Resumo
Mastitis is a mammary gland inflammation that is very common worldwide, mostly caused by bacteria, and causes enormous economic losses. Many microorganisms cause this disease. The most common causes of mastitis by these microorganisms are Staphylococcus aureus (S. aureus), Escherichia coli (E. coli) and Streptococcus agalactiae (S. agalactiae). The anti-inflammatory properties of transforming growth factor (TGF)-ß include: 1) limiting interferon (IFN)-γ production; 2) increasing the expression of the interleukine (IL)-1 receptor antagonist; 3) inhibiting macrophage production of chemokines, pro-inflammatory cytokines, nitric oxide, and reactive oxygen intermediates; and 4) increasing macrophage clearance of bacterial debris and damaged parenchymal cells. It is stated that cytokines and milk composition change in case of mastitis. In this study, it was aimed to reveal the changes in milk TGF-ß1 and Tumor necrosis factor (TNF)-α concentrations and milk composition in mixed infections caused by three pathogens causing mastitis. In this study, milk samples from 90 cows were divided into 5 groups. Tumor necrosis factor (TNF)-α and TGF-ß1 concentrations and milk composition were determined in these milk samples. The California Mastitis Test (CMT) was applied to the cows included in the study and scoring was done. According to the CMT results of the milk samples taken, CMT(-) cows were included in group 1 (n = 22). Those with the CMT(+) were sent to the microbiology laboratory for analysis within 2 h. After the bacteria was determined, combination groupings were formed. Group 2 (n = 17), in which S. aureus and E. coli grew together, group 3 (n = 21), in which S. aureus and S. agalactiae grew together, group 4 (n = 8), in which S. agalactiae and E. coli grew together in milk samples, and milk samples without any bacterial growth in CMT (+) formed group 5 (n = 22), respectively. Somatic cell count was measured with the DeLaval Cell Counter® (Cell Counter DCC) device. Mineral matter, fat, protein, lactose, electrical conductivity and specific gravity were measured in milk samples using Lactoscan Milk Analyzer (Milkotronic/EUROPE). Milk samples were then stored at -80°C to measure TGF-ß1 and TNF-α. Tumor necrosis factor-α and TGF-ß1 concentrations in milk samples were measured using ELISA kits (Sunred Biological Technology). Changes in milk TNF-α and TGF-ß1 concentration and milk composition were determined in milk samples with mastitis caused by mixed infection. The TNF-α concentration of group 4 was higher than the other groups. On the other hand, the highest concentration of TGF-ß1 was found in group 2. While the number of somatic cells in group 1 was lower than in groups 2, 3, and 4, there was no statistical difference between groups 1 and 5. The lowest milk fat ratio was found in group 1, and it was found to be statistically lower than groups 2, 3, and 4. While the rate of solid-non-fat of group 1 increased compared to groups 2 and 3, the highest protein ratio was found in groups 1 and 5. There was no difference between the 5 groups in terms of mineral matter ratios. While the specific gravity was highest in group 1, there was no statistical difference between the other 4 groups. Overall, it was concluded that there was an increase in TNF-α and TGF-ß1 concentrations and a change in milk composition in samples with bacterial growth.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Doenças dos Bovinos , Fator de Crescimento Transformador alfa/análise , Fator de Necrose Tumoral alfa/análise , Coinfecção/veterinária , Mastite Bovina/patologia , Bovinos , LeiteResumo
This research aimed to investigate the genotypic relatedness of 18 Staphylococcus aureus strains isolated from intramammary infections in primiparous cows and extramammary sites on five dairy herds by rep-PCR using RW3A primers, and by PFGE using the endonuclease SmaI. The isolates were also evaluated in vitro for the susceptibility against beta-lactam antimicrobials drugs (penicillin and oxacillin), considering that beta-lactams are frequently used for treating staphylococcal intrammamary infections. The rep-PCR typing was highly discriminatory (D value= 0.9804) and a total of 15 patterns were detected. The PFGE method was also highly discriminatory (D value= 0.9667) and a total of 13 patterns were observed. A total of 15 out of 18 (83%) isolates were resistant to penicillin and one out of 18 (6%) to oxacillin. In conclusion, these findings confirmed the occurrence of a high genetic diversity of S. aureus strains at the herds and the presence of clonally-related strains only at the same herd, emphasizing a variety of genotypic profiles among the isolates.(AU)
Objetivou-se com este estudo investigar a correlação genética de 18 cepas de Staphylococcus aureus isoladas de infecções intramamárias em vacas primíparas e de locais extramamários em cinco propriedades leiteiras através das técnicas de PCR por sequências palindrômicas extragênicas repetitivas (rep-PCR), usando iniciadores RW3A, e de eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE), usando a endonuclease SmaI. Os isolados também foram avaliados in vitro quanto à suscetibilidade aos antimicrobianos beta-lactâmicos (penicilina e oxacilina). A tipagem por rep-PCR foi altamente discriminatória (valor D = 0,9804) e um total de 15 padrões foram detectados. Os isolados de S. aureus foram agrupados em três grupos diferentes (A a C), com 80% de similaridade. A técnica de PFGE também foi altamente discriminatória (valor D = 0,9667) e um total de 13 padrões foi observado. A análise do dendrograma com um coeficiente de similaridade de 80% gerou dois grupos diferentes (A e B). Além disso, cepas clonais isoladas do leite foram identificadas na mesma propriedade pelos dois métodos de tipificação e, apesar da presença de cepas dominantes, nossos resultados sugerem uma alta diversidade genética dentre as cepas de S. aureus analisadas. Um total de 15, dos 18 (83%) isolados, eram resistentes à penicilina e um dos 18 (6%) à oxacilina. Assim, esses achados confirmam a ocorrência de uma alta diversidade genética de cepas de S. aureus nas propriedades e a presença de cepas clonalmente relacionadas apenas na mesma propriedade, enfatizando uma variedade de perfis genotípicos entre os isolados.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Mastite Bovina/diagnóstico , Mastite Bovina/microbiologia , Mastite Bovina/patologia , Mastite Bovina/transmissão , Infecções Estafilocócicas/prevenção & controle , Infecções Estafilocócicas/veterinária , Staphylococcus aureus/crescimento & desenvolvimento , Staphylococcus aureus/genética , Staphylococcus aureus/isolamento & purificaçãoResumo
Biocides and/or antibiotics used in subinhibitory concentrations can promote the development of adaptive resistance or even cross-resistance in microorganisms. However, studies on these responses following silver treatments are scarce in the literature. Silver-based compounds, including silver nanoparticles (Ag-NPs), can be an alternative in the prevention and treatment of bovine mastitis. Thus, this research evaluated the effect of subinhibitory dosages of Ag-NPs and Ag+ ions from silver nitrate (AgNO3) on Staphylococcus aureus and Escherichia coli isolated from milk of cows with mastitis. Ag-NPs were synthesized by chemical reduction using AgNO3 and sodium citrate and the minimum inhibitory concentration (MIC) of Ag-NPs and Ag+ ions on the mastitis pathogens were determined. Isolates were exposed to subinhibitory concentrations of Ag-NPs or AgNO3 for 10 consecutive days to verify the development of adaptive resistance evaluated by changes in the MIC values. The development of cross-resistance with antibiotics was also studied, being verified by comparing the sensitivity profile of treated cells with non-treated cells. AgNO3 was more effective against all isolates. There was no change in the MIC values or in the antibiotic sensitivity profile for both bacteria following consecutive exposure to subinhibitory dosages of Ag-NPs or AgNO3, indicating that silver was not able to select adaptive resistance or cross resistance to the tested antibiotics. The potential of silver presented by these results is favorable to the continuity of studies aiming to elaborate silver-based therapies for the treatment of bovine mastitis.
Biocidas e/ou antibióticos em concentrações sub-inibitórias podem promover o desenvolvimento de resistência adaptativa ou mesmo resistência cruzada nos micro-organismos. Entretanto, estudos destas respostas após o tratamento com a prata são escassos na literatura. Compostos a base de prata, incluindo as nanopartículas de prata (Ag-NPs), podem ser uma alternativa na prevenção e/ou tratamento de mastite bovina. Assim, este trabalho objetivou determinar o efeito de doses sub-inibitórias de Ag-NPs e dos íons Ag+ provenientes do nitrato de prata (AgNO3) sobre isolados de Staphylococcus aureus e de Escherichia coli, provenientes de leite de vacas com mastite. As Ag-NPs foram sintetizadas por redução química utilizando AgNO3 e citrato de sódio e a Concentração Mínima Inibitória (CMI) das Ag-NPs e íons Ag+ nos patógenos da mastite foi determinada. Os isolados foram expostos a concentrações sub-inibitórias de Ag-NPs ou de AgNO3 por 10 dias consecutivos para verificar o desenvolvimento de resistência adaptativa à prata pela mudança no valor da CMI, e de resistência cruzada com antibióticos pela mudança no perfil de sensibilidade em relação ao controle. AgNO3 apresentou-se mais efetivo contra todos os isolados. Não foi verificada alteração no valor da CMI nem do perfil de sensibilidade aos antibióticos, indicando que não houve seleção de resistência adaptativa à prata e de resistência cruzada aos antibióticos pelos micro-organismos estudados. O uso potencial da prata apresentado nos resultados é favorável à continuidade dos estudos objetivando a elaboração de terapias à base de prata para o tratamento da mastite bovina.
Assuntos
Feminino , Animais , Bovinos , Doenças dos Bovinos/microbiologia , Escherichia coli/efeitos dos fármacos , Escherichia coli/patogenicidade , Infecções Estafilocócicas/tratamento farmacológico , Infecções Estafilocócicas/veterinária , Mastite Bovina/microbiologia , Mastite Bovina/patologia , Mastite Bovina/tratamento farmacológico , Prata/administração & dosagem , Prata/uso terapêuticoResumo
Biocides and/or antibiotics used in subinhibitory concentrations can promote the development of adaptive resistance or even cross-resistance in microorganisms. However, studies on these responses following silver treatments are scarce in the literature. Silver-based compounds, including silver nanoparticles (Ag-NPs), can be an alternative in the prevention and treatment of bovine mastitis. Thus, this research evaluated the effect of subinhibitory dosages of Ag-NPs and Ag+ ions from silver nitrate (AgNO3) on Staphylococcus aureus and Escherichia coli isolated from milk of cows with mastitis. Ag-NPs were synthesized by chemical reduction using AgNO3 and sodium citrate and the minimum inhibitory concentration (MIC) of Ag-NPs and Ag+ ions on the mastitis pathogens were determined. Isolates were exposed to subinhibitory concentrations of Ag-NPs or AgNO3 for 10 consecutive days to verify the development of adaptive resistance evaluated by changes in the MIC values. The development of cross-resistance with antibiotics was also studied, being verified by comparing the sensitivity profile of treated cells with non-treated cells. AgNO3 was more effective against all isolates. There was no change in the MIC values or in the antibiotic sensitivity profile for both bacteria following consecutive exposure to subinhibitory dosages of Ag-NPs or AgNO3, indicating that silver was not able to select adaptive resistance or cross resistance to the tested antibiotics. The potential of silver presented by these results is favorable to the continuity of studies aiming to elaborate silver-based therapies for the treatment of bovine mastitis.(AU)
Biocidas e/ou antibióticos em concentrações sub-inibitórias podem promover o desenvolvimento de resistência adaptativa ou mesmo resistência cruzada nos micro-organismos. Entretanto, estudos destas respostas após o tratamento com a prata são escassos na literatura. Compostos a base de prata, incluindo as nanopartículas de prata (Ag-NPs), podem ser uma alternativa na prevenção e/ou tratamento de mastite bovina. Assim, este trabalho objetivou determinar o efeito de doses sub-inibitórias de Ag-NPs e dos íons Ag+ provenientes do nitrato de prata (AgNO3) sobre isolados de Staphylococcus aureus e de Escherichia coli, provenientes de leite de vacas com mastite. As Ag-NPs foram sintetizadas por redução química utilizando AgNO3 e citrato de sódio e a Concentração Mínima Inibitória (CMI) das Ag-NPs e íons Ag+ nos patógenos da mastite foi determinada. Os isolados foram expostos a concentrações sub-inibitórias de Ag-NPs ou de AgNO3 por 10 dias consecutivos para verificar o desenvolvimento de resistência adaptativa à prata pela mudança no valor da CMI, e de resistência cruzada com antibióticos pela mudança no perfil de sensibilidade em relação ao controle. AgNO3 apresentou-se mais efetivo contra todos os isolados. Não foi verificada alteração no valor da CMI nem do perfil de sensibilidade aos antibióticos, indicando que não houve seleção de resistência adaptativa à prata e de resistência cruzada aos antibióticos pelos micro-organismos estudados. O uso potencial da prata apresentado nos resultados é favorável à continuidade dos estudos objetivando a elaboração de terapias à base de prata para o tratamento da mastite bovina.(AU)
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Animais , Feminino , Bovinos , Doenças dos Bovinos/microbiologia , Mastite Bovina/tratamento farmacológico , Mastite Bovina/patologia , Mastite Bovina/microbiologia , Infecções Estafilocócicas/tratamento farmacológico , Infecções Estafilocócicas/veterinária , Escherichia coli/efeitos dos fármacos , Escherichia coli/patogenicidade , Prata/administração & dosagem , Prata/uso terapêuticoResumo
