Use of bone marrow for detection of toxic chemicals for the elucidation of poisoning in forensic veterinary medicine / Uso de medula óssea para detecção de produtos químicos tóxicos para a elucidação de intoxicação em patologia veterinária forense

In forensic toxicology, the detection of toxic chemicals from human bone marrow is often used in cases with an extended post mortem interval; however, in veterinary medicine, this practice is not used. Therefore, this study was performed to investigate the suitability of bone marrow for toxicological analysis in dogs and cats. Six animals with suspected poisoning were selected; the carcasses were sent for necropsy, and the organs were collected and preserved in buffered formalin and processed routinely for histological examination. In addition, bone marrow samples from the femur, humerus, and tibia were collected for toxicological analysis by liquid chromatography coupled to mass spectrometry detection (LC-MS). This analysis confirmed the presence of aldicarb, aldicarb sulfone, asulam, carbendazim, chlorpyrifos, dichlorvos, thifensulfuron methyl and trifloxysulfuron-sodium and associated with clinical symptoms and anatomo-histopathological alterations it was recognized the poisonings. It is expected that this study will promote the toxicological investigation of bone marrow and open avenues for the use of this tissue as an option for the detection of toxic chemicals in cases of forensic pathology.(AU)

Na toxicologia forense, a detecção de substâncias químicas tóxicas provenientes da medula óssea humana é frequentemente usada em casos com intervalo post mortem prolongado; no entanto, na medicina veterinária, essa prática não é utilizada. Portanto, este estudo foi realizado para investigar a utilização da medula óssea nas análises toxicológicas em cães e gatos. Seis animais com suspeita de intoxicação foram selecionados; as carcaças foram enviadas para necropsia e os órgãos foram coletados e preservados em formalina tamponada e processados rotineiramente para exame histológico. Amostras de medula óssea de fêmur, úmero e tíbia foram coletadas para análise toxicológica por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa-massa (LC-MS). A análise por LC-MS confirmou a presença dos agrotóxicos aldicarbe, aldicarbe sulfona, asulam, carbendazim, clorpirifós, diclorvós, tifensulfuron metil e trifloxisulfuron-sódico, e em associação com sinais clínicos e achados anatomo-histopatológicos comprovou-se as intoxicações. Espera-se que este estudo promova a utilização da medula óssea como uma opção na investigação toxicológica para a detecção de produtos químicos tóxicos em casos de patologia forense.(AU)

Use of bone marrow for detection of toxic chemicals for the elucidation of poisoning in forensic veterinary medicine / Uso de medula óssea para detecção de produtos químicos tóxicos para a elucidação de intoxicação em patologia veterinária forense

In forensic toxicology, the detection of toxic chemicals from human bone marrow is often used in cases with an extended post mortem interval; however, in veterinary medicine, this practice is not used. Therefore, this study was performed to investigate the suitability of bone marrow for toxicological analysis in dogs and cats. Six animals with suspected poisoning were selected; the carcasses were sent for necropsy, and the organs were collected and preserved in buffered formalin and processed routinely for histological examination. In addition, bone marrow samples from the femur, humerus, and tibia were collected for toxicological analysis by liquid chromatography coupled to mass spectrometry detection (LC-MS). This analysis confirmed the presence of aldicarb, aldicarb sulfone, asulam, carbendazim, chlorpyrifos, dichlorvos, thifensulfuron methyl and trifloxysulfuron-sodium and associated with clinical symptoms and anatomo-histopathological alterations it was recognized the poisonings. It is expected that this study will promote the toxicological investigation of bone marrow and open avenues for the use of this tissue as an option for the detection of toxic chemicals in cases of forensic pathology.(AU)

Na toxicologia forense, a detecção de substâncias químicas tóxicas provenientes da medula óssea humana é frequentemente usada em casos com intervalo post mortem prolongado; no entanto, na medicina veterinária, essa prática não é utilizada. Portanto, este estudo foi realizado para investigar a utilização da medula óssea nas análises toxicológicas em cães e gatos. Seis animais com suspeita de intoxicação foram selecionados; as carcaças foram enviadas para necropsia e os órgãos foram coletados e preservados em formalina tamponada e processados rotineiramente para exame histológico. Amostras de medula óssea de fêmur, úmero e tíbia foram coletadas para análise toxicológica por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massa-massa (LC-MS). A análise por LC-MS confirmou a presença dos agrotóxicos aldicarbe, aldicarbe sulfona, asulam, carbendazim, clorpirifós, diclorvós, tifensulfuron metil e trifloxisulfuron-sódico, e em associação com sinais clínicos e achados anatomo-histopatológicos comprovou-se as intoxicações. Espera-se que este estudo promova a utilização da medula óssea como uma opção na investigação toxicológica para a detecção de produtos químicos tóxicos em casos de patologia forense.(AU)

Detecção e análise da distribuição de carbamatos por espectrometria de massa DESI em órgãos de ratos experimentalmente intoxicados

Os carbamatos são praguicidas anticolinesterásicos com inúmeras formulações e usos distintos. O aldicarbe e o carbofurano, formulados para uso agrícola, têm frequentemente uso irregular como abortivos, tentativas de suicídio, homicídio e intoxicações de animais domésticos e silvestres. Eles são conhecidos como chumbinho devido à aparência enegrecida e granular, são fornecidos em uma única dose letal a animais junto a alimentos (iscas). Quando encontrados vivos, esses animais apresentam sinais relacionados à inibição da atividade da acetilcolinesterase, que causa estímulo a receptores muscarínicos e nicotínicos, resultando em sinais como diarreia, vômitos, depressão e convulsões. As alterações macroscópicas e histopatológicas são consideradas inespecíficas, sendo observadas congestões em múltiplos órgãos. O diagnóstico da intoxicação é feito a partir da análise de amostras colhidas durante a necropsia e os métodos mais utilizados são a cromatografia em camada delgada (CCD) e a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), além da recém validada cromatografia líquida de alta pressão com detector de matriz de diodos (HPCL-DAD). O método de detecção por espectrometria de massa DESI (desorption electrospray ionization ou ionização por dessorção por eletrospray) pode ser utilizada para esse fim. Nele, um solvente é direcionado para a superfície da amostra para dessorver e ionizar o material. Esses íons são evaporados e, com a ajuda de um software, essa amostra é escaneada e a informação correlacionada com a distribuição espacial da espécie química.

Carbamates are acetylcholinesterase inhibitors with many different formulations and uses. Aldicarb and carbofuran, originally formulated for agricultural use, are frequently employed to cause abortions, homicides, suicides and intoxications of domestic and wild animals. They are known as small lead due to its dark granular presentation, are offered to animals with food (bait) in a single quickly lethal dosage. When found alive, these animals present clinical signs related to the inhibition of the acetylcholinestesase enzyme, which stimulates muscarinic and nicotinic receptors, such as diarrhea, vomits, depression and convulsions. The macroscopic and histopathological changes are considered unspecific; such are blood ingurgitation in many organs. The diagnosis is obtained after the analysis of samples taken during necropsy and the most used methods are the thin layer chromatography (TLC), high performance liquid chromatography (HPLC), and the recently validated High-performance liquid chromatography-diode array detection (HPLC-DAD). The method of desorption electrospray ionization mass spectrometry (DESI-MS) can also be used. In this technique, a solvent is directed towards a sample surface to desorb and ionize the material, which will be evaporated. Using a software, the sample is scanned and the information correlated with the spatial distribution of the chemical specimen.

Avaliação dos efeitos tóxicos dos carbamatos: I. Modelo experimental em ratos Wistar e comparação com a intoxicação exógena intencional em gatos e cães; II. Análise de estabilidade dos compostos e dos seus efeitos nos post mortem imediato e em animais exu

SIQUEIRA, A. de. Avaliação dos efeitos tóxicos dos carbamatos: I. Modelo experimental em ratos Wistar e comparação com a intoxicação exógena intencional em gatos e cães; II. Análise de estabilidade dos compostos e dos seus efeitos no post mortem imediato e em animais exumados. [Evaluation of the toxic effects of carbamates: I. Experimental model in Wistar rats and comparison with the intentional poisoning of cats and dogs; II. Analysis of the stability of the compounds and their effects in the immediate post mortem and in exhumed animals]. 2015. 101 f. Tese (Doutorado em Ciências) Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, 2015. A intoxicação intencional de animais e de pessoas é uma ameaça à saúde e à segurança públicas em todo o mundo. No Brasil, os pesticidas da classe dos carbamatos aldicarbe e carbofurano são facilmente obtidos, e uma única dose letal daqueles é facilmente misturada a alimentos palatáveis e iscas. Foram analisadas as necropsias de 26 gatos e 10 cães, da rotina do Serviço de Patologia Animal da FMVZ-USP, com variados intervalos post mortem e tipos de conservação de carcaça, intoxicados pelos carbamatos aldicarbe e carbofurano, confirmados pela cromatografia de camada delgada (CCD) e cromatografia líquida de alta performance com detector de arranjo de diodos (CLAE-DAD). Foram colhidas as matrizes biológicas para histopatologia e análise toxicológica. CLAE-DAD foi utilizada para detectar o aldicarbe e seus metabólitos, aldicarbe sulfóxido e aldicarbe sulfona, e carbofurano e seu metabólito 3-hidroxicarbofurano. As análises macroscópica e histopatológica revelaram predominantemente achados congestivos e hemorrágicos, o que pode ser resultante dos efeitos tóxicos dos carbamatos e seus metabólitos. Foram feitos 2 experimentos envolvendo exposição a uma dose única de carbofurano e de aldicarbe via gavagem em ratos Wistar. No primeiro, no qual foram avaliados os efeitos no post mortem imediato, 30 animais forma separados nos seguintes grupos: aldicarbe (n=10), carbofurano (n=10) e grupo controle (n=10). Os animais foram filmados para avaliar as alterações clínicas na intoxicação aguda e, quando foram sedados, foi colhido sangue por punção cardíaca para fazer o hemograma, bioquímica sérica, colinesterase e exame toxicológico e, após a eutanásia, foi feita a necropsia e colhido material para o exame histopatológico. Em todos os animais experimentais foi possível ser feita a detecção e a quantificação do aldicarbe e do carbofurano, além das alterações microscópicas congestivas e hemorrágicas, com alterações em parâmetros hematológicos e bioquímicos. No segundo experimento, foram utilizados 30 animais, e o protocolo experimental foi idêntico ao experimento anterior, exceto que, após o óbito, os animais foram colocados em uma caixa com terra nos seguintes grupos: 1 dia, 3 dias, 5 dias, 7 dias e 10 dias, e em cada dia foram agrupados 2 animais intoxicados e 1 controle, sendo que as necropsias foram feitas nestes intervalos. Foram colhidos cérebro, pulmão, fígado e rim ao exame histopatológico e globo ocular, conteúdo gástrico, fígado e músculo esquelético ao exame toxicológico. Foram observadas as alterações tanatológicas e, em todas as matrizes analisadas, puderam ser quantificados o aldicarbe e/ou seus metabólitos aldicarbe sulfóxido e aldicarbe sulfona, bem como o carbofurano e seu metabólito 3-hidroxicarbofurano. Estes estudos mostram a importância da necropsia e da coleta de matrizes diversas ao exame toxicológico, que são complementares e cruciais na investigação de óbitos decorrentes de intoxicações por praguicidas, tanto no post mortem imediato quanto em exumações.

SIQUEIRA, A. de. Evaluation of the toxic effects of carbamates: I. Experimental model in Wistar rats and comparison with the intentional poisoning of cats and dogs; II. Analysis of the stability of the compounds and their effects in the immediate post mortem and in exhumed animals. [Avaliação dos efeitos tóxicos dos carbamatos: I. Modelo experimental em ratos Wistar e comparação com a intoxicação exógena intencional em gatos e cães; II. Análise de estabilidade dos compostos e dos seus efeitos no post mortem imediato e em animais exumados]. 2015. 101 f. Tese. (Doutorado em Ciências) Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, 2015. The intentional poisoning of animals and people is a threat to public health and safety worldwide. In Brazil, the carbamate pesticides aldicarb and carbofuran are easily obtained. A single lethal dose of these carbamates is easily mixed with palatable food or baits. Necropsies and histopathological examinations of 26 cats and 10 dogs poisoned by the carbamates aldicarb and carbofuran were performed in the Service of Animal Pathology of FMVZ-USP, and the poisoning was confirmed by thin layer chromatography (TLC) and high performance liquid chromatography with diode-array detector (HPLC-DAD), with variable post mortem interval and conservation of the carcass. Biological matrices were collected for histopathological and toxicological analysis. HPLC-DAD was utilised to detect aldicarb and its metabolites, aldicarb sulphoxide and aldicarb sulphone, and carbofuran and its metabolite 3-hydroxycarbofuran. Gross and histopathological evaluations showed mainly congestive and haemorrhagic findings, which may result from the toxic effects of the carbamates and their metabolites. Two experimental protocols were performed in Wistar rats by exposing them to a single oral gavage dose to the carbamates aldicarb and carbofuran. The first experiment was performed to evaluate the immediate post mortem effects of carbamates, and 30 rats were divided into three groups: aldicarb (n-=10), carbofuran (n=10) and control (n=10). The animals were filmed to evaluate the clinical signs of poisoning, and they were sedated to collect blood by heart puncture, to perform CBC, serum biochemistry, and to measure serum cholinesterase. After euthanasia, tissues were collected for histopathological evaluation. Aldicarb and carbofuran were detected and quantified in the blood of all experimental groups, and the most common histological changes observed were congestion and haemorrhage. In the second experiment, the experimental protocol was identical to the first one, but the animals were buried in a plastic box with garden soil within 5 groups of 3 animals, two exposed to the same pesticide and 1 control, as follows: day 1, day 3, day 5, day 7 and day 10. The exhumations were performed within these days (1, 3, 5, 7 and 10). We collected brain, lung, liver and kidney to examine the thanatological changes, and the eyeballs, gastric content, liver and skeletal muscle to perform the toxicological screening. Thanatological changes could be observed within and between the groups, and, in all the matrices we could detect aldicarb and its metabolites aldicarb sulphoxide and aldicarb sulphone, and carbofuran and its metabolite 3-hydroxycarbofuran. The studies have shown the importance of the necropsy and the collection of diverse matrices to the toxicological screening, because both are complementary and crucial to the investigation of deaths by pesticides poisoning, even in exhumation, since we could evaluate the thanatological changes and correlate them to the action of the pesticides in the tissues.

