Live bacterial vaccine vectors: An overview

Genetically attenuated microorganisms, pathogens, and some commensal bacteria can be engineered to deliver recombinant heterologous antigens to stimulate the host immune system, while still offering good levels of safety. A key feature of these live vectors is their capacity to stimulate mucosal as well as humoral and/or cellular systemic immunity. This enables the use of different forms of vaccination to prevent pathogen colonization of mucosal tissues, the front door for many infectious agents. Furthermore, delivery of DNA vaccines and immune system stimulatory molecules, such as cytokines, can be achieved using these special carriers, whose adjuvant properties and, sometimes, invasive capacities enhance the immune response. More recently, the unique features and versatility of these vectors have also been exploited to develop anti-cancer vaccines, where tumor-associated antigens, cytokines, and DNA or RNA molecules are delivered. Different strategies and genetic tools are constantly being developed, increasing the antigenic potential of agents delivered by these systems, opening fresh perspectives for the deployment of vehicles for new purposes. Here we summarize the main characteristics of the different types of live bacterial vectors and discuss new applications of these delivery systems in the field of vaccinology.

Ultrasonographic evaluation of hG-CSF transgenic goat conceptus / Avaliação ultrassonográfica de conceptos transgênicos para o hG-CSF

The objective of this study was to evaluate the development of transgenic (T) goat embryos and fetuses for human Granulocyte Colony Stimulating Factor (hG-CSF) by ultrasonography. Four pregnancies in non-transgenic (NT) goats were obtained after fertilization (either fixed-time artificial insemination or natural mating) using the T male for hG-CSF. Ultrasound examinations were carried out at 30, 40 (transrectal via), 50, 60, 90 and 120 days of pregnancy (transabdominal via). Some parameters were observed such as morphology, organogenesis and formation of skeletal fetuses, viability with cardiac activity and fetuses movements. Measurements were taken of the crown-rump length, diameter of embryonic vesicle, thorax, abdomen, umbilical cord and placentomes. After parturition, DNA testing was conducted in all offspring and 4 T and 2 NT kids were identified. The conceptus started their differentiation at 40 days. The heart was detected in all examinations and the heart chambers were assessed at 50 days. Gastric compartments, liver and kidneys were observed at 60 days, the same period that all bony structures were visualized. Average values of all evaluated parameters had a gradual increase with the progression of pregnancy. T and NT goat embryos and fetuses had a similar growth and all remained viable throughout the experimental period.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar o desenvolvimento de embriões e fetos transgênicos (T) para o Fator Estimulante de Colôniasde Granulócitos humano (hG-CSF) por ultrassonografia. Quatro gestações em cabras não transgênicas (NT) foram obtidas pos fecundação (inseminação artificial em tempo fixo ou monta controlada) utilizando o bode T para o hG-CSF. Exames ultrassonográficos foram realizados aos 30, 40 (via transretal), 50, 60, 90 e 120 dias de gestação (via transabdominal). Alguns parâmetros foram observados como morfologia, organogênese e formação do esqueleto fetal, viabilidade por meio de atividade cardíaca e movimento fetal. As seguintes mensurações foram realizadas: comprimento crânio caudal, diâmetro da vesícula embrionária, do tórax, do abdomen, do cordão umbilical e dos placentomas. Após o parto, o exame por PCR foi conduzido em todas as crias e 4 T e 2NT foram identificadas. O concepto iniciou sua diferenciação aos 40 dias. O coração foi detectado em todos os exames e as câmeras cardíacas foram identificadas aos 50 dias. Compartimentos gástricos, fígado e rins foram observados aos 60 dias, o mesmo período que todas as estruturas ósseas foram visualizadas. Valores médios de todos os parâmetros avaliados tiveram um aumento gradual com o avanço da gestação. Embriões e fetos T e NT tiveram um crescimento similar e todos permaneceram viáveis durante o período experimental.(AU)

Ultrasonographic evaluation of hG-CSF transgenic goat conceptus / Avaliação ultrassonográfica de conceptos transgênicos para o hG-CSF

