Leucogram, fibrinogen, plasmatic proteins and glucose evaluation in dairy cows before and after calving / Avaliação do leucograma, fibrinogênio, proteínas plasmáticas e glicose em vacas leiteiras no pré e pós-parto imediato

Immunological deficiency observed during the transition period in dairy cows promotes development of puerperal diseases. Thus, the research aimed to evaluate hematological (leukogram) and biochemical (glucose, fibrinogen, and total proteins) parameters in Holstein cows (n = 44) before (day -20) and after (day +20) parturition and the possibility of identifying initial signs of reproductive illness, thereby assisting the professional in decision making. There was a difference in the number of total leukocytes, which decreased postpartum (8,888.4 cells/mm3). There was no difference in neutrophils at both time points. Females who presented high concentration of fibrinogen (5.2 g/L) and total plasmatic proteins (78.9 g/L) at postpartum presented retention of fetal appendages and later uterine disease. These results are consistent with the literature on antepartum leukocytosis and inflammation indicated by increased fibrinogen and plasmatic protein and differ in terms of neutrophil behavior. Thus, laboratory assays can be complementary tools to physical examination, aiding in the diagnosis and identification of changes even before the appearance of clinical signs in animals, which is necessary for the prevention of metabolic and infectious disorders.

A deficiência imunológica observada no período de transição em vacas leiteiras suscetibiliza o desenvolvimento de enfermidades puerperais. Desta forma, a pesquisa objetivou a avaliação hematológica (leucograma) e bioquímica (glicose, fibrinogênio e proteínas totais) de vacas Holandesas (n=44) próximas (dia -20) e após (dia +20) o parto e a possibilidade de identificar sinais de enfermidades de ordem reprodutiva ao seu início, auxiliando o profissional na tomada de decisões. Houve diferença no número de leucócitos totais, que diminuíram no pós-parto (8.888,4 células/mm3). Não houve diferença para neutrófilos nos dois momentos. Fêmeas que manifestaram concentração de fibrinogênio (5,2 g/L) e proteínas plasmáticas totais (78,9 g/L) elevados ao pós-parto apresentaram quadro de retenção dos anexos fetais e posteriormente enfermidade uterina. Esses resultados corroboram com o demonstrado na literatura para leucocitose pré-parto e inflamação indicada pelo aumento de fibrinogênio e proteína plasmática e não difere quanto ao comportamento dos neutrófilos. Desta forma, os exames laboratoriais surgem como ferramentas complementares ao exame físico, permitindo auxiliar no diagnóstico e identificar alterações antes mesmo do aparecimento dos sinais clínicos nos animais, sendo necessários para prevenção dos transtornos metabólicos e infecciosos.

Leucogram, fibrinogen, plasmatic proteins and glucose evaluation in dairy cows before and after calving / Avaliação do leucograma, fibrinogênio, proteínas plasmáticas e glicose em vacas leiteiras no pré e pós-parto imediato

Immunological deficiency observed during the transition period in dairy cows promotes development of puerperal diseases. Thus, the research aimed to evaluate hematological (leukogram) and biochemical (glucose, fibrinogen, and total proteins) parameters in Holstein cows (n = 44) before (day -20) and after (day +20) parturition and the possibility of identifying initial signs of reproductive illness, thereby assisting the professional in decision making. There was a difference in the number of total leukocytes, which decreased postpartum (8,888.4 cells/mm3). There was no difference in neutrophils at both time points. Females who presented high concentration of fibrinogen (5.2 g/L) and total plasmatic proteins (78.9 g/L) at postpartum presented retention of fetal appendages and later uterine disease. These results are consistent with the literature on antepartum leukocytosis and inflammation indicated by increased fibrinogen and plasmatic protein and differ in terms of neutrophil behavior. Thus, laboratory assays can be complementary tools to physical examination, aiding in the diagnosis and identification of changes even before the appearance of clinical signs in animals, which is necessary for the prevention of metabolic and infectious disorders.(AU)

A deficiência imunológica observada no período de transição em vacas leiteiras suscetibiliza o desenvolvimento de enfermidades puerperais. Desta forma, a pesquisa objetivou a avaliação hematológica (leucograma) e bioquímica (glicose, fibrinogênio e proteínas totais) de vacas Holandesas (n=44) próximas (dia -20) e após (dia +20) o parto e a possibilidade de identificar sinais de enfermidades de ordem reprodutiva ao seu início, auxiliando o profissional na tomada de decisões. Houve diferença no número de leucócitos totais, que diminuíram no pós-parto (8.888,4 células/mm3). Não houve diferença para neutrófilos nos dois momentos. Fêmeas que manifestaram concentração de fibrinogênio (5,2 g/L) e proteínas plasmáticas totais (78,9 g/L) elevados ao pós-parto apresentaram quadro de retenção dos anexos fetais e posteriormente enfermidade uterina. Esses resultados corroboram com o demonstrado na literatura para leucocitose pré-parto e inflamação indicada pelo aumento de fibrinogênio e proteína plasmática e não difere quanto ao comportamento dos neutrófilos. Desta forma, os exames laboratoriais surgem como ferramentas complementares ao exame físico, permitindo auxiliar no diagnóstico e identificar alterações antes mesmo do aparecimento dos sinais clínicos nos animais, sendo necessários para prevenção dos transtornos metabólicos e infecciosos.(AU)

Agenesia unilateral del cuerno uterino y ovario derecho de gato: un informe de caso / Unilateral agenesis of the uterine horn and right ovary in cat: a case report / Agenesia unilateral do corno uterino e ovário direito em gata: relato de caso

El objetivo fue describir el hallazgo de agenesia uterina y ovárica en gata sometida a procedimiento para la mastectomía total de ovariohisterectomía y el tratamiento de la hiperplasia mamaria felina fibroepitelial. En este artículo se describe el caso de un felino, femenino, sin raza definida, de siete meses de edad con histórico de hinchazón de las mamas después de la administración de una dosis de anticonceptivos de acetato de medroxiprogesterona. De acuerdo con la historia clínica y el examen físico establecido el diagnóstico de la hiperplasia fibroepitelial felina. Para el tratamiento era la mastectomía completa y ovariohisterectomía (OSH). Durante la cirugía se comprobó la ausencia del cuerno uterino y ovario derecho. Este tipo de defecto puede pasar desapercibido porque los animales pueden no mostrar clínica y mostrar un comportamiento estral regular, siendo en su mayoría incidental encontrar y asume importancia, especialmente para la posibilidadde la aparición de diversas anomalías órganos con el mismo origen embriológico.(AU)

This study aimed to describe the finding of uterine and ovarian agenesis in cat after a total mastectomy procedure and ovariosalpingohisterectomy for treatment of feline mammary fibroepithelial hyperplasia. This paper described the case of a feline, female, without defined breed standard, seven months of age, it presented description of increase of mammary volume, after the administration of a dose of contraceptive medroxyprogesterone acetate. According to medical history and physical examination the diagnosis of feline fibroepithelial hyperplasia was established. For the treatment was opted to realize a complete mastectomy and ovaryhysterectomy (OSE). During the surgery was found the absence of the horn uterine and right ovary. This type of defect can go undetected since the animal may not present clinical and demonstrate the normal estrous behavior, and most often an incidental finding and assumes importance, especially for the possibility of the occurrence of various organs anomalies with the same origin embryological.(AU)

Objetivou-se descrever o achado de agenesia uterina e ovariana em gata submetida a procedimento de mastectomia total e ovariosalpingohisterectomia para tratamento de hiperplasia fibroepitelial mamária felina. O presente trabalho descreveu o caso de um felino, fêmea, sem padrão de raça definido, sete meses de idade com histórico de aumento de volume mamário após administração de uma dose de contraceptivo acetato de medroxiprogesterona. De acordo com a anamnese e o exame físico foi estabelecido o diagnóstico de hiperplasia fibroepitelial felina. Para o tratamento foi instituído a mastectomia total e a ovariosalpingohisterectomia (OSH). Durante o ato operatório constatou-se a ausência do corno uterino e ovário direito. Esse tipo de malformação pode passar despercebido já que o animal pode não apresentar alterações clínicas e demonstrar comportamento éstrico normal, sendo na maioria das vezes um achado incidental e assume importância, principalmente, pela possiblidade da ocorrência de anomalias de órgãos distintos com a mesma origem embriológica.(AU)

Agenesia unilateral del cuerno uterino y ovario derecho de gato: un informe de caso / Unilateral agenesis of the uterine horn and right ovary in cat: a case report / Agenesia unilateral do corno uterino e ovário direito em gata: relato de caso

El objetivo fue describir el hallazgo de agenesia uterina y ovárica en gata sometida a procedimiento para la mastectomía total de ovariohisterectomía y el tratamiento de la hiperplasia mamaria felina fibroepitelial. En este artículo se describe el caso de un felino, femenino, sin raza definida, de siete meses de edad con histórico de hinchazón de las mamas después de la administración de una dosis de anticonceptivos de acetato de medroxiprogesterona. De acuerdo con la historia clínica y el examen físico establecido el diagnóstico de la hiperplasia fibroepitelial felina. Para el tratamiento era la mastectomía completa y ovariohisterectomía (OSH). Durante la cirugía se comprobó la ausencia del cuerno uterino y ovario derecho. Este tipo de defecto puede pasar desapercibido porque los animales pueden no mostrar clínica y mostrar un comportamiento estral regular, siendo en su mayoría incidental encontrar y asume importancia, especialmente para la posibilidadde la aparición de diversas anomalías órganos con el mismo origen embriológico.

