Significant production of vanillin and in vitro amplification of ech gene in local bacterial isolates / Produção significativa de vanilina e amplificação in vitro do gene ech em isolados bacterianos locais

Abstract Vanillin is the major component which is responsible for flavor and aroma of vanilla extract and is produced by 3 ways: natural extraction from vanilla plant, chemical synthesis and from microbial transformation. Current research was aimed to study bacterial production of vanillin from native natural sources including sewage and soil from industrial areas. The main objective was vanillin bio-production by isolating bacteria from these native sources. Also to adapt methodologies to improve vanillin production by optimized fermentation media and growth conditions. 47 soil and 13 sewage samples were collected from different industrial regions of Lahore, Gujranwala, Faisalabad and Kasur. 67.7% bacterial isolates produced vanillin and 32.3% were non-producers. From these 279 producers, 4 bacterial isolates selected as significant producers were; A3, A4, A7 and A10. These isolates were identified by ribotyping as A3 Pseudomonas fluorescence (KF408302), A4 Enterococcus faecium (KT356807), A7 Alcaligenes faecalis (MW422815) and A10 Bacillus subtilis (KT962919). Vanillin producers were further tested for improved production of vanillin and were grown in different fermentation media under optimized growth conditions for enhanced production of vanillin. The fermentation media (FM) were; clove oil based, rice bran waste (residues oil) based, wheat bran based and modified isoeugenol based. In FM5, FM21, FM22, FM23, FM24, FM30, FM31, FM32, FM34, FM35, FM36, and FM37, the selected 4 bacterial strains produced significant amounts of vanillin. A10 B. subtilis produced maximum amount of vanillin. This strain produced 17.3 g/L vanillin in FM36. Cost of this fermentation medium 36 was 131.5 rupees/L. This fermentation medium was modified isoeugenol based medium with 1% of isoeugenol and 2.5 g/L soybean meal. ech gene was amplified in A3 P. fluorescence using ech specific primers. As vanillin use as flavor has increased tremendously, the bioproduction of vanillin must be focused.

Resumo A vanilina é o principal componente responsável pelo sabor e aroma do extrato de baunilha e é produzida de três formas: extração natural da planta da baunilha, síntese química e transformação microbiana. A pesquisa atual teve como objetivo estudar a produção bacteriana de vanilina a partir de fontes naturais nativas, incluindo esgoto e solo de áreas industriais. O objetivo principal era a bioprodução de vanilina por meio do isolamento de bactérias dessas fontes nativas. Também para adaptar metodologias para melhorar a produção de vanilina por meio de fermentação otimizada e condições de crescimento. Foram coletadas 47 amostras de solo e 13 de esgoto de diferentes regiões industriais de Lahore, Gujranwala, Faisalabad e Kasur; 67,7% dos isolados bacterianos produziram vanilina e 32,3% eram não produtores. Desses 279 produtores, 4 isolados bacterianos selecionados como produtores significativos foram: A3, A4, A7 e A10. Esses isolados foram identificados por ribotipagem como fluorescência A3 Pseudomonas (KF408302), A4 Enterococcus faecium (KT356807), A7 Alcaligenes faecalis (MW422815) e A10 Bacillus subtilis (KT962919). Os produtores de vanilina foram posteriormente testados para produção aprimorada de vanilina e foram cultivados em diferentes meios de fermentação sob condições de crescimento otimizadas para produção aprimorada de vanilina. Os meios de fermentação (FM) foram: à base de óleo de cravo, à base de resíduos de farelo de arroz (resíduos de óleo), à base de farelo de trigo e à base de isoeugenol modificado. Em FM5, FM21, FM22, FM23, FM24, FM30, FM31, FM32, FM34, FM35, FM36 e FM37, as 4 cepas bacterianas selecionadas produziram quantidades significativas de vanilina. A10 B. subtilis produziu quantidade máxima de vanilina. Essa cepa produziu 17,3 g / L de vanilina em FM36. O custo desse meio de fermentação 36 foi de 131,5 rúpias / L. Esse meio de fermentação foi um meio à base de isoeugenol modificado com 1% de isoeugenol e 2,5 g / L de farelo de soja. O gene ech foi amplificado em A3 P. fluorescence usando primers específicos para ech. Como o uso da vanilina como sabor aumentou tremendamente, a bioprodução da vanilina deve ser focada.

In vitro bacterial probiotic selection from Nannostomus beckfordi, an Amazon ornamental fish / [Seleção in vitro de bactérias probióticas do peixe ornamental Amazônico Nannostomus beckfordi]

This study aimed to isolate and select in vitro bacteria with probiotic potential for the Amazon ornamental fish Nannostomus beckfordi. For isolate, twelve fish underwent surgery procedure to remove their intestinal tract, macerate and then inoculate in the plate petri containing de Man Rugosa Sharped Agar (MRS). After bacterial growth (48 hours at 35ºC), selected strains were inoculated in MRS broth and submitted to resistance test with NaCl (0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 3.0%), pH (4, 5, 6, 8 and 9) and bile salts (5% w/v). Inhibition test against pathogenic bacteria Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae and Aeromonas Jandaei was also performed. Within the isolated strains group (23 strains), only six (S1, S2, S3, S4, S5 and S6) showed probiotic potential. Strains S1 and S6 showed the greater resistance for NaCl (0.5% and 1%) and pH (5 and 6), but only S1 obtained better results to resist the bile salts. Even against pathogenic bacteria, the S1 showed the best results with inhibition halos greater than 9 mm. In the end, this bacterial strain (S1) was identified as Enterococcus faecium 11037CHB. Thus, this is the first report regarding isolated autochthonous bacterium E. faecium with probiotic potential of N. beckfordi.

O objetivo deste estudo foi isolar e selecionar in vitro bactérias com potencial probiótico do peixe ornamental Amazônico Nannostomus beckfordi. Para o isolamento, retirou-se o intestino de 12 espécimes, que foram macerados, homogeneizados e semeados em placa de petri contento Ágar Man Rogosa e Sharpe (MRS). Posteriormente ao crescimento bacteriano (48 horas a 35ºC), as cepas selecionadas foram mantidas em caldo MRS e submetidas a testes de resistência a NaCl (0,5, 1,0, 1,5, 2,0 e 2,5 e 3,0%), pH (4, 5, 6, 8 e 9) e sais biliares (5% p/v). O antagonismo foi realizado frente as bactérias patogênicas Aeromonas hydrophila, Pseudomonas aeroginosa, Streptococcus agalactiae e Aeromonas jandaei. Das cepas isoladas (23 cepas), apenas seis (C1, C2, C3, C4, C5 e C6) apresentaram potencial probiótico. As cepas C1 e C6 tiveram maior resistência (p<0,05) para o NaCl (0,5 e 1%) e pH (5 a 6), na presença de sais biliares somente a C1 teve a melhor resistência de crescimento. Para o antagonismo frente as bactérias patogênicas, a C1 apresentou halo de inibição maior que 9 mm. Sendo esta cepa bactéria (C1) identificada como Enterococcus faecium 11037 CHB. Portanto, este é o primeiro relato do isolamento da bactéria autóctone E. faecium em N. beckfordi com potencial probiótico.

