Correlation of Clinical, Histopathological and Histomorphometric Features of Canine Soft Tissue Sarcomas

Sarcomas de partes moles (STS) representam um grupo heterogêneo de tumores com características histológicas e comportamento biológico semelhantes. Este estudo teve como objetivo descrever a correlação entre as características clínicas, histopatológicas e histomorfométricas do STS em cães. Os registros médicos foram revisados ​​para identificar todos os cães nos quais um STS foi diagnosticado entre 2006-2017. Trinta casos foram incluídos, e amostras de tumor e prontuários médicos foram recuperados. A maioria dos cães era mestiça (40%) e 80% dos STS localizavam-se no tecido conjuntivo subcutâneo. A classificação histopatológica mostrou que sarcoma indiferenciado (17%) e tumor de bainha de nervo periférico (30%) foram os STS mais comuns. O STS de grau I foi obtido em 50% dos casos (15/30), e os tumores de grau II ou III comprometeram 43% (13/30) e 7% (2/30), respectivamente. O índice mitótico variou de zero a 26 (5,8 ± 7,5). A razão núcleo: citoplasma aumentada foi moderadamente associada com maior grau de tumor (p = 0,05; rS = 0,361) e índice mitótico (p = 0,05; rS = 0,355), enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05 ; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear).

Correlation of Clinical, Histopathological and Histomorphometric Features of Canine Soft Tissue Sarcomas

Sarcomas de partes moles (STS) representam um grupo heterogêneo de tumores com características histológicas e comportamento biológico semelhantes. Este estudo teve como objetivo descrever a correlação entre as características clínicas, histopatológicas e histomorfométricas do STS em cães. Os registros médicos foram revisados ​​para identificar todos os cães nos quais um STS foi diagnosticado entre 2006-2017. Trinta casos foram incluídos, e amostras de tumor e prontuários médicos foram recuperados. A maioria dos cães era mestiça (40%) e 80% dos STS localizavam-se no tecido conjuntivo subcutâneo. A classificação histopatológica mostrou que sarcoma indiferenciado (17%) e tumor de bainha de nervo periférico (30%) foram os STS mais comuns. O STS de grau I foi obtido em 50% dos casos (15/30), e os tumores de grau II ou III comprometeram 43% (13/30) e 7% (2/30), respectivamente. O índice mitótico variou de zero a 26 (5,8 ± 7,5). A razão núcleo: citoplasma aumentada foi moderadamente associada com maior grau de tumor (p = 0,05; rS = 0,361) e índice mitótico (p = 0,05; rS = 0,355), enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05 ; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear). enquanto o número de microvasos foi positivamente correlacionado com o grau de diferenciação (p = 0,05; rS = 0,362) e pleomorfismo nuclear (p = 0,036; rS = 0,384). A histomorfometria mostrou-se útil na avaliação do STS, representando uma ferramenta adicional correlacionada a fatores prognósticos bem estabelecidos (grau histopatológico, grau de diferenciação, pleomorfismo nuclear).(AU)

Morfologia e grânulos citoplasmáticos do corpo lúteo de vacas aneloradas (Bos taurus indicus) gestantes e não gestantes / Morphology and cytoplasmic granules of the corpus luteum in pregnant and non-pregnant Nelore cows

