Production of recombinant human epidermal growth factor in Pichia pastoris

This study was carried out to express human epidermal growth factor (hEGF) in Pichia pastoris GS115. For this aim, the hEGF gene was cloned into the pPIC9K expression vector, and then integrated into P. pastoris by electroporation. ELISA-based assay showed that the amount of hEGF secreted into the medium can be affected by the fermentation conditions especially by culture medium, pH and temperature. The best medium for the optimal hEGF production was BMMY buffered at a pH range of 6.0 and 7.0. The highest amount of hEGF with an average yield of 2.27 µg/mL was obtained through an induction of the culture with 0.5% (v/v) methanol for 60 h. The artificial neural network (ANN) analysis revealed that changes in both pH and temperature significantly affected the hEGF production with the pH change had slightly higher impact on hEGF production than variations in the temperature.(AU)

Evaluation of thymic lymphocyte loss of broiler using Digital Analysis of the Lymphoid Depletion System (ADDL) / Avaliação de perda de linfócitos do timo em frangos usando análise digital do sistema de depleção linfóide (ADDL)

The thymus is a lymphoid organ and usually evaluated for the degree of lymphocyte loss with subjective histological techniques. This study aimed to adapt and to apply of the digital analysis of the lymphoid depletion system (ADDL) in the thymus in order to obtain a more accurate analysis. Glucocorticoid was used to induce immunosuppression in 55 broilers at 21 days of age; other 15 broilers were the control group. After euthanasia of the broilers, postmortem examination was made. Both thymic chains were collected and six lobes were selected for histological examination of the degree of lymphocyte depletion (scores 1 to 5) and for submission to all stages of processing by the ADDL system. The artificial constructed neural networks (ANN) obtained 94.03% of correct classifications. In conclusion, it was possible to adopt objective criteria to evaluate thymic lymphoid depletion with the ADDL system.(AU)

O timo é um órgão linfóide, que é normalmente avaliado para o grau de perda de linfócitos a partir de técnicas histológicas subjetivas. Este trabalho teve como objetivo a adaptação e aplicação do sistema de análise digital de depleção linfóide (ADDL) para o timo, a fim de tornar sua análise mais acurada. Glicocorticóides foram utilizados a fim de induzir imunossupressão em 55 aves de 21 dias de idade. Outras 15 aves formaram o grupo controle. Posteriormente, para cada um dos aves, realizou-se a eutanásia e necropsia. Ambas as cadeias do timo foram coletadas e foram selecionadas seis lóbulos para processamento histológico, análise quanto ao grau de depleção linfocitária (escores de 1-5) e submissão a todas as fases do processamento pelo sistema ADDL. Observou-se que a rede neural artificial (RNA) construída obteve 94,03% de classificações corretas. Em conclusão, foi possível adotar critérios objetivos para avaliar a depleção linfóide tímica utilizando o sistema ADDL.(AU)

Evaluation of thymic lymphocyte loss of broiler using Digital Analysis of the Lymphoid Depletion System (ADDL) / Avaliação de perda de linfócitos do timo em frangos usando análise digital do sistema de depleção linfóide (ADDL)

The thymus is a lymphoid organ and usually evaluated for the degree of lymphocyte loss with subjective histological techniques. This study aimed to adapt and to apply of the digital analysis of the lymphoid depletion system (ADDL) in the thymus in order to obtain a more accurate analysis. Glucocorticoid was used to induce immunosuppression in 55 broilers at 21 days of age; other 15 broilers were the control group. After euthanasia of the broilers, postmortem examination was made. Both thymic chains were collected and six lobes were selected for histological examination of the degree of lymphocyte depletion (scores 1 to 5) and for submission to all stages of processing by the ADDL system. The artificial constructed neural networks (ANN) obtained 94.03% of correct classifications. In conclusion, it was possible to adopt objective criteria to evaluate thymic lymphoid depletion with the ADDL system.(AU)

O timo é um órgão linfóide, que é normalmente avaliado para o grau de perda de linfócitos a partir de técnicas histológicas subjetivas. Este trabalho teve como objetivo a adaptação e aplicação do sistema de análise digital de depleção linfóide (ADDL) para o timo, a fim de tornar sua análise mais acurada. Glicocorticóides foram utilizados a fim de induzir imunossupressão em 55 aves de 21 dias de idade. Outras 15 aves formaram o grupo controle. Posteriormente, para cada um dos aves, realizou-se a eutanásia e necropsia. Ambas as cadeias do timo foram coletadas e foram selecionadas seis lóbulos para processamento histológico, análise quanto ao grau de depleção linfocitária (escores de 1-5) e submissão a todas as fases do processamento pelo sistema ADDL. Observou-se que a rede neural artificial (RNA) construída obteve 94,03% de classificações corretas. Em conclusão, foi possível adotar critérios objetivos para avaliar a depleção linfóide tímica utilizando o sistema ADDL.(AU)

