Miliary tuberculosis in catlle in Sergipe State, Brazil / Tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe

O objetivo deste trabalho é relatar o primeiro caso de tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe, seus achados clínicos e patológicos. Um bovino, fêmea, com histórico de que há dez dias apresentava emagrecimento progressivo e no oitavo dia de evolução clínica começou a apresentar incoordenação e anorexia. No exame clínico do sistema nervoso foi observado desvio lateral da cabeça, déficit proprioceptivo com dismetria, ataxia, redução do tônus lingual, flacidez de mandíbula, ausência do reflexo de deglutição e compressão da cabeça contra objeto. Macroscopicamente foram observados múltiplos nódulos nos pulmões, diafragma, linfonodos mediastínicos, glândula mamária, encéfalo e medula espinhal, amarelados, de tamanhos variados e consistência firme que, ao corte, apresentavam conteúdo amarelado pastoso com aspecto arenoso. O coração continha abundante líquido serosanguinolento no saco pericárdico, com presença de fibrina livre no líquido e aderida ao epicárdio. Histologicamente, as lesões nodulares caracterizavam-se pela formação de lesão granulomatosa caracterizada por uma área central de necrose, rodeada por macrófagos epitelióides, poucos linfócitos e abundantes células gigantes multinucleadas do tipo Langhans, exibindo áreas multifocais de calcificação caracterizando o quadro de tuberculose miliar, confirmado com a coloração de Ziehl Neelsen. A tuberculose miliar deve ser considerada no diagnóstico diferencial de enfermidades que acometem o sistema nervoso em bovinos oriundos de rebanhos com elevados índices de animais positivos para tuberculose, reforçando a importância do inquérito a respeito da prevalência desta enfermidade.

The objective of this work is to report the first case of miliary tuberculosis in cattle in the state of Sergipe, Brazil, with its clinical and pathological findings. A female bovine with a ten-day history had progressive weight loss and on the eighth day of clinical evolution showed incoordination and anorexia. The clinical examination of the nervous system indicated lateral deviation of the head, proprioceptive deficit with dysmetria, ataxia, reduced lingual tone, flaccidity of the jaw, absence of the swallowing reflex and compression of the head against an object. After euthanasia, multiple nodules were observed in the lungs, diaphragm, mediastinal lymph nodes, mammary glands, brain and spinal cord. Yellowish of varying sizes and firm consistency were observed at the macroscopic level and when cut, had a pasty yellowish content with a sandy aspect. The heart contained abundant serosanguinous fluid in the pericardial sac, with the presence of free fibrin in the liquid and adhered to the epicardium. In the histological analysis, the nodular lesions were characterized by the formation of granulomatous lesions with a distinctive central area of necrosis, surrounded by epithelioid macrophages, few lymphocytes and abundant giant multinucleated cells of the Langhans type, showing multifocal areas of calcification characterizing miliary tuberculosis, confirmed with the Ziehl Neelsen stain. Miliary tuberculosis must be considered in the differential diagnosis of diseases that affect the nervous system in cattle from herds with high levels of animals positive for tuberculosis, reinforcing the importance of the investigation regarding the prevalence of this disease.

Miliary tuberculosis in catlle in Sergipe State, Brazil / Tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe

O objetivo deste trabalho é relatar o primeiro caso de tuberculose miliar em bovino no estado de Sergipe, seus achados clínicos e patológicos. Um bovino, fêmea, com histórico de que há dez dias apresentava emagrecimento progressivo e no oitavo dia de evolução clínica começou a apresentar incoordenação e anorexia. No exame clínico do sistema nervoso foi observado desvio lateral da cabeça, déficit proprioceptivo com dismetria, ataxia, redução do tônus lingual, flacidez de mandíbula, ausência do reflexo de deglutição e compressão da cabeça contra objeto. Macroscopicamente foram observados múltiplos nódulos nos pulmões, diafragma, linfonodos mediastínicos, glândula mamária, encéfalo e medula espinhal, amarelados, de tamanhos variados e consistência firme que, ao corte, apresentavam conteúdo amarelado pastoso com aspecto arenoso. O coração continha abundante líquido serosanguinolento no saco pericárdico, com presença de fibrina livre no líquido e aderida ao epicárdio. Histologicamente, as lesões nodulares caracterizavam-se pela formação de lesão granulomatosa caracterizada por uma área central de necrose, rodeada por macrófagos epitelióides, poucos linfócitos e abundantes células gigantes multinucleadas do tipo Langhans, exibindo áreas multifocais de calcificação caracterizando o quadro de tuberculose miliar, confirmado com a coloração de Ziehl Neelsen. A tuberculose miliar deve ser considerada no diagnóstico diferencial de enfermidades que acometem o sistema nervoso em bovinos oriundos de rebanhos com elevados índices de animais positivos para tuberculose, reforçando a importância do inquérito a respeito da prevalência desta enfermidade.(AU)

The objective of this work is to report the first case of miliary tuberculosis in cattle in the state of Sergipe, Brazil, with its clinical and pathological findings. A female bovine with a ten-day history had progressive weight loss and on the eighth day of clinical evolution showed incoordination and anorexia. The clinical examination of the nervous system indicated lateral deviation of the head, proprioceptive deficit with dysmetria, ataxia, reduced lingual tone, flaccidity of the jaw, absence of the swallowing reflex and compression of the head against an object. After euthanasia, multiple nodules were observed in the lungs, diaphragm, mediastinal lymph nodes, mammary glands, brain and spinal cord. Yellowish of varying sizes and firm consistency were observed at the macroscopic level and when cut, had a pasty yellowish content with a sandy aspect. The heart contained abundant serosanguinous fluid in the pericardial sac, with the presence of free fibrin in the liquid and adhered to the epicardium. In the histological analysis, the nodular lesions were characterized by the formation of granulomatous lesions with a distinctive central area of necrosis, surrounded by epithelioid macrophages, few lymphocytes and abundant giant multinucleated cells of the Langhans type, showing multifocal areas of calcification characterizing miliary tuberculosis, confirmed with the Ziehl Neelsen stain. Miliary tuberculosis must be considered in the differential diagnosis of diseases that affect the nervous system in cattle from herds with high levels of animals positive for tuberculosis, reinforcing the importance of the investigation regarding the prevalence of this disease.(AU)

