Resumo
Functional enzyme assays to detect sublethal poisoning of Neotropical fish are paramount. Accordingly, we assayed a glutathione S-transferase (GST) activity in liver and kidney cytosols from Piaractus mesopotamicus injected with methyl parathion or benzo[a]pyrene using the substrate 1-chloro-2,4-dinitrobenzene (CDNB), which is the usual substrate for assaying a known general activity of GST. Since the most reactive substrate is required to reveal specific changes in enzyme activity, we also used two alternative substrates, 1,2-dichloro-4-nitrobenzene (DCNB) and ethacrynic acid (ETHA). Activities with CDNB or ETHA did not change. However, assays with DCNB showed that methyl parathion caused a decrease in GST activity in the liver on the 24th, 48th and 96th hour after the injection. DCNB also revealed that GST activity in the liver increased seven days after benzo[a]pyrene injection, coming down to normal after fourteen days. Benzo[a]pyrene, but not methyl parathion, increased the activities with DCNB in cytosol from the kidney seven and fourteen days after the injection. Thus, a decreased liver GST activity assayed with DCNB corresponded to contamination of P. mesopotamicus with methyl parathion. The increase of this GST activity in the liver and the kidney correlates to pacu contamination with polycyclic aromatic hydrocarbons.
Ensaios práticos de enzimas para detectar contaminação subletal de peixes neotropicais são da maior importância. Assim, ensaiamos a atividade da glutationa S-transferase (GST) em citosóis de fígado e de rim de Piaractus mesopotamicus injetados com metilparation ou benzo[a]pireno usando 1-cloro-2,4-dinitrobenzeno (CDNB), o substrato usual para ensaiar uma denominada atividade geral de GST. Desde que para indicar alterações na atividade de uma isoenzima, é necessário o substrato mais reativo, também usamos dois substratos alternativos, o 1,2-dicloro-4-nitrobenzeno (DCNB) e o ácido etacrínico (ETHA). As atividades com CDNB ou ETHA não mudaram. Entretanto, ensaios com DCNB mostraram que metilparation decresceu a atividade de GST no fígado em 24, 48 e 96 horas depois da injeção. O DCNB também revelou que sete dias depois da injeção de benzo[a]pireno a atividade da GST aumentou no fígado, normalizando depois de 14 dias. Benzo[a]pireno, mas não metilparation, aumentou as atividades com DCNB no citosol dos rins sete e 14 dias depois da injeção. Assim, uma atividade de GST ensaiada com DCNB diminuída no fígado correspondeu à contaminação de P. mesopotamicus com metilparation. O aumento dessa atividade de GST no fígado e nos rins está correlacionada com contaminação do pacu por hidrocarbonetos policíclicos aromáticos.
Assuntos
Animais , Hidrocarbonetos Policíclicos Aromáticos/análise , Glutationa S-Transferase pi/análise , Characidae/fisiologia , Fígado/fisiopatologia , Metil Paration/toxicidade , Poluição da Água/análise , CitosolResumo
The aim of this work was to evaluate whether the heart function of bullfrog tadpoles (25 Gosner stage) is affected by their acute exposure (48 h) to a sub-lethal concentration (10 µg.L1) of the active principle of the organophosphorus pesticide Folisuper 600R (methyl parathion - MP). Our results demonstrated that MP causes not only a reduction in tadpoles cardiac ventricular mass, resulting in a marked reduction in their cardiac twitch force, but also impairs their swimming performance, irrespective of increasing their heart rate. Together, these findings indicate that low and realistic concentration of MP have a negative impact on tadpoles performance, jeopardizing their survival.(AU)
O objetivo do presente estudo foi avaliar se a função cardíaca de girinos de rãs-touro (estágio 25 de Gosner) é afetada pela exposição aguda (48h) a uma concentração sub-letal (10 µg.L1) do princípio ativo do pesticida organofosforado Folisuper 600R (metil paration MP). Nossos resultados demonstraram que o MP ocasionou não apenas uma redução na massa ventricular cardíaca dos girinos, como também provocou uma redução na sua força de contração cardíaca e de seu desempenho natatório, a despeito de ter sido observado um aumento de sua freqüência cardíaca. Conjuntamente, os achados aqui obtidos indicam que uma baixa e realística concentração de MP exerce um impacto negativo sobre o desempenho dos girinos, ameaçando sua sobrevivência.(AU)