Resumo

This study evaluated aspects of the pollen viability of the species Myrceugenia euosma(O. Berg) D. Legrand and Siphoneugena reitziiD. Legrand (Myrtaceae), both native trees with ornamental, medicinal and industrial potential. The study used different concentrations of sucrose to determine pollen viability in vitroand through colorimetric tests with specific dyes (Lugol, carmine acetic, and tetrazolium chloride ­TTC ­0.1 and 0.05%). The two species also hadtheir pollen stored for 30 and 90 days in freezers, refrigerators, and natural environments to check the best method for preserving their viability. The results showed that the highest average germination of M. euosmapollen was in a culture medium containing 30% sucrose. After 30 and 90 days of storage, pollen viability was significantly reduced, having preserved part of its potential only in the freezer. The pollen of S. reitziihad a higher average germination rate in a medium with 20% sucrose, but alsoshowed a reduction in viability after 30 and 90 days of storage. The colorimetric tests showed that the pollen of both species responded to the dyes. However, the viability of Lugol and carmine acetic was considered to be overestimated in relation to the in vitrogermination tests. Tetrazolium at 0.1% proved to be an alternative for checking the viability of S. reitzii pollen. It can be concluded that different concentrations of sucrose affect germination, and that storing pollen at a low temperature can preserve some of its viability in the short term.

Neste trabalho foram avaliados aspectos da viabilidade polínica das espécies Myrceugenia euosma (O. Berg) D. Legrand e Siphoneugena reitzii D. Legrand (Myrtaceae), ambas arbóreas nativas com potencial ornamental, medicinal e industrial. No estudo foram utilizadas diferentes concentrações de sacarose para determinar a viabilidade do pólen in vitroe por meio de testes colorimétricos com corantes específicos (Lugol, carmim acético e tetrazólio ­TTC ­0,1 e 0,05%). As duas espécies tiveram ainda seu pólen armazenado por 30 e 90 dias em freezer, geladeira e ambiente natural para verificar o melhor método para conservar sua viabilidade. Os resultados indicaram que a maior média de germinação do pólen de M. euosma foi em meio de cultura com 30% de sacarose. Após 30 e 90 dias de armazenamento, a viabilidade do pólen foi significativamente reduzida, preservando parte de seu potencial somente em freezer. Já o pólen de S. reitziit eve maior média de germinação em meio com 20% de sacarose, mas também apresentou redução de viabilidade após 30 e 90 dias de armazenamento. Os testes colorimétricos mostraram que houve resposta do pólen, de ambas as espécies, aos corantes, mas a viabilidade acessada com Lugol e carmim acético foi considerada superestimada em relação aos testes de germinação in vitro. O tetrazólio a 0,1% se apresentou como uma alternativa para verificar a viabilidade do pólen de S. reitzii. Conclui-se que diferentes concentrações de sacarose afetam a germinação e que o armazenamento do pólen em baixa temperatura pode conservar parte da viabilidade a curto prazo.

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The therapeutic potential of medicinal plants is known as an alternative in treatment of human affections; in effect, the conventional application of these medicinal sources has several limitations like low bioavailability, solubility and stability, which affect its pharmacological efficacy. In recent decades, extraordinary advances have been made in new drug delivery systems using nanocarriers. This work consisted in determining the in vitro antifungal activity of the methanolic extract of Euphorbia tirucalli formulated in polymeric nanoparticles. The antifungal activity was determined by the microdilution method in 96-well microplates, applying nanoparticles loaded with plant extract (NP-Ext) obtained by nanoprecipitation on clinical isolates of Trichophyton rubrum and T. interdigitalis. Regarding the nanoparticles, the lots used did not present significant differences in their physicochemical characteristics, with a size of 91.885 ± 1.621nm, polydispersity index of 0.152 ± 0.025 and Z-potential of -6.047 ± 0.987. The quantification of the extract in the polymeric matrix was determined by infrared spectroscopy (FTIR), where an efficiency and encapsulation percentage of 22.15 ± 0.82 and 2.95 ± 0.11, respectively, were obtained. The in vitro antifungal activity of the crude and formulated extract was obtained calculating the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of each one; a MIC of 125 µg/mL was obtained against T. rubrum and T. interdigitalis with the crude extract, while a MIC value of 55.55 and 0.1 µg/mL was obtained with NP-Ext, respectively, against these same. Conclusions: biological activity is closely linked to the phytochemical profile of the extract; while the improvement of said potential with the NP-Ext with the dosage form was directly related to the physicochemical characteristics of the nanocarrier.

O potencial terapêutico das plantas medicinais é conhecido como alternativa para o tratamento das afecções humanas. Com efeito, a aplicação convencional dessas fontes medicinais apresenta diversas limitações, como baixa biodisponibilidade, solubilidade e estabilidade, que afetam sua eficácia farmacológica. Nas últimas décadas, avanços extraordinários foram feitos em novos sistemas de liberação de fármacos usando nanocarreadores. Este trabalho consistiu na determinação da atividade antifúngica in vitro do extrato metanólico de Euphorbia tirucalli, formulado em nanopartículas poliméricas. A atividade antifúngica foi determinada pelo método de microdiluição em microplacas de 96 poços, aplicando-se nanopartículas carregadas com extrato vegetal (NP-Ext) obtido por nanoprecipitação sobre isolados clínicos de Trichophyton rubrum e Trichophyton interdigitalis. Em relação às nanopartículas, os lotes utilizados não apresentaram diferenças significativas em suas características físico-químicas, com tamanho de 91,885 ± 1,621 nm, índice de polidispersão de 0,152 ± 0,025 e potencial Z de -6,047 ± 0,987. A quantificação do extrato na matriz polimérica foi determinada por espectroscopia de infravermelho (FT/IR), em que foram obtidas eficiência e porcentagem de encapsulamento de 22,15 ± 0,82 e 2,95 ± 0,11, respectivamente. A atividade antifúngica in vitro do extrato bruto e formulado foi calculada por meio da Concentração Inibitória Mínima (CIM) de cada um. Obteve-se uma CIM de 125 µg/mL contra T. rubrum e T. interdigitalis com o extrato bruto, enquanto o valor de CIM com NP-Ext contra estes mesmos fungos foi de, respectivamente, 55,55 e 0,1 µg/mL. Conclusões: a atividade biológica está intimamente ligada ao perfil fitoquímico do extrato, enquanto a melhora desse potencial com o NP-Ext com a forma farmacêutica esteve diretamente relacionada às características físico-químicas do nanocarreador.

