Eugenol and its liposome-based nano carrier reduce anxiety by inhibiting glyoxylase-1 expression in mice / Eugenol e seu nanocarreador à base de lipossoma reduzem a ansiedade ao inibir a expressão de glioxalase 1 em camundongos

Abstract The most common form of psycho-social dysfunction is anxiety with depression being related closely without any age bar. They are present with combined state of sadness, confusion, stress, fear etc. Glyoxalase system contains enzyme named glyoxalase 1 (GLO1).It is a metabolic pathway which detoxifies alpha-oxo-aldehydes, particularly methylglyoxal (MG). Methylglyoxal is mainly made by the breakdown of the glycolytic intermediates, glyceraldehyde-3-phosphates and dihydroxyacetone phosphate. Glyoxylase-1 expression is also related with anxiety behavior. A casual role or GLO-1 in anxiety behavior by using viral vectors for over expression in the anterior cingulate cortex was found and it was found that local GLO-1 over expression increased anxiety behavior. The present study deals with the molecular mechanism of protective activity of eugenol against anxiolytic disorder. A pre-clinical animal study was performed on 42 BALB/c mice. Animals were given stress through conventional restrain model. The mRNA expression of GLO-1 was analyzed by real time RT-PCR. Moreover, the GLO-1 protein expression was also examined by immunohistochemistry in whole brain and mean density was calculated. The mRNA and protein expressions were found to be increased in animals given anxiety as compared to the normal control. Whereas, the expressions were decreased in the animals treated with eugenol and its liposome-based nanocarriers in a dose dependent manner. However, the results were better in animals treated with nanocarriers as compared to the compound alone. It is concluded that the eugenol and its liposome-based nanocarriers exert anxiolytic activity by down-regulating GLO-1 protein expression in mice.

Resumo A forma mais comum de disfunção psicossocial é a ansiedade intimamente relacionada com a depressão, sem qualquer barreira de idade. Elas estão presentes em um estado combinado de tristeza, confusão, estresse, medo etc. O sistema de glioxalase contém uma enzima chamada glioxalase 1 (GLO1). É uma via metabólica que desintoxica alfa-oxo-aldeídos, particularmente metilglioxal (MG). O metilglioxal é produzido principalmente pela quebra dos intermediários glicolíticos, gliceraldeído-3-fosfatos e fosfato de diidroxiacetona. A expressão da glioxalase 1 também está relacionada ao comportamento de ansiedade. Um papel casual ou GLO1 no comportamento de ansiedade usando vetores virais para superexpressão no córtex cingulado anterior foi encontrado e descobriu-se que a superexpressão local de GLO1 aumentava o comportamento de ansiedade. O presente estudo trata do mecanismo molecular da atividade protetora do eugenol contra o transtorno ansiolítico. Um estudo pré-clínico em animais foi realizado em 42 camundongos BALB / c. Os animais foram submetidos ao estresse por meio do modelo de contenção convencional. A expressão de mRNA de GLO1 foi analisada por RT-PCR em tempo real. Além disso, a expressão da proteína GLO1 também foi examinada por imuno-histoquímica em todo o cérebro e a densidade média foi calculada. Verificou-se que as expressões de mRNA e proteínas estavam aumentadas em animais que receberam ansiedade em comparação com o controle normal. Considerando que as expressões foram diminuídas nos animais tratados com eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas de forma dependente da dose. No entanto, os resultados foram melhores em animais tratados com nanocarreadores em comparação com o composto sozinho. Conclui-se que o eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas exercem atividade ansiolítica por regulação negativa da expressão da proteína GLO1 em camundongos.

Óleos essenciais como suplementação na dieta de vacas leiteiras e a sua influência na composição do leite / Use of essential oils as supplementation in the diet of dairy cows at IFMG ­ campus Bambuí and its influence on milk production and composition / Uso de aceites esenciales como suplemento en la dieta de las vacas lecheras en IFMG - campus Bambuí y su influencia en la producción y composición de la leche

Este estudo teve como intuito apresentar pesquisas e dados relacionados à inclusão de óleos essenciais microencapsulados na dieta de vacas leiteiras, realizando, assim, levantamento de dados sobre a produtividade do leite e também sobre a sua composição e qualidade, efetuando comparações entre vacas suplementadas e não suplementadas. A pesquisa foi realizada no setor de bovinocultura leiteira do IFMG - Campus Bambuí, utilizando-se 40 vacas com diferentes graus de sangue e com variações entre 27 e 300 dias em lactação. As vacas foram mantidas em sistema semi-intensivo, pois tinham acesso aos piquetes rotacionados e recebiam suplementação de silagem de milho e concentrado antes de se iniciar as ordenhas. O trabalho baseia-se em uma comparação de antes e após o uso de óleos essenciais. Diante disso, o estudo teve duração total de 82 dias, com as coletas de dados diárias sobre o consumo alimentar das vacas, produtividade e coleta de amostras de leite destinadas à análise no LaQal (Laboratório de Análise de Qualidade de Água e Leite) do IFMG - Campus Bambuí. Os animais receberam 5 g/vaca/dia de óleos essenciais microepsulados, um produto comercial com os seguintes princípios ativos: carvacrol, cinamaldeido, eugenol, oleoresina e veículo. Os dados foram tabulados e transformados em valores nominais e percentuais para, a partir daí, serem construídos os gráficos com a finalidade de facilitar a interpretação dos resultados. Portanto, no presente trabalho, realizou-se uma análise exploratória dos dados de grau de sangue, produção de leite diária, composição do leite, contagem de células somáticas (CCS) e consumo alimentar de silagem de milho e concentrado. Ademais, o nível de significância adotado foi de 0,05% (valor-p=0,05). Utilizou-se o pacote dplyr, do programa estatístico R (R CORE TEAM, 2022), e, para análises, o teste-t de Student, utilizando-se a função t.test do pacote stats do programa estatístico R. Não foram obtidos resultados significantes sobre a produtividade do leite, nem sobre sua composição, CCS e consumo. Embora o produto comercial não tenha demonstrado influência sobre as análises realizadas, são necessários mais estudos para melhor conhecimento da sua ação e de seus beneficios para a produção animal.