Desenvolvimento de métodos analíticos com finalidade forense aplicados à medicina veterinária legal: ênfase na identificação de agentes anticolinesterásicos

As intoxicações letais, via de regra, estão comumente relacionadas com a área médico-legal; alguns agentes tóxicos ocupam lugar de destaque como os principais responsáveis pela ocorrência desses óbitos. Em medicina legal, tanto humana quanto animal, o grande desafio enfrentado é a elucidação da causa mortis e do tempo da ocorrência da morte quando os cadáveres são encontrados, indicando possível exposição aos agentes tóxicos, os quais são adicionados intencionalmente, na maior parte das vezes, com a finalidade de causar danos irreversíveis à vítima. No último relatório do Sistema Nacional de Informações Tóxico- Farmacológicas (SINITOX), no ano de 2012, foram relatadas no Brasil 102.854 intoxicações envolvendo seres humanos e animais, sendo que desse total 1.199 (1,17%) intoxicações foram relatadas em animais. Dentre os principais agentes responsáveis por intoxicação, tanto em seres humanos, como em animais, estão os praguicidas e, em particular, os anticolinesterásicos, sendo importante causa de óbitos intencionais e não intencionais em animais. Métodos de análises toxicológicas envolvendo intoxicações em seres humanos são amplamente estudados e divulgados, o que é menos usual na medicina veterinária legal. Portanto, a existência de laboratórios que atendam as legislações relacionadas as análises toxicológicas forenses, bem como a pesquisa das características da forma de apresentação e do potencial toxicológico dos anticolinesterásicos e o desenvolvimento e validação de técnicas analíticas mais sofisticadas se fazem necessária e contribuirão para os avanços nesse aspecto forense da toxicologia veterinária. Assim, o presente trabalho foi distribuído em quatro capítulos distintos. No primeiro capítulo discute-se o recebimento de amostras e um modelo de formulário de Requisição de Análise Toxicológica num laboratório veterinário de análises toxicológicas que recebe amostras biológicas de interesse forense. O segundo capítulo apresenta a possibilidade de utilização de uma técnica enzimática com a finalidade de avaliar o potencial de inibição dos praguicidas anticolinesterásicos; o método se mostrou eficiente para avaliar a inibição da atividade da acetilcolinesterase (AChE) causada pelo aldicarbe e pelo seu metabólito, o aldicarbe-sulfona. O terceiro capítulo trata-se do teste de dissolução in vitro da forma acabada do grânulo comercial do praguicida aldicarbe (Temik 150®), a fim de avaliar a cinética de liberação do princípio ativo tóxico, bem como a cinética de formação dos seus principais metabólitos ativos, considerando que cães e gatos encontrados mortos com suspeita de intoxicação exógena apresentam chumbinho no conteúdo estomacal. O perfil de dissolução dos grânulos do Temik 150® em meio ácido foi capaz mostrar a presença in vitro dos metabólitos aldicarbe-sulfóxido e o aldicarbe-sulfona, o que não ocorre quando apenas o princípio ativo passou pelo mesmo perfil de dissolução, mostrando que essa forma disponível no comércio contribui para a toxicidade deste praguicida. O quarto capítulo apresenta o desenvolvimento de um método para determinação de praguicidas anticolinesterásicos, bem como os seus produtos biotransformados em diversas matrizes biológicas, baseada em cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) com detecção por arranjo de diodos (DAD). Foi, então, desenvolvido e validado um método de extração e identificação de praguicidas anticolinesterásicos em matrizes biológicas, cujas figuras de mérito atendem a RDC 27 de 2012 da ANVISA (Brasil, 2012). O método permitiu a extração e identificação de aldicarbe e seus metabólitos (aldicarbe-sulfóxido e aldicarbe-sulfona), carbofurano e seu metabólito (3-OH carbofurano), forato e seu metabólito (forato-sulfóxido) e aldicarbe. Esse método foi aplicado em amostras reais encaminhadas ao Laboratório de Diagnóstico Toxicológico (LADTOX) e se mostrou eficiente para identificação de aldicarbe

