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1.
Braz. j. biol ; 82: e239449, 2022. tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-1249271

Resumo

Alpha amylase, catalyzing the hydrolysis of starch is a ubiquitous enzyme with tremendous industrial applications. A 1698 bp gene coding for 565 amino acid amylase was PCR amplified from Geobacillus thermodenitrificans DSM465, cloned in pET21a (+) plasmid, expressed in BL21 (DE3) strain of E. coli and characterized. The recombinant enzyme exhibited molecular weight of 63 kDa, optimum pH 8, optimum temperature 70°C, and KM value of 157.7µM. On pilot scale, the purified enzyme efficiently removed up to 95% starch from the cotton fabric indicating its desizing ability at high temperature. 3D model of enzyme built by Raptor-X and validated by Ramachandran plot appeared as a monomer having 31% α-helices, 15% ß-sheets, and 52% loops. Docking studies have shown the best binding affinity of enzyme with amylopectin (∆G -10.59). According to our results, Asp 232, Glu274, Arg448, Glu385, Asp34, Asn276, and Arg175 constitute the potential active site of enzyme.


A alfa-amilase, que catalisa a hidrólise do amido, é uma enzima ubíqua com imensas aplicações industriais. Um gene de 1698 pb que codifica a amilase de 565 aminoácidos foi amplificado por PCR, a partir de Geobacillus thermodenitrificans DSM-465, clonado no plasmídeo pET21a (+), expresso na cepa BL21 (DE3) de E. coli e caracterizado. A enzima recombinante exibiu peso molecular de 63 kDa, pH ótimo igual a 8, temperatura ótima de 70° C e valor KM de 157,7 µM. Em escala piloto, a enzima purificada removeu com eficiência até 95% de amido do tecido de algodão, indicando sua capacidade de desengomagem em alta temperatura. O modelo 3D da enzima construída por Raptor-X e validada por Ramachandran plot apareceu como um monômero com 31% de hélices alfa, 15% de folhas beta e 52% de loops. Os estudos de docking mostraram melhor afinidade de ligação da enzima com amilopectina (∆G: - 10,59). De acordo com nossos resultados, Asp 232, Glu274, Arg448, Glu385, Asp34, Asn276 e Arg175 constituem o sítio ativo potencial da enzima.


Assuntos
Escherichia coli/genética , alfa-Amilases/genética , alfa-Amilases/metabolismo , Temperatura , Estabilidade Enzimática , Clonagem Molecular , Geobacillus , Concentração de Íons de Hidrogênio
2.
Braz. j. biol ; 82: 1-10, 2022. ilus, tab, graf
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-1468498

Resumo

Alpha amylase, catalyzing the hydrolysis of starch is a ubiquitous enzyme with tremendous industrial applications. A 1698 bp gene coding for 565 amino acid amylase was PCR amplified from Geobacillus thermodenitrificans DSM-465, cloned in pET21a (+) plasmid, expressed in BL21 (DE3) strain of E. coli and characterized. The recombinant enzyme exhibited molecular weight of 63 kDa, optimum pH 8, optimum temperature 70°C, and KM value of 157.7µM. On pilot scale, the purified enzyme efficiently removed up to 95% starch from the cotton fabric indicating its desizing ability at high temperature. 3D model of enzyme built by Raptor-X and validated by Ramachandran plot appeared as a monomer having 31% α-helices, 15% β-sheets, and 52% loops. Docking studies have shown the best binding affinity of enzyme with amylopectin (∆G -10.59). According to our results, Asp 232, Glu274, Arg448, Glu385, Asp34, Asn276, and Arg175 constitute the potential active site of enzyme.


A alfa-amilase, que catalisa a hidrólise do amido, é uma enzima ubíqua com imensas aplicações industriais. Um gene de 1698 pb que codifica a amilase de 565 aminoácidos foi amplificado por PCR, a partir de Geobacillus thermodenitrificans DSM-465, clonado no plasmídeo pET21a (+), expresso na cepa BL21 (DE3) de E. coli e caracterizado. A enzima recombinante exibiu peso molecular de 63 kDa, pH ótimo igual a 8, temperatura ótima de 70° C e valor KM de 157,7 µM. Em escala piloto, a enzima purificada removeu com eficiência até 95% de amido do tecido de algodão, indicando sua capacidade de desengomagem em alta temperatura. O modelo 3D da enzima construída por Raptor-X e validada por Ramachandran plot apareceu como um monômero com 31% de hélices alfa, 15% de folhas beta e 52% de loops. Os estudos de docking mostraram melhor afinidade de ligação da enzima com amilopectina (∆G: - 10,59). De acordo com nossos resultados, Asp 232, Glu274, Arg448, Glu385, Asp34, Asn276 e Arg175 constituem o sítio ativo potencial da enzima.


Assuntos
Escherichia coli/genética , Geobacillus , Vetores Genéticos , alfa-Amilases/genética
3.
Braz. J. Biol. ; 82: 1-10, 2022. ilus, tab, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-32515

Resumo

Alpha amylase, catalyzing the hydrolysis of starch is a ubiquitous enzyme with tremendous industrial applications. A 1698 bp gene coding for 565 amino acid amylase was PCR amplified from Geobacillus thermodenitrificans DSM-465, cloned in pET21a (+) plasmid, expressed in BL21 (DE3) strain of E. coli and characterized. The recombinant enzyme exhibited molecular weight of 63 kDa, optimum pH 8, optimum temperature 70°C, and KM value of 157.7µM. On pilot scale, the purified enzyme efficiently removed up to 95% starch from the cotton fabric indicating its desizing ability at high temperature. 3D model of enzyme built by Raptor-X and validated by Ramachandran plot appeared as a monomer having 31% α-helices, 15% β-sheets, and 52% loops. Docking studies have shown the best binding affinity of enzyme with amylopectin (∆G -10.59). According to our results, Asp 232, Glu274, Arg448, Glu385, Asp34, Asn276, and Arg175 constitute the potential active site of enzyme.(AU)


A alfa-amilase, que catalisa a hidrólise do amido, é uma enzima ubíqua com imensas aplicações industriais. Um gene de 1698 pb que codifica a amilase de 565 aminoácidos foi amplificado por PCR, a partir de Geobacillus thermodenitrificans DSM-465, clonado no plasmídeo pET21a (+), expresso na cepa BL21 (DE3) de E. coli e caracterizado. A enzima recombinante exibiu peso molecular de 63 kDa, pH ótimo igual a 8, temperatura ótima de 70° C e valor KM de 157,7 µM. Em escala piloto, a enzima purificada removeu com eficiência até 95% de amido do tecido de algodão, indicando sua capacidade de desengomagem em alta temperatura. O modelo 3D da enzima construída por Raptor-X e validada por Ramachandran plot apareceu como um monômero com 31% de hélices alfa, 15% de folhas beta e 52% de loops. Os estudos de docking mostraram melhor afinidade de ligação da enzima com amilopectina (∆G: - 10,59). De acordo com nossos resultados, Asp 232, Glu274, Arg448, Glu385, Asp34, Asn276 e Arg175 constituem o sítio ativo potencial da enzima.(AU)


Assuntos
alfa-Amilases/genética , Geobacillus , Escherichia coli/genética , Vetores Genéticos
4.
Braz. j. biol ; 81(2): 387-391, 2021. tab, ilus
Artigo em Inglês | LILACS, VETINDEX | ID: biblio-1153349

Resumo

Poor storage conditions provide favorable environment to stored grain pests for their growth. The bio-pesticides are the best alternatives to synthetic pesticides. Present study was conducted to compare toxicity of Rubus fruticosus and Valeriana jatamansi against granary weevil, Sitophilus granarius and subsequent changes in enzyme activity responsible for grain damage. In current research 5 g of R. fruticosus fruit and V. jatamansi rhizome powders were tested separately against S. granarius, in 50 g wheat whole grains for seven days in comparison with the control. The enzymatic activity of malate dehydrogenase and α-amylase was observed in the cellular extracts of S. granarius. The insects were crushed and homogenized in phosphate-buffer solution and centrifuged at 10000 rpm for 5 minutes. For the enzymatic measurement supernatant was tested; the spectrophotometer was adjusted at 340 nm. The reagents were mixed and incubated at 25 °C for five minutes. The cuvettes were placed in the experimental and reference sites of spectrophotometer and recorded the change in absorbance for 3-4 minutes. There was 5.60% and 14.92% reduction in the activity of malate dehydrogenase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. The alpha amylase enzyme activity was 6.82% reduced and 63.63% increase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. Present study addresses that both plant powders are effective against granary weevil by altering enzyme activities so both the plant powders can be used as bio-pesticides against the stored grains pests.


As más condições de armazenamento proporcionam um ambiente favorável às pragas armazenadas para o crescimento. Os biopesticidas são as melhores alternativas aos pesticidas sintéticos. O presente estudo foi conduzido para comparar a toxicidade de Rubus fruticosus e Valeriana jatamansi contra gorgulhos, Sitophilus granarius e subsequentes alterações na atividade enzimática responsáveis ​​por danos aos grãos. Na pesquisa atual, 5 g de frutos de R. fruticosus e pós de rizoma de V. jatamansi foram testados separadamente contra S. granarius, em 50 g de grãos integrais de trigo por sete dias, em comparação com o controle. A atividade enzimática da malato desidrogenase e α-amilase foi observada nos extratos celulares de S. granarius. Os insetos foram esmagados e homogeneizados em solução tampão fosfato e centrifugados a 10000 rpm por 5 minutos. Para a medição enzimática, o sobrenadante foi testado; o espectrofotômetro foi ajustado a 340 nm. Os reagentes foram misturados e incubados a 25 °C por cinco minutos. As cubetas foram colocadas nos locais experimentais e de referência do espectrofotômetro e registradas as alterações na absorbância por 3-4 minutos. Houve redução de 5,60% e 14,92% na atividade da malato desidrogenase em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. A atividade da enzima alfa amilase foi reduzida em 6,82% e aumento de 63,63% em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. O presente estudo aborda que ambos os pós de plantas são eficazes contra o gorgulho do celeiro, alterando as atividades enzimáticas, de modo que ambos os pós de plantas possam ser usados ​​como biopesticidas contra pragas de grãos armazenados.