This study aimed to describe the finding of uterine and ovarian agenesis in cat after a total mastectomy procedure and ovariosalpingohisterectomy for treatment of feline mammary fibroepithelial hyperplasia. This paper described the case of a feline, female, without defined breed standard, seven months of age, it presented description of increase of mammary volume, after the administration of a dose of contraceptive medroxyprogesterone acetate. According to medical history and physical examination the diagnosis of feline fibroepithelial hyperplasia was established. For the treatment was opted to realize a complete mastectomy and ovaryhysterectomy (OSE). During the surgery was found the absence of the horn uterine and right ovary. This type of defect can go undetected since the animal may not present clinical and demonstrate the normal estrous behavior, and most often an incidental finding and assumes importance, especially for the possibility of the occurrence of various organs anomalies with the same origin embryological.

Objetivou-se descrever o achado de agenesia uterina e ovariana em gata submetida a procedimento de mastectomia total e ovariosalpingohisterectomia para tratamento de hiperplasia fibroepitelial mamária felina. O presente trabalho descreveu o caso de um felino, fêmea, sem padrão de raça definido, sete meses de idade com histórico de aumento de volume mamário após administração de uma dose de contraceptivo acetato de medroxiprogesterona. De acordo com a anamnese e o exame físico foi estabelecido o diagnóstico de hiperplasia fibroepitelial felina. Para o tratamento foi instituído a mastectomia total e a ovariosalpingohisterectomia (OSH). Durante o ato operatório constatou-se a ausência do corno uterino e ovário direito. Esse tipo de malformação pode passar despercebido já que o animal pode não apresentar alterações clínicas e demonstrar comportamento éstrico normal, sendo na maioria das vezes um achado incidental e assume importância, principalmente, pela possiblidade da ocorrência de anomalias de órgãos distintos com a mesma origem embriológica.

Histological characterization of reproductive tract and fetal annexes of the West Indian Manatee (Trichechus manatus) from Brazil / Caracterização histológica do trato reprodutor e anexos fetais do peixe-boi marinho (Trichechus manatus) do Brasil

The West Indian manatee (Trichechus manatus) is one of the most threatened aquatic mammals in Brazil, and is currently classified as "endangered" (MMA). The objective of this study was to characterize histologically the reproductive tract and fetal annexes of stranded manatees in northeastern Brazil. Tissue samples were collected from the reproductive tract of 23 manatees, which were fixed in 10% buffered formalin, processed using standard histological protocols and stained with hematoxylin eosin. We qualitatively described the histological and histomorphometric characteristics of each structure. Six ovaries were analyzed. In four ovaries, we found a large number of primordial and primary follicles. Two ovaries were different from the others: one had inflammatory infiltration and the other had a thickening in the cortex and absence of follicles. We also analyzed seven uteri (of which four were in the proliferative phase, two in the secretory phase, and one in the recovery phase), four placentas, one vagina, six testes (four were in the immature phase, one in the pubertal phase, and one in the mature phase), two epididymides, two penises, and one umbilical cord. The histological and morphometric findings in our work will support future analyses of the reproductive tract of T. manatus from Brazil.(AU)

O peixe-boi marinho (Trichechus manatus) é um dos mamíferos aquáticos mais ameaçados do Brasil e, atualmente é classificado como "em perigo" (MMA). O objetivo deste estudo foi caracterizar histologicamente o trato reprodutor e os anexos fetais de peixes-bois marinhos encalhados no Nordeste do Brasil. Foram coletadas amostras de tecidos do trato reprodutor de 23 peixes-bois marinhos (T. manatus), que foram fixadas em formol tamponado a 10%, processados usando protocolos histológicos padrão e corados com hematoxilina eosina. Foi realizada a descrição qualitativa das características histológicas e histomorfométricas de cada estrutura. Foram analisados seis ovários. Em quatro ovários, foi encontrado um grande número de folículos primordiais e primários. Dois ovários eram diferentes dos outros: um tinha infiltração inflamatória e o outro tinha um espessamento no córtex e ausência de folículos. Também foram analisadas sete amostras uterinas (das quais quatro estavam na fase proliferativa, duas na fase secretória e uma na fase de recuperação), quatro placentas, uma vagina, seis testículos (quatro na fase imatura, um na fase puberal e um na fase madura), dois epidídimos, dois pênis e um cordão umbilical. Os achados histológicos e morfométricos em nosso trabalho apoiarão futuras análises do trato reprodutivo de T. manatus do Brasil.(AU)

Histological characterization of reproductive tract and fetal annexes of the West Indian Manatee (Trichechus manatus) from Brazil / Caracterização histológica do trato reprodutor e anexos fetais do peixe-boi marinho (Trichechus manatus) do Brasil

The West Indian manatee (Trichechus manatus) is one of the most threatened aquatic mammals in Brazil, and is currently classified as "endangered" (MMA). The objective of this study was to characterize histologically the reproductive tract and fetal annexes of stranded manatees in northeastern Brazil. Tissue samples were collected from the reproductive tract of 23 manatees, which were fixed in 10% buffered formalin, processed using standard histological protocols and stained with hematoxylin eosin. We qualitatively described the histological and histomorphometric characteristics of each structure. Six ovaries were analyzed. In four ovaries, we found a large number of primordial and primary follicles. Two ovaries were different from the others: one had inflammatory infiltration and the other had a thickening in the cortex and absence of follicles. We also analyzed seven uteri (of which four were in the proliferative phase, two in the secretory phase, and one in the recovery phase), four placentas, one vagina, six testes (four were in the immature phase, one in the pubertal phase, and one in the mature phase), two epididymides, two penises, and one umbilical cord. The histological and morphometric findings in our work will support future analyses of the reproductive tract of T. manatus from Brazil.(AU)

O peixe-boi marinho (Trichechus manatus) é um dos mamíferos aquáticos mais ameaçados do Brasil e, atualmente é classificado como "em perigo" (MMA). O objetivo deste estudo foi caracterizar histologicamente o trato reprodutor e os anexos fetais de peixes-bois marinhos encalhados no Nordeste do Brasil. Foram coletadas amostras de tecidos do trato reprodutor de 23 peixes-bois marinhos (T. manatus), que foram fixadas em formol tamponado a 10%, processados usando protocolos histológicos padrão e corados com hematoxilina eosina. Foi realizada a descrição qualitativa das características histológicas e histomorfométricas de cada estrutura. Foram analisados seis ovários. Em quatro ovários, foi encontrado um grande número de folículos primordiais e primários. Dois ovários eram diferentes dos outros: um tinha infiltração inflamatória e o outro tinha um espessamento no córtex e ausência de folículos. Também foram analisadas sete amostras uterinas (das quais quatro estavam na fase proliferativa, duas na fase secretória e uma na fase de recuperação), quatro placentas, uma vagina, seis testículos (quatro na fase imatura, um na fase puberal e um na fase madura), dois epidídimos, dois pênis e um cordão umbilical. Os achados histológicos e morfométricos em nosso trabalho apoiarão futuras análises do trato reprodutivo de T. manatus do Brasil.(AU)

Occurrence of brucellosis, leptospirosis and neosporosis in cows with retained placenta in Southwest Paraná, Brazil / Ocorrência de brucelose, leptospirose e neosporose em vacas com retenção de placenta no Sudoeste do Paraná, Brasil

