Growth kinetics of Escherichia coli O157: H7 on the epicarp of fresh vegetables and fruits

Despite the increasing reports on the incidence of fresh vegetables and fruits as a possible vehicle for human pathogens, there is currently limited knowledge on the growth potential of Escherichia coli O157:H7 on different plant substrates. This study analyzed the selective adhesion and growth of E. coli O157:H7 on chili habanero (Capsicum chinense L.), cucumber (Cucumis sativus), radish (Raphanus sativus), tomato (Lycopersicon esculentum), beet (Beta vulgaris subsp. vulgaris), and onion (Allium cepa L.) under laboratory conditions. The Gompertz parameters were used to determine the growth kinetics. Scanning electron microscopy was used to visualize the adhesion of E. coli O157:H7 on the epicarp of the samples. Predictive models were constructed to compare the growth of E. coli O157:H7 on the samples with different intrinsic factors and to demonstrate the low selectivity of the pathogen. No significant difference was observed in the lag-phase duration (LPD), generation time (GT), and exponential growth rate (EGR) of the pathogen adhered to the samples. The interaction between the microorganism and the substrate was less supportive to the growth of E. coli O157:H7 for onion, whereas for tomato and cucumber, the time for the microorganism to attain the maximum growth rate (M) was significantly longer than that recorded for other samples.(AU)

Combined effects of garlic essential oil and allyl isothiocyanate against Escherichia coli O157: H7 in vitro and in pork sausage / Efeito combinado de óleo essencial de alho e isotiocianato de alila contra Escherichia coliO157: H7 in vitro e em linguiça suína

Escherichia coli O157:H7 is a toxigenic serotype of E. coli and has been associated with foodborne outbreaks involving meat products, vegetables and fresh produces worldwide. Salts for curing are usually employed as antimicrobials in the production of pork sausages. However, salts do not have a significant inhibitory effect on enterobacteria. Due to the growing demand for natural foods, the use of essential oils has been proposed as natural antimicrobials in food. This study aimed to evaluate the effects of garlic essential oil (GO) and allyl isothiocyanate (AITC) against E. coli O157:H7 in vitro and in pork sausage. The Minimal Inhibitory Concentration (MIC) and Minimal Bactericidal Concentration (MBC) of these oils, alone and in combination, against E. coli O157:H7 were determined. Pork sausage was inoculated with 8log CFU/g E. coli O157:H7 and different combinations of GO and AITC. A control group was performed without essential oils. Sausages were packaged and stored at 6°C for 20 days. E. coli O157:H7 population and instrumental color (L*, a*, b*, C* and hue) determinations were performed at 5-day intervals. AITC showed lower MIC and MBC than GO. When combined, AITC and GO showed a synergistic effect. Treatments T3 and T4 showed 1,01log CFU and 1,87log CFU reduction of E. coli O157:H7 compared to control. The redness and the chroma of sausages treated with AITC and GO increased during storage. Together, GO and AITC caused minor changes in taste and flavor of sausages, and were able to reduce the population of E. coli O157:H7 and to maintain the red color of sausage during storage.(AU)

Escherichia coli O157:H7 é um sorotipo toxigênico de E. coli associado mundialmente a surtos de doenças alimentares causadas por produtos cárneos. Os sais de cura são normalmente empregados como antimicrobianos na fabricação de linguiças, entretanto, possuem pouco efeito inibitório sobre enterobactérias como E. coli. Devido à crescente demanda por produtos naturais, o uso de óleos essenciais tem sido proposto como antimicrobiano natural em alimentos. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do óleo essencial de alho (GO) e isotiocianato de alila (AITC) contra E. coli O157:H7 in vitro e em linguiça. As concentrações inibitória mínima (MIC) e bactericida mínima (MBC) dos óleos, isolados e em combinação, contra E. coli O157:H7 foram determinadas in vitro. Lotes de linguiça foram inoculados com 8log UFC/g E. coli O157:H7 e diferentes concentrações de GO + AITC e estocados a 6°C por 20 dias. Contagens de E. coli O157:H7 e determinação de cor instrumental (L*, a*, b*, C* e hue) foram realizadas a cada 5 dias. Nos testes in vitro, AITC mostrou maior ação inibitória que GO, havendo efeito sinérgico dos óleos quando combinados. Os tratamentos T3 e T4 mostraram redução de 1,01log UFC e 1,87log UFC de E. coli O157:H7 comparados ao controle. A intensidade de cor vermelha e a saturação de cor aumentaram durante a estocagem nas linguiças adicionadas de óleos essenciais. A adição dos óleos GO + AITC causou mínima alteração no sabor e na aparência das linguiças e foi capaz de reduzir a população de E. coli O157:H7 no produto cárneo, mostrando potencial para uso como conservante natural nesse tipo de alimento.(AU)

Escherichia coli O157: H7 survival in traditional and low lactose yogurt during fermentation and cooling periods / Sobrevivência da Escherichia coli O157: H7 em iogurte natural e com baixo teor de lactose durante a fermentação e o resfriamento

The purpose of this study was to evaluate the behavior of E. coli O157:H7 during lactose hydrolysis and fermentation of traditional and low lactose yogurt. It also aimed to verify E. coli O157:H7 survival after 12 h of storage at 4 °C ±1 °C. Two different types of yogurts were prepared, two with whole milk and two with pre-hydrolyzed whole milk; in both groups one yogurt was inoculated with E. coli O157:H7 and the other one was not inoculated. The survival of E. coli and pH of yogurt were determined during fermentation and after 12-h refrigeration. The results showed that E. coli O157:H7 was able to grow during the fermentation period (from 4.34 log CFU.mL-1 to 6.13 log CFU.mL-1 in traditional yogurt and 4.34 log CFU.mL-1 to 6.16 log CFU.mL-1 in low lactose yogurt). The samples with E. coli O157:H7 showed gas formation and syneresis. Thus, E. coli O157:H7 was able to survive and grow during fermentation of traditional and low lactose yogurts affecting the manufacture technology. Moreover, milk contamination by E. coli before LAB addition reduces the growth of L. bulgaricus and S. thermophilus especially when associated with reduction of lactose content.(AU)

Objetivou-se no presente estudo avaliar o comportamento da E. coli O157:H7 durante o processo de hidrólise da lactose e fermentação de iogurte tradicional e com teor reduzido de lactose. Além disso, objetivou-se verificar a viabilidade da E. coli O157:H7 e a viabilidade das bactérias ácido láticas após 12 h de estocagem a 4 °C ±1 °C. Dois diferentes tipos de iogurte com amostras controle e amostras inoculadas foram preparados, sendo dois com leite integral e dois com leite integral pré-hidrolisado; em ambos os grupos um foi inoculado com E. coliO157:H7 e um não foi inoculado. A sobrevivência da E. coli e o pH dos iogurtes foram determinados durante a fermentação e após 12h de refrigeração. A partir dos resultados observou-se que a E. coli O157:H7 foi capaz de se multiplicar ou manter-se viável durante a fermentação (4,34 UFC.mL-1 para 6,13 UFC.mL-1 no iogurte tradicional e 4,34 UFC.mL-1 para 6,16 log UFC.mL-1em iogurte com lactose reduzida). Nas amostras inoculadas com E. coli O157:H7 houve formação de gás e sinérese. Dessa forma, concluiu-se que a E. coli O157:H7 foi capaz de sobreviver e de se multiplicar durante a fermentação afetando a tecnologia de fabricação. Além disso, a contaminação do leite antes da adição das BAL reduziu o crescimento de L. bulgaricus e S. thermophilus, especialmente quando associado à redução da lactose.(AU)

Effect of Lactobacillus sp. isolates supernatant on Escherichia coli O157: H7 enhances the role of organic acids production as a factor for pathogen control / Efeito do sobrenadante de isolados de Lactobacillus sp. sobre Escherichia coli O157: H7 reforça o papel da produção de ácidos orgânicos como fator de controle patogênico

Many attempts have been made to establish the control of foodborne pathogens through Lactobacillus isolates and their metabolism products with success being obtained in several situations. The aim of this study was to investigate the antagonistic effect of eight Lactobacillus isolates, including L. casei subsp. pseudoplantarum, L. plantarum, L. reuteri and L. delbrueckii subsp. delbrueckii, on the pathogenic Escherichia colistrain O157:H7. The inhibitory effect of pure cultures and two pooled cultures supernatants of Lactobacillus on the growth of pathogenic bacteria was evaluated by the spot agar method and by monitoring turbidity. Antimicrobial activity was confirmed for L. reuteri and L. delbrueckii subsp. delbrueckii and for a pool of lactic acid bacteria. The neutralized supernatant of the pool exerted a higher antimicrobial activity than that of the individual strains. Furthermore, D-lactic acid and acetic acid were produced during growth of the Lactobacillus isolates studied.(AU)