Assuntos
Animais , Valeriana/toxicidade , Gorgulhos , Agentes de Controle Biológico/administração & dosagem , Rubus/toxicidade , Controle Biológico de Vetores/métodos , alfa-Amilases , Armazenamento de Alimentos/normas , Malato Desidrogenase
5.
Braz. J. Biol. ; 81(2): 387-391, Mar.-May 2021. ilus, tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-762739

Resumo

Poor storage conditions provide favorable environment to stored grain pests for their growth. The bio-pesticides are the best alternatives to synthetic pesticides. Present study was conducted to compare toxicity of Rubus fruticosus and Valeriana jatamansi against granary weevil, Sitophilus granarius and subsequent changes in enzyme activity responsible for grain damage. In current research 5 g of R. fruticosus fruit and V. jatamansi rhizome powders were tested separately against S. granarius, in 50 g wheat whole grains for seven days in comparison with the control. The enzymatic activity of malate dehydrogenase and alpha-amylase was observed in the cellular extracts of S. granarius. The insects were crushed and homogenized in phosphate-buffer solution and centrifuged at 10000 rpm for 5 minutes. For the enzymatic measurement supernatant was tested; the spectrophotometer was adjusted at 340 nm. The reagents were mixed and incubated at 25 °C for five minutes. The cuvettes were placed in the experimental and reference sites of spectrophotometer and recorded the change in absorbance for 3-4 minutes. There was 5.60% and 14.92% reduction in the activity of malate dehydrogenase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. The alpha amylase enzyme activity was 6.82% reduced and 63.63% increase in R. fruticosus and V. jatamansi, treated insects, respectively. Present study addresses that both plant powders are effective against granary weevil by altering enzyme activities so both the plant powders can be used as bio-pesticides against the stored grains pests.(AU)


As más condições de armazenamento proporcionam um ambiente favorável às pragas armazenadas para o crescimento. Os biopesticidas são as melhores alternativas aos pesticidas sintéticos. O presente estudo foi conduzido para comparar a toxicidade de Rubus fruticosus e Valeriana jatamansi contra gorgulhos, Sitophilus granarius e subsequentes alterações na atividade enzimática responsáveis por danos aos grãos. Na pesquisa atual, 5 g de frutos de R. fruticosus e pós de rizoma de V. jatamansi foram testados separadamente contra S. granarius, em 50 g de grãos integrais de trigo por sete dias, em comparação com o controle. A atividade enzimática da malato desidrogenase e alfa-amilase foi observada nos extratos celulares de S. granarius. Os insetos foram esmagados e homogeneizados em solução tampão fosfato e centrifugados a 10000 rpm por 5 minutos. Para a medição enzimática, o sobrenadante foi testado; o espectrofotômetro foi ajustado a 340 nm. Os reagentes foram misturados e incubados a 25 °C por cinco minutos. As cubetas foram colocadas nos locais experimentais e de referência do espectrofotômetro e registradas as alterações na absorbância por 3-4 minutos. Houve redução de 5,60% e 14,92% na atividade da malato desidrogenase em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. A atividade da enzima alfa amilase foi reduzida em 6,82% e aumento de 63,63% em R. fruticosus e V. jatamansi, insetos tratados, respectivamente. O presente estudo aborda que ambos os pós de plantas são eficazes contra o gorgulho do celeiro, alterando as atividades enzimáticas, de modo que ambos os pós de plantas possam ser usados como biopesticidas contra pragas de grãos armazenados.(AU)


Assuntos
Malato Desidrogenase , alfa-Amilases , Rubus , Gorgulhos , Valeriana , Controle Biológico de Vetores
6.
Acta sci., Anim. sci ; 42: e47546, out. 2020. tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-26671

Resumo

The objective of this study was to investigate the effects of alpha-amylase supplementation on performance and carcass and cuts yield in broilers during finishing phase (21 to 42 days). A completely randomized experimental design with six treatments and eight replications was used: Positive Control (PC): no enzyme; Negative control (NC): without enzyme formulated with 6.34% less energy (- 6.34% ME); NC1: with 250 g ton-1 of alpha-amylase; NC2: with 500 g ton-1 of alpha-amylase; NC3: with 750 g ton-1 of alpha-amylase; NC4: with 1000 g ton-1 of alpha-amylase. Significant differences in weight gain, feed intake and feed conversion were reported with the inclusion of alpha-amylase. The NC treatment with inclusion of amylase provided improvement values of weight gain, feed conversion and feed intake, but do not was similarly in comparison to those obtained in broilers fed a diet that completely met the requirements during this phase. There was no dietary influence on carcass parameters. The use of alphaamylase was effective in improving performance in broilers fed a diet of 200 kcal kg-1 of reduced metabolizable energy.(AU)


Assuntos
Animais , Galinhas/metabolismo , Galinhas/fisiologia , alfa-Amilases/administração & dosagem , alfa-Amilases/análise
7.
Acta sci., Anim. sci ; 42: e47546, out. 2020. tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1459894

