Características clínicas, histopatológicas e imuno-histoquímicas do mastocitoma cutâneo equino: relato de caso / Clinical, histopathological and immunohistochemical chacteristics ofequine cutaneous mastocytoma: case report

Uma égua puro sangue árabe, com 3 anos de idade, pertencente ao rebanho experimental da FMVZ-USP apresentou lesões tumorais cutâneas nos membros pélvicos direito e esquerdo com aproximadamente um ano de evolução. Notou-se nova formação cutânea com crescimento rápido na região do pescoço, e desde então, as lesões dos membros ganharam características inflamatórias. Foi realizada punção aspirativa da lesão do pescoço para análise citológica, em que se identificou infiltrado eosinofílico. Optou-se pelo início de tratamento conservativo com três infiltrações intralesionais consecutivas com corticoesteroide. A partir da falta de sucesso das infiltrações foram realizadas as excisões cirúrgicas totais dos nódulos do pescoço, membro pélvico direito e esquerdo. Todos os materiais obtidos dos procedimentos cirúrgicos foram enviados para avaliação histopatológica e imuno-histoquímica, nas quais se confirmou o diagnóstico de mastocitoma cutâneo. O animal recebeu alta após a cicatrização das feridas cirúrgicas e remissão dos sinais, e não demonstrou recidivas ou outras complicações advindas das lesões tumorais. Algumas neoplasias cutâneas são bem descritas e de comum ocorrência na espécie equina, como o sarcoide, melanoma, papiloma e tumor de células escamosas. Já o mastocitoma cutâneo consiste em neoplasia cutânea rara nessa espécie. Segundo a literatura, não parece existir uma predileção racial para o aparecimento deste tumor, entretanto, alguns autores citam o acometimento maior nos animais Puro Sangue Árabe. Para o estabelecimento do diagnóstico definitivo é importante a associação dos exames físico, histopatológico e imuno-histoquímico e, apesar desta neoplasia ser de raro aparecimento nos equinos, deve ser sempre considerada como diagnóstico diferencial.(AU)

A 3 year-old mare, Arab, that belongs to the experimental herd of FMVZ-USP presented cutaneous tumor lesions on right and left posterior limb with approximately one year of evolution. A new formation with rapid growth was observed on the neck region, and since then, the limbs lesion gained inflammatory characteristics. Aspirative punction was performed on the neck formation in order to submit the sample to cytological analyses, in which eosinophilic infiltrate was identified. At this point, a conservative approach was chosen with three consecutive corticoid infiltrations. With lack of success of infiltrative therapy, neck, right and left posterior limbs lesions were surgically removed. The materials obtained from surgical procedures were sent to histophatological and immunohistrochemical evaluation that confirmed cutaneous mastocytoma diagnosis. The mare was discharged after all surgical wound were healed and after full remission of clinical signs, and did not show relapses or any other complication from tumor lesions. Some cutaneous tumors are well described and commonly occur in horses, such as sarcoids, melanoma, papilloma and squamous cell carcinoma. Cutaneous mastocytoma is considered a rare cutaneous tumor in this species. According to literature, equine mastocytoma do not have breed predilection, however, some authors mention a greater involvement in Purebreed Arabian horses. In order to establish a definitive diagnosis, it is important to associate physical exams to histophatological an immunohistochemical evaluation and, even though rare in horses, this neoplasm must be considered as a differential diagnosis.(AU)

Características clínicas, histopatológicas e imuno-histoquímicas do mastocitoma cutâneo equino: relato de caso / Clinical, histopathological and immunohistochemical chacteristics ofequine cutaneous mastocytoma: case report

Uma égua puro sangue árabe, com 3 anos de idade, pertencente ao rebanho experimental da FMVZ-USP apresentou lesões tumorais cutâneas nos membros pélvicos direito e esquerdo com aproximadamente um ano de evolução. Notou-se nova formação cutânea com crescimento rápido na região do pescoço, e desde então, as lesões dos membros ganharam características inflamatórias. Foi realizada punção aspirativa da lesão do pescoço para análise citológica, em que se identificou infiltrado eosinofílico. Optou-se pelo início de tratamento conservativo com três infiltrações intralesionais consecutivas com corticoesteroide. A partir da falta de sucesso das infiltrações foram realizadas as excisões cirúrgicas totais dos nódulos do pescoço, membro pélvico direito e esquerdo. Todos os materiais obtidos dos procedimentos cirúrgicos foram enviados para avaliação histopatológica e imuno-histoquímica, nas quais se confirmou o diagnóstico de mastocitoma cutâneo. O animal recebeu alta após a cicatrização das feridas cirúrgicas e remissão dos sinais, e não demonstrou recidivas ou outras complicações advindas das lesões tumorais. Algumas neoplasias cutâneas são bem descritas e de comum ocorrência na espécie equina, como o sarcoide, melanoma, papiloma e tumor de células escamosas. Já o mastocitoma cutâneo consiste em neoplasia cutânea rara nessa espécie. Segundo a literatura, não parece existir uma predileção racial para o aparecimento deste tumor, entretanto, alguns autores citam o acometimento maior nos animais Puro Sangue Árabe. Para o estabelecimento do diagnóstico definitivo é importante a associação dos exames físico, histopatológico e imuno-histoquímico e, apesar desta neoplasia ser de raro aparecimento nos equinos, deve ser sempre considerada como diagnóstico diferencial.

A 3 year-old mare, Arab, that belongs to the experimental herd of FMVZ-USP presented cutaneous tumor lesions on right and left posterior limb with approximately one year of evolution. A new formation with rapid growth was observed on the neck region, and since then, the limbs lesion gained inflammatory characteristics. Aspirative punction was performed on the neck formation in order to submit the sample to cytological analyses, in which eosinophilic infiltrate was identified. At this point, a conservative approach was chosen with three consecutive corticoid infiltrations. With lack of success of infiltrative therapy, neck, right and left posterior limbs lesions were surgically removed. The materials obtained from surgical procedures were sent to histophatological and immunohistrochemical evaluation that confirmed cutaneous mastocytoma diