Antitumoral effects of Amblyomma sculptum Berlese saliva in neuroblastoma cell lines involve cytoskeletal deconstruction and cell cycle arrest / Efeito antitumoral da saliva do carrapato Amblyomma sculptum Berlese em células de neuroblastoma envolve desconstrução do citoesqueleto e parada do ciclo celular

The antitumor properties of ticks salivary gland extracts or recombinant proteins have been reported recently, but little is known about the antitumor properties of the secreted components of saliva. The goal of this study was to investigate the in vitro effect of the saliva of the hard tick Amblyomma sculptum on neuroblastoma cell lines. SK-N-SK, SH-SY5Y, Be(2)-M17, IMR-32, and CHLA-20 cells were susceptible to saliva, with 80% reduction in their viability compared to untreated controls, as demonstrated by the methylene blue assay. Further investigation using CHLA-20 revealed apoptosis, with approximately 30% of annexin-V positive cells, and G0/G1-phase accumulation (>60%) after treatment with saliva. Mitochondrial membrane potential (m) was slightly, but significantly (p 0.05), reduced and the actin cytoskeleton was disarranged, as indicated by fluorescent microscopy. The viability of human fibroblast (HFF-1 cells) used as a non-tumoral control decreased by approximately 40%. However, no alterations in cell cycle progression, morphology, and m were observed in these cells. The present work provides new perspectives for the characterization of the molecules present in saliva and their antitumor properties.(AU)

As propriedades antitumorais de extratos de glândulas salivares de carrapatos ou proteínas recombinantes foram relatadas recentemente, mas pouco se sabe sobre as propriedades antitumorais dos componentes secretados da saliva. O objetivo deste estudo foi investigar o efeito in vitro da saliva bruta do carrapato duro Amblyomma sculptum sobre as linhagens celulares de neuroblastoma. Células SK-N-SK, SH-SY5Y, Be(2)-M17, IMR-32 e CHLA-20 foram suscetíveis à saliva, com redução de 80% na sua viabilidade em comparação com controles não tratados, como demonstrado pelo ensaio de Azul de Metileno. Investigações posteriores utilizando CHLA-20 revelaram apoptose, com aproximadamente 30% de células positivas para anexina-V, e G0/G1 (> 60%) após tratamento com saliva. O potencial de membrana mitocondrial (m) foi reduzido significativamente (p 0,05), e o citoesqueleto de actina foi desestruturado, como indicado pela microscopia de fluorescência. A viabilidade do fibroblasto humano (células HFF-1), usado como controle não tumoral, diminuiu em aproximadamente 40%. No entanto, não foram observadas alterações na progressão do ciclo celular, morfologia e m nestas células. O presente trabalho fornece novas perspectivas para a caracterização das moléculas presentes na saliva e suas propriedades antitumorais.(AU)

Biological parameters of Amblyomma coelebs Neumann, 1906 (Acari: Ixodidae) under experimental conditions

One generation of Amblyomma coelebs life cycle under experimental conditions was evaluated. Ten tick pairs were allowed to feed on rabbits under laboratory conditions (LC), resulting six engorged females with a mean weight of 1,403.9 mg. Two females were maintained in a forest reserve under natural conditions (NC), and four were maintained in incubators (LC). The engorgement period lasted 10.33 days. Pre-oviposition periods were 10.75 (NC) and 22 days (LC). The mean egg-mass weight was 514.76 mg, and the blood meal conversion index was 36.67% (LC). Incubation period under NC and LC were 91 and 56.33 days and hatching rates were 50% and 28.33%, respectively. Larval engorgement period ranged from 4 to 10 days, with average weight of 1.1 mg. Engorged larvae were incubated under NC and LC, with a premolt period of 27 to 36 days and molting rate of 7.1% and 28.7%, respectively. Nymphal engorgement period ranged from 5 to 7 days, with a mean weight of 18.8 mg and a recovery rate of 54.54%. In LC, the ecdysis mean period was 24.5 days, and molting rate was 44.44%, resulting in 24 adult A. coelebs. Our results show a life cycle of 187.45 (NC) and 149 (LC) days.(AU)