Lethal poisonings, as a rule, are commonly related to the forensic area; some toxic agents are commonly found as the main agent responsible for these deaths. In forensic medicine, both human and animal, the major challenge faced is the elucidation of cause of death and the time elapsed when the bodies are found, indicating possible exposure to toxic agents, which are intentionally added, most of the times in order to cause irreversible damage to the victim. In the latest report of the Toxic-Pharmacologic National Information System (SINITOX) in the year 2012, 102 854 poisonings involving humans and animals were reported in Brazil, and of this total 1,199 (1.17%) poisonings have been reported in animals. Among the main agents responsible for toxicity, both in humans and in animals, pesticides are common and, in particular, cholinesterase inhibitors, which is important because of intentional and unintentional deaths in animals. Methods of toxicological analyzes involving poisoning in humans are widely studied and published, but less so in legal veterinary medicine. Therefore, the existence of laboratories that meet the legislation related to forensic toxicological analysis and research of the characteristics of the presentation and toxicological potential of cholinesterase inhibitors and the development and validation of more sophisticated analytical techniques are necessary and can contribute to advances in the forensic aspect of veterinary toxicology. Thus, this work was distributed into four distinct chapters. The first chapter discusses the receipt of samples and a Request Form template for Toxicological analysis in a Toxicological analysis veterinary laboratory that receives biological samples of forensic interest. The second section presents the possibility of using an enzymatic technique in order to assess the potential inhibition of cholinesterase inhibitors pesticides; the method was efficient to evaluate the inhibition of the activity of acetylcholinesterase (AChE) caused by aldicarb and its metabolite, aldicarb sulfone. The third chapter it is the in vitro dissolution test of the finished form of commercial bead pesticide aldicarb (Temik 150®) in order to assess the kinetics of release of toxic active ingredient, as well as the formation kinetics of its main metabolites assets, whereas dogs and cats found dead with suspected exogenous intoxication present "pellets" in the stomach contents. The dissolution profile of the Temik 150® beads in acid was able to show the presence of in vitro metabolites aldicarb sulfoxide and aldicarb sulfone, which does not occur when only the active ingredient went through the same dissolution profile, showing that this market-available form contributes to the toxicity of this pesticide. The fourth chapter presents the development of a method for determining cholinesterase inhibitors pesticides, as well as their biotransformation products in various biological matrices, based on high-performance liquid chromatography (HPLC) with diode array detection (DAD).Then, a method of extraction and identification of anticholinesterase pesticides in biological matrices was developed and validated, meeting current standards RDC 27, 2012 ANVISA (Brazil, 2012). The method allowed the extraction and identification of aldicarb and its metabolites (aldicarb sulfoxide and aldicarb sulfone), carbofuran and its metabolite (3-OH carbofuran), phorate and its metabolite (phorate sulfoxide) and aldicarb. This method was applied to real samples sent to the Toxicology Laboratory Diagnostics (LADTOX) and was efficient in aldicarb identification.

