Pancreatic cancer orthotopic graft in a murine model

Purpose: Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is one of the deadliest cancers with increasing incidence. Even if progress have been made, the five-year overall survival remains lower than 10%. There is a desperate need in therapeutic improvements. In the last two decades, new in-vitro models have been developed and improved, including tridimensional-culture spheroids and organoids. However, animal studies remain mandatory in the upscaling before clinical studies. Orthotopic and syngeneic grafting is a robust model to test a drug efficiency in a tumor and its microenvironment. Methods: We described a method for orthotopic and syngeneic graft of KRAS mutated, p53 wildtype, 8305 cells in a C57BL/6J mouse model. Results: With this microsurgical method, 30 mice were grafted, 24 by a junior and six by a senior, resulting in 95,8 and 100% of (partial and total) successful tumoral implantation, respectively. Twenty mice underwent ultrasound follow-up. It was an efficient method for the tumoral growth evaluation. At day 16 after grafting, 85% of the tumors were detectable by ultrasound, and at day 22 all tumors were detected. Conclusions: The presented method appears to be a robust and reliable method for pre-clinical studies. A junior master student can provide positive results using this technique, which can be improved with training.

Occurrence of Hymenolepis diminuta: a potential helminth of zoonotic importance in murid rodents / Ocorrência de Hymenolepis diminuta: um helminto potencial de importância zoonótica em roedores murídeos

The study reveals the prevalence of a potential rodent-borne zoonotic helminth species, Hymenolepis diminuta in commensal rodents caught from irrigated and rain-fed areas of Swat, Pakistan. Three hundred and fifty rodents (269 rats and 81 mice) trapped during vegetative, flowering/fruiting and mature/harvesting stages of crops were studied from 2011-2013. Hymenolepisdiminuta eggs were identified on the basis of their shape, size, colour and markings on the surface of the egg shell and three pairs of embryonic hook-lets. Overall prevalence of H. diminuta was 3.14% (n=11/350). The highest prevalence 3.49% (n=5/143) of H. diminuta was noted at harvesting stages of the crops whereas the lowest 2.59% (n=2/77) during vegetative stage. Infection was higher in males 3.25% (n=7/215) than females 2.96% (n=4/135). Adult rodents were highly infected while no sub-adult was found infected. Infection was higher in mice 3.70% (3/81) than rats 2.69% (8/269) while no significance (p=1.0000:0.1250 to 32.00 CI). Rats and mice appears to show the most suitable reservoirs by hosting H. diminuta a zoonotic helminth. The presence of these rodents in all possible habitats can act as a main channel of transferring parasites through various habitats and can pose a hazard to humans in the area.

O estudo revela a prevalência de uma espécie potencial de helmintos zoonóticos transmitidos por roedores, Hymenolepis diminuta, em roedores comensais capturados em áreas irrigadas e alimentadas pela chuva de Swat, Paquistão. Trezentos e cinquenta roedores (269 ratos e 81 camundongos) presos durante os estágios vegetativo, floração/frutificação e maturidade/colheita das safras foram estudados de 2011-2013. Ovos de Hymenolepis diminuta foram identificados com base em sua forma, tamanho, cor e marcações na superfície da casca do ovo e três pares de anzóis embrionários. A prevalência geral de H. diminuta foi de 3,14% (n = 11/350). A maior prevalência 3,49% (n = 5/143) de H. diminuta foi observada na fase de colheita das lavouras, enquanto a menor 2,59% (n = 2/77) durante a fase vegetativa. A infecção foi maior nos homens 3,25% (n = 7/215) do que nas mulheres 2,96% (n = 4/135). Roedores adultos foram altamente infectados, enquanto nenhum subadulto foi encontrado infectado. A infecção foi maior em camundongos 3,70% (3/81) do que em ratos 2,69% (8/269), embora sem significância (p = 1,0000: 0,1250 a 32,00 CI). Ratos e camundongos parecem mostrar os reservatórios mais adequados hospedando H. diminuta um helmintos zoonótico. A presença desses roedores em todos os habitats possíveis pode atuar como um canal principal de transferência de parasitas através de vários habitats e pode representar um perigo para os humanos na área.

Protective effect of kaempferol against cisplatin-induced acute ovarian damage in a mouse model / [Efeito protetor do kaempferol contra o dano ovariano agudo induzido pela cisplatina em um modelo murino]

The flavonoid kaempferol has attracted research attention as a potential adjuvant during chemotherapy. This study aimed to evaluate the protective effects of kaempferol against ovarian damage in cisplatin-treated mice. Two groups of mice received saline solution (intraperitoneal injection [i.p.]; control) or a single dose of cisplatin (5 mg/kg body weight, i.p.). Moreover, two other mice groups were pretreated with kaempferol (1 or 10 mg/kg body weight, i.p.) 30 min before of the cisplatin administration. Thereafter, their ovaries were harvested and subjected to histological (follicular morphology and activation) and fluorescence (reactive oxygen species [ROS] production, glutathione [GSH] concentration, and mitochondrial activity) analyses. Compared with cisplatin treatment alone, pretreatment with 1 mg/kg kaempferol maintained normal follicular morphology, reduced ROS production and mitochondrial damage, and enhanced GSH concentration. However, pretreatment with 10 mg/kg kaempferol did not prevent cisplatin-induced damage. The rate of primordial follicle activation was greater in mice pretreated with 1 mg/kg kaempferol than in the other treatment groups. In conclusion, pretreatment with 1 mg/kg kaempferol prevents cisplatin-induced ovarian damage and stimulates primordial follicle activation in mice.

O flavonoide kaempferol tem atraído a atenção como um potencial adjuvante durante a quimioterapia. O presente estudo objetivou avaliar os efeitos do kaempferol contra os danos ovarianos em camundongos tratados com cisplatina. Fêmeas de camundongos receberam solução salina (injeção intraperitoneal [ip]; controle) ou uma dose única de cisplatina (5 mg/kg, ip) ou foram pré-tratadas com kaempferol (1 ou 10 mg/kg, ip) 30 min antes da administração de cisplatina. Os ovários foram recuperados e destinados para as análises histológicas (morfologia e ativação folicular) e de fluorescência (produção de espécies reativas de oxigênio [ERO], concentração de glutationa [GSH] e atividade mitocondrial). Em comparação ao tratamento apenas com cisplatina, o pré-tratamento com 1 mg/kg de kaempferol manteve a morfologia folicular normal, reduziu a produção de ERO, bem como os danos mitocondriais, e aumentou a concentração de GSH. Entretanto, o pré-tratamento com 10 mg/kg de kaempferol não preveniu os danos induzidos pela cisplatina. A taxa de ativação do folículo primordial foi maior em camundongos pré-tratados com 1 mg/kg de kaempferol do que nos outros grupos experimentais. Em conclusão, o pré-tratamento com 1 mg/kg de kaempferol previne o dano ovariano induzido pela cisplatina e estimula a ativação do folículo primordial em camundongos.