O objetivo do presente estudo foi avaliar a capacidade de estafilococos não aureus (NAS) isolados de diferentes nichos ecológicos (leite, ambiente e ápice do teto), associados a vacas leiteiras, de inibir os principais agentes etiológicos da mastite bovina (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus uberis e Escherichia coli). Neste estudo, 38 isolados NAS de diferentes nichos ecológicos foram avaliados quanto à capacidade de inibir o crescimento in vitro de importantes patógenos causadores de mastite pelo método cross-streaking. No total, 19 (50%) isolados de NAS (oito isolados de S. chromogenes, 10 de S. fleurettii e um de S. haemolyticus) apresentaram inibição contra os principais patógenos causadores de mastite. No entanto, a inibição dos patógenos causadores da mastite bovina por isolados de NAS foi maior contra bactérias Gram-positivas. Além disso, o presente estudo não sugeriu que os nichos ecológicos influenciam a capacidade do NAS de inibir os principais patógenos causadores da mastite bovina. Com base nesses resultados, concluiu-se que certos isolados de NAS apresentam potencial efeito protetor contra os principais patógenos da mastite, pelo menos in vitro.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Staphylococcus , Mastite Bovina/etiologia , Mastite Bovina/patologia , Técnicas In Vitro/métodosResumo
O objetivo do presente estudo foi avaliar a capacidade de estafilococos não aureus (NAS) isolados de diferentes nichos ecológicos (leite, ambiente e ápice do teto), associados a vacas leiteiras, de inibir os principais agentes etiológicos da mastite bovina (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus uberis e Escherichia coli). Neste estudo, 38 isolados NAS de diferentes nichos ecológicos foram avaliados quanto à capacidade de inibir o crescimento in vitro de importantes patógenos causadores de mastite pelo método cross-streaking. No total, 19 (50%) isolados de NAS (oito isolados de S. chromogenes, 10 de S. fleurettii e um de S. haemolyticus) apresentaram inibição contra os principais patógenos causadores de mastite. No entanto, a inibição dos patógenos causadores da mastite bovina por isolados de NAS foi maior contra bactérias Gram-positivas. Além disso, o presente estudo não sugeriu que os nichos ecológicos influenciam a capacidade do NAS de inibir os principais patógenos causadores da mastite bovina. Com base nesses resultados, concluiu-se que certos isolados de NAS apresentam potencial efeito protetor contra os principais patógenos da mastite, pelo menos in vitro.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Staphylococcus , Mastite Bovina/etiologia , Mastite Bovina/patologia , Técnicas In Vitro/métodosResumo
Neste trabalho, objetivou-se verificar a ocorrência de mastite em vacas sem raça definida de uma propriedade do município do Cantá. Foram avaliados onze animais, sendo os quesitos observados: escore corporal, idade, número de crias, produção leiteira, lesão de casco e, por fim, se há ou não a presença da mastite. A maioria das vacas apresentou fraca positividade para a enfermidade, sendo que apenas uma resultou em forte positivo em um dos tetos. Com isso, é possível concluir que a propriedade onde se realizou a pesquisa não positivou a mastite em seu pior grau, visto que há uma baixa produção individual das vacas e a presença do bezerro ao pé.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Mastite Bovina/diagnóstico , Mastite Bovina/epidemiologia , Mastite Bovina/prevenção & controle , Mastite Bovina/patologiaResumo
O presente trabalho objetivou relatar um caso de mastite causada por Enterobacter aerogenes no município de Primavera do Leste MT. Foi atendida em propriedade agro familiar uma vaca da raça Holandesa, de aproximadamente 8 anos de idade, apresentando sinais clínicos de edema de úbere, rubor, hiperemia e presença de secreção no leite. Diante do quadro clínico, foi coletado material intramamário por meio de um swab de transporte para identificação do agente patogênico, acrescido de antibiograma. A partir desta amostra foi possível identificar a bactéria Enterobacter aerogenes como causadora da doença, além de constatar sensibilidade a 14 dos 22 antibióticos testados. Foi detectada resistência aos fármacos Cefoxitina e Fosfomicina. A ocorrência de ESBL ocorreu nos fármacos Aztreonam e Cefotaxima. A incidência da doença é relacionada ao déficit de boas práticas de higiene, manejos inadequados e tratamentos errôneos, sendo necessária a adoção de boas práticas para prevenção da enfermidade.(AU)
The present study aimed to report a case of mastitis caused by Enterobacter aerogenes in the municipality of Primavera do Leste/MT. One Holstein cow with approximately 8 years old, was attended in the family farming. The cow showed clinical signs as udder swelling, redness, hyperemia and presence of milk secretion. In view of the clinical condition, intramammary material was collected by means of a transport swab to identify the pathogen, plus antibiogram. From this sample it was possible to identify the bacterium Enterobacter aerogenes as cause of the disease, in addition to detecting sensitivity to 14 of the 22 antibiotics tested. Resistance to the drugs Cefoxitin and Fosfomycin was detected. The occurrence of ESBL occurred in the Aztreonam and Cefotaxime drugs. The incidence of the disease is related to the deficiency of good hygiene practices, inadequate management and erroneous treatments. It is necessary to adopt good practices to prevent the disease.(AU)
Assuntos
Animais , Feminino , Bovinos , Mastite Bovina/microbiologia , Mastite Bovina/patologia , Infecções por Enterobacteriaceae/veterinária , Enterobacter aerogenes/isolamento & purificação , Infecções por Enterobacteriaceae/tratamento farmacológicoResumo
O presente trabalho objetivou relatar um caso de mastite causada por Enterobacter aerogenes no município de Primavera do Leste MT. Foi atendida em propriedade agro familiar uma vaca da raça Holandesa, de aproximadamente 8 anos de idade, apresentando sinais clínicos de edema de úbere, rubor, hiperemia e presença de secreção no leite. Diante do quadro clínico, foi coletado material intramamário por meio de um swab de transporte para identificação do agente patogênico, acrescido de antibiograma. A partir desta amostra foi possível identificar a bactéria Enterobacter aerogenes como causadora da doença, além de constatar sensibilidade a 14 dos 22 antibióticos testados. Foi detectada resistência aos fármacos Cefoxitina e Fosfomicina. A ocorrência de ESBL ocorreu nos fármacos Aztreonam e Cefotaxima. A incidência da doença é relacionada ao déficit de boas práticas de higiene, manejos inadequados e tratamentos errôneos, sendo necessária a adoção de boas práticas para prevenção da enfermidade.