The aim of this study was to measure the occurrence of brucellosis, leptospirosis and neosporosis in cows from 25 family farms milk, with semi-intensive grazing system, located in the Southwest region of Paraná, Brazil. Eighty-four cows with retained placenta, between July 2013 to July 2014, diagnosed by the presence of fetal membranes in the uterus up to 12 hours after partum, decrease of appetite and of milk production, as well increase of rectal temperature were included into the study. The animals were submitted to blood collection for evaluating the seropositivity for brucellosis, leptospirosis and neosporosis. The blood was collected at 15 to 45 days postpartum, avoiding false negative results due to immune deficiency observed in the transition period. After collection, the blood was centrifuged, the serum was packed in three aliquots, identified and subsequently frozen. Serology was performed to diagnose brucellosis (technique of buffered acidified antigen), leptospirosis (through the microscopic agglutination test - MAT) and neosporosis (indirect immunofluorescence test). Animals were considered positive when presenting titer >1:100 (leptospirosis) and 1:200 (neosporosis). No animal with placenta retention presented Brucella abortus bacteria; 39% (33/84) were reactive to one or more Leptospira serovars, 15% (13/84) were positive to Neospora caninum, and 4% (4/84) had both diagnosis, being reactive for leptospirosis and neosporosis. In conclusion, data from this experiment inspires greater attention to leptospirosis and neosporosis in dairy cattle presenting placenta retention in southwest Paraná.(AU)

Objetivou-se com esse estudo avaliar a ocorrência de brucelose, leptospirose e neosporose em fêmeas bovinas de 25 propriedades leiteiras de agricultura familiar, mantidas em sistema de pastejo semi-intensivo, localizadas na Região Sudoeste do Paraná, Brasil. Para tanto, incluiu-se nesse estudo, 84 vacas diagnosticadas com retenção de placenta (RP) pela presença parcial ou total dos anexos fetais no útero após 12 horas do parto, diminuição do apetite e da produção de leite, como também aumento da temperatura retal. Os animais foram submetidos à coleta de sangue 15 a 45 dias pós-parto, a fim de evitar resultado falso negativo devido à imunodeficiência observada no período de transição. Após coleta, o sangue foi centrifugado, o soro aliquotado em três amostras, identificado e congelado. Para o diagnóstico sorológico de Brucelose utilizou-se o exame sorológico do antígeno acidificado tamponado, de leptospirose a técnica de soroaglutinação microscópica, e neosporose pela técnica de imunofluorescência indireta. Os animais foram diagnosticados positivos quando apresentaram título igual ou superior à 1:100 (leptospirose) e 1:200 (neosporose). Em nenhum dos 84 animais com RP foi detectada a presença da bactéria Brucella abortus. Desses, 39,28% (33/84) foram reativos para um ou mais sorovares de Leptospira, 15,47% (13/84) foram positivos para Neospora caninum e 4,76% (4/84) foram reativos para sorovares de Leptospira sp. e N. caninum, concomitantemente. Em conclusão, os dados deste estudo inspiram maior atenção à leptospirose e neosporose em bovinos leiteiros que apresentam retenção de placenta no sudoeste do Paraná.(AU)

Occurrence of brucellosis, leptospirosis and neosporosis in cows with retained placenta in Southwest Paraná, Brazil / Ocorrência de brucelose, leptospirose e neosporose em vacas com retenção de placenta no Sudoeste do Paraná, Brasil

The aim of this study was to measure the occurrence of brucellosis, leptospirosis and neosporosis in cows from 25 family farms milk, with semi-intensive grazing system, located in the Southwest region of Paraná, Brazil. Eighty-four cows with retained placenta, between July 2013 to July 2014, diagnosed by the presence of fetal membranes in the uterus up to 12 hours after partum, decrease of appetite and of milk production, as well increase of rectal temperature were included into the study. The animals were submitted to blood collection for evaluating the seropositivity for brucellosis, leptospirosis and neosporosis. The blood was collected at 15 to 45 days postpartum, avoiding false negative results due to immune deficiency observed in the transition period. After collection, the blood was centrifuged, the serum was packed in three aliquots, identified and subsequently frozen. Serology was performed to diagnose brucellosis (technique of buffered acidified antigen), leptospirosis (through the microscopic agglutination test - MAT) and neosporosis (indirect immunofluorescence test). Animals were considered positive when presenting titer >1:100 (leptospirosis) and 1:200 (neosporosis). No animal with placenta retention presented Brucella abortus bacteria; 39% (33/84) were reactive to one or more Leptospira serovars, 15% (13/84) were positive to Neospora caninum, and 4% (4/84) had both diagnosis, being reactive for leptospirosis and neosporosis. In conclusion, data from this experiment inspires greater attention to leptospirosis and neosporosis in dairy cattle presenting placenta retention in southwest Paraná.(AU)

Objetivou-se com esse estudo avaliar a ocorrência de brucelose, leptospirose e neosporose em fêmeas bovinas de 25 propriedades leiteiras de agricultura familiar, mantidas em sistema de pastejo semi-intensivo, localizadas na Região Sudoeste do Paraná, Brasil. Para tanto, incluiu-se nesse estudo, 84 vacas diagnosticadas com retenção de placenta (RP) pela presença parcial ou total dos anexos fetais no útero após 12 horas do parto, diminuição do apetite e da produção de leite, como também aumento da temperatura retal. Os animais foram submetidos à coleta de sangue 15 a 45 dias pós-parto, a fim de evitar resultado falso negativo devido à imunodeficiência observada no período de transição. Após coleta, o sangue foi centrifugado, o soro aliquotado em três amostras, identificado e congelado. Para o diagnóstico sorológico de Brucelose utilizou-se o exame sorológico do antígeno acidificado tamponado, de leptospirose a técnica de soroaglutinação microscópica, e neosporose pela técnica de imunofluorescência indireta. Os animais foram diagnosticados positivos quando apresentaram título igual ou superior à 1:100 (leptospirose) e 1:200 (neosporose). Em nenhum dos 84 animais com RP foi detectada a presença da bactéria Brucella abortus. Desses, 39,28% (33/84) foram reativos para um ou mais sorovares de Leptospira, 15,47% (13/84) foram positivos para Neospora caninum e 4,76% (4/84) foram reativos para sorovares de Leptospira sp. e N. caninum, concomitantemente. Em conclusão, os dados deste estudo inspiram maior atenção à leptospirose e neosporose em bovinos leiteiros que apresentam retenção de placenta no sudoeste do Paraná.(AU)

Isolation, culture, characterization and cryopreservation of stem cells derived from amniotic mesenchymal layer and umbilical cord tissue of bovine fetuses / Isolamento, cultura, caracterização e criopreservação de células tronco derivadas de camada amniótica mesenquimal e de tecido do cordão umbilical de fetuses bovinos

Stem cells are undifferentiated cells with a high proliferation potential. These cells can be characterized by their in vivo ability to self-renew and to differentiate into specialized cell lines. The most used stem cell types, in both human and veterinary fields, are the mesenchymal stem cells (MSC) derived from bone marrow and adipose tissue. Nowadays, there is a great interest in using stem cells derived from fetal tissues, such as amniotic membrane (AM) and umbilical cord tissue (UCT), which can be obtained non-invasively at delivery time. Due to the scarcity of studies in bovine species, the aim of this study was to isolate, characterize, differentiate and cryopreserve MSC derived from the mesenchymal layer of amniotic membrane (AM), for the first time, and umbilical cord tissue (UCT) of dairy cow neonates after assisted delivery (AD) and from fetus at initial third of pregnancy (IT) obtained in slaughterhouse. Cells were isolated by enzymatic digestion of the tissue fragments with 0.1% collagenase solution. Six samples of AM and UCT at delivery time and six samples of AM and UCT at first trimester of pregnancy were subjected to morphology evaluation, imunophenotype characterization, in vitro osteogenic, adipogenic and chondrogenic differentiation and viability analysis after cryopreservation. All samples showed adherence to plastic and fibroblast-like morphology. Immunocytochemistry revealed expression of CD 44, NANOG and OCT-4 and lack of expression of MHC II in MSC from all samples. Flow cytometry demonstrated that cells from all samples expressed CD 44, did not or low expressed CD 34 (AM: IT-0.3%a, AD-3.4%b; UCT: 0.4%, 1.4%) and MHC II (AM: IT-1.05%a, AD-9.7%b; UCT: IT-0.7%a, AD-5.7%b). They were also capable of trilineage mesenchymal differentiation and showed 80% viability after cryopreservation. According to the results, bovine AM and UCT-derived cells, either obtained at delivery time or from slaughterhouse, are a painless and non-invasive source of MSC and can be used for stem cell banking.(AU)

