Characterization of proteinuria in treated and untreated dogs naturally infected with Leishmania sp / Caracterização da proteinúria de cães tratados e não tratados, naturalmente infectados com Leishmania sp

In the search for an early biomarker of renal injury, this study aimed to determine the urinary protein profile of dogs with leishmaniasis without treatment and treated as determined by Brazilian legislation. The identification of proteinuria, its classification and the circumstances in which it takes place instigated this study. For this, 30 dogs from an outpatient clinic at a Veterinary Hospital in Belo Horizonte were evaluated. All animals underwent clinical and laboratory tests, which included renal biomarkers. The proteins were characterized using the SDS-page electrophoresis technique, and thus, a urinary protein profile was developed comparing patients considered clinically healthy with dogs infected with leishmaniasis that were under treatment and with untreated infected dogs. The results showed that the hematological and biochemical parameters showed similar behavior between the groups of healthy dogs and dogs with leishmaniasis treated, however a very heterogeneous pattern of urinary proteins can be observed and differed between healthy animals and animals with leishmaniasis, as well as between treated and untreated animals. The results suggest that the classification of proteinuria can be a tool that helps in the staging of animals infected with L. infantum and can differentiate them as to the severity of existing kidney injuries.(AU)

Na busca por um biomarcador precoce de injúria renal, este trabalho teve como objetivo determinar o perfil proteico urinário de cães infectados com leishmaniose sem tratamento e tratados conforme determina a legislação brasileira. A identificação da proteinúria, sua classificação e as circunstâncias em que ocorrem instigaram este estudo. Para tanto, foram avaliados 30 cães oriundos do atendimento clínico ambulatorial de um Hospital Veterinário em Belo Horizonte. Todos os animais passaram por exame clínico e laboratorial, que incluíram biomarcadores renais. As proteínas foram caracterizadas através da técnica de eletroforese por SDS-PAGE, e assim, foi elaborado um perfil proteico urinário comparando pacientes considerados clinicamente hígidos, com cães infectados por Leishmania (L.) infantum e que estavam sob tratamento e cães infectados não tratados. Os resultados demonstraram que os parâmetros hematológicos e bioquímicos apresentaram comportamento semelhante entre os grupos de cães hígidos e de cães infectados com L. infantum tratados, entretanto um padrão muito heterogêneo de proteínas urinárias pode ser observado e diferiu entre animais hígidos e animais com leishmaniose, assim como entre os animais tratados e não tratados. Os resultados sugerem que a classificação da proteinúria pode ser uma ferramenta que auxilia no estadiamento de animais infectados por L. infantum podendo diferenciá-los quanto à gravidade de lesões renais existentes.(AU)

Characterization of proteinuria in treated and untreated dogs naturally infected with Leishmania sp / Caracterização da proteinúria de cães tratados e não tratados, naturalmente infectados com Leishmania sp

In the search for an early biomarker of renal injury, this study aimed to determine the urinary protein profile of dogs with leishmaniasis without treatment and treated as determined by Brazilian legislation. The identification of proteinuria, its classification and the circumstances in which it takes place instigated this study. For this, 30 dogs from an outpatient clinic at a Veterinary Hospital in Belo Horizonte were evaluated. All animals underwent clinical and laboratory tests, which included renal biomarkers. The proteins were characterized using the SDS-page electrophoresis technique, and thus, a urinary protein profile was developed comparing patients considered clinically healthy with dogs infected with leishmaniasis that were under treatment and with untreated infected dogs. The results showed that the hematological and biochemical parameters showed similar behavior between the groups of healthy dogs and dogs with leishmaniasis treated, however a very heterogeneous pattern of urinary proteins can be observed and differed between healthy animals and animals with leishmaniasis, as well as between treated and untreated animals. The results suggest that the classification of proteinuria can be a tool that helps in the staging of animals infected with L. infantum and can differentiate them as to the severity of existing kidney injuries.(AU)

Na busca por um biomarcador precoce de injúria renal, este trabalho teve como objetivo determinar o perfil proteico urinário de cães infectados com leishmaniose sem tratamento e tratados conforme determina a legislação brasileira. A identificação da proteinúria, sua classificação e as circunstâncias em que ocorrem instigaram este estudo. Para tanto, foram avaliados 30 cães oriundos do atendimento clínico ambulatorial de um Hospital Veterinário em Belo Horizonte. Todos os animais passaram por exame clínico e laboratorial, que incluíram biomarcadores renais. As proteínas foram caracterizadas através da técnica de eletroforese por SDS-PAGE, e assim, foi elaborado um perfil proteico urinário comparando pacientes considerados clinicamente hígidos, com cães infectados por Leishmania (L.) infantum e que estavam sob tratamento e cães infectados não tratados. Os resultados demonstraram que os parâmetros hematológicos e bioquímicos apresentaram comportamento semelhante entre os grupos de cães hígidos e de cães infectados com L. infantum tratados, entretanto um padrão muito heterogêneo de proteínas urinárias pode ser observado e diferiu entre animais hígidos e animais com leishmaniose, assim como entre os animais tratados e não tratados. Os resultados sugerem que a classificação da proteinúria pode ser uma ferramenta que auxilia no estadiamento de animais infectados por L. infantum podendo diferenciá-los quanto à gravidade de lesões renais existentes.(AU)

Modified comet assay with Giemsa staining: a suitable method for assessing genotoxicity in rats / Ensaio cometa modificado com coloração de Giemsa: um método adequado para avaliar a genotoxicidade em ratos

The present study tested a comet assay that was modified for compatibility with Giemsa staining to assess the drug genotoxicity in the peripheral blood of rats. We analysed the peripheral blood of 16 female Wistar rats (N=8 rats/group) from a control group and from a group that was treated with an intraperitoneal injection of 50mg cyclophosphamide/kg. The comet assay was carried out with modifications of the blood volume and immersion time in the lysing solution and different combinations of electrophoresis conditions (running time, voltage and current), to Giemsa staining. The lysing time and electrophoresis conditions allowed for the expression of all classes of DNA damage during the electrophoresis run, and the comets were efficiently stained with Giemsa. The technique showed high reproducibility for the DNA classes. The results demonstrate that the modified comet assay with Giemsa staining can be standardized for routine laboratory procedures using a 20µL blood sample, 3h and 30min immersions in the lysing solution and electrophoresis runs with 23 to 25 V and 310 and 360mA of electrical current. The modified comet assay with Giemsa staining that was described in the present study was standardized to be applied in the laboratory routine.(AU)

O presente estudo testou um ensaio cometa modificado para a coloração de Giemsa para avaliar a genotoxicidade de fármacos no sangue periférico de ratos. Analisou-se o sangue periférico de 16 ratas Wistar (n=8 ratas/grupo) de um grupo controle e de um grupo que foi tratado com uma injeção intraperitoneal de 50mg/kg pv. de ciclofosfamida. O ensaio cometa foi realizado com modificações do volume sanguíneo e do tempo de imersão na solução de lise, bem como com diferentes combinações de condições de eletroforese (tempo de corrida, tensão e corrente), para coloração de Giemsa. O tempo de lise e as condições de eletroforese permitiram a expressão de todas as classes de danos no DNA durante a corrida de eletroforese, e os cometas foram eficientemente corados com Giemsa. A técnica mostrou alta reprodutibilidade para as classes de DNA. Os resultados demonstram que o ensaio cometa modificado com coloração de Giemsa foi padronizado para procedimentos laboratoriais de rotina usando-se uma amostra de sangue de 20µL, 3h30min de imersão na solução de lise e eletroforese com 23 a 25 V e 310 e 360mA. O ensaio cometa modificado com coloração de Giemsa descrito foi padronizado para ser aplicado na rotina laboratorial.(AU)