This study aimed to present research and data related to the inclusion of microencapsulated essential oils in the diet of dairy cows, thus performing a survey of data on milk productivity and also on its composition and quality, making comparisons between supplemented and non-supplemented cows. The research was carried out the dairy cattle sector of the IFMG - Campus Bambuí, using 40 cows with different degrees of blood and with variations between 27 and 300 days in lactation. Cows were kept in a semi-intensive system, as they had access to rotated paddocks and received supplementation with corn silage and concentrate before starting milking. The work is based on a comparison of before and after the use of essential oils. Therefore, the study lasted a total of 82 days, with daily data collection on the cows' food consumption, productivity and collection of milk samples destined for analysis in the IFMG's LaQal (Laboratory for the Analysis of Water and Milk Quality) - Campus Bambui. The animals received 5 g/cow/day of microencapsulated essential oils, a commercial product with the following active ingredients: carvacrol, cinnamaldehyde, eugenol, oleoresin and vehicle. The data were tabulated and transformed into nominal values and percentages so that, from there, graphs could be constructed in order to facilitate the interpretation of the results. Therefore, in the present work, an exploratory analysis of blood grade data, daily milk production, milk composition, somatic cell count (SCC) and food consumption of corn silage and concentrate was carried out. Furthermore, the significance level adopted was 0.05% (p-value = 0.05). The dplyr package, from the R statistical program (R CORE TEAM, 2022), was used and, for analyses, Student's t-test, using the t.test function from the stats package of the R statistical program. significant results on milk productivity, nor on its composition, CCS and consumption. Although the commercial product has not shown influence on the analyzes carried out, further studies are needed to better understand its action and its benefits for animal production.

Este estudio tuvo como objetivo presentar investigaciones y datos relacionados con la inclusión de aceites esenciales microencapsulados en la dieta de las vacas lecheras, realizando así un levantamiento de datos sobre la productividad de la leche y también sobre su composición y calidad, haciendo comparaciones entre vacas suplementadas y no suplementadas. investigación se realizó en el sector de ganado lechero de la IFMG - Campus Bambuí, utilizando 40 vacas con diferentes grados de sangre y con variaciones entre 27 y 300 días en lactación. Las vacas se mantuvieron en un sistema semi-intensivo, ya que tenían acceso a potreros rotados y recibieron suplementación con ensilado de maíz y concentrado antes de iniciar el ordeño. El trabajo se basa en una comparación del antes y el después del uso de los aceites esenciales. Por lo tanto, el estudio duró un total de 82 días, con la recolección diaria de datos sobre el consumo de alimentos de las vacas, la productividad y la recolección de muestras de leche destinadas para análisis en el LaQal (Laboratorio de Análisis de Calidad de Agua y Leche) de la IFMG - Campus Bambuí. Los animales recibieron 5 g/vaca/día de aceites esenciales microencapsulados, producto comercial con los siguientes principios activos: carvacrol, cinamaldehído, eugenol, oleorresina y vehículo. Los datos fueron tabulados y transformados en valores nominales y porcentajes para que, a partir de ahí, se construyeran gráficas para facilitar la interpretación de los resultados. Por lo tanto, en el presente trabajo se realizó un análisis exploratorio de los datos de grado sanguíneo, producción diaria de leche, composición de la leche, conteo de células somáticas (RCS) y consumo alimentario de ensilado y concentrado de maíz. Además, el nivel de significancia adoptado fue de 0,05% (p-valor = 0,05). Se utilizó el paquete dplyr, del programa estadístico R (R CORE TEAM, 2022), y para los análisis, la prueba t de Student, utilizando la función t.test del paquete stats del programa estadístico R. No hubo resultados significativos en la productividad lechera, ni sobre su composición, CCS y consumo. Aunque el producto comercial no ha mostrado influencia en los análisis realizados, se necesitan más estudios para comprender mejor su acción y sus beneficios para la producción animal.

Smartphone-based rapid and low-cost method for the determination of eugenol content of clove essential oil / Método rápido e de baixo custo empregando smartphone para a determinação de eugenol em óleo essencial de cravo

The determination of eugenol in clove essential oil was performed using a smartphone-operated device, which was used for image capture and processing. The colorimetric reaction with the Folin-Ciocalteu reagent was used, and the lighting conditions were evaluated to capture images directly in 2 mL disposable vessels. The free application PhotoMetrix UVC was used for partial least squares regression calibration with suitable values (R² greater than 0.99). The accuracy of the proposed method was compared with traditional methods, such as gas chromatography (GC) and spectrophotometry, and it can be observed that there were no significant differences (Student's t-test (P > 0.05), with agreements from 97% to 101%. The smartphone method allowed the evaluation of several samples in a few minutes, with simple analysis steps and easy interpretation of the results. The miniaturized scale allowed the use of small amounts of reagents with minimal waste generation. Therefore, the proposed method can be easily operated in the field and allows the evaluation of the quality of clove essential oil in places of restricted access without the need for a laboratory structure and specialized analysts.

A determinação de eugenol em óleo essencial de cravo-da-índia foi realizada utilizando um dispositivo operado com smartphone para captura e processamento de imagens. Para tal desenvolvimento foi utilizada a reação colorimétrica com o reagente de Folin-Ciocalteu. Foram avaliadas diferentes condições de iluminação para a captura das imagens diretamente em frascos descartáveis de 2 mL. O aplicativo livre PhotoMetrix UVC foi usado para a calibração por regressão de mínimos quadrados parciais com valores adequados (R2 maior que 0.99). A exatidão do método proposto foi comparada com métodos tradicionais, tais como cromatografia gasosa (CG) e espectrofotometria, sem diferenças significativas (teste t de Student (P > 0,05) e com concordâncias entre 97% e 101%. O método com smartphone permitiu a avaliação de várias amostras em poucos minutos, com etapas de análise simples e com fácil interpretação dos resultados. A escala miniaturizada permitiu o uso de pequenas quantidades de reagentes e mínima geração de resíduos. Portanto, o método proposto pode ser facilmente operado em campo e permite avaliar a qualidade de óleo essencial de cravo- da- índia em locais de acesso restrito, sem a necessidade de estrutura laboratorial e analistas especializados.