Resumo

The objective of this study was to investigate the effects of alpha-amylase supplementation on performance and carcass and cuts yield in broilers during finishing phase (21 to 42 days). A completely randomized experimental design with six treatments and eight replications was used: Positive Control (PC): no enzyme; Negative control (NC): without enzyme formulated with 6.34% less energy (- 6.34% ME); NC1: with 250 g ton-1 of alpha-amylase; NC2: with 500 g ton-1 of alpha-amylase; NC3: with 750 g ton-1 of alpha-amylase; NC4: with 1000 g ton-1 of alpha-amylase. Significant differences in weight gain, feed intake and feed conversion were reported with the inclusion of alpha-amylase. The NC treatment with inclusion of amylase provided improvement values of weight gain, feed conversion and feed intake, but do not was similarly in comparison to those obtained in broilers fed a diet that completely met the requirements during this phase. There was no dietary influence on carcass parameters. The use of alphaamylase was effective in improving performance in broilers fed a diet of 200 kcal kg-1 of reduced metabolizable energy.


Assuntos
Animais , Galinhas/fisiologia , Galinhas/metabolismo , alfa-Amilases/administração & dosagem , alfa-Amilases/análise
8.
Arq. bras. med. vet. zootec ; 68(3): 748-754, tab
Artigo em Português | LILACS, VETINDEX | ID: lil-785698

Resumo

O objetivo deste trabalho foi avaliar o valor nutricional e determinar a energia metabolizável do farelo residual de milho (FRM) sem e com o uso da enzima alfa- amilase. Foi realizado um experimento de metabolismo com 180 pintos machos Cobb com 14 dias, distribuídos em um delineamento inteiramente ao acaso, com seis tratamentos, cinco repetições e seis aves por parcela. As dietas experimentais foram: T1: ração referência (RR), T2: 60% T1 + 40% de FRM, T3: RR + enzima, T4: 60% T1 + 40% de FRM com adição de enzima, T5: RR com substituição de 100% do milho pelo FRM e T6: RR com substituição de 100% do milho pelo FRM com adição de enzima. A composição química do FRM foi: 88,33% de matéria seca (MS), 10,23% de proteína bruta (PB), 15,44% de extrato etéreo (EE), 4,33% de cinzas (CZ) e 4555kcal/kg de energia bruta (EB). Os valores dos coeficientes de metabolizabilidade aparente para o FRM sem e com adição de enzima foram, respectivamente, de 73,37% e 76,33% para MS (p=0,0136), 70,44% e 70,39% para PB (p=0,9595) e de 74,79% e 76,77% para EB (p=0,0128). Os valores da energia metabolizável aparente (EMA) e da EMA corrigida para retenção de nitrogênio (EMAn) para o FRM (na base natural) foram de 3322±19 e 3241±18kcal/kg e de 3334±16 e 3261±17kcal/kg, respectivamente, sem e com adição de enzima. A adição da enzima não teve efeito estatístico significativo sobre os valores de EMA e EMAn, entretanto houve efeito positivo no coeficiente de metabolização da energia.(AU)


The aim of this study was to evaluate the nutritional value and the metabolizable energy of residual corn bran (FRM) with and without the use of alpha amylase enzyme. One metabolism assay was done using 180 Ross male broilers at 14 days of age distributed in an entirely randomized design with six treatments, five replications and six broilers per plot. The assay treatments established were: T1: reference diet (RR), T2: 60% T1 + 40% of FRM, T3: T1 (RR) + enzyme addition, T4: 60% T1 + 40% of FRM with enzyme addition, T5: T1 (RR) with 100% replacement of corn by FRM and T6: T1 (RR) with 100% replacement of corn by FRM with enzyme addition. FRM chemical composition was: 88.33% of dry matter (MS), 10.23% of crude protein (PB), 15.44% of crude fat (EE), 4.33% of ashes (CZ) and 4555Kcal/kg of Gross Energy (EB). The FRM apparent metabolizability coefficients with and without the enzyme addition were, respectively, 73.37% and 76.33% for MS (p=0.0136), 70.44% and 70.39% for PB (p=0.9595) and 74.79% and 76.77% for EB (p=0.0128). The apparent metabolizable energy (EMA) and EMA corrected for nitrogen retention values (as is basis) were 3322±19 and 3241±18Kcal/kg and 3334±16 and 3261±17Kcal/kg, respectively, for with and without the enzyme addition to FRM. The enzyme addition had no statistical significance on the EMA and EMAn values, however, a significant effect on energy metabolizability coefficient was observed.(AU)


Assuntos
Animais , alfa-Amilases , Aminoácidos , Ração Animal/análise , /veterinária , Zea mays/metabolismo , Fenômenos Fisiológicos da Nutrição Animal , Dieta/veterinária , Aves Domésticas
9.
Arq. bras. med. vet. zootec. (Online) ; 68(3): 748-754, 2016. tab
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-338186