Occurrence of Hymenolepis diminuta: a potential helminth of zoonotic importance in murid rodents / Ocorrência de Hymenolepis diminuta: um helminto potencial de importância zoonótica em roedores murídeos

The study reveals the prevalence of a potential rodent-borne zoonotic helminth species, Hymenolepis diminuta in commensal rodents caught from irrigated and rain-fed areas of Swat, Pakistan. Three hundred and fifty rodents (269 rats and 81 mice) trapped during vegetative, flowering/fruiting and mature/harvesting stages of crops were studied from 2011-2013. Hymenolepisdiminuta eggs were identified on the basis of their shape, size, colour and markings on the surface of the egg shell and three pairs of embryonic hook-lets. Overall prevalence of H. diminuta was 3.14% (n=11/350). The highest prevalence 3.49% (n=5/143) of H. diminuta was noted at harvesting stages of the crops whereas the lowest 2.59% (n=2/77) during vegetative stage. Infection was higher in males 3.25% (n=7/215) than females 2.96% (n=4/135). Adult rodents were highly infected while no sub-adult was found infected. Infection was higher in mice 3.70% (3/81) than rats 2.69% (8/269) while no significance (p=1.0000:0.1250 to 32.00 CI). Rats and mice appears to show the most suitable reservoirs by hosting H. diminuta a zoonotic helminth. The presence of these rodents in all possible habitats can act as a main channel of transferring parasites through various habitats and can pose a hazard to humans in the area.

O estudo revela a prevalência de uma espécie potencial de helmintos zoonóticos transmitidos por roedores, Hymenolepis diminuta, em roedores comensais capturados em áreas irrigadas e alimentadas pela chuva de Swat, Paquistão. Trezentos e cinquenta roedores (269 ratos e 81 camundongos) presos durante os estágios vegetativo, floração/frutificação e maturidade/colheita das safras foram estudados de 2011-2013. Ovos de Hymenolepisdiminuta foram identificados com base em sua forma, tamanho, cor e marcações na superfície da casca do ovo e três pares de anzóis embrionários. A prevalência geral de H. diminuta foi de 3,14% (n = 11/350). A maior prevalência 3,49% (n = 5/143) de H. diminuta foi observada na fase de colheita das lavouras, enquanto a menor 2,59% (n = 2/77) durante a fase vegetativa. A infecção foi maior nos homens 3,25% (n = 7/215) do que nas mulheres 2,96% (n = 4/135). Roedores adultos foram altamente infectados, enquanto nenhum subadulto foi encontrado infectado. A infecção foi maior em camundongos 3,70% (3/81) do que em ratos 2,69% (8/269), embora sem significância (p = 1,0000: 0,1250 a 32,00 CI). Ratos e camundongos parecem mostrar os reservatórios mais adequados hospedando H. diminuta um helmintos zoonótico. A presença desses roedores em todos os habitats possíveis pode atuar como um canal principal de transferência de parasitas através de vários habitats e pode representar um perigo para os humanos na área.

Occurrence of Hymenolepis diminuta: a potential helminth of zoonotic importance in murid rodents / Ocorrência de Hymenolepis diminuta: um helminto potencial de importância zoonótica em roedores murídeos

The study reveals the prevalence of a potential rodent-borne zoonotic helminth species, Hymenolepis diminuta in commensal rodents caught from irrigated and rain-fed areas of Swat, Pakistan. Three hundred and fifty rodents (269 rats and 81 mice) trapped during vegetative, flowering/fruiting and mature/harvesting stages of crops were studied from 2011-2013. Hymenolepisdiminuta eggs were identified on the basis of their shape, size, colour and markings on the surface of the egg shell and three pairs of embryonic hook-lets. Overall prevalence of H. diminuta was 3.14% (n=11/350). The highest prevalence 3.49% (n=5/143) of H. diminuta was noted at harvesting stages of the crops whereas the lowest 2.59% (n=2/77) during vegetative stage. Infection was higher in males 3.25% (n=7/215) than females 2.96% (n=4/135). Adult rodents were highly infected while no sub-adult was found infected. Infection was higher in mice 3.70% (3/81) than rats 2.69% (8/269) while no significance (p=1.0000:0.1250 to 32.00 CI). Rats and mice appears to show the most suitable reservoirs by hosting H. diminuta a zoonotic helminth. The presence of these rodents in all possible habitats can act as a main channel of transferring parasites through various habitats and can pose a hazard to humans in the area.(AU)

O estudo revela a prevalência de uma espécie potencial de helmintos zoonóticos transmitidos por roedores, Hymenolepis diminuta, em roedores comensais capturados em áreas irrigadas e alimentadas pela chuva de Swat, Paquistão. Trezentos e cinquenta roedores (269 ratos e 81 camundongos) presos durante os estágios vegetativo, floração/frutificação e maturidade/colheita das safras foram estudados de 2011-2013. Ovos de Hymenolepisdiminuta foram identificados com base em sua forma, tamanho, cor e marcações na superfície da casca do ovo e três pares de anzóis embrionários. A prevalência geral de H. diminuta foi de 3,14% (n = 11/350). A maior prevalência 3,49% (n = 5/143) de H. diminuta foi observada na fase de colheita das lavouras, enquanto a menor 2,59% (n = 2/77) durante a fase vegetativa. A infecção foi maior nos homens 3,25% (n = 7/215) do que nas mulheres 2,96% (n = 4/135). Roedores adultos foram altamente infectados, enquanto nenhum subadulto foi encontrado infectado. A infecção foi maior em camundongos 3,70% (3/81) do que em ratos 2,69% (8/269), embora sem significância (p = 1,0000: 0,1250 a 32,00 CI). Ratos e camundongos parecem mostrar os reservatórios mais adequados hospedando H. diminuta um helmintos zoonótico. A presença desses roedores em todos os habitats possíveis pode atuar como um canal principal de transferência de parasitas através de vários habitats e pode representar um perigo para os humanos na área.(AU)

Characteristic of decreased bacterial diversity in psoriasis / [Característica da diminuição da diversidade bacteriana na psoríase]

Disturbance of commensal intestinal microbiota is related to chronic inflammatory dermatosis. We analyzed the diversity of the gut microbiota to characterize the biological variation of psoriasis (Ps). Significant differences of gut microbiome profiles were revealed in murine model with psoriasis by sequencing 16S rRNA V3-V4 variable region. Group comparisons included the imiquimod cream (IMQ group, n=8), the imiquimod cream and antibiotics (ATB) (PC+IMQ group, n=8) and the healthy control (CTRL group, n=8). The gut microbiota existed in Ps groups including IMQ group and PC+IMQ group encompassed less diversity than controls, which were attributed to decreased presence of several taxa. The two Ps groups were characterized by significant reduction in firmicutes. In this study, microbiota of psoriasis was defined by an increase presence of Bacteroides. After treated with ATB, we found substantial increase of Lactobacillales but significant decrease of Clostridiales and Coriobacteriales. Relative lower abundance of multiple intestinal bacteria was observed in Ps groups. Although part of genera were concomitantly reduced in both IMQ and PC+IMQ conditions, we discovered the specialty of PC+IMQ group samples was that contained lower abundance of beneficial taxa. Characteristics of gut microbiota profiles in Ps mice were comparable to profiles in patients with Ps, which were related to alteration of specific inflammatory proteins in disease groups but were significantly different from control group. Thus, this study emphasizes the role of intestinal microbiota in the pathogenesis of Ps and provides new insight for investigating association between intestinal microbes and immune inflammation.