Eugenol and its liposome-based nano carrier reduce anxiety by inhibiting glyoxylase-1 expression in mice / Eugenol e seu nanocarreador à base de lipossoma reduzem a ansiedade ao inibir a expressão de glioxalase 1 em camundongos

The most common form of psycho-social dysfunction is anxiety with depression being related closely without any age bar. They are present with combined state of sadness, confusion, stress, fear etc. Glyoxalase system contains enzyme named glyoxalase 1 (GLO1).It is a metabolic pathway which detoxifies alpha-oxo-aldehydes, particularly methylglyoxal (MG). Methylglyoxal is mainly made by the breakdown of the glycolytic intermediates, glyceraldehyde-3-phosphates and dihydroxyacetone phosphate. Glyoxylase-1 expression is also related with anxiety behavior. A casual role or GLO-1 in anxiety behavior by using viral vectors for over expression in the anterior cingulate cortex was found and it was found that local GLO-1 over expression increased anxiety behavior. The present study deals with the molecular mechanism of protective activity of eugenol against anxiolytic disorder. A pre-clinical animal study was performed on 42 BALB/c mice. Animals were given stress through conventional restrain model. The mRNA expression of GLO-1 was analyzed by real time RT-PCR. Moreover, the GLO-1 protein expression was also examined by immunohistochemistry in whole brain and mean density was calculated. The mRNA and protein expressions were found to be increased in animals given anxiety as compared to the normal control. Whereas, the expressions were decreased in the animals treated with eugenol and its liposome-based nanocarriers in a dose dependent manner. However, the results were better in animals treated with nanocarriers as compared to the compound alone. It is concluded that the eugenol and its liposome-based nanocarriers exert anxiolytic activity by down-regulating GLO-1 protein expression in mice.

A forma mais comum de disfunção psicossocial é a ansiedade intimamente relacionada com a depressão, sem qualquer barreira de idade. Elas estão presentes em um estado combinado de tristeza, confusão, estresse, medo etc. O sistema de glioxalase contém uma enzima chamada glioxalase 1 (GLO1). É uma via metabólica que desintoxica alfa-oxo-aldeídos, particularmente metilglioxal (MG). O metilglioxal é produzido principalmente pela quebra dos intermediários glicolíticos, gliceraldeído-3-fosfatos e fosfato de diidroxiacetona. A expressão da glioxalase 1 também está relacionada ao comportamento de ansiedade. Um papel casual ou GLO1 no comportamento de ansiedade usando vetores virais para superexpressão no córtex cingulado anterior foi encontrado e descobriu-se que a superexpressão local de GLO1 aumentava o comportamento de ansiedade. O presente estudo trata do mecanismo molecular da atividade protetora do eugenol contra o transtorno ansiolítico. Um estudo pré-clínico em animais foi realizado em 42 camundongos BALB / c. Os animais foram submetidos ao estresse por meio do modelo de contenção convencional. A expressão de mRNA de GLO1 foi analisada por RT-PCR em tempo real. Além disso, a expressão da proteína GLO1 também foi examinada por imuno-histoquímica em todo o cérebro e a densidade média foi calculada. Verificou-se que as expressões de mRNA e proteínas estavam aumentadas em animais que receberam ansiedade em comparação com o controle normal. Considerando que as expressões foram diminuídas nos animais tratados com eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas de forma dependente da dose. No entanto, os resultados foram melhores em animais tratados com nanocarreadores em comparação com o composto sozinho. Conclui-se que o eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas exercem atividade ansiolítica por regulação negativa da expressão da proteína GLO1 em camundongos.

Eugenol and its liposome-based nano carrier reduce anxiety by inhibiting glyoxylase-1 expression in mice / Eugenol e seu nanocarreador à base de lipossoma reduzem a ansiedade ao inibir a expressão de glioxalase 1 em camundongos

The most common form of psycho-social dysfunction is anxiety with depression being related closely without any age bar. They are present with combined state of sadness, confusion, stress, fear etc. Glyoxalase system contains enzyme named glyoxalase 1 (GLO1).It is a metabolic pathway which detoxifies alpha-oxo-aldehydes, particularly methylglyoxal (MG). Methylglyoxal is mainly made by the breakdown of the glycolytic intermediates, glyceraldehyde-3-phosphates and dihydroxyacetone phosphate. Glyoxylase-1 expression is also related with anxiety behavior. A casual role or GLO-1 in anxiety behavior by using viral vectors for over expression in the anterior cingulate cortex was found and it was found that local GLO-1 over expression increased anxiety behavior. The present study deals with the molecular mechanism of protective activity of eugenol against anxiolytic disorder. A pre-clinical animal study was performed on 42 BALB/c mice. Animals were given stress through conventional restrain model. The mRNA expression of GLO-1 was analyzed by real time RT-PCR. Moreover, the GLO-1 protein expression was also examined by immunohistochemistry in whole brain and mean density was calculated. The mRNA and protein expressions were found to be increased in animals given anxiety as compared to the normal control. Whereas, the expressions were decreased in the animals treated with eugenol and its liposome-based nanocarriers in a dose dependent manner. However, the results were better in animals treated with nanocarriers as compared to the compound alone. It is concluded that the eugenol and its liposome-based nanocarriers exert anxiolytic activity by down-regulating GLO-1 protein expression in mice.(AU)

A forma mais comum de disfunção psicossocial é a ansiedade intimamente relacionada com a depressão, sem qualquer barreira de idade. Elas estão presentes em um estado combinado de tristeza, confusão, estresse, medo etc. O sistema de glioxalase contém uma enzima chamada glioxalase 1 (GLO1). É uma via metabólica que desintoxica alfa-oxo-aldeídos, particularmente metilglioxal (MG). O metilglioxal é produzido principalmente pela quebra dos intermediários glicolíticos, gliceraldeído-3-fosfatos e fosfato de diidroxiacetona. A expressão da glioxalase 1 também está relacionada ao comportamento de ansiedade. Um papel casual ou GLO1 no comportamento de ansiedade usando vetores virais para superexpressão no córtex cingulado anterior foi encontrado e descobriu-se que a superexpressão local de GLO1 aumentava o comportamento de ansiedade. O presente estudo trata do mecanismo molecular da atividade protetora do eugenol contra o transtorno ansiolítico. Um estudo pré-clínico em animais foi realizado em 42 camundongos BALB / c. Os animais foram submetidos ao estresse por meio do modelo de contenção convencional. A expressão de mRNA de GLO1 foi analisada por RT-PCR em tempo real. Além disso, a expressão da proteína GLO1 também foi examinada por imuno-histoquímica em todo o cérebro e a densidade média foi calculada. Verificou-se que as expressões de mRNA e proteínas estavam aumentadas em animais que receberam ansiedade em comparação com o controle normal. Considerando que as expressões foram diminuídas nos animais tratados com eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas de forma dependente da dose. No entanto, os resultados foram melhores em animais tratados com nanocarreadores em comparação com o composto sozinho. Conclui-se que o eugenol e seus nanocarreadores baseados em lipossomas exercem atividade ansiolítica por regulação negativa da expressão da proteína GLO1 em camundongos.(AU)