In vitro selection of autochthonous bacterium with probiotic potential for the neotropical fish piauçu Megaleporinus microcephalus / [Seleção in vitro de bactéria autóctone com potencial probiótico para o peixe neotropical piauçu Megaleporinus macrocephalus]

The study aimed to isolate, identify, and apply in vitro tests on bacteria with autochthonous probiotic potential isolated from fifteen healthy specimens of Megaleporinus macrocephalus. The strains were selected from the intestinal tract of fish and inoculated in the Petri plate containing Sharp Man Rogosa Agar (MRS) for (48 hours at 35ºC). They were isolated based on a test of catalase, Gram stain, tolerance to different gradients NaCl (1, 2 and 3%), pH (4, 5, 6, 8 and 9) values and bile salts (2.5 and 5%), in addition to the inhibition zone against pathogens. Of the 42 strains isolated, ST1 and ST9 had higher values (p<0.05) for total viable cells (31.80±0.07 and 32.51±0.05 CFU/mL × 108) respectively. In the resistance tests, strains ST1 and ST9 presented the best results, with emphasis on ST9 in the gradients of pH, high values of bile salts and larger inhibition zones against Aeromonas hydrophila and Aeromonas jandaei. The strains with the best results in the tests, ST1 and ST9, were identified by the MALDI-TOF-MS method as Enterococcus faecium. Thus, the isolated E. faecium bacteria, may be recommended as for probiotic use in farming the M. macrocephalus.

O presente estudo visou isolar, identificar e aplicar testes in vitro em bactérias com potencial probiótico, autóctones, isoladas de 15 espécimes saudáveis de Megaleporinus macrocephalus. As cepas foram selecionadas do trato intestinal dos peixes e inoculadas em placas de Petri contendo Man Rogosa Sharped Agar (MRS), por 48 horas, a 35ºC. Foram isoladas com base em teste de catalase, coloração de Gram, tolerância a diferentes gradientes de NaCl (1, 2 e 3%), valores de pH (4, 5, 6, 8 e 9) e sais biliares (2,5 e 5%), além do halo de inibição contra patógenos. Das 42 cepas isoladas, ST1 e ST9 apresentaram maiores valores (P<0,05) para células viáveis totais (31,80±0,07 e 32,51±0,05 UFC/mL × 108), respectivamente. Nos testes de resistência, as cepas ST1 e ST9 apresentaram os melhores resultados, com destaque para ST9 nos gradientes de pH, altos valores de sais biliares e maiores halos de inibição contra Aeromonas hydrophila e Aeromonas jandaei. As cepas com melhores resultados nos testes, ST1 e ST9, foram identificadas pelo método de MALDI-TOF-MS como Enterococcus faecium. Assim, a bactéria isolada Enterococcus faecium, pode ser recomendada para uso probiótico na criação do M. macrocephalus.

Prevalence of antimicrobial-resistant Enterococcus faecium in commercial cattle: a systematic review and meta-analysis / Prevalência de Enterococcus faecium resistente a antimicrobianos na bovinocultura comercial: uma revisão sistemática e meta-análise

The use of antimicrobials in animals is broader compared to humans, which can influence the increase in microbial resistance. This study was a systematic review which determined the prevalence of resistant Enterococcus faecium in commercial cattle. Eighteen studies were included, mainly carried out in European countries (n=9) and in the production (n= 11) and retail (n= 7) environments. The main material used in the detection of the microorganism was milk. The mean prevalence of resistant E. faecium in cattle was 4.3% (95% CI = 2.8-5.0%), but the prevalence in Asia was higher [25.4% (95% CI = 20.5-30.6%)]. There was a higher prevalence in samples from retail (13.7%; 95% CI=11.5-16.1%) and collected mainly from equipment surfaces (12.5%; 95% CI= 5.5-26.1%) than in the others tested samples. Antibiotics frequently tested were vancomycin, tetracycline, ciprofloxacin, and erythromycin, with resistance percentages of 50%, 59%, 79%, and 94%, respectively. These results reinforce the need to plan interventions to reduce antimicrobials in food-producing animals.

O uso de antimicrobianos em animais é mais frequente quando comparado aos humanos, e isso pode influenciar no desenvolvimento da resistência microbiana. O presente estudo teve como objetivo realizar uma revisão sistemática cujo desfecho de interesse foi a prevalência de E. faecium resistente a antimicrobianos na bovinocultura comercial. Foram incluídos 18 estudos, realizados principalmente em países europeus (n=9), em ambientes de produção (n=11) e destinados ao varejo (n=7). O principal material utilizado na detecção do microrganismo foi o leite. A prevalência de E. faecium resistente em bovinos foi de 4,3% (IC 95% -2,8-5,0%), mas a prevalência na Ásia foi maior [25,4% (IC 95%=20,5-30,6%)]. Houve maior prevalência em amostras do varejo (13,7%; IC 95%=11,5-16,1%) e coletadas principalmente de superfícies de equipamentos (12,5%; IC 95%-5,5-26,1%). Os antibióticos frequentemente testados foram vancomicina, tetraciclina, ciprofloxacino, e eritromicina, com percentuais de resistência de 50%, 59%, 79%, e 94%, respectivamente. Estes resultados reforçam a necessidade de intervenções planejadas para reduzir a utilização de antimicrobianos nos animais criados para produção de alimentos.

Effect of the application of probiotic strains of Enterococcus faecium on the physicochemical and sensory characteristics of coalho cheese / Efeito da aplicação de cepas probióticas de Enterococcus faecium nas características físicoquímicas e sensoriais de queijo coalho

Coalho cheese is a typical Northeastern Brazilian food whose production and consumption has expanded considerably to other regions of the country. Despite its cultural and socioeconomic relevance, coalho cheese still has a negative reputation due to problems in its physicochemical and microbiological quality standards, especially when it is produced artisanally. For this reason, many researchers have been looking for alternatives to improve the quality and the notoriety of this product, such as the application of probiotic strains to inhibit pathogens. However, in addition to the research related to the desired probiotic properties and the safety of strains for food application, it is important to know the possible changes in the food matrix caused by this intervention. In this context, the aim of this study was to evaluate the effect of the incorporation of probiotic strains of Enterococcus faecium on the physicochemical and sensory characteristics of coalho cheese. The cheeses were made with pasteurized cow milk and probiotic strains of E. faecium were added during production. Cheeses were also made without adding the strains, and considered as control cheeses. The final products were evaluated for moisture, pH, titratable acidity, total carbohydrates, proteins, lipids, ash, color, organic acid profile, and sensory attributes.(AU)

O queijo coalho é um queijo típico do Nordeste do Brasil, cuja produção e consumo se expandiram consideravelmente para outras regiões do país. Apesar de sua relevância cultural e socioeconômica, o queijo coalho apresenta uma reputação negativa, devido a problemas em seus padrões de qualidade físicoquímicos e microbiológicos, principalmente quando é produzido artesanalmente. Por esse motivo, muitos pesquisadores têm buscado alternativas para melhoria da qualidade e notabilidade desse produto, como a aplicação de cepas probióticas que inibem patógenos. No entanto, além da investigação relacionada às propriedades probióticas desejadas e de segurança das cepas para aplicação em alimentos, é importante conhecer as possíveis alterações na matriz alimentícia em virtude dessa adição. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da incorporação de cepas probióticas de Enterococcus faecium nas características físico-químicas e sensoriais de queijo coalho. Os queijos foram elaborados com leite de vaca pasteurizado e adicionados de cepas probióticas de E. faecium durante a produção. Também foram elaborados queijos sem adição das cepas, considerados queijos controle. Os produtos finais foram avaliados quanto a umidade, pH, acidez titulável, carboidratos totais, proteínas, lipídios, cinzas, cor, perfil de ácidos orgânicos e atributos sensoriais. Além disso, procedeu-se a contagem de bactérias ácido lácticas viáveis. Os queijos coalho adicionados de E. faecium apresentaram maior acidez titulável e menor pH. Além disso, houve uma redução no teor de carboidratos, atribuída à degradação da lactose. O. perfil de ácidos orgânicos também variou, destacando-se pelo aumento da concentração de ácido láctico em um fator de 3,5 e pela ausência de ácido cítrico, como possível resultado do metabolismo de E. faecium na produção de compostos aromáticos(AU)

Effect of the application of probiotic strains of Enterococcus faecium on the physicochemical and sensory characteristics of coalho cheese / Efeito da aplicação de cepas probióticas de Enterococcus faecium nas características físicoquímicas e sensoriais de queijo coalho

Coalho cheese is a typical Northeastern Brazilian food whose production and consumption has expanded considerably to other regions of the country. Despite its cultural and socioeconomic relevance, coalho cheese still has a negative reputation due to problems in its physicochemical and microbiological quality standards, especially when it is produced artisanally. For this reason, many researchers have been looking for alternatives to improve the quality and the notoriety of this product, such as the application of probiotic strains to inhibit pathogens. However, in addition to the research related to the desired probiotic properties and the safety of strains for food application, it is important to know the possible changes in the food matrix caused by this intervention. In this context, the aim of this study was to evaluate the effect of the incorporation of probiotic strains of Enterococcus faecium on the physicochemical and sensory characteristics of coalho cheese. The cheeses were made with pasteurized cow milk and probiotic strains of E. faecium were added during production. Cheeses were also made without adding the strains, and considered as control cheeses. The final products were evaluated for moisture, pH, titratable acidity, total carbohydrates, proteins, lipids, ash, color, organic acid profile, and sensory attributes.

O queijo coalho é um queijo típico do Nordeste do Brasil, cuja produção e consumo se expandiram consideravelmente para outras regiões do país. Apesar de sua relevância cultural e socioeconômica, o queijo coalho apresenta uma reputação negativa, devido a problemas em seus padrões de qualidade físicoquímicos e microbiológicos, principalmente quando é produzido artesanalmente. Por esse motivo, muitos pesquisadores têm buscado alternativas para melhoria da qualidade e notabilidade desse produto, como a aplicação de cepas probióticas que inibem patógenos. No entanto, além da investigação relacionada às propriedades probióticas desejadas e de segurança das cepas para aplicação em alimentos, é importante conhecer as possíveis alterações na matriz alimentícia em virtude dessa adição. Nesse contexto, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da incorporação de cepas probióticas de Enterococcus faecium nas características físico-químicas e sensoriais de queijo coalho. Os queijos foram elaborados com leite de vaca pasteurizado e adicionados de cepas probióticas de E. faecium durante a produção. Também foram elaborados queijos sem adição das cepas, considerados queijos controle. Os produtos finais foram avaliados quanto a umidade, pH, acidez titulável, carboidratos totais, proteínas, lipídios, cinzas, cor, perfil de ácidos orgânicos e atributos sensoriais. Além disso, procedeu-se a contagem de bactérias ácido lácticas viáveis. Os queijos coalho adicionados de E. faecium apresentaram maior acidez titulável e menor pH. Além disso, houve uma redução no teor de carboidratos, atribuída à degradação da lactose. O. perfil de ácidos orgânicos também variou, destacando-se pelo aumento da concentração de ácido láctico em um fator de 3,5 e pela ausência de ácido cítrico, como possível resultado do metabolismo de E. faecium na produção de compostos aromáticos

Efeito do Enterococcus faecium e Saccharomyces cerevisiae na resposta imunológica, parâmetros hematológicos e ganho de peso de bezerros alimentados com silagem de milho / Effect of the Enterococcus faecium and Saccharomyces cerevisiae in the immunological response, hematological parameters and body weight of calves fed with corn silage / Efecto de Enterococcus faecium y Saccharomyces cerevisiae en la respuesta inmunológica, parámetros hematológicos y ganancia de peso de terneros alimentados con ensilaje de maíz

O uso de probióticos a base de leveduras melhora o ganho de peso e o sistema imunológico de bovinos frente a grandes desafios imunológicos, no entanto permanece a dúvida se seu uso também apresentaria efeito em desafios mais tênues. Desta maneira, o presente trabalho verificou se o uso de probiótico a base de Enterococcus faecium e Saccaromyces cerevisiae via oral interfere na imunidade inata e no peso de bezerros sadios, em fase de crescimento, alimentados principalmente com silagem de milho. Para tanto, 12 bezerros da raça Jersey (120 kg ±50 kg e 4-7 meses de idade), foram alocados nos grupos controle (n=6) ou tratamento (n=6), de acordo com a oferta de probiótico (2g/dia, via oral) durante 45 dias. Nos dias 0, 15, 30 e 45, os animais foram submetidos a pesagens, exames clínicos, e colheita de sangue para realização de hemograma e mensuração do metabolismo oxidativo neutrofílico. Observou-se que, o probiótico promoveu pequeno e pontual incremento na função neutrofilica sanguínea (P=0,10, D15), incremento nos valores de hematócrito e hemoglobina (P=0,03 e 0,05, D45), além de maior ganho de peso nas fases iniciais da administração do suplemento (P=0,05), permitindo concluir que o suplemento é benéfico para animais em fase de adaptação de trocas de dieta e de manejo, mesmo quando estes desafios são tênues.(AU)

The use of yeast probiotics improves body weight gain and the immune system of cattle submitted to husbandry challenges, however the question remains whether the probiotics could have an effect on more tenuous challenges. In this way, the present study verified if the use of probiotic (Enterococcus faecium and Saccharomyces cerevisiae) provided orally, interferes with the innate immunity and body weight of calves fed mainly with corn silage. Twelve Jersey calves (120 kg ± 50 kg and 4-7 months of age) were allocated to the control (n = 6) or treatment (n = 6) group according to the probiotic supply (2 g / day, orally) for 45 days. On days 0, 15, 30 and 45, the animals were weighted, and submitted to clinical examinations, and blood collection for hemogram and measurement of neutrophil oxidative metabolism. It was observed that the probiotic promoted a slight and punctual increase in blood neutrophilic function (P = 0.10, D15), increased hematocrit and hemoglobin values P = 0.03 and 0.05, D45) and increased the body weight gain in the initial phases of supplementation (P = 0.08), allowing to conclude that the probiotic is beneficial for animals in the adaptation phase of diet changes and management, even when these challenges are mild.(AU)

El uso de probióticos de levadura mejora el aumento de peso corporal y el sistema inmunológico del ganado sometido a los desafíos de la cría, sin embargo, la pregunta sigue siendo si los probióticos podrían tener un efecto en desafíos más tenues. De esta manera, el presente estudio verificó si el uso de probióticos (Enterococcus faecium y Saccharomyces cerevisiae) proporcionado por vía oral interfiere con la inmunidad innata y el peso corporal de los terneros alimentados principalmente con ensilaje de maíz. Doce terneros de Jersey (120 kg ± 50 kg y 4-7 meses de edad) se asignaron al grupo control (n = 6) o tratamiento (n = 6) según el suministro de probióticos (2 g / día, por vía oral) para 45 dias. En los días 0, 15, 30 y 45, los animales se pesaron y se sometieron a exámenes clínicos y se recogieron muestras de sangre para el hemograma y la medición del metabolismo oxidativo de los neutrófilos. Se observó que el probiótico promovió un aumento leve y puntual de la función neutrofílica en sangre (P = 0,10, D15), aumento de los valores de hematocrito y hemoglobina (P = 0,03 y 0,05, D45) y aumento de la ganancia de peso corporal en las fases iniciales de la suplementación. (P = 0.08), lo que permite concluir que el probiótico es beneficioso para los animales en la fase de adaptación de los cambios y el manejo de la dieta, incluso cuando estos desafíos son leves.(AU)

Efeito do Enterococcus faecium e Saccharomyces cerevisiae na resposta imunológica, parâmetros hematológicos e ganho de peso de bezerros alimentados com silagem de milho / Effect of the Enterococcus faecium and Saccharomyces cerevisiae in the immunological response, hematological parameters and body weight of calves fed with corn silage / Efecto de Enterococcus faecium y Saccharomyces cerevisiae en la respuesta inmunológica, parámetros hematológicos y ganancia de peso de terneros alimentados con ensilaje de maíz

O uso de probióticos a base de leveduras melhora o ganho de peso e o sistema imunológico de bovinos frente a grandes desafios imunológicos, no entanto permanece a dúvida se seu uso também apresentaria efeito em desafios mais tênues. Desta maneira, o presente trabalho verificou se o uso de probiótico a base de Enterococcus faecium e Saccaromyces cerevisiae via oral interfere na imunidade inata e no peso de bezerros sadios, em fase de crescimento, alimentados principalmente com silagem de milho. Para tanto, 12 bezerros da raça Jersey (120 kg ±50 kg e 4-7 meses de idade), foram alocados nos grupos controle (n=6) ou tratamento (n=6), de acordo com a oferta de probiótico (2g/dia, via oral) durante 45 dias. Nos dias 0, 15, 30 e 45, os animais foram submetidos a pesagens, exames clínicos, e colheita de sangue para realização de hemograma e mensuração do metabolismo oxidativo neutrofílico. Observou-se que, o probiótico promoveu pequeno e pontual incremento na função neutrofilica sanguínea (P=0,10, D15), incremento nos valores de hematócrito e hemoglobina (P=0,03 e 0,05, D45), além de maior ganho de peso nas fases iniciais da administração do suplemento (P=0,05), permitindo concluir que o suplemento é benéfico para animais em fase de adaptação de trocas de dieta e de manejo, mesmo quando estes desafios são tênues.

The use of yeast probiotics improves body weight gain and the immune system of cattle submitted to husbandry challenges, however the question remains whether the probiotics could have an effect on more tenuous challenges. In this way, the present study verified if the use of probiotic (Enterococcus faecium and Saccharomyces cerevisiae) provided orally, interferes with the innate immunity and body weight of calves fed mainly with corn silage. Twelve Jersey calves (120 kg ± 50 kg and 4-7 months of age) were allocated to the control (n = 6) or treatment (n = 6) group according to the probiotic supply (2 g / day, orally) for 45 days. On days 0, 15, 30 and 45, the animals were weighted, and submitted to clinical examinations, and blood collection for hemogram and measurement of neutrophil oxidative metabolism. It was observed that the probiotic promoted a slight and punctual increase in blood neutrophilic function (P = 0.10, D15), increased hematocrit and hemoglobin values P = 0.03 and 0.05, D45) and increased the body weight gain in the initial phases of supplementation (P = 0.08), allowing to conclude that the probiotic is beneficial for animals in the adaptation phase of diet changes and management, even when these challenges are mild.

El uso de probióticos de levadura mejora el aumento de peso corporal y el sistema inmunológico del ganado sometido a los desafíos de la cría, sin embargo, la pregunta sigue siendo si los probióticos podrían tener un efecto en desafíos más tenues. De esta manera, el presente estudio verificó si el uso de probióticos (Enterococcus faecium y Saccharomyces cerevisiae) proporcionado por vía oral interfiere con la inmunidad innata y el peso corporal de los terneros alimentados principalmente con ensilaje de maíz. Doce terneros de Jersey (120 kg ± 50 kg y 4-7 meses de edad) se asignaron al grupo control (n = 6) o tratamiento (n = 6) según el suministro de probióticos (2 g / día, por vía oral) para 45 dias. En los días 0, 15, 30 y 45, los animales se pesaron y se sometieron a exámenes clínicos y se recogieron muestras de sangre para el hemograma y la medición del metabolismo oxidativo de los neutrófilos. Se observó que el probiótico promovió un aumento leve y puntual de la función neutrofílica en sangre (P = 0,10, D15), aumento de los valores de hematocrito y hemoglobina (P = 0,03 y 0,05, D45) y aumento de la ganancia de peso corporal en las fases iniciales de la suplementación. (P = 0.08), lo que permite concluir que el probiótico es beneficioso para los animales en la fase de adaptación de los cambios y el manejo de la dieta, incluso cuando estos desafíos son leves.

Quorum sensing in Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis and Bacillus cereus strains isolated from ricotta processing / Quorum sensing em cepas de Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis e Bacillus cereus isoladas do processamento de ricota

The quorum sensing phenomenon is a process of intra- and inter-species microbial communication involving the production and detection of extracellular signaling molecules. The autoinducer AI-2 has been proposed to serve as a universal signal for interspecies communication. This study aimed to evaluate the capability of Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, and Bacillus cereus strains isolated from ricotta processing to produce quorum sensing signalling molecules (AI-2). The strains were evaluated for the presence of the luxS gene using the polymerase chain reaction. AI-2 quorum sensing signalling molecules were measured in relative light units (RLUs) using a luminometer. A total of 74% of E. faecium, 91% of E. faecalis, and 95% of B. cereus isolates were positive for luxS gene. In addition, the induced bioluminescence in Vibrio harveyi BB170 was observed in all strains, indicating the presence of the AI-2 autoinducer.(AU)

O fenômeno quorum sensing corresponde a um processo de comunicação intra e interespécies microbianas e é mediado por sinais químicos extracelulares, denominados moléculas sinalizadoras ou auto indutoras (AI). A molécula AI2 está envolvida na comunicação interespécies, denominada sistema universal de comunicação. Este estudo teve como objetivo avaliar a capacidade de Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis e Bacillus cereus isolados do processamento de ricota em produzir moléculas sinalizadoras de Quorum sensing (AI-2). Os isolados foram avaliados quanto à presença do gene luxS utilizando a reação em cadeia da polimerase (PCR). As moléculas sinalizadoras (AI-2) foram medidas em unidades relativas de luz (RLU) através de um luminômetro. Um total de 74% dos isolados de E. faecium, 91% de E. faecalis e 95% de B. cereus foram positivos para o gene luxS. Além disso, todos os isolados apresentaram capacidade de induzir o fenômeno de bioluminescência em Vibrio harveyi BB170, indicando a presença de auto indutores AI-2.(AU)

Effects of probiotic bacteria at different concentrations on production of immunomodulatory antibodies against rabies virus in vaccinated cattle / Efeito da concentração de bactérias probióticas como imunomodulador da produção de anticorpos antirrábicos em bovinos vacinados

This study evaluated the effects of supplementation with a combination of probiotic microorganisms, added at different concentrations to the mineral mixture, on the production of serum antibodies against rabies virus in cattle vaccinated with a single dose of rabies vaccine. Forty-two male Nellore cattle, aged 12 months, were randomly divided into three groups (n = 14): the control group (CG) received 70 grams of mineral mixture/animal/day; and the 2 gram probiotic group (G2P) and 8 gram probiotic group (G8P) received 70 grams of mineral mix/animal/day with 2 and 8 grams added, respectively, of a combination of probiotic microorganisms (Lactobacillus acidophilus, Streptococcus faecium, Bifidobacterium thermophilum and Bifidobacterium longum). Individual antibody titers were determined using a neutralization in cell-based rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT) technique. One-way analysis of variance (one-way ANOVA) was used with contrasts using the Tukey method to determine whether the experimental groups differed within each time point, and the paired t-test was used to determine whether differences occurred between time points within each group. The level of significance was set at 5%. There were statistically significant differences between the mean serum concentrations of the CG and G8P groups at 30 and 60 days after the first vaccination, and at 60 days, 100% of the animals maintained minimum titers of protective antibodies only in the G8P group. There was also improvement in the production of antibodies in the G2P group compared with the CG after 30 and 60 days, but this difference was not statistically significant. In conclusion, increasing doses of probiotic added to the mineral mix beneficially affected the rabies humoral immune response, as determined by serum antibodies, and enabled the maintenance of minimum protective titers for a longer period in previously vaccinated cattle.(AU)

Esse estudo avaliou o efeito da suplementação de uma associação de microrganismos probióticos, adicionados à mistura mineral em diferentes doses, na produção de anticorpos séricos antirrábicos em bovinos primovacinados. Os Quarenta e dois bovinos Nelore machos, com idade de 12 meses, foram divididos em três grupos (n=14): grupo controle (GC) recebeu 70 gramas de mistura mineral/animal/dia; grupos probiótico 2 gramas (G2P) e 8 gramas (G8P) receberam 70 gramas de mistura mineral/animal/dia adicionados respectivamente de 2 e 8 gramas de probióticos (Lactobacillus acidophilus, Streptococcus faecium, Bifidobacterium thermophilum e Bifidobacterium longum). títulos individuais de anticorpos antirrábicos foram determinados por meio da técnica de soroneutralização em células baseado no rapid fluorescent focus inhibition test (RFFIT). Os resultados obtidos foram comparados pelo teste t não pareado, com 5% de nível de significância. Houve diferenças estatísticas significativas entre as médias de concentrações séricas entre os grupos GC e G8P, após 30 e 60 dias da primovacinação e após 60 dias, somente o G8P manteve 100% com títulos de anticorpos protetores mínimos. Houve também melhora na produção de anticorpos no grupo G2P em relação ao GC, após 30 e 60 dias, porém não significativa. Conclui-se que as doses crescentes de probiótico adicionadas na mineral interferiram beneficamente na resposta imune humoral antirrábica, determinada pela concentração sérica de anticorpos, assim como permitiu a manutenção por um período maior os títulos protetores mínimos nos bovinos primovacinados.(AU)

Safety, beneficial and technological properties of Enterococcus faecium isolated from Brazilian cheeses

This study aimed to characterize the safety and technological properties of Enterococcus faecium strains isolated from Brazilian Coalho cheeses. High levels of co-aggregation were observed between Enterococcus faecium strains EM485 and EM925 and both Escherichia coli and Clostridium perfringens. Both strains presented low levels of hydrophobicity. E. faecium EM485 and EM925 were both able to grow in the presence of 0.5% of the sodium salts of taurocholic acid (TC), taurodeoxycholic acid (TDC), glycocholic acid (GC), and glycodeoxycholic acid (GDC), although they showed the ability to deconjugate only GDC and TDC. Both strains showed good survival when exposed to conditions simulating the gastro intestinal tract (GIT). When tested for the presence of virulence genes, only tyrosine decarboxylase and vancomycin B generated positive PCR results.(AU)