Muitas tentativas têm sido feitas para se estabelecer o controle de patógenos de origem alimentar através do uso de estirpes de Lactobacillus e dos seus produtos de metabolismo, com sucesso sendo sucedido em várias situações. O objetivo deste trabalho foi investigar o efeito antagônico do sobrenadante de culturas de oito isolados de Lactobacillus, incluindo L. casei subsp. pseudoplantarum, L. plantarum L. reuteri e L. delbrueckii subsp. delbrueckii, sobre Escherichia coli amostra O157:H7. Os efeitos inibidores de culturas puras e de dois "pools" de cultura de Lactobacillus sobre o crescimento da bactéria foram avaliados através do método de inibição em ágar e através do monitoramento da turbidez da cultura bacteriana. A atividade antimicrobiana foi confirmada para Lactobacillus reuteri e Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii e para o "pool" de bactérias acido-láctica. O sobrenadante neutralizado do "pool" de Lactobacillus exerceu uma atividade antimicrobiana mais elevada do que aquela das estirpes individuais. Além disso, ácido D-láctico e ácido acético foram produzidos durante o crescimento dos Lactobacillusestudados.(AU)

Effect of Lactobacillus sp. isolates supernatant on Escherichia coli O157: H7 enhances the role of organic acids production as a factor for pathogen control / Efeito do sobrenadante de isolados de Lactobacillus sp. sobre Escherichia coli O157: H7 reforça o papel da produção de ácidos orgânicos como fator de controle patogênico

Many attempts have been made to establish the control of foodborne pathogens through Lactobacillus isolates and their metabolism products with success being obtained in several situations. The aim of this study was to investigate the antagonistic effect of eight Lactobacillus isolates, including L. casei subsp. pseudoplantarum, L. plantarum, L. reuteri and L. delbrueckii subsp. delbrueckii, on the pathogenic Escherichia colistrain O157:H7. The inhibitory effect of pure cultures and two pooled cultures supernatants of Lactobacillus on the growth of pathogenic bacteria was evaluated by the spot agar method and by monitoring turbidity. Antimicrobial activity was confirmed for L. reuteri and L. delbrueckii subsp. delbrueckii and for a pool of lactic acid bacteria. The neutralized supernatant of the pool exerted a higher antimicrobial activity than that of the individual strains. Furthermore, D-lactic acid and acetic acid were produced during growth of the Lactobacillus isolates studied.(AU)

Muitas tentativas têm sido feitas para se estabelecer o controle de patógenos de origem alimentar através do uso de estirpes de Lactobacillus e dos seus produtos de metabolismo, com sucesso sendo sucedido em várias situações. O objetivo deste trabalho foi investigar o efeito antagônico do sobrenadante de culturas de oito isolados de Lactobacillus, incluindo L. casei subsp. pseudoplantarum, L. plantarum L. reuteri e L. delbrueckii subsp. delbrueckii, sobre Escherichia coli amostra O157:H7. Os efeitos inibidores de culturas puras e de dois "pools" de cultura de Lactobacillus sobre o crescimento da bactéria foram avaliados através do método de inibição em ágar e através do monitoramento da turbidez da cultura bacteriana. A atividade antimicrobiana foi confirmada para Lactobacillus reuteri e Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii e para o "pool" de bactérias acido-láctica. O sobrenadante neutralizado do "pool" de Lactobacillus exerceu uma atividade antimicrobiana mais elevada do que aquela das estirpes individuais. Além disso, ácido D-láctico e ácido acético foram produzidos durante o crescimento dos Lactobacillus estudados(AU)

Sorologia e suscetibilidade antimicrobiana em isolados de Escherichia coli de pesque-pagues / Serology and patterns of antimicrobial susceptibility in Escherichia coli isolates from pay-to-fish ponds

Pesquisou-se a ocorrência de Escherichia coli (EPEC, EIEC, O157) em água e peixe (pele, trato digestivo e músculo) de pesque-pagues da microbacia do Córrego Rico, Jaboticabal (SP). Foram isoladas 115 cepas de E. coli, entre as quais 49 (43%) foram sorogrupadas como EPEC. Os sorogrupos mais frequentes foram O125, O126 e O158. Dentre as amostras testadas, 60 (52%) apresentaram resistência simultânea a dois antimicrobianos. A análise de correspondência foi realizada com o intuito de verificar as possíveis correspondências envolvendo o local de isolamento, sorogrupos e multirresistência e, com isso, pôde-se observar que o músculo apresentou menor correspondência com os demais fatores analisados. Porém, o isolamento de sorogrupos EPEC neste estudo representa risco à saúde dos consumidores.(AU)

The occurrence of Escherichia coli (EPEC, EIEC and O157) in water and fish (skin, gut and muscle) in pay-to-fish ponds of the micro bay of Córrego Rico, in Jaboticabal (SP), was assessed. One hundred and fifteen strains of E. coli were isolated, and 49 (43%) were serogrouped as EPEC. The most common serogroups were O125, O126 and O158. Among the tested samples, 60 (52%) showed simultaneous resistance to two antimicrobials. A correspondence analysis was performed to assess possible correlations involving the site of isolation, serogroups and multi-resistance. The results of this analysis showed that the muscle was less correlated with the the other factors. However, the isolation of EPEC serogroups in this study demonstrates a risk to public health.(AU)

Sorologia e suscetibilidade antimicrobiana em isolados de Escherichia coli de pesque-pagues / Serology and patterns of antimicrobial susceptibility in Escherichia coli isolates from pay-to-fish ponds

Pesquisou-se a ocorrência de Escherichia coli (EPEC, EIEC, O157) em água e peixe (pele, trato digestivo e músculo) de pesque-pagues da microbacia do Córrego Rico, Jaboticabal (SP). Foram isoladas 115 cepas de E. coli, entre as quais 49 (43%) foram sorogrupadas como EPEC. Os sorogrupos mais frequentes foram O125, O126 e O158. Dentre as amostras testadas, 60 (52%) apresentaram resistência simultânea a dois antimicrobianos. A análise de correspondência foi realizada com o intuito de verificar as possíveis correspondências envolvendo o local de isolamento, sorogrupos e multirresistência e, com isso, pôde-se observar que o músculo apresentou menor correspondência com os demais fatores analisados. Porém, o isolamento de sorogrupos EPEC neste estudo representa risco à saúde dos consumidores.(AU)

The occurrence of Escherichia coli (EPEC, EIEC and O157) in water and fish (skin, gut and muscle) in pay-to-fish ponds of the micro bay of Córrego Rico, in Jaboticabal (SP), was assessed. One hundred and fifteen strains of E. coli were isolated, and 49 (43%) were serogrouped as EPEC. The most common serogroups were O125, O126 and O158. Among the tested samples, 60 (52%) showed simultaneous resistance to two antimicrobials. A correspondence analysis was performed to assess possible correlations involving the site of isolation, serogroups and multi-resistance. The results of this analysis showed that the muscle was less correlated with the the other factors. However, the isolation of EPEC serogroups in this study demonstrates a risk to public health.(AU)

Enterohemorrhagic Escherichia coli O157: H7 from healthy dairy cattle in Mid-West Brazil: occurrence and molecular characterization / Escherichia coli enterohemorrágica O157: H7 em bovinos leiteiros saudáveis no Centro-Oeste do Brasil: ocorrência e caracterização molecular

Enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) serotype O157:H7 represents the major Shiga toxin-producing E. coli (STEC) strain related to large outbreaks and severe diseases such as hemorrhagic colitis (HC) and the potentially lethal hemolytic uremic syndrome (HUS). The aim of this study was to report the occurrence and molecular characterization of O157:H7 isolates obtained by rectal swab from 52 healthy dairy cattle belonging to 21 farms in Mid-West of Brazil. Detection of 16SrRNA, stx1, stx2, rfbO157, fliCh7, eae, ehxA, saa, cnf1, chuA, yjaA and TSPE4.C2 genes was performed by PCR. The isolates were further characterized by serotyping. Two hundred and sixty E. coli isolates were obtained, of which 126 were characterized as STEC. Two isolates from the same cow were identified as serotype O157:H7. Both isolates presented the stx2, eae, ehxA, saa and cnf1 virulence factor genes and the chuA gene in the phylogenetic classification (virulent group D), suggesting that they were clones. The prevalence of O157:H7 was found to be 1.92% (1/52 animals), demonstrating that healthy dairy cattle from farms in the Mid-West of Brazil are an important reservoir for highly pathogenic E. coli O157:H7.(AU)

Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC) sorotipo O157:H7 representa as principais cepas de E. coli produtoras de toxina Shiga (STEC) relatadas em grandes surtos e doenças graves, tais como colite hemorrágica (CH) e síndrome hemolítica urêmica (SHU), potencialmente letais. O objetivo deste estudo foi reportar a ocorrência e caracterização molecular de STEC 0157:H7 isoladas por swab retal de 52 bovinos saudáveis pertencentes a 21 rebanhos leiteiros do Centro-Oeste do Brasil. A detecção dos genes 16SrRNA, stx1, stx2, rfbO157, fliCh7, eae, ehxA, saa, cnf1, chuA, yjaA e TSPE4.C2 foi realizada por PCR. Os isolados foram ainda caracterizados por sorotipagem. Dos 260 isolados de E. coli obtidos, 126 foram caracterizados como STEC. Dois deles, oriundos do mesmo animal, foram caracterizados como pertencentes ao sorotipo O157:H7. Ambos apresentaram os genes de virulência stx2, eae, ehxA, saa e cnf1 e na caracterização filogenética, o gene chuA (grupo patogênico D), sugerindo que eles foram clones. A prevalência de O157:H7 foi de 1,92% (1/52 animais), demonstrando que os bovinos leiteiros saudáveis de fazendas do Centro-Oeste do Brasil são importantes reservatórios de E. coli O157:H7 altamente patogênicas.(AU)

Qualidade microbiológica da carcaça bovina durante o processo de abate e a ocorrência de e. Coli o157 h7 na carne / Microbiological quality of cattle carcass during harvest process and the occurrence of e. Coli o157 h7 in meat

A Escherichia coli O157: H7 é uma importante cepa associada a surtos graves de enfermidade em seres humanos, a maioria deles derivada do consumo de carne crua ou mal cozida. É provável que o gado atue como um importante reservatório, sugerindo-se a possibilidade de que a gestão da dieta no confinamento possa influenciar o aparecimento de cepas Shigatoxigênicas. Este estudo teve como objetivo verificar a qualidade microbiológica das carcaças e a ocorrência de E. coli O157: H7, por meio dos resultados obtidos por métodos indicadores (contagem total de microrganismos viáveis, contagem de Coliformes e de E. coli) e por um método automatizado de PCR para detecção de E. coli O157: H7. Foram colhidas amostras de retalhos de carne (carne industrial) e de carcaças de bovinos terminados em pastagem ou em confinamento, permitindo o fornecimento de subsídios necessários para a Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle (HACCP). Desses mesmos animais foram colhidas, também, amostras de swab retal para a detecção experimental de E. coli O157: H7 nas fezes. Um total de 100 swabs retais, 100 amostras de carcaças quentes, além de outras 323 amostras de aparas de carne (retalhos da desossa), foram analisados. Com exceção de uma amostra de retalhos de carne (0,31%), todas as demais, de fezes e de carcaças, foram negativas para a presença de E. coli O157: H7. Não houve diferenças significativas entre os tipos de terminação utilizada para o gado. Os resultados dos métodos indicadores foram considerados aceitáveis em 91%, 85% e 93% das amostras testadas, respectivamente, para a CTV, contagem de Coliformes e de E. coli de carcaças, dando suporte e em acordo com a baixa ocorrência da cepa O157: H7(AU)

Escherichia coli O157:H7, an important bacillus strain associated with serious gastroenteritis in humans, is more frequently derived from the consumption of raw or poorly cooked beef. Cattle are important reservoirs suggesting the possibility that feedlot diet management influences the emergence of Shiga-toxigenic strains. This study evaluates the microbiological quality of carcasses and the occurrence of E. coli O157:H7 using the results from general indicator methods (total viable count, coliform rate and E. coli counts) and by an automated PCR method for the detection of E. coli O157:H7. Samples were collected from (industrially processed) meat trimmings and from carcasses of cattle finished on pasture or in feedlots so that sufficient data for the Hazard Analysis and Critical Control Points (HACCP) could be obtained. Samples of rectal swab for experimental detection of E. coli O157:H7 were also collected. One hundred rectal swabs, 100 samples retrieved from warm carcasses and 323 samples of meat trimmings were analyzed. With the exception of one sample of meat trim (0.31%), all the other samples from excreta and carcasses were negative for the O157:H7 E. coli strain. There were no significant differences between the methods used for cattle finishing. Indicator methods results were considered acceptable in 91%, 85% and 93% of tested samples of carcasses respectively for TVC, coliform and E. coli counts. These results agree with statistical data showing the low occurrence of O157:H7 strain(AU)