A perturbação da microbiota intestinal comensal está relacionada à dermatose inflamatória crônica. Analisamos a diversidade da microbiota intestinal para caracterizar a variação biológica da psoríase (Ps). Diferenças significativas do perfil microbiológico intestinal foram reveladas no modelo murino com psoríase pelo sequenciamento da região variável 16S rRNA V3-V4. As comparações de grupo incluíram o creme imiquimod (grupo IMQ, n=8), o creme imiquimod e antibióticos (ATB) (grupo PC+IMQ, n=8) e o controle saudável (grupo CTRL, n=8). A microbiota intestinal existia nos grupos Ps, incluindo o grupo IMQ e o grupo PC+IMQ englobava menos diversidade do que os controles, que foram atribuídos à diminuição da presença de vários taxa. Os dois grupos de Ps caracterizavam-se por uma redução significativa nos firicutes. Neste estudo, a microbiota da psoríase foi definida por um aumento da presença de bacteroides. Após o tratamento com ATB, encontramos um aumento substancial de Lactobacillales mas uma diminuição significativa de Clostridiales e Coriobacteriales. Uma menor abundância relativa de bactérias intestinais múltiplas foi observada nos grupos de Ps. Embora parte dos gêneros tenha sido concomitantemente reduzida tanto em condições IMQ como PC+IMQ, descobrimos que a especialidade das amostras do grupo PC+IMQ era que continham menor abundância de taxas benéficas. As características dos perfis de microbiota intestinal em ratos de Ps eram comparáveis aos perfis em pacientes com Ps, que estavam relacionados à alteração de proteínas inflamatórias específicas em grupos de doenças, mas eram significativamente diferentes do grupo controle. Assim, este estudo enfatiza o papel da microbiota intestinal na patogênese do Ps e fornece novos conhecimentos para investigar a associação entre micróbios intestinais e inflamação imunológica.

Sensitization with Eustrongylides sp. (Nematoda: Dioctophymatidae) antigens induce production of specific IgG and IgE in murine model / Sensibilização com antígenos de Eustrongylides sp. (Nematoda: Dioctophymatidae) induzindo a produção de IgG e IgE em modelo murino

Fish consumption plays an important role in human diet. Hoplias malabaricus, commonly known as traíra, is a freshwater fish widely appreciated in several Brazilian states and frequently infected by Eustrongylides sp. fourth-instar larvae (L4). The aim of the present study was to evaluate allergenic potential of Eustrongylides sp. L4 crude extract (CEE). BALB/c mice were immunized intraperitoneally (IP) by 10 g CEE with 2 mg of aluminum hydroxide on days 0 and 35. Specific IgG and IgE antibody levels were determined after immunization and cellular immunity was evaluated by assessing intradermal reaction in ear pavilion. Epicutaneous sensitization was performed in dorsal region by antigen exposure using a Finn-type chamber containing 50 g of CEE or saline solution, followed by evaluation of specific antibody levels. IP immunization resulted in a gradual increase in IgG antibody levels and transitory IgE production. Significant increase in ear thickness was observed in cellular hypersensitivity reaction. In case of antigen exposure by epicutaneous route, CEE was able to induce meaningfully increased levels of specific IgG and IgE antibodies as well as heightened cellular immunity. Both intraperitoneal immunization and epicutaneous contact with Eustrongylides sp. larval antigens were observed for first time to be capable of inducing immunological sensitization in mice.(AU)

Consumir peixe constitui papel importante na dieta humana. Hoplias malabaricus, comumente chamado de traíra, peixe de água doce largamente apreciado no Brasil, é frequentemente infectado com larvas de quarto estágio (L4) de Eustrongylides sp. O presente estudo objetivou avaliar o potencial alergênico do Extrato Bruto de L4 de Eustrongylides sp. (EBE). Camundongos BALB/c foram imunizados intraperitonealmente (IP) por 10 g de EBE com 2 mg de hidróxido de alumínio nos dias 0 e 35. Após imunização, determinaram-se níveis específicos de anticorpos IgG e IgE e avaliou-se a imunidade celular pela reação intradérmica no pavilhão auricular. Realizou-se sensibilização epicutânea na região dorsal pela exposição ao antígeno, utilizando-se câmara tipo Finn, contendo 50 g de CEE ou solução salina. Após exposições, foram avaliados níveis específicos de anticorpos. Na imunização via IP, houve aumento gradual nos níveis de anticorpos IgG e produção de IgE transitória. Foi observado aumento significativo na espessura do pavilhão auricular na reação de hipersensibilidade celular. Na exposição ao antígeno pela via epicutânea, o EBE induziu aumento significante nos níveis de anticorpos IgG e IgE específicos e induziu imunidade celular. Pela primeira vez, observou-se que a imunização intraperitoneal e contato epicutâneo com antígenos larvares de Eustrongylides sp. são capazes de induzir sensibilização imunológica em camundongos.(AU)

Resposta imunológica a antígenos de Hysterothylacium deardorffoverstreetorum de peixes teleósteos / Imunne response against Hysterothylacium deardorffoverestreetorum from teleost fish