Adsorção “in vitro” de Ochratoxina A por probióticos utilizados na aquicultura / In vitro adsorption of ochratoxin A by probiotics used in aquaculture

Devido as constantes contaminações de rações comerciais pelas micotoxinas, o presente trabalhoteve por objetivo avaliar in vitro a capacidade de dois produtos comerciais utilizados na aquicultura emadsorverem Ochratoxina A (OTA). Dois tipos de probióticos comerciais, compostos por Bacillus subtilis,Bifidobacterium bifidum, Enterococcus faecium e Lactobacillus acidophilus (Probiótico A) e, Saccharomycescerevisiae provenientes de cervejaria (Probiótico B) foram utilizados no ensaio. Soluções em tampão fosfatosalino (PBS), com pH de 1,5 e 7,5, foram elaborados para simular o pH do estômago e intestino de tilápias doNilo (Oreochromis niloticus). As soluções de PBS foram testadas nas duas faixas de pH (1,5 e 7,5), com asconcentrações dos produtos comerciais de 0%; 25%; 50%; 75% e 100%, para uma concentração de 1.000 ng.mL-1de OTA. As concentrações de OTA foram adicionadas em microtubos para que fosse determinado a capacidadede adsorção dos probióticos utilizados neste estudo. Na detecção e quantificação de OTA, utilizou-se ametodologia de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Os resultados finais mostraram que osprobióticos A e B nas suas concentrações máximas foram capazes de adsorver OTA nas quantidades de 13,78 a76,81 e 301,48 a 317,54 (ng.mL-1), respectivamente. Os dados mostraram que os dois tipos de probióticos sãopromissores para adsorverem OTA nas condições simuladas de pH gastrointestinal de tilápias do Nilo, sendo amaior eficiência verificada para o probiótico B

Given the constant contamination of animals by feed mycotoxins, this study aimed to evaluate invitro the ability of commercial products used in aquaculture as adsorbents of ochratoxin A (OTA). Twocomercial probiotics, composed of Bacillus subtilis, Bifidobacterium bifidum, Enterococcus faecium andLactobacillus acidophilus (Probiotic A) and one made of dry yeast of Saccharomyces cerevisiae from a brewery(Probiotic B) were used in the assay. Phosphate buffered saline solutions (PBS) at pH 1.5 and 7.5 wereformulated to simulate the pH of the stomach and intestine of Nile Tilapia (Oreochromis niloticus). The PBSsolutions were tested at the two pH (1,5 and 7,5) with the probiotics concentrations of 0%; 25%; 50%; 75% and100% for a OTA concentration of 1.000 ng.mL-1. The OTA concentrations were added in microtubes forevaluation of adsorption capacity of the probiotics. The OTA detection and quantification were performed byHigh Performance Liquid Chromatography (HPLC). The final results showed that the probiotics A and B in theirmaximum concentration were capable of adsorbing OTA in amounts from 13.78 to 76.81 and from 301.48 to317.54 (ng.mL-1), respectively. The data showed that this two probiotics were very promissimg at adsorbingOTA under simulated gastrointestinal conditions of pH of tilapias, being more efficient the probiotic B

Adsorção “in vitro” de Ochratoxina A por probióticos utilizados na aquicultura / In vitro adsorption of ochratoxin A by probiotics used in aquaculture

Devido as constantes contaminações de rações comerciais pelas micotoxinas, o presente trabalhoteve por objetivo avaliar in vitro a capacidade de dois produtos comerciais utilizados na aquicultura emadsorverem Ochratoxina A (OTA). Dois tipos de probióticos comerciais, compostos por Bacillus subtilis,Bifidobacterium bifidum, Enterococcus faecium e Lactobacillus acidophilus (Probiótico A) e, Saccharomycescerevisiae provenientes de cervejaria (Probiótico B) foram utilizados no ensaio. Soluções em tampão fosfatosalino (PBS), com pH de 1,5 e 7,5, foram elaborados para simular o pH do estômago e intestino de tilápias doNilo (Oreochromis niloticus). As soluções de PBS foram testadas nas duas faixas de pH (1,5 e 7,5), com asconcentrações dos produtos comerciais de 0%; 25%; 50%; 75% e 100%, para uma concentração de 1.000 ng.mL-1de OTA. As concentrações de OTA foram adicionadas em microtubos para que fosse determinado a capacidadede adsorção dos probióticos utilizados neste estudo. Na detecção e quantificação de OTA, utilizou-se ametodologia de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Os resultados finais mostraram que osprobióticos A e B nas suas concentrações máximas foram capazes de adsorver OTA nas quantidades de 13,78 a76,81 e 301,48 a 317,54 (ng.mL-1), respectivamente. Os dados mostraram que os dois tipos de probióticos sãopromissores para adsorverem OTA nas condições simuladas de pH gastrointestinal de tilápias do Nilo, sendo amaior eficiência verificada para o probiótico B(AU)

Given the constant contamination of animals by feed mycotoxins, this study aimed to evaluate invitro the ability of commercial products used in aquaculture as adsorbents of ochratoxin A (OTA). Twocomercial probiotics, composed of Bacillus subtilis, Bifidobacterium bifidum, Enterococcus faecium andLactobacillus acidophilus (Probiotic A) and one made of dry yeast of Saccharomyces cerevisiae from a brewery(Probiotic B) were used in the assay. Phosphate buffered saline solutions (PBS) at pH 1.5 and 7.5 wereformulated to simulate the pH of the stomach and intestine of Nile Tilapia (Oreochromis niloticus). The PBSsolutions were tested at the two pH (1,5 and 7,5) with the probiotics concentrations of 0%; 25%; 50%; 75% and100% for a OTA concentration of 1.000 ng.mL-1. The OTA concentrations were added in microtubes forevaluation of adsorption capacity of the probiotics. The OTA detection and quantification were performed byHigh Performance Liquid Chromatography (HPLC). The final results showed that the probiotics A and B in theirmaximum concentration were capable of adsorbing OTA in amounts from 13.78 to 76.81 and from 301.48 to317.54 (ng.mL-1), respectively. The data showed that this two probiotics were very promissimg at adsorbingOTA under simulated gastrointestinal conditions of pH of tilapias, being more efficient the probiotic B(AU)

Healthcare-associated vancomycin resistant Enterococcus faecium infections in the Mansoura University Hospitals intensive care units, Egypt

