Verificação de desempenho do método analítico de determinação de pH em carne, produtos cárneos, pescados e derivados e estimativa de incerteza da medição: em atendimento aos requisitos da ABNT NBR ISO/IEC 17025 / Performance verification of the analytical method of determination of pH in meat, meat products, fish and derivatives and uncertainty of measurement: following the requirement of ISO / IEC 17025

A cada dia torna-se mais importante dispor de técnicas e metodologias confiáveis para quantificação de substâncias, bem como das suas características. Este trabalho objetivou a confirmação do desempenho do método analítico e o cálculo da estimativa da incerteza para determinação de pH em carnes e pescados conforme ISO 2917. O estudo do desempenho do método foi feito através da avaliação dos parâmetros de precisão e exatidão, cujos testes foram realizados em amostras de cárneos e pescados (precisão) e de recuperação para determinação da exatidão do método, comparando-se a recuperação tabelada e a recuperação obtida com a leitura de solução tampão pH 9,05, utilizando um MRC. Estimou-se a incerteza do método tendo como fontes pesagem; incerteza do pHmetro; a recuperação e a precisão; sendo realizada ao final uma comparação interlaboratorial.(AU)

Verificação de desempenho do método analítico de determinação de pH em carne, produtos cárneos, pescados e derivados e estimativa de incerteza da medição: em atendimento aos requisitos da ABNT NBR ISO/IEC 17025 / Performance verification of the analytical method of determination of pH in meat, meat products, fish and derivatives and uncertainty of measurement: following the requirement of ISO / IEC 17025

A cada dia torna-se mais importante dispor de técnicas e metodologias confiáveis para quantificação de substâncias, bem como das suas características. Este trabalho objetivou a confirmação do desempenho do método analítico e o cálculo da estimativa da incerteza para determinação de pH em carnes e pescados conforme ISO 2917. O estudo do desempenho do método foi feito através da avaliação dos parâmetros de precisão e exatidão, cujos testes foram realizados em amostras de cárneos e pescados (precisão) e de recuperação para determinação da exatidão do método, comparando-se a recuperação tabelada e a recuperação obtida com a leitura de solução tampão pH 9,05, utilizando um MRC. Estimou-se a incerteza do método tendo como fontes pesagem; incerteza do pHmetro; a recuperação e a precisão; sendo realizada ao final uma comparação interlaboratorial.

Evaluation of a fungal collection as certified reference material producer and as a biological resource center

Considering the absence of standards for culture collections and more specifically for biological resource centers in the world, in addition to the absence of certified biological material in Brazil, this study aimed to evaluate a Fungal Collection from Fiocruz, as a producer of certified reference material and as Biological Resource Center (BRC). For this evaluation, a checklist based on the requirements of ABNT ISO GUIA34:2012 correlated with the ABNT NBR ISO/IEC17025:2005, was designed and applied. Complementing the implementation of the checklist, an internal audit was performed. An evaluation of this Collection as a BRC was also conducted following the requirements of the NIT-DICLA-061, the Brazilian internal standard from Inmetro, based on ABNT NBR ISO/IEC 17025:2005, ABNT ISO GUIA 34:2012 and OECD Best Practice Guidelines for BRCs. This was the first time that the NIT DICLA-061 was applied in a culture collection during an internal audit. The assessments enabled the proposal for the adequacy of this Collection to assure the implementation of the management system for their future accreditation by Inmetro as a certified reference material producer as well as its future accreditation as a Biological Resource Center according to the NIT-DICLA-061.(AU)

Uncertainty measurement in the homogenization and sample reduction in the physical classification of rice and beans / Incerteza de medição na homogeneização e redução de amostra na classificação física de arroz e feijão

The study aimed to i) quantify the measurement uncertainty in the physical tests of rice and beans for a hypothetical defect, ii) verify whether homogenization and sample reduction in the physical classification tests of rice and beans is effective to reduce the measurement uncertainty of the process and iii) determine whether the increase in size of beans sample increases accuracy and reduces measurement uncertainty in a significant way. Hypothetical defects in rice and beans with different damage levels were simulated according to the testing methodology determined by the Normative Ruling of each product. The homogenization and sample reduction in the physical classification of rice and beans are not effective, transferring to the final test result a high measurement uncertainty. The sample size indicated by the Normative Ruling did not allow an appropriate homogenization and should be increased.(AU)

O trabalho teve como objetivo i) quantificar a incerteza de medição nos ensaios físicos de arroz e feijão para um defeito hipotético; ii) verificar se a homogeneização e redução da amostra nos ensaios de classificação física de arroz e feijão são eficazes para reduzir a incerteza do processo; iii) analisar se o aumento do tamanho da amostra de grãos de feijão aumenta a precisão e reduz a incerteza de medição de forma considerável. Defeitos hipotéticos em arroz e feijão com diferentes níveis de danos foram simulados de acordo com a metodologia de ensaio da Instrução Normativa de cada produto. A homogeneização e redução da amostra na classificação física de arroz e feijão não são eficazes, transferindo para o resultado final do ensaio uma elevada incerteza de medição. O tamanho da amostra indicado pela instrução normativa não permite uma adequada homogeneização e deveria ser aumentado.(AU)