Spatial and temporal analyses of culls due to bovine tuberculosis in slaughterhouses of Minas Gerais state, Brazil, 2008 to 2012 / Análise espacial e temporal das condenações por tuberculose bovina em frigoríficos do estado de Minas Gerais, Brasil, 2008 a 2012

The application of spatial and temporal analysis in epidemiology aims to understand the causes and consequences of spatial and temporal heterogeneity in studies of infectious diseases. Bovine tuberculosis (bTB) is a chronic and progressive infectious disease caused by Mycobacterium bovis and is an important zoonosis worldwide. The aim of this study was to conduct spatial and temporal analyses of a secondary database of bTB-positive cases registered by the Federal Inspection Service in two slaughterhouses from the West of Minas mesoregion of Minas Gerais state, Brazil, from 2008 to 2012 and to suggest its use in epidemiological surveillance. The culled cattle with bTB macroscopic lesions during post mortem inspection were considered positive in this study. The data used were the positive cases registered on the "Sistema de Informações Gerenciais do Serviço de Inspeção Federal" (SIG/SIF - Management Information System of the Federal Inspection Service) of the "Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento" (MAPA - Ministry of Agriculture, Livestock and Supplies), the number of animals slaughtered monthly and their municipalities of origin, per slaughterhouse. The prevalence (%) of cases per cattle slaughtered was calculated, and the relationship between these cases of bTB and cases of human tuberculosis (hTB) and the GDP per capita of the mesoregions comprising the municipalities surveyed was evaluated. The prevalence was 1,030 cases of bTB (0.28%). The lowest case numbers and prevalence rates were obtained in 2010, while the highest rates were observed in 2011. Slaughterhouse 1 showed stationarity, while Slaughterhouse 2 showed an increasing annual trend for data since October 2009. A statistical correlation between the numbers of cases of bovine and human TB (p=0.006, r=0.148) was observed. The prevalence for Slaughterhouses 1 and 2 were not correlated (p>0.05). The municipalities of origin demonstrated randomness in their spatial distribution. SIG/SIF-MAPA may be used for the analysis of spatial and temporal distribution to contribute to the monitoring of animal health services with information on the prevalence of culling for bTB in the West of Minas, South/Southwest of Minas, Campo das Vertentes and Zona da Mata mesoregions of Minas Gerais, Brazil.(AU)

A aplicação de análises espacial e temporal em epidemiologia visa compreender as causas e consequências da heterogeneidade espacial e temporal nos estudos de doenças infecciosas. A tuberculose bovina (TBb) é uma doença infecciosa crônica e progressiva causada pelo Mycobacterium bovis e uma importante zoonose em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi realizar análises espaciais e temporais em um banco de dados secundário de casos positivos de TBb registrados pelo Serviço de Inspeção Federal em dois frigoríficos da mesorregião Oeste de Minas, estado de Minas Gerais, Brasil, de 2008 a 2012 e sugerir sua utilização na vigilância epidemiológica. Os bovinos abatidos com lesões macroscópicas de TBb durante a inspeção post mortem foram considerados positivos neste estudo. Os dados utilizados foram os casos positivos cadastrados no Sistema de Informações Gerenciais do Serviço de Inspeção Federal do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (SIGSIF/MAPA), o número de animais abatidos mensalmente e seus municípios de origem, por frigorífico. Foi calculada a prevalência (%) de casos por bovinos abatidos e avaliada a relação entre esses casos de TBb e os casos de tuberculose humana (TBh) e o PIB per capita das mesorregiões que compõem os municípios pesquisados. A prevalência foi de 1.030 casos de TBb (0,28%). Os menores números de casos e prevalências foram obtidos em 2010, enquanto as maiores prevalências foram observadas em 2011. O Frigorífico 1 apresentou estacionariedade, enquanto o Frigorífico 2 apresentou tendência anual crescente para os dados desde outubro de 2009. Correlação estatística entre o número de casos de TBb e TBh (p=0,006, r=0,148) foi observada. As prevalências nos Frigoríficos 1 e 2 não se correlacionaram (p>0,05). Os municípios de origem demonstraram aleatoriedade em sua distribuição espacial. O SIGSIF/MAPA pode ser utilizado para a análise da distribuição espacial e temporal a fim de contribuir com o monitoramento dos serviços de saúde animal com informações sobre a prevalência de condenações por TBb nas mesorregiões Oeste de Minas, Sul/Sudoeste de Minas, Campo das Vertentes e Zona da Mata de Minas Gerais, Brasil.(AU)

Spatial and temporal analyses of culls due to bovine tuberculosis in slaughterhouses of Minas Gerais state, Brazil, 2008 to 2012 / Análise espacial e temporal das condenações por tuberculose bovina em frigoríficos do estado de Minas Gerais, Brasil, 2008 a 2012