As células tronco mesenquimais (CTMs) estão presentes na maioria dos tecidos adultos e possuem grande capacidade de multiplicação. Quando cultivadas in vitro são capazes de se auto renovar e dar origem a novos tipos celulares. As células tronco mais utilizadas, tanto na medicina humana como na medicina veterinária são as células tronco mesenquimais derivadas da medula óssea e do tecido adiposo. Atualmente, uma grande tendência para a utilização de CTMs obtidas de tecidos fetais, como a membrana amniótica (MA), matriz extravascular do cordão umbilical (TCU) e sangue do cordão umbilical (SCU) pode ser observada, já que estas fontes podem ser colhidas no momento do parto por uma técnica não invasiva. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi isolar, caracterizar, diferenciar e criopreservar CTMs obtidas de MA e TCU de fetos bovinos colhidos no momento do parto e de fetos do terço inicial da gestação em abatedouro-frigorífico. As células foram recuperadas por meio de digestão enzimática tecidual, realizada com solução de colagenase 0,1%. Foram colhidas amostras de MA e TCU no momento do parto (n=6) e de MA e TCU no terço inicial de gestação (n=6), as quais foram submetidas às análises morfológicas, imunofenotípica por imunocitoquímica e citometria de fluxo, diferenciações in vitro nas linhagens osteogênica, adipogênica e condrogênica e ainda, avaliação da viabilidade após a criopreservação por citometria de fluxo. Todas as amostras dos diferentes grupos demonstraram adesão ao plástico e morfologia fibroblastóide. No ensaio imunocitoquímico todas as amostras foram imunomarcadas para CD44, NANOG e Oct-4, com ausência de marcação para MHC II. Na análise imunofenotipica por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram marcação para CD44, ausência de marcação para ou baixíssima expressão de CD34 (MA: TI-0,3%a, PA-3.4%b; TCU: TI-0,4%, PA-1.4%) e nula ou baixa expressão de MHC II (MA: TI-1.5%a, PA-9.7%b; UCT: TI-0.7%a, PA-5.7%b. Apresentaram também capacidade de diferenciação in vitro nas três linhagens mesodermais e quando analisadas pós criopreservação por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram viabilidade de 80%. Estes resultados indicam que MA e TCU, obtidos tanto no momento de parto como em abatedouro, de fetos bovinos podem ser utilizados como fonte não invasiva e indolor de CTMs e possibilitam a formação de bancos de armazenamento de células.(AU)

Isolation, culture, characterization and cryopreservation of stem cells derived from amniotic mesenchymal layer and umbilical cord tissue of bovine fetuses / Isolamento, cultura, caracterização e criopreservação de células tronco derivadas de camada amniótica mesenquimal e de tecido do cordão umbilical de fetuses bovinos

Stem cells are undifferentiated cells with a high proliferation potential. These cells can be characterized by their in vivo ability to self-renew and to differentiate into specialized cell lines. The most used stem cell types, in both human and veterinary fields, are the mesenchymal stem cells (MSC) derived from bone marrow and adipose tissue. Nowadays, there is a great interest in using stem cells derived from fetal tissues, such as amniotic membrane (AM) and umbilical cord tissue (UCT), which can be obtained non-invasively at delivery time. Due to the scarcity of studies in bovine species, the aim of this study was to isolate, characterize, differentiate and cryopreserve MSC derived from the mesenchymal layer of amniotic membrane (AM), for the first time, and umbilical cord tissue (UCT) of dairy cow neonates after assisted delivery (AD) and from fetus at initial third of pregnancy (IT) obtained in slaughterhouse. Cells were isolated by enzymatic digestion of the tissue fragments with 0.1% collagenase solution. Six samples of AM and UCT at delivery time and six samples of AM and UCT at first trimester of pregnancy were subjected to morphology evaluation, imunophenotype characterization, in vitro osteogenic, adipogenic and chondrogenic differentiation and viability analysis after cryopreservation. All samples showed adherence to plastic and fibroblast-like morphology. Immunocytochemistry revealed expression of CD 44, NANOG and OCT-4 and lack of expression of MHC II in MSC from all samples. Flow cytometry demonstrated that cells from all samples expressed CD 44, did not or low expressed CD 34 (AM: IT-0.3%a, AD-3.4%b; UCT: 0.4%, 1.4%) and MHC II (AM: IT-1.05%a, AD-9.7%b; UCT: IT-0.7%a, AD-5.7%b). They were also capable of trilineage mesenchymal differentiation and showed 80% viability after cryopreservation. According to the results, bovine AM and UCT-derived cells, either obtained at delivery time or from slaughterhouse, [...](AU)

As células tronco mesenquimais (CTMs) estão presentes na maioria dos tecidos adultos e possuem grande capacidade de multiplicação. Quando cultivadas in vitro são capazes de se auto renovar e dar origem a novos tipos celulares. As células tronco mais utilizadas, tanto na medicina humana como na medicina veterinária são as células tronco mesenquimais derivadas da medula óssea e do tecido adiposo. Atualmente, uma grande tendência para a utilização de CTMs obtidas de tecidos fetais, como a membrana amniótica (MA), matriz extravascular do cordão umbilical (TCU) e sangue do cordão umbilical (SCU) pode ser observada, já que estas fontes podem ser colhidas no momento do parto por uma técnica não invasiva. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi isolar, caracterizar, diferenciar e criopreservar CTMs obtidas de MA e TCU de fetos bovinos colhidos no momento do parto e de fetos do terço inicial da gestação em abatedouro-frigorífico. As células foram recuperadas por meio de digestão enzimática tecidual, realizada com solução de colagenase 0,1%. Foram colhidas amostras de MA e TCU no momento do parto (n=6) e de MA e TCU no terço inicial de gestação (n=6), as quais foram submetidas às análises morfológicas, imunofenotípica por imunocitoquímica e citometria de fluxo, diferenciações in vitro nas linhagens osteogênica, adipogênica e condrogênica e ainda, avaliação da viabilidade após a criopreservação por citometria de fluxo. Todas as amostras dos diferentes grupos demonstraram adesão ao plástico e morfologia fibroblastóide. No ensaio imunocitoquímico todas as amostras foram imunomarcadas para CD44, NANOG e Oct-4, com ausência de marcação para MHC II. Na análise imunofenotipica por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram marcação para CD44, ausência de marcação para ou baixíssima expressão de CD34 (MA: TI-0,3%a, PA-3.4%b; TCU: TI-0,4%, PA-1.4%) e nula ou baixa expressão de MHC II (MA: TI-1.5%a, PA-9.7%b; UCT: TI-0.7%a, PA-5.7%b. [...](AU)

Risk factors associated with Toxoplasma gondii infection in free-range chickens in the semiarid region of Brazil / Fatores de riscos associados com a infecção de Toxoplasma gondii em galinhas de vida livre na região do semiárido do Brasil

This study aimed to investigate the frequency of anti-Toxoplasma gondii antibodies in serum from 629 chickens on 39 family farms in seven municipalities in the semiarid region, Pernambuco, Brazil, and to identify risk factors associated with T. gondii infection. The risk factors were studied in 421 samples from 29 farms. Anti-T. gondii antibodies were investigated by indirect fluorescent antibody test with a 1:16 cutoff. The frequency of positive chickens was 27.9% (176/629) and 94.8% of the farms studied had chickens infected by T. gondii. Multivariate analysis showed variables significantly associated with anti-T. gondii antibodies in serum: slaughter of animals on the farm, reproductive disorders in sheep, consumption of fetal adnexa and placentas by chickens, presence of sheep in the property and birth of sheep the property. The results suggest that there is a complex relationship between general management practices for different animal species raised on the same farm and the prevalence of T. gondii infection in chickens. In addition, the results draw attention to the risk of human infection by T. gondii via consumption of infected chicken meat, because the farming conditions and the low human development indices observed in the region studied result in inappropriate meat preparation practices.(AU)

Objetivou-se investigar a prevalência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii em 629 soros de galinha em 39 propriedades da agricultura familiar em sete municípios de Pernambuco, Brasil e identificar os fatores de risco associados à infecção. Para a pesquisa de anticorpos anti-T. gondii empregou-se a reação de imunofluorescência indireta com ponto-de-corte 1:16. O estudo dos fatores de risco foi realizado em 29 propriedades, totalizando 421 amostras. A prevalência de aves positivas foi de 27,9% (176/629) e 94,8% das propriedades tinham galinhas infectadas por T. gondii. Na análise multivariada, obteve-se como variáveis significativas associadas com anticorpos anti-T. gondii a ocorrência de abate de animais na propriedade, relato de distúrbios reprodutivos em ovinos, ingestão de anexos fetais e placentas pelas galinhas, presença de ovinos na propriedade e nascimento de ovinos na propriedade. Os resultados sugerem relações complexas entre o manejo das espécies animais criados nas propriedades e a prevalência da infecção nas galinhas. Em adicional, chama-se atenção para o risco de infecção humana por T. gondii via consumo de carne de galinha infectada, uma vez que as condições de criação e os baixos índices de desenvolvimento observados na região resultam em inapropriada preparação da carne para consumo.(AU)