Effects of ortho-eugenol on anxiety, working memory and oxidative stress in mice / Efeitos do orto-eugenol na ansiedade, memória de trabalho e estresse oxidativo em camundongos

Ortho-eugenol is a synthetic derivative from eugenol, the major compound of clove essential oil, which has demonstrated antidepressant and antinociceptive effects in pioneering studies. Additionally, its effects appear to be dependent on the noradrenergic and dopaminergic systems. Depression and anxiety disorders are known to share a great overlap in their pathophysiology, and many drugs are effective in the treatment of both diseases. Furthermore, high levels of anxiety are related to working memory deficits and increased oxidative stress. Thus, in this study we investigated the effects of acute treatment of ortho-eugenol, at 50, 75 and 100 mg/kg, on anxiety, working memory and oxidative stress in male Swiss mice. Our results show that the 100 mg/kg dose increased the number of head-dips and reduced the latency in the hole-board test. The 50 mg/kg dose reduced malondialdehyde levels in the prefrontal cortex and the number of Y-maze entries compared to the MK-801-induced hyperlocomotion group. All doses reduced nitrite levels in the hippocampus. It was also possible to assess a statistical correlation between the reduction of oxidative stress and hyperlocomotion after the administration of ortho-eugenol. However, acute treatment was not able to prevent working memory deficits. Therefore, the present study shows that ortho-eugenol has an anxiolytic and antioxidant effect, and was able to prevent substance-induced hyperlocomotion. Our results contribute to the elucidation of the pharmacological profile of ortho-eugenol, as well as to direct further studies that seek to investigate its possible clinical applications.

Ortho-eugenol é um derivado sintético do eugenol, composto principal do óleo essencial de cravo, que demonstrou efeitos antidepressivos e antinociceptivos em estudos pioneiros. Além disso, seus efeitos parecem ser dependentes dos sistemas noradrenérgico e dopaminérgico. Sabe-se que os transtornos de depressão e ansiedade compartilham uma grande sobreposição em sua fisiopatologia, e muitas drogas são eficazes no tratamento de ambas as doenças. Além disso, altos níveis de ansiedade estão relacionados a déficits de memória de trabalho e aumento do estresse oxidativo. Assim, o presente estudo investigou os efeitos do tratamento agudo de orto-eugenol, nas doses de 50, 75 e 100 mg/kg, na ansiedade, memória de trabalho e estresse oxidativo em camundongos Swiss machos. Nossos resultados mostram que a dose de 100 mg/kg aumentou o número de mergulhos e reduziu a latência no teste da placa perfurada. A dose de 50 mg/kg reduziu os níveis de malondialdeído no córtex pré-frontal e o número de entradas no labirinto em Y em comparação com o grupo de hiperlocomoção induzida por MK-801. Todas as doses reduziram os níveis de nitrito no hipocampo. Também foi possível avaliar uma correlação estatística entre a redução do estresse oxidativo e a hiperlocomoção após a administração do orto-eugenol. No entanto, o tratamento agudo não foi capaz de prevenir os déficits de memória de trabalho. Portanto, o presente estudo mostra que o orto-eugenol tem efeito ansiolítico e antioxidante, sendo capaz de prevenir a hiperlocomoção induzida pela substância. Nossos resultados contribuem para a elucidação do perfil farmacológico do orto-eugenol, bem como para direcionar novos estudos que busquem investigar suas possíveis aplicações clínicas.

Benzocaine and eugenol as anesthetics for pangasius juveniles, Pangasianodon hypophthalmus

The aim of this study was to evaluate the effect and efficacy of different concentrations of eugenol and benzocaine for pangasius juveniles (Pangasianodon hypophthalmus) and determine the anesthetic and concentration most appropriate for carrying out routine fish farming practices for this species. One hundred juveniles with an average weight of 32.10 ± 4.9 g and an average total length of 15.32 ± 0.57 cm were used. Four concentrations of both anesthetics were evaluated: 0, 25, 50, 75 and 100 mg/L, with four induction time stages and three recovery stages. During the time that the fish remained anesthetized, biometric procedures were performed. Then, they were transferred to a 10-liter aquarium containing clean water, without adding the anesthetic to observe the recovery time. After recovery, the animals were kept in aquariums for 72 hours to check for mortality. Eugenol, at all concentrations evaluated, and benzocaine, at a concentration of 25 mg/L, were not effective in sedating juveniles of pangasius. Benzocaine concentrations of 75 and 100 mg/L were effective for anesthesia and recovery of fish within the time span of five and seven minutes. However, considering animal welfare, the use of a concentration of 100 mg/L is recommended, as it resulted in shorter latency and recovery times.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito e a eficácia de diferentes concentrações de benzocaína e eugenol em juvenis de pangasius (Pangasianodon hypophthalmus) para determinar o anestésico mais eficiente e a concentração mais adequada para realização das práticas rotineiras em piscicultura para esta espécie. Foram utilizados 100 juvenis, com peso médio de 32,10 ± 4,9 g e comprimento total médio de 15,32 ± 0,57 cm. Foram avaliadas quatro concentrações para ambos os anestésicos: 0, 25, 50, 75 e 100 mg/L, sendo observados quatro estágios de tempo de indução e três estágios de recuperação. Durante o tempo em que os peixes permaneceram anestesiados, foram realizados os procedimentos de biometria. Em seguida, os animais foram transferidos para um aquário de 10 L contendo água limpa, sem adição do anestésico, para observar o tempo de recuperação. Após a recuperação, os animais foram mantidos nos aquários por 72 horas para verificação da mortalidade. O eugenol, em todas as concentrações avaliadas, e a benzocaína, na concentração de 25 mg/L, não foram eficazes na sedação de juvenis de pangasius. As concentrações de benzocaína de 75 e 100 mg/L foram eficientes para anestesia e recuperação dos peixes considerando a faixa de tempo pré-estabelecida de cinco e sete minutos, respectivamente. Entretanto, considerando o bem-estar animal, recomenda-se o uso da concentração de 100 mg/L, uma vez que resultou em menor tempo de latência e recuperação.