Sobrevivência de Escherichia coli 0157: H7 em iogurtes com diferentes teores de açúcar / Survival of Escherichia coli 0157: H7 in yoghurts with different levels of sugar

The aim of this work was determine the viability of Escherichia coli 0157:H7 in yoghurt with different concentrations of sucrose (O, 10 and 15%) during 30 days of storage under refrigeration at 4.0°C±2.0°C. There was no difference apparent in pH among the yoghurt types. Yoghurt with no sugar and with 10% sucrose presented initially pH 4.52 and 4.44, respectively, and dropped in both to 4.32 at the end of storage. Yoghurt with 15% sucrose presented initial and final pH of 4.40 and 4.16, respectively. The acid lactic was 0.64 ± 0.04% on day O for three yoghurt types and there was no great variation during the time. Streptococcus thermophilus remained the 30 days of storage with log 9.0 CFU/mL and Lactobacillus bulgaricus about log 8.0-9.0 CFU/mL in all yoghurts. E. coli 0157:H7 survival S, 7and 8 days in yoghurt with O, 10% and 15% of sucrose, respectively. It was observed that the greater survival of pathogen occurred in yoghurt with more content of sucrose. (AU)

O objetivo do presente trabalho foi determinar a viabilidade de Escherichia coli 0157:H7 em iogurtes com diferentes concentrações de sacarose (O, 10, 15%) durante 30 dias de estocagem sob refrigeração a 4,0°C±2,0°C. Não houve diferença aparente no pH entre os tipos de iogurte. Iogurte sem açúcar e com 10% de sacarose apresentaram inicialmente pH de 4,52 e 4,44, respectivamente, caindo para 4,32 no final da estocagem; o pH baixou de 4,40 a 4,16 em iogurte com 15% de sacarose. Os três tipos de iogurte apresentaram 0,64±0,04% de ácido lático e não houve grande alteração com o tempo de refrigeração. S. thermophilus permaneceu os 30 dias de estocagem com log 9,0 UFC/mL e L bulgaricus entre log 8,0-9,0 UFC/rnL em todos os iogurtes. E. coli 0157:H7 sobreviveu 5, 7 e 8 dias em iogurte com 0, 10 e 15% de sacarose, respectivamente. Observou-se que a maior sobrevivência do patógeno ocorreu em iogurte com maior teor de açúcar. (AU)

Pesquisa de Escherichia coli sorotipo O157: H7 em carcaças de bovinos oriundos de abatedouros frigoríficos localizados no Distrito Federal e Goiás / Research Escherichia coli serotype O157: H7 in beef carcasses from slaughterhouses located in the Federal District and Goias

The aim of this work was to detect Escherichia coli, specifically 0157 : H7 serotype, in beef half carcasses from slaughterhouses located in Federal District area and State of Goiás. For this, methods of culture, serology, biochemical tests and the polymerase chain reaction were used, as well as the enumeration of this microorganism. 15 strains of E. coli were detected from 40 (37.5%) beef half-carcasses analyred. In the plate count procedure, it was observed the microrganism in only two of the 40 samples (5%), showed typical colonies from which it was obtained an average of 100 CFU / cm 2. Serotype 0157: H7 was not detected by any of the methods employed. These results suggest that care can be taken during the slaughter, since food contamination by E. coli may indicate inadequate hygiene and sanitary measures in the industrialization process. (AU)

Este trabalho teve por objetivo detectar a presença da Escherichia coli, mais especificamente o sorotipo 0157 : H7, em meias-carcaças bovinas provenientes de abatedouros frigoríficos situados no Distrito Federal e no Estado de Goiás. Para tanto, foram utilizados métodos de cultura microbiológica, sorologia, testes bioquímicos e a reação em cadeia da polimerase (PCR), além da contagem microbiana deste micro-organismo. Foram isoladas 15 cepas de E. coli a partir das 40 meias-carcaças bovinas analisadas (37,5%). No procedimento de contagem em placa, observou-se que das 40 amostras, apenas duas (5%) apresentaram colônias típicas, das quais obteve-se uma média de 100 UFC/cm2• O sorotipo 0157 : H7 não foi detectado por nenhum dos métodos empregados. Estes resultados, apesar da não detecção do sorotipo 0157 : H7, evidenciam que cuidados adicionais podem ser tomados durante a fase de abate, pois a contaminação de alimentos pelo micro-organismo em questão pode indicar inadequação de medidas higienicossanitárias no processo de industrialização. (AU)