Electrophoretic analysis (sds-page) of canine urinary proteins according to the stage of chronic kidney disease / [Análise eletroforética (SDS-PAGE) de proteínas urinárias de cães de acordo com o estágio da doença renal crônica]

Glomerular proteinuria is characterized by the loss of high-molecular-weight proteins (HMWPs), while tubulointerstitial proteinuria is characterized by the loss of low-molecular-weight proteins (LMWPs). The objective was to assess the molecular weight of urinary proteins (MWUP) in dogs with naturally acquired CKD and determine the proportion of HMWPs and LMWPs according to CKD stage. Twenty-eight dogs with CKD were recruited and divided into 4 groups based on serum creatinine (Cr) levels (group1: Cr<1,4, n=8; group2: 1,45,0, n=5). The control group consisted of 5 healthy dogs. The MWUP was determined by SDS-PAGE. The urinary protein-to-creatinine ratio (UP/C) was used to quantitatively assess proteinuria. The electrophoresis pattern revealed a proportionally greater loss of HMWPthan of LMWP in all groups with CKD and an increased loss of LMWP in group 4 (P<0.05). These results suggest a predominance of glomerular injuries throughout all stages of CKD in these dogs and an increase in tubulointerstitial injury towards the end-stage of the disease. The results of the present study support the recommendation of SDS-PAGE as an effective technique for the qualitative assessment of proteinuria, as well as a method for assessing the severity and location of renal injury.(AU)

A proteinúria glomerular é caracterizada pela perda de proteínas de alto peso molecular (PAPM), enquanto a proteinúria tubulointersticial se caracteriza pela perda de proteínas de baixo peso molecular (PBPM). O objetivo do trabalho foi determinar o peso molecular das proteínas urinárias (PMPU) de cães com DRC naturalmente adquirida e a proporção de PAPM e PBPM de acordo com o estágio da DRC. Foram utilizados 28 cães com DRC, divididos em quatro grupos, de acordo com o nível sérico de creatinina (cr) (grupo 1: cr<1,4, n=8; grupo 2: 1,45,0, n=5). O grupo controle era composto por cinco cães saudáveis. O PMPU foi determinado por SDS-PAGE. A relação proteína:creatinina urinária (RPCU) foi utilizada como um método quantitativo de proteinúria. A eletroforese revelou uma perda proporcionalmente maior de PAPM, quando comparada às PBPM, em todos os grupos de DRC, bem como uma perda crescente de PBPM no grupo 4 (P<0,05). Esses resultados sugerem uma predominância de lesão glomerular em todos os estágios de DRC nesses cães e uma progressão crescente na lesão túbulo-intersticial no estágio terminal da doença. Os resultados deste estudo reafirmam a recomendação de que a eletroforese de proteínas urinárias é uma técnica qualitativa efetiva de avaliação da proteinúria, bem como um método que permite avaliar a extensão e a localização da lesão renal.(AU)

Electrophoretic analysis (sds-page) of canine urinary proteins according to the stage of chronic kidney disease / [Análise eletroforética (SDS-PAGE) de proteínas urinárias de cães de acordo com o estágio da doença renal crônica]

Glomerular proteinuria is characterized by the loss of high-molecular-weight proteins (HMWPs), while tubulointerstitial proteinuria is characterized by the loss of low-molecular-weight proteins (LMWPs). The objective was to assess the molecular weight of urinary proteins (MWUP) in dogs with naturally acquired CKD and determine the proportion of HMWPs and LMWPs according to CKD stage. Twenty-eight dogs with CKD were recruited and divided into 4 groups based on serum creatinine (Cr) levels (group1: Cr<1,4, n=8; group2: 1,45,0, n=5). The control group consisted of 5 healthy dogs. The MWUP was determined by SDS-PAGE. The urinary protein-to-creatinine ratio (UP/C) was used to quantitatively assess proteinuria. The electrophoresis pattern revealed a proportionally greater loss of HMWPthan of LMWP in all groups with CKD and an increased loss of LMWP in group 4 (P<0.05). These results suggest a predominance of glomerular injuries throughout all stages of CKD in these dogs and an increase in tubulointerstitial injury towards the end-stage of the disease. The results of the present study support the recommendation of SDS-PAGE as an effective technique for the qualitative assessment of proteinuria, as well as a method for assessing the severity and location of renal injury.(AU)

A proteinúria glomerular é caracterizada pela perda de proteínas de alto peso molecular (PAPM), enquanto a proteinúria tubulointersticial se caracteriza pela perda de proteínas de baixo peso molecular (PBPM). O objetivo do trabalho foi determinar o peso molecular das proteínas urinárias (PMPU) de cães com DRC naturalmente adquirida e a proporção de PAPM e PBPM de acordo com o estágio da DRC. Foram utilizados 28 cães com DRC, divididos em quatro grupos, de acordo com o nível sérico de creatinina (cr) (grupo 1: cr<1,4, n=8; grupo 2: 1,45,0, n=5). O grupo controle era composto por cinco cães saudáveis. O PMPU foi determinado por SDS-PAGE. A relação proteína:creatinina urinária (RPCU) foi utilizada como um método quantitativo de proteinúria. A eletroforese revelou uma perda proporcionalmente maior de PAPM, quando comparada às PBPM, em todos os grupos de DRC, bem como uma perda crescente de PBPM no grupo 4 (P<0,05). Esses resultados sugerem uma predominância de lesão glomerular em todos os estágios de DRC nesses cães e uma progressão crescente na lesão túbulo-intersticial no estágio terminal da doença. Os resultados deste estudo reafirmam a recomendação de que a eletroforese de proteínas urinárias é uma técnica qualitativa efetiva de avaliação da proteinúria, bem como um método que permite avaliar a extensão e a localização da lesão renal.(AU)

Modified comet assay with Giemsa staining: a suitable method for assessing genotoxicity in rats / Ensaio cometa modificado com coloração de Giemsa: um método adequado para avaliar a genotoxicidade em ratos

The present study tested a comet assay that was modified for compatibility with Giemsa staining to assess the drug genotoxicity in the peripheral blood of rats. We analysed the peripheral blood of 16 female Wistar rats (N=8 rats/group) from a control group and from a group that was treated with an intraperitoneal injection of 50mg cyclophosphamide/kg. The comet assay was carried out with modifications of the blood volume and immersion time in the lysing solution and different combinations of electrophoresis conditions (running time, voltage and current), to Giemsa staining. The lysing time and electrophoresis conditions allowed for the expression of all classes of DNA damage during the electrophoresis run, and the comets were efficiently stained with Giemsa. The technique showed high reproducibility for the DNA classes. The results demonstrate that the modified comet assay with Giemsa staining can be standardized for routine laboratory procedures using a 20µL blood sample, 3h and 30min immersions in the lysing solution and electrophoresis runs with 23 to 25 V and 310 and 360mA of electrical current. The modified comet assay with Giemsa staining that was described in the present study was standardized to be applied in the laboratory routine.(AU)

O presente estudo testou um ensaio cometa modificado para a coloração de Giemsa para avaliar a genotoxicidade de fármacos no sangue periférico de ratos. Analisou-se o sangue periférico de 16 ratas Wistar (n=8 ratas/grupo) de um grupo controle e de um grupo que foi tratado com uma injeção intraperitoneal de 50mg/kg pv. de ciclofosfamida. O ensaio cometa foi realizado com modificações do volume sanguíneo e do tempo de imersão na solução de lise, bem como com diferentes combinações de condições de eletroforese (tempo de corrida, tensão e corrente), para coloração de Giemsa. O tempo de lise e as condições de eletroforese permitiram a expressão de todas as classes de danos no DNA durante a corrida de eletroforese, e os cometas foram eficientemente corados com Giemsa. A técnica mostrou alta reprodutibilidade para as classes de DNA. Os resultados demonstram que o ensaio cometa modificado com coloração de Giemsa foi padronizado para procedimentos laboratoriais de rotina usando-se uma amostra de sangue de 20µL, 3h30min de imersão na solução de lise e eletroforese com 23 a 25 V e 310 e 360mA. O ensaio cometa modificado com coloração de Giemsa descrito foi padronizado para ser aplicado na rotina laboratorial.(AU)