Anisaquidose é uma doença provocada por parasitos da família Anisakidae e se caracteriza por manifestações gastrointestinais e alérgicas. O Anisakis simplex é o parasito mais patogênico ao homem e altamente alergênico. Porém, outros anisaquídeos também são danosos aos humanos, mas é desconhecida a imunogenicidade dessas larvas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial imunogênico do parasito Hysterothylacium deardorffoverestreetorum (HD) em modelo murino. Camundongos da linhagem BALB/c foram divididos em três grupos experimentais e receberam as preparações antigênicas obtidas de larvas de HD: extrato bruto de larvas (EBH), extrato secretado/ excretado de larvas (ESH) e extrato bruto de larvas após excreção/secreção (EEH). Amostras séricas foram obtidas em diferentes dias após imunização para determinação dos níveis de anticorpos específicos pelo ensaio imunoenzimático (ELISA). Os resultados demonstram aumento na produção de imunoglobulina (Ig) G após a segunda imunização, com aumento progressivo após a terceira imunização. Já em relação à IgE, a reatividade foi mais tardia, demonstrando aumento progressivo após a terceira imunização. Foi avaliada a imunidade celular por meio da intradermorreação, como resultado estatisticamente significativo em relação ao controle utilizado. Este experimento é a primeira descrição da potencialidade patogênica desse parasito em mamíferos e representa um avanço no diagnóstico da anisaquidose humana.(AU)

Anisaquidosis is a disease caused by parasites of Anisakidae family and is characterized by gastrointestinal and allergic reactions. The Anisakis simplex is a more pathogenic Anisakidae to humans and is highly allergenic. However, other species of this family also have characteristics that are harmful to humans, but little is known about the immunogenicity this parasites. The objective of this study was to experimentally assess the immunogenic potential of the parasite Hysterothylacium deardorffoverestreetorum (H.D) in mice. Mice of inbred BALB/c strain were divided into three groups and received three immunizations of the following antigenic preparations obtained from L3 larvae H.D: Crude larval extract of H.D (CEH) Extract secreted / excreted larvae H.D. (ESH) and crude extract of larvae after excretion / secretion (EEH). Serum samples were obtained on different days after immunization to determine the levels of circulating specific antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The results show increased production of immunoglobulin (Ig) G after the second immunization with a gradual increase after the third immunization. Regarding IgE reactivity, this occurred later, demonstrating a progressive increase only after the third immunization. Cellular immunity was evaluated by intradermal, and showed statistically significant result compared to the control used. This experiment is the first description of the pathogenic potential of this parasite in mammals and represents a breakthrough in the diagnosis of human Anisakidosis.(AU)

Resposta imunológica a antígenos de Hysterothylacium deardorffoverstreetorum de peixes teleósteos / Imunne response against Hysterothylacium deardorffoverestreetorum from teleost fish

Anisaquidose é uma doença provocada por parasitos da família Anisakidae e se caracteriza por manifestações gastrointestinais e alérgicas. O Anisakis simplex é o parasito mais patogênico ao homem e altamente alergênico. Porém, outros anisaquídeos também são danosos aos humanos, mas é desconhecida a imunogenicidade dessas larvas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial imunogênico do parasito Hysterothylacium deardorffoverestreetorum (HD) em modelo murino. Camundongos da linhagem BALB/c foram divididos em três grupos experimentais e receberam as preparações antigênicas obtidas de larvas de HD: extrato bruto de larvas (EBH), extrato secretado/ excretado de larvas (ESH) e extrato bruto de larvas após excreção/secreção (EEH). Amostras séricas foram obtidas em diferentes dias após imunização para determinação dos níveis de anticorpos específicos pelo ensaio imunoenzimático (ELISA). Os resultados demonstram aumento na produção de imunoglobulina (Ig) G após a segunda imunização, com aumento progressivo após a terceira imunização. Já em relação à IgE, a reatividade foi mais tardia, demonstrando aumento progressivo após a terceira imunização. Foi avaliada a imunidade celular por meio da intradermorreação, como resultado estatisticamente significativo em relação ao controle utilizado. Este experimento é a primeira descrição da potencialidade patogênica desse parasito em mamíferos e representa um avanço no diagnóstico da anisaquidose humana.(AU)

Anisaquidosis is a disease caused by parasites of Anisakidae family and is characterized by gastrointestinal and allergic reactions. The Anisakis simplex is a more pathogenic Anisakidae to humans and is highly allergenic. However, other species of this family also have characteristics that are harmful to humans, but little is known about the immunogenicity this parasites. The objective of this study was to experimentally assess the immunogenic potential of the parasite Hysterothylacium deardorffoverestreetorum (H.D) in mice. Mice of inbred BALB/c strain were divided into three groups and received three immunizations of the following antigenic preparations obtained from L3 larvae H.D: Crude larval extract of H.D (CEH) Extract secreted / excreted larvae H.D. (ESH) and crude extract of larvae after excretion / secretion (EEH). Serum samples were obtained on different days after immunization to determine the levels of circulating specific antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The results show increased production of immunoglobulin (Ig) G after the second immunization with a gradual increase after the third immunization. Regarding IgE reactivity, this occurred later, demonstrating a progressive increase only after the third immunization. Cellular immunity was evaluated by intradermal, and showed statistically significant result compared to the control used. This experiment is the first description of the pathogenic potential of this parasite in mammals and represents a breakthrough in the diagnosis of human Anisakidosis.(AU)

Use of cellulose filter and paper filter to reduce the volume of cryoprotectant solution in vitrification of mouse embryos / Uso do filtro de celulose e papel filtro para redução do volume da solução crioprotetora na vitrificação de embriões murinos

The objective of this study was to evaluate the the efficiency of the cellulose filter on the reduction of the cryoprotectant during vitrification of mouse embryos. Twenty female mice, four week old,  were used (C57BL / 6 X BalbC) and superovulated by intraperitoneal injection of 10 IU eCG (Equine Chorionic Gonadotropin - Novo-rmon-SYntex®) followed 48h with 10 IU hCG (Chorionic Gonadotrophin human - Vetecor-HertapeCalier®). The protocol suggested by Vitri-Ingá® was used for vitrification and heating.  During the last step of the protocol, the excess of the cryoprotectant medium was aspirated with glass Pasteur pipette (Group A), with filter paper strips (Group B) and cellulose strips (Group C), and immediately mv immersed in liquid nitrogen. Statistical analysis was  performed using the chi² calculation, evaluating survival rates, cleavage, blastocyst formation and hatching. There was no difference between groups A and B on survival rates, cleavage, blastocyst and hatching. However, there were differences (p<0.05) in  blastocyst rates (80.8%, 60%) and hatching (55.3%, 33.3%)  between group A and group C, respectively. It was concluded that the use of filter paper for the vitrification of embryos in the present study was satisfactory and promising, confirming the importance of the cooling rate for the success of the technique and it has also tried to simplify and improve the implementation of the methodology.