Effect of the Supplementation of Plant Extracts Based Additive in Broiler Chicken Diets on Productive Performance, Carcass Yield, and Meat Quality

The study aimed to evaluate the effect of supplementation of an additive based on plant and spice extracts in broiler chicken diets on the productive performance, carcass yield, and meat quality. 704 male broiler chicks were distributed in a completely randomized experimental design with 4 treatment, 4 replicates of 44 broiler chickens each. The experimental diets consisted of Diet 1: Control diet; Diet 2: Control diet + antibiotic growth promoters (AGP); Diet 3: Control diet + vegetable extracts (100 g/ton) and Diet 4: Control diet + vegetable extracts (150 g/ton). The vegetable extracts used were carvacrol, cinnamaldehyde, and eugenol extracted from oregano, cinnamon, and cloves. The supplementation of vegetal extracts did not affect (p>0.05) broiler chickens' productive performance or carcass yield. The lipid peroxidation (MDA nmol/mg protein) in the meat in natura was decreased (p<0.05) for broilers supplemented with vegetable extracts. The supplementation of 100 or 150 g/ton of vegetal extracts based on carvacrol, cinnamaldehyde, and eugenol did not affect broiler chickens' productive performance, carcass characteristics, and meat quality, and inhibited MDA production in broilers' in natura meat.(AU)

In vitro and in silico evaluation of the schistosomicidal activity of eugenol derivatives using biochemical, molecular, and morphological tools

Background Eugenol shows both antibacterial and antiparasitic activities, suggesting that it might be evaluated as an option for the treatment of praziquantel-resistant schistosome. Methods The in vitro activities of three eugenol derivatives (FB1, FB4 and FB9) on adult worms from Schistosoma mansoni were examined by fluorescence and scanning electron microscopy to analyze effects on the excretory system and integument damage, respectively. Biochemical tests with verapamil (a calcium channel antagonist) and ouabain (a Na+/K+-ATPase pump inhibitor) were used to characterize eugenol derivative interactions with calcium channels and the Na+/K+-ATPase, while in silico analysis identified potential Na+/K+-ATPase binding sites. Results The compounds showed effective doses (ED50) of 0.324 mM (FB1), 0.167 mM (FB4), and 0.340 mM (FB9). In addition, FB4 (0.322 mM), which showed the lowest ED50, ED90 and ED100 (p < 0.05), caused the most damage to the excretory system and integument, according to both fluorescence and scanning electron microscopy analysis. The death of adult worms was delayed by ouabain treatment plus FB1 (192 versus 72 hours) and FB9 (192 versus 168 hours), but the response to FB4 was the same in the presence or absence of ouabain. Besides, no changes were noted when all of the eugenol derivatives were combined with verapamil. Moreover, FB1 and FB9 inhibited Na+/K+-ATPase activity according to in silico analysis but FB4 did not show a time-dependent relationship and may act on targets other than the parasite Na+/K+-ATPase. Conclusion Eugenol derivatives, mainly FB4 when compared to FB1 and FB9, seem to act more effectively on the integument of adult S. mansoni worms.(AU)

Research of antifungal effects on some essential oils with tube dilution / Pesquisa de efeitos antifúngicos em alguns óleos essenciais com diluição em tubo

The aim of study to investigate inhibition effects of cinnamic acid (volatile compound of cinnamon), limonene (essential oil of lemon) and eugenol (essential oil of clove, cinnamon) on Metschnikowia fructicola, Candida oleophila, Schisosaccharomyces pombe, Saccharomyces uvarum and Kloeckera apiculata. In this study, tube dilution method was used. Among eugenol, limonene and cinnamic acid, it was found that cinnamic acid has the most inhibition effect with low concentrations (%2.8, %3.84, %4.36, %5,4) at tube dilution methods. Also it was found that test yeast have different resistance against test materials.(AU)

O objetivo do estudo foi investigar os efeitos de inibição do ácido cinâmico (composto volátil da canela), limoneno (óleo essencial de limão) e eugenol (óleo essencial de cravo, canela) sobre Metschnikowia fructicola, Candida oleophila, Schisosaccharomyces pombe, Saccharomyces uvarum e Kloeckera apiculata. Neste estudo, foi utilizado o método de diluição em tubo. Entre eugenol, limoneno e ácido cinâmico, verificou-se que o ácido cinâmico tem o maior efeito de inibição com baixas concentrações (% 2,8,% 3,84,% 4,36,% 5,4) nos métodos de diluição em tubo. Também foi descoberto que a levedura testada tem diferentes resistências contra os materiais de teste.(AU)

Eugenol and tricaine methanesulfonate as anhestesics for the pearl cichlid

Anesthesia reduces the handling process duration and prevent fish injuries. The anesthetic effect and ideal concentrations of eugenol and tricaine methanesulfonate (MS-222) were tested for pearl cichlid (Geophagus brasiliensis) juveniles with an average weight of 4.4 g in water at 24ºC. The criterion for determining the optimal dose considered an induction time of one minute. Experiment 1 tested the concentrations of 25, 75, 150 and 300 mg L-1 of eugenol. The best results were obtained at doses of 150 and 300 mg L-1. Experiment 2 aimed to establish a more accurate result by testing the concentrations of 180, 210, 240 and 270 mg L-1, and led to an estimation of 217 mg L-1 of eugenol to induce anesthesia in one minute. Experiment 3 evaluated 200, 300, 400, 500 and 600 mg L-1 of tricaine, of which the concentration of 294 mg L-1 was estimated to induce anesthesia in one minute. No significant differences were observed for recovery times when using either of the anesthetics. No mortality was observed within 24 hours after the experiments for any concentration of the anesthetics. The present study recommends 217 mg L-1 of eugenol or 394 mg L-1 of tricaine for anesthesia of the pearl cichlid.

