA de carrapatos.(AU)

Alterações nos parâmetros hematológicos de Gallus gallus domesticus experimentalmente infectados por Borrelia anserina / Alterations in hematological parameters of Gallus gallus domesticus experimentally infected with Borrelia anserina

Borreliose aviária é uma doença septicêmica aguda, cosmopolita, que acomete diferentes espécies aviárias, sendo causada por Borrelia anserina Sakharoff, 1891. O objetivo do presente trabalho foi avaliar as alterações hematológicas em Gallus gallus domesticus experimentalmente infectados por B. anserina via vetor Argas (Persicargas) miniatus. Um total de 27 aves da espécie G. g. domesticus com 67 dias de vida, foram divididas em três grupos inteiramente casualizados contendo nove animais cada. Um grupo foi exposto a carrapatos infectados por B. anserina (Grupo 1); outro a carrapatos livres deste agente (Grupo 2); além de um grupo não exposto aos carrapatos (Grupo 3). Realizaram-se esfregaços sangüíneos diariamente, a partir do primeiro dia de exposição ao vetor, até o 25º dia pós-exposição (DPE). Amostras de sangue foram coletadas 3 dias antes da exposição aos carrapatos, e 3, 8 e 18 dias pós-exposição (DPE), para a realização dos hemogramas. O exame dos esfregaços das aves do Grupo 1 revelou grande número de espiroquetas. Os esfregaços sangüíneos dos Grupos 2 e 3 mantiveram-se negativos durante todo o período experimental. De acordo com os resultados das avaliações hematológicas, as aves do Grupo 1 apresentaram um quadro de anemia normocítica normocrômica em oito DPE, além de leucocitose com heterofilia e monocitose que cursaram paralelamente ao período de espiroquetemia. Concluiu-se que a infecção por B. anserina determinou nas aves do Grupo 1 alterações hematológicas compatíveis com uma infecção bacteriana de moderada gravidade, evoluindo para auto-cura, nas condições experimentais estabelecidas neste trabalho.(AU)

Avian spirochaetosis is a cosmopolite acute septicemic disease of many avian species, caused by Borrelia anserina Sakharoff, 1891. The present study assesses the estimate of the hematological alterations of Gallus gallus domesticus experimentally infected with B. anserina by vector Argas (Persicargas) miniatus. Twenty-seven fowls of the species G. g. domesticus, 67 days old, were randomly allocated into three groups composed by nine animals each. One group was exposed to B. anserina infected ticks (Group 1), other one to ticks free of this agent (Group 2), and another group not exposed to ticks (Group 3). Blood smears of the fowls were taken daily, since the first day the fowls were exposed to the ticks, up to the 25th day after exposure (DAE). Blood samples were collected three days before exposure, and three, eight and 18 DAE, for hematologic tests. The examination of Group 1 smears revealed large number of spirochaetes. Group 2 and 3 blood smears were negative during the whole period under exam. In agreement with the hematological evaluation results, the fowls exposed to infected ticks showed a normocytic normochromic anemia in eight DAE, leucocytosis with heterophilia and monocytosis concomitant with the spirochaetemia. We concluded that B. anserina infection determined on fowls of Group 1 hematological alterations compatible with bacterial infection of moderate gravity, developing to self-cure, in the experimental conditions established in this study.(AU)

Alterações nos parâmetros hematológicos de Gallus gallus domesticus experimentalmente infectados por Borrelia anserina / Alterations in hematological parameters of Gallus gallus domesticus experimentally infected with Borrelia anserina

Borreliose aviária é uma doença septicêmica aguda, cosmopolita, que acomete diferentes espécies aviárias, sendo causada por Borrelia anserina Sakharoff, 1891. O objetivo do presente trabalho foi avaliar as alterações hematológicas em Gallus gallus domesticus experimentalmente infectados por B. anserina via vetor Argas (Persicargas) miniatus. Um total de 27 aves da espécie G. g. domesticus com 67 dias de vida, foram divididas em três grupos inteiramente casualizados contendo nove animais cada. Um grupo foi exposto a carrapatos infectados por B. anserina (Grupo 1); outro a carrapatos livres deste agente (Grupo 2); além de um grupo não exposto aos carrapatos (Grupo 3). Realizaram-se esfregaços sangüíneos diariamente, a partir do primeiro dia de exposição ao vetor, até o 25º dia pós-exposição (DPE). Amostras de sangue foram coletadas 3 dias antes da exposição aos carrapatos, e 3, 8 e 18 dias pós-exposição (DPE), para a realização dos hemogramas. O exame dos esfregaços das aves do Grupo 1 revelou grande número de espiroquetas. Os esfregaços sangüíneos dos Grupos 2 e 3 mantiveram-se negativos durante todo o período experimental. De acordo com os resultados das avaliações hematológicas, as aves do Grupo 1 apresentaram um quadro de anemia normocítica normocrômica em oito DPE, além de leucocitose com heterofilia e monocitose que cursaram paralelamente ao período de espiroquetemia. Concluiu-se que a infecção por B. anserina determinou nas aves do Grupo 1 alterações hematológicas compatíveis com uma infecção bacteriana de moderada gravidade, evoluindo para auto-cura, nas condições experimentais estabelecidas neste trabalho.(AU)

Avian spirochaetosis is a cosmopolite acute septicemic disease of many avian species, caused by Borrelia anserina Sakharoff, 1891. The present study assesses the estimate of the hematological alterations of Gallus gallus domesticus experimentally infected with B. anserina by vector Argas (Persicargas) miniatus. Twenty-seven fowls of the species G. g. domesticus, 67 days old, were randomly allocated into three groups composed by nine animals each. One group was exposed to B. anserina infected ticks (Group 1), other one to ticks free of this agent (Group 2), and another group not exposed to ticks (Group 3). Blood smears of the fowls were taken daily, since the first day the fowls were exposed to the ticks, up to the 25th day after exposure (DAE). Blood samples were collected three days before exposure, and three, eight and 18 DAE, for hematologic tests. The examination of Group 1 smears revealed large number of spirochaetes. Group 2 and 3 blood smears were negative during the whole period under exam. In agreement with the hematological evaluation results, the fowls exposed to infected ticks showed a normocytic normochromic anemia in eight DAE, leucocytosis with heterophilia and monocytosis concomitant with the spirochaetemia. We concluded that B. anserina infection determined on fowls of Group 1 hematological alterations compatible with bacterial infection of moderate gravity, developing to self-cure, in the experimental conditions established in this study.(AU)