The present study aimed to report a case of mastitis caused by Enterobacter aerogenes in the municipality of Primavera do Leste/MT. One Holstein cow with approximately 8 years old, was attended in the family farming. The cow showed clinical signs as udder swelling, redness, hyperemia and presence of milk secretion. In view of the clinical condition, intramammary material was collected by means of a transport swab to identify the pathogen, plus antibiogram. From this sample it was possible to identify the bacterium Enterobacter aerogenes as cause of the disease, in addition to detecting sensitivity to 14 of the 22 antibiotics tested. Resistance to the drugs Cefoxitin and Fosfomycin was detected. The occurrence of ESBL occurred in the Aztreonam and Cefotaxime drugs. The incidence of the disease is related to the deficiency of good hygiene practices, inadequate management and erroneous treatments. It is necessary to adopt good practices to prevent the disease.
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Feminino , Animais , Bovinos , Enterobacter aerogenes/isolamento & purificação , Infecções por Enterobacteriaceae/tratamento farmacológico , Infecções por Enterobacteriaceae/veterinária , Mastite Bovina/microbiologia , Mastite Bovina/patologiaResumo
Neste trabalho, objetivou-se verificar a ocorrência de mastite em vacas sem raça definida de uma propriedade do município do Cantá. Foram avaliados onze animais, sendo os quesitos observados: escore corporal, idade, número de crias, produção leiteira, lesão de casco e, por fim, se há ou não a presença da mastite. A maioria das vacas apresentou fraca positividade para a enfermidade, sendo que apenas uma resultou em forte positivo em um dos tetos. Com isso, é possível concluir que a propriedade onde se realizou a pesquisa não positivou a mastite em seu pior grau, visto que há uma baixa produção individual das vacas e a presença do bezerro ao pé.
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Animais , Bovinos , Mastite Bovina/diagnóstico , Mastite Bovina/epidemiologia , Mastite Bovina/patologia , Mastite Bovina/prevenção & controleResumo
A mastite bovina é a enfermidade que causa maior impacto na produção leiteira, sendo o microrganismo Staphylococcus aureus o mais prevalente. Este gênero possui a capacidade de produzir biofilmes que é um importante mecanismo de resistência aos antibióticos. Considerando a capacidade terapêutica das plantas, a espécie Croton urucurana, nativa do Cerrado, foi alvo do presente estudo, que teve como objetivo avaliar a atividade antibiofilme in vitro do extrato vegetal e substâncias isoladas desta espécie, frente Staphylococcus aureus, isolados de leite de vacas com mastite, bem como dos antibióticos gentamicina e vancomicina. A atividade antibiofilme foi avaliada por meio do cristal violeta e da contagem de unidades formadoras de colônia. As imagens foram obtidas por microscopia eletrônica de varredura. O extrato bruto e frações de C. urucurana apresentaram atividade antibiofilme superior à gentamicina e semelhante à vancomicina, enquanto a substância isolada α-Costol foi significativamente mais ativa quando comparada aos demais tratamentos avaliados, reduzindo cerca de 6 ciclos logarítmicos da população bacteriana em biofilme. Conclui-se que os fitocomplexos e a substância α-Costol isolados de Croton urucurana são promissores no combate a um dos principais agentes etiológicos da mastite bovina.(AU)
Mastitis in dairy cattle is the disease that impacts dairy production the most; Staphylococcus aureus is the main causative agent of this condition. The genus Staphylococcus has the ability to produce biofilms, an important mechanism of antibiotic resistance. Bearing in mind that plants have therapeutic action, this study investigated the in vitro antibiofilm activity of the plant extract and compounds isolated from the species Croton urucurana, native to the Brazilian Cerrado, against Staphylococcus aureus isolated from the milk of cows with mastitis, as well as the antibiotic gentamycin and vancomicyn. The antibiofilm activity was evaluated by means of violet crystal and the counting of Colony Forming Units. The images were obtained by scanning electron microscopy. The C. urucurana crude extract and fraction displayed better antibiofilm effect than gentamycin; their antibiofilm action was similar to the action of vancomycin. Compared with all the assessed treatments, the isolated compound α-Costol was significantly more active it reduced six logarithmic cycles of the bacterial population composing the biofilm. The phytocomplexs and the α-Costol substance isolated from Croton urucurana are promising in the fight against one of the main etiological agents of bovine mastitis.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Staphylococcus aureus , Bovinos/anormalidades , Mastite Bovina/patologia , CrotonResumo
A mastite bovina é a enfermidade que causa maior impacto na produção leiteira, sendo o microrganismo Staphylococcus aureus o mais prevalente. Este gênero possui a capacidade de produzir biofilmes que é um importante mecanismo de resistência aos antibióticos. Considerando a capacidade terapêutica das plantas, a espécie Croton urucurana, nativa do Cerrado, foi alvo do presente estudo, que teve como objetivo avaliar a atividade antibiofilme in vitro do extrato vegetal e substâncias isoladas desta espécie, frente Staphylococcus aureus, isolados de leite de vacas com mastite, bem como dos antibióticos gentamicina e vancomicina. A atividade antibiofilme foi avaliada por meio do cristal violeta e da contagem de unidades formadoras de colônia. As imagens foram obtidas por microscopia eletrônica de varredura. O extrato bruto e frações de C. urucurana apresentaram atividade antibiofilme superior à gentamicina e semelhante à vancomicina, enquanto a substância isolada α-Costol foi significativamente mais ativa quando comparada aos demais tratamentos avaliados, reduzindo cerca de 6 ciclos logarítmicos da população bacteriana em biofilme. Conclui-se que os fitocomplexos e a substância α-Costol isolados de Croton urucurana são promissores no combate a um dos principais agentes etiológicos da mastite bovina.(AU)