The application of spatial and temporal analysis in epidemiology aims to understand the causes and consequences of spatial and temporal heterogeneity in studies of infectious diseases. Bovine tuberculosis (bTB) is a chronic and progressive infectious disease caused by Mycobacterium bovis and is an important zoonosis worldwide. The aim of this study was to conduct spatial and temporal analyses of a secondary database of bTB-positive cases registered by the Federal Inspection Service in two slaughterhouses from the West of Minas mesoregion of Minas Gerais state, Brazil, from 2008 to 2012 and to suggest its use in epidemiological surveillance. The culled cattle with bTB macroscopic lesions during post mortem inspection were considered positive in this study. The data used were the positive cases registered on the "Sistema de Informações Gerenciais do Serviço de Inspeção Federal" (SIG/SIF - Management Information System of the Federal Inspection Service) of the "Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento" (MAPA - Ministry of Agriculture, Livestock and Supplies), the number of animals slaughtered monthly and their municipalities of origin, per slaughterhouse. The prevalence (%) of cases per cattle slaughtered was calculated, and the relationship between these cases of bTB and cases of human tuberculosis (hTB) and the GDP per capita of the mesoregions comprising the municipalities surveyed was evaluated. The prevalence was 1,030 cases of bTB (0.28%). The lowest case numbers and prevalence rates were obtained in 2010, while the highest rates were observed in 2011. Slaughterhouse 1 showed stationarity, while Slaughterhouse 2 showed an increasing annual trend for data since October 2009. A statistical correlation between the numbers of cases of bovine and human TB (p=0.006, r=0.148) was observed. The prevalence for Slaughterhouses 1 and 2 were not correlated (p>0.05). The municipalities of origin demonstrated randomness in their spatial distribution. SIG/SIF-MAPA may be used for the analysis of spatial and temporal distribution to contribute to the monitoring of animal health services with information on the prevalence of culling for bTB in the West of Minas, South/Southwest of Minas, Campo das Vertentes and Zona da Mata mesoregions of Minas Gerais, Brazil.(AU)

A aplicação de análises espacial e temporal em epidemiologia visa compreender as causas e consequências da heterogeneidade espacial e temporal nos estudos de doenças infecciosas. A tuberculose bovina (TBb) é uma doença infecciosa crônica e progressiva causada pelo Mycobacterium bovis e uma importante zoonose em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi realizar análises espaciais e temporais em um banco de dados secundário de casos positivos de TBb registrados pelo Serviço de Inspeção Federal em dois frigoríficos da mesorregião Oeste de Minas, estado de Minas Gerais, Brasil, de 2008 a 2012 e sugerir sua utilização na vigilância epidemiológica. Os bovinos abatidos com lesões macroscópicas de TBb durante a inspeção post mortem foram considerados positivos neste estudo. Os dados utilizados foram os casos positivos cadastrados no Sistema de Informações Gerenciais do Serviço de Inspeção Federal do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (SIGSIF/MAPA), o número de animais abatidos mensalmente e seus municípios de origem, por frigorífico. Foi calculada a prevalência (%) de casos por bovinos abatidos e avaliada a relação entre esses casos de TBb e os casos de tuberculose humana (TBh) e o PIB per capita das mesorregiões que compõem os municípios pesquisados. A prevalência foi de 1.030 casos de TBb (0,28%). Os menores números de casos e prevalências foram obtidos em 2010, enquanto as maiores prevalências foram observadas em 2011. O Frigorífico 1 apresentou estacionariedade, enquanto o Frigorífico 2 apresentou tendência anual crescente para os dados desde outubro de 2009. Correlação estatística entre o número de casos de TBb e TBh (p=0,006, r=0,148) foi observada. As prevalências nos Frigoríficos 1 e 2 não se correlacionaram (p>0,05). Os municípios de origem demonstraram aleatoriedade em sua distribuição espacial. O SIGSIF/MAPA pode ser utilizado para a análise da distribuição espacial e temporal a fim de contribuir com o monitoramento dos serviços de saúde animal com informações sobre a prevalência de condenações por TBb nas mesorregiões Oeste de Minas, Sul/Sudoeste de Minas, Campo das Vertentes e Zona da Mata de Minas Gerais, Brasil.(AU)

Tuberculose bovina: diagnóstico ante mortem e post mortem em bovinos leiteiros através da associação de análises / Bovine tuberculosis: diagnosis ante mortem and post mortem in dairy cattle through analysis association

Este estudo descreve o emprego de quatro métodos diagnósticos para a confirmação de casos de tuberculose em bovinos. Para tanto foram avaliados 211 bovinos leiteiros, dos quais 35,1% apresentaram reatividade no teste tuberculínico cervical comparativo, e 143 animais foram encaminhados para abate sanitário. No acompanhamento do abate e inspeção sanitária verificou-se que 51,8% dos bovinos apresentavam lesões visíveis compatíveis com tuberculose. Também foram coletados fragmentos teciduais de bovinos com e sem lesões macroscópicas, os quais na análise histológica apresentaram numerosas áreas de necrose caseosa e áreas de calcificação, e na coloração de Ziehl-Neelsen apresentaram bacilos álcool-ácido resistentes. Assim, as análises empregadas no estudo se mostraram importantes para o diagnóstico acurado de tuberculose bovina, além de alertar para o risco de saúde pública que pessoas que trabalham nos abatedouros e/ou em contato direto com bovinos doentes estão submetidas.(AU)

Tuberculose bovina: diagnóstico ante mortem e post mortem em bovinos leiteiros através da associação de análises / Bovine tuberculosis: diagnosis ante mortem and post mortem in dairy cattle through analysis association

Este estudo descreve o emprego de quatro métodos diagnósticos para a confirmação de casos de tuberculose em bovinos. Para tanto foram avaliados 211 bovinos leiteiros, dos quais 35,1% apresentaram reatividade no teste tuberculínico cervical comparativo, e 143 animais foram encaminhados para abate sanitário. No acompanhamento do abate e inspeção sanitária verificou-se que 51,8% dos bovinos apresentavam lesões visíveis compatíveis com tuberculose. Também foram coletados fragmentos teciduais de bovinos com e sem lesões macroscópicas, os quais na análise histológica apresentaram numerosas áreas de necrose caseosa e áreas de calcificação, e na coloração de Ziehl-Neelsen apresentaram bacilos álcool-ácido resistentes. Assim, as análises empregadas no estudo se mostraram importantes para o diagnóstico acurado de tuberculose bovina, além de alertar para o risco de saúde pública que pessoas que trabalham nos abatedouros e/ou em contato direto com bovinos doentes estão submetidas.