Uma geração do ciclo de vida de Amblyomma coelebs em condições laboratoriais foi avaliada. Dez casais de carrapatos foram alimentados em coelhos sob condições laboratoriais (CL), resultando em seis fêmeas ingurgitadas, com um peso médio de 1.403,9 miligramas (mg). Duas fêmeas foram mantidas em uma reserva florestal sob condições naturais (CN), e quatro foram mantidas em incubadoras (CL). O período de ingurgitamento durou 10,33 dias. Períodos de pré-postura foram de 10,75 (CN) e 22 dias (CL). O peso médio das massas de ovos foi de 514,76 mg e o índice de conversão alimentar foi de 36,67% (CL). O período de incubação em CN e CL foi de 91 e 56,33 dias e os percentuais de eclosão foram de 50% e 28,33%, respectivamente. O período de ingurgitamento larval variou de quatro a 10 dias, com peso médio de 1,1 mg. Larvas ingurgitadas foram incubadas em CN e CL, com período de pré-muda de 27 a 36 dias e percentual de ecdise de 7,1% e 28,7%, respectivamente. O período de ingurgitamento das ninfas oscilou de cinco a sete dias, com peso médio de 18,8 mg e uma taxa de recuperação de 54,54%. Em CL, o período médio de ecdise foi de 24,5 dias, e o percentual de muda foi 44,44%, resultando em 24 adultos de A. coelebs. Estes resultados demonstram um ciclo de vida de 187,45 (CN) e 149 (CL) dias.(AU)

Neuronal projections from the Haller's organ and palp sensilla to the synganglion of Amblyomma americanum / Projeções neuronais do órgão de Haller e sensila palpal até o singânglio de Amblyomma americanum

The present study was conducted to elucidate the neuronal pathways between peripheral olfactory and taste sensilla and the synganglion in an Ixodidae tick species. The tarsus of the front legs (olfactory nerves) and the fourth palpal segment (gustatory nerves) of unfed Amblyomma americanum males and females were excised. A neuronal tracer, dextran tetramethylrhodamine, was used for filling of the sensory neurons. The synganglion preparations were examined using a confocal microscope. Neuronal arborizations from the Hallers organ were confined to the olfactory lobes and the first pedal ganglion. The estimated number of olfactory glomeruli ranged from 16 to 22 per olfactory lobe in the females. The number of glomeruli was not counted in males because they were densely packed. Sensory neurons associated with sensilla at the distal end of the palpal organ projected into the palpal ganglion in the synganglion through the palpal nerve. Gustatory sensory neurons associated with palpal sensilla projected into a commissure with several bulges, which are confined in the palpal ganglion. The findings of distinct projection patterns of sensory neurons associated with the Hallers organ and palpal organ in the lone star tick from this study advanced our knowledge on mechanisms of sensory information processing in ticks.(AU)

O presente estudo foi conduzido para elucidar a trajetória neuronal, entre as sensilas periféricas olfativas e gustativas e o singânglio, em uma espécie de carrapato Ixodidae. O tarso da primeira pata (nervos olfativos) e o quarto segmento palpal (nervos gustativos) de machos e fêmeas não alimentados de Amblyomma americanum foram excisados. Um traçador neuronal, dextran tetrametilrodamina, foi usado para preenchimento dos neurônios sensoriais. Os singânglios foram examinados através de microscopia confocal. Arborizações neuronais do órgão de Haller foram confinadas nos lobos olfativos e primeiro gânglio pedal. O número estimado de glomérulos olfativos variou de 16 a 22 por lobo olfativo nas fêmeas. Em machos, o número de glomérulos não foi contado, pois eles estavam densamente compactados. Os neurônios sensoriais associados com as sensilas, na porção distal do órgão palpal, projetaram-se no gânglio palpal do singânglio através do nervo palpal. Neurônios sensoriais gustativos associados com a sensila palpal projetaram-se numa comissura onde havia vários bulbos. Os resultados obtidos neste estudo de padrões de projeção distintos de neurônios sensoriais associados com os órgãos de Haller e palpal no carrapato A. americanum avançam nosso conhecimento sobre os mecanismos de processamento da informação sensorial em carrapatos.(AU)