Detecção de Escherichia coli O157: H7 inoculada experimentalmente em amostras de leite cru por método convencional e PCR multiplex / Detection of E. coli O157: H7 experimentally inoculated in raw milk samples by conventional method and multiplex PCR

Padronizou-se um método de reação em cadeia da polimerase (PCR) multiplex para detecção de Escherichia coli O157:H7 e avaliou-se a eficiência da PCR e de um método de cultivo convencional em placas na detecção desse patógeno experimentalmente adicionado em leite estéril e em leite cru com baixa contagem bacteriana total (média de 4,01 x 10³ UFC/ml) e com alta contagem bacteriana (média de 2,10 x 10(6) UFC/ml). Foram padronizadas duas reações de PCR com o uso dos primers: "A" (RfbF; RfbR e FLICh7F/FLICh7R) e "B" (SLT-IF/SLTIR e SLT-IIF/SLT-IIR). A detecção de E. coli O157:H7 (1UFC/ml) a partir do leite estéril e do leite cru com baixa contaminação bacteriana foi possível quando se utilizou o método de contagem em placas e a PCR. A sensibilidade dos dois métodos foi menor quando se testou o leite cru com alta contaminação microbiana, sendo o método convencional mais sensível. Os resultados indicam que a presença de outros microrganismos, em alta quantidade no leite, dificulta a detecção de E. coli O157:H7 pelos métodos utilizados.(AU)

This experiment was carried out in order to evaluate the effect of the raw milk bacterial count on the efficiency of a multiplex polymerase chain reaction and a conventional plate count method for detection of Escherichia coli O157:H7. This pathogen was experimentally inoculated into sterile milk, raw milk with low bacterial count (count mean of 4.01 x 10³ cfu/ml) and, raw milk with high bacterial count (mean 2.10 x 10(6) cfu/ml). Two protocols of PCR were standardized using primers "A" (Rfbf and Rfbr and FLICh7F/FLICh7R) and "B" (SLT-IF/SLTIR and SLT-IIF/SLT-IIR). Both conventional plate count and PCR methods were able to detect the presence of E. coli O157:H7 in either sterile milk or raw milk with low bacterial count initially inoculated with 1cfu of E. coli O157:H7 per ml. The sensibility of both methods for high-contaminated raw milk samples was lower, being the conventional approach more sensitive. These results indicate that high bacterial count in raw milk can affect E. coli O157:H7 detection.(AU)

Fate of non O157 Shiga toxigenic Escherichia coli in composted cattle manure / Eliminação de Escherichia coli Shigatoxigênica não-O157 em compostagem de esterco bovino

To determine the fate of Shiga toxigenic Escherichia coli (STEC) non-O 157 in composted manure from naturally colonized cattle, fresh manure was obtained from three cows carrying non-O157 STEC strains possessing the stx2 gene. Two composting systems were used: a 0.6m deep cave opened in the soil and an one meter high solid manure heap in a pyramidal architecture. Every day, for the 10 first days, and every five days for a month, one manure sample from three different points in both systems was collected and cultured to determine the presence of E. coli and the presence of the stx 2 gene in the cells. The temperature was verified at each sampling. STEC non-O157 E. coli cells survived for 8, 25 and 30 days at 42, 40 and 38ºC, respectively, in the deep cave and 4, 4 and 7 days at 65, 58 and 52ºC, respectively, in the heap, during the composting manure. Temperature and indigenous microorganisms appear to contribute to pathogen disappearance in the composting system. It is concluded that both composting systems were efficient to eliminate STEC cells. Land application of composted manure should minimize environmental risk associated with the dissemination of the pathogen (AU)