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One of the crucial aspects to be considered for successful in vitro production (IVP) of embryos is the composition of the various media used throughout the stages of this reproductive biotechnology. The cell culture media employed should fulfill the metabolic requirements of both gametes during oocyte maturation and sperm development, as well as the embryo during its initial cell divisions. Most IVP protocols incorporate blood serum into the media composition as a source of hormones, proteins, growth factors, and nutrients. Numerous studies have suggested Platelet-Rich Plasma (PRP) as a substitute for fetal sera in cell culture, particularly for stem cells. Therefore, the objective of this study is to assess the potential use of PRP as a replacement for fetal bovine serum (FBS) during oocyte maturation for in vitro production of bovine embryos. During in vitro maturation (IVM), cumulus-oocyte complexes (COCs) were allocated into the following experimental groups: Group G1 (IVM medium with 5% PRP); Group G2 (MIV medium with 5% PRP and 5% SFB); Group G3 (MIV medium with 5% SFB); and Group G4 (MIV medium without either PRP or SFB). Subsequently, the cumulus-oocyte complexes were fertilized with semen from a single bull, and the resulting zygotes were cultured for seven days. Cleavage and blastocyst formation rates were assessed on days 2 and 7 of embryonic development, respectively. The quality of matured COCs was also evaluated by analyzing the gene expression of HSP70, an important protein associated with cellular stress. The results demonstrated that there were no significant differences among the experimental groups in terms of embryo production rates, both in the initial cleavage stages and blastocyst formation (except for the G4 group, which exhibited a lower blastocyst formation rate on D7, as expected). This indicates that PRP could be a cost-effective alternative to SFB in the IVP of embryos.(AU)

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Microalgal lipids exhibit physical-chemical characteristics similar to vegetable oils, representing alternative sources of long-chain fatty acids for food supplements. However, separating intracellular lipids from microalgae biomass is still challenging due to downstream processing technology limitations that depend on the particular microalgal species and its cultivation conditions. Thus, this work evaluated a multistep process for lipid extraction from Tetradesmus obliquus biomass instead of conventional single extraction methods to improve the lipid yield. The wet biomass was freeze-dried, the cells of the dried biomass were disrupted in a ball mill, and the milled biomass was suspended in water to obtain solid contents of 5 % and 10 % w v­1. Lipids were extracted from the aqueous suspension using the ethanol polar solvent and the hexane apolar solvent with ethanol:hexane ratios of 1:1, 1:2, and 3:5 v v­1. Tests were also carried out on the deproteinized biomass to evaluate the effect of proteins on emulsion formation since deproteinization can avoid emulsion formation. Thus, lipid downstream processing could be designed without an emulsion removal stage. The biomass was deproteinized before lipid extraction with NaOH at pH 10. The highest lipid content was verified for the 1:2 ethanol:hexane ratio, in which up to 42 % of the total lipids were extracted from the biomass. With the 3:5 ratio, the organic and aqueous phases emulsified due to the presence of lipoproteins, which hindered the lipid extraction process. Under the studied conditions, no increase in lipid extraction yield was observed with increases in the solid content or biomass deproteinization.(AU)

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ABSTRACT The aqueous portion of the tear film has been characterized as an essential structure for ocular surface health. Among various assessment tests, some measure the aqueous portion, such as Schirmer Tear Test 1, Meniscometry using a strip, and the test to determine Tear Meniscus Height (TMH). Conversely, few studies have specifically evaluated tear meniscus height, especially those utilizing ocular surface analyzers. Therefore, the aim of this study was to comparatively evaluate the results obtained from employing Tear Meniscus Height (TMH) using an Ocular Surface Analyzer and Schirmer Tear Test 1 (STT-1) in Shih Tzu dogs. To achieve this, the eyes of 18 brachycephalic Shih Tzu dogs of both sexes and varying ages were assessed and compared. The results revealed that the TMH for the right eye was 0.59±0.29mm, and for the left eye was 0.88±0.27mm; p=0.0135. For STT-1, it was found that the right eye had a value of 19.06±4.87mm/min, and the left eye had a value of 23.11±4.80mm/min; p=0.0238. Furthermore, the Pearson correlation test applied between TMH and STT-1 yielded the following results for the right eye (r=0.601; p=0.008) and the left eye (r=-0.032; p=0.8979). The TMH shows potential as an alternative to STT-1 for evaluating the aqueous component of tear film in a similar manner. However, further research is warranted, particularly for establishing reference values for TMH and conducting a comprehensive comparison between STT-1 and TMH. This research is especially important for gathering information that can contribute to the understanding of ophthalmic and systemic conditions that directly influence the physiological composition of tears. Critical for establishing the values obtained when measuring the canine lacrimal meniscus using different techniques is the consideration of associated functional factors.

RESUMO A porção aquosa do filme lacrimal tem sido caracterizada como uma estrutura essencial para a saúde da superfície ocular. Entre vários testes de avaliação, alguns medem a porção aquosa, como o teste lacrimal de Schirmer 1, a meniscometria usando uma tira, e o teste para determinar a altura do menisco lacrimal (TMH). Por outro lado, poucos estudos avaliaram especificamente a altura do menisco lacrimal, especialmente aqueles que utilizam analisadores de superfície ocular. Portanto, o objetivo deste estudo foi avaliar comparativamente os resultados obtidos ao empregar a altura do menisco lacrimal (TMH) usando um analisador de superfície ocular, e o teste lacrimal de Schirmer 1 (STT-1), em cães Shih-Tzu. Para isso, os olhos de 18 cães Shih-Tzu braquiocefálicos, de ambos os sexos e de idades variadas, foram avaliados e comparados. Os resultados revelaram que a TMH, para o olho direito, foi de 0,59±0,29 mm e, para o olho esquerdo, foi de 0,88±0,27mm; P=0,0135. Para o STT-1, verificou-se, no olho direito, 19,06±4,87mm/min e, no olho esquerdo, 23,11±4,80 mm/min; P=0,0238. Além disso, o teste de correlação de Pearson aplicado entre TMH e STT-1 produziu os seguintes resultados para o olho direito (r=0,601; P=0,008) e para o olho esquerdo (r=-0,032; P=0,8979). A TMH mostra potencial como um teste alternativo ao STT-1 para avaliar a porção aquosa do filme lacrimal de maneira semelhante. No entanto, mais pesquisas serão necessárias, especialmente para estabelecer valores de referência para a TMH e realizar uma comparação abrangente entre o STT-1 e a TMH. Esta pesquisa reuniu informações que contribuíram para a compreensão de condições oftálmicas e sistêmicas que afetam diretamente a composição fisiológica das lágrimas. Determinante para estabelecimento, dos valores obtidos ao medir o menisco lacrimal em cães por diferentes técnicas, além de considerar fatores funcionais associados.