Vancomycin resistant Enterococcus faecium (VREF) ia an emerging and challenging nosocomial pathogen. This study aimed to determine the prevalence, risk factors and clonal relationships between different VREF isolates in the intensive care units (ICUs) of the university hospitals in our geographic location. This prospective study was conducted from July, 2012 until September, 2013 on 781 patients who were admitted to the ICUs of the Mansoura University Hospitals (MUHs), and fulfilled the healthcare-associated infection (HAI) criteria. Susceptibility testing was determined using the disk diffusion method. The clonal relationships were evaluated with pulsed field gel electrophoresis (PFGE). Out of 52 E. faecium isolates, 12 (23.1%) were vancomycin resistant. The significant risk factors for the VREF infections were: transfer to the ICU from a ward, renal failure, an extended ICU stay and use of third-generation cephalosporins, gentamicin, or ciprofloxacin. PFGE with the 12 isolates showed 9 different patterns; 3 belonged to the same pulsotype and another 2 carried a second pulsotypes. The similar pulsotypes isolates were isolated from ICUs of one hospital (EICUs); however, all of the isolates from the other ICUs had different patterns. Infection control policy, in conjunction with antibiotic stewardship, is important to combat VREF transmission in these high-risk patients..(AU)

Isolation, enumeration, molecular identification and probiotic potential evaluation of lactic acid bacteria isolated from sheep milk

Lactic acid bacteria species were molecularly identified in milk from Lacaune, Santa Inês and crossbred sheep breeds and their in vitro probiotic potential was evaluated. The species identified were Enterococcus faecium (56.25%), E. durans (31.25%) and E. casseliflavus (12.5%). No other lactic acid bacteria species, such as lactobacilli, was identified. Most of the isolated enterococci were resistant to gastric pH (2.0) and to 0.3% oxgall. All tested enterococci were resistant to ceftazidime, oxacillin and streptomycin and sensible to clindamycin, erythromycin and penicillin. The resistance to ciprofloxacin, gentamicin, tetracycline and vancomycin varied among tested species. All tested enterococci strongly inhibited (P<0.05) Escherichia coli and Listeria monocytogenes, moderately inhibited E. faecalis and Staphylococcus aureus and did not inhibit Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica var. Typhimurium and also one E. durans sample isolated from sheep milk. Four samples of E. faecium, one of E. durans and one of E. casseliflavus presented the best probiotic potential.(AU)

Espécies de bactérias ácido-lácticas foram identificadas em nível molecular em leite das raças ovinas Lacaune, Santa Inês e suas mestiças, e o seu potencial probiótico in vitro foi avaliado. As espécies identificadas foram Enterococcus faecium (56,25%), E. durans (31,25%) e E. casseliflavus (12,5%). Nenhuma outra espécie de bactéria ácido-láctica, como Lactobacillus sp., foi identificada. A maioria dos enterococos isolados foi resistente ao pH gástrico (2.0) e a 0,3% de oxgall. Todos os enterococos testados foram resistentes à ceftazidima, oxacilina e estreptomicina e sensíveis à clindamicina, eritromicina e penicilina. A resistência à ciprofloxacina, gentamicina, tetraciclina e vancomicina variou entre as amostras. Todos os enterococos testados inibiram fortemente (P<0,05) Escherichia coli e Listeria monocytogenes, inibiram moderadamente E. faecalis e Staphylococcus aureus e não inibiram Pseudomonas aeruginosa, Salmonella enterica var. Typhimurium e uma amostra de E. durans isolada de leite de ovelha. Quatro amostras de E. faecium, uma de E. durans e uma de E. casseliflavus apresentaram o melhor potencial probiótico.(AU)

Biofilm formation on polystyrene under different temperatures by antibiotic resistant Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium isolated from food

The ability of antibiotic resistant E. faecalis and E. faecium isolated from food to form biofilm at different temperatures in the absence or presence of 0.75% glucose was evaluated. A synergistic effect on biofilm at 10 °C, 28 °C, 37 °C and 45 °C and glucose was observed for E. faecalis and E. faecium.(AU)

Additive containing homo and heterolactic bacteria on the fermentation quality of maize silage / Aditivo contendo bactérias homo e heteroláticas sobre a qualidade fermentativa da silagem de milho

This trial evaluated the addition of Lactobacillus plantarum, L. brevis and Enterococcus faecium combo additive against a control treatment. The silages were made in laboratory silos that were stored for 30, 60, 90 or 120 days before opening. We evaluated the chemical composition of the forage before and after ensiling and the fermentative losses of silages. The additive decreased (p < 0.01) effluent production (11.4 kg ton⁻¹) compared to control silage (14.0 kg ton⁻¹), but it increased (p < 0.01) the Neutral Detergent Fiber (NDF) and Acid Detergent Fiber (ADF) from 45.6% and 24.5% to 47.0 and 25.1% for control and additive silages, respectively. The storage periods affected (p < 0.01) effluent production, Dry Matter Losses (DML), NDF, ADF and pH variables. Fermentative losses were very low because of the adequate characteristics of maize for ensilage.

O presente ensaio experimental avaliou inoculação de aditivo composto por Lactobacillus plantarum, L. brevis e Enterococcus faecium em relação à silagem sem aditivo (Controle). As silagens foram confeccionadas em silos experimentais e armazenadas por 30, 60, 90 ou 120 dias antes da abertura dos silos. Foi avaliada a composição bromatológica da forragem antes e após a ensilagem, e as perdas fermentativas durante o processo. O aditivo avaliado reduziu (p <0,01) a produção de efluente (11,4 kg t⁻¹) em relação à silagem Controle (14,0 kg t⁻¹). A inoculação com aditivo elevou os teores de Fibra em Detergente Neutro (FDN) e Fibra em Detergente Ácido (FDA), de 45,6 e 24,5% para 47,0 e 25,1% para as silagens controle e com aditivo, respectivamente. Os tempos de armazenamento influenciaram (p < 0,01) a produção de efluente, a perda de matéria seca (PMS), os teores de FDN e FDA, e o pH das silagens. As silagens apresentaram bons parâmetros de qualidade e as perdas fermentativas observadas foram bastante reduzidas, dadas as adequadas características da cultura do milho para a ensilagem.