Serum proteinogram and biochemistry of Holstein cows in the peripartum period / Proteinograma e bioquímica séricas de vacas da raça Holandesa no período periparto

In face of the few reports found in national literature analyzing the potential influence of parturition number in serum proteinogram and biochemical profile in the peripartum period of high yielding dairy cows, the aim of the present study was to comparatively evaluate the dynamics of these serum constituents' concentrations in blood samples obtained from primiparous and multiparous Holstein cows, 60 and 30 days prepartum and in the day of parturition. Data were analyzed by repeated measures variance analysis (ANOVA) and differences between groups and moments were analyzed by Tukey's test. Results were considered significant when P<0.05. Parity influenced levels of total protein, albumin, globulins, magnesium, cholesterol, which were higher in multiparous cows, as well as concentrations of ceruloplasmin, total calcium, chloride and alkaline phosphatase activity, which were higher in primiparous cows. Parturition influenced serum concentrations of ceruloplasmin (+58%), transferrin (-25%), haptoglobin (+33%), total protein (-17%), globulins (-25%), immunoglobulin A (-43%), immunoglobulin G (-24%), total calcium (-12%), inorganic phosphorus (-10%), chloride (+5%), sodium (+4%), cholesterol (-23%), triglycerides (-38.6%), as well as activities of aspartate aminotransferase (+14%) and alkaline phosphatase (+28%). A decrease in serum levels of total calcium, inorganic phosphorus, cholesterol and triglycerides was more pronounced in multiparous than in primiparous cows. These results demonstrate that the interpretation of proteinogram and serum constituents should take into consideration lactation number and the moment of parturition as relevant factors in high yielding dairy cows in the transition period.(AU)

Diante da escassez de relatos encontrados na literatura nacional quanto à potencial influência do número de parições sobre o proteinograma sérico e perfil bioquímico no período periparto de vacas leiteiras de alta produção, o objetivo do presente estudo foi avaliar comparativamente a dinâmica de constituintes séricos em amostras de sangue obtidas de vacas da raça Holandesa primíparas e pluríparas, 60 e 30 dias pré-parto e no dia do parto. Os resultados foram avaliados por análise de variância (ANOVA) com medidas repetidas no tempo e as diferenças entre grupos e entre momentos foram analisadas pelo teste de Tukey, sendo os resultados considerados significativos quando P<0,05. O número de parições influenciou os teores de proteína total, albumina, globulinas, magnésio e colesterol, que foram maiores em vacas pluríparas, bem como as concentrações de ceruloplasmina, cálcio total, cloreto e atividade de fosfatase alcalina, que foram maiores em vacas primíparas. O número de parições influenciou as concentrações séricas de ceruloplasmina (+58%), transferrina (-25%), haptoglobina (+33%), proteína total (-17%), globulinas (-25%), imunoglobulina A (-43%), imunoglobulina G (-24%), cálcio total (-12%), fósforo (-10%), cloretos (+5%), sódio (+4%), colesterol (-23%), triglicérides (-38.6%), bem como as atividades de aspartato aminotransferase (+14%) e fosfatase alcalina (+28%). A diminuição do teor sérico de cálcio total, fósforo, colesterol e triglicérides foi mais acentuada em vacas pluríparas do que em vacas primíparas. Esses resultados mostram que a interpretação do proteinograma e dos constituintes séricos deve levar em consideração o número de lactações e a ocorrência do parto como fatores relevantes em vacas leiteiras de alta produção no período de transição.(AU)

Serum proteinogram and biochemistry of Holstein cows in the peripartum period / Proteinograma e bioquímica séricas de vacas da raça Holandesa no período periparto

In face of the few reports found in national literature analyzing the potential influence of parturition number in serum proteinogram and biochemical profile in the peripartum period of high yielding dairy cows, the aim of the present study was to comparatively evaluate the dynamics of these serum constituents' concentrations in blood samples obtained from primiparous and multiparous Holstein cows, 60 and 30 days prepartum and in the day of parturition. Data were analyzed by repeated measures variance analysis (ANOVA) and differences between groups and moments were analyzed by Tukey's test. Results were considered significant when P<0.05. Parity influenced levels of total protein, albumin, globulins, magnesium, cholesterol, which were higher in multiparous cows, as well as concentrations of ceruloplasmin, total calcium, chloride and alkaline phosphatase activity, which were higher in primiparous cows. Parturition influenced serum concentrations of ceruloplasmin (+58%), transferrin (-25%), haptoglobin (+33%), total protein (-17%), globulins (-25%), immunoglobulin A (-43%), immunoglobulin G (-24%), total calcium (-12%), inorganic phosphorus (-10%), chloride (+5%), sodium (+4%), cholesterol (-23%), triglycerides (-38.6%), as well as activities of aspartate aminotransferase (+14%) and alkaline phosphatase (+28%). A decrease in serum levels of total calcium, inorganic phosphorus, cholesterol and triglycerides was more pronounced in multiparous than in primiparous cows. These results demonstrate that the interpretation of proteinogram and serum constituents should take into consideration lactation number and the moment of parturition as relevant factors in high yielding dairy cows in the transition period.(AU)

Diante da escassez de relatos encontrados na literatura nacional quanto à potencial influência do número de parições sobre o proteinograma sérico e perfil bioquímico no período periparto de vacas leiteiras de alta produção, o objetivo do presente estudo foi avaliar comparativamente a dinâmica de constituintes séricos em amostras de sangue obtidas de vacas da raça Holandesa primíparas e pluríparas, 60 e 30 dias pré-parto e no dia do parto. Os resultados foram avaliados por análise de variância (ANOVA) com medidas repetidas no tempo e as diferenças entre grupos e entre momentos foram analisadas pelo teste de Tukey, sendo os resultados considerados significativos quando P<0,05. O número de parições influenciou os teores de proteína total, albumina, globulinas, magnésio e colesterol, que foram maiores em vacas pluríparas, bem como as concentrações de ceruloplasmina, cálcio total, cloreto e atividade de fosfatase alcalina, que foram maiores em vacas primíparas. O número de parições influenciou as concentrações séricas de ceruloplasmina (+58%), transferrina (-25%), haptoglobina (+33%), proteína total (-17%), globulinas (-25%), imunoglobulina A (-43%), imunoglobulina G (-24%), cálcio total (-12%), fósforo (-10%), cloretos (+5%), sódio (+4%), colesterol (-23%), triglicérides (-38.6%), bem como as atividades de aspartato aminotransferase (+14%) e fosfatase alcalina (+28%). A diminuição do teor sérico de cálcio total, fósforo, colesterol e triglicérides foi mais acentuada em vacas pluríparas do que em vacas primíparas. Esses resultados mostram que a interpretação do proteinograma e dos constituintes séricos deve levar em consideração o número de lactações e a ocorrência do parto como fatores relevantes em vacas leiteiras de alta produção no período de transição.(AU)

Relação do proteinograma sérico e as fases folicular e luteal do ciclo estral em éguas / Relation of the serum proteins and the follicular and luteal phases of the estrous cycle in mares