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The search for more environmental friendly herbicides, aiming at the control of agricultural pests, combinated with less harmfulness to human health and the environment has grown. An alternative used by researchers is the application of products of secondary plant metabolism, which are investigated due to their potential bioactivities. Thus, species belonging to the Myrtaceae family are potential in these studies, since this family is recognized for having high biological activity. A species belonging to this genus is Psidium cattleyanum, which has a medicinal effect and its fruits are used in human food. Thus, the objective of this research was to evaluate and compare the phyto-cyto-genotoxicity of aqueous and ethanolic leaf extracts of the specie P. cattleyanum, from plant bioassays, as well as to identify the main classes of compounds present in the extracts. For this, the extracts were prepared, characterized and biological tests were carried out by evaluating, in seeds and seedlings of lettuce and sorghum, the variables: percentage of germination, germination speed index, root growth and aerial growth; and in meristematic lettuce cells the variables: mitotic phases, mitotic index, nuclear alterations and chromosomal alterations. Flavones, flavonones, flavonols, flavononols, flavonoids, alkaloids, resins, xanthones and anthraquinone glycoside were characterized in the ethanolic extract. Both evaluated extracts, in the highest concentration, inhibited the initial plant development. All treatments caused alterations in the mitotic phases and inhibited mitotic index. In addition, the treatments promoted an increase in nuclear and chromosomal alterations. The mechanism of action presented was aneugenic, clastogenic and determined in epigenetic alterations. The ethanolic extract was more cytotoxic, since it had a more expressive effect at a lower concentration. Despite the cytotoxicity of the extracts under study, they promoted alterations at lower levels than the glyphosate positive control.

A busca por herbicidas mais amigáveis ​​ao meio ambiente, visando o controle de pragas agrícolas, aliado a uma menor nocividade à saúde humana e ao meio ambiente tem crescido. Uma alternativa utilizada pelos pesquisadores é a aplicação de produtos do metabolismo secundário de plantas, que são investigados em virtude do seu potencial bioativo. Assim, espécies pertencentes à família Myrtaceae são potenciais nestes estudos, uma vez que esta família é reconhecida por possuir alta atividade biológica. Uma espécie pertencente a este gênero é Psidium cattleyanum, que possui efeito medicinal e seus frutos são utilizados na alimentação humana. Assim, o objetivo desta pesquisa foi avaliar e comparar a fitocitogenotoxicidade de extratos foliares aquosos e etanólicos da espécie P. cattleyanum, a partir de bioensaios vegetais, bem como identificar as principais classes de compostos presentes nos extratos. Para isso, os extratos foram preparados e caracterizados e foram realizados testes biológicos avaliando, em sementes e plântulas de alface e sorgo, as variáveis: porcentagem de germinação, índice de velocidade de germinação, crescimento radicular e crescimento aéreo; em células meristemáticas de alface foram avaliadas as variáveis: fases mitóticas, índice mitótico, alterações nucleares e alterações cromossômicas. Flavonas, flavononas, flavonóis, flavononóis, flavonóides, alcalóides, resinas, xantonas e glicosídeo de antraquinona foram caracterizados no extrato etanólico. Ambos os extratos avaliados, na maior concentração, inibiram o desenvolvimento inicial da planta. Todos os tratamentos causaram alterações nas fases mitóticas e inibiram o índice mitótico. Além disso, os tratamentos promoveram aumento de alterações nucleares e cromossômicas. O mecanismo de ação apresentado foi aneugênico, clastogênico e epigenético. O extrato etanólico foi mais citotóxico, pois teve efeito mais expressivo em menor concentração. Apesar da citotoxicidade dos extratos em estudo, eles promoveram alterações em níveis inferiores ao controle positivo glifosato.

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Este estudo aborda a aplicação do óleo essencial de Melaleuca (Melaleuca alternifolia Cheel) no controle de doenças na cultura de feijão. Considerando a importância global e econômica do feijoeiro, a pesquisa investigou o potencial da M. alternifolia, conhecida como árvore-do-chá, para suprimir patógenos. Testesin vitroforam conduzidos, revelando que o óleo essencial (OE) inibiu o crescimento de fungos e bactérias a partir de 0,5%. Experimentos in vivo, com delineamento estatístico casualizado, demonstraram uma redução significativa na incidência e severidade das doenças a partir de 0,5%. Os resultados sugerem que o OE de Melaleuca pode ser uma alternativa eficaz no controle fitossanitário do cultivo de feijão, destacando seu potencial para promover a sustentabilidade e produtividade agrícola.

This study looks at the application of Melaleuca (Melaleuca alternifolia Cheel) essential oil to control diseases in bean crops. Considering the global and economic importance of the bean crop, the research investigated the potential of M. alternifolia, known as the tea tree, to suppress pathogens. In vitro tests were conducted, revealing that the essential oil (EO) inhibited the growth of fungi and bacteria from 0.5%. In vivo experiments, using a randomized statistical design, showed a significant reduction in the incidence and severity of diseases from 0.5%. The results suggest that Melaleuca EO can be an effective alternative for phytosanitary control of bean crops, highlighting its potential to promote sustainability and agricultural productivity.

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Products derived from medicinal plants with antimicrobial activity are considered a promising alternative in the treatment of fungal infections. In this perspective, this study proposed to evaluate the antifungal activity of the dichloromethane fraction of Annona crassiflora Mart. against C. albicans strains. Tests were carried out to determine Minimum Inhibitory Concentration (MIC), Minimum Fungicide Concentration (MFC), microbial growth kinetics, fungal cell wall and membrane mechanisms of action, antifungal biofilm activity, and cytotoxic effects on human erythrocytes. The extract presented MIC and MFC values that ranged from 256 µg/mL to 1,024 µg/mL, with fungicidal activity in the microbial growth kinetics assay. The mechanism of action did not occur through damage to the cell wall or via binding to ergosterol in the membrane, though the fraction presents activity against biofilm and is not cytotoxic in human erythrocytes. The dichloromethane fraction of Annona crassiflora Mart. presented antifungal activity and reduced biofilm growth, without toxicity against human erythrocytes; however, further studies are needed to define its mechanism of action.