Amblyomma auricularium (Acari: Ixodidae): underwater survival of the non-parasitic phase of feeding females / Amblyomma auricularium (Acari: Ixodidae): sobrevivência subaquática da fase não parasitária de fêmeas alimentadas

To determine the effects of immersion in water on the biological parameters of engorged females of the tick species Amblyomma auricularium, 60 females were distributed in six groups, each comprising 10 individuals. The control group G1 (not immersed) was fixed dorsally in a Petri dish and incubated at 27 ± 1°C and 80% RH. The other groups were subjected to immersion periods of 24, 48, 72 and 96 hours, and the sixth group to continuous immersion. After the immersion period, the females were placed in Petri dishes to begin laying. Eggs were collected every 72 hours and kept in biological chambers. All the groups showed significant differences (p <0.05) during the pre-oviposition period. The laying period and the average weight of overall posture did not change. The egg incubation period also did not differ significantly, but the hatching rate in the group immersed for 96h showed a significant difference. Thus, immersion for up to 96 hours does not impair the survival of A. auricularium females, although it may delay egg laying and reduce the number of offspring.

A fim de conhecer os efeitos da imersão em água sobre os parâmetros biológicos de fêmeas ingurgitadas de Amblyomma auricularium, 60 fêmeas foram distribuídas em seis grupos, cada um contendo 10 indivíduos. O grupo controle G1 (sem imersão) foi fixado dorsalmente numa placa de Petri e incubado a 27 ± 1°C e 80 % de HR. Os demais grupos foram submetidos a períodos de imersão de 24, 48, 72 e 96 horas e, o último grupo, em imersão continua. Após o período de imersão, as fêmeas foram colocadas em placas de Petri para iniciar a postura. Os ovos foram coletados a cada 72 horas e mantidos em câmaras biológicas. Houve diferença significativa (p <0,05) em relação ao período de pré-oviposição de todos os grupos. O período de postura e o peso médio da postura total não se alterou. O período de incubação dos ovos também não diferiram significativamente, mas houve uma diferença significativa na taxa de eclosão das larvas no grupo imerso por 96 horas. Assim, a imersão por até 96 horas não compromete a sobrevivência de fêmeas de A. auricularium, mas pode retardar a postura de ovos e reduzir o número de descendentes.

New host records of Ixodes luciae (Acari: Ixodidae) in the State of Para, Brazil / Registros de novos hospedeiros para Ixodes luciae (Acari: Ixodidae) no estado do Pará, Brasil

The aim of this paper is to record new hosts for Ixodes luciae Sénevet in the State of Para, Brazil, and present a case of malformation (teratogeny) in a nymph of this species. The new host records are Marmosa murina (parasitized by females) and Philander opossum (parasitized by nymphs). One of these nymphs showed malformation in the posterior margin of the opisthosoma resulting in a heart shaped posterior end.

O objetivo deste trabalho foi registrar novos hospedeiros para Ixodes luciae Sénevet no estado do Pará, Brasil, e um caso de malformação em uma ninfa dessa espécie de carrapato. Os novos hospedeiros são Marmosa murina (parasitado por fêmeas) e Philander opossum (parasitado por ninfas). Uma dessas ninfas apresentou uma malformação na parte posterior do opistossoma em forma de coração.

Noteworthy records of Ixodes schulzei (Acari: Ixodidae) on rodents from the State of Parana, southern Brazil / Relatos de Ixodes schulzei (Acari: Ixodidae) em roedores do estado do Paraná, sul do Brasil

Ixodes schulzei Aragão & Fonseca is an endemic tick to Brazil and has already been reported in the northern (State of Rondonia), southeastern (States of Minas Gerais, Rio de Janeiro and São Paulo) and southern (State of Santa Catarina) regions, always found in association with the water rat Nectomys squamipes (Brandt). This communication records the first occurrence of this tick species in the State of Parana, southern region of Brazil, and it constitutes its first report on Akodon montensis (Thomas) and Oryzomys russatus (Wagner) hosts.

