Use of MALDI-TOF for identification and surveillance of gram-negative bacteria in captive wild psittacines / Uso do MALDI-TOF para identificação e monitoramento de bactérias Gram-negativas em psitacídeos cativos

Microbiological studies of the sanitary and health status of psittacine birds that will be reintroduced is important in evaluating whether these animals act as carriers of pathogenic agents to other animals and humans. Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS) is a faster and more accurate method to identify bacteria than conventional microbiology methods. The aim of this study was to evaluate the health status of psittacines housed in captivity, by assessment of Gram-negative bacteria from fecal microbiota through MALDI- TOF MS identification. The results indicate high frequency of Gram-negative bacteria in feces (96.5%), especially from the Enterobacteriaceae family (88.7%). The most prevalent bacteria were Escherichia coli (39.0%), Proteus vulgaris (12.2%), Klebsiella spp. (12.1%) and Raoultella ornithinolytica (8.7%). Proteus hauseri, Citrobacter spp., Morganella morgannii, Providencia rettgeri, Enterobacter spp. and Escherichia hermannii were isolated with lower frequency. . All these agents are potentially pathogenic for parrots and can cause systemic infections in other animals and humans. These findings reinforce that MALDI- TOF MS proved to be a rapid and accurate method of identification of the microorganism and evaluation of the health status of psittacines, providing relevant data to assist decision-making regarding the sanitary protocols in wildlife centers, and possible future reintroduction of wild birds.

Estudos microbiológicos da sanidade de psitacídeos que serão reintroduzidos são importantes para avaliar se esses animais atuam como portadores de agentes patogênicos para outros animais e humanos. A espectrometria de massa por ionização/dessorção de matriz assistida por laser/tempo de vôo (MALDI-TOF MS) é um método mais rápido e preciso para identificar bactérias na comparação com métodos convencionais de microbiologia. O objetivo deste estudo foi avaliar o estado de saúde de psitacídeos cativos, identificando bactérias Gram-negativas da microbiota fecal por MALDI -TOF MS. Os resultados indicaram alta frequência de bactérias Gram-negativas nas fezes (96,5%), principalmente da família Enterobacteriaceae (88,7%). As mais prevalentes foram Escherichia coli (39,0%), Proteus vulgaris (12,2%), Klebsiella spp. (12,1%) e Raoultella ornithinolytica (8,7%). Proteus hauseri, Citrobacter spp., Morganella morgannii, Providencia rettgeri, Enterobacter spp. e Escherichia hermannii foram isolados com menor frequência. Todos esses agentes são potencialmente patogênicos para os papagaios e podem causar infecções sistêmicas em outros animais e seres humanos. Esses achados reforçam que o MALDI- TOF MS é um método rápido e preciso de identificação do microrganismo e avaliação do estado de saúde dos psitacídeos, fornecendo dados relevantes para auxiliar na tomada de decisões sobre os protocolos sanitários em centros de triagem de animais selvagens e sobre a possibilidade de reintrodução futura.

Classificação dos graus de lesões de aerossaculite em perus associadas com enterobactérias / [Classification of the levels of the airsacculitis injuries in turkeys associated with Enterobacteriaceae]

Foram padronizados os graus de lesões dos sacos aéreos em perus com aerossaculite, associadas com a presença de isolados de enterobactérias nesses órgãos. Um total de 110 amostras de sacos aéreos de perus machos com aerossaculite foi coletado para o estudo. Durante o processo de abate, as amostras foram coletadas por meio de swabs e submetidas a três métodos de armazenamento (imediato, congelado ou pré-incubado após congelamento) para posterior comparação das suas eficiências de isolamento. Os gêneros da família Enterobacteriaceae foram identificados pelas séries bioquímicas EPM, MILi e citrato de Simmons. O crescimento bacteriano ocorreu em 43,64% das amostras. Neste estudo, quatro padrões de lesões de aerossaculite foram identificados de acordo com as características patológicas dos sacos aéreos. Os principais gêneros de enterobactérias identificadas foram: Escherichia coli, Citrobacter, Proteus, Edwardsiella, Morganella, Kluyvera, Salmonella e Klebsiella. Foi observado que os graus padronizados como 3 e 4 apresentaram maior variedade de gêneros bacterianos. O armazenamento imediato apresentou maior porcentagem de positividade, 41,82%, no entanto o pré-incubado após congelamento se apresentou mais eficaz em relação à quantidade de colônias.(AU)