Avaliaram-se a proporção volumétrica dos constituintes do corpo lúteo e a distribuição de células lúteas com grânulos citoplasmáticos no corpo lúteo de animais Nelore ao longo da gestação e em animais não gestantes. Foram coletados ovários com corpos lúteos de 24 animais abatidos em frigorífico. Os animais foram distribuídos em dois grupos: gestantes e não gestantes. A idade gestacional foi determinada pela medição do comprimento apicocaudal do feto. Os ovários foram distribuídos segundo o trimestre gestacional: primeiro - gestação de até 90 dias; segundo - de 91 a 180 dias; e terceiro - de 181 a 270 dias. Os corpos lúteos, processados para inclusão em paraplast, foram avaliados em microscópio de luz. Na proporção volumétrica do corpo lúteo, os constituintes avaliados foram citoplasma e núcleo de células lúteas, tecido conjuntivo e fibroblastos, células endoteliais e pericitos e vasos sanguíneos. A proporção volumétrica de citoplasma de células lúteas reduziu de 46,1±2,8% para 37,9±3,5% e a de núcleo de células lúteas reduziu de 9,2±1,0% para 6,2±1,0%, do primeiro para o segundo trimestre. A proporção de tecido conjuntivo e fibroblastos aumentou de 20,9±5,4%, no primeiro trimestre, para 34,0±4,2%, no segundo trimestre. Grânulos citoplasmáticos foram evidenciados pelas técnicas histoquímicas xylidine ponceau e azul de bromofenol, que indicam sua provável composição proteica. A quantidade de células maiores com grânulos aumentou significativamente de 2,3±1,9%, no primeiro trimestre, para 25,5±20,3%, no segundo. A proporção volumétrica de citoplasma e núcleo de células lúteas diminuiu ao longo da gestação, e a de tecido conjuntivo aumentou. A quantidade de células lúteas maiores contendo grânulos também aumentou ao longo da gestação.(AU)

The purpose of this study was to evaluate, in cycling and pregnant Nelore cows, the volumetric proportion of the corpus luteum and the distribution of lutein cells with cytoplasmic granules. Twenty four ovaries with corpus luteum were collected in a slaughterhouse. The ovaries were distributed into two groups: pregnant and non-pregnant cows. The group of pregnant cows was divided according to the stage of pregnancy, by the crown-rump fetus length: 1st third - until 90 days, 2nd third - between 91 and 180 days and 3rd third - between 181 and 270 days. The corpus luteum were processed for inclusion in paraplast, and slides were stained for analysis in light microscopy. The constituents quantified in the volumetric proportion were: lutein cells cytoplasm and nucleus, connective tissue and fibroblasts, endothelial cells and pericyte and blood vessels. The volumetric proportion of lutein cells cytoplasm decreased significantly from 46.1±2.8% to 37.9±3.5%, and also decreased significantly in the nucleus from 9.2±1.0% to 6.2±1.0% between the first and the second trimester of pregnancy. The amount of connective tissue and fibroblasts increased significantly throughout gestation, with 20.9±5.4% on the first trimester and 34.0±4.2% on the second. Granules were evidenced by the histochemical technique of Xylidine Ponceau and Bromophenol blue, indicating their probable protein composition. The amount of lutein cells with granules increased throughout gestation, but significant difference was observed only between the first (2.3±1.9%) and second trimester (25.5±20.3%). The cytoplasmic and nucleus volumetric proportion decreased during pregnancy and the volumetric proportion of connective tissue increased. The amount of lutein cells with granules increased throughout pregnancy.(AU)

Impact of environmental stress on biochemical parameters of bacteria reducing chromium

Chromium pollution is produced in connection with industrial processes like in tanneries. It has been suggested that bioremediation could be a good option for clean up. The stress effect of variable chromate levels, pHs and growth temperatures on biochemical parameters of two Cr(VI) reducing bacterial strains Pseudomonas aeruginosa Rb-1 and Ochrobactrum intermedium Rb-2 was investigated. Transmission electrone microscopy (TEM) was performed to study the intracellular distribution of Cr(VI). It was observed that initial stress of 1000 µgmL-1 caused significant enhancement of all studied biochemical parameters at pH 7.0 and growth temperature of 37 °C showing great bioremediation potential of the strains. Transmission electron microscopy revealed that the distribution of chromium precipitates was not uniform as they were distributed in the cytoplasm as well as found associated with the periplasm and outer membrane. Fourier transform infrared spectroscopy showed the possible involvement of carboxyl, amino, sulpohonate and hydroxyl groups present on the bacterial cell surface for the binding of Cr(VI) ions. Cr(VI) stress brought about changes in the distridution of these functional groups. It can be concluded that the investigated bacterial strains adjust well to Cr(VI) stress in terms of biochemical parameters and along that exhibited alteration in morphology.