Validation of the multiplex PCR for identification of Brucella spp / Validação da técnica de PCR multiplex para identificação de Brucella spp

A multiplex PCR technique for detection of Brucella spp. in samples of bacterial suspension was validated as a complementary tool in the diagnosis of the disease. This technique allows the characterization of the agent without performing biochemical tests, which greatly reduces the time for a final diagnosis, and provides more security for the analyst by reducing the time of exposure to microorganisms. The validation was performed in accordance with the Manual of Diagnostic Tests from OIE (2008) and following the requirements present in the ABNT NBR ISO/IEC 17025:2005. The mPCR validated in this study identified the different species of Brucella ( Brucella abortus , B. suis , B. ovis e B. melitensis ) of bacterial suspension obtained from the slaughterhouse samples, as well as distinguished the biovars (1, 2 e 4; 3b, 5, 6 e 9) of B. abortus in grouped form and differentiated the field strains from vaccine strains, as a quick, useful and less expensive technique in diagnosis of brucellosis in Brazil.(AU)

Validou-se neste trabalho uma técnica de PCR Multiplex (mPCR) para detecção de Brucella spp. em amostras de suspensão bacteriana, como ferramenta complementar no diagnóstico da doença. Esta técnica possibilita a caracterização do agente sem que seja necessária a realização de testes bioquímicos, o que diminui consideravelmente o tempo para o diagnóstico final, além de oferecer mais segurança ao analista ao diminuir o tempo de exposição ao agente infecioso. A validação foi realizada de acordo com o Manual de Testes de Diagnósticos da OIE (2008), seguindo as exigências presentes na norma de qualidade da ABNT NBR ISO/IEC 17025:2005. A mPCR validada neste trabalho identificou as diferentes espécies de Brucella ( Brucella abortus , B. suis , B. ovis e B. melitensis ) em suspensão bacteriana, obtidas a partir de amostras de frigorífico. Além disso, discriminou os biovares (1, 2 e 4; 3b, 5, 6 e 9) de B. abortus , de forma agrupada, e diferenciou cepa vacinal de cepa de campo, sendo esta uma técnica rápida, útil e de menor custo para o auxílio no diagnóstico de brucelose no Brasil.(AU)

ANÁLISE DAS NÃO-CONFORMIDADES AO LONGO DOS CICLOS DE ACREDITAÇÃO DE LABORATÓRIOS DE ENSAIO DE DOENÇA VEICULADAS POR PRODUTOS DE ORIGEM ANIMAL

Os animais de produção e seus produtos derivados podem ser veiculadores de importantes doenças transmitidas ao homem podendo assim constituir uma ameaça à saúde e segurança alimentar. Juntamente com o aumento significativo da participação brasileira na produção mundial de produtos agropecuários, aumenta também a preocupação com a segurança alimentar sendo fundamental o controle de todas as etapas da cadeia produtiva, incluindo as análises laboratoriais. A falta de confiança no resultado de um laboratório pode ocasionar danos à saúde e constituir um obstáculo ao comércio internacional. Dessa forma, tem sido crescente a exigência de um reconhecimento internacional para os ensaios laboratoriais com a adoção de padrões aceitos internacionalmente. Considerando esse cenário, o Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento (MAPA) passou a exigir a acreditação de laboratórios na Norma ABNT NBR ISO/IEC 17025:2005 Requisitos Gerais para a Competência de Laboratórios de Ensaio e Calibração, como um dos requisitos necessários para o credenciamento na Rede Nacional de Laboratórios Agropecuários, constituindo assim um importante impulsionador da acreditação. O objetivo deste trabalho foi realizar um estudo de frequência das não conformidades (NC) nos processos de acreditação dos laboratórios que realizam ensaios biológicos para diagnóstico de zoonoses que utilizam matrizes oriundas de aves, bovídeos e suídeos e verificar sua performance ao longo das avaliações. Para esse estudo foram selecionados 23 laboratórios na área de saúde animal e coletados dados de 56 relatórios de avaliação no período de 2008 a 2016. Foram identificados e analisados os requisitos da acreditação com maior frequência de NC e também feita análise da performance individual dos laboratórios por meio de estatística descritiva. Na análise da performance geral foram utilizados testes estatísticos para avaliar se houve diferenças significativas nos resultados entre as avaliações. Constatou-se que a maior dificuldade dos laboratórios de saúde animal está na implementação do Sistema de Gestão da Qualidade. Os estudos de frequência demonstraram que houve uma predominância de NC nos Requisitos da Direção (62,7%) da norma ABNT NBR ISO/IEC 17025:2005, relacionados a Controle de Documentos, Sistema de Gestão e Controle de Registros. Nos Requisitos Técnicos houve maior predominância de NC nos requisitos relacionados a Equipamentos e Rastreabilidade da Medição. Os estudos individuais de performance demonstraram que a maioria dos laboratórios (70%) conseguiu reduzir o número de não conformidades demonstrando assim uma evolução positiva na manutenção dos requisitos do Sistema de Gestão e sua consequente adaptação à norma ABNT NBR ISO/IEC 17025 ao longo dos ciclos de avaliação estudados.