The degrees of air sac lesions in turkeys with airsacculitis were standardized, associated with the presence of Enterobacteriaceae isolated from these organs. A total of 110 samples of air sacs from male turkeys with airsacculitis were collected and analyzed. During the slaughtering process, the sample collection was done using swabs and submitted to three storage methods (immediate, frozen, or pre incubated after freezing) for further comparison of their isolated efficiency. The bacterial genera of the family Enterobacteriaceae were identified biochemical series EPM, MILi and Simmons citrate. Bacterial growth occurred in 43.64% of samples. In this study, four patterns of aerossaculitis lesions were identified according to the pathological characteristics of air sacs. The frequencies of the Enterobacteriaceae isolated identified in the samples were: Escherichia coli, Citrobacter, Proteus, Edwardsiella, Morganell, Kluyvera, Salmonella and Klebsiella. Otherwise, it was observed that the levels already standardized as level three and four showed higher variety of genus. The immediate storage showed higher percentage of positivity at 41.82%, however, the pre incubated after freezing showed more efficiency in relation to the quantity of colonies.(AU)

Classificação dos graus de lesões de aerossaculite em perus associadas com enterobactérias / [Classification of the levels of the airsacculitis injuries in turkeys associated with Enterobacteriaceae]

Foram padronizados os graus de lesões dos sacos aéreos em perus com aerossaculite, associadas com a presença de isolados de enterobactérias nesses órgãos. Um total de 110 amostras de sacos aéreos de perus machos com aerossaculite foi coletado para o estudo. Durante o processo de abate, as amostras foram coletadas por meio de swabs e submetidas a três métodos de armazenamento (imediato, congelado ou pré-incubado após congelamento) para posterior comparação das suas eficiências de isolamento. Os gêneros da família Enterobacteriaceae foram identificados pelas séries bioquímicas EPM, MILi e citrato de Simmons. O crescimento bacteriano ocorreu em 43,64% das amostras. Neste estudo, quatro padrões de lesões de aerossaculite foram identificados de acordo com as características patológicas dos sacos aéreos. Os principais gêneros de enterobactérias identificadas foram: Escherichia coli, Citrobacter, Proteus, Edwardsiella, Morganella, Kluyvera, Salmonella e Klebsiella. Foi observado que os graus padronizados como 3 e 4 apresentaram maior variedade de gêneros bacterianos. O armazenamento imediato apresentou maior porcentagem de positividade, 41,82%, no entanto o pré-incubado após congelamento se apresentou mais eficaz em relação à quantidade de colônias.(AU)

The degrees of air sac lesions in turkeys with airsacculitis were standardized, associated with the presence of Enterobacteriaceae isolated from these organs. A total of 110 samples of air sacs from male turkeys with airsacculitis were collected and analyzed. During the slaughtering process, the sample collection was done using swabs and submitted to three storage methods (immediate, frozen, or pre incubated after freezing) for further comparison of their isolated efficiency. The bacterial genera of the family Enterobacteriaceae were identified biochemical series EPM, MILi and Simmons citrate. Bacterial growth occurred in 43.64% of samples. In this study, four patterns of aerossaculitis lesions were identified according to the pathological characteristics of air sacs. The frequencies of the Enterobacteriaceae isolated identified in the samples were: Escherichia coli, Citrobacter, Proteus, Edwardsiella, Morganell, Kluyvera, Salmonella and Klebsiella. Otherwise, it was observed that the levels already standardized as level three and four showed higher variety of genus. The immediate storage showed higher percentage of positivity at 41.82%, however, the pre incubated after freezing showed more efficiency in relation to the quantity of colonies.(AU)

Cistite enfisematosa em cão: relato radiográfico de caso / Emphysematous cystitis in a dog: case report radiographic

A infecção da vesícula urinária, por microrganismos fermentadoresde glicose denominada de cistite enfisematosa é caracterizadapela produção de gás no lúmen do orgão. Os microrganismosmais encontrados em tal patologia são: Proteus sp, Aerobacteraerogenous, Escherichia coli e Clostridium spp. As causas sãoinespecíficas, e a sua instalação pode ser secundária a doençascomo diabetes mellitus, hiperadrenocorticismo, defeitos anatômicos,urolitíase, neoplasias, além de defeitos anatômicos, terapiaprolongada com corticoide e espessamento da parede vesicalcausada por inflamação crônica, com o relato da afecção em cãesnão diabéticos. Os sinais clínicos, inespecíficos, apresentados pelosanimais são: disúria, hematúria, polaquiúria, dor abdominale apatia, ou, mesmo, assintomáticos. O presente trabalho relataum caso diagnosticado em um cão macho, Husky Siberiano com13 anos, apresentando pneumatúria e diagnosticado com CistiteEnfisematosa por exames de imagem