Antibacterial activity of alfa-terpineol may induce morphostructural alterations in Escherichia coli

The antibacterial effect of α-terpineol from Cinnamomum longepaniculatum (Gamble) N. Chao leaf essential oils were studied with special reference to the mechanism of inhibiting the standard strain of Escherichia coli (CMCC (B) 44102) growth at ultrastructural level. Minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) and time-kill curves of α-terpineol were determined; Escherichia coli was treated with α-terpineol and observed under a transmission electron microscope. The MIC and MBC values of α-terpineol were all 0.78 µL/mL, and time-kill curves showed the concentration-dependent. Under the transmission electron microscopy (TEM), Escherichia coli exposed to MIC levels of α-terpineol exhibited decreased cell size and irregular cell shape, cell wall and cell membrane were ruptured, nucleus cytoplasm was reduced and nuclear area gathered aside. Results suggest that α-terpineol has excellent antibacterial activity and could induce morphological changes of Escherichia coli.

Isolamento e caracterização de células mesenquimais do tecido adiposo de cães / Isolation and characterization of canine adipose-derived mesenchymal stem cells

As células-tronco mesenquimais (CTMs) diferenciam-se em várias linhagens e têm potencial de utilização na medicina regenerativa. As CTMs podem ser isoladas de vários tecidos de animais adultos. O objetivo deste estudo foi o isolamento das CTMs do tecido adiposo de cães, seu cultivo e diferenciação. Foram coletadas amostras de tecido adiposo subcutâneo de cinco cães. As CTMs foram isoladas, obtendo-se 146.803 (±49.533) células/g, cultivadas e diferenciadas em osteoblastos, adipócitos e condrócitos. Avaliaram-se a cinética do crescimento, a morfologia e a viabilidade celular. A caracterização citoquímica comprovou a natureza mesenquimal das células isoladas. O cultivo foi iniciado com 20.000 células/mL, verificando-se crescimento rápido até 72 horas (220.000 células/mL), fase exponencial entre 72 e 192 horas (455.000 células/mL), seguida de platô por saturação da densidade com 240 horas (355.000 células/mL). A viabilidade celular variou entre 96 e 100%. As CTMs em cultivo são fibroblásticas, fusiformes, com citoplasma basofílico e núcleo esférico. O comprimento médio das células variou entre 80,85 e 98,36µm, a largura média entre 17,40 e 28,79µm e o diâmetro médio do núcleo entre 15,46 e 17,74µm.(AU)

The applications of mesenchymal stem cells (MSCs) are becoming increasingly more promising for regenerative medicine and tissue engineering fields. MSCs can be isolated from adult animals from a variety of tissues, such as the adipose. This study focused on the isolation, culture and differentiation of MSCs from canine adipose tissue. Samples of subcutaneous adipose tissue from five dogs were collected. These cells were isolated, cultured and differentiated into osteoblasts, adipocytes and chondrocytes. We obtained 146,803 (±49,533) cells/g. Growth kinetics and viability studies were conducted during cell culture and the evaluation of cell differentiation was successfully performed by cytochemistry. The cell cultures were initiated with 20,000 MSCs/ml. Rapid growth was observed at 72 hours (220,000 cells/ml), the exponential phase between 72 and 192 hours (455,000 cells/ml) and saturation at 240 hours (355,000 cells/ml). The cellular viability ranged from 96 to 100%. MSCs in culture are fibroblastic cells, fusiform with basophilic cytoplasm and spherical nucleus. The length and width means of the cells and nuclear diameter ranged from 80.85-98.36µm, 17.40-28.79µm and 15.46-17.74µm respectively.(AU)

Lectin histochemical aspects of the ovarian lamellae epithelium of Genypterus blacodes (Schneider, 1801) / Padrão de reação lectino-histoquímico do epitélio laminar ovariano em Genypterus blacodes (Schneider, 1801)