Formulações de fungos nematófagos associadas ao controle químico e matéria orgânica no manejo dos nematoides dos citros (Tylenchulus semipenetrans e Pratylenchus jaehni)

Os nematoides dos citros causam perdas consideráveis à citricultura em todo o mundo. Em 1987, foram estimadas perdas de 14,2%. No Brasil, perdas associadas à Tylenchulus semipenetrans foram estimadas em R$ 319 milhões para a safra de 1999/2000 no Estado de São Paulo. Para Pratylenchus jaehni, observou-se perdas de 30% na produção, de pomares de laranja no município de Itápolis-SP. O manejo dessas espécies de nematoides, em pomares infestados é feito, exclusivamente, com uso de aldicarbe (Temik® 150G), contudo o controle biológico pode tornar-se uma alternativa viável de manejo desses nematoides. Os ensaios foram conduzidos nos Municípios de Taquaritinga, Itápolis e Fernandópolis-SP, no período de setembro de 2008 a fevereiro de 2011. Os objetivos desse trabalho foram: avaliar a sobrevivência dos fungos nematófagos nas parcelas que foram tratadas, a campo, com uma formulação de cinco espécies desses agentes de biocontrole; avaliar a influência da adição de matéria orgânica de diferentes fontes para promover o estabelecimento e potencializar a ação dos fungos; estudar o controle químico com doses reduzidas de aldicarbe, associado aos fungos nematófagos no manejo dos nematoides dos citros; avaliar a distribuição espacial nos sentidos norte, sul, leste e oeste de cinco fungos nematófagos aplicados em pomar comercial de citros. A sobrevivência dos fungos nematófagos concluiu-se que as espécies de Arthrobotrys e Monacrosporium já estavam presentes na área e foram recuperadas até a avaliação de 9 meses após a aplicação. No experimento de distribuição geográfica dos fungos nematófagos concluiu-se não existe um padrão de distribuição sob a copa das plantas. Nos experimentos de associação da formulação dos fungos nematófagos com aldicarbe pode-se indicar a aplicação...

The citrus nematodes cause considerable losses to the citrus industry worldwide. In 1987, estimated losses of 14.2%. In Brazil, losses associated with Tylenchulus semipenetrans were estimated at R$ 319 million for the harvest of 1999/2000 in São Paulo. To Pratylenchus jaehni, there was loss of 30% in the production of orange orchards in the county of Itápolis-SP. The management of these species of nematodes in infested orchards is made exclusively with the use of aldicarb (Temik ® 150G), but biological control is emerging as a viable alternative for management of these nematodes. The objectives of this study were to evaluate the survival of nematophagous fungi on plots that were treated, the field, with a formulation of five species of biocontrol agents, to evaluate the influence of the addition of organic matter from different sources to promote the establishment and enhance action of fungi, to study the chemical control with reduced doses of aldicarb associated with nematophagous fungi the management of the citrus nematode; evaluate the spatial distribution in the directions north, south, east and west with applied to five nematophagous fungi in commercial citrus orchards. The survival of nematophagous fungi concluded that the species of Arthrobotrys and Monacrosporium were already present in the area and were recovered up to the evaluation of 9 months after application. In the experiment of geographical distribution of nematophagous fungi concluded there is no standard distribution under the tree canopy. In association experiments the formulation of the nematophagous fungi with aldicarb may indicate the application concurrently with the nematicide aldicarb did not affect the survival of microorganisms in the soil and producing a positive interaction in the control of citrus nematode T. semipenetrans...

Compatibilidade de fungos entomopatogênicos com agroquímicos utilizados no manejo integrado da cultura da cana-de-açúcar

No manejo integrado da cana-de-açúcar são utilizados fungos entomopatogênicos para o controle de insetos e também diversos agroquímicos visando aumento de produtividade. Porém, vários destes agroquímicos podem interferir na sobrevivência de Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a toxicidade dos agroquímicos mais utilizados no manejo da cana-de-açúcar para B. bassiana e M. anisopliae em experimentos feitos com a utilização em meio de cultura e de solo. Nos ensaios com meio de cultura, os fungos foram inoculados em meio de batata, dextrose e ágar (BDA) contendo diversos inseticidas (4), herbicidas (7) e maturadores (3). Avaliou-se o crescimento, a esporulação e a viabilidade, e com base nesses parâmetros fez-se a classificação toxicológica dos agroquímicos. Para verificar se o efeito encontrado em meio de cultura se mantém no ambiente do solo, foram usados os agroquímicos que apresentaram maior toxicidade no ensaio com meio de cultura. Nesta etapa os fungos foram inoculados nos solos argiloso e arenoso esterilizados, contendo os agroquímicos nas doses recomendadas pelos fabricantes, observando-se as seguintes formas de aplicação: T1 - inoculação do fungo no solo 1 hora antes da aplicação do agroquímico; T2 - inoculação do fungo no solo 1 hora após a aplicação do agroquímico; T3 - inoculação do fungo no solo 48 horas após a aplicação do agroquímico. Avaliou-se a sobrevivência dos fungos por um período de sete dias através das unidades formadoras de colônias (UFC) em placas de Petri. Nos ensaios com meios de cultura, os inseticidas à base de Fipronil (Regente®) e Thiametoxan (Actara®) foram compatíveis com os fungos, mas Aldicarbe (Temik®) foi considerado tóxico. A maior parte dos herbicidas avaliados foram classificados como tóxicos aos entomopatógenos, mas aqueles formulados com Imazapir...