Mastitis in dairy cattle is the disease that impacts dairy production the most; Staphylococcus aureus is the main causative agent of this condition. The genus Staphylococcus has the ability to produce biofilms, an important mechanism of antibiotic resistance. Bearing in mind that plants have therapeutic action, this study investigated the in vitro antibiofilm activity of the plant extract and compounds isolated from the species Croton urucurana, native to the Brazilian Cerrado, against Staphylococcus aureus isolated from the milk of cows with mastitis, as well as the antibiotic gentamycin and vancomicyn. The antibiofilm activity was evaluated by means of violet crystal and the counting of Colony Forming Units. The images were obtained by scanning electron microscopy. The C. urucurana crude extract and fraction displayed better antibiofilm effect than gentamycin; their antibiofilm action was similar to the action of vancomycin. Compared with all the assessed treatments, the isolated compound α-Costol was significantly more active it reduced six logarithmic cycles of the bacterial population composing the biofilm. The phytocomplexs and the α-Costol substance isolated from Croton urucurana are promising in the fight against one of the main etiological agents of bovine mastitis.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Staphylococcus aureus , Bovinos/anormalidades , Mastite Bovina/patologia , CrotonResumo
Dairy farming is an important social and economic activity in the Midwest region of Santa Catarina State, Brazil. However, despite technological advances in the productive chain, mastitis is still considered the main disease of dairy herds, due its high economic impact. Bacterial pathogens are the main cause of this disease and failures in the treatment of clinical cases are attributed in part to the antimicrobial resistance of these pathogens. As an alternative, in vitro antimicrobial susceptibility tests of strains isolated from bovine mastitis cases have been carried out; the information generated contributes to strategic treatment measures, and also to the control of microorganism resistance. Therefore, the aims of the present study were to evaluate the etiology and in vitro antimicrobial susceptibility profiles of bacterial strains isolated from cases of bovine mastitis in dairy herds from the Midwest region of Santa Catarina State, Brazil. For this purpose, 345 milk samples were collected from 70 herds located in 16 different municipalities. The main pathogens isolated were: staphylococci (55.9%), streptococci (34.8%), Corynebacterium spp. (7.8%) and Escherichia coli (1.4%). The resistance rates of staphylococcus strains to ampicillin and to gentamicin were lower (24.9%) and higher (33%), respectively, than those obtained in other Brazilian studies. The resistance profiles of streptococcus strains were similar to those described in the literature, while Corynebacterium spp., showed high resistance rates to tetracycline (85.2%). Moreover, a considerable prevalence of staphylococcus (27.5%) and streptococcus (11.7%) multiresistant strains was verified. These data reinforce the need for regional characterization of microorganisms.
Assuntos
Animais , Bovinos , Farmacorresistência Bacteriana , Mastite Bovina/etiologia , Mastite Bovina/patologia , Brasil , Corynebacterium , Staphylococcus , StreptococcusResumo
Dairy farming is an important social and economic activity in the Midwest region of Santa Catarina State, Brazil. However, despite technological advances in the productive chain, mastitis is still considered the main disease of dairy herds, due its high economic impact. Bacterial pathogens are the main cause of this disease and failures in the treatment of clinical cases are attributed in part to the antimicrobial resistance of these pathogens. As an alternative, in vitro antimicrobial susceptibility tests of strains isolated from bovine mastitis cases have been carried out; the information generated contributes to strategic treatment measures, and also to the control of microorganism resistance. Therefore, the aims of the present study were to evaluate the etiology and in vitro antimicrobial susceptibility profiles of bacterial strains isolated from cases of bovine mastitis in dairy herds from the Midwest region of Santa Catarina State, Brazil. For this purpose, 345 milk samples were collected from 70 herds located in 16 different municipalities. The main pathogens isolated were: staphylococci (55.9%), streptococci (34.8%), Corynebacterium spp. (7.8%) and Escherichia coli (1.4%). The resistance rates of staphylococcus strains to ampicillin and to gentamicin were lower (24.9%) and higher (33%), respectively, than those obtained in other Brazilian studies. The resistance profiles of streptococcus strains were similar to those described in the literature, while Corynebacterium spp., showed high resistance rates to tetracycline (85.2%). Moreover, a considerable prevalence of staphylococcus (27.5%) and streptococcus (11.7%) multiresistant strains was verified. These data reinforce the need for regional characterization of microorganisms.(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Mastite Bovina/etiologia , Mastite Bovina/patologia , Farmacorresistência Bacteriana , Corynebacterium , Staphylococcus , Streptococcus , BrasilResumo
Mastitis is one of the most common and costly infectious diseases in dairy cattle worldwide. This is a multifactorial illness caused by different microorganisms, including virus, yeasts, algae, parasites, and several species of bacteria. Among these bacteria, Streptococcus uberis is an important environmental pathogen that is responsible for a large range of clinical and subclinical mammary infections, especially in intensively managed herds. Despite the increasing importance of this pathogen in the etiology of bovine mastitis, data on its virulence and diversity in Brazilian dairy herds are scarce. The aims of the present study were to investigate the virulence characteristics of S. uberis isolated from bovine mastitis and to assess the molecular epidemiology of the Brazilian isolates using pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). In this work, 46 strains of S. uberis isolated from bovine mastitis from 26 Brazilian dairy herds were evaluated regarding their genetic diversity by PFGE using with the SmaI enzyme. Additionally, the presence of the virulence genes skc and pauA, which encode plasminogen activators, and the gene sua, which encodes an adhesion molecule in mammary epithelial cells, were assessed by PCR. Our results showed a high genetic diversity in the population, displaying many different patterns in the PFGE analysis. A high proportion of strains was positive for virulence genes in the sampled population(sua [100%], pauA [91%], and skc [91%]). The high frequency of skc, pauA, and sua genes amongthe studied strains suggests the importance of these virulence factors, possibly helping S. uberis in thecolonization of the bovine mammary gland. Surveys of the genetic and molecular characteristics of thispathogen can improve our knowledge of bacterial activity and identify molecules that have roles in theestablishment of the infection. This might help in the development of more effective measures to controland prevent bovine mastitis.