A gastrocnemius heterotopical transplant model with end-to-side neurorraphy

To present an animal model to assess the effects of end-to-side innervation in the heterotopically transplanted model with reduced chances of neural contamination. The medial portion of the gastrocnemius muscle in wistar male rats was isolated and its pedicle dissected and performed a flap in the abdominal portion. To prevent neural contamination in the abdominal region, the muscle was wrapped with a Goretex(r) sheet. The specimens were divided into 2 groups (G). In G1 was performed an end-to-end suture between tibial nerve of the gastrocnemius and femoral motor nerve and between the saphenous sensory nerve and the motor nerve. In G2 was performed a end-to-side suture between the tibial nerve and the motor femoral and between the tibial nerve and saphenous motor nerve. The specimens were evaluated 60 days later to check the structure of the neurorraphy. Sections were obtained proximal and distal to the coaptation site. The medial gastrocnemius muscle had the advantage of maintaining visible mass after 60 days. No disruption of the coaptation site was found. No major injury to the donor nerve was seen in group 2. The proposed model is simple, reproduciple and prevent the neural contamination in the flap in end-to-side suture.(AU)

Origens e ramificações do plexo braquial no cachorro-do-mato Cerdocyon thous (Linnaeus, 1766) / Origins and ramifications of brachial plexus in the crab-eating-fox Cerdocyon thous (Linnaeus, 1766)

Este estudo teve o objetivo de descrever a origem e ramificação dos nervos de vinte plexos braquiais de cachorro-do-mato (Cerdocyon thous). Dez animais da espécie, obtidos post mortem por atropelamento em rodovias, foram utilizados para o estudo, de acordo com a autorização do IBAMA/SISBIO nº33667-1. Depois de coletados, os cadáveres foram fixados em solução de formaldeído a 50% e conservados por pelo menos 14 dias em solução de formaldeído a 10% antes das dissecções. Após remoção da pele, incisões na musculatura peitoral e afastamento dos membros, acessou-se o espaço axilar e os nervos do plexo tiveram seu trajeto dissecados individualmente até sua inserção muscular. Para melhorar a visualização dos ramos ventrais cervicais e torácicos que originavam cada nervo, removeram-se a musculatura que encobria os forames intervertebrais, os processos transversos e os corpos vertebrais ventralmente, expondo inclusive a medula espinhal. Registros fotográficos e desenhos esquemáticos documentaram a origem e ramificação dos nervos. Os vinte plexos braquiais foram resultantes das conexões entre os ramos ventrais dos três últimos nervos espinhais cervicais (C6, C7 e C8) e do primeiro torácico (T1). Estes ramos derivaram os nervos supra-escapular, subescapular, axilar, musculocutâneo, radial, mediano, ulnar para a musculatura intrínseca e os nervos braquiocefálico, toracodorsal, torácico lateral, torácico longo, peitoral cranial e peitoral caudal para a musculatura extrínseca do membro torácico. Constatou-se que os ramos ventrais de C7 foram os que mais contribuíram na formação de nervos (61,5%), seguido de C8 (55,4%), de T1 (41,2%) e de C6 (30,8%). O teste t de comparação entre as médias, ao nível de significância de 5%, não demonstrou diferenças na origem do plexo quando comparados os antímeros e os sexos. Do total dos 260 nervos dissecados, 68,8% foram originados pela combinação de dois ou três ramos, enquanto apenas 31,2% tiveram formação por um único ramo. A combinação entre C8 e T1 foi a que mais formou nervos para o plexo (23,8%) nesta espécie. Quando comparadas a origem, ramificação e área de inervação do plexo braquial do C. thous com outras espécies domésticas e silvestres, verificou-se maior semelhança com o cão doméstico. Os resultados deste estudo podem embasar o diagnóstico de disfunções neuromusculares, as técnicas de bloqueios anestésicos e análises morfofuncionais comparativas envolvendo esta espécie.(AU)