Produtos derivados de plantas medicinais com atividade antimicrobiana são considerados uma alternativa promissora no tratamento de infecções fúngicas. Nesta perspectiva, o estudo propôs avaliar a atividade antifúngica da fração diclorometano da Annona crassiflora Mart. frente às cepas de C. albicans. Realizou-se ensaios para determinação de Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração Fungicida Mínima (CFM), interferência sobre a cinética de crescimento microbiano, mecanismos de ação sobre a parede e a membrana celular fúngica, atividade antifúngica sobre o biofilme e os efeitos citotóxicos sobre eritrócitos humanos. Esse extrato apresentou valores da CIM e CFM que variaram de 256 µg/mL a 1,024µg/mL e no ensaio de cinética de crescimento microbiana, demonstrou atividade fungicida. O mecanismo de ação não ocorreu por danos na parece celular, tampouco por via ligação ao ergosterol da membrana. Demonstrou-se, ainda, que a fração tem ação frente ao biofilme e não é citotóxico em eritrócitos humanos. Assim, a fração diclorometano de Annona crassiflora Mart possui atividade antifúngica com capacidade de promover redução do crescimento do biofilme, não demosntrou toxicidade frente eritrócitos humanos, no entanto, necessita-se de mais estudos para definição do seu provável mecanismo de ação.

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The objective of the study was to carry out phytochemical prospection through colorimetric tests to determine the groups of secondary metabolites and also to determine the total content of phenolic compounds (TPC) present in plant extracts methanol (ME), ethyl acetate (EAE), hexane (HE) and dichloromethane (DE) from the leaves of Myrsine umbellata, as well as to investigate the antimicrobial activity against twelve standard ATCC strains by the broth microdilution technique; the antioxidant potential by the DPPH method and the ABTS method and the antibiofilm potential on the biofilm biomass of standard bacteria by the crystal violet technique and tetrazolium salt reduction (MTT) assay. Phytochemical prospection detected the presence of saponins, steroids, alkaloids, anthocyanins, anthocyanidins, flavonoids, and tannins. The results of the quantitative phytochemical estimation revealed a higher content of total phenolics in DE (280.24 ± 0.037 µM GAE g ext. -1) followed by ME (159.01 ± 0.031 µM GAE g ext. -1). The ME showed the best biological activities when compared to the other extracts tested. We observed antimicrobial activity against Gram-positive Staphylococcus epidermidis strain (MIC 3.12 and MBC 6.25), antioxidant percentage of 92.58% against the DPPH radical and 420.31 µM Trolox g ext. -1 against the ABTS radical, finally showed antibiofilm action against Gram-positive strain Staphylococcus aureus, with eradication of the biomass in 92.58%. The results suggest that EM from M. umbellata represents an alternative source of plant bioactives for the development of natura products.

O objetivo do estudo foi realizar a prospecção fitoquímica através de testes colorimétricos para determinar os grupos de metabólitos secundários e também determinar o teor total dos compostos fenólicos (TPC) presente nos extratos vegetais metanol (EM), acetato de etila (EAE), hexano (EH) e diclorometano (ED) das folhas de Myrsine umbellata, bem como investigar a atividade antimicrobiana contra doze cepas padrão ATCC pela técnica de microdiluição em caldo; o potencial antioxidante pelo método DPPH e pelo método ABTS e o potencial antibiofilme sobre a biomassa padrão de biofilmes bacterianos pela técnica do cristal violeta e ensaio de redução do sal de tetrazólio (MTT). A prospecção fitoquímica detectou a presença de saponinas, esteróides, alcaloides, antocianinas, antocianidinas, flavonoides e taninos. Os resultados da estimativa fitoquímica quantitativa revelaram maior teor de fenólicos totais em ED (175,15 ± 0,037 µM GAE g ext. -1) seguido de EM (159,02 ± 0,031 µM GAE g ext. -1). O EM apresentou as melhores atividades biológicas quando comparado aos demais extratos testados, observamos atividade antimicrobiana contra cepa Gram-positiva S. epidermidis (MIC 3.12 e MBC 6.25), percentual antioxidante de 92,58% frente ao radical DPPH e 420,44 mg Trolox g ext. -1 frente ao radical ABTS, por fim apresentou ação antibiofilme contra cepa Gram-positiva S. aureus, com erradicação da biomassa em 92,58%. Os resultados sugerem que o EM de M. umbellata representa uma fonte alternativa de bioativos vegetais para o desenvolvimento de produtos em natura.

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The maize weevil, Sitophilus zeamais Motschulsky, 1855 (Coleoptera: Curculionidae), generally reaches pest status in stored grain. Chemical control is the most used method for population suppression, which can cause adverse impacts, thus creating a need for alternatives such as using inert powders. The present work aims to verify the effect of different concentrations of different types of inert powders on the mortality of S. zeamais in the laboratory. To this end, the experiments were carried out in a completely randomized design, with 13 treatments and four replications, ten adults per replication, where the effect of different inert powders (basalt powder, gypsum powder, and diatomaceous earth) was tested at concentrations of 0.025 g, 0.05 g, 0.1 g and 0.2 g/20 g of corn grains. Variance, normality, and homoscedasticity tests were applied in addition to controlling efficiency (CE%), median lethal time (TL50), and survival curves. All treatments caused mortality in S. zeamais, and all concentrations with diatomaceous earth were more efficient, with 100% mortality at 20 days, followed by the treatment of 0.2 g of gypsum powder/20 g of corn grains, with superior efficiency, to 95% in 20 days and 100% in 30 days. The results indicated that treatments with diatomaceous earth had the highest mortality rate and the best average survival time.

O gorgulho-do-milho, Sitophilus zeamais Motschulsky, 1855 (Coleoptera: Curculionidae), geralmente atinge o status de praga em grãos armazenados. O controle químico é o método mais utilizado para sua supressão populacional, podendo causar impactos adversos, surge assim a necessidade de alternativas como o uso de pós inertes. O presente trabalho tem como objetivo verificar o efeito de diferentes concentrações de diferentes tipos de pós inertes na mortalidade de S. zeamais no laboratório. Para tanto, os experimentos foram realizados em delineamento inteiramente casualizado, com 13 tratamentos e quatro repetições, 10 adultos por repetição. Onde testou-se o efeito de diferentes pós inertes (pó de basalto, pó de gesso e terra diatomácea), nas concentrações de 0,025 g, 0,05 g, 0,1 g e 0,2 g/20 g de grãos de milho. Sendo aplicados testes de variância, normalidade e homocedasticidade, além de eficiência de controle (CE%), tempo letal mediano (TL50) e curvas de sobrevivência. Todos os tratamentos causaram mortalidade em S. zeamais, e todas as concentrações com terra diatomácea foram mais eficientes com 100% de mortalidade aos 20 dias, seguido do tratamento de 0,2 g de pó de gesso/20 g de grãos de milho, com eficiência superior a 95% aos 20 dias e 100% em 30 dias. Os resultados indicaram que os tratamentos com terra diatomácea apresentaram a maior taxa de mortalidade e a melhor média em termos de tempo de sobrevivência.

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Cleft palate is an oronasal communication that can affect the area comprehending the lips and the soft palate. Its clinical signs vary depending on the degree of the defect and the age of the animal, ranging from nasal secretion, coughing, sneezing, halitosis, respiratory difficulty, aspiration pneumonia, and loss of body condition. Its diagnosis is based on inspection of the oral cavity and imaging tests. Palatal defects must be surgically corrected as quickly as possible, using mucosal flaps, grafts, or implants. A desire to evolve alternative treatments for cleft palates drives the search for ways to manufacture customized pieces. 3D printing and biomaterials have enhanced in detail and applicability; combined with design tools and imaging exams, they allow for the making of precise implants and anatomical models for the planning and execution of surgical procedures. This report describes the case of a female, mixed-breed feline treated at a veterinary clinic; it was diagnosed with secondary cleft palate, had a history of falling, and underwent previous palatoplasties with recurrence. A surgical reintervention was performed to implant a 3D-printed TPU film to close its secondary cleft palate.(AU)

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Abstract The β-lactam/lactamase inhibitors (BLBLIs) combination drugs are considered an effective alternative to carbapenems. However, there is a growing concern that the increased use of BLBLIs may lead to increased resistance. This study determined the temporal association between the consumption of BLBLI and the antimicrobial resistance in Gram-negative bacteria. In this retrospective study, electronic data on the Gram-negative bacterial isolates, including A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli, and K. pneumoniae from in-patients and susceptibility testing results were retrieved from the medical records of the clinical laboratory. A linear regression and cross-correlation analysis were performed on the acquired data. Increasing trends (p<0.05) in the consumption of BIBLI and carbapenem with a median use of 27.68 and 34.46 DDD/1000 PD per quarter were observed, respectively. A decreased trend (p=0.023) in the consumption of fluoroquinolones with a median use of 29.13 DDD/1000 PD per quarter was observed. The resistance rate of K. pneumoniae was synchronized with the BIBLI and carbapenem consumptions with a correlation coefficient of 0.893 (p=0.012) and 0.951 (p=0.016), respectively. The cross-correlation analysis against the consumption of BIBLI and meropenem resistant K. pneumoniae was peaked at 0-quarter lag (r=951, p=0.016). There was an increasing trend in the consumption of BLBLI and carbapenems. The increasing trend in the rates of resistance to piperacillin/tazobactam, in line with the increasing consumption of BLBLI, suggests that BLBLI has to be used with caution and cannot be directly considered as a long-term alternative to carbapenems.

Resumo Os medicamentos combinados de β-lactâmicos / inibidores da lactamase (BLBLIs) são considerados uma alternativa eficaz aos carbapenêmicos. No entanto, existe uma preocupação crescente de que o aumento do uso de BLBLIs pode levar ao aumento da resistência. Este estudo determinou a associação temporal entre o consumo de BLBLI e a resistência antimicrobiana em bactérias gram-negativas. Neste estudo retrospectivo, os dados eletrônicos sobre as bactérias gram-negativas isoladas, incluindo A. baumannii, P. aeruginosa, E. coli e K. pneumoniae de pacientes internados e os resultados dos testes de suscetibilidade foram recuperados dos registros médicos do laboratório clínico. Uma regressão linear e análise de correlação cruzada foram realizadas nos dados adquiridos. Foram observadas tendências crescentes (p < 0,05) no consumo de BIBLI e carbapenem com uma mediana de uso de 27,68 e 34,46 DDD/1000 PD por trimestre, respectivamente. Foi observada uma tendência de diminuição (p = 0,023) no consumo de fluoroquinolonas com uma mediana de uso de 29,13 DDD/1000 PD por trimestre. A taxa de resistência de K. pneumoniae foi sincronizada com os consumos de BIBLI e carbapenem com coeficiente de correlação de 0,893 (p = 0,012) e 0,951 (p = 0,016), respectivamente. A análise de correlação cruzada contra o consumo de BIBLI e K. pneumoniae resistente ao meropenem atingiu o pico no intervalo de 0 quarto (r = 951, p = 0,016). Houve uma tendência de aumento no consumo de BLBLI e carbapenêmicos. A tendência crescente nas taxas de resistência a piperacilina/tazobactam, em linha com o consumo crescente de BLBLI, sugere que BLBLI deve ser usado com cautela e não pode ser considerado diretamente como alternativa de longo prazo aos carbapenêmicos.

Resumo

Diversos estudos relacionados à viabilidade e eficiência do uso de materiais alternativos ao globo de Vernon têm sido realizados, principalmente em decorrência ao preço elevado do cobre, componente do instrumento padrão. O objetivo foi avaliar a eficiência da utilização de caneca de alumínio como material alternativo para substituição do globo de Vernon. Para a confecção do protótipo empregou-se uma caneca de alumínio, utilizada em pistola de pintura, com capacidade de 50 ml. A caneca foi pintada com tinta preto-fosca, em duas camadas e um termômetro de mercúrio foi inserido ao centro. Para realização dos testes foram utilizados quatro equipamentos (dois globos de Vernon e dois globos negros alternativos). Foram efetuados testes prévios de comportamento temporal. Estabelecido o tempo, as temperaturas dos globos foram coletadas durante sete dias consecutivos, em três períodos, de 15 minutos cada. Os registros de temperatura foram realizados a cada cinco minutos, num total de 84 por equipamento. Os dados foram submetidos a análise de correlação de Pearson. Os resultados indicaram correlação positiva com o r2 de 0,9927, estabelecendo uma forte correlação entre os resultados de temperatura média do globo negro alternativo e globo de Vernon. Conclui-se que o globo negro alternativo do tipo caneca de alumínio mostrou-se eficiente para aferição da temperatura de globo negro em estudos de ambiência em substituição ao Globo de Vernon.(AU)

Several studies related to the feasibility and efficiency of using alternative materials to Vernon's globe have been carried out, mainly due to the high price of copper, a component of the standard instrument. The objective was to evaluate the efficiency of using an aluminum mug as an alternative material for replacing Vernon's globe. To make the prototype, an aluminum mug was used, used in a paint gun, with a capacity of 50 ml. The mug was painted with matte black paint, in two layers and a mercury thermometer was inserted in the center. Four pieces of equipment were used to carry out the tests (two Vernon globes and two alternative black globes). Previous temporal behavior tests were carried out. Once the time was established, the globes' temperatures were collected for seven consecutive days, in three periods of 15 minutes each. Temperature records were taken every five minutes, a total of 84 per equipment. Data were subjected to Pearson's correlation analysis. The results indicated a positive correlation with the r2 of 0.9927, establishing a strong correlation between the mean temperature results of the alternative black globe and Vernon's globe. It is concluded that the alternative black globe of the aluminum mug type proved tobe efficient for measuring the temperature of the black globe in ambience studies, replacing the Vernon Globe.(AU)

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The evaluation of animal locomotor activity is a behavioral tool widely used to measure the mechanisms underlying a particular disease, disorder, or injury, as well as the effects of exposure to a xenobiotic. The elevated beam test is one of the most used tests in rodents to assess balance and motor coordination. Despite being inexpensive and utilizing a simple apparatus, the high beam test requires a long period of animal training and habituation. The development and characterization of an alternative test, namely the gait test, has the potential to circumvent the time and effort required for animal training, deeming it an effective, inexpensive, and fast method for the analysis of behaviors that are comparably assessed by the high beam test. Therefore, the present study focused on determining the effectiveness and feasibility of the gait test for assessing rodent locomotion and balance as a replacement for the elevated beam test. For this purpose, male rats were divided into three groups: one control group exposed to a saline solution (NaCl 0.9%) and two experimental groups exposed to a single dose of either 0.2 or 1.0 mg/kg of ivermectin intraperitoneally for induction of locomotor disturbance. The high beam and gait tests were performed 15 min and 24 h after drug administration. Results show that the experimental groups had difficulty performing the tasks of either test at both time points analyzed compared to the control groups. At the high beam, experimental animals had trouble maintaining balance and walking. At the gait test, experimental animals showed alterations in gait, which were quantitated by: (a) shortening of step length, (b) decrease of stride, (c) altered step symmetry, and (d) altered stride area. Such results are indicative of compensatory efforts and were comparable between both tests. Altogether, the data indicate that the gait test meets all requirements for assessing motor coordination in rodents. The gait test is therefore validated as a complement to the elevated beam test for the study and analysis of neurodegenerative impairment and other disorders involving neuromuscular disturbances.(AU)

A avaliação da atividade locomotora animal é uma ferramenta comportamental bastante utilizada para mensurar os mecanismos subjacentes a uma determinada doença, distúrbio ou lesão e efeitos da exposição a um xenobiótico. Um dos testes mais utilizados em roedores para avaliar o equilíbrio e coordenação motora é o teste da trave elevada que, apesar de ser um teste barato e que exige um aparato simples, é necessário um longo período de treino e habituação dos animais. O desenvolvimento e caracterização de um teste alternativo, chamado de teste da marcha, tem o potencial de contornar o tempo e o esforço necessários ao treino dos animais, considerando-o um método eficaz, barato e rápido para a análise de comportamentos avaliados comparativamente pelo alto teste de feixe. Portanto, o presente estudo concentrou-se em determinar a eficácia e viabilidade do teste de marcha para avaliação da locomoção e equilíbrio de roedores em substituição ao teste da trave elevada. Para isso, ratos machos foram divididos em 3 grupos, sendo 1 grupo controle exposto à solução salina (NaCl 0,9%) e 2 grupos experimentais expostos à dose única de 0,2 e 1,0 mg/kg de ivermectina por via intraperitoneal para indução da alteração locomotora. Os testes de trave elevada e marcha foram realizados 15 min e 24 h após a administração da droga. Os resultados mostram que os grupos experimentais tiveram dificuldade em realizar as tarefas de qualquer teste em ambos os momentos analisados em comparação com os grupos de controle. Na trave elevada, os animais experimentais tiveram dificuldade em manter o equilíbrio e andar. No teste de marcha, os animais experimentais apresentaram alterações na marcha, que foram quantificadas por: (a) encurtamento do comprimento da passada, (b) diminuição da passada, (c) alteração da simetria da passada e (d) alteração da área da passada. Tais resultados são indicativos de esforços compensatórios e foram comparáveis entre os dois testes. Em conjunto, os dados indicam que o teste de marcha atende a todos os requisitos para avaliação da coordenação motora em roedores. O teste de marcha é, portanto, validado como um complementar para o teste da trave elevada e para o estudo e análise de comprometimento neurodegenerativo e outros distúrbios envolvendo distúrbios neuromusculares.(AU)

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This study evaluated an alternative heating-stirring system in the determination of in vitro ruminal digestibility of dry matter (IVRDMD) of forages using the Tilley and Terry (TT) method. For this purpose, the IVRDMD of three forage species (Marandu, Tifton 85, and Mombasa) was determined by incubating 500 mg of each dried and ground (1 mm) forage in 50-mL rumen inoculum during 48h, followed by quantification of the incubation residue. Two heating-stirring systems were used: i) heating in a water bath at 39°C with manual stirring every two hours (i.e., traditional system); and ii) heating in an oven with controlled temperature at 39°C and automatic agitation (44 rpm; alternative system); there was no effect of the interaction between the heating-stirring system and the type of forage (p = 0.829) on the IVRDMD of forages. The type of heating-stirring system (p = 0.422) did not affect the IVRDMD of forages. Nevertheless, the IVRDMD values of Marandu grass (system i = 598.7 g kg-1 vs system ii = 599.4 g kg-1) were greater (p < 0.001) than Tifton 85 (system i = 392.1 vs g kg-1 vs system ii = 370.7 g kg-1) and Mombasa (system i = 397.4 g kg-1; system ii = 369.7 g kg-1) grasses. In conclusion, the obtained data indicate that the alternative heating-stirring system produces similar results to those obtained using the traditionally heating-stirring system during the determination of the IVRDMD of forages.(AU)