The urinary bladder infection, having glucose-fermentingmicroorganisms such as pathogens is the disease called asemphysematous cystitis. These microorganism are ableto produce balls of gas in the bladder lumen. The mostfrequent bacteria associated with this pathology are: Proteussp, Aerobacteraerogenous, Escherichia coli and Clostridiumspp. The causes are nonspecific and are usually secondary toseveral conditions as diabetes mellitus, hyperadrenocorticism,anatomical defects, urolithiasis, tumours, prolongedcorticosteroid therapy, bladder wall thickening caused by chronicinflammation, and not ruling out the possibility of reportsin dogs not diabetic. The clinical sings are also nonspecific:dysuria, hematuria, urinary frequency, abdominal pain,apathy. Asymptomatic case could be accidentally diagnosedby radiographic examination and pnemautúria. The objectiveof this paper is to report a case of emphysematous cystitisdiagnosed through image investigation.

Cistite enfisematosa em cão: relato radiográfico de caso / Emphysematous cystitis in a dog: case report radiographic

A infecção da vesícula urinária, por microrganismos fermentadoresde glicose denominada de cistite enfisematosa é caracterizadapela produção de gás no lúmen do orgão. Os microrganismosmais encontrados em tal patologia são: Proteus sp, Aerobacteraerogenous, Escherichia coli e Clostridium spp. As causas sãoinespecíficas, e a sua instalação pode ser secundária a doençascomo diabetes mellitus, hiperadrenocorticismo, defeitos anatômicos,urolitíase, neoplasias, além de defeitos anatômicos, terapiaprolongada com corticoide e espessamento da parede vesicalcausada por inflamação crônica, com o relato da afecção em cãesnão diabéticos. Os sinais clínicos, inespecíficos, apresentados pelosanimais são: disúria, hematúria, polaquiúria, dor abdominale apatia, ou, mesmo, assintomáticos. O presente trabalho relataum caso diagnosticado em um cão macho, Husky Siberiano com13 anos, apresentando pneumatúria e diagnosticado com CistiteEnfisematosa por exames de imagem(AU)

The urinary bladder infection, having glucose-fermentingmicroorganisms such as pathogens is the disease called asemphysematous cystitis. These microorganism are ableto produce balls of gas in the bladder lumen. The mostfrequent bacteria associated with this pathology are: Proteussp, Aerobacteraerogenous, Escherichia coli and Clostridiumspp. The causes are nonspecific and are usually secondary toseveral conditions as diabetes mellitus, hyperadrenocorticism,anatomical defects, urolithiasis, tumours, prolongedcorticosteroid therapy, bladder wall thickening caused by chronicinflammation, and not ruling out the possibility of reportsin dogs not diabetic. The clinical sings are also nonspecific:dysuria, hematuria, urinary frequency, abdominal pain,apathy. Asymptomatic case could be accidentally diagnosedby radiographic examination and pnemautúria. The objectiveof this paper is to report a case of emphysematous cystitisdiagnosed through image investigation.(AU)

Diagnosis of Proteus spp. in wild birds raised under captivity in Rio Grande do Norte, brazil / Diagnóstico de Proteus spp. em aves exóticas criadas em cativeiro no Rio Grande do Norte

The aim of this work was to relate the occurrence of bacterial illnesses in two wild birds raised under captive conditions in Rio Grande do Norte State, Brazil, focusing on their clinical and microbiological findings. Clinical exams were performed in both birds in order to collect data and to determine the clinical and pathological outcome. In bird [A1] was diagnosed an infection in the respiratory system, and in bird [A2] the diagnosis was pododermatitis. Samples of shedding were collected using a sterile swab to perform a bacterial culture in blood agar and McConkey agar. An antibiogram was performed as well. The bacterial culture revealed the growing of Proteus sp. and Proteus vulgares, respectively. The antibiogram performed with the samples of bird [A1] showed the resistance to the follow antibiotics: ampicillin, amoxicillin/clavulanic acid, aztreonam, cefepime, ceftazidime, ciprofloxacin, tetracycline, sulfamethoxazole/trimethoprim and gentamicin. In bird [A2], strain was resistant to ampicillin, amoxicillin/clavulanic acid, aztreonam, cefotoxin, chloramphenicol, tetraciclin, sulfamethoxazole/trimethoprim and gentamicina. Proteus spp. appears to be a potencial multiresistant pathogen and causes severe lesions and diseases for wild birds in captivity.