Ixodes schulzei Aragão & Fonseca é um carrapato endêmico do Brasil e já foi relatado nas regiões Norte (estado de Rondônia), Sudeste (estados de Minas Gerais, Rio de Janeiro e São Paulo) e Sul (estado de Santa Catarina), tendo sido encontrado sempre em associação com o rato d'água Nectomys squamipes (Brandt). Esta comunicação registra a primeira ocorrência dessa espécie de carrapato no estado do Paraná, região Sul do Brasil e constitui o primeiro relato de Akodon montensis (Thomas) e Oryzomys russatus (Wagner) como hospedeiros.

Amblyomma nodosum (Acari: Ixodidae) parasitizing a domestic dog in Colatina, Espírito Santo, Brazil / Carrapato Amblyomma nodosum (Acari: Ixodidae) parasitando cão em um domicílio de Colatina, Espírito Santo, Brasil

On 27 Jan 2011 an adult Amblyomma nodosum tick was found attached to a domestic dog from the municipality of Colatina, state of Espírito Santo, Brazil. This is the first report of this tick species in this state and the second time it has been reported parasitizing a domestic dog in the country. For the time being, this finding should be regarded as incidental. However, more in-depth research into the hosts and ecology of A. nodosum is needed, since it has been associated to infectious agents that are potentially pathogenic for humans.(AU)

Em 17 de janeiro de 2011 um carrapato adulto de Amblyomma nodosum foi encontrado parasitando um cão doméstico no município de Colatina, Espírito Santo, Brasil. Esta é a primeira vez que esta espécie de carrapato foi descrita no Estado e pela segunda vez no país parasitando um cão doméstico. Este achado por ora deve ser considerado fortuito. Entretanto, a busca por informações adicionais sobre hospedeiros e ecologia do A. nodosum é recomendada uma vez que este parasito já foi associado a agente infeccioso potencialmente patogênico para seres humanos.(AU)

New host records for Amblyomma rotundatum (Acari: Ixodidae) from Grussaí restinga, Rio de Janeiro, Brazil / Novos registros de hospedeiros para Amblyomma rotundatum (Acari: Ixodidae) da restinga de Grussaí, Rio de Janeiro, Brasil

Amblyomma rotundatum Koch is a parthenogenetic tick usually associated with reptiles and amphibians. However, relatively few studies on occurrences of ticks in wild reptile populations in Brazil have been produced. The aim of this study was to analyze the presence of ticks associated with reptile species in the Grussaí restinga, in the municipality of São João da Barra, state of Rio de Janeiro, Brazil. Between December 2010 and January 2011, 131 individuals belonging to nine species of reptiles of the order Squamata were sampled: the lizards Tropidurus torquatus (n = 51), Hemidactylus mabouia (n = 25), Mabuya agilis (n = 30), Mabuya macrorhyncha (n = 6), Cnemidophorus littoralis (n = 5) and Ameiva ameiva (n = 10); and the snakes Philodryas olfersii (n = 2), Oxyrhopus rhombifer (n = 1) and Micrurus corallinus (n = 1). The only tick species found to be associated with any of the reptiles sampled was A. rotundatum. One adult female was detected on one individual of the lizard A. ameiva, one nymph on one individual of the lizard T. torquatus and four nymphs on one individual of the snake P. olfersii. This study is the first record of parasitism of A. rotundatum involving the reptiles T. torquatus and P. olfersii as hosts. Our results suggest that in the Grussaí restinga habitat, A. rotundatum may use different species of reptiles to complete its life cycle.