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Fusarium oxysporum is the causal agent of Fusarium wilt in tomato plants. The most common form of control of this disease is through seed chemical treatment. However, the present work presents an alternative method, through the fumigation technique with essential oils. The pathogen F. oxysporum was inoculated on organic cherry tomato seeds through contact with sporulated Petri® plates. Thereafter, seeds were placed in stainless steel crucibles containing a 1.0 x 1.0 cm filter paper adhered to the lid and kept for 24 hours. This paper received 20 µL of each essential oil: tea tree, chia, citronella, lavender, anise basil, clove basil, and deionized water as control. This process was called "seed fumigation by essential oil". After this process, a germination test was carried out in germ boxes with Germitest® paper to verify the variables Germination Speed Index (GSI), Germination (G%), and Mean time to germination (MGT). Mycelial growth was verified in Petri® plates containing PDA medium. The plates containing mycelial growth were observed through scanning electron microscopy to verify possible morphological damage in the hyphae of the pathogen. Tea tree essential oil was the one that allowed the greatest suppression of the phytopathogen. Therefore, new tests were carried out with this specific oil. In germ boxes, tests of germination (G%), Abnormal seedlings count (ASC), and percentage of seedlings with mycelial growth were carried out. In addition, plant elicitation tests were performed in tomato seedlings through the analysis of chitinase, glucanase, and total proteins. All tests were carried out in completely randomized designs with four replications. All data were submitted to the Lilliefors normality test, followed by the analysis of variance, and Tukey's HSD (5% significance) for mean comparison. It was found that tea tree essential oil inhibited the mycelial growth of F. oxysporum without affecting the germination of cherry tomato seeds. Subsequent tests with this oil also demonstrated that there is a reduction in mycelia present in the seeds and a reduction in abnormal seedlings compared to the control. There was no significant difference between the variables tested for plant elicitation.

Fusarium oxysporum é o agente causal da murcha de Fusarium em tomateiro, a forma mais comum de controle da doença é através do tratamento químico das sementes, porém o presente trabalho apresenta uma alternativa, através da técnica de expurgo com óleos essenciais. O patógeno, Fusarium oxysporum, foi inoculado em sementes de tomate cereja orgânicas, através do contato com placas de Petri® esporuladas. Em seguida, estas sementes dotadas do inóculo da doença, foram alocadas em cadinhos de inox contendo um papel filtro de 1 cm x 1cm, aderido à tampa contento 20 uL de cada óleo: óleo essencial de melaleuca, chia, citronela, lavanda, alfavaca anis, alfavaca cravo e água deionizada como testemunha. Esse processo em que as sementes foram alocadas em cadinhos contendo óleo essencial na tampa por um período de 24 horas, foi chamado de expurgo das sementes pelo óleo essencial. Após este processo, foi realizado o teste de germinação em caixas Gerbox com papel Germitest®, verificando as variáveis IVG, %G, TMG; e crescimento micelial em placas de Petri® contendo meio BDA. As placas de crescimento micelial foram observadas em microscópio eletrônico de varredura, a fim de verificar possíveis danos morfológicos nas hifas do patógeno. Após tais ensaios, constatou-se que o óleo essencial de melaleuca foi o que obteve maior supressão do fitopatógeno; e dessa forma novos ensaios laboratoriais foram realizados apenas com este óleo. Em caixas Gerbox realizou-se o teste de germinação (%), contagem de sementes anormais e porcentagem de sementes com micélio, além de testes de indução de resistência em plântulas de tomate, realizado por meio da análise de quitinase, glucanase e proteínas totais. O delineamento adotado em todos os ensaios foi o inteiramente ao acaso, com quatro repetições. Os dados obtidos foram submetidos ao teste de normalidade de Lilliefors, e à análise de variância, com as médias comparadas pelo teste de Tukey (significância de 5%). Constatou-se que o óleo de melaleuca inibiu o crescimento micelial de F. oxysporum, sem prejudicar a germinação das sementes de tomate cereja. Os testes subsequentes com este óleo, também demonstram que há a redução de micélio nas sementes e redução de plântulas anormais em comparação com a testemunha. Não ocorreu diferença significativa entre as variáveis testadas para indução de resistência.

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Rabies is a zoonotic disease caused by the rabies virus (RABV) from the Lyssavirus rabies species. In humans, around 60,000 deaths are registered annually in the world due to the disease, while accurate estimation of rabies incidence among other animals, mainly in wildlife, is unfeasible. In recent decades, considerable improvements in diagnostic techniques for RABV were achieved as new methods were developed and standardized. The Brazilian Ministry of Health (MH) recommends the Direct Fluorescent Antibody test (DFA), Viral Isolation in Mice (VIM) and Viral Isolation in Cell Culture (VICC) techniques as diagnostic routine tests. However, even following animal welfare guidelines and rational use of animals, the substitution of VIM by alternative methods, as VICC, has been encouraged. Here, we evaluate the performance of VICC in our laboratory routine, which revealed to be a highly sensitive and specific technique for detecting RABV enabling its implementation as an alternative method to VIM, according to requirements of the MH. Besides the benefits involving the absence of animal use, a shorter laboratory execution time for diagnosis was required, which is a very important factor for the success of the control measures promoted by surveillance agencies. The Evandro Chagas Institute is the Macroregional Reference for diagnosing rabies in the North of Brazil, and the first laboratory in the region to perform the implementation the VICC technique, as described in the present study.

A raiva é uma zoonose causada pelo Rabies lyssavirus (RABV). Cerca de 60.000 mortes humanas atribuídas à doença são registradas periodicamente em todo o mundo, enquanto uma estimativa precisa da incidência de raiva entre outros animais, principalmente os silvestres, é impossível. A rede de diagnóstico da raiva no Brasil aplica as técnicas de Imunifluorescência Direta (IFD) e isolamento viral em camundongos (IVC). No entanto, nas últimas décadas, melhorias consideráveis ​​nas técnicas de diagnóstico para RABV foram alcançadas à medida que novos métodos foram desenvolvidos e padronizados, visando aumentar a sensibilidade e diminuir o tempo de execução. Além disso, mesmo seguindo as diretrizes de bem-estar animal e uso racional de animais, tem sido incentivada a substituição da IVC por métodos alternativos, como o Isolamento Viral em Cultura de células (IVCC). Neste estudo, avaliamos o desempenho da IVCC em nossa rotina laboratorial, que se revelou uma técnica altamente sensível e específica para detecção de RABV possibilitando sua implementação como método alternativo ao IVC. Além dos benefícios envolvendo a ausência do uso de animais, foi necessário um menor tempo de execução laboratorial para o diagnóstico, o que é um fator muito importante para o sucesso das medidas de controle promovidas pelos órgãos de vigilância.