A mastite é uma das doenças infecciosas mais onerosas em bovinos leiteiros em todos os continentes. Trata-se de uma doença de cunho multifatoral causada por diferentes microrganismos, incluindo vírus, leveduras, algas, parasitas e várias espécies de bactérias. Entre as bactérias, Streptococcus uberis destaca-se como um importante agente ambiental, responsável por uma grande variedade de infecções clínicas e subclínicas da glândula mamária, especialmente em sistemas de produção intensivos. Apesar da crescente importância de S. uberis na etiologia da mastite bovina, existem poucos estudos sobre a diversidade populacional e fatores de virulência deste patógeno em rebanhos leiteiros brasileiros.Os objetivos do presente estudo foram investigar as características de virulência e a epidemiologia molecular de S. uberis isolados de mastite bovina em rebanhos brasileiros, utilizando-se a PCR e a eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). Para tal, 46 amostras de S. uberis isoladas de mastite bovina em 26 rebanhos leiteiros de uma mesma mesorregião brasileira foram avaliadas quanto à diversidade populacional por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE), utilizando-se a enzima Smal. Além disso, foi realizada PCR para detectar os genes de virulência pauA e skc, que codificam ativadores de plasminogênio, e do gene sua, que codifica uma proteína de adesão às celulas epiteliais da glândula mamária. Nossosresultados mostraram uma alta diversidade genética na população estudada, com vários padrões dePFGE, e uma elevada frequência dos genes de virulência pesquisados: sua (100%), pauA (91%) e skc(91%). A alta frequência dos genes skc, pauA e sua sugere a importância destes fatores de virulênciapara S. uberis na colonização da glândula mamária bovina. Estudos moleculares e genéticos sobre esteagente podem contribuir muito para melhorar o conhecimento sobre a patogenia, permitindo identificarmoléculas que tenham papel relevante no estabelecimento da infecção, fornecendo...
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Animais , Bovinos , Mastite Bovina/genética , Mastite Bovina/patologia , Streptococcus/genética , Variação GenéticaResumo
Mastitis is one of the most common and costly infectious diseases in dairy cattle worldwide. This is a multifactorial illness caused by different microorganisms, including virus, yeasts, algae, parasites, and several species of bacteria. Among these bacteria, Streptococcus uberis is an important environmental pathogen that is responsible for a large range of clinical and subclinical mammary infections, especially in intensively managed herds. Despite the increasing importance of this pathogen in the etiology of bovine mastitis, data on its virulence and diversity in Brazilian dairy herds are scarce. The aims of the present study were to investigate the virulence characteristics of S. uberis isolated from bovine mastitis and to assess the molecular epidemiology of the Brazilian isolates using pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). In this work, 46 strains of S. uberis isolated from bovine mastitis from 26 Brazilian dairy herds were evaluated regarding their genetic diversity by PFGE using with the SmaI enzyme. Additionally, the presence of the virulence genes skc and pauA, which encode plasminogen activators, and the gene sua, which encodes an adhesion molecule in mammary epithelial cells, were assessed by PCR. Our results showed a high genetic diversity in the population, displaying many different patterns in the PFGE analysis. A high proportion of strains was positive for virulence genes in the sampled population(sua [100%], pauA [91%], and skc [91%]). The high frequency of skc, pauA, and sua genes amongthe studied strains suggests the importance of these virulence factors, possibly helping S. uberis in thecolonization of the bovine mammary gland. Surveys of the genetic and molecular characteristics of thispathogen can improve our knowledge of bacterial activity and identify molecules that have roles in theestablishment of the infection. This might help in the development of more effective measures to controland prevent bovine mastitis.(AU)
A mastite é uma das doenças infecciosas mais onerosas em bovinos leiteiros em todos os continentes. Trata-se de uma doença de cunho multifatoral causada por diferentes microrganismos, incluindo vírus, leveduras, algas, parasitas e várias espécies de bactérias. Entre as bactérias, Streptococcus uberis destaca-se como um importante agente ambiental, responsável por uma grande variedade de infecções clínicas e subclínicas da glândula mamária, especialmente em sistemas de produção intensivos. Apesar da crescente importância de S. uberis na etiologia da mastite bovina, existem poucos estudos sobre a diversidade populacional e fatores de virulência deste patógeno em rebanhos leiteiros brasileiros.Os objetivos do presente estudo foram investigar as características de virulência e a epidemiologia molecular de S. uberis isolados de mastite bovina em rebanhos brasileiros, utilizando-se a PCR e a eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE). Para tal, 46 amostras de S. uberis isoladas de mastite bovina em 26 rebanhos leiteiros de uma mesma mesorregião brasileira foram avaliadas quanto à diversidade populacional por eletroforese em gel de campo pulsado (PFGE), utilizando-se a enzima Smal. Além disso, foi realizada PCR para detectar os genes de virulência pauA e skc, que codificam ativadores de plasminogênio, e do gene sua, que codifica uma proteína de adesão às celulas epiteliais da glândula mamária. Nossosresultados mostraram uma alta diversidade genética na população estudada, com vários padrões dePFGE, e uma elevada frequência dos genes de virulência pesquisados: sua (100%), pauA (91%) e skc(91%). A alta frequência dos genes skc, pauA e sua sugere a importância destes fatores de virulênciapara S. uberis na colonização da glândula mamária bovina. Estudos moleculares e genéticos sobre esteagente podem contribuir muito para melhorar o conhecimento sobre a patogenia, permitindo identificarmoléculas que tenham papel relevante no estabelecimento da infecção, fornecendo...(AU)
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Animais , Bovinos , Variação Genética , Streptococcus/genética , Mastite Bovina/genética , Mastite Bovina/patologiaResumo
The Prototheca sp. is unicellular alga, no chlorophyll, which causes protothecosis in animals and humans. The protothecosis is an emerging zoonosis that is transmitted through contaminated milk intake. Mastitis caused by Prototheca sp. is an infection of the mammary gland predominantly chronic, easily diagnosed in the laboratory, but diffi cult to treat and control. The lack of hygiene is the main risk factor for the occurrence of the disease that causes drop in productivity and quality of milk, as well as being a risk to public health. In this paper we report the fi rst case of bovine mastitis caused by Prototheca sp. in the State of Rondonia, indicating that the region is not free from protothecosis. Strengthening health education is essential to prevent the spread of Prototheca, taking into account their zoonotic power, which may cause great economic losses to the dairy production and public health.
Prototheca sp. é uma alga unicelular, sem clorofila, que causa a prototecose nos animais e seres humanos. A prototecose é uma zoonose emergente que é transmitida através da ingestão de leite contaminado. A mastite causada por Prototheca sp. é uma infecção da glândula mamária predominantemente crônica, de fácil diagnóstico em laboratório, porém de difícil tratamento e controle. A falta de higiene é o principal fator de risco para a ocorrência da doença que causa queda na produtividade e qualidade do leite, além de ser um risco à saúde pública. Nesse trabalho relatamos o primeiro caso de mastite bovina causada por Prototheca sp. no Estado de Rondônia, indicando que a região não é livre da prototecose. O reforço na educação sanitária é essencial para evitar a disseminação da Prototheca, levando em consideração o seu poder zoónotico, podendo acarretar grande prejuízos econômicos para bovinocultura de leite e para saúde pública.
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Animais , Bovinos , Leite/toxicidade , Mastite Bovina/patologia , Mastite/veterinária , Prototheca/fisiologia , Zoonoses/transmissão , Educação em SaúdeResumo
The Prototheca sp. is unicellular alga, no chlorophyll, which causes protothecosis in animals and humans. The protothecosis is an emerging zoonosis that is transmitted through contaminated milk intake. Mastitis caused by Prototheca sp. is an infection of the mammary gland predominantly chronic, easily diagnosed in the laboratory, but diffi cult to treat and control. The lack of hygiene is the main risk factor for the occurrence of the disease that causes drop in productivity and quality of milk, as well as being a risk to public health. In this paper we report the fi rst case of bovine mastitis caused by Prototheca sp. in the State of Rondonia, indicating that the region is not free from protothecosis. Strengthening health education is essential to prevent the spread of Prototheca, taking into account their zoonotic power, which may cause great economic losses to the dairy production and public health.(AU)
Prototheca sp. é uma alga unicelular, sem clorofila, que causa a prototecose nos animais e seres humanos. A prototecose é uma zoonose emergente que é transmitida através da ingestão de leite contaminado. A mastite causada por Prototheca sp. é uma infecção da glândula mamária predominantemente crônica, de fácil diagnóstico em laboratório, porém de difícil tratamento e controle. A falta de higiene é o principal fator de risco para a ocorrência da doença que causa queda na produtividade e qualidade do leite, além de ser um risco à saúde pública. Nesse trabalho relatamos o primeiro caso de mastite bovina causada por Prototheca sp. no Estado de Rondônia, indicando que a região não é livre da prototecose. O reforço na educação sanitária é essencial para evitar a disseminação da Prototheca, levando em consideração o seu poder zoónotico, podendo acarretar grande prejuízos econômicos para bovinocultura de leite e para saúde pública.(AU)
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Animais , Bovinos , Prototheca/fisiologia , Zoonoses/transmissão , Mastite/veterinária , Mastite Bovina/patologia , Leite/toxicidade , Educação em SaúdeResumo
Acompanhou-se durante 15 meses um rebanho leiteiro, composto por diferentes graus de sangue Holandês-Zebu (HZ), em sistema semi-intensivo. Objetivou-se avaliar o comportamento longitudinal da contagem de células somáticas (CCS) e a influência da mastite subclínica (MS) na produção total e no pico de produção de leite de vacas mestiças HZ. Inicialmente, coletaram-se amostras de leite individual para análise microbiológica, a fim de identificar o perfil de patógenos causadores de mastite. Realizou-se mensalmente a CCS com o intuito de monitorar a MS. Semanalmente, avaliou-se a produção de leite. Para avaliar o efeito da CCS sobre a produção de leite, as vacas foram divididas em dois grupos, <200.000 e ≥200.000 células/mL. Os patógenos encontrados foram Streptococcusambientais (34%), células leveduriformes (29%), Staphylococcuscoagulase negativa (31%) e Staphylococcus aureus (6%), com CCS de 1.100.000, 845.000, 275.000 e 620.000, respectivamente. A CCS média variou de 255.000 a 975.000 cél./mL, com prevalência média de 42% de MS. Vacas primíparas com MS apresentaram redução da produção total de leite quando comparadas às primíparas sem MS (P<0,05). Em contraste, a produção total das vacas multíparas não foi alterada. Não foram observadas diferenças entre a CCS, a produção total e o pico de produção nos diferentes graus de sangue HZ (P>0,05). A CCS das vacas diferiu (P<0,01) entre a secagem e o pós-parto imediato. A manutenção das condições de elevado risco ambiental em rebanho leiteiro manejado em sistema semi-intensivo pode minimizar as variações na ocorrência de MS nos períodos de verão e inverno, possibilitando a expressão do problema em vacas de diferentes graus de sangue HZ. Em um rebanho caracterizado pela ocorrência de mastite predominantemente ambiental, a produção de leite na lactação total de vacas primíparas com CCS superior a 200.000 cél./mL [...](AU)
A herd of dairy cattle with different crossbreeding Holstein x Zebu (HZ), housed in a semi-intensive production system, was monitored for 15 months. We aimed to evaluate the longitudinal behavior of somatic cell count (SCC) and the influence of subclinical mastitis (SM) on the milk yield and on the peak yield of crossbred HZ dairy cows. Initially, individual milk samples were collected for microbiological analysis for identification of mastitis pathogens. The SCC was performed monthly to monitor subclinical mastitis. Additionally, milk production was evaluated weekly. To evaluate the effects of SCC on milk production, the cows were identified as falling into two groups: <200.000 and ≥200.000 cells/mL. The isolated pathogens were environmental streptococci (34%), yeasts cells (29%), coagulase-negative staphylococci (31%) and Staphylococcus aureus (6%). The SCC associated to each type of pathogen was 1100.000, 845.000, 275.000 and 620.000, respectively. The average SCC varied from 255.000 to 975.000 cells/mL and the prevalence of SM was 42%. Primiparous cows with SM presented a decrease in total milk yield when compared to primiparous cows without SM (P<0.05). In contrast, the total milk yield of multiparous cows did not change. Differences in SCC, total yield and peak yield between the crossbreeding Holstein x Zebu (HZ) levels were not observed (P>0.05). SCC differed (P<0.01) between drying off and immediate postpartum. Maintaining high environmental risk conditions in a dairy herd, housed in semi-intensive system, can reduce the variations in the occurrence of SM in summer and winter periods. This can also decrease the variations in SM occurrence between cows of different crossbreeding HZ levels. In a herd characterized primarily by the presence of environmental mastitis, milk yield of primiparous cows with SCC above 200.000 cells/mL is reduced when compared to cows with SCC below 200.000 cells/mL. This finding was not observed for multiparous cows(AU)
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Animais , Feminino , Bovinos , Mastite Bovina/economia , Mastite Bovina/patologia , Estudos Longitudinais , Infecções Assintomáticas , Contagem de Células/veterináriaResumo
Escherichia coli é um micro-organismo altamente adaptativo e sua habilidade em formar biofilmes pode ser fundamental na resistência a tratamentos com antimicrobianos. A avaliação da concentração mínima inibitória (CMI) vem sendo utilizada para verificar a sensibilidade dos micro-organismos aos antimicrobianos. Entretanto, quando se avaliam células sésseis, a concentração do antimicrobiano requerido para erradicação do biofilme é maior do que a determinada pela CMI. Objetivou-se comparar as CMI com as concentrações mínimas de erradicação de biofilmes (CMEB) de antimicrobianos usados no tratamento da mastite em 27 isolados de E. coli produtores de biofilmes provenientes de mastite. Os isolados foram submetidos a testes de sensibilidade a antimicrobianos usados no tratamento da mastite, tanto para células planctônicas, por meio da CMI, quanto para células sésseis, pela avaliação da CMEB. Os resultados revelaram uma alta sensibilidade: apenas quatro (14,8%) isolados obtiveram valores da CMI elevados, variando de 4 a 10µg/mL, sendo classificados como resistentes. Para os demais isolados (85,2%), os valores foram menores, variando de 0,125 a 2µg/mL, classificados como sensíveis. A avaliação de CMEB indicou que a concentração dos antimicrobianos necessária para eliminar as células sésseis variou de 100µg/mL a 500µg/mL. Os valores de CMEB foram significativamente maiores nos isolados grandes e moderados produtores de biofilmes em relação aos isolados fracos produtores de biofilmes (p<0,001). Não houve correlação entre os valores de CMEB e CMI (p>0,05). A escolha da terapêutica antimicrobiana correta para o tratamento de infecções intramamárias em bovinos relacionadas com a produção de biofilmes parece exigir a aplicação de testes mais específicos. Testes de susceptibilidade antimicrobiana baseados apenas em valores de CMI mostraram-se ineficazes em determinar com precisão a susceptibilidade das células bacterianas sésseis.(AU)
Escherichia coli is a highly adaptive microorganism. Its ability to form biofilms may be critical for resistance to antimicrobial treatments. Evaluation of minimum inhibitory concentration (MIC) has been used to check the sensitivity of microorganisms to antibiotics, however, when evaluating sessile cells, the required antibiotic concentration to eradicate biofilm is greater than determined by MIC. This study aimed to compare MIC with minimum biofilm eradication concentration (MBEC) of antimicrobials used in mastitis treatment in 27 E. coli biofilm producers isolates from mastitis. Isolates were tested for sensitivity to antimicrobials used in mastitis treatment, for both planktonic cells (by CMI) and sessile cells (by MBEC). The results revealed high sensitivity: only four (14.8%) isolates showed high MIC values, ranging from 4 to 10g/mL and they were classified as resistant. All other isolates (85.2%) showed lower values, ranging from 0.125 to 2mg/mL, and they were classified as sensitive. Evaluation of MBEC indicated that concentration of antimicrobial needed to remove sessile cells ranged from 100mg/mL to 500mg/mL. MBEC values were significantly higher in large and moderate biofilm producers isolates regarding weak biofilm producers isolates (p<0.001). There was no correlation between MBEC and CMI values (p>0.05). The correct choice of antimicrobial therapy for treatment of mammary infections in cattle related to biofilm production seems to require application of more specific tests. Antimicrobial susceptibility testing based only on MIC values proved ineffectiveness to accurately determination the susceptibility of sessile bacterial cells.(AU)