O objetivo deste estudo foi obter o perfil eletroforético das proteínas séricas em éguas cíclicas e verificar as diferenças entre as fases folicular e luteal do ciclo estral nesta espécie. Foram utilizadas 18 éguas, totalizando 36 amostras de soro, sendo duas de cada égua. As amostras foram colhidas no estro e no diestro. As proteínas séricas totais foram obtidas pelo método do Biureto, a partir da utilização de Kits comerciais (LABTEST) e, as diferentes subfrações proteicas, por eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE). O eletroforetograma das proteínas séricas colocou em evidência a presença de 17 a 25 frações proteicas, cujos pesos moleculares variaram de 22 a 254 kDa. Identificaram-se duas proteínas ainda não nomeadas oficialmente, de massas moleculares (MM) 23 kDa e 144 kDa. Os valores médios ± SEM obtidos para cada variável no estro e no diestro, respectivamente, foram: proteínas totais (g/dL) 7,11 ± 0,07 e 7,36 ± 0,07; albumina (mg/dL) 4790,83 ± 69,10 e 5027,19 ± 69,10; α1 glicoproteína ácida (mg/dL) 4,90 ± 0,31 e 4,93 ± 0,31; ceruloplasmina (mg/dL) 15,28 ± 1,31 e 10,65 ± 1,31; haptoglobina (mg/dL) 22,70 ± 1,16 e 27,06 ± 1,16; transferrina (mg/dL) 329,00 ± 9,78 e 350,16 ± 9,78; IgA (mg/dL) 119,91 ± 6,30 e 107,03 ± 6,30; IgG (mg/dL) 1525,07 ± 40,18 e 1517,25 ± 40,18; MM 23 (mg/dL) 204,44 ± 8,61 e 219,79 ± 8,61; MM 144 (mg/dL) 22,13 ± 0,55 e 21,49 ± 0,55. Não houve diferença significativa das proteínas totais e suas frações do estro para o diestro. Conclui-se que as modificações hormonais durante as fases do ciclo estral da égua não interferem no proteinograma sérico.

This study aimed to obtain the electrophoretic profile of serum proteins in cyclic mares and to verify the differences between the follicular and luteal phases of the estrous cycle in this species. Eighteen mares were used, totaling 36 serum samples, two of each mare. Samples were collected both in estrus and in diestrus. Total serum proteins were obtained by the Biureto method, by using commercial kits (LABTEST), while the different protein subfractions by polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The electroforetogram of serum proteins evidenced the presence of 17 to 25 protein fractions, whose molecular weights ranged from 22 to 254 kDa. Two proteins that were not yet officially named were identified, of molecular weights (MW) of 23 kDa and 144 kDa. The mean values (± SEM) obtained for each variable in estrus and diestrus were, respectively: total proteins (g/dL) 7.11 ± 0.07 and 7.36 ± 0.07; albumin (mg/dL) 4790.83 ± 69.10 and 5027.19 ± 69.10; α1 acid glycoprotein (mg/dL) 4.90 ± 0.31 and 4.93 ± 0.31; ceruloplasmine (mg/dL) 15.28 ± 1.31 and 10.65 ± 1.31; haptoglobine (mg/dL) 22.70 ± 1.16 and 27.06 ± 1.16; transferrin (mg/dL) 329.00 ± 9.78 and 350.16 ± 9.78; IgA (mg/dL) 119.91 ± 6.30 and 107.03 ± 6.30; IgG (mg/dL) 1525.07 ± 40.18 and 1517.25 ± 40.18; MW 23 (mg/dL) 204.44 ± 8.61 and 219.79 ± 8.61; MW 144 (mg/dL) 22.13 ± 0.55 and 21.49 ± 0.55. No significant difference was verified in total proteins and its fractions in estrus and diestrus. The hormonal changes during the specific stages of the estrous cycle of the mare do not interfere with the serum proteinogram.

Sensitivity, specificity and comparison of three commercially available immunological tests in the diagnosis of Cryptosporidium species in animals

The study was conducted to compare the specificity of immunological diagnostic methods used for the diagnosis of Cryptosporidium species capable of causing life-threatening infection in both immunosuppressed and immunocompetent patients. For the detection of Cryptosporidium species in 79 animals with diarrhoea, we used three Copro-antigen tests: RIDASCREEN® Cryptosporidium test, Cryptosporidium 2nd Generation (ELISA) and RIDA®QUICK Cryptosporidium. For immunoassays we used positive and negative samples detected by means of polymerase chain reaction and validated by sequencing and nested polymerase chain reaction to confirm the presence six different species of Cryptosporidium species. Prevalence of cryptosporidiosis in the entire group determined by enzyme immunoassay, enzyme linked immunosorbent assay, immuno-chromatographic test and polymerase chain reaction was 34.17%, 27.84%, 6.33% and 27.84%, respectively. Sensitivity of animal samples with enzyme immunoassay, enzyme linked immunosorbent assay, and immuno-chromatographic test was 63.6%, 40.9% and 22.7%, resp., when questionable samples were considered positive, whereas specificity of enzyme immunoassay, enzyme linked immunosorbent assay and immuno-chromatographic test was 75.9%, 78.9% and 100%, respectively. Positive predictive values and negative predictive values were different for all the tests. These differences results are controversial and therefore reliability and reproducibility of immunoassays as the only diagnostic method is questionable. The use of various Cryptosporidium species in diagnosis based on immunological testing and different results obtained by individual tests indicate potential differences in Copro-antigens produced by individual Cryptosporidium species.(AU)

Proteinograma e concentração sérica de IgG em potros, do nascimento aos trinta dias de vida, tratados com plasma / Proteinogram and serum IgG concentration in newborn foals up to thirty days of life treated with plasma

Este trabalho teve por objetivo avaliar o proteinograma e concentrações séricas de IgG (após a padronização de teste ELISA) em potros do nascimento aos trinta dias de idade, antes e depois de mamarem colostro e serem tratados com plasma por via intravenosa. Foram utilizados 20 potros e suas respectivas mães, além de quatro animais doadores de plasma. Foram colhidas amostras de sangue dos potros em cinco momentos, logo após o nascimento e antes de mamar colostro (M1), dez horas após nascimento (M2), 24 horas após nascimento e previamente administração do plasma sanguíneo (M3), 48 horas de vida e 24 horas após administração do plasma sanguíneo (M4), e 30 dias após nascimento (M5). Foram colhidos sangue e colostro das éguas progenitoras no momento do parto. A concentração de proteína total (PT) e albumina foram determinadas em analisador bioquímico, a concentração de PT também foi avaliada em refratômetro manual. O fracionamento proteico foi realizado utilizando eletroforese em gel de agarose. A densidade do colostro foi avaliada com colostrômetros de refração BRIX e de densidade específica. A concentração de IgG total de todas as amostras foi determinada por teste ELISA. Com o sistema de ELISA aqui proposto foi possível determinar concentrações de IgG em amostras de soro, plasma e colostro equino com adequada repetibilidade. A média ± desvio padrão da concentração sérica de IgG dos potros ao nascer, foi de 15±8mg/dL, com dez horas de vida foi de 2.408±608mg/dL, se manteve em níveis semelhantes até 48 horas (2.364±784mg/dL) e diminuíram significativamente aos 30 dias de vida (1.414±586mg/dL). A concentração sérica e colostral de IgG nas éguas foi de 1.746±505mg/dL e 7.714±2.619mg/dL, respectivamente. A concentração plasmática de IgG dos doadores de plasma foi de 2.026±148mg/dL. Houve correlação positiva entre as concentrações séricas de IgG e PT (r=0,69 para refratômetro e r=0,76...(AU)