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This work aimed to evaluate the chemical composition, antioxidant and antimicrobial activities from crude extract and fractions from leaves of Eugenia uniflora Linn. The crude extract was obtained by turbo extraction and their fractions by partitioning. Chromatographic analysis were performed, and the antioxidant capacity was verified by two methods (DPPH• and ABTS•+). The Minimal Inhibitory/Bactericidal Concentration were conducted against twenty-two bacteria, selecting five strains susceptible to extract/fractions and resistant to the antibiotics tested. Ampicillin, azithromycin, ciprofloxacin, and gentamicin were associated with Ethyl Acetate Fraction (EAF) against multidrug-resistant strains in modulatory and checkerboard tests. The chromatographic data showed gallic acid, ellagic acid, and myricitrin in crude extract, with enrichment in the EAF. The electron transfer activity demonstrated in the antioxidant tests is related to the presence of flavonoids. The Gram-positive strains were more susceptible to EAF, and their action spectra were improved by association, comprising Gram-negative bacilli. Synergisms were observed to ciprofloxacin and gentamicin against Pseudomonas aeruginosa colistin-resistant. The results demonstrate that the extract and enriched fraction obtained from the leaves of E. uniflora act as a promising natural alternative against multidrug-resistant bacteria.

Este trabalho teve como objetivo avaliar a composição química, as atividades antioxidantes e antimicrobianas do extrato bruto e frações de folhas de Eugenia uniflora Linn. O extrato bruto foi obtido por turbólise e suas frações por partição. Foram realizadas análises cromatográficas e a capacidade antioxidante foi verificada por dois métodos (DPPH• e ABTS•+). A Concentração Inibitória/Bactericida Mínima foi realizada contra vinte e duas bactérias, selecionando cinco cepas suscetíveis a extração/frações e resistentes aos antibióticos testados. Ampicilina, azitromicina, ciprofloxacina e gentamicina foram associados à Fração Acetato de Etila (FAE) contra cepas multirresistentes em testes modulatórios e de checkboard. Os dados cromatográficos mostraram ácido gálico, ácido elágico e miricitrina em extrato bruto, com enriquecimento na FAE. A atividade de transferência de elétrons demonstrada nos testes antioxidantes está relacionada com a presença de flavonoides. As cepas de Gram-positivas foram mais suscetíveis à FAE, e seus espectros de ação foram melhorados por associação, compreendendo bacilos Gram-negativos. Foram observados sinergismos de ciprofloxacina e gentamicina contra Pseudomonas aeruginosa resistente à colistina. Os resultados demonstram que o extrato e a fração enriquecida obtida das folhas de E. uniflora atuam como uma alternativa natural promissora contra bactérias multirresistentes.

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ABSTRACT: Bovine rabies is endemic in most Brazilian States, including Rio Grande do Sul (RS), which has faced an unprecedented rabies outbreak between 2011 and 2018. We described a real-time reverse transcription quantitative PCR (RT-rtPCR) for detection of rabies virus (RABV) in bovine samples. The primers were designed targeting a highly conserved region of the nucleoprotein (N) gene of RABV obtained from cattle. The detection limit corresponded to 13 DNA copies and the intra- and inter-run repeatability was adequate (CV<9%) in all dilutions tested. Amplification of other pathogens associated with neurological disease in cattle or cross-contamination was not observed. Brain samples from cattle suspicious of rabies (n=21) were tested in triplicate by the RT-rtPCR and by the gold-standard direct fluorescent antibody test (DFAT), resulting in 100% of sensitivity and specificity of the RT-rtPCR. Testing of additional 41 bovine brain samples submitted to the routine DFAT testing yielded 37 (90.2%) concordant results (30 positive/7 negative) and 4 (9.7%) inconclusive in DFAT and RT-rtPCR positive. These results showed a good concordance between the tests and a higher sensitivity of the RT-rtPCR. This assay represents an alternative for RABV detection, either as a confirmatory test or for large-scale diagnosis in endemic regions.

RESUMO: A raiva bovina é endêmica na maioria dos estados brasileiros, inclusive no Rio Grande do Sul (RS), que enfrentou um surto de raiva sem precedentes entre 2011 e 2018. Descrevemos um PCR quantitativo de transcrição reversa em tempo real (RT-rtPCR) para detecção do vírus da raiva (RABV) em bovinos. Os primers foram desenhados visando uma região altamente conservada do gene da nucleoproteína (N) de RABV obtido de bovinos. O limite de detecção correspondeu a 13 cópias de DNA e a repetibilidade intra e inter-ensaios foi adequada (CV <9%) em todas as diluições testadas. Não foi observada amplificação de outros patógenos associados a doenças neurológicas em bovinos ou contaminação cruzada. Amostras de cérebro de bovinos com suspeita de raiva (n = 21) foram testadas em triplicata no RT-rtPCR e pelo teste de anticorpo fluorescente padrão ouro (DFAT), resultando em 100% de sensibilidade e especificidade do RT-rtPCR. O teste de 41 amostras de cérebro bovino adicionais submetidas ao teste de DFAT de rotina rendeu 37 (90,2%) resultados concordantes (30 positivos / sete negativos) e quatro (9,7%) inconclusivos em DFAT e RT-rtPCR positivo. Esses resultados mostraram boa concordância entre os testes e maior sensibilidade do RT-rtPCR. Este ensaio representa uma alternativa para a detecção do vírus da raiva, seja como teste confirmatório ou para diagnóstico em larga escala em regiões endêmicas.

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In vitro embryo production (IVEP) is an extremely important tool for genetic improvement in livestock and it is the biotechnology that has grown the most recently. However, multiple ovulation followed by embryo transfer is still considered the leading biotechnology for embryo production in small ruminants. This review aimed to identify what is still missing for more efficient diffusion of IVEP in small ruminants, going through the IVEP steps and highlighting the main factors affecting the outcomes. Oocyte quality is essential for the success of IVEP and an aspect to be considered in small ruminants is their reproductive seasonality and strategies to mitigate the effect of season. The logistics for oocyte collection from live females is more complex than in cattle, and tools to simplify this collection system and/or to promote an alternative way of recovering oocytes may be an important point in this scenario. The heterogeneity of oocytes collected from growing follicles in live females or from ovaries collected from abattoirs remains a challenge, and there is a demand to standardize/homogenize the hormonal stimulatory protocols and IVM protocols for each source of oocytes. The use of sexed semen is technically possible, however the low market demand associated with the high costs of the sexing process prevents the routine use of this technique, but its higher availability is an important aspect aiming for greater dissemination of IVEP. New noninvasive approaches for embryo selection are key factors since the selection for transfer or cryopreservation is another difficulty faced among laboratories. Embryo selection is based on morphological traits, although these are not necessarily reliable in predicting pregnancy. Several issues described in this review must be considered by researchers in other to promote the diffusion of IVEP in small ruminants.(AU)