Amblyomma rotundatum Koch é um carrapato partenogenético geralmente associado a répteis e anfíbios. Entretanto existem relativamente poucos estudos sobre a ocorrência de carrapatos em populações silvestres de répteis no Brasil. O objetivo deste estudo foi analisar a presença de carrapatos associados às espécies de répteis em uma comunidade na restinga de Grussaí, município de São João da Barra, Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Foram amostradas, entre os meses de dezembro de 2010 e janeiro de 2011, 131 indivíduos pertencentes a nove espécies de répteis da ordem Squamata: lagartos Tropidurus torquatus (n = 51); Hemidactylus mabouia (n = 25), Mabuya agilis (n = 30), Mabuya macrorhyncha (n = 6), Cnemidophorus littoralis (n = 5) e Ameiva ameiva (n = 10), e serpentes Philodryas olfersii (n = 2), Oxyrhopus rhombifer (n = 1) e Micrurus corallinus (n = 1). A única espécie de carrapato encontrada associada a espécimes de répteis foi A. rotundatum, tendo sido encontrada uma fêmea adulta em um indivíduo do lagarto A. ameiva, uma ninfa em um T. torquatus e quatro ninfas em uma serpente P. olfersii. O presente estudo constitui o primeiro registro do parasitismo de A. rotundatum nos répteis T. torquatus e P. olfersii como hospedeiros. Nossos resultados sugerem que no habitat da restinga de Grussaí, A. rotundatum pode utilizar diferentes espécies de répteis para a realização do seu ciclo de vida.

New host records for Amblyomma rotundatum (Acari: Ixodidae) from Grussaí restinga, Rio de Janeiro, Brazil / Novos registros de hospedeiros para Amblyomma rotundatum (Acari: Ixodidae) da restinga de Grussaí, Rio de Janeiro, Brasil

Amblyomma rotundatum Koch is a parthenogenetic tick usually associated with reptiles and amphibians. However, relatively few studies on occurrences of ticks in wild reptile populations in Brazil have been produced. The aim of this study was to analyze the presence of ticks associated with reptile species in the Grussaí restinga, in the municipality of São João da Barra, state of Rio de Janeiro, Brazil. Between December 2010 and January 2011, 131 individuals belonging to nine species of reptiles of the order Squamata were sampled: the lizards Tropidurus torquatus (n = 51), Hemidactylus mabouia (n = 25), Mabuya agilis (n = 30), Mabuya macrorhyncha (n = 6), Cnemidophorus littoralis (n = 5) and Ameiva ameiva (n = 10); and the snakes Philodryas olfersii (n = 2), Oxyrhopus rhombifer (n = 1) and Micrurus corallinus (n = 1). The only tick species found to be associated with any of the reptiles sampled was A. rotundatum. One adult female was detected on one individual of the lizard A. ameiva, one nymph on one individual of the lizard T. torquatus and four nymphs on one individual of the snake P. olfersii. This study is the first record of parasitism of A. rotundatum involving the reptiles T. torquatus and P. olfersii as hosts. Our results suggest that in the Grussaí restinga habitat, A. rotundatum may use different species of reptiles to complete its life cycle.

Amblyomma rotundatum Koch é um carrapato partenogenético geralmente associado a répteis e anfíbios. Entretanto existem relativamente poucos estudos sobre a ocorrência de carrapatos em populações silvestres de répteis no Brasil. O objetivo deste estudo foi analisar a presença de carrapatos associados às espécies de répteis em uma comunidade na restinga de Grussaí, município de São João da Barra, Estado do Rio de Janeiro, Brasil. Foram amostradas, entre os meses de dezembro de 2010 e janeiro de 2011, 131 indivíduos pertencentes a nove espécies de répteis da ordem Squamata: lagartos Tropidurus torquatus (n = 51); Hemidactylus mabouia (n = 25), Mabuya agilis (n = 30), Mabuya macrorhyncha (n = 6), Cnemidophorus littoralis (n = 5) e Ameiva ameiva (n = 10), e serpentes Philodryas olfersii (n = 2), Oxyrhopus rhombifer (n = 1) e Micrurus corallinus (n = 1). A única espécie de carrapato encontrada associada a espécimes de répteis foi A. rotundatum, tendo sido encontrada uma fêmea adulta em um indivíduo do lagarto A. ameiva, uma ninfa em um T. torquatus e quatro ninfas em uma serpente P. olfersii. O presente estudo constitui o primeiro registro do parasitismo de A. rotundatum nos répteis T. torquatus e P. olfersii como hospedeiros. Nossos resultados sugerem que no habitat da restinga de Grussaí, A. rotundatum pode utilizar diferentes espécies de répteis para a realização do seu ciclo de vida.