The aim of this study was to evaluate serum protein and serum IgG concentrations (after a direct enzyme immunoassay test ELISA optimization) in newborns foals from birth to thirty days of life before and after colostrum consumption and intravenous treatment with plasma. Twenty foals and their respective progenitors as well as four plasma donor's horses were used. Blood samples were obtained from newborn foals at five time points, immediately after birth and before colostrum intake (M1), ten hours after birth (M2), 24 hours after birth and prior administration of blood plasma (M3), 48 hours after birth and 24 hours after plasma administration (M4), and 30 days after birth (M5). Blood and colostrum samples were collected from the progenitor mares immediately postpartum. Concentration of total protein (TP) and albumin were determined using a biochemical analyzer. The TP concentration was also measured by refractometer. Fractions of total serum protein were separated using agarose gel electrophoresis. Colostrum density was evaluated using BRIX refractometer and specific density colostrometer. Total IgG concentration was determined by an enzyme-linked immunosorbent assay. With the ELISA system proposed here it was possible to determine IgG concentrations in serum, plasma, and equine colostrum samples with adequate repeatability. Serum IgG concentration in foals at birth was 15±8mg/dL (mean ± standard deviation) raising at ten hours (2,408±608mg/dL) and remaining at similar levels up to 48 hours of life (2,364±784mg/dL), and decreasing significantly at 30 days of age (1,414±586mg/dL). Serum and colostrum IgG concentrations of mares were 1,746±505mg/dL and 7,714±2,619mg/dL, respectively. The plasma IgG concentrations from donor mares were 2,026±148mg/dL. Total protein...(AU)

Pregnancy modulates serum proteins, hematological and blood biochemical variables of the Pêga donkey / Prenhez modula as proteínas séricas, variáveis hematológicas e bioquímicas sanguíneas do jumento Pêga

Considering the scarcity of information regarding blood parameters of Pêga donkeys (Equus asinus), and the influence of factors such as breed and physiological status on these parameters, this study aimed to evaluate the influence of pregnancy on hematological, blood biochemical and serum protein profiles of the Pêga donkey, using samples from 59 female adult donkeys, 22 pregnant and 37 non-pregnant, kept under field conditions. The parameters measured were counts of red blood cells (RBC), white blood cells (WBC), basophils, eosinophils, bands, segmented neutrophils, lymphocytes, monocytes and platelets; and the levels of packed cell volume, hemoglobin concentration, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, creatine kinase, gamma-glutamyl transferase, urea, glucose, cholesterol, triglycerides, total calcium, phosphorus, magnesium, chlorides, sodium, potassium, ionized calcium, creatinine, total protein, albumin, total, direct and indirect serum bilirubin. Serum protein fractionation was performed by sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), which found 10 proteins: immunoglobulins A and G, ceruloplasmin, transferrin, albumin, haptoglobin, 1-acid glycoprotein, 138 kDa (MWP138), 33 kDa (MWP33) and 23 kDa (MWP23) molecular weight proteins. RBC and triglycerides were higher in pregnant females. Urea, Immunoglobulin A, MWP138 and MWP23 concentrations were higher in non-pregnant mares. This study presented differences from previous studies, and some differences in blood variables between pregnant and non-pregnant Pêga donkeys, confirming that pregnancy causes significant metabolic changes, which must be considered in the clinical evaluation of these animals.

Considerando a escassez de informações sobre as variáveis hematológicas dos jumentos Pêga e a influência de fatores como raça e estado fisiológico sobre estes parâmetros, este estudo teve como objetivo avaliar a influência da prenhez sobre os perfis hematológico, bioquímico sanguíneo e de proteínas séricas de jumentos Pêga, utilizando amostras de 59 jumentas adultas, 22 prenhes e 37 não prenhes, mantidas sob condições de campo. Foram mensuradas as contagens de hemácias, leucócitos, basófilos, eosinófilos, neutrófilos bastonetes, neutrófilos segmentados, linfócitos, monócitos e plaquetas; volume globular, concentração de hemoglobina e os níveis de alanina aminotransferase, aspartato aminotransferase, fosfatase alcalina, creatina quinase, gama glutamil transferase, ureia, glicose, colesterol, triglicérides, cálcio total, fósforo, magnésio, cloretos, sódio, potássio, cálcio ionizado, creatinina, proteína total, albumina, bilirrubina total, direta e indireta. O fracionamento de proteínas séricas foi realizado pela eletroforese em gel de acrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE), o qual revelou 10 proteínas: imunoglobulinas A e G, ceruloplasmina, transferrina, albumina, haptoglobina, 1-glicoproteína ácida, proteína de peso molecular 138 kDa (PPM138), 33 kDa (PPM33) e 23 kDa (PPM23). A contagem de eritrócitos e os triglicérides séricos foram mais altos para as fêmeas prenhes. As concentrações de ureia, IgA, PPM138e PPM23 foram mais altas para jumentas não prenhes. Houve diferenças em relação a estudos anteriores, e diferenças entre as variáveis sanguíneas de jumentas Pêga prenhes e vazias confirmam que a prenhez causa mudanças metabólicas significantes, as quais devem ser consideradas na avaliação clínica destes animais.

Proteinograma e concentração sérica de IgG em potros, do nascimento aos trinta dias de vida, tratados com plasma / Proteinogram and serum IgG concentration in newborn foals up to thirty days of life treated with plasma

Este trabalho teve por objetivo avaliar o proteinograma e concentrações séricas de IgG (após a padronização de teste ELISA) em potros do nascimento aos trinta dias de idade, antes e depois de mamarem colostro e serem tratados com plasma por via intravenosa. Foram utilizados 20 potros e suas respectivas mães, além de quatro animais doadores de plasma. Foram colhidas amostras de sangue dos potros em cinco momentos, logo após o nascimento e antes de mamar colostro (M1), dez horas após nascimento (M2), 24 horas após nascimento e previamente administração do plasma sanguíneo (M3), 48 horas de vida e 24 horas após administração do plasma sanguíneo (M4), e 30 dias após nascimento (M5). Foram colhidos sangue e colostro das éguas progenitoras no momento do parto. A concentração de proteína total (PT) e albumina foram determinadas em analisador bioquímico, a concentração de PT também foi avaliada em refratômetro manual. O fracionamento proteico foi realizado utilizando eletroforese em gel de agarose. A densidade do colostro foi avaliada com colostrômetros de refração BRIX e de densidade específica. A concentração de IgG total de todas as amostras foi determinada por teste ELISA. Com o sistema de ELISA aqui proposto foi possível determinar concentrações de IgG em amostras de soro, plasma e colostro equino com adequada repetibilidade. A média ± desvio padrão da concentração sérica de IgG dos potros ao nascer, foi de 15±8mg/dL, com dez horas de vida foi de 2.408±608mg/dL, se manteve em níveis semelhantes até 48 horas (2.364±784mg/dL) e diminuíram significativamente aos 30 dias de vida (1.414±586mg/dL). A concentração sérica e colostral de IgG nas éguas foi de 1.746±505mg/dL e 7.714±2.619mg/dL, respectivamente. A concentração plasmática de IgG dos doadores de plasma foi de 2.026±148mg/dL. Houve correlação positiva entre as concentrações séricas de IgG e PT (r=0,69 para refratômetro e r=0,76 para bioquímico), GT (r=0,81) e gamaglobulina (r=0,85). Dez horas após o nascimento foi possível verificar a transferência de imunidade passiva, possibilitando adotar medidas profiláticas e/ou terapêuticas em haras de criação de cavalos. Considerando que a proteína total, globulinas totais e fração γ-globulina apresentam correlação com IgG, estas determinações são úteis para monitorar os potros após mamarem o colostro. Um litro de plasma administrado às 24 horas de vida não foi suficiente para aumentar as concentrações séricas de IgG, 24 horas após transfusão, em potros com adequada transferência de imunidade passiva.(AU)