Determinou-se o tempo necessário para a eliminação de Escherichia coli Shigatoxigênica (STEC) não-O157 em esterco bovino composto, obtido de fezes frescas de três vacas portadoras de cepas STEC não-O157 que apresentavam o gene stx 2. Foram utilizados dois sistemas de compostagem, o primeiro foi um buraco de 0,6m escavado no solo e o segundo um monte apresentando uma arquitetura piramidal com um metro de altura. Todos os dias, durante os primeiros 10 dias e a cada cinco dias durante um mês, uma amostra de três pontos diferentes dos dois sistemas de compostagem foram coletadas e semeadas para determinar a presença de E. coli e a presença do gene stx 2 nas células, sendo que em cada coleta a temperatura do sistema de compostagem foi determinada. Células de STEC não-O157 sobreviveram por 8, 25 e 30 dias nas temperaturas de 42, 40 e 38ºC, respectivamente, no sistema enterrado no solo, enquanto que no sistema de monte as células foram detectadas por 4, 4 e 7 dias em temperaturas de 65, 58 e 52ºC, respectivamente. A temperatura e os microrganismos presentes na microbiota do sistema de compostagem parecem ser os responsáveis pela eliminação do patógeno. Pode-se concluir que os dois sistemas de compostagem utilizados mostraram-se eficientes na eliminação de células de STEC. A aplicação de esterco após compostagem deve diminuir o risco de contaminação ambiental e a disseminação do patógeno (AU)

Escherichia coli O157: isolamento e identificação em amostras de fezes suínas oriundas de matadouro-frigorífico / Escherichia coli O157: isolation and identification in samples swine feces of abattoirs

A suinocultura destaca-se nos setores da economia, gerando recursos financeiros desde a criação zootécnica à comercialização dos produtos oriundos do abate. Entretanto, as fezes suínas podem conter Escherichia coli 0157, e outros resíduos agroindustriais não tratados, de importância epidemiológica, contaminando solo, lençol freático, equipamentos e instalações, disseminando microrganismo principalmente na utilização de fezes suínas, não tratadas pelo processo de biodigestão, na agricultura orgânica. Procedeu-se à técnica Merck (1996) para isolamento e diferenciação das cepas EHEC e Escherichia coli 0157 :H7. Para a identificação bioquímica e sorologia, seguiu-se Toledo, et al., 1982 a,b; Drieg & Holt, 1984 & Ewing, 1986, respectivamente. Aplicaram-se técnicas genéticas de reação de polimerase em cadeia (PCR), segundo China et al., 1996 e Paton & Paton, 1998, para PCR1, PCR2 correspondentemente. Das 20 amostras pesquisadas, uma amostra (5 por cento) apresentou Escherichia coli 0157:H7. Faz-se necessária a aplicação de monitoramento para certificar-se que atividades agropecuárias e industriais não representem riscos à produção de alimentos seguros, tão necessários aos mundo moderno, e que, através do desenvolvimento sustentável, promovam a manutenção da biodiversidade bacteriana própria de cada nicho ecológico. Cabe aos órgãos fiscalizados e a comunidade científica, implementar programas visando erradicar ou minimizar a presença deste microrganismo na cadeia alimentar, evitando-se o risco de prejuízos à saúde pública pela ingestão acidental desta bactéria.(AU)

The swine breeding stands out in the sections of the economy generating financial resources from the zoo Tec creation to the commercialization of the products originating from of the slaughtery. How ever, the swine faeces can contain escherichia coli 0157, and other non-treat ed industries residues of epidemiological importance, contaminating the soil, ground water, equipments and facilities, disseminating the microorganisms mainly in the use of swine faeces, not treated by the biodigestion process, in the organic agriculture Proceeded the Merck (1996) technic for isolation and differentiation of EHEC and Escherichia coZi0157:H7 strains. For bio chemical and serological identification were followed Toledo et al., 1982 a,b; Krieg et al., 1984 and Ewing, 1986, respective. The genetic technique of polymerase in chain(PCR) reaction were applied in according to China et al., 1996 and Paton & Paton, 1998,for PCR1 and PCR2 correspondingly. Of the 20 researched samples, one (5%) presented Escherichia coli 0157:H-. It is necessary to applicate the monitoring to certify that agricultural and industrial activities don' t represent risk to the safe food production, so necessary to the modern world, and that through the maintenable development, promote the maintenance the own bacterial biodiversity of each ecological niche. Falls to the inspect organsand scientific community, to implement programs seeking to eradicate or to minimize the presence of this microorganism in the alimentary chain, being avoided the risk of damage to the public health for the accidental ingestion of this bacteria. (AU)