Eugenol and tricaine methanesulfonate as anhestesics for the pearl cichlid

Anesthesia reduces the handling process duration and prevent fish injuries. The anesthetic effect and ideal concentrations of eugenol and tricaine methanesulfonate (MS-222) were tested for pearl cichlid (Geophagus brasiliensis) juveniles with an average weight of 4.4 g in water at 24ºC. The criterion for determining the optimal dose considered an induction time of one minute. Experiment 1 tested the concentrations of 25, 75, 150 and 300 mg L-1 of eugenol. The best results were obtained at doses of 150 and 300 mg L-1. Experiment 2 aimed to establish a more accurate result by testing the concentrations of 180, 210, 240 and 270 mg L-1, and led to an estimation of 217 mg L-1 of eugenol to induce anesthesia in one minute. Experiment 3 evaluated 200, 300, 400, 500 and 600 mg L-1 of tricaine, of which the concentration of 294 mg L-1 was estimated to induce anesthesia in one minute. No significant differences were observed for recovery times when using either of the anesthetics. No mortality was observed within 24 hours after the experiments for any concentration of the anesthetics. The present study recommends 217 mg L-1 of eugenol or 394 mg L-1 of tricaine for anesthesia of the pearl cichlid.(AU)

Eugenol as an efficient anesthetic for neotropical fish Prochilodus nigricans (Teleostei, Prochilodontidae) / [Eugenol como um anestésico eficaz para o peixe neotropical Prochilodus nigricans (Teleostei, Prochilodontidae)]

The use of anesthetics in fish farming is essential to reduce stress during management. The present study proposes to evaluate the effect of eugenol as an anesthetic for the management of curimatã (Prochilodus nigricans). Fifty specimens were used (221.34±9.0 g; 25.8 ±1.1 cm), submitted to five treatments with concentrations of 0, 25, 50, 100 and 200 mgL−1 eugenol for 10 min. The times required to reach each anesthetic stage and the recovery of each fish were recorded. To check bloodglucose levels individual blood samples were taken from the fish before immersion and after ten minutes of anesthetic exposure. Evaluation of the anesthetic effect ongills was performed by histopathological analysis. The concentration of 50 mgL−1 was within the ideal limit of three minutes recommended for surgical anesthesia induction and did not significantly increase glucose levels when compared to the control group (35.7±19.4 mg dL−1), besides not causing gill injuries. At this concentration the fish presented controlled blood glucose levels within the basal levels, besides not taking the risk to have later problems concernig mortality, because this concentration ensures the good health of the gills and good recovery of the animals.(AU)

O uso de anestésicos em pisciculturas é indispensável para reduzir o estresse durante o manejo. O presente trabalho propôs avaliar o efeito do eugenol como anestésico para manejo do curimatã (Prochilodus nigricans). Foram utilizados 50 espécimes (221,34±9,0 g; 25,8 ±1,1 cm), submetidos a cinco tratamentos com concentrações de 0, 25, 50, 100 e 200 mg L−1 de eugenol em exposição de 10 minutos. Foram registrados os tempos necessários para atingir cada estágio anestésico e a recuperação de cada peixe. Para verificação dos níveis de glicose sanguínea, foram realizadas coletas individuais de sangue dos peixes antes da imersão e após os 10 minutos de exposição ao anestésico. A avaliação do efeito do anestésico sobre as brânquias foi realizada por meio de análises histopatológicas. A concentração de 50 mg L−1 ficou dentro do limite ideal de três minutos preconizado para indução à anestesia cirúrgica e não elevou significativamente os níveis de glicose quando comparada ao grupo controle (35,7±19,4 mg dL−1), além de não provocar lesões branquiais. Nessa concentração, os peixes apresentaram níveis de glicose sanguínea controlada, dentro dos teores basais, além de não correrem o risco de apresentarem problemas posteriores em relação à mortalidade, pois essa concentração garante a boa saúde das brânquias e uma boa recuperação dos animais.(AU)

Use of eugenol for anesthesia of lesser guitarfish Zapteryx brevirostris (Rhinobatidae) / Uso de eugenol para anestesia de raia-viola Zapteryx brevirostris (Rhinobatidae)

Anesthesia can be utilized as a non-lethal procedure to allow easy handling of teleosts and elasmobranchs in captivity or in the wild. For this, anesthetic protocols need to be established according to the species. The aim of this study was to determine the ideal concentration of eugenol for anesthesia of Zapteryx brevirostris. Four concentrations were tested: 21.25, 42.50, 85.00 and 170.00 mg L-1 (ratio of 1:5 with absolute ethanol). The perfect concentration of eugenol for this species was 85.0 mg L-1 , which enabled up to 300 seconds of work on the fish, without any response to handling.(AU)

A anestesia pode ser utilizada como um procedimento não letal que facilita o manejo de teleósteos e elasmobrânquios de cativeiro e de vida livre. Para isso, protocolos anestésicos devem ser estabelecidos de acordo com a espécie. O objetivo deste trabalho foi determinar a concentração ideal do eugenol para anestesiar Zapteryx brevirostris. Foram testadas as concentrações de 21,25; 42,50; 85,00 e 170,00 mg L-1 (1:5 de álcool absoluto). A concentração de 85,0 mg L-1 de eugenol foi a mais adequada para a espécie, permitindo uma janela de trabalho de até trezentos segundos com o animal não respondendo ao manejo.(AU)

Adaptação de Escherichia coli enterotoxigênica ao eugenol / Adaptation of enterotoxigenic Escherichia coli to eugenol

O objetivo do trabalho foi verificar a capacidade de adaptação de ETEC- ATCC 35401 ao antimicrobiano eugenol. Para isso, a Concentração Mínima Bactericida (CMB) de eugenol foi determinada e em seguida,as células de ETEC foram expostas a concentrações subletais de eugenol (CMB/4, CMB/8 e CMB/16). Posteriormente testadas frente a diferentes concentrações do composto (CMB/2; CMB; 1,2CMB; 1,4CMB; 1,6CMB; 1,8CMB e 2CMB), estas foram incubadas e plaqueadas em TSA (Ágar Triptona de Soja) empregando a técnica de microgotas. As células de ETEC foram classificadas como capazes de se adaptarem quando essas cresceram em placas após cultivo em presença do componente em concentração igual ou maior que a CMB do eugenol (1,0% (v/v)). As células de ETEC apresentaram a capacidade de adaptação por crescerem na CMB, após exposta a CMB/16. Os resultados demonstram a necessidade de obtenção da concentração de uso adequado de eugenol a fim de evitar a adaptação.(AU)