Production animals and their by-products may be carriers of important diseases transmitted to man and therefore can represent a threat to food health and safety. With the significant increase of Brazilian participation in the world production of agricultural products, there is also a growing concern with food safety becoming fundamental the control of all stages of the production chain, including laboratory analysis. Lack of confidence in laboratory data can cause health damages and constitute an obstacle to international trade. Therefore, the need for international recognition for laboratory testing has been increasing with the adoption of internationally accepted standards. Considering this scenario, the Ministry of Agriculture, Livestock and Food Supply (MAPA) started demanding the accreditation of laboratories in the standard ABNT NBR ISO / IEC 17025 - General Requirements for the Competence of Testing and Calibration Laboratories, as one of the prerequisites for their recognition by MAPA in the National Network of Agricultural Laboratories , thus consisting of an important driver of accreditation. The objective of this work was to study the frequency of findings in the accreditation processes of laboratories that perform biological tests for the diagnosis of zoonoses that use matrices derived from poultry, bovidae and suidae families and verify their performance throughout the assessments. For this study, 23 laboratories from animal health area were selected and data were collected from 56 assessment reports from 2008 to 2016. Descriptive statistics was used to analyze the individual performance of each lab and also to identify the accreditation requirements with the highest frequency of findings. Statistical tests were applied in the general performance studies, in order to evaluate if there were significant differences in the results between the assessments. It was observed that the greatest difficulty of the animal health laboratories lies in the implementation of the Quality Management System. The frequency studies demonstrated that there was a predominance of findings in the Management Requirements (62.7%) of the ABNT NBR ISO /IEC 17025:2005 standard related to Control of Documents, Management System and Control of Records. In the Technical Requirements there was a predominance of findings in the requirements related to Equipment and Measurement Traceability. Individual performance studies demonstrated that most laboratories (70%) were able to reduce the number of findings confirmed by the result of the statistical test used in the general performance study thus demonstrating a positive evolution in the maintenance of the requirements of the Management System and its consequent adaptation to ABNT NBR ISO / IEC 17025 standard over the accreditation cycles investigated.

VALIDAÇÃO DO ENSAIO GENÉTICO DE DETERMINAÇÃO DE ESPÉCIES DE PESCADO POR DNA BARCODE SEGUNDO ABNT NAR ISSO/IEC 17025 E DESENVOLVIMENTO DE MÉTODO PARA IDENTIFICAÇÃO MOLECULAR DE ESPÉCIES DE SALMÃO E TRUTA POR MINISEQUENCIAMENTO.

O presente estudo descreve a otimização e padronização do método de identificação de espécies de peixes por DNA Barcode bem como a sua validação segundo os requisitos da ABNT NBR ISO/IEC 1705 para acreditação junto ao INMETRO e posteriormente credenciamento junto ao MAPA com o objetivo de prestar o serviço de identificação, podendo auxiliar os empresários na escolha de seus fornecedores e controle de qualidade de seus produtos, bem como os consumidores a terem maior confiança no que estão consumindo. Pode ainda, auxiliar o governo nos testes de fiscalização de produtos para evitar a fraude, além de regular com maior eficácia produtos exportados e importados. Propõe também um novo método para identificação molecular de trutas e salmão em nível de gênero e/ou de espécies. Esse método é baseado na amplificação seguida de minissequenciamento de parte da região D-loop (Região controle) do DNA mitocondrial dos peixes. Por meio desse método, é possível identificar os dois gêneros e as quatros espécies de salmão e truta mais prevalentes, Salmo salar, Oncorhynchus keta, O. gorbuscha e O. mykiss.

The present study describes the optimization and standardization of the method of identification of fish species by DNA Barcode as well as its validation according to the requirements of ABNT NBR ISO / IEC 1705 for accreditation with INMETRO and later accreditation with the MAPA with the objective of providing the identification service, which can help entrepreneurs choose their suppliers and quality control of their products, as well as consumers to have greater confidence in what they are consuming. It can also assist the government in testing products to prevent fraud, as well as regulate products exported and imported more effectively. It also proposes a new method for molecular identification of trout and salmon at the level of genus and / or species. This method is based on amplification followed by minissequencing of part of the D-loop region of the mitochondrial DNA of the fish. By means of this method, it is possible to identify the two genera and the four most prevalent salmon and trout species, Salmo salar, Oncorhynchus keta, O. gorbuscha and O. mykiss.