The composition and distribution of the glycoconjugates (GCs) secreted by the epithelium of ovarian lamellae with reference to the reproductive biology of Genypterus blacodes (Schneider, 1801) through lectin hi stochemistry is here discussed. In this species, the epithelial cells that line the ovarian cavity presented sharp morphological variations along the reproductive cycle related to the mucus secretion that accompanies oocyte ma turation. During sp awning season, residues of mannose and N-acetylglucosamine were detected in the glycocalyx of those cells using lectinhistochemistry. N- acetylgalactosamine and fucose were also observed in the same zone. The greatest variations in the lectinhistochemical pattern were found in the apical cytoplasm composition in comparison to the basal zone of the cells. The results of the present study were discussed by comparing their possible functional implications.(AU)

A composição e distribuição dos glicoconjugados (GCs) secretado pelo epitélio do ovário de lamelas com referência à biologia reprodutiva de Genypterus blacodes (Schneider, 1801) através da histoquímica com lectinas é aqui discutida. Nesta espécie, as células epiteliais que revestem a cavidade do ovário apresentou acentuada variação morfológica ao longo do ciclo reprodutivo relacionados com a secreção de muco que acompanha a maturação do oócito. Durante a época de desova, de resíduos de manose e N-acetilglicosamina foram detectados no glicocálix dessas células usando histoquímica de lectinas. N-acetilgalactosamina e fucose também foram observados na mesma zona. As maiores variações no padrão de lectinas foram encontradas na composição do citoplasma apical, em comparação com a zona basal das células. Os resultados do presente estudo foram discutidos, comparando as suas possíveis implicações funcionais.(AU)

Inclusões intracitoplasmáticas hialinas na medular da adrenal de bovinos / Intracytoplasmic hyaline inclusions in adrenal medulla of bovine

Cytoplasmic inclusion bodies in adrenal medullary chromaffin cells have been described in various species including humans. These inclusions are believed to be related to certain infectious, toxic and neurodegenerative diseases. No reports concerning such adrenal inclusions have been described in bovines. Adrenal glands from twenty bovines were evaluated in a retrospective study. Seven of these exhibited inclusions - three cases of rabies, two cases of chronic suppurative bronchopneumonia, one case of chronic suppurative peritonitis, and one case of gangrenous mastitis. The inclusions were present in higher numbers especially in cases of rabies and also in one case of chronic suppurative bronchopneumonia. The inclusions were intracytoplasmic, eosinophilic, rounded, single or multiple, of various sizes, strongly stained by PAS and were present in higher numbers in the external layer of the adrenal medulla. The inclusions were negative when subjected to immunohistochemistry for detection of viral antigens in the cases of rabies. Although inclusion bodies were present in adrenal glands devoid of other histological alterations, they were more abundant in cases in which the adrenal gland had other alterations. The correlation between certain diseases and the development of inclusion bodies is not known, which highlights the importance of further studies on these inclusions in adrenal glands of bovines.(AU)

Antibacterial activity of venom from funnel web spider Agelena labyrinthica (Araneae: Agelenidae)

Since the number of microorganisms that are resistant to antibiotics has been increasing steadily, the need for combating these pathogens requires new pharmaceutical agents. To produce these substances, new models have been developed in recent decades. In our study, the venom of Agelena labyrinthica (Clerck, 1757) (Araneae: Agelenidae) was tested against ten bacterial strains, specifically, testing 1/100, 1/10 and 1/1 fractions of diluted venom against these bacteria. While the 1/100 dilution was successful in only one of ten bacterial strains, the 1/10 and the 1/1 were effective on six of ten bacterial strains. The most effective results, among these three different concentrations, were observed on Bacillus subtilis. The other five strains that were also sensitive to the dilutions showed similar inhibition zones. Morphological alterations on bacterial cells and comparison with normal cells were accomplished by scanning electron microscopy (SEM). The venom-treated cells, due to their loss of cytoplasm, shrank and presented cell wall depression.(AU)