Adaptação de Escherichia coli enterotoxigênica ao eugenol / Adaptation of enterotoxigenic Escherichia coli to eugenol

O objetivo do trabalho foi verificar a capacidade de adaptação de ETEC- ATCC 35401 ao antimicrobiano eugenol. Para isso, a Concentração Mínima Bactericida (CMB) de eugenol foi determinada e em seguida,as células de ETEC foram expostas a concentrações subletais de eugenol (CMB/4, CMB/8 e CMB/16). Posteriormente testadas frente a diferentes concentrações do composto (CMB/2; CMB; 1,2CMB; 1,4CMB; 1,6CMB; 1,8CMB e 2CMB), estas foram incubadas e plaqueadas em TSA (Ágar Triptona de Soja) empregando a técnica de microgotas. As células de ETEC foram classificadas como capazes de se adaptarem quando essas cresceram em placas após cultivo em presença do componente em concentração igual ou maior que a CMB do eugenol (1,0% (v/v)). As células de ETEC apresentaram a capacidade de adaptação por crescerem na CMB, após exposta a CMB/16. Os resultados demonstram a necessidade de obtenção da concentração de uso adequado de eugenol a fim de evitar a adaptação.

Efficiency of anesthetics on female gastropod Littoraria angulifera / Eficiência de anestésicos em fêmeas do gastrópode Littoraria angulifera

The present study evaluated the effect of three anesthetics at three concentrations, menthol (C10H20O) (1%, 1.5%, 2%), eugenol (C10H12O2) (0.5%, 1%, 1.5%) and magnesium chloride (MgCl2) (4%, 7%, 10%) diluted in distilled water, on the gastropod Littoraria angulifera. Twenty females were tested for each concentration with shell height varying between 18.3 and 26.1 mm (n = 180), all collected from the same site in the estuary of Barra do Sargi-Uruçuca, Bahia (Brazil). The time of induction and recovery of the sedative effect, as well as the survival rate, were assessed. The animals were kept at a temperature of 25 ± 1 °C and observations were made every 30 minutes since the beginning of the anesthesia for up to 2 hours. After this period, the animals were observed during the following 15 days for survival evaluation. Only MgCl2 caused a sedative effect on L. angulifera. At 4% and 7% MgCl2 solutions, 20% and 95% of animals were anesthetized after 2 hours, respectively, and at 10% all animals were anesthetized after 1 hour. In conclusion, L. angulifera can be efficiently anesthetized in a 10% MgCl2 solution for 1 h and the recovery occurs after 1 h with no apparent side effects on behavior and survival.

O presente estudo avaliou o efeito de três anestésicos em três concentrações, o mentol (C10H20O) (1%; 1,5%; 2%), o eugenol (C10H12O2) (0,5%; 1%; 1,5%) e o cloreto de magnésio (MgCl2) (4%; 7%; 10%), diluídos em água destilada, sobre fêmeas do gastrópode Littoraria angulifera. Para cada concentração foram utilizadas 20 fêmeas (total = 180), com altura da concha entre 18,3 e 26,1 mm, coletadas no mesmo local, no estuário da Barra do Sargi-Uruçuca, Bahia. Foram observados os tempos de indução e de recuperação do efeito sedativo, assim como a sobrevivência. Os animais foram mantidos a uma temperatura laboratorial de 25 ± 1 °C e as observações foram feitas a cada 30 minutos após a anestesia, durante 2 horas. Após o término do experimento, os animais foram observados por 15 dias quanto à sobrevivência. Apenas o MgCl2 causou efeito sedativo sobre L. angulifera, sendo que a 4% e a 7% observou-se sedação de 20% e de 95% dos animais, respectivamente, após 2 horas de anestesia, enquanto que a 10%, todos os animais foram anestesiados em 1 hora. Em conclusão, L. angulifera pode ser anestesiada de forma eficiente em uma solução de 10% de MgCl2 durante 1 h e a sua recuperação ocorre ao fim de 1 h sem nenhum efeito colateral evidente no comportamento e na sobrevivência.

Efficiency of anesthetics on female gastropod Littoraria angulifera / Eficiência de anestésicos em fêmeas do gastrópode Littoraria angulifera

The present study evaluated the effect of three anesthetics at three concentrations, menthol (C10H20O) (1%, 1.5%, 2%), eugenol (C10H12O2) (0.5%, 1%, 1.5%) and magnesium chloride (MgCl2) (4%, 7%, 10%) diluted in distilled water, on the gastropod Littoraria angulifera. Twenty females were tested for each concentration with shell height varying between 18.3 and 26.1 mm (n = 180), all collected from the same site in the estuary of Barra do Sargi-Uruçuca, Bahia (Brazil). The time of induction and recovery of the sedative effect, as well as the survival rate, were assessed. The animals were kept at a temperature of 25 ± 1 °C and observations were made every 30 minutes since the beginning of the anesthesia for up to 2 hours. After this period, the animals were observed during the following 15 days for survival evaluation. Only MgCl2 caused a sedative effect on L. angulifera. At 4% and 7% MgCl2 solutions, 20% and 95% of animals were anesthetized after 2 hours, respectively, and at 10% all animals were anesthetized after 1 hour. In conclusion, L. angulifera can be efficiently anesthetized in a 10% MgCl2 solution for 1 h and the recovery occurs after 1 h with no apparent side effects on behavior and survival.(AU)