Decay of Mycobacterium bovis in whole milk submitted to pasteurization parameters / Decaimento de Mycobacterium bovis em leite integral submetido aos parâmetros de pasteurização

Parameters for milk pasteurization were established a long time ago, considering the thermal resistance of Mycobacterium bovis, and the systematic adoption of this process has drastically reduced the incidence of human tuberculosis caused by this pathogen. However, more recently, molecular methods have allowed the identification of genetic variations in this bacterium that may lead to greater thermal resistance. The aim of this study was to investigate whether genetic variation leads to variation in the death pattern of this bacterium during the milk pasteurization process. Samples of UHT (ultra-high temperature)-treated whole milk were artificially contaminated with four different Mycobacterium bovis spoligotypes and were subjected to pasteurization by low-temperature long-time (LTLT) and high-temperature short-time (HTST) treatments. The M. bovis spoligotypes were quantified (Colony Forming Unit per milliliter of milk) before and during the thermal process. The decay of the pathogen was quantified by calculating the difference between the measurements at the beginning and at the end of the thermal treatment. The data demonstrated that the LTLT and HTST pasteurization processes considerably reduced the M. bovis load in the milk; however, the bacterium was not eliminated. There was no difference in the thermal resistance of the spoligotypes tested or in the efficiency of pasteurization processes (LTLT versus HTST). However, heating phase was more effective in reducing the M. bovis load than the target temperature maintenance phase.

Os parâmetros para a pasteurização do leite foram estabelecidos há muito tempo, considerando a resistência térmica de Mycobacterium bovis e a adoção sistemática deste processo reduziu drasticamente a incidência de tuberculose humana causada por este patógeno. Entretanto, mais recentemente, métodos moleculares permitiram a identificação de variações genéticas nesta bactéria que podem levar a uma maior resistência térmica. O objetivo deste estudo foi investigar se a variação genética apresenta modificação no padrão de morte da bactéria durante o processo de pasteurização do leite. Amostras de leite tratadas por UHT (ultra-alta temperatura) integral foram contaminadas com quatro diferentes espoligotipos de Mycobacterium bovis e foram submetidos ao tratamento por temperatura baixa e tempo longo (LTLT) e temperatura alta e tempo curto (HTST). Os espoligotipos M. bovis foram quantificados (Unidades Formadoras de colônias por mililitro de leite) antes e durante o processo térmico. A diminuição do patógeno foi quantificada através do cálculo da diferença entre as medições no início e no fim do tratamento térmico. Os dados demonstraram que os processos de pasteurização HTST e LTLT reduziram consideravelmente a carga de M. bovis no leite; no entanto, a bactéria não foi eliminada. Não houve diferença na resistência térmica dos espoligotipos testados nem na eficiência dos processos de pasteurização (HTST versus LTLT). Entretanto, a fase de aquecimento foi mais eficaz na redução da carga de M. bovis que a fase de manutenção da temperatura-alvo.

Decay of Mycobacterium bovis in whole milk submitted to pasteurization parameters / Decaimento de Mycobacterium bovis em leite integral submetido aos parâmetros de pasteurização

Parameters for milk pasteurization were established a long time ago, considering the thermal resistance of Mycobacterium bovis, and the systematic adoption of this process has drastically reduced the incidence of human tuberculosis caused by this pathogen. However, more recently, molecular methods have allowed the identification of genetic variations in this bacterium that may lead to greater thermal resistance. The aim of this study was to investigate whether genetic variation leads to variation in the death pattern of this bacterium during the milk pasteurization process. Samples of UHT (ultra-high temperature)-treated whole milk were artificially contaminated with four different Mycobacterium bovis spoligotypes and were subjected to pasteurization by low-temperature long-time (LTLT) and high-temperature short-time (HTST) treatments. The M. bovis spoligotypes were quantified (Colony Forming Unit per milliliter of milk) before and during the thermal process. The decay of the pathogen was quantified by calculating the difference between the measurements at the beginning and at the end of the thermal treatment. The data demonstrated that the LTLT and HTST pasteurization processes considerably reduced the M. bovis load in the milk; however, the bacterium was not eliminated. There was no difference in the thermal resistance of the spoligotypes tested or in the efficiency of pasteurization processes (LTLT versus HTST). However, heating phase was more effective in reducing the M. bovis load than the target temperature maintenance phase.(AU)

Os parâmetros para a pasteurização do leite foram estabelecidos há muito tempo, considerando a resistência térmica de Mycobacterium bovis e a adoção sistemática deste processo reduziu drasticamente a incidência de tuberculose humana causada por este patógeno. Entretanto, mais recentemente, métodos moleculares permitiram a identificação de variações genéticas nesta bactéria que podem levar a uma maior resistência térmica. O objetivo deste estudo foi investigar se a variação genética apresenta modificação no padrão de morte da bactéria durante o processo de pasteurização do leite. Amostras de leite tratadas por UHT (ultra-alta temperatura) integral foram contaminadas com quatro diferentes espoligotipos de Mycobacterium bovis e foram submetidos ao tratamento por temperatura baixa e tempo longo (LTLT) e temperatura alta e tempo curto (HTST). Os espoligotipos M. bovis foram quantificados (Unidades Formadoras de colônias por mililitro de leite) antes e durante o processo térmico. A diminuição do patógeno foi quantificada através do cálculo da diferença entre as medições no início e no fim do tratamento térmico. Os dados demonstraram que os processos de pasteurização HTST e LTLT reduziram consideravelmente a carga de M. bovis no leite; no entanto, a bactéria não foi eliminada. Não houve diferença na resistência térmica dos espoligotipos testados nem na eficiência dos processos de pasteurização (HTST versus LTLT). Entretanto, a fase de aquecimento foi mais eficaz na redução da carga de M. bovis que a fase de manutenção da temperatura-alvo.(AU)