DISTRIBUIÇÃO ESPACIAL E AVALIAÇÃO DOS FATORES DE RISCO PARA A NEOSPOROSE BOVINA EM RONDÔNIA

A neosporose bovina é uma enfermidade parasitária de distribuição cosmopolita, seu agente etiológico é o protozoário Neospora caninum, que tem como hospedeiros definitivos os canídeos e principalmente bovinos como intermediários. Devido às alterações reprodutivas, o parasito causa sérios prejuízos econômicos na pecuária bovina, sendo reconhecido como uma das principais causas de abortamento em todo mundo. A transmissão em bovinos ocorre por duas vias distintas, a vertical ou transplacentária e a horizontal. Entre os fatores de risco relatados para a infecção estão a presença e acesso de cães aos bovinos, aptidão do rebanho, alterações reprodutivas e idade do animal. O diagnóstico é baseado primeiramente em evidências epidemiológicas e por meio da aplicação de técnicas diretas e indiretas para identificação do agente. O controle da neosporose deve ser baseado na eliminação de animais positivos, restrição do acesso de cães aos bovinos, descarte correto de carcaças de animais infectados, fetos e anexos fetais entre outras medidas. Devido aos escassos relatos no estado de Rondônia, o presente estudo objetivou identificar a ocorrência de anticorpos anti-N. caninum em bovinos abatidos no município de Rolim de Moura, que eram provenientes de 33 municípios e sete microrregiões do estado, além de determinar os possíveis fatores de risco. Foram selecionados aleatoriamente 494 animais, dos quais foram colhidas amostras sanguíneas para obtenção do soro para a pesquisa de anticorpos contra o parasito, por meio da Reação de Imunofluorescência Indireta. Foram consideradas positivas as amostras de soros sanguíneos com títulos de anticorpos iguais ou superiores a 100. Do total das amostras analisadas, detectou-se a ocorrência de anticorpos anti-N. caninum em 5,06% (25/494) dos bovinos, distribuídos em quatro microrregiões e em nove municípios amostrados do estado de Rondônia. O único fator de risco estatisticamente significante foi a presença de abortamentos nos últimos 12 meses. Por meio dos resultados do presente estudo, é possível compreender um pouco da distribuição do protozoário no rebanho bovino do estado e apontar a presença de abortamentos como o principal fator de risco associado a infecção pelo parasito na região.

Bovine neosporosis is a parasitic disease of cosmopolitan distribution, its etiological agent is the protozoan Neospora caninum, which has as definitive hosts canids and mainly cattle as intermediates. Due to reproductive changes, the parasite causes serious economic losses in cattle ranching, being recognized as one of the main causes of abortion worldwide. Transmission in cattle occurs by two distinct routes, vertical or transplacental and horizontal. Risk factors reported for infection include the presence and access of dogs to cattle, herd fitness, reproductive changes and age of the animal. The diagnosis is based primarily on epidemiological evidence and the application of direct and indirect techniques for agent identification. Control of neosporosis should be based on the elimination of positive animals, restriction of dog access to cattle, proper disposal of infected animal carcasses, fetuses and fetal attachments among other measures. Due to the scarce reports in the state of Rondônia, the present study aimed to identify the occurrence of anti-N. caninum antibodies in cattle slaughtered in the municipality of Rolim de Moura, which came from 33 municipalities and seven microregions of the state, and determine the possible risk factors. A total of 494 animals were randomly selected, from which blood samples were collected to obtain serum for antibodies against the parasite by means of the Indirect Immunofluorescence Reaction. Blood serum samples with antibody titers of 100 or greater were considered positive. Of the total samples analyzed, anti-N. caninum antibodies were detected in 5.06% (25/494) of cattle, distributed in four microregions and nine municipalities sampled in the state of Rondônia. The only statistically significant risk factor was the presence of abortions in the last 12 months. Through the results of the present study, it is possible to understand a little of the distribution of protozoan in the state cattle herd and point out the presence of abortions as the main risk factor associated with parasite infection in the region.

Efeito de diferentes biotécnicas reprodutivas (IA, TE e FIV) no desempenho produtivo e reprodutivo de fêmeas da raça Holandesa

Resumo: Biotécnicas da reprodução como IA, TE-in vivo e TE-in vitro têm sido aplicadas como estratégias de manejo visando maior produtividade, ganho genético e eficiência reprodutiva na pecuária brasileira e mundial. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito das diferentes biotécnicas (IA, TE-in vivo e TE-in vitro) no desempenho reprodutivo de vacas da raça Holandesa em lactação, e avaliar o desempenho reprodutivo e produtivo de sua progênie. O estudo foi conduzido na Fazenda Santa Rita/Agrindus S.A. localizada em Descalvado, SP, Brasil. Foram analisadas as seguintes variáveis em vacas Holandesas lactantes que receberam as três biotecnologias contemporaneamente nos anos de 2013 a 2018: taxa de gestação aos 30 (TG30) e 60 (TG60) dias, taxa de perda gestacional entre 30 e 60 dias (TPG) e taxa de aborto (TA). Além disso, também foram analisadas as variáveis duração da gestação (DG), facilidade de parto (FP) e retenção de anexos fetais (RAF). Na progênie, foram avaliadas as seguintes variáveis: informação genômica (IG), peso ao nascimento (PN) e ao desmame (PD), mortalidade do nascimento ao desmame (MN-D) e idade à primeira cobertura (IP-COB), das bezerras nascidas entre os anos de 2013 a 2018. Ainda, foram avaliadas idade ao primeiro parto (IP-PAR) e a produção de leite total na primeira lactação (PLT-1), das bezerras nascidas entre os anos de 2013 a 2017, e a produção de leite total na segunda lactação (PLT-2), das bezerras nascidas entre os anos de 2013 a 2015. Os dados foram analisados por procedimentos do SAS. Houve interação biotécnica ano para as variáveis TG30 (P<0,0001), TG60 (P<0,0001) e TPG (P=0,03), porém, houve efeito de biotécnica (P=0,01) e de ano (P=0,03) para TA. Houve interação biotécnica ano para DG (P<0,0001). Houve efeito de biotécnica para FP (P<0,0001) e não houve efeito de biotécnica para RAF (P=0,14). Houve interação biotécnica ano para IG (P<0,0001). Não houve interação biotécnica ano (P=0,30), efeito de biotécnica (P=0,62) e de ano (P=0,82) para MN-D. Houve interação biotécnica ano para PN (P=0,01) e PD (P<0,0001). Entretanto, houve apenas efeito de ano para IP-COB (P<0,0001), IP-PAR (P=0,0002) e PLT-1 (P<0,0001). Não houve interação biotécnica ano (P=0,41), efeito de biotécnica (P=0,97) e de ano (P=0,92) para PLT-2. Nas progenitoras, a TE apresentou maior eficiência reprodutiva, com semelhantes perdas gestacionais quando comparada com a IA. Adicionalmente, a TE-in vivo apresentou semelhantes eficiência reprodutiva e perda gestacional do que a TE-in vitro. Na progênie, não houve efeito de biotecnologia na produtividade de fêmeas nascidas de IA, TE-in vivo e TE-in vitro.

Abstract: Reproductive biotechnologies as AI, ET-in vivo and ET-in vitro have been applied as manegement strategies to acomplish productivity, genetic gain and reproductive efficiency on Brazilian and worldwide livestock. However, there are differences on the efficiency of this biotechnologies that may compromises the reproductive and productive development of the farms. The objective of this study was to evaluate the effect of different reproductive technologies (AI, ET-in vivo and ET-in vitro) on reproductive development of lactating Holstein cows, and evaluate the reproductive and productive development of their progeny. The study was conducted at Santa Rita/Agrindus S.A. Farm, located in Descalvado, SP, Brazil. The following variables of the lactating Holstein cows that received the three biotechnologies contemporaneously from 2013 to 2018 were analyzed: gestation rate at 30 (GR30) and 60 (GR60) days, gestation lost between 30 and 60 days (GLO) and abortion rate (AR). Additionally, other variables were analyzed: gestation length (GLE), labor facility (LF) and retention of fetal attachments (RFA). The following variables were analyzed on the progeny: genomic information (GI), weight at birth (WB) and at weaning (WW), mortality from calve to weaning (MCW) and age at first conception (ACON) of calves born from 2013 to 2018. Also, were analyzed age at first calve (ACA) and milk production from the first lactation (MP1) of calves born from 2013 to 2017, and milk production from the second lactation (MP2) of calves born from 2013 to 2015. The data were analyzed by procedures of SAS. There was interaction biotechnology year to GR30 (P<0,0001), GR60 (P<0,0001) and GLO (P=0,03), however, there was effect of biotechnology (P=0,01) and effect of year (P=0,03) to AR. There was interaction biotechnology year to GLE (P<0,0001). There was effect of biotechnology to LF (P<0,0001), without effect of biotechnology to RFA (P=0,14). There was interaction biotechnology year to GI (P<0,0001). There was no interaction biotechnology year (P=0,30), effect of biotechnology (P=0,62) and effect of year (P=0,82) to MCW. There was interaction biotechnology year to WB (P=0,01) and WW (P<0,0001). However, there was only effect of year to ACON (P<0,0001), ACA (P=0,0002) and MP1 (P<0,0001). There was no interaction biotechnology year (P=0,41), effect of biotechnology (P=0,97) and effect of year (P=0,92) to MP2. On lactating cows ET presented better reproductive efficiency, with similar gestation lost than AI. Additionally, ET-in vivo presented similar reproductive efficiency and lower gestation lost than ET-in vitro. On progeny, there were no differences between productivity of females born from AI, ET-in vivo or ET-in vitro.