In the management of sugarcane are used entomopathogenic fungi to control insects; and various agrochemicals aimed at increasing productivity. However, several of these agrochemicals may interfere with survival of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae. Therefore, this research had the objective to evaluate the toxicity of agrochemicals used in handling of sugarcane to B. bassiana and M. anisopliae in experiments in culture medium and soil. In tests in culture medium, the fungi were inoculated on potato dextrose agar (PDA) containing various insecticides (4), herbicides (7) and ripeners (3). It were evaluated the growth, sporulation and viability, and based on these parameters became the toxicological classification of agrochemicals. To examine whether the effect found in the culture medium remains in the soil environment, were used agrochemicals that showed higher toxicity in culture medium assays. At this stage the fungi were inoculated in clay and sandy soils sterilized, containing the chemicals in the recommended dosages, observing the following application forms: T1 - inoculation of the fungi in soil 1 hour before to herbicide application, T2 - inoculation fungi in the soil 1 hour after herbicide application, T3 - inoculation of the fungi in the soil 48 hours after herbicide application. It was evaluated the survival of the fungi for a period of seven days through the colony forming units (CFU) in Petri dishes. Insecticides based on Fipronil (Regente®) and Thiamethoxan (Actara®) are compatible with the fungi, but Aldicarbe (Temik®) proved to be toxic. Most of the herbicides evaluated were classified as toxic to entomopathogenic fungi, but those made with Imazapir (Contain®), Glyphosate (Glifosato®) and Metribuzin (Sencor®) were considered compatible. Among the ripeners only Glyphosate (Round up®) showed compatibility with B. bassiana and M. anisopliae...

Controle da cochonilha (Orthezia praelonga Douglas, 1891) em laranjeira, com inseticidas granulados

The experiment was carried out on adult orange-trees in the county of Limeira, SP, Brazil. The objective was to evaluate the efficiency of insecticide granules with 15% aldicarb and 5% imidadoprid, applied to the soil, to control the citrus coccid Orthezia praelonga Douglas, 1891. Treatments were six: A) check; B) aldicarb, 100g/pl; C) aldicarb, 65g/pl; D) imidacloprid 100g/pl; E) aldicarb, 130g/pl; F) imidacloprid, 75g/pl of commercial insecticide granules. Six evaluations were made, one previous and other five 07, 20, 34, 49 and 70 days after application. The most efficient treatments were E and B at 49 and 70 days, respectively.

Com o objetivo de se avaliar a eficiência de inseticidas granulados no controle da Orthezia praelonga em laranjeiras, foram empregados o aldicarbe 15% e o imidaclopride 5%, aplicados ao solo. Os tratamentos foram seis, com quatro repetições: A) testemunha; B) aldicarbe, 100g/pl; C) aldicarbe, 65g/pl; D) imidaclopride, 100g/pl; E) aldicarbe, 130g/pl; F) imidaclopride, 75g/pl. Foram feitas seis avaliações: uma prévia e outras cinco após 07, 20, 34, 49 e 70 dias da aplicação. Os melhores tratamentos foram: aldicarbe 100g/pl e aldicarbe, 130g/pl, aos 49 e 70 dias, respectivamente.

Controle da cochonilha (Orthezia praelonga Douglas, 1891) em laranjeira, com inseticidas granulados

The experiment was carried out on adult orange-trees in the county of Limeira, SP, Brazil. The objective was to evaluate the efficiency of insecticide granules with 15% aldicarb and 5% imidadoprid, applied to the soil, to control the citrus coccid Orthezia praelonga Douglas, 1891. Treatments were six: A) check; B) aldicarb, 100g/pl; C) aldicarb, 65g/pl; D) imidacloprid 100g/pl; E) aldicarb, 130g/pl; F) imidacloprid, 75g/pl of commercial insecticide granules. Six evaluations were made, one previous and other five 07, 20, 34, 49 and 70 days after application. The most efficient treatments were E and B at 49 and 70 days, respectively.