Effect of pasteurization on the decay of Mycobacterium bovis in milk cream / Efeito da pasteurização no decaimento de Mycobacterium bovis em creme de leite

Milk cream must be pasteurized in order to be sold in Brazil. However, there are no specific legal requirements for this product, and producers set their own pasteurization parameters using the ones approved for milk as a reference. Considering that fat protects bacteria from heat, that no thermal inactivation studies have been performed on Mycobacterium bovis present in cream, and that bovine tuberculosis is endemic in Brazil, the aim of this study was to evaluate the inactivation of M. bovis in milk cream subjected to commercial parameters of pasteurization. Milk cream samples were contaminated and pasteurized in a water bath at 75, 80, 85, and 90C for 5 and 15 s. M. bovis cells were plated onto Stonebrink-Leslie medium, incubated at 36C for 45 days, and quantified; the result was expressed in log CFU mL-1. The fat content of the samples ranged from 34% to 37% and the average initial load of M. bovis was 8.0 Log CFU mL-1. The average decay of the M. bovis populations was 4.0, 4.3, 4.9 and 6.7 log CFU mL-1 when the cream was incubated for 15 sec at 75, 80, 85 and 90C, respectively, showing that the efficiency of the heat treatment was improved by increasing the temperature of the process. Given the lipophilic nature of M. bovis, the cream should be subjected to more intense parameters of pasteurization than those applied to milk.(AU)

A pasteurização do creme de leite é obrigatória no Brasil, mas não há parâmetros legais específicos para esse produto, de forma que as empresas estabelecem seus próprios parâmetros tendo como referência mínima os aprovados para a pasteurização do leite. Assim, considerando que a gordura tem efeito termo protetor para as bactérias, que não há estudos de inativação térmica do Mycobacterium bovis em creme de leite e que a tuberculose bovina é endêmica no Brasil, o objetivo deste estudo foi avaliar a inativação de M. bovis em creme de leite, submetido aos parâmetros comerciais de pasteurização. Amostras de creme de leite foram contaminadas e pasteurizadas em Banho-Maria a 75C, 80C, 85C e 90C, por até 15 s. O M. bovis foi quantificado por semeadura em meio Stonebrink-Leslie, incubado a 36ºC por 45 dias, e o resultado expresso em Log UFC mL-1. O teor de gordura das amostras variou de 34 a 37% e a carga inicial média de M. bovis foi de 8,0 Log UFC mL-1. O decaimento médio da população de M. bovis foi de 4,0, 4,3, 4,9 e 6,7 Log UFC mL-1, quando expostos respectivamente às temperaturas estudadas por 15 s, demonstrando que a eficácia do tratamento térmico melhorou com o aumento da temperatura do processo. Devido ao caráter lipofílico do M. bovis, o creme de leite deveria ser submetido a parâmetros de pasteurização mais intensos do que aqueles aplicados ao leite.(AU)

Effect of pasteurization on the decay of Mycobacterium bovis in milk cream / Efeito da pasteurização no decaimento de Mycobacterium bovis em creme de leite

Milk cream must be pasteurized in order to be sold in Brazil. However, there are no specific legal requirements for this product, and producers set their own pasteurization parameters using the ones approved for milk as a reference. Considering that fat protects bacteria from heat, that no thermal inactivation studies have been performed on Mycobacterium bovis present in cream, and that bovine tuberculosis is endemic in Brazil, the aim of this study was to evaluate the inactivation of M. bovis in milk cream subjected to commercial parameters of pasteurization. Milk cream samples were contaminated and pasteurized in a water bath at 75, 80, 85, and 90C for 5 and 15 s. M. bovis cells were plated onto Stonebrink-Leslie medium, incubated at 36C for 45 days, and quantified; the result was expressed in log CFU mL-1. The fat content of the samples ranged from 34% to 37% and the average initial load of M. bovis was 8.0 Log CFU mL-1. The average decay of the M. bovis populations was 4.0, 4.3, 4.9 and 6.7 log CFU mL-1 when the cream was incubated for 15 sec at 75, 80, 85 and 90C, respectively, showing that the efficiency of the heat treatment was improved by increasing the temperature of the process. Given the lipophilic nature of M. bovis, the cream should be subjected to more intense parameters of pasteurization than those applied to milk.