This study aimed to describe the origin and branching of nerves from twenty brachial plexuses of crab-eating foxes (Cerdocyon thous). Ten animals of the species, obtained post mortem from being run over on highways, were used for the study, in accordance with the authorization from IBAMA / SISBIO No. 33667-1. Once collected, the cadavers were fixed in 50% formaldehyde and kept for at least 14 days in a solution of 10% formaldehyde before dissections. After removal of skin, incisions in breast muscles and reflection of thoracic limbs allowed access to axillary space and the nerves could have trajects dissected individually to each muscle insertion. To improve visualization of the cervical and thoracic ventral roots that originated every single nerve, muscles that covered the intervertebral foramina, transverse processes and vertebral bodies were removed ventrally and the spinal cord exposed. Schematic drawings and photographic records documented the origin and branching of nerves. The twenty plexuses were resulted from connections between the ventral branches of the last three cervical spinal nerves (C6, C7 and C8) and first thoracic (T1). These branches derived the nerves suprascapular, subscapular, axillary, musculocutaneous, radial, median and ulnar to the intrinsic muscles and brachiocephalic, thoracodorsal, lateral thoracic, long thoracic, cranial and caudal pectoral nerves to the extrinsic muscles of the thoracic limb. It was found that the ventral rami of C7 were the main contributors in the formation of nerves (61.5%), followed by C8 (55.4%), T1 (41.2%) and C6 (30.8%). The t-test comparison between means at a significance level of 5% showed no differences in the origin of plexus when compared antimeres and sexes. Of the total of 260 dissected nerves, 68.8% originated by the combination of two or three roots, while only 31.2% were formed by a single root. The combination between C8 and T1 was the most frequent origin of nerves to the plexus (23.8%) in this species. Comparing the origin, branching and innervation area of the brachial plexus in C. thous with other domestic and wild species, there was a greater similarity with the domestic dog. These results may give the anatomical basis to diagnosis of neuromuscular disorders, anesthetic blocks techniques and comparative morphofunctional analyzes involving this species.(AU)

Origem e distribuição anatômica do nervo isquiático de mão-pelada (Procyon cancrivorus) / Origin and anatomical distribution of ischiatic nerve in the crab-eating raccoon (Procyon cancrivorus)

O nervo isquiático é considerado o maior nervo do corpo, pertence tanto ao plexo sacral quanto ao lombossacral em carnívoros, continuando até a extremidade distal do membro pélvico, recebe fiibras dos ramos ventrais do sexto e sétimo nervos lombares e do primeiro nervo sacral. O objetivo do presente estudo é descrever a distribuição do nervo isquiático em mão-pelada (Procyon cancrivorus) e comparar com dados literários de animais domésticos e silvestres. Os animais são procedentes de coleta em rodovias, entre as cidades de Goiânia e Jataí, principalmente na BR 364 ou BR 060. (mortos por acidente) e fiixados em solução aquosa, a 10 por cento de formaldeído. Doados ao Museu de Anatomia Humana e Comparada da UFG (Universidade Federal de Goiás, Campus de Jataí, Proc.CAJ-287/2008). As dissecações e documentação fotográfiica permitiram observar a distribuição do nervo isquiático. O nervo isquiático de mão-pelada inerva o membro pélvico passando entre os músculos glúteo médio e profundo, emitindo ramos para a musculatura da região glútea e da coxa, respectivamente, para os músculos glúteo médio, glúteo bíceps, semimembranáceo, semitendíneo, bíceps femoral, gêmeos, quadrado femoral e adutor magno, emitindo nervo cutâneo lateral e caudal da sura para suprir a pele na superfiície lateral e caudal da perna, respectivamente. Próximo ao meio da coxa bifurca-se em nervo tibial e nervo fiibular comum. O conhecimento anatômico da origem e distribuição do nervo is quiático em mão pelada quando comparado com animais domésticos, silvestres e de fazenda, mostram um padrão de inervação semelhante entre os espécimes.(AU)

The ischiatic nerve is the largest nerve in the body, belongs both to the sacral and lumbosacral plexus in carnivores, continuing until the distal hind limb, and receives fibers from the ventral branch of the sixth and seventh lumbar nerves and the first sacral nerve. We aim to describe the distribution of the sciatic nerve in raccoon (Procyon cancrivorus) and compare with data of literary domestic and wild animals. The animals are coming to collect on highways (killed by accident) and subjected to fixation in aqueous solution, 10 percent formaldehyde. The dissection and photographic documentation (Sony α200 camera, 10.2mpx) shows the distribution of the sciatic nerve. The ischiatic nerve of raccoon innervates the hind limb passing between the middle and deep gluteal muscles, giving off branches to the muscles of the buttock and thigh, respectively, for the gluteus medius, gluteus biceps, semimembranosus, semitendinosus, biceps femoris, twins, quadratus femoris and adductor magnus, sending the lateral cutaneous nerve of the thickness and flow to supply the skin on the lateral surface of the leg and tail, respectively. Near the middle of the thigh nerve bifurcates into the tibial and peroneal nerve. The anatomical knowledge of the pattern of nervous raccoon (Procyon cancrivorus) is of fundamental importance in research to refer to the distribution of the ischiatic nerve, and show no disagreement with the corresponding data in the literature of domestic carnivores.(AU)