Infecção transplacentária e intrauterina por Brucella abortus em búfalos (Bubalus bubalis) / Placenta and intrauterine infection by Brucella abortus in buffaloes (Bubalus bubalis)

O objetivo deste trabalho foi verificar a presença de Brucella abortus e as lesões causadas por esse agente nos anexos fetais e nos fetos de búfalas. Para isso, 20 búfalas em diversos meses de gestação, sorologicamente positivas para brucelose, foram submetidas ao abate sanitário. A idade fetal foi determinada através de exames ultrassonográficos associados à mensuração dos fetos durante a necropsia. Do útero fechado desses animais foram coletadas amostras para histopatologia e qPCR. A partir do segundo mês de gestação foi possível detectar a presença de DNA de B. abortus em líquido amniótico, líquido alantoide e em útero e, a partir do quinto mês, na placenta, coração, baço, rim, pulmão, intestino, fígado e linfonodos dos fetos. Os principais achados anatomopatológicos foram placentite fibrinopurulenta necrótica e endometrite supurativa crônica.(AU)

The objective of this study was to detect Brucella abortus and injuries caused by the bacteria in fetal membranes and fetuses. Twenty buffaloes serologically positive for brucellosis were used and subjected to stamping for collection of material from the closed uterus of several months gestation. Fetal age was determined by ultrasound examination and the size of fetuses was measured at necropsy. The samples were subjected to histopathology and qPCR. From the second month of pregnancy on it was possible to detect the presence of B. abortus DNA in amniotic fluid, allantoic liquid and uterus, and from the fifth month on in placenta, heart, spleen, kidney, lung, intestine, liver and lymph nodes of the fetuses. The main pathological findings were fibrinous suppurative necrotic placentitis, and chronic endometritis.(AU)

Correlação entre o peso, comprimento e anexos fetais de mocós (Kerodon rupestris Wied, 1820) / Correlation between weight, length and fetal membranes of rock cavies (Kerodon rupestris Wied, 1820)

Foi avaliada a existência de correlação entre diferentes anexos fetais de mocós e determinada a relação entre peso do feto e peso da placenta, a relação entre o peso do feto e comprimento do cordão umbilical e a relação entre o peso do feto e comprimento do feto. Foram utilizados anexos fetais e fetos de três, cinco e seis fêmeas, respectivamente, no terço inicial, médio e final de gestação, obtidas no Centro de Multiplicação de Animais Silvestres (CEMAS-UFERSA). Os dados foram expressos em média ± desvio-padrão, bem como valores mínimos e máximos, avaliados pelo programa estatístico GraphPad Prism Versão 6.0. Após a análise dos pressupostos paramétricos, os dados foram submetidos aos Testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, e regressão linear. A relação entre peso do feto e peso da placenta demonstrou expressão y = 33,73 + 16,38x com cálculo do coeficiente de correlação entre o peso do feto e o peso da placenta elevado e positivo, evidenciando dependência entre as variáveis (R2 = 0,7251). A relação entre o peso do feto e comprimento do cordão umbilical demonstrou expressão y = 35,64 + 25,64x e a análise de correlação entre as variáveis, positiva (R2 = 0,7201) indicando elevada dependência entre as variáveis. Quanto à relação entre o peso do feto e comprimento do feto, identificou-se uma relação do tipo y = a + bx, cuja expressão definida foi y = 1,26 + 0,41x, com análise de correlação das variáveis apresentando elevada correlação considerando-se o valor de R2 = 0,7890. As variáveis analisadas demonstram uma influência direta no desenvolvimento embrionário e fetal em mocós confirmando a correlação destes com o tamanho do feto.(AU)

We evaluated the correlation between different fetal membranes of rock cavies and determined the relationship between fetal weight and placental weight, the relationship between fetal weight and length of the umbilical cord and the relationship between fetal weight and length of the fetus. The fetuses and fetal membranes of three, five and six females respectively in the first third, middle and late gestation were used, obtained from Multiplication Center for Wild Animals of the Federal University Rural of Semiarid (CEMAS-UFERSA). The data were expressed as mean ± standard deviation, minimum and maximum values, evaluated by the statistical program GraphPad Prism version 6.0. After analysis of parametric assumptions, the data were subjected to Kruskal-Wallis test and Mann-Whitneys test and linear regression. The relationship between fetal weight and placental weight showed the expression y = 33.73 + 16.38x with an estimate of the coefficient of correlation between fetal weight and placental weight high and positive, showing dependence between variables (R2 = 0.7251). The relationship between fetal weight and length of the umbilical cord showed expression y = 35.64 + 25.64x and the correlation analysis between variables, positive (R2 = 0.7201) indicating high dependence between variables. Regarding the relationship between fetal weight and length of the fetus, we identified a relationship of the type y = a + bx, whose expression was defined y = 1.26 + 0.41x, with correlation analysis of the variables showing high correlation considering the value of R2 = 0.7890. The variables analyzed demonstrate a direct influence on embryonic andfetal development in rock cavies confirming the correlation of these with the size of the fetus.(AU)

Correlação entre o peso, comprimento e anexos fetais de mocós (Kerodon rupestris Wied, 1820) / Correlation between weight, length and fetal membranes of rock cavies (Kerodon rupestris Wied, 1820)

Foi avaliada a existência de correlação entre diferentes anexos fetais de mocós e determinada a relação entre peso do feto e peso da placenta, a relação entre o peso do feto e comprimento do cordão umbilical e a relação entre o peso do feto e comprimento do feto. Foram utilizados anexos fetais e fetos de três, cinco e seis fêmeas, respectivamente, no terço inicial, médio e final de gestação, obtidas no Centro de Multiplicação de Animais Silvestres (CEMAS-UFERSA). Os dados foram expressos em média ± desvio-padrão, bem como valores mínimos e máximos, avaliados pelo programa estatístico GraphPad Prism Versão 6.0. Após a análise dos pressupostos paramétricos, os dados foram submetidos aos Testes de Kruskal-Wallis e Mann-Whitney, e regressão linear. A relação entre peso do feto e peso da placenta demonstrou expressão y = 33,73 + 16,38x com cálculo do coeficiente de correlação entre o peso do feto e o peso da placenta elevado e positivo, evidenciando dependência entre as variáveis (R2 = 0,7251). A relação entre o peso do feto e comprimento do cordão umbilical demonstrou expressão y = 35,64 + 25,64x e a análise de correlação entre as variáveis, positiva (R2 = 0,7201) indicando elevada dependência entre as variáveis. Quanto à relação entre o peso do feto e comprimento do feto, identificou-se uma relação do tipo y = a + bx, cuja expressão definida foi y = 1,26 + 0,41x, com análise de correlação das variáveis apresentando elevada correlação considerando-se o valor de R2 = 0,7890. As variáveis analisadas demonstram uma influência direta no desenvolvimento embrionário e fetal em mocós confirmando a correlação destes com o tamanho do feto.

We evaluated the correlation between different fetal membranes of rock cavies and determined the relationship between fetal weight and placental weight, the relationship between fetal weight and length of the umbilical cord and the relationship between fetal weight and length of the fetus. The fetuses and fetal membranes of three, five and six females respectively in the first third, middle and late gestation were used, obtained from Multiplication Center for Wild Animals of the Federal University Rural of Semiarid (CEMAS-UFERSA). The data were expressed as mean ± standard deviation, minimum and maximum values, evaluated by the statistical program GraphPad Prism version 6.0. After analysis of parametric assumptions, the data were subjected to Kruskal-Wallis’ test and Mann-Whitney’s test and linear regression. The relationship between fetal weight and placental weight showed the expression y = 33.73 + 16.38x with an estimate of the coefficient of correlation between fetal weight and placental weight high and positive, showing dependence between variables (R2 = 0.7251). The relationship between fetal weight and length of the umbilical cord showed expression y = 35.64 + 25.64x and the correlation analysis between variables, positive (R2 = 0.7201) indicating high dependence between variables. Regarding the relationship between fetal weight and length of the fetus, we identified a relationship of the type y = a + bx, whose expression was defined y = 1.26 + 0.41x, with correlation analysis of the variables showing high correlation considering the value of R2 = 0.7890. The variables analyzed demonstrate a direct influence on embryonic andfetal development in rock cavies confirming the correlation of these with the size of the fetus.