Este estudo teve como objetivo avaliar a eficiência do filtro de celulose e papel filtro na diminuição do volume de crioprotetor na vitrificação de embriões murinos. Foram utilizadas 20 fêmeas de camundongos F1 (C57Bl/6 X BALBc), com 04 semanas de idade, e superovuladas por administração intraperitoneal de 10 IU eCG (Gonadotrofina Coriônica equina Novormon-SYntex®) e após 48h com 10 IU hCG (Gonadotrofina Coriônica humana Vetecor-HertapeCalier®). A vitrificação e aquecimento de todos os grupos seguiu o protocolo estabelecido pelo método Vitri-Ingá®. Na última etapa da técnica, o excesso de meio crioprotetor foi aspirado com pipeta pasteur de vidro estirada (Grupo A), com tiras de papel filtro (Grupo B) e com tiras de celulose (Grupo C), sendo imediatamente imersos em nitrogênio líquido. A análise estatística foi realizada através do cálculo chi², avaliando as taxas de sobrevivência, clivagem, formação de blastocistos e eclosão. Percebeu-se que não houve diferença entre os grupos A e B quanto as taxas de sobrevivência, clivagem, blastocistos e eclosão. Houve diferença (p<0,05) nas taxas de blastocisto (80,8%, 60%) e eclosão (55,3%, 33,3%) entre o grupo A e o grupo C, respectivamente. Ao fim, concluiu-se que a utilização do papel filtro na vitrificação de embriões neste estudo foi satisfatória e promissora, confirmando a importância da velocidade de resfriamento para o sucesso da técnica e ainda buscou simplificar e melhorar a execução da metodologia.

Use of cellulose filter and paper filter to reduce the volume of cryoprotectant solution in vitrification of mouse embryos / Uso do filtro de celulose e papel filtro para redução do volume da solução crioprotetora na vitrificação de embriões murinos

The objective of this study was to evaluate the the efficiency of the cellulose filter on the reduction of the cryoprotectant during vitrification of mouse embryos. Twenty female mice, four week old,  were used (C57BL / 6 X BalbC) and superovulated by intraperitoneal injection of 10 IU eCG (Equine Chorionic Gonadotropin - Novo-rmon-SYntex®) followed 48h with 10 IU hCG (Chorionic Gonadotrophin human - Vetecor-HertapeCalier®). The protocol suggested by Vitri-Ingá® was used for vitrification and heating.  During the last step of the protocol, the excess of the cryoprotectant medium was aspirated with glass Pasteur pipette (Group A), with filter paper strips (Group B) and cellulose strips (Group C), and immediately mv immersed in liquid nitrogen. Statistical analysis was  performed using the chi² calculation, evaluating survival rates, cleavage, blastocyst formation and hatching. There was no difference between groups A and B on survival rates, cleavage, blastocyst and hatching. However, there were differences (p<0.05) in  blastocyst rates (80.8%, 60%) and hatching (55.3%, 33.3%)  between group A and group C, respectively. It was concluded that the use of filter paper for the vitrification of embryos in the present study was satisfactory and promising, confirming the importance of the cooling rate for the success of the technique and it has also tried to simplify and improve the implementation of the methodology.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a eficiência do filtro de celulose e papel filtro na diminuição do volume de crioprotetor na vitrificação de embriões murinos. Foram utilizadas 20 fêmeas de camundongos F1 (C57Bl/6 X BALBc), com 04 semanas de idade, e superovuladas por administração intraperitoneal de 10 IU eCG (Gonadotrofina Coriônica equina Novormon-SYntex®) e após 48h com 10 IU hCG (Gonadotrofina Coriônica humana Vetecor-HertapeCalier®). A vitrificação e aquecimento de todos os grupos seguiu o protocolo estabelecido pelo método Vitri-Ingá®. Na última etapa da técnica, o excesso de meio crioprotetor foi aspirado com pipeta pasteur de vidro estirada (Grupo A), com tiras de papel filtro (Grupo B) e com tiras de celulose (Grupo C), sendo imediatamente imersos em nitrogênio líquido. A análise estatística foi realizada através do cálculo chi², avaliando as taxas de sobrevivência, clivagem, formação de blastocistos e eclosão. Percebeu-se que não houve diferença entre os grupos A e B quanto as taxas de sobrevivência, clivagem, blastocistos e eclosão. Houve diferença (p<0,05) nas taxas de blastocisto (80,8%, 60%) e eclosão (55,3%, 33,3%) entre o grupo A e o grupo C, respectivamente. Ao fim, concluiu-se que a utilização do papel filtro na vitrificação de embriões neste estudo foi satisfatória e promissora, confirmando a importância da velocidade de resfriamento para o sucesso da técnica e ainda buscou simplificar e melhorar a execução da metodologia.(AU)

Avaliação do extrato etanólico de casca de Punica granatum (romã) na diminuição da replicação viral do BoHV-1 Colorado em embriões murinos experimentalmente infectados / Evaluation of ethanol extract of Punica granatum (Pomegranate) peel decrease in viral replication of BoHV-1 in Colorado murine embryos experimentally infected

O objetivo do trabalho foi avaliar a diminuição da replicação viral (BoHV-1 Colorado) em embriões murinos após tratamento do extrato etanólico da casca de Punica granatum (EEPg). Camundongos fêmeas Swiss com idade entre 6 e 8 semanas foram superovuladas com 0,2 mL a 5 UI de hormônios (eCG e hCG), e acasaladas com machos da mesma idade. Após 18 horas, as fêmeas sofreram eutanásia em câmara de CO2 e, através de abertura no peritônio, os zigotos foram coletados e lavados com solução de pronase 0,5%.Os zigotos foram divididos em quatro grupos: G1 (controle), G2 (expostos aos vírus BoHV-1 Colorado a 108 TCID50/mL), G3 (expostos ao EEPg) e G4 (expostos aos vírus e ao EEPg). Os grupos foram mantidos a 37,5ºC em meio TCM199 (100µL) com 10% de soro fetal bovino em estufa a 5% de CO2 e 95% de umidade. Após 24 h, analisamos a taxa de clivagem (teste exato de Fisher; p<0,05), a morfologia (por microscopia óptica), a nested-PCR e a titulação dos embriões em cocultura com células MDBK após mais 72 h do tratamento (teste de Mann-Whitney; p<0,05) e microscopia eletrônica de transmissão (ME). Os embriões murinos tratados com EEPg apresentaram resultados satisfatórios: sem alterações morfológicas, taxa de clivagem semelhante ao controle e, apesar da detecção da presença do vírus pela nested-PCR e ME, houve diminuição do título viral após tratamentos com esse extrato, o que sugere interferência desse tratamento no ciclo viral do BoHV-1 Colorado sem alterar o desenvolvimento dos embriões.(AU)