Additive containing homo and heterolactic bacteria on the fermentation quality of maize silage / Aditivo contendo bactérias homo e heteroláticas sobre a qualidade fermentativa da silagem de milho

This trial evaluated the addition of Lactobacillus plantarum, L. brevis and Enterococcus faecium combo additive against a control treatment. The silages were made in laboratory silos that were stored for 30, 60, 90 or 120 days before opening. We evaluated the chemical composition of the forage before and after ensiling and the fermentative losses of silages. The additive decreased (p < 0.01) effluent production (11.4 kg ton⁻¹) compared to control silage (14.0 kg ton⁻¹), but it increased (p < 0.01) the Neutral Detergent Fiber (NDF) and Acid Detergent Fiber (ADF) from 45.6% and 24.5% to 47.0 and 25.1% for control and additive silages, respectively. The storage periods affected (p < 0.01) effluent production, Dry Matter Losses (DML), NDF, ADF and pH variables. Fermentative losses were very low because of the adequate characteristics of maize for ensilage.(AU)

O presente ensaio experimental avaliou inoculação de aditivo composto por Lactobacillus plantarum, L. brevis e Enterococcus faecium em relação à silagem sem aditivo (Controle). As silagens foram confeccionadas em silos experimentais e armazenadas por 30, 60, 90 ou 120 dias antes da abertura dos silos. Foi avaliada a composição bromatológica da forragem antes e após a ensilagem, e as perdas fermentativas durante o processo. O aditivo avaliado reduziu (p <0,01) a produção de efluente (11,4 kg t⁻¹) em relação à silagem Controle (14,0 kg t⁻¹). A inoculação com aditivo elevou os teores de Fibra em Detergente Neutro (FDN) e Fibra em Detergente Ácido (FDA), de 45,6 e 24,5% para 47,0 e 25,1% para as silagens controle e com aditivo, respectivamente. Os tempos de armazenamento influenciaram (p < 0,01) a produção de efluente, a perda de matéria seca (PMS), os teores de FDN e FDA, e o pH das silagens. As silagens apresentaram bons parâmetros de qualidade e as perdas fermentativas observadas foram bastante reduzidas, dadas as adequadas características da cultura do milho para a ensilagem.(AU)

Resistência antimicrobiana em Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium isolados de carcaças de frango / Antimicrobial Resistance of Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium isolated from poultry carcasses

O objetivo deste trabalho foi realizar o isolamento e analisar o perfil de resistência antimicrobiana de Enterococcus de carcaças de frango resfriadas e congeladas comercializadas no Distrito Federal, detectando genes de resistência antimicrobiana e identificando as espécies Enterococcus faecalis e Enterococcus faecium por reação polimerase em cadeia. Foram analisadas 100 carcaças de frangos, das quais foram isoladas 50 cepas de Enterococcus spp., sendo 42% de E. faecalis e 2% de E. faecium. O teste de susceptibilidade antimicrobiana demonstrou que todas as cepas isoladas apresentaram resistência a pelo menos um antimicrobiano, dos quais 90,47% das cepas de E. faecalis, 100% das cepas de E. Faecium e 82,14% dos Enterococcus spp. apresentaram resistência à Tetraciclina; 80,95% das cepas de E. faecalis e 35,71% das cepas de Enterococcus spp. foram resistentes à Eritromicina; 39,28% dos Enterococcus spp. e 23,80% dos E. faecalis à Ciprofloxacina e 28,57% dos E. faecalis apresentaram resistência ao Cloranfenicol. Foram detectados os genes de resistência antimicrobiana erm(B), vanC-1, aph(3')-llla, ant(6)-la, vanB, vanA, aac(6')-le-aph(2'')-la, erm(A) e tet(M) - este último mais frequente. Estes resultados sugerem sérios problemas para a Saúde Pública, uma vez que esses microrganismos podem possuir a capacidade de transmitir genes de resistência antimicrobiana para outros microrganismos presentes na microbiota intestinal de humanos e animais, podendo inviabilizar o uso destas drogas para tratamentos clínicos.(AU)

The aim of this study was to isolate and analyze the antimicrobial profile resistance of Enterococcus from cooled and frozen poultry carcasses commercialized at the Federal District area, detecting the antimicrobial resistance genes and identifying Enterococcus faecalis and Enterococcus faecium by polymerase chain reaction. One hundred poultry carcasses were analyzed and 50 strains of Enterococcus spp. were isolated, of which 42% were E. faecalis and 2% E. faecium. The antimicrobial susceptibility test showed that all isolates were resistant to at least one antibiotic; 90,47% of E. faecalis, 100% of E. faecium and 82,14% of Enterococcus spp. were resistant to Tetracycline; 80,95% of E. faecalis and 35,71% of Enterococcus spp. strains were resistant to Erythromycin; 39,28% of Enterococcus spp. and 23,80% of E. faecalis to Ciprofloxacin, and 28,57% of E. faecalis were resistant to Chloramphenicol. There were detected erm(B), vanC-1, aph(3')-llla, ant(6)-la, vanB, vanA, aac(6')-le-aph(2'')-la, erm(A) and tet(M) resistance genes, the last one most often verified. The results might suggest problems for public health due the high resistance, since these microorganisms have ability to transmit genes for antimicrobial resistance to others in the intestinal tract of humans and animals. Thus, the use of these drugs for clinical treatment could be hindered.(AU)

Avaliação de probiótico na alimentação de poedeiras comerciais no segundo ciclo de postura / Evaluation of probiotics in feed for laying hens in the second cycle stance

Avaliou-se o efeito da inclusão de probiótico sobre o desempenho e a qualidade dos ovos de poedeiras semipesadas no segundo ciclo de postura. Foram utilizadas 450 aves com 69 semanas de idade, distribuídas aleatoriamente em um delineamento inteiramente ao acaso, em cinco tratamentos, seis repetições e 15 aves por unidade experimental. A ração experimental foi à base de milho e farelo de soja e suplementada com probiótico composto por Lactobacillus acidophilus, Streptococcus faecium e Bifidobacterium bifidum. O experimento teve a duração de 16 semanas e foi dividido em quatro períodos de 28 dias cada, nos quais as aves receberam cinco rações experimentais contendo diferentes porcentagens de inclusão de probiótico, 0; 0,05; 0,10; 0,15 e 0,20%. Não foi observado efeito (P>0,05) da inclusão de probiótico sobre o desempenho e a qualidade dos ovos de galinhas poedeiras no segundo ciclo de postura. A inclusão de 0,10% de probiótico influenciou negativamente a gravidade específica dos ovos. A utilização de probiótico para galinhas no segundo ciclo de postura não interfere na produção e na qualidade dos ovos.(AU)

Evaluating the effect of the inclusion of probiotic on the performance and egg quality of laying hens in the second laying cycle, 450 birds were used at 69 weeks of age, distributed in a completely randomized design, in five treatments, six replicates and 15 poultries per experimental unit. The experimental diets were based on corn and soybean meal and supplemented with increasing levels of probiotic consisting of Lactobacillus acidophilus, Streptococcus faecium, and Bifidobacterium bifidum. The experiment lasted 16 weeks, divided into four periods of 28 days each, in which the birds were fed five experimental diets containing different percentages of probiotic inclusion, 0; 0.05; 0.10; 0.15 and 0.20%, in the period from 69 to 85 weeks of age. There was no effect (P> 0.05) of the inclusion of probiotic on performance and egg quality of laying hens in the second laying cycle. The inclusion of 0.10% of probiotic negatively influenced the specific gravity of eggs. The probiotic used for laying hens in the second cycle does not interfere in production and egg quality.(AU)