O objetivo deste trabalho é relatar a ocorrência de enfermidades bacterianas em duas aves exóticas criadas em cativeiro no Rio Grande do Norte, com enfoque nos achados clínicos e microbiológicos. Realizou-se o exame clínico nas aves para a coleta de dados e caracterização do quadro clínico-patológico, sendo diagnosticada na ave [A1] infecção no trato respiratório superior, e na ave [A2] pododermatite profunda. O material biológico das secreções foi colhido com o auxílio de swabs estéreis para a determinação do agente etiológico através de cultura bacteriana em ágar sangue e ágar MacConkey. Realizou-se também o teste de susceptibilidade a antimicrobianos. A cultura bacteriológica das aves [A1] e [A2] resultou em crescimento de Proteus sp. e Proteus vulgares, respectivamente. O antibiograma da ave [A1] demonstrou resistência aos antibióticos: ampicilina, amoxicilina/ácido clavulâmico, aztreonam, cefepime, ceftazidima, ciprofloxacina, tetraciclina, sulfametoxazol/trimetroprim e gentamicina. Na ave [A2] a cepa isolada apresentou resistência a ampicilina, amoxicilina/ácido clavulâmico, aztreonam, cefoxitina, cloranfenicol, tetraciclina, sulfametoxazol/trimetroprim e gentamicina. Proteus spp. pode ser considerado um patógeno multirresistente, causador de lesões graves e doenças em aves selvagens criadas em cativeiro.

Diagnosis of Proteus spp. in wild birds raised under captivity in Rio Grande do Norte, brazil / Diagnóstico de Proteus spp. em aves exóticas criadas em cativeiro no Rio Grande do Norte

The aim of this work was to relate the occurrence of bacterial illnesses in two wild birds raised under captive conditions in Rio Grande do Norte State, Brazil, focusing on their clinical and microbiological findings. Clinical exams were performed in both birds in order to collect data and to determine the clinical and pathological outcome. In bird [A1] was diagnosed an infection in the respiratory system, and in bird [A2] the diagnosis was pododermatitis. Samples of shedding were collected using a sterile swab to perform a bacterial culture in blood agar and McConkey agar. An antibiogram was performed as well. The bacterial culture revealed the growing of Proteus sp. and Proteus vulgares, respectively. The antibiogram performed with the samples of bird [A1] showed the resistance to the follow antibiotics: ampicillin, amoxicillin/clavulanic acid, aztreonam, cefepime, ceftazidime, ciprofloxacin, tetracycline, sulfamethoxazole/trimethoprim and gentamicin. In bird [A2], strain was resistant to ampicillin, amoxicillin/clavulanic acid, aztreonam, cefotoxin, chloramphenicol, tetraciclin, sulfamethoxazole/trimethoprim and gentamicina. Proteus spp. appears to be a potencial multiresistant pathogen and causes severe lesions and diseases for wild birds in captivity.(AU)

O objetivo deste trabalho é relatar a ocorrência de enfermidades bacterianas em duas aves exóticas criadas em cativeiro no Rio Grande do Norte, com enfoque nos achados clínicos e microbiológicos. Realizou-se o exame clínico nas aves para a coleta de dados e caracterização do quadro clínico-patológico, sendo diagnosticada na ave [A1] infecção no trato respiratório superior, e na ave [A2] pododermatite profunda. O material biológico das secreções foi colhido com o auxílio de swabs estéreis para a determinação do agente etiológico através de cultura bacteriana em ágar sangue e ágar MacConkey. Realizou-se também o teste de susceptibilidade a antimicrobianos. A cultura bacteriológica das aves [A1] e [A2] resultou em crescimento de Proteus sp. e Proteus vulgares, respectivamente. O antibiograma da ave [A1] demonstrou resistência aos antibióticos: ampicilina, amoxicilina/ácido clavulâmico, aztreonam, cefepime, ceftazidima, ciprofloxacina, tetraciclina, sulfametoxazol/trimetroprim e gentamicina. Na ave [A2] a cepa isolada apresentou resistência a ampicilina, amoxicilina/ácido clavulâmico, aztreonam, cefoxitina, cloranfenicol, tetraciclina, sulfametoxazol/trimetroprim e gentamicina. Proteus spp. pode ser considerado um patógeno multirresistente, causador de lesões graves e doenças em aves selvagens criadas em cativeiro.(AU)