The aim of this study was to evaluate the reduction of viral replication (Colorado BoHV-1) in murine embryos after the treatment of ethanol extract of Punica granatum peel (PgEE). Swiss female mice aged 6 to 8 weeks were superovulated with 0.2 mL of the 5 UI hormones (eCG and hCG) and mated with males of the same age. After 18 hours, the females were euthanized in a CO2 chamber, and through the opening in the peritoneum, zygotes were collected and washed with 0.5% pronase solution. The zygotes were divided into four groups: G1 (control), G2 (exposed to the virus Colorado BoHV -1 to 108 TCID50/mL), G3 (exposed to PgEE) and G4 (exposed to the virus and to PgEE). The groups were maintained at 37.5ºC in TCM199 (100 mL) with 10% fetal bovine serum in an incubator at 5% CO2 and 95% humidity. After 24 h, we analyzed the cleavage rate (Fisher's exact test; p<0.05), the morphology (by light microscopy), the nested-PCR and the titration of embryos in co-culture with MDBK cells after over 72 h of treatment (Mann-Whitney test; p<0.05) and transmission electron microscopy (TEM). The murine embryos treated with PgEE showed satisfactory results: no morphological changes, cleavage rate similar to controls, despite the detection of the presence of virus by nested PCR and TEM, there was a decrease of the viral titer after the treatment with this extract, which suggests interference of this treatment in the viral cycle BoHV-1 Colorado without altering the embryo development.(AU)

Cultivo in vitro de folículos pré-antrais: principais substâncias reguladoras, vias de sinalização e avanços nas espécies murina, bovina, ovina e caprina / In vitro culture of preantral follicles: main regulatory factors, signaling pathways and advances in murine, bovine, ovine and caprine

A regulação da foliculogênese é um processo complexo regulado por vários fatores intra e extraovarianos. A resposta das células ovarianas ao estímulo produzido por esses fatores depende da transdução de sinais no interior das células através de várias vias de sinalização. A interação entre as diversas vias de sinalização celular e a descoberta constante de novas vias demonstram a complexidade desse processo. A presente revisão se propõe a descrever os principais fatores reguladores da foliculogênese, seus receptores e as vias de sinalização celular destacando pontos de interação entre elas. Em adição, uma análise crítica dos principais resultados obtidos com o cultivo in vitro de folículos ovarianos murinos, bovinos, caprinos e ovinos levando-se em consideração as substâncias presentes nos meios de cultivo utilizados e as prováveis vias de sinalização celular empregadas é apresentada na presente revisão.

Folliculogenesis is regulated by a complex process, which involves several intra- and extraovarian factors. The response of the ovarian cells to those factors depends on the signal transduction inside the cells through several signaling pathways. The interaction of different signaling pathways and discovery of new pathways demonstrate the complexity of folliculogenesis. Therefore, this review will highlight the main regulatory factors that control folliculogenesis, their receptors and sharing signaling pathways. Moreover, a critical analysis about the main results from in vitro follicle culture studies in murine, bovine, caprine, and ovine, focusing on the medium supplements and the interactions of their signaling pathways will be presented.

Evaluation of ethanol extract of Punica granatum (Pomegranate) peel decrease in viral replication of BoHV-1 in Colorado murine embryos experimentally infected / Avaliação do extrato etanólico de casca de Punica granatum (romã) na diminuição da replicação viral do BoHV-1 Colorado em embriões murinos experimentalmente infectados

The aim of this study was to evaluate the reduction of viral replication (Colorado BoHV-1) in murine embryos after the treatment of ethanol extract of Punica granatum peel (PgEE). Swiss female mice aged 6 to 8 weeks were superovulated with 0.2 mL of the 5 UI hormones (eCG and hCG) and mated with males of the same age. After 18 hours, the females were euthanized in a CO2 chamber, and through the opening in the peritoneum, zygotes were collected and washed with 0.5% pronase solution. The zygotes were divided into four groups: G1 (control), G2 (exposed to the virus Colorado BoHV -1 to 108 TCID50/mL), G3 (exposed to PgEE) and G4 (exposed to the virus and to PgEE). The groups were maintained at 37.5ºC in TCM199 (100 mL) with 10% fetal bovine serum in an incubator at 5% CO2 and 95% humidity. After 24 h, we analyzed the cleavage rate (Fishers exact test; p 0.05), the morphology (by light microscopy), the nestedPCR and the titration of embryos in co-culture with MDBK cells after over 72 h of treatment (Mann-Whitney test; p 0.05) and transmission electron microscopy (TEM). The murine embryos treated with PgEE showed satisfactory results: no morphological changes, cleavage rate similar to controls, despite the detection of the presence of virus by nested PCR and TEM, there was a decrease of the viral titer after the treatment with this extract, which suggests  interference of this treatment in the viral cycle BoHV-1 Colorado without altering the embryo development.

O objetivo do trabalho foi avaliar a diminuição da replicação viral (BoHV-1 Colorado) em embriões murinos após tratamento do extrato etanólico da casca de Punica granatum (EEPg). Camundongos fêmeas Swiss com idade entre 6 e 8 semanas foram superovuladas com 0,2 mL a 5 UI de hormônios (eCG e hCG), e acasaladas com machos da mesma idade. Após 18 horas, as fêmeas sofreram eutanásia em câmara de CO2 e, através de abertura no peritônio, os zigotos foram coletados e lavados com solução de pronase 0,5%. Os zigotos foram divididos em quatro grupos: G1 (controle), G2 (expostos aos vírus BoHV-1 Colorado a 108  TCID50/mL), G3 (expostos ao EEPg) e G4 (expostos aos vírus e ao EEPg). Os grupos foram mantidos a 37,5ºC em meio TCM199 (100µL) com 10% de soro fetal bovino em estufa a 5% de CO2 e 95% de umidade. Após 24 h, analisamos a taxa de clivagem (teste exato de Fisher; p 0,05), a morfologia (por microscopia óptica), a nested-PCR e a titulação dos embriões em cocultura com células MDBK após mais 72 h do tratamento (teste de Mann-Whitney; p 0,05) e microscopia eletrô- nica de transmissão (ME). Os embriões murinos tratados com EEPg apresentaram resultados satisfatórios: sem alterações morfológicas, taxa de clivagem semelhante ao controle e, apesar da detecção da presença do vírus pela nested-PCR e ME, houve diminuição do título viral após tratamentos com esse extrato, o que sugere interferência desse tratamento no ciclo viral do BoHV-1 Colorado sem alterar o desenvolvimento dos embriões.