The aim of this study was to evaluate serum protein and serum IgG concentrations (after a direct enzyme immunoassay test ELISA optimization) in newborns foals from birth to thirty days of life before and after colostrum consumption and intravenous treatment with plasma. Twenty foals and their respective progenitors as well as four plasma donor's horses were used. Blood samples were obtained from newborn foals at five time points, immediately after birth and before colostrum intake (M1), ten hours after birth (M2), 24 hours after birth and prior administration of blood plasma (M3), 48 hours after birth and 24 hours after plasma administration (M4), and 30 days after birth (M5). Blood and colostrum samples were collected from the progenitor mares immediately postpartum. Concentration of total protein (TP) and albumin were determined using a biochemical analyzer. The TP concentration was also measured by refractometer. Fractions of total serum protein were separated using agarose gel electrophoresis. Colostrum density was evaluated using BRIX refractometer and specific density colostrometer. Total IgG concentration was determined by an enzyme-linked immunosorbent assay. With the ELISA system proposed here it was possible to determine IgG concentrations in serum, plasma, and equine colostrum samples with adequate repeatability. Serum IgG concentration in foals at birth was 15±8mg/dL (mean ± standard deviation) raising at ten hours (2,408±608mg/dL) and remaining at similar levels up to 48 hours of life (2,364±784mg/dL), and decreasing significantly at 30 days of age (1,414±586mg/dL). Serum and colostrum IgG concentrations of mares were 1,746±505mg/dL and 7,714±2,619mg/dL, respectively. The plasma IgG concentrations from donor mares were 2,026±148mg/dL. Total protein, total globulins, and γ-globulin fraction showed correlation with IgG. Ten hours post birth was an adequate time to verify the transfer of passive immunity, allowing to adoption prophylactic and/or therapeutic measures in a horse farms. One liter of plasma administered at 24 hours of life was not sufficient to raise serum IgG concentrations in foals without passive immunity transfer failure.(AU)

Pregnancy modulates serum proteins, hematological and blood biochemical variables of the Pêga donkey / Prenhez modula as proteínas séricas, variáveis hematológicas e bioquímicas sanguíneas do jumento Pêga

Considering the scarcity of information regarding blood parameters of Pêga donkeys (Equus asinus), and the influence of factors such as breed and physiological status on these parameters, this study aimed to evaluate the influence of pregnancy on hematological, blood biochemical and serum protein profiles of the Pêga donkey, using samples from 59 female adult donkeys, 22 pregnant and 37 non-pregnant, kept under field conditions. The parameters measured were counts of red blood cells (RBC), white blood cells (WBC), basophils, eosinophils, bands, segmented neutrophils, lymphocytes, monocytes and platelets; and the levels of packed cell volume, hemoglobin concentration, alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, alkaline phosphatase, creatine kinase, gamma-glutamyl transferase, urea, glucose, cholesterol, triglycerides, total calcium, phosphorus, magnesium, chlorides, sodium, potassium, ionized calcium, creatinine, total protein, albumin, total, direct and indirect serum bilirubin. Serum protein fractionation was performed by sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), which found 10 proteins: immunoglobulins A and G, ceruloplasmin, transferrin, albumin, haptoglobin, 1-acid glycoprotein, 138 kDa (MWP138), 33 kDa (MWP33) and 23 kDa (MWP23) molecular weight proteins. RBC and triglycerides were higher in pregnant females. Urea, Immunoglobulin A, MWP138 and MWP23 concentrations were higher in non-pregnant mares. This study presented differences from previous studies, and some differences in blood variables between pregnant and non-pregnant Pêga donkeys, confirming that pregnancy causes significant metabolic changes, which must be considered in the clinical evaluation of these animals.(AU)

Considerando a escassez de informações sobre as variáveis hematológicas dos jumentos Pêga e a influência de fatores como raça e estado fisiológico sobre estes parâmetros, este estudo teve como objetivo avaliar a influência da prenhez sobre os perfis hematológico, bioquímico sanguíneo e de proteínas séricas de jumentos Pêga, utilizando amostras de 59 jumentas adultas, 22 prenhes e 37 não prenhes, mantidas sob condições de campo. Foram mensuradas as contagens de hemácias, leucócitos, basófilos, eosinófilos, neutrófilos bastonetes, neutrófilos segmentados, linfócitos, monócitos e plaquetas; volume globular, concentração de hemoglobina e os níveis de alanina aminotransferase, aspartato aminotransferase, fosfatase alcalina, creatina quinase, gama glutamil transferase, ureia, glicose, colesterol, triglicérides, cálcio total, fósforo, magnésio, cloretos, sódio, potássio, cálcio ionizado, creatinina, proteína total, albumina, bilirrubina total, direta e indireta. O fracionamento de proteínas séricas foi realizado pela eletroforese em gel de acrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE), o qual revelou 10 proteínas: imunoglobulinas A e G, ceruloplasmina, transferrina, albumina, haptoglobina, 1-glicoproteína ácida, proteína de peso molecular 138 kDa (PPM138), 33 kDa (PPM33) e 23 kDa (PPM23). A contagem de eritrócitos e os triglicérides séricos foram mais altos para as fêmeas prenhes. As concentrações de ureia, IgA, PPM138e PPM23 foram mais altas para jumentas não prenhes. Houve diferenças em relação a estudos anteriores, e diferenças entre as variáveis sanguíneas de jumentas Pêga prenhes e vazias confirmam que a prenhez causa mudanças metabólicas significantes, as quais devem ser consideradas na avaliação clínica destes animais.(AU)

Transferência de imunidade passiva em bezerras alimentadas com colostro de vacas com mastite subclínica / Passive immunity transfer in calves fed with colostrum from dams with subclinical mastitis

This study evaluated the influence of intramammary infection under the passive immunity transfer in newborn calves. Holstein cows (n=13) were monitored at delivery, and milked to obtain sterile colostrum samples (n=52) for microbiological examination. The newborn calves received 6 liters of colostrum from their dams up to 12 hours after birth. Blood samples were harvested before (D0) and after (D2) colostrum feeding. The passive immune transfer was evaluated by biochemical tests, electrophoresis and leukogram. Calves were distributed according to absence ­(IB-) or presence (IB+) of mammary gland infection in one or more quarters. All colostrum samples (n=52) were negative for fungal culture. Eight dams (8; 61%) had bacterial growth in one or more mammary quarter. In relation to mammary gland unit, bacterial growth was observed in 21.15% (11/52) of the colostrum samples, with predominance of coagulase negative staphylococcal infections. Statistical differences were not found among variables according to the groups. According to the experimental moments, the evaluated parameters (total protein, albumin, globulins, GGT and beta and alpha electrophoretic) increased after colostrum intake. Subclinical mastitis did not influence the passive immune transfer in Holstein calves evaluated by biochemical tests, electrophoresis or leukogram.

Este trabalho avaliou a influência da infecção bacteriana da glândula mamária (GM) sobre a transferência de imunidade passiva (TIP) em bezerros recém-nascidos. Vacas holandesas (n=13) foram observadas no momento da parição e ordenhadas para a obtenção de forma asséptica das amostras de colostro (n=52) para os testes microbiológicos. Os recém-nascidos receberam 6 litros de colostro de uma ordenha nas primeiras 12 horas de vida, proveniente de suas respectivas mães. Amostras de sangue foram colhidas antes (D0) e após (D2) o manejo do colostro. A TIP foi avaliada por meio de testes bioquímicos, eletroforese e leucograma. Os bezerros foram distribuídos conforme a ausência (IB-) ou presença (IB+) de infecção mamária em pelo menos uma GM de suas respectivas mães. Todas as amostras de colostro (n=52) foram negativas ao cultivo fúngico. Das 13 fêmeas, 8 (61%) apresentaram crescimento bacteriano em 1 quartos mamários. Considerando-se os quartos mamários, foi obtido isolamento bacteriano em 21,15% (11/52), observando-se predomínio de espécies bacterianas do grupo Staphylococcus coagulase negativa. Não foram encontradas diferenças entre os parâmetros de acordo com os grupos experimentais. Em relação aos momentos, foi possível verificar aumento nos valores de proteína total, globulinas, atividade sérica da gama glutamiltransferase e frações eletroforéticas beta e gamaglobulina após a ingestão do colostro materno. A mastite subclínica não influencia a transferência de imunidade passiva em bezerros recém-nascidos da raça holandesa, avaliados por teste bioquímicos, eletroforese e leucograma.