Occurrence of Toxoplasma gondii DNA in sheep naturally infected and slaughtered in abattoirs in Pernambuco, Brazil / Ocorrência de DNA de Toxoplasma gondii em ovelhas naturalmente infectadas e abatidas em matadouros de Pernambuco

The aim of the present study was to assess the occurrence of antibodies to Toxoplasma gondii and to detect genomic DNA of the parasite in the reproductive organs, fetuses and fetal membranes of sheep in slaughterhouses in the state of Pernambuco, Brazil. The Indirect Immunofluorescence technique (IFA) was used for screening. The Polymerase Chain Reaction (PCR) was used to detect DNA of T. gondii in the animals that were positive in the serology. In the serology, 13/50 samples were positive and genomic DNA of T. gondii was detected in one uterus, tube, ovary, placenta and fetus (heart, brain and umbilical cord) sample from a sheep that was positive in the serology. The present study provides evidence of the occurrence of T. gondii DNA in the organs of the reproductive system, placenta and fetus of a naturally infected sheep.(AU)

Objetivou-se estudar a ocorrência de anticorpos contra Toxoplasma gondii e detectar o DNA genômico do parasito em órgãos reprodutivos, fetos e anexos fetais de ovelhas em matadouros no estado de Pernambuco, Brasil. Foram coletadas amostras de soro sanguíneo, útero, trompas e ovários, além de fetos e placentas. Para a triagem utilizou-se a técnica de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e para a detecção do DNA de T. gondii empregou-se a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) nos animais positivos na sorologia e em todos os fetos e anexos fetais. Na sorologia, 13/50 amostras foram positivas e o DNA genômico de T. gondii foi detectado em uma amostra de útero, trompa, ovário, placenta e feto (coração, cérebro e cordão umbilical) de uma ovelha positiva na sorologia. A identidade molecular dos produtos amplificados foi confirmada por sequenciamento. Neste estudo comprova-se a ocorrência do DNA de T. gondii em órgãos do sistema reprodutivo, placenta e feto de ovelha naturalmente infectada.(AU)

Isolamento, caracterização e diferenciação de células-tronco mesenquimais do líquido amniótico equino obtido em diferentes idades gestacionais / Isolation, characterization and differentiation of mesenchymal stem cells derived from equine amniotic fluid obtained from different gestacional ages

O interesse nas pesquisas com células-tronco derivadas de anexos fetais de diversas espécies cresceu exponencialmente nas últimas décadas em virtude de serem fontes de células-tronco adultas com potencial de diferenciação em diversas linhagens celulares que apresentam pouca ou nenhuma imunogenicidade, apresentando-se assim como alternativa de grande importância para a formação de bancos celulares. Apesar do crescente interesse, os estudos para espécie equina ainda são escassos. O objetivo deste trabalho foi isolar, caracterizar e diferenciar células-tronco mesenquimais (CTMs) derivadas do líquido amniótico equino obtidas do terço inicial, médio e final da gestação (LA-CTMs), comparando suas características. Foram colhidas 23 amostras de líquido amniótico as quais foram submetidas às análises morfológica, imunocitoquímica, imunofenotípica por citometria de fluxo e às diferenciações osteogênica, adipogênica e condrogênica in vitro. Todas as amostras demonstraram adesão ao plástico e morfologia fibroblastóide. No ensaio imunocitoquímico as células de todos os grupos foram imunomarcadas para CD44, PCNA e vimentina com ausência de marcação para citoqueratina e Oct-4. Na citometria de fluxo observou-se a expressão de CD44 e CD90 e ausência de expressão de CD34, sendo que os marcadores CD44 e CD90 mostraram padrão de expressão decrescente em relação ao desenvolvimento gestacional. As amostras obtidas de todas as fases da gestação foram capazes de diferenciação nas linhagens osteogênica, condrogênica e adipogênica. Portanto, as células obtidas do líquido amniótico apresentaram características morfológicas, imunofenotípicas e potencial de diferenciação típicos das CTMs, demonstrando que a colheita pode ser realizada em qualquer fase gestacional. No entanto, mais pesquisas devem ser realizadas principalmente quanto à expressão de marcadores de pluripotencialidade (como o Oct-4) e ao seu potencial de diferenciação em linhagens extra mesodermais já relatados na literatura.(AU)

The interest in stem cells derived from fetal annexes of many species has exponentially increased during the last decades, because they are adult stem cell sources with potential of differentiation in several cell lineages; which present little or no immunogenicity and are an alternative with great importance for storage cell banks. Despite the rising interest, studies for the equine species are still rare. The aim of this study was to isolate, characterize and differentiate mesenchymal stem cells derived from equine amniotic fluid obtained from initial, middle and late third of gestation (AF-MSCs), and compare their results. Twenty three samples from equine amniotic fluid were evaluated by morphological, immunocytochemical and immunophenotypical (Flow cytometer) assays and osteogenic, adipogenic and chondrogenic in vitro differentiation. All samples demonstrated plastic adhesion and fibroblastoid morphology. The immunocytochemical assay demonstrated cells from all the studied groups were positive for CD44, PCNA and vimentin and negative for cytokeratin and Oct-4. Flow cytometry demonstrated expression of CD44 and CD90 and no expression of CD34, where CD44 and CD90 markers presented decreasing pattern of expression in relation to the gestational development. All samples collected from all gestational phases were capable to differentiate in osteogenic, chondrogenic and adipogenic lineages. Thus, cells obtained from equine amniotic fluid presented morphological and immunophenotypical characteristics and potential of differentiation typical of MSCs showing that the collection can be performed at any stage of pregnancy. However, more studies should be performed about the expression of pluripotent markers as Oct-4 and the differentiation potential for extra mesodermal lineages prior demonstrated in the literature.(AU)

Efeitos da anemia em vacas periparturientes

RESUMO PAIANO, R. B. Efeitos da anemia em vacas periparturientes. [Effects of anemia on periparturient cows]. 2018. 77 f. Dissertação (Mestrado em Ciências) Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. Os objetivos deste estudo foram caracterizar o padrão hematológico e produtivo durante o periparto em vacas com e sem anemia, assim como avaliar o eritrograma em animais que apresentaram metrite puerperal aguda (APM), claudicação, acetonemia, valores de ácidos graxos não esterificados aumentados (AGNE) e vacas com diferentes categorizações de escore de condição corporal (ECC). No estudo 1, foram utilizadas 50 vacas Holandesas (29 multíparas e 21 primíparas), foram realizadas colheitas sanguíneas e exame físicos em 13 momentos diferentes: 18 ± 3, 12 ± 2, 5 ± 1, e 2 ± 1 dias antes do parto, parto, e 1, 7, 14, 21, 30, 45 e 60 dias após o parto. Foram realizadas avaliações do eritrograma sendo mensurado a contagem de hemácias (RBC), concentração de hemoglobina, volume globular, além dos valores hematimétricos absolutos do volume corpuscular médio (VCM), concentração hemoglobínica corpuscular média (CHCM), hemoglobina corpuscular média (HCM) e amplitude de distribuição dos glóbulos vermelhos (RDW), para as análises bioquímicas foram determinadas a concentração sérica de ferro, betahidróxidobutirato (BHBA), AGNE e bilirrubina total (TBIL). Anemia foi classificada de acordo com os valores de hemoglobina < 8 g/dL e o volume globular < 24 %. A prevalência de anemia foi maior no período 60 dias após o parto afetando 18,3% dos animais, o padrão da anemia apresentado foi normocítica, normocrômica e regenerativa. Os valores das contagens de hemácias, volume globular e hemoglobina foram menores (P < 0,05) para os animais com anemia. Enquanto os animais com APM e com claudicação, o valor do eritrograma foi muito semelhante ao longo do pós-parto. Não foi observado diferença entre os grupos de acordo com os valores de AGNE, ECC e perda de ECC durante as coletas realizadas no pós-parto. Em conclusão os animais anêmicos apresentaram os valores do exame físico de acordo com os limites fisiológicos, a anemia não provocou perdas produtivas nos animais afetados. Não foi evidenciado que animais com APM e claudicantes apresentassem maior redução da crase sanguínea, excluindo a ocorrência de anemia inflamatória, sendo que embora a prevalência de anemia aumentasse durante o pós-parto não foi possível caracterizar nenhuma associação com a redução dos valores hematológicos entre as categorizações realizadas. No estudo 2, foram realizadas coletas sanguíneas em 336 animais (252 multíparas e 84 primíparas) entre 21 e 30 dias em lactação (DEL) em sete fazendas no Estado de São Paulo com objetivo de caracterizar a prevalência de anemia nos animais, prevalência de anemia em diferentes categorizações realizadas como: distocia, retenção dos anexos fetais, mastite, problema digestivo, claudicação, acetonemia, ECC no momento da coleta e número de parto, assim como a análise do eritrograma, bioquímico e ECC e produção de leite entre os animais com e sem anemia. Em conclusão a prevalência de anemia foi baixa (16,3%) e nenhuma associação com as categorizações realizadas nesse estudo foi evidenciada. Palavras-chave: Anemia; Eritrograma; Hematologia; Vaca leiteira;