Resumo

O objetivo deste trabalho foi avaliar o valor nutricional e determinar a energia metabolizável do farelo residual de milho (FRM) sem e com o uso da enzima alfa- amilase. Foi realizado um experimento de metabolismo com 180 pintos machos Cobb com 14 dias, distribuídos em um delineamento inteiramente ao acaso, com seis tratamentos, cinco repetições e seis aves por parcela. As dietas experimentais foram: T1: ração referência (RR), T2: 60% T1 + 40% de FRM, T3: RR + enzima, T4: 60% T1 + 40% de FRM com adição de enzima, T5: RR com substituição de 100% do milho pelo FRM e T6: RR com substituição de 100% do milho pelo FRM com adição de enzima. A composição química do FRM foi: 88,33% de matéria seca (MS), 10,23% de proteína bruta (PB), 15,44% de extrato etéreo (EE), 4,33% de cinzas (CZ) e 4555kcal/kg de energia bruta (EB). Os valores dos coeficientes de metabolizabilidade aparente para o FRM sem e com adição de enzima foram, respectivamente, de 73,37% e 76,33% para MS (p=0,0136), 70,44% e 70,39% para PB (p=0,9595) e de 74,79% e 76,77% para EB (p=0,0128). Os valores da energia metabolizável aparente (EMA) e da EMA corrigida para retenção de nitrogênio (EMAn) para o FRM (na base natural) foram de 3322±19 e 3241±18kcal/kg e de 3334±16 e 3261±17kcal/kg, respectivamente, sem e com adição de enzima. A adição da enzima não teve efeito estatístico significativo sobre os valores de EMA e EMAn, entretanto houve efeito positivo no coeficiente de metabolização da energia.(AU)


The aim of this study was to evaluate the nutritional value and the metabolizable energy of residual corn bran (FRM) with and without the use of alpha amylase enzyme. One metabolism assay was done using 180 Ross male broilers at 14 days of age distributed in an entirely randomized design with six treatments, five replications and six broilers per plot. The assay treatments established were: T1: reference diet (RR), T2: 60% T1 + 40% of FRM, T3: T1 (RR) + enzyme addition, T4: 60% T1 + 40% of FRM with enzyme addition, T5: T1 (RR) with 100% replacement of corn by FRM and T6: T1 (RR) with 100% replacement of corn by FRM with enzyme addition. FRM chemical composition was: 88.33% of dry matter (MS), 10.23% of crude protein (PB), 15.44% of crude fat (EE), 4.33% of ashes (CZ) and 4555Kcal/kg of Gross Energy (EB). The FRM apparent metabolizability coefficients with and without the enzyme addition were, respectively, 73.37% and 76.33% for MS (p=0.0136), 70.44% and 70.39% for PB (p=0.9595) and 74.79% and 76.77% for EB (p=0.0128). The apparent metabolizable energy (EMA) and EMA corrected for nitrogen retention values (as is basis) were 3322±19 and 3241±18Kcal/kg and 3334±16 and 3261±17Kcal/kg, respectively, for with and without the enzyme addition to FRM. The enzyme addition had no statistical significance on the EMA and EMAn values, however, a significant effect on energy metabolizability coefficient was observed.(AU)


Assuntos
Animais , Zea mays/metabolismo , alfa-Amilases , Ração Animal/análise , Deficiência de Proteína/veterinária , Aminoácidos , Aves Domésticas , Dieta/veterinária , Fenômenos Fisiológicos da Nutrição Animal
10.
R. bras. Ci. avíc. ; 17(2): 227-236, abr.-jun. 2015. tab, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-17109

Resumo

A trial was conducted to evaluate the effects of adding an exogenous -amylase--glucanase complex produced from Bacillus amyloliquefaciens on the growth performance, carcass yield, and relative AME bioequivalence in broilers fed corn-soy diets from 1 to 40 d of age. One thousand seven hundred and fifty one-day-old Cobb x Cobb 500 slow-feathering male broilers were randomly allotted to seven treatments with 10 replicates of 25 birds each as follows: control diet (C); C diet with reduction of 60 (C-60), 90 (C-90), or 120 (C-120) kcal AME/kg; C diet with reduction of 120 kcal AME/kg and supplemented with 200 (C-120-200), 300 (C-120-300), or 400 (C-120-400) mg of the enzyme complex/kg. Each g of the enzyme complex corresponded to 200 kilo-Novo -amylase and 350 fungal -glucanase units. On d 40, eight birds were randomly taken from each pen and processed to evaluate carcass and commercial cuts yields. Percent mortality was not affected by the treatments (p > 0.05). Live performance, as indicated by BW gain (BWG) linearly decreased (p 0.05) and FCR linearly increased with the reduction in AME. Birds fed diets supplemented with the enzyme complex showed weekly improvements in BWG and FCR. There were no effects of the treatments on the yield of the carcass or of commercial cuts; however, abdominal fat was significantly lower (p 0.0343) in birds fed the C-120-400 compared to the C-120 feeding program (1.67% vs. 1.90%); all other treatments were intermediate. Average AME equivalence of the enzyme complex varied weekly. Estimations for the entire period were 40, 46, and 56 kcal for BWG and 58, 76, and 99 kcal AME/kg for FCR (p 0.001) for the diets containing 200, 300, and 400 mg enzyme complex/kg, respectively.(AU)