Transferência de imunidade passiva em bezerras alimentadas com colostro de vacas com mastite subclínica / Passive immunity transfer in calves fed with colostrum from dams with subclinical mastitis

This study evaluated the influence of intramammary infection under the passive immunity transfer in newborn calves. Holstein cows (n=13) were monitored at delivery, and milked to obtain sterile colostrum samples (n=52) for microbiological examination. The newborn calves received 6 liters of colostrum from their dams up to 12 hours after birth. Blood samples were harvested before (D0) and after (D2) colostrum feeding. The passive immune transfer was evaluated by biochemical tests, electrophoresis and leukogram. Calves were distributed according to absence ­(IB-) or presence (IB+) of mammary gland infection in one or more quarters. All colostrum samples (n=52) were negative for fungal culture. Eight dams (8; 61%) had bacterial growth in one or more mammary quarter. In relation to mammary gland unit, bacterial growth was observed in 21.15% (11/52) of the colostrum samples, with predominance of coagulase negative staphylococcal infections. Statistical differences were not found among variables according to the groups. According to the experimental moments, the evaluated parameters (total protein, albumin, globulins, GGT and beta and alpha electrophoretic) increased after colostrum intake. Subclinical mastitis did not influence the passive immune transfer in Holstein calves evaluated by biochemical tests, electrophoresis or leukogram.(AU)

Este trabalho avaliou a influência da infecção bacteriana da glândula mamária (GM) sobre a transferência de imunidade passiva (TIP) em bezerros recém-nascidos. Vacas holandesas (n=13) foram observadas no momento da parição e ordenhadas para a obtenção de forma asséptica das amostras de colostro (n=52) para os testes microbiológicos. Os recém-nascidos receberam 6 litros de colostro de uma ordenha nas primeiras 12 horas de vida, proveniente de suas respectivas mães. Amostras de sangue foram colhidas antes (D0) e após (D2) o manejo do colostro. A TIP foi avaliada por meio de testes bioquímicos, eletroforese e leucograma. Os bezerros foram distribuídos conforme a ausência (IB-) ou presença (IB+) de infecção mamária em pelo menos uma GM de suas respectivas mães. Todas as amostras de colostro (n=52) foram negativas ao cultivo fúngico. Das 13 fêmeas, 8 (61%) apresentaram crescimento bacteriano em 1 quartos mamários. Considerando-se os quartos mamários, foi obtido isolamento bacteriano em 21,15% (11/52), observando-se predomínio de espécies bacterianas do grupo Staphylococcus coagulase negativa. Não foram encontradas diferenças entre os parâmetros de acordo com os grupos experimentais. Em relação aos momentos, foi possível verificar aumento nos valores de proteína total, globulinas, atividade sérica da gama glutamiltransferase e frações eletroforéticas beta e gamaglobulina após a ingestão do colostro materno. A mastite subclínica não influencia a transferência de imunidade passiva em bezerros recém-nascidos da raça holandesa, avaliados por teste bioquímicos, eletroforese e leucograma.(AU)

Transferência de imunidade passiva em bezerras alimentadas com colostro de vacas com mastite subclínica / Passive immunity transfer in calves fed with colostrum from dams with subclinical mastitis

Este trabalho avaliou a influência da infecção bacteriana da glândula mamária (GM) sobre a transferência de imunidade passiva (TIP) em bezerros recém-nascidos. Vacas holandesas (n=13) foram observadas no momento da parição e ordenhadas para a obtenção de forma asséptica das amostras de colostro (n=52) para os testes microbiológicos. Os recém-nascidos receberam 6 litros de colostro de uma ordenha nas primeiras 12 horas de vida, proveniente de suas respectivas mães. Amostras de sangue foram colhidas antes (D0) e após (D2) o manejo do colostro. A TIP foi avaliada por meio de testes bioquímicos, eletroforese e leucograma. Os bezerros foram distribuídos conforme a ausência (IB-) ou presença (IB+) de infecção mamária em pelo menos uma GM de suas respectivas mães. Todas as amostras de colostro (n=52) foram negativas ao cultivo fúngico. Das 13 fêmeas, 8 (61%) apresentaram crescimento bacteriano em ≥1 quartos mamários. Considerando-se os quartos mamários, foi obtido isolamento bacteriano em 21,15% (11/52), observando-se predomínio de espécies bacterianas do grupo Staphylococcus coagulase negativa. Não foram encontradas diferenças entre os parâmetros de acordo com os grupos experimentais. Em relação aos momentos, foi possível verificar aumento nos valores de proteína total, globulinas, atividade sérica da gama glutamiltransferase e frações eletroforéticas beta e gamaglobulina após a ingestão do colostro materno. A mastite subclínica não influencia a transferência de imunidade passiva em bezerros recém-nascidos da raça holandesa, avaliados por teste bioquímicos, eletroforese e leucograma.(AU)

This study evaluated the influence of intramammary infection under the passive immunity transfer in newborn calves. Holstein cows (n=13) were monitored at delivery, and milked to obtain sterile colostrum samples (n=52) for microbiological examination. The newborn calves received 6 liters of colostrum from their dams up to 12 hours after birth. Blood samples were harvested before (D0) and after (D2) colostrum feeding. The passive immune transfer was evaluated by biochemical tests, electrophoresis and leukogram. Calves were distributed according to absence ­(IB-) or presence (IB+) of mammary gland infection in one or more quarters. All colostrum samples (n=52) were negative for fungal culture. Eight dams (8; 61%) had bacterial growth in one or more mammary quarter. In relation to mammary gland unit, bacterial growth was observed in 21.15% (11/52) of the colostrum samples, with predominance of coagulase negative staphylococcal infections. Statistical differences were not found among variables according to the groups. According to the experimental moments, the evaluated parameters (total protein, albumin, globulins, GGT and beta and alpha electrophoretic) increased after colostrum intake. Subclinical mastitis did not influence the passive immune transfer in Holstein calves evaluated by biochemical tests, electrophoresis or leukogram.(AU)

Pesquisa de hemoglobinopatias em cães da região metropolitana do Rio de Janeiro portadores de anemia crônica / Search for hemoglobinopathies in dogs with chronic anemia in the metropolitan region of Rio de Janeiro

Talassemias e hemoglobinopatias são condições hereditárias encontradas em humanos de todo o mundo. Em medicina veterinária, o polimorfismo de hemoglobinas tem sido estudado em animais de produção, mas não existem relatos de hemoglobinopatias em cães, e os estudos envolvendo o polimorfismo de hemoglobinas nesta espécie são escassos. Com o objetivo de pesquisar variantes da hemoglobina em cães, foram coletadas amostras de sangue de 202 caninos de variadas raças, sendo 130 portadores de anemia crônica (Grupo Experimental) e 72 animais clinicamente saudáveis (Grupo Controle). Estas amostras foram submetidas à eletroforese alcalina de hemoglobinas, que permitiu a separação e quantificação das frações de hemoglobina por densitometria, e posteriormente submetidas à eletroforese de hemoglobinas em meio ácido, técnica utilizada em medicina humana para a separação de frações de hemoglobinas variantes que não se diferenciam em meio alcalino. O eritrograma e índices hematimétricos foram obtidos concomitantemente. Os métodos utilizados demonstraram que a HbA é o maior componente da hemoglobina canina, e que uma pequena quantidade de HbA2 pode ser detectada em uma parcela dos animais avaliados, sendo que a maioria dos caninos apresentava exclusivamente HbA em sua composição. Concluiu-se que a presença ou ausência de HbA2 não interfere nos índices hematimétricos dos animais avaliados, e que quando comparadas as hemoglobinas dos grupos Experimental e Controle, não são observadas diferenças na distribuição das frações destas, além de não serem observadas hemoglobinas variantes nos caninos avaliados.(AU)