ABSTRACT PAIANO, R. B. Effects of anemia on periparturient cows. [Efeitos da anemia em vacas periparturientes]. 2018. 77 f. Dissertação (Mestrado em Ciências) Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. The objectives of this study were to characterize the hematological and productive pattern during the peripartum in cows with and without anemia, as well as to evaluate the erythrogram in animals that presented acute puerperal metritis (APM), lameness, acetonemia, increased non-esterified fatty acids (NEFA) and cows with different categorization of body condition score (BCS). In study 1, 50 Holstein cows (29 multiparous and 21 primiparous) were used. Blood samples and physical examination were performed at 13 different times: 18 ± 3, 12 ± 2, 5 ± 1, and 2 ± 1 before calving, and 1, 7, 14, 21, 30, 45 and 60 days postpartum. Erythrogram evaluations were performed, and red blood cell count (RBC), hemoglobin concentration, packed cell volum (PCV), and absolute hematimetric values of mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC), mean corpuscular hemoglobin, red cell distribution width (RDW), serum concentrations of iron, betahydroxybutyrate (BHBA), AGNE and total bilirubin (TBIL) were determined for the biochemical analyzes. Anemia was classified according to hemoglobin values <8 g / dL and globular volume <24%. The prevalence of anemia was higher in the period 60 days postpartum affecting 18.3% of the animals, the pattern of anemia presented was normocytic, normochromic and regenerative. RBC, PCV and hemoglobin were lower (P <0.05) for animals with anemia. While the animals with APM and lameness the value of the erythrogram was very similar throughout the postpartum period. No difference was observed between the groups according to the values of NEFA, BCS and loss of BCS during the periods performed in the postpartum period. In conclusion the anemic animals presented the values of the physical examination according to the physiological limits, the anemia did not cause productive losses in the affected animals. It was not evidenced that animals with APM and claudicants presented a greater reduction of blood crass, excluding the occurrence of inflammatory anemia, and although the prevalence of anemia increased during postpartum, it was not possible to characterize the main association of the reduction of hematological values between the categorizations. In the second study, blood was sampled from 336 animals (252 multiparous and 84 primiparous) between 21 and 30 days in lactation (DEL) on 7 farms in the State of São Paulo with the objective of characterizing the prevalence of anemia in dairy cows, prevalence of anemia in different categorizations such as: lactation number, BCS at the time of collection, dystocia, retention of fetal membranes, mastitis, digestive problem, lameness and acetonemia, as well as the analysis erythrogram, biochemical profile, BCS, and milk production among animals with and without anemia. In conclusion, the prevalence of anemia was low (16.3%) and no association with the categorizations performed in this study were observed. Keywords: Anemia; Erythrogram; Dairy cow; Hematology;

Avaliação dos parâmetros etológicos, laboratoriais e do perfil oxidativo de neonatos muares no primeiro mês de vida: um comparativo com equinos

O objetivo do presente trabalho foi avaliar os parâmetros de vitalidade, comportamentais, laboratoriais e perfil oxidativo de neonatos muares, comparando com os equinos, no primeiro mês de vida. Os neonatos foram acompanhados logo após o nascimento, sendo avaliado o escore Apgar nos momentos 0, 5, 10, 30 e 60 minutos pós-parto, além dos tempos comportamentais (posicionar em decúbito esternal, iniciar reflexo de sucção, levantar, iniciar ingestão de colostro e eliminar mecônio) e a necessidade de realização de enema. Observamos o tempo de delivramento e peso dos anexos fetais e dos potros. A proporção do peso dos potros em relação aos anexos fetais foi calculada no grupo dos muares. Foram realizados exames hematológicos e bioquímicos, enquanto para a avaliação do perfil oxidativo foi mensurada a peroxidação lipídica utilizando o TBARS e a oxidação de proteína. Foi mensurada a atividade enzimática da glutationa peroxidase, superóxido dismutase e as quantidades séricas de bilirrubinas total, indireta e direta. O escore Apgar ao nascimento, 5, 10 e 30 minutos de vida foi maior nos muares. Os muares iniciaram a ingestão de colostro mais precocemente que os equinos, e demoraram mais para eliminar o mecônio. O tempo para delivramento dos anexos fetais foi menor nas éguas gestantes de muar. Os demais parâmetros comportamentais e os pesos dos potros e anexos foram iguais entre os dois grupos. Não houve correlação entre os pesos dos neonatos e dos anexos fetais nos muares. Nos muares, CHCM, plaquetas, albumina, cálcio, cloro, ferro e magnésio foram maiores. A contagem dos leucócitos totais, neutrófilos segmentados, linfócitos, assim como a relação neutrófilo:linfócito, fibrinogênio, BT, BD, BI, colesterol e CK foi menor nos muares quando comparado aos equinos. Houve interação entre grupo e tempo na contagem de hemácias, hematócrito, hemoglobina, leucócitos totais, neutrófilos segmentados, glicose, ureia, albumina, triglicérides, colesterol, CK e ferro. No perfil oxidativo não houve interação entre grupo e tempo para nenhuma variável analisada. O TBARS foi menor no grupo dos muares, enquanto que a atividade enzimática da GPx foi maior. Ocorreu uma queda progressiva do TBARS nos neonatos, sendo que a GPx se manteve constante do nascimento até os 7 dias, tendo um aumento significativo aos 30 dias. A oxidação de proteína não teve efeito de tempo e de grupo. A SOD não foi influenciada pelo grupo, permanecendo constante nos tempos analisados, com exceção da 1 hora, com menor atividade em relação às 6 horas, 7 e 30 dias. As concentrações das bilirrubinas foram menores nos muares. Tendo em vista as diferenças encontradas entre as espécies, este estudo oferece dados de referência comportamentais, hematológicos, bioquímicos e oxidativos para muares saudáveis no primeiro mês de vida, podendo ser útil para o diagnóstico e tratamento de neonatos comprometidos.

The aim of the present study was to evaluate vitality, behavioral, laboratory parameters and oxidative profile of newborn mules, comparing with horses during the first month of life. The foals were monitored from birth, Apgar score was assessed at 0, 5, 10, 30 and 60 minutes postpartum and behavioral traits (stand in sternal recumbency, suckle reflex, stand, ingest colostrum and meconium elimination) and the need of enema evaluated. We observed time for placental delivery and weighed placenta and foals. The relationship between placental and foal weight was calculated for the mules group. Laboratory evaluation included hematological and biochemical parameters, while lipid peroxidation was measured using TBARS and oxidation of protein. Glutathione peroxidase activity, superoxide dismutase and total, indirect and direct bilirubin were used to evaluate antioxidant profile. Apgar score at birth, 5, 10 and 30 minutes after birth was higher in mules. Mules started nursing colostrum earlier than horses, however elimination of meconium started later. Mares pregnant with mules eliminated fetal membranes earlier. Foals and placental weight were similar between groups. There was no correlation between placental and foals weight. In laboratory parameters mules had higher MCHC, platelets, albumin, calcium, chloride, iron and magnesium, while total leukocytes, segmented neutrophils, lymphocytes, neutrophil:lymphocyte ratio, fibrinogen, BT, BD, BI, cholesterol and CK were lower in mule compared to horses. Interaction was found between group and time for red blood cells, hematocrit, hemoglobin, total leukocytes, segmented neutrophils, glucose, urea, albumin, triglycerides, cholesterol, CK and iron. Oxidative profile results showed no interaction between group and time for any analyzed variable. TBARS was lower in mules, while GPx activity was higher. There was a progressive TBARS decrease over time in the studied neonates, with GPx remaining constant from birth to 7 days, with a significant increase at 30 days. Time and group did not affect protein oxidation. SOD did not have a group effect and showed constant activity between analyzed times, except at 1 hour, when activity was lower than 6 hours, 7 and 30 days. Bilirrubins were lower in mules. Based on the differences found between species, this study offers reference value in behavioral, hematological, biochemistryl and oxidative aspects in healthy mule neonates during the first month of life, and it can be useful for diagnosis and treatment of compromised neonates. Keywords: Hematology. Biochemistryl. Apgar. Oxidative balance. Behavior.