Evaluation of ethanol extract of Punica granatum (Pomegranate) peel decrease in viral replication of BoHV-1 in Colorado murine embryos experimentally infected / Avaliação do extrato etanólico de casca de Punica granatum (romã) na diminuição da replicação viral do BoHV-1 Colorado em embriões murinos experimentalmente infectados

The aim of this study was to evaluate the reduction of viral replication (Colorado BoHV-1) in murine embryos after the treatment of ethanol extract of Punica granatum peel (PgEE). Swiss female mice aged 6 to 8 weeks were superovulated with 0.2 mL of the 5 UI hormones (eCG and hCG) and mated with males of the same age. After 18 hours, the females were euthanized in a CO2 chamber, and through the opening in the peritoneum, zygotes were collected and washed with 0.5% pronase solution. The zygotes were divided into four groups: G1 (control), G2 (exposed to the virus Colorado BoHV -1 to 108 TCID50/mL), G3 (exposed to PgEE) and G4 (exposed to the virus and to PgEE). The groups were maintained at 37.5ºC in TCM199 (100 mL) with 10% fetal bovine serum in an incubator at 5% CO2 and 95% humidity. After 24 h, we analyzed the cleavage rate (Fishers exact test; p 0.05), the morphology (by light microscopy), the nestedPCR and the titration of embryos in co-culture with MDBK cells after over 72 h of treatment (Mann-Whitney test; p 0.05) and transmission electron microscopy (TEM). The murine embryos treated with PgEE showed satisfactory results: no morphological changes, cleavage rate similar to controls, despite the detection of the presence of virus by nested PCR and TEM, there was a decrease of the viral titer after the treatment with this extract, which suggests  interference of this treatment in the viral cycle BoHV-1 Colorado without altering the embryo development.(AU)

O objetivo do trabalho foi avaliar a diminuição da replicação viral (BoHV-1 Colorado) em embriões murinos após tratamento do extrato etanólico da casca de Punica granatum (EEPg). Camundongos fêmeas Swiss com idade entre 6 e 8 semanas foram superovuladas com 0,2 mL a 5 UI de hormônios (eCG e hCG), e acasaladas com machos da mesma idade. Após 18 horas, as fêmeas sofreram eutanásia em câmara de CO2 e, através de abertura no peritônio, os zigotos foram coletados e lavados com solução de pronase 0,5%. Os zigotos foram divididos em quatro grupos: G1 (controle), G2 (expostos aos vírus BoHV-1 Colorado a 108  TCID50/mL), G3 (expostos ao EEPg) e G4 (expostos aos vírus e ao EEPg). Os grupos foram mantidos a 37,5ºC em meio TCM199 (100µL) com 10% de soro fetal bovino em estufa a 5% de CO2 e 95% de umidade. Após 24 h, analisamos a taxa de clivagem (teste exato de Fisher; p 0,05), a morfologia (por microscopia óptica), a nested-PCR e a titulação dos embriões em cocultura com células MDBK após mais 72 h do tratamento (teste de Mann-Whitney; p 0,05) e microscopia eletrô- nica de transmissão (ME). Os embriões murinos tratados com EEPg apresentaram resultados satisfatórios: sem alterações morfológicas, taxa de clivagem semelhante ao controle e, apesar da detecção da presença do vírus pela nested-PCR e ME, houve diminuição do título viral após tratamentos com esse extrato, o que sugere interferência desse tratamento no ciclo viral do BoHV-1 Colorado sem alterar o desenvolvimento dos embriões.(AU)

Cultivo in vitro de folículos pré-antrais: principais substâncias reguladoras, vias de sinalização e avanços nas espécies murina, bovina, ovina e caprina / In vitro culture of preantral follicles: main regulatory factors, signaling pathways and advances in murine, bovine, ovine and caprine

A regulação da foliculogênese é um processo complexo regulado por vários fatores intra e extraovarianos. A resposta das células ovarianas ao estímulo produzido por esses fatores depende da transdução de sinais no interior das células através de várias vias de sinalização. A interação entre as diversas vias de sinalização celular e a descoberta constante de novas vias demonstram a complexidade desse processo. A presente revisão se propõe a descrever os principais fatores reguladores da foliculogênese, seus receptores e as vias de sinalização celular destacando pontos de interação entre elas. Em adição, uma análise crítica dos principais resultados obtidos com o cultivo in vitro de folículos ovarianos murinos, bovinos, caprinos e ovinos levando-se em consideração as substâncias presentes nos meios de cultivo utilizados e as prováveis vias de sinalização celular empregadas é apresentada na presente revisão.(AU)

Folliculogenesis is regulated by a complex process, which involves several intra- and extraovarian factors. The response of the ovarian cells to those factors depends on the signal transduction inside the cells through several signaling pathways. The interaction of different signaling pathways and discovery of new pathways demonstrate the complexity of folliculogenesis. Therefore, this review will highlight the main regulatory factors that control folliculogenesis, their receptors and sharing signaling pathways. Moreover, a critical analysis about the main results from in vitro follicle culture studies in murine, bovine, caprine, and ovine, focusing on the medium supplements and the interactions of their signaling pathways will be presented. (AU)

Morphological and Immunophenotipical Characterization of Murine Mammary Carcinoma 4t1

The 4T1 murine mammary carcinoma is an experimental model widely used in assessing and better understanding of tumor biology. It is a highly tumorigenic cell line and invasive, where metastases are observed in various organs. This study aims to describe morphological and immunophenotipical aspects of 4T1 mammary carcinoma in mice Balb/c with the aid of the immunohistochemistry. Tissues were fixed in formalin and processed using the routine paraffin inclusion technique. Histologic sections (4 m) were stained through Hematoxylin-Eosin techniques for morphologic assessments. For immunohistochemical study, we used a panel of 9 (nine) antibodies: hormone receptors, receptors for cell proliferation, cytokeratins, vimentin, growth factor receptor and markers of blood vessels. Morphologically, the 4T1 murine mammary carcinoma shows malignant epithelial proliferation in solid arrangement, with pleomorphic cells and high mitotic index. In immunohistochemical analysis was determined a positivity for hormone receptors, cytokeratin AE1/AE3, receptors of cell proliferation and markers of blood vessels. There was a negative for vimentin, cytokeratin 5/6, cytokeratin 34E12 and growth factor receptor.The results show that the characteristics observed in this model are similar to some types of breast cancers found in women like poorly differentiated invasive ductal carcinoma. Thus, the immunophenotypic characterizationof mammary carcinoma 4T1 allows a better understanding of the model to the study of new anticancer therapies.