Assuntos
Animais , Carne/análise , Carne , alfa-Amilases/análise , Galinhas/metabolismo
11.
Rev. bras. ciênc. avic ; 17(2): 227-236, abr.-jun. 2015. tab, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1490148

Resumo

A trial was conducted to evaluate the effects of adding an exogenous -amylase--glucanase complex produced from Bacillus amyloliquefaciens on the growth performance, carcass yield, and relative AME bioequivalence in broilers fed corn-soy diets from 1 to 40 d of age. One thousand seven hundred and fifty one-day-old Cobb x Cobb 500 slow-feathering male broilers were randomly allotted to seven treatments with 10 replicates of 25 birds each as follows: control diet (C); C diet with reduction of 60 (C-60), 90 (C-90), or 120 (C-120) kcal AME/kg; C diet with reduction of 120 kcal AME/kg and supplemented with 200 (C-120-200), 300 (C-120-300), or 400 (C-120-400) mg of the enzyme complex/kg. Each g of the enzyme complex corresponded to 200 kilo-Novo -amylase and 350 fungal -glucanase units. On d 40, eight birds were randomly taken from each pen and processed to evaluate carcass and commercial cuts yields. Percent mortality was not affected by the treatments (p > 0.05). Live performance, as indicated by BW gain (BWG) linearly decreased (p 0.05) and FCR linearly increased with the reduction in AME. Birds fed diets supplemented with the enzyme complex showed weekly improvements in BWG and FCR. There were no effects of the treatments on the yield of the carcass or of commercial cuts; however, abdominal fat was significantly lower (p 0.0343) in birds fed the C-120-400 compared to the C-120 feeding program (1.67% vs. 1.90%); all other treatments were intermediate. Average AME equivalence of the enzyme complex varied weekly. Estimations for the entire period were 40, 46, and 56 kcal for BWG and 58, 76, and 99 kcal AME/kg for FCR (p 0.001) for the diets containing 200, 300, and 400 mg enzyme complex/kg, respectively.


Assuntos
Animais , Carne , Carne/análise , alfa-Amilases/análise , Galinhas/metabolismo
12.
Braz. J. Microbiol. ; 45(1): 97-104, 2014. ilus, tab
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-27611

Resumo

Polygalacturonase and α-amylase play vital role in fruit juice industry. In the present study, polygalacturonase was produced by Aspergillus awamori Nakazawa MTCC 6652 utilizing apple pomace and mosambi orange (Citrus sinensis var mosambi) peels as solid substrate whereas, α-amylase was produced from A. oryzae (IFO-30103) using wheat bran by solid state fermentation (SSF) process. These carbohydrases were decolourized and purified 8.6-fold, 34.8-fold and 3.5-fold, respectively by activated charcoal powder in a single step with 65.1%, 69.8% and 60% recoveries, respectively. Apple juice was clarified by these decolourized and partially purified enzymes. In presence of 1% polygalacturonase from mosambi peels (9.87 U/mL) and 0.4% α-amylase (899 U/mL), maximum clarity (%T660nm = 97.0%) of juice was attained after 2 h of incubation at 50 ºC in presence of 10 mM CaCl2. Total phenolic content of juice was reduced by 19.8% after clarification, yet with slightly higher %DPPH radical scavenging property.(AU)


Assuntos
Aspergillus/enzimologia , Bebidas , Manipulação de Alimentos/métodos , Poligalacturonase/isolamento & purificação , Poligalacturonase/metabolismo , alfa-Amilases/isolamento & purificação , alfa-Amilases/metabolismo , Aspergillus/crescimento & desenvolvimento , Meios de Cultura/química , Sequestradores de Radicais Livres/análise , Fenóis/análise , Temperatura , Fatores de Tempo
13.
Semina ciênc. agrar ; 35(supl.4): 2629-2642, 2014. tab, graf
Artigo em Português | VETINDEX | ID: biblio-1499791

Resumo

It were performed two experiments to evaluate the utilization of industrial enzymes in the evaluation of NDF contents in high-starch materials. In the first experiment, it was verified the accuracy of estimates of neutral detergent fiber (NDF) obtained with the utilization of three industrial enzymes (Termamyl 2X, Liquozyme Supra 2.2.X, and Amylase AG 300L) at different volumes (50, 100, 250 or 500 mL/ sample). Samples were simulated to contain starch at 0, 100, 300, 500 and 1000 g/kg using purified cellulose and starch (n = 240). In the second experiment, samples of corn grain and sorghum grain were evaluated considering the same enzyme types and volumes used in the first experiment adding aliquots without using enzyme (n = 104). There was no significant bias of NDF recovery for simulated samples containing starch up to 300 g/kg. Considering those samples, none difference among enzymes was observed. It was observed a more intense decrease in NDF content according to each enzyme unit added on corn when compared to sorghum. Considering NDF evaluation in samples with mass of 0.7 to 1.0 g, it can be recommended the utilization of 250 mL the ?-amylases Termamyl and 2X Liquozyme 2.2X with activities of 240 and 300 KNU/g, respectively.


Foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar o uso de enzimas industriais na avaliação da fibra em detergente neutro (FDN) de materiais ricos em amido. No primeiro experimento verificou-se a exatidão das estimativas dos teores de FDN obtidas com a utilização de diferentes enzimas industriais (Termamyl 2X, Liquozyme Supra 2.2X e Amylase AG 300L) em diferentes volumes (50, 100, 250 ou 500 ?L/amostra). Foram produzidas amostras contendo amido nas concentrações de 0, 100, 300, 500 e 1000 g/kg, utilizando celulose e amido purificados (n = 240). No segundo experimento foram avaliadas amostras de milho e sorgo, considerando-se os três tipos e os quatro volumes de enzimas utilizados no primeiro experimento, sendo adicionada a avaliação de alíquotas sem a utilização de enzimas (n = 104). Para amostras simuladas com concentração de amido menor ou igual a 300 g/kg não foram verificados vícios significativos sobre a recuperação da FDN, não havendo diferenças entre enzimas. Houve redução mais acentuada do teor de FDN por volume de enzima na amostra de milho em comparação ao sorgo. Para a avaliação dos teores de fibra em detergente neutro recomenda-se o uso das ?-amilases Termamyl 2X e Liquozyme 2.2X com atividades de 240 e 300 KNU/g, respectivamente, em volumes de 250 mL para amostras de massa variando de 0,7 a 1,0 g.


Assuntos
Amido , Carboidratos , Enzimas/administração & dosagem , Fibras na Dieta , alfa-Amilases
14.
Semina Ci. agr. ; 35(supl.4): 2629-2642, 2014. tab, graf
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-26466

Resumo

It were performed two experiments to evaluate the utilization of industrial enzymes in the evaluation of NDF contents in high-starch materials. In the first experiment, it was verified the accuracy of estimates of neutral detergent fiber (NDF) obtained with the utilization of three industrial enzymes (Termamyl 2X, Liquozyme Supra 2.2.X, and Amylase AG 300L) at different volumes (50, 100, 250 or 500 mL/ sample). Samples were simulated to contain starch at 0, 100, 300, 500 and 1000 g/kg using purified cellulose and starch (n = 240). In the second experiment, samples of corn grain and sorghum grain were evaluated considering the same enzyme types and volumes used in the first experiment adding aliquots without using enzyme (n = 104). There was no significant bias of NDF recovery for simulated samples containing starch up to 300 g/kg. Considering those samples, none difference among enzymes was observed. It was observed a more intense decrease in NDF content according to each enzyme unit added on corn when compared to sorghum. Considering NDF evaluation in samples with mass of 0.7 to 1.0 g, it can be recommended the utilization of 250 mL the ?-amylases Termamyl and 2X Liquozyme 2.2X with activities of 240 and 300 KNU/g, respectively.(AU)


Foram realizados dois experimentos com o objetivo de avaliar o uso de enzimas industriais na avaliação da fibra em detergente neutro (FDN) de materiais ricos em amido. No primeiro experimento verificou-se a exatidão das estimativas dos teores de FDN obtidas com a utilização de diferentes enzimas industriais (Termamyl 2X, Liquozyme Supra 2.2X e Amylase AG 300L) em diferentes volumes (50, 100, 250 ou 500 ?L/amostra). Foram produzidas amostras contendo amido nas concentrações de 0, 100, 300, 500 e 1000 g/kg, utilizando celulose e amido purificados (n = 240). No segundo experimento foram avaliadas amostras de milho e sorgo, considerando-se os três tipos e os quatro volumes de enzimas utilizados no primeiro experimento, sendo adicionada a avaliação de alíquotas sem a utilização de enzimas (n = 104). Para amostras simuladas com concentração de amido menor ou igual a 300 g/kg não foram verificados vícios significativos sobre a recuperação da FDN, não havendo diferenças entre enzimas. Houve redução mais acentuada do teor de FDN por volume de enzima na amostra de milho em comparação ao sorgo. Para a avaliação dos teores de fibra em detergente neutro recomenda-se o uso das ?-amilases Termamyl 2X e Liquozyme 2.2X com atividades de 240 e 300 KNU/g, respectivamente, em volumes de 250 mL para amostras de massa variando de 0,7 a 1,0 g.(AU)


Assuntos
Enzimas/administração & dosagem , Fibras na Dieta , Amido , alfa-Amilases , Carboidratos
15.
R. Inst. Adolfo Lutz ; 70(2): 185-92, abr.-jun. 2011. tab, graf
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-8506