A pasteurização do creme de leite é obrigatória no Brasil, mas não há parâmetros legais específicos para esse produto, de forma que as empresas estabelecem seus próprios parâmetros tendo como referência mínima os aprovados para a pasteurização do leite. Assim, considerando que a gordura tem efeito termo protetor para as bactérias, que não há estudos de inativação térmica do Mycobacterium bovis em creme de leite e que a tuberculose bovina é endêmica no Brasil, o objetivo deste estudo foi avaliar a inativação de M. bovis em creme de leite, submetido aos parâmetros comerciais de pasteurização. Amostras de creme de leite foram contaminadas e pasteurizadas em Banho-Maria a 75C, 80C, 85C e 90C, por até 15 s. O M. bovis foi quantificado por semeadura em meio Stonebrink-Leslie, incubado a 36ºC por 45 dias, e o resultado expresso em Log UFC mL-1. O teor de gordura das amostras variou de 34 a 37% e a carga inicial média de M. bovis foi de 8,0 Log UFC mL-1. O decaimento médio da população de M. bovis foi de 4,0, 4,3, 4,9 e 6,7 Log UFC mL-1, quando expostos respectivamente às temperaturas estudadas por 15 s, demonstrando que a eficácia do tratamento térmico melhorou com o aumento da temperatura do processo. Devido ao caráter lipofílico do M. bovis, o creme de leite deveria ser submetido a parâmetros de pasteurização mais intensos do que aqueles aplicados ao leite.

Avaliação da região corpórea e dose da tuberculina no diagnóstico imunoalérgico em ovinos (Ovis aries) experimentalmente sensibilizados com inóculo inativado de Mycobacterium bovis / Evaluation of the body region and tuberculin dose in the diagnosis of the allergic response in sheep (Ovis aries) experimentally sensitized with inactivated inoculum from Mycobacterium bovis

O objetivo foi a investigação do local de aplicação do derivado proteico purificado (PPD) bovino, empregado no teste imunoalérgico da tuberculose, em 15 ovinos (Ovis aries) experimentalmente sensibilizados com Mycobacterium bovis AN5. A partir da melhor resposta obtida na fase de identificação da região corpórea, avaliou-se a dose de PPD bovino a ser aplicada. Decorridos 60 dias da sensibilização, o PPD bovino foi aplicado em cinco distintas regiões corpóreas (cervical média, torácica dorsal, abdominal dorsal, prega da cauda e face medial proximal do membro pélvico – face interna da coxa) com a mensuração da espessura da dobra de pele e da reação através de cutímetro de mola, nos momentos antes (0h) e após aplicação (12h, 24h, 48h, 72h e 96h). A análise dos resultados obtidos foi significante, em ordem decrescente, para as regiões: torácica dorsal, cervical média e abdominal dorsal às 48 e 72h após aplicação do PPD bovino. Elegeu-se a região torácica dorsal como melhor local de aplicação. Recomenda-se que a leitura da reação tuberculínica em ovinos deve ser efetuada às 72h da aplicação do PPD, utilizando-se a dose de 0,1 mL.

EVALUATION OF THE BODY REGION AND TUBERCULIN DOSE IN THE DIAGNOSIS OF THE ALLERGIC RESPONSE IN SHEEP (OVIS ARIES) EXPERIMENTALLY SENSITIZED WITH INACTIVATED INOCULUM FROM Mycobacterium BOVIS. This study was aimed to investigate the best area for application of bovine purified protein derivative (PPD) for the imunoallergic test for tuberculosis, in 15 sheep (Ovis aries) experimentally sensitized with Mycobacterium bovis AN5. Based on the best response obtained in the previous phase, the dose of bovine PPD to be applied was evaluated. After 60 days of sensitization, the bovine PPD was applied at 5 distinct body regions to measure the skinfold thickness and reaction, at moments before (0h) and after injection (12h, 24h, 48h, 72h and 96h), with skinfold calipers. Statistical analysis showed significance for the best site of application: the dorsal thoracic region, followed by the middle cervical and dorsal abdominal, at 48 and 72 hours after injection of bovine PPD. The thoracic region was chosen as the best site for application. It is recommended that the reading of the tuberculin response in sheep should be made 72h after the PPD application, using a dose of 0.1 mL.

Determinação da imunogenicidade de proteínas de amostra de Mycobacterium bovis isolada de bovinos no estado de Goiás, Brasil / Immunogenicity evaluation of proteins from a Mycobacterium bovis isolated from cattle in the State of Goiás, Brasil

A tuberculose bovina persiste em vários países como ameaça à saúde dos rebanhos apesar dos esforços dispensados ao controle e erradicação da doença. O objetivo deste trabalho foi elucidar quais seriam as proteínas mais imunogênicas e, portanto, com potencial de serem utilizadas em novos testes de diagnóstico bovino da tuberculose. Amostras de soro obtidas de animais reatores e não reatores ao teste de tuberculinização intradérmica foram avaliados quanto ao reconhecimento de antígenos proteicos de Mycobacterium bovis, isolado de bovino no Estado de Goiás. A imunogenicidade das proteínas de M. bovis foi obtida por meio da técnica de Western blot. A maioria dos bovinos PPD positivos (67,92%) reconheceu o antígeno de 26kDa, sugerindo o seu uso potencial no desenvolvimento de um ensaio sorológico para a tuberculose bovina.(AU)

Bovine tuberculosis, persists in several countries as a threat to health of the herds despite the efforts given to the control and eradication of the disease. In order to detect immunogenic proteins with a potential to be used in a bovine tuberculosis diagnosis test, serum samples obtained from reactors and no reactors to intradermal tuberculin test, were evaluated for reactivity to Mycobacterium bovis antigens from a bacilli originated in Goiás Brazil. The proteins immunogenicity from M. bovis was obtained by Western blot according to the molecular weight profile. The majority of the PPD positive bovine (67.92%) recognized a protein with 26kDa, suggesting the use of this protein in a serological test for bovine tuberculosis.(AU)

Avaliação da região corpórea e dose da tuberculina no diagnóstico imunoalérgico em ovinos (Ovis aries) experimentalmente sensibilizados com inóculo inativado de Mycobacterium bovis / Evaluation of the body region and tuberculin dose in the diagnosis of the allergic response in sheep (Ovis aries) experimentally sensitized with inactivated inoculum from Mycobacterium bovis

O objetivo foi a investigação do local de aplicação do derivado proteico purificado (PPD) bovino, empregado no teste imunoalérgico da tuberculose, em 15 ovinos (Ovis aries) experimentalmente sensibilizados com Mycobacterium bovis AN5. A partir da melhor resposta obtida na fase de identificação da região corpórea, avaliou-se a dose de PPD bovino a ser aplicada. Decorridos 60 dias da sensibilização, o PPD bovino foi aplicado em cinco distintas regiões corpóreas (cervical média, torácica dorsal, abdominal dorsal, prega da cauda e face medial proximal do membro pélvico face interna da coxa) com a mensuração da espessura da dobra de pele e da reação através de cutímetro de mola, nos momentos antes (0h) e após aplicação (12h, 24h, 48h, 72h e 96h). A análise dos resultados obtidos foi significante, em ordem decrescente, para as regiões: torácica dorsal, cervical média e abdominal dorsal às 48 e 72h após aplicação do PPD bovino. Elegeu-se a região torácica dorsal como melhor local de aplicação. Recomenda-se que a leitura da reação tuberculínica em ovinos deve ser efetuada às 72h da aplicação do PPD, utilizando-se a dose de 0,1 mL. (AU)

EVALUATION OF THE BODY REGION AND TUBERCULIN DOSE IN THE DIAGNOSIS OF THE ALLERGIC RESPONSE IN SHEEP (OVIS ARIES) EXPERIMENTALLY SENSITIZED WITH INACTIVATED INOCULUM FROM Mycobacterium BOVIS. This study was aimed to investigate the best area for application of bovine purified protein derivative (PPD) for the imunoallergic test for tuberculosis, in 15 sheep (Ovis aries) experimentally sensitized with Mycobacterium bovis AN5. Based on the best response obtained in the previous phase, the dose of bovine PPD to be applied was evaluated. After 60 days of sensitization, the bovine PPD was applied at 5 distinct body regions to measure the skinfold thickness and reaction, at moments before (0h) and after injection (12h, 24h, 48h, 72h and 96h), with skinfold calipers. Statistical analysis showed significance for the best site of application: the dorsal thoracic region, followed by the middle cervical and dorsal abdominal, at 48 and 72 hours after injection of bovine PPD. The thoracic region was chosen as the best site for application. It is recommended that the reading of the tuberculin response in sheep should be made 72h after the PPD application, using a dose of 0.1 mL.(AU)

Incidência de tuberculose em bovinos abatidos na região do Vale do Ivinhema, MS / Tuberculosis incidence in cattle slaughtered in the region of Ivinhema Valley, MS

A tuberculose bovina é uma zoonose, responsável por causar lesões granulomatosas nas carcaças e o tratamento não é recomendado. A carne, sendo um alimento perecível indispensável para a maioria dos consumidores, carece de métodos de conservação que sejam eficientes. Neste trabalho relataram-se os índices de contaminações de tuberculose bovina ocorrido no período de janeiro de 2009 a janeiro de 20 I O, no frigorífico Frigovema-MS. (AU)

Bovine tuberculosis is a zoonosis of worldwide distribution, caused by Mycobacterium bovis, the treatment is not recommended, so the best way to combat this disease is the hygiene and control. This paper reports the levels of contamination of bovine tuberculosis occurred in the period January 2009 to January 2010, in the refrigerator Frigovema-MS. (AU)

Inativação de Mycobacterium bovis (espoligotipos SB0120 e SB1033) em leite integral submetido à pasteurização lenta e rápida em banho Maria / Inactivation of Mycobacterium bovis (SB0120 and SB1033 spoligotypes) in whole milk subjected to Holder pasteurization and HTST pasteurization in water baths

O Mycobacterium bovis causa a tuberculose zoonótica, doença que afeta os animais e o homem podendo causar a morte, sendo o leite uma importante via de transmissão da doença para o homem. A pasteurização do leite é a principal medida para quebrar essa cadeia de transmissão, cujos parâmetros de tempo e temperatura foram definidos através de experimentos que datam desde o fim do século XIX, com base na resistência térmica do M. bovis e da Coxiella burnetti, então considerados os mais resistentes patógenos não formadores de esporos que contaminam o leite. No Brasil são aprovados os binômios 62ºC a 65ºC por 30 minutos e 72ºC a 75ºC por 15 a 20 segundos. Entretanto, com o passar dos anos e surgimento de novas tecnologias (PCR, Spoligotyping e outras técnicas biomoleculares) foi possível observar diferenças genéticas intra-espécie. Assim, este projeto tem por objetivo avaliar e comparar o comportamento de dois espoligotipos de M. bovis (SB0120 e SB1033) frente aos dois protocolos de pasteurização utilizados no país. Para tanto, leite integral UHT foi contaminado com esses espoligotipos e submetido aos dois processos térmicos, em Banho-Maria. O leite foi semeado em meio sólido Stonebrink-Leslie e a contagem de colônias foi feita após 45 dias de incubação a 37ºC. Não houve neste experimento diferença entre as resistências térmicas dos dois espoligotipos, no entanto detectou-se uma maior importância da fase de aquecimento na redução do agente do que da fase de manutenção da temperatura, para os dois espoligotipos, nos dois processos.

Mycobacterium bovis causes zoonotic tuberculosis disease that affects animals and humans and can cause death, the milk is an important route of disease transmission to humans. The pasteurization of milk is the main measure to break the transmission chain, whose time and temperature parameters were defined by experiments dating from the late nineteenth century, based on thermal resistance of M. bovis and Coxiella burnetti, considered then the most resistant non-spore-forming pathogens that contaminate the milk. In Brazil, there are two approved binomials 62ºC to 65ºC for 30 minutes and 72ºC to 75ºC for 15 to 20 seconds. However, over the years and the emergence of new technologies (PCR, spoligotyping and other biomolecular techniques) was observed genetic differences intra-species. Thus, this project aims to evaluate and compare the behavior of two spoligotypes of M. bovis (SB0120 and SB1033) compared to the two pasteurization protocols used in the country. To this end, UHT milk was contaminated with these spoligotypes and subjected to two thermal processes in a water bath. The milk was streaked on solid medium Stonebrink-Leslie and colony counting was done after 45 days of incubation at 37ºC. This experiment showed that there was no difference between the thermal resistances of the two spoligotypes, however it was detected a greater importance of the heating phase in reducing the agent that the maintenance phase of temperature for the two spoligotypes, in both cases.

Inativação de Mycobacterium bovis (espoligotipos SB0120 e SB1033) em leite integral submetido à pasteurização lenta e rápida em banho Maria / Inactivation of Mycobacterium bovis (SB0120 and SB1033 spoligotypes) in whole milk subjected to Holder pasteurization and HTST pasteurization in water baths

O Mycobacterium bovis causa a tuberculose zoonótica, doença que afeta os animais e o homem podendo causar a morte, sendo o leite uma importante via de transmissão da doença para o homem. A pasteurização do leite é a principal medida para quebrar essa cadeia de transmissão, cujos parâmetros de tempo e temperatura foram definidos através de experimentos que datam desde o fim do século XIX, com base na resistência térmica do M. bovis e da Coxiella burnetti, então considerados os mais resistentes patógenos não formadores de esporos que contaminam o leite. No Brasil são aprovados os binômios 62ºC a 65ºC por 30 minutos e 72ºC a 75ºC por 15 a 20 segundos. Entretanto, com o passar dos anos e surgimento de novas tecnologias (PCR, Spoligotyping e outras técnicas biomoleculares) foi possível observar diferenças genéticas intra-espécie. Assim, este projeto tem por objetivo avaliar e comparar o comportamento de dois espoligotipos de M. bovis (SB0120 e SB1033) frente aos dois protocolos de pasteurização utilizados no país. Para tanto, leite integral UHT foi contaminado com esses espoligotipos e submetido aos dois processos térmicos, em Banho-Maria. O leite foi semeado em meio sólido Stonebrink-Leslie e a contagem de colônias foi feita após 45 dias de incubação a 37ºC. Não houve neste experimento diferença entre as resistências térmicas dos dois espoligotipos, no entanto detectou-se uma maior importância da fase de aquecimento na redução do agente do que da fase de manutenção da temperatura, para os dois espoligotipos, nos dois processos. (AU)

Mycobacterium bovis causes zoonotic tuberculosis disease that affects animals and humans and can cause death, the milk is an important route of disease transmission to humans. The pasteurization of milk is the main measure to break the transmission chain, whose time and temperature parameters were defined by experiments dating from the late nineteenth century, based on thermal resistance of M. bovis and Coxiella burnetti, considered then the most resistant non-spore-forming pathogens that contaminate the milk. In Brazil, there are two approved binomials 62ºC to 65ºC for 30 minutes and 72ºC to 75ºC for 15 to 20 seconds. However, over the years and the emergence of new technologies (PCR, spoligotyping and other biomolecular techniques) was observed genetic differences intra-species. Thus, this project aims to evaluate and compare the behavior of two spoligotypes of M. bovis (SB0120 and SB1033) compared to the two pasteurization protocols used in the country. To this end, UHT milk was contaminated with these spoligotypes and subjected to two thermal processes in a water bath. The milk was streaked on solid medium Stonebrink-Leslie and colony counting was done after 45 days of incubation at 37ºC. This experiment showed that there was no difference between the thermal resistances of the two spoligotypes, however it was detected a greater importance of the heating phase in reducing the agent that the maintenance phase of temperature for the two spoligotypes, in both cases. (AU)

Pesquisa de bacilos álcool ácido resistentes em cortes histológicos de lesões sugestivas de tuberculose em bovinos / Search bacilli - acid - resistant in histological lesions suggestive of tuberculosis at bovines

Verificou-se a ocorrência de bacilos álcool-ácido resistentes, em linfonodos de bovinos com lesões sugestivas de tuberculose observadas durante inspeção sanitária em abatedouros-frigoríficos sob Serviço de Inspeção Federal (SIF), em Mato Grosso do Sul no período de maio a novembro de 2003. Foram colhidas 63 amostras que, depois de fixadas, foram destinadas à histopatologia e processadas pela técnica rotineira de inclusão em parafina. Á histopatologia, 74,6 por cento dos casos evidenciaram lesões granulomatosas características de tuberculose ganglionar, 17,5por cento apresentaram lesões nodulares inespecíficas e 7,9 por cento inconclusivos, apresentando-se como processos inflamatórios difusos. Bacilos álcool-ácido-resistentes foram observados em 70 por cento das lâminas coradas pela técnica de Ziehl Neelsen-Faraco.(AU)

The occurrence of acid-fast resistant bacilli in bovine lymph nodes was verified; suggestive of tuberculosis. The observation was made during sanitary inspections carried out by the Federal InspectionService (FIS), in South Mato Grosso, in slaughterhouses and meat packing plants from May to November in 2003. 63 samples were collected which after fixation, were reserved for histopathology and processed by a routine technique of paraffin inclusion. According to histopathology results, 74,6% of the cases gave evidence of granulomatous lesions, characteristic of ganglion tuberculosis, 17,5% presented nan-specific lesions and 7,9% were inconclusive, presenting diffuse inflammatatory processes. Acid fast bacilli were observed in 70% of the slides stained using the Siehl Neelsen- Faraco technique. (AU)