O presente estudo avaliou o efeito de três anestésicos em três concentrações, o mentol (C10H20O) (1%; 1,5%; 2%), o eugenol (C10H12O2) (0,5%; 1%; 1,5%) e o cloreto de magnésio (MgCl2) (4%; 7%; 10%), diluídos em água destilada, sobre fêmeas do gastrópode Littoraria angulifera. Para cada concentração foram utilizadas 20 fêmeas (total = 180), com altura da concha entre 18,3 e 26,1 mm, coletadas no mesmo local, no estuário da Barra do Sargi-Uruçuca, Bahia. Foram observados os tempos de indução e de recuperação do efeito sedativo, assim como a sobrevivência. Os animais foram mantidos a uma temperatura laboratorial de 25 ± 1 °C e as observações foram feitas a cada 30 minutos após a anestesia, durante 2 horas. Após o término do experimento, os animais foram observados por 15 dias quanto à sobrevivência. Apenas o MgCl2 causou efeito sedativo sobre L. angulifera, sendo que a 4% e a 7% observou-se sedação de 20% e de 95% dos animais, respectivamente, após 2 horas de anestesia, enquanto que a 10%, todos os animais foram anestesiados em 1 hora. Em conclusão, L. angulifera pode ser anestesiada de forma eficiente em uma solução de 10% de MgCl2 durante 1 h e a sua recuperação ocorre ao fim de 1 h sem nenhum efeito colateral evidente no comportamento e na sobrevivência.(AU)

Essential oils and eugenol as anesthetics for Serrasalmus rhombeus / Óleos essenciais e eugenol como anestésico para Serrasalmus rhombeus

This study evaluated the periods of time of anesthetic induction and recovery of Serrasalmus rhombeus exposed to essential oils (EOs) of Aloysia triphylla and Lippia alba and eugenol, as well as if these anesthetics can be used for transport of this species through analysis of swimming behavior. Fish were placed in aquaria containing different concentrations of A. triphylla EO or L. alba EO or eugenol, posteriorly were transferred to aquaria containing only water to evaluate the recovery time. In the second experiment, behavior was analyzed during exposure to A. triphylla EO, L. alba EO or eugenol at 5 or 10 µL L-1. The evaluations were carried out at 0, 1, 5, 10 and 15 min of exposure. Fish exposed to 150, 200 and 50 µL L-1 of A. triphylla EO, L. alba EO and eugenol, respectively, showed anesthetic induction time lower than 3 min and recovery time lower than 10 min. Concentrations of 50 µL L-1 of both EOs and 25 µL L-1 eugenol caused only sedation. Exposure to 5 and 10 µL L-1 EOs and eugenol decreased fish swimming time. Both EOs and eugenol were effective for anesthesia and can be used for transport of S. rhombeus.(AU)

Esse estudo avaliou os períodos de tempo de indução e recuperação anestésica de Serrasalmus rhombeus expostos aos óleos essenciais (OEs) de Aloysia triphylla e Lippia alba e eugenol, bem como se esses anestésicos podem ser usados no transporte dessa espécie através da análise do comportamento natatório. Os peixes foram colocados em aquários contendo diferentes concentrações de OE de A. triphylla ou OE L. alba ou eugenol, posteriormente foram transferidos para aquários contendo somente água para avaliar o tempo de recuperação. No segundo experimento, comportamento foi analisado durante exposição aos OEs ou eugenol nas concentrações 5 ou 10 µL L-1. As avaliações foram realizadas em 0, 1, 5, 10 e 15 min de exposição. Peixes expostos a 150, 200 e 50 µL L-1 de OE de A. triphylla, OE de L. alba e eugenol, respectivamente, apresentaram tempo de indução anestésica menor que 3 min e tempo de recuperação menor que 10 min. Concentrações de 50 µL L-1 de ambos OEs e 25 µL L-1 de eugenol causaram somente sedação. Exposição a 5 e 10 µL L-1 de OEs e eugenol diminuíram o tempo de natação dos peixes. Ambos os OEs e o eugenol foram efetivos para anestesia e podem ser utilizados para transporte de S. rhombeus.(AU)

Essential oils and eugenol as anesthetics for Serrasalmus rhombeus / Óleos essenciais e eugenol como anestésico para Serrasalmus rhombeus

This study evaluated the periods of time of anesthetic induction and recovery of Serrasalmus rhombeus exposed to essential oils (EOs) of Aloysia triphylla and Lippia alba and eugenol, as well as if these anesthetics can be used for transport of this species through analysis of swimming behavior. Fish were placed in aquaria containing different concentrations of A. triphylla EO or L. alba EO or eugenol, posteriorly were transferred to aquaria containing only water to evaluate the recovery time. In the second experiment, behavior was analyzed during exposure to A. triphylla EO, L. alba EO or eugenol at 5 or 10 µL L-1. The evaluations were carried out at 0, 1, 5, 10 and 15 min of exposure. Fish exposed to 150, 200 and 50 µL L-1 of A. triphylla EO, L. alba EO and eugenol, respectively, showed anesthetic induction time lower than 3 min and recovery time lower than 10 min. Concentrations of 50 µL L-1 of both EOs and 25 µL L-1 eugenol caused only sedation. Exposure to 5 and 10 µL L-1 EOs and eugenol decreased fish swimming time. Both EOs and eugenol were effective for anesthesia and can be used for transport of S. rhombeus.

Esse estudo avaliou os períodos de tempo de indução e recuperação anestésica de Serrasalmus rhombeus expostos aos óleos essenciais (OEs) de Aloysia triphylla e Lippia alba e eugenol, bem como se esses anestésicos podem ser usados no transporte dessa espécie através da análise do comportamento natatório. Os peixes foram colocados em aquários contendo diferentes concentrações de OE de A. triphylla ou OE L. alba ou eugenol, posteriormente foram transferidos para aquários contendo somente água para avaliar o tempo de recuperação. No segundo experimento, comportamento foi analisado durante exposição aos OEs ou eugenol nas concentrações 5 ou 10 µL L-1. As avaliações foram realizadas em 0, 1, 5, 10 e 15 min de exposição. Peixes expostos a 150, 200 e 50 µL L-1 de OE de A. triphylla, OE de L. alba e eugenol, respectivamente, apresentaram tempo de indução anestésica menor que 3 min e tempo de recuperação menor que 10 min. Concentrações de 50 µL L-1 de ambos OEs e 25 µL L-1 de eugenol causaram somente sedação. Exposição a 5 e 10 µL L-1 de OEs e eugenol diminuíram o tempo de natação dos peixes. Ambos os OEs e o eugenol foram efetivos para anestesia e podem ser utilizados para transporte de S. rhombeus.