Com o objetivo de se avaliar a eficiência de inseticidas granulados no controle da Orthezia praelonga em laranjeiras, foram empregados o aldicarbe 15% e o imidaclopride 5%, aplicados ao solo. Os tratamentos foram seis, com quatro repetições: A) testemunha; B) aldicarbe, 100g/pl; C) aldicarbe, 65g/pl; D) imidaclopride, 100g/pl; E) aldicarbe, 130g/pl; F) imidaclopride, 75g/pl. Foram feitas seis avaliações: uma prévia e outras cinco após 07, 20, 34, 49 e 70 dias da aplicação. Os melhores tratamentos foram: aldicarbe 100g/pl e aldicarbe, 130g/pl, aos 49 e 70 dias, respectivamente.

Número de microrganismos e atividade da urease na presença de aldicarbe e endosulfan no solo

The effect of two concentrations of aldicarb and endosulfan was evaluated through the dilution in series and urease activity methods. Aldicarb was inhibitory to actinomycetes at 2 ppm, but caused a slight stimulation at 20 ppm. A stimulation on the actinomycete population was also observed at 2 and 20 ppm of endosulfan. Aldicarb was inhibitory to bacteria in both concentrations but, on the other hand, endosulfan caused stimulation of bacteria and fungi populations; aldicarb was found to have no effect on fungi number. The protozoa were drasticaly affected by both insecticides. The results have shown that both insecticides had no effect on urease activity.

Avaliou-se o efeito de duas concentrações de inseticidas nematicida aldicarbe e do inseticida acaricida endosulfan na população microbiana do solo, através das técnicas de diluição em série e plaqueamento, e através da medida da atividade da enzima urease. Houve um decréscimo na população de actinomicetos com 2ppm de aldicarbe, entretanto com 20 ppm também para endosulfan, a população desses microrganismos aumentou. Para bactérias a adição de aldicarbe nas duas concentrações resultou em decréscimo da população; no entanto, para 2 ppm verificou-se recuperação no final do bioensaio e, para 20 ppm o efeito foi considerado irreversível. Na presença de endosulfan verificou-se acréscimo da população bacteriana. Aldicarbe não mostrou ter efeito significativo na população de fungos, enquanto que para endosulfan houve um acréscimo da população fúngica. Os dois inseticidas inibiram drasticamente a população de protozoários. Para os dois inseticidas não foi detectado qualquer efeito na atividade da urease durante o período de incubação.

Número de microrganismos e atividade da urease na presença de aldicarbe e endosulfan no solo

The effect of two concentrations of aldicarb and endosulfan was evaluated through the dilution in series and urease activity methods. Aldicarb was inhibitory to actinomycetes at 2 ppm, but caused a slight stimulation at 20 ppm. A stimulation on the actinomycete population was also observed at 2 and 20 ppm of endosulfan. Aldicarb was inhibitory to bacteria in both concentrations but, on the other hand, endosulfan caused stimulation of bacteria and fungi populations; aldicarb was found to have no effect on fungi number. The protozoa were drasticaly affected by both insecticides. The results have shown that both insecticides had no effect on urease activity.

Avaliou-se o efeito de duas concentrações de inseticidas nematicida aldicarbe e do inseticida acaricida endosulfan na população microbiana do solo, através das técnicas de diluição em série e plaqueamento, e através da medida da atividade da enzima urease. Houve um decréscimo na população de actinomicetos com 2ppm de aldicarbe, entretanto com 20 ppm também para endosulfan, a população desses microrganismos aumentou. Para bactérias a adição de aldicarbe nas duas concentrações resultou em decréscimo da população; no entanto, para 2 ppm verificou-se recuperação no final do bioensaio e, para 20 ppm o efeito foi considerado irreversível. Na presença de endosulfan verificou-se acréscimo da população bacteriana. Aldicarbe não mostrou ter efeito significativo na população de fungos, enquanto que para endosulfan houve um acréscimo da população fúngica. Os dois inseticidas inibiram drasticamente a população de protozoários. Para os dois inseticidas não foi detectado qualquer efeito na atividade da urease durante o período de incubação.