Thalassemias and hemoglobinopathies are hereditary conditions found in humans throughout the world. In veterinary medicine, hemoglobin polymorphism has been studied in production animals, but there are no reports of hemoglobinopathies in dogs, and studies involving hemoglobin polymorphism in this species are scarce. In order to search for hemoglobin variants in dogs, blood samples were collected from 202 dogs of various breeds, being 130 patients with chronic anemia (Experimental Group) and 72 clinically healthy animals (Control Group). These samples were subjected to alkaline electrophoresis of hemoglobin, which permitted separation and quantification of hemoglobin fractions by densitometry, and then subjected to hemoglobin electrophoresis in an acid medium, a technique used in human medicine for the separation of variant fractions of hemoglobin that do not differentiate in an alkaline medium. The erythrogram and RBC indices were obtained concurrently. The methods demonstrated that HbA is the major component of canine hemoglobin, and a small amount of HbA2 can be detected in some of the evaluated animals, and most dogs showed only HbA in its composition. It was concluded that the presence or absence of HbA2 does not interfere with RBC indices of evaluated animals, and the comparison between the hemoglobin of Experimental and Control groups showed no differences in fractions distribution between them, and there was no hemoglobin variants in evaluated canines.(AU)

Buffalo mozzarella chemical composition and authenticity assessment by electrophoretic profiling / Avaliação da composição química e autenticidade de muçarela de búfala por meio do perfil eletroforético

Buffalo milk mozzarella is often adulterated by the addition of cows milk. The aim of this study was to assess the quality of buffalo milk mozzarella by using electrophoresis (SDS-PAGE) to detect the addition of cows milk. Reference cheeses were produced exclusively from combinations of buffalo and cow milk, and labeled reference treatment buffalo or cow (RTB and RTC, respectively). Standardized cheeses were made by combining buffalo milk and 2.5%, 5.0%, 10%, 20%, 30%, 40% or 50% cows milk. A total of 9 cheese formulations were produced and either frozen immediately (time 0) or after 20 days (time 20). Eighteen commercial samples of buffalo mozzarella were sampled between 020 days of production. The chemical composition (moisture, ash, fat in dry matter, protein, total solids and defatted dry extract) and physicochemical characteristics (acidity) of the cheeses were evaluated. Proteins and water-soluble peptides (WSP) extracted from RTB, RTC and from the commercial samples, and were analyzed by SDS-PAGE electrophoresis under denaturing conditions. It was not possible to detect the inclusion of cows milk by the cheeses chemical and physicochemical properties. However, the separation and detection of peptide and protein fractions of the cheese was possible by electrophoresis. The results of the electrophoretic analysis suggest that 28% of the commercial samples considered here had evidence of the addition of cows milk. The methodology described here is important to identify occurrences of fraud in buffalo mozzarella production.(AU)

Objetivou-se com o presente estudo detectar fraudes por adição de leite de vaca em muçarela de búfala. Foram produzidos queijos exclusivamente com leite de búfala (TRB) e vaca (TRV) e com inclusões crescentes de leite bovino ao bubalino (2,5%, 5,0%, 10%, 20%, 30%, 40% e 50%), totalizando 9 formulações que foram congeladas no dia de fabricação (Tempo 0) e com 20 dias após a data de fabricação (Tempo 20). Foram coletadas 18 amostras comerciais de muçarela de búfala com até 20 dias de fabricação sendo congeladas no Tempo 20. Os queijos foram avaliados em relação à composição química (umidade, cinzas, gordura no extrato seco, proteínas, extrato seco total e extrato seco desengordurado) e característica físico-química (acidez titulável). Proteínas dos queijos muçarela produzidos e amostras comerciais e peptídeos solúveis em água (PSA) extraídos de TRB, TRV e amostras comerciais foram analisados por eletroforese sob condições desnaturantes por meio de dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Não foi possível detectar adulterações por meio dos resultados de composição química e caracterização físico-química. A técnica SDS-PAGE mostrou-se eficiente na separação e detecção das frações proteicas e peptídeos dos queijos. Em 28% das amostras comerciais de muçarela de búfala houve indícios de adulteração por adição de leite de vaca. Os resultados deste trabalho mostraram-se importantes para alertar sobre a ocorrência de fraudes em muçarela de búfala.(AU)

Pesquisa de hemoglobinopatias em cães da região metropolitana do Rio de Janeiro portadores de anemia crônica / Search for hemoglobinopathies in dogs with chronic anemia in the metropolitan region of Rio de Janeiro

Talassemias e hemoglobinopatias são condições hereditárias encontradas em humanos de todo o mundo. Em medicina veterinária, o polimorfismo de hemoglobinas tem sido estudado em animais de produção, mas não existem relatos de hemoglobinopatias em cães, e os estudos envolvendo o polimorfismo de hemoglobinas nesta espécie são escassos. Com o objetivo de pesquisar variantes da hemoglobina em cães, foram coletadas amostras de sangue de 202 caninos de variadas raças, sendo 130 portadores de anemia crônica (Grupo Experimental) e 72 animais clinicamente saudáveis (Grupo Controle). Estas amostras foram submetidas à eletroforese alcalina de hemoglobinas, que permitiu a separação e quantificação das frações de hemoglobina por densitometria, e posteriormente submetidas à eletroforese de hemoglobinas em meio ácido, técnica utilizada em medicina humana para a separação de frações de hemoglobinas variantes que não se diferenciam em meio alcalino. O eritrograma e índices hematimétricos foram obtidos concomitantemente. Os métodos utilizados demonstraram que a HbA é o maior componente da hemoglobina canina, e que uma pequena quantidade de HbA2 pode ser detectada em uma parcela dos animais avaliados, sendo que a maioria dos caninos apresentava exclusivamente HbA em sua composição. Concluiu-se que a presença ou ausência de HbA2 não interfere nos índices hematimétricos dos animais avaliados, e que quando comparadas as hemoglobinas dos grupos Experimental e Controle, não são observadas diferenças na distribuição das frações destas, além de não serem observadas hemoglobinas variantes nos caninos avaliados.(AU)

Thalassemias and hemoglobinopathies are hereditary conditions found in humans throughout the world. In veterinary medicine, hemoglobin polymorphism has been studied in production animals, but there are no reports of hemoglobinopathies in dogs, and studies involving hemoglobin polymorphism in this species are scarce. In order to search for hemoglobin variants in dogs, blood samples were collected from 202 dogs of various breeds, being 130 patients with chronic anemia (Experimental Group) and 72 clinically healthy animals (Control Group). These samples were subjected to alkaline electrophoresis of hemoglobin, which permitted separation and quantification of hemoglobin fractions by densitometry, and then subjected to hemoglobin electrophoresis in an acid medium, a technique used in human medicine for the separation of variant fractions of hemoglobin that do not differentiate in an alkaline medium. The erythrogram and RBC indices were obtained concurrently. The methods demonstrated that HbA is the major component of canine hemoglobin, and a small amount of HbA2 can be detected in some of the evaluated animals, and most dogs showed only HbA in its composition. It was concluded that the presence or absence of HbA2 does not interfere with RBC indices of evaluated animals, and the comparison between the hemoglobin of Experimental and Control groups showed no differences in fractions distribution between them, and there was no hemoglobin variants in evaluated canines.(AU)