Resumo

Os cereais são fontes de inibidores enzimáticos que agem sobre a α-amilase, que alteram a disponibilidade do amido e podem representar uma ferramenta útil para a resistência dos vegetais ao ataque de agentes patogênicos. Neste estudo foram analisadas as características físico-químicas e da fração proteica de aveia, arroz e trigo, cultivados no Rio Grande do Sul, com o objetivo de correlacioná-las, posteriormente, com apresença de inibidores enzimáticos e resistência à contaminação fúngica. As amostras de grãos de aveia, trigo e arroz foram caracterizadas físico-quimicamente e avaliadas quanto à digestibilidade proteica in vitro, solubilidade em sistema aquoso e atividade enzimática de hidrolases. A aveia apresentou maior teor lipídico e proteico e a cultivar UPFA 20 Teixeirinha demonstrou a menor digestibilidade em função do teor de fibras. O maior conteúdo de glutelina foi detectado no arroz cultivar BR 424, acompanhado pelo maior teor de proteína bruta e digestibilidade. As variedades de trigo apresentaram maior atividade de α-amilase e β-amilase, o que sugere que esse cereal é mais susceptível à degradação fúngica quando comparado com arroz e aveia, em vista da maior disponibilidade de açúcares. A atividade inibidora de amilases dos extratos proteicos dos cereais foi maior nos cultivares de aveia.(AU)


Assuntos
Inibidores Enzimáticos , Grão Comestível , Solubilidade , Proteínas , alfa-Amilases , Oryza , Triticum , Avena
16.
Braz. J. Biol. ; 70(2): 405-407, May 2010. ilus, graf
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: vti-2614

Resumo

A modification of the sensitive agar diffusion method was developed for macro-scale determination of alfa-amylase. The proposed modifications lower costs with the utilisation of starch as substrate and agar as supporting medium. Thus, a standard curve was built using alfa-amylase solution from Aspergillus oryzae, with concentrations ranging from 2.4 to 7,500 U.mL-1. Clear radial diffusion zones were measured after 4 hours of incubation at 20 ºC. A linear relationship between the logarithm of enzyme activities and the area of clear zones was obtained. The method was validated by testing α-amylase from barley at the concentrations of 2.4; 60; 300 and 1,500 U.mL-1. The proposed method turned out to be simpler, faster, less expensive and able to determine on a macro-scale α-amylase over a wide range (2.4 to 7,500 U.mL-1) in scientific investigation as well as in teaching laboratory activities.(AU)


Modificações foram propostas ao método sensível de difusão em ágar para a macrodeterminação de alfa-amilase. As modificações propostas diminuem os custos, com a utilização de amido como substrato e ágar como meio solidificante. Assim, foi construída uma curva padrão utilizando uma solução de alfa-amilase de Aspergillus oryzae com concentrações variando de 2,4 a 7.500 U.mL-1. Em seguida, as zonas claras de difusão radial foram mensuradas depois de 4 horas de incubação a 20 ºC. Foi obtida uma relação linear entre o logaritmo da atividade enzimática e os diâmetros das zonas claras. O método foi validado utilizando-se soluções de alfa-amilase de cevada nas concentrações de 2,4; 60; 300 e 1.500 U.mL-1. O método tornou-se mais simples, rápido, com baixo custo e passível de ser utilizado para macrodeterminação de alfa-amilase em ampla faixa (2,4 a 7.500 U.mL-1) na investigação científica e para fins didáticos em aulas práticas.(AU)


Assuntos
alfa-Amilases/administração & dosagem , Estudos de Avaliação como Assunto/métodos
17.
Braz. j. biol ; 84: e253180, 2024. tab, ilus
Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1403865

Resumo

Abstract The present work is based on analysis of inhibitory activity of alpha-amylase inhibitor in selected cultivars of Phaseolus vulgaris of Uttarakhand. Fifteen samples were assessed for inhibitory activity of alpha-amylase inhibitor. Significant variations were found in different cultivars. Crude extract of alpha-amylase inhibitor from sample PUR (Purola) have shown maximum inhibitory activity (70.2 ± 0.84). Crude extract of all the cultivars have shown considerable variations in inhibitory activity in the temperature ranging from 20ºC to 100ºC. Based on inhibitory activity and heat stability profile, the alpha amylase inhibitor was purified from PUR cultivar. The purified inhibitor was found to be stable even at 90ºC with an inhibitory activity of 97.20 ±0.09. The molecular weight of purified inhibitor on Native PAGE (Polyacrylamide gel electrophoresis) was found to be 31kd, consisting of two subunits of 17kd and 14kd on SDS-PAGE.


O presente trabalho é fundamentado na análise da atividade inibitória do inibidor da alfa-amilase em cultivares selecionadas de Phaseolus vulgaris, de Uttarakhand. Quinze amostras foram avaliadas quanto à atividade inibitória do inibidor da alfa-amilase. Variações significativas foram encontradas em diferentes cultivares. O extrato bruto do inibidor da alfa-amilase da amostra PUR (Purola) apresentou atividade inibitória máxima (70,2 ± 0,84). O extrato bruto de todas as cultivares apresentou variações consideráveis ​​na atividade inibitória na temperatura de 20ºC a 100ºC. Com base na atividade inibitória e no perfil de estabilidade ao calor, o inibidor da alfa-amilase foi purificado do cultivar PUR. O inibidor purificado mostrou-se estável mesmo a 90ºC, com uma atividade inibitória de 97,20 ± 0,09. O peso molecular do inibidor purificado em Native PAGE (eletroforese em gel de poliacrilamida) foi de 31kd, consistindo em duas subunidades de 17kd e 14kd em SDS-PAGE.


Assuntos
Cristalografia por Raios X , Phaseolus/efeitos da radiação , alfa-Amilases , Índia
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