The objective of this study was to evaluate the development of transgenic (T) goat embryos and fetuses for human Granulocyte Colony Stimulating Factor (hG-CSF) by ultrasonography. Four pregnancies in non-transgenic (NT) goats were obtained after fertilization (either fixed-time artificial insemination or natural mating) using the T male for hG-CSF. Ultrasound examinations were carried out at 30, 40 (transrectal via), 50, 60, 90 and 120 days of pregnancy (transabdominal via). Some parameters were observed such as morphology, organogenesis and formation of skeletal fetuses, viability with cardiac activity and fetuses movements. Measurements were taken of the crown-rump length, diameter of embryonic vesicle, thorax, abdomen, umbilical cord and placentomes. After parturition, DNA testing was conducted in all offspring and 4 T and 2 NT kids were identified. The conceptus started their differentiation at 40 days. The heart was detected in all examinations and the heart chambers were assessed at 50 days. Gastric compartments, liver and kidneys were observed at 60 days, the same period that all bony structures were visualized. Average values of all evaluated parameters had a gradual increase with the progression of pregnancy. T and NT goat embryos and fetuses had a similar growth and all remained viable throughout the experimental period.

O objetivo deste estudo foi avaliar o desenvolvimento de embriões e fetos transgênicos (T) para o Fator Estimulante de Colôniasde Granulócitos humano (hG-CSF) por ultrassonografia. Quatro gestações em cabras não transgênicas (NT) foram obtidas pos fecundação (inseminação artificial em tempo fixo ou monta controlada) utilizando o bode T para o hG-CSF. Exames ultrassonográficos foram realizados aos 30, 40 (via transretal), 50, 60, 90 e 120 dias de gestação (via transabdominal). Alguns parâmetros foram observados como morfologia, organogênese e formação do esqueleto fetal, viabilidade por meio de atividade cardíaca e movimento fetal. As seguintes mensurações foram realizadas: comprimento crânio caudal, diâmetro da vesícula embrionária, do tórax, do abdomen, do cordão umbilical e dos placentomas. Após o parto, o exame por PCR foi conduzido em todas as crias e 4 T e 2NT foram identificadas. O concepto iniciou sua diferenciação aos 40 dias. O coração foi detectado em todos os exames e as câmeras cardíacas foram identificadas aos 50 dias. Compartimentos gástricos, fígado e rins foram observados aos 60 dias, o mesmo período que todas as estruturas ósseas foram visualizadas. Valores médios de todos os parâmetros avaliados tiveram um aumento gradual com o avanço da gestação. Embriões e fetos T e NT tiveram um crescimento similar e todos permaneceram viáveis durante o período experimental.

Biossegurança: uma revisão / Biosafety: a review

A biossegurança é o conjunto de ações voltadas para a prevenção, minimização ou eliminação de riscos que possam comprometer a saúde do homem e dos animais e o meio ambiente. Os primeiros debates sobre a biossegurança tiveram início na década de 1970, devido a preocupações com a segurança nos espaços laboratoriais e com as consequências que os constantes avanços tecnológicos na área de engenharia genética poderiam significar para o homem, bem como para os sistemas ecológicos. No Brasil, a regulamentação para atividades relacionadas a essas áreas teve início em 1995, com a criação da Comissão Técnica Nacional de Biossegurança. Suas funções são fiscalizar a manipulação de organismos geneticamente modificados (OGM) e certificar a segurança dos espaços laboratoriais. Este trabalho tem como finalidade disseminar os conceitos de biossegurança e proporcionar informações que auxiliarão na segurança do homem e do meio ambiente em aspectos relacionados às atividades de pesquisa, produção, ensino, desenvolvimento tecnológico e prestação de serviços.

Biosafety is a set of actions directed to the prevention, minimization or elimination of risks that could jeopardize the human's and animal's health and of the environment. The first debates about biosafety were held in the early 1970's due to the outbreak of transmissible diseases and to the concern to the safety in laboratory arenas. In Brazil, the regulations to activities related to these areas began in 1995 with the formation of the National Technical Biosafety whose functions are the inspection of the manipulated Genetically Modified Organisms (GMO) and of the laboratory arena safety. This review describes the biosafety concepts and their applicability known in order to improve the human safety as well as the environment in related issues to the research activities, production, teaching, technological development and given service.