Morphological and Immunophenotipical Characterization of Murine Mammary Carcinoma 4t1

The 4T1 murine mammary carcinoma is an experimental model widely used in assessing and better understanding of tumor biology. It is a highly tumorigenic cell line and invasive, where metastases are observed in various organs. This study aims to describe morphological and immunophenotipical aspects of 4T1 mammary carcinoma in mice Balb/c with the aid of the immunohistochemistry. Tissues were fixed in formalin and processed using the routine paraffin inclusion technique. Histologic sections (4 m) were stained through Hematoxylin-Eosin techniques for morphologic assessments. For immunohistochemical study, we used a panel of 9 (nine) antibodies: hormone receptors, receptors for cell proliferation, cytokeratins, vimentin, growth factor receptor and markers of blood vessels. Morphologically, the 4T1 murine mammary carcinoma shows malignant epithelial proliferation in solid arrangement, with pleomorphic cells and high mitotic index. In immunohistochemical analysis was determined a positivity for hormone receptors, cytokeratin AE1/AE3, receptors of cell proliferation and markers of blood vessels. There was a negative for vimentin, cytokeratin 5/6, cytokeratin 34E12 and growth factor receptor.The results show that the characteristics observed in this model are similar to some types of breast cancers found in women like poorly differentiated invasive ductal carcinoma. Thus, the immunophenotypic characterizationof mammary carcinoma 4T1 allows a better understanding of the model to the study of new anticancer therapies.(AU)

Caracterização da dominância e subordinação na estrutura hierárquica de camundongos Swiss Webster em biotério / Characterization of dominant and subordinate social status and the structure of the social hierarchy in Swiss Webster mice

Os camundongos utilizados em biotérios pertencem à família Muridae, subfamília Murinae, ordem Rodentia, gênero Mus e espécie Mus musculus. São animais sociais e territoriais. Diversas linhagens foram desenvolvidas em laboratório porém apresentam comportamento agressivo semelhante ao de camundongos selvagens. O objetivo deste estudo foi caracterizar a estrutura hierárquica, características corporais e os níveis de hormônios em camundongos dominantes, subordinadas e não-agressivos. O modelo de avaliação do padrão de comportamento agressivo (PCA) classificou os animais da seguinte forma: LAg - indivíduos com comportamento agressivo baixo, HAg - dominante (altamente agressivo) e Sb - subordinado. O reagrupamento de camundongos macho adulto promove um efeito estressor considerável e influencia a formação de sua estrutura hierárquica. Comparações comportamentais antes (BfR) e após reagrupamento mostrou que o percentual de peso perdido por animais nas categorias especificadas foram as seguintes: Lag - 68,1% , HAg - 86,9% e Sb - 90,5% ; os níveis médios de corticosterona por categoria foram BfR : 43,5 ± 17,5, LAg: 177,0 ± 40,4, Hag: 72,8±23,8 e Sb: 136,4±51,2 ng/mL. Camundongos dominantes apresentaram diferenças nas características do corpo (principalmente a relação corpo/ cauda) em relação aos indivíduos subordinados. Também foram observadas duas posições hierárquicas adicionais: “indivíduo neutro” (sem comportamento agressivo) e “subordinado alvo”.

The mice used in animal facilities belong to the family Muridae, subfamily Murinae, order Rodentia, genus Mus and species Mus musculus. They are social and territorial animals. Several lineages developed in the laboratory show aggressive behavior similar to that of wild mice. The aim of this study was characterize the hierarchical structure, body characteristics and hormonal levels in dominant, subordinate and non-aggressive mice. The model established for spontaneous aggression (MSA) evaluates the pattern of aggressive behavior (PBA) and categorizes the animals as follows: LAg - individuals with low aggressive behavior, HAg – dominant (highly aggressive) and Sb - subordinate. The regrouping of adult male mice produces substantial stress and influences the formation of their hierarchical structure. Behavioral comparisons before regrouping (BfR) and after regrouping showed that the percentage of body weight lost in mice was dependent of the specific categories as follows: LAg - 68.1%, HAg - 86.9% and Sb - 90.5%; the average corticosterone levels by category were BfR: 43.5±17.5, LAg: 177.0±40.4, HAg: 72.8±23.8 and Sb: 136.4±51.2 ng/mL. Dominant mice showed differences in body characteristics (primarily the body/tail relationship) relative to subordinate mice. Two additional hierarchical positions were observed: “neutral individual” (without aggressive behavior) and “subordinate target” (an animal that receives approximately 30% of the total number of attacks made by dominant animals).

Caracterização da dominância e subordinação na estrutura hierárquica de camundongos Swiss Webster em biotério / Characterization of dominant and subordinate social status and the structure of the social hierarchy in Swiss Webster mice

Os camundongos utilizados em biotérios pertencem à família Muridae, subfamília Murinae, ordem Rodentia, gênero Mus e espécie Mus musculus. São animais sociais e territoriais. Diversas linhagens foram desenvolvidas em laboratório porém apresentam comportamento agressivo semelhante ao de camundongos selvagens. O objetivo deste estudo foi caracterizar a estrutura hierárquica, características corporais e os níveis de hormônios em camundongos dominantes, subordinadas e não-agressivos. O modelo de avaliação do padrão de comportamento agressivo (PCA) classificou os animais da seguinte forma: LAg - indivíduos com comportamento agressivo baixo, HAg - dominante (altamente agressivo) e Sb - subordinado. O reagrupamento de camundongos macho adulto promove um efeito estressor considerável e influencia a formação de sua estrutura hierárquica. Comparações comportamentais antes (BfR) e após reagrupamento mostrou que o percentual de peso perdido por animais nas categorias especificadas foram as seguintes: Lag - 68,1% , HAg - 86,9% e Sb - 90,5% ; os níveis médios de corticosterona por categoria foram BfR : 43,5 ± 17,5, LAg: 177,0 ± 40,4, Hag: 72,8±23,8 e Sb: 136,4±51,2 ng/mL. Camundongos dominantes apresentaram diferenças nas características do corpo (principalmente a relação corpo/ cauda) em relação aos indivíduos subordinados. Também foram observadas duas posições hierárquicas adicionais: “indivíduo neutro” (sem comportamento agressivo) e “subordinado alvo”. (AU)

The mice used in animal facilities belong to the family Muridae, subfamily Murinae, order Rodentia, genus Mus and species Mus musculus. They are social and territorial animals. Several lineages developed in the laboratory show aggressive behavior similar to that of wild mice. The aim of this study was characterize the hierarchical structure, body characteristics and hormonal levels in dominant, subordinate and non-aggressive mice. The model established for spontaneous aggression (MSA) evaluates the pattern of aggressive behavior (PBA) and categorizes the animals as follows: LAg - individuals with low aggressive behavior, HAg dominant (highly aggressive) and Sb - subordinate. The regrouping of adult male mice produces substantial stress and influences the formation of their hierarchical structure. Behavioral comparisons before regrouping (BfR) and after regrouping showed that the percentage of body weight lost in mice was dependent of the specific categories as follows: LAg - 68.1%, HAg - 86.9% and Sb - 90.5%; the average corticosterone levels by category were BfR: 43.5±17.5, LAg: 177.0±40.4, HAg: 72.8±23.8 and Sb: 136.4±51.2 ng/mL. Dominant mice showed differences in body characteristics (primarily the body/tail relationship) relative to subordinate mice. Two additional hierarchical positions were observed: “neutral individual” (without aggressive behavior) and “subordinate target” (an animal that receives approximately 30% of the total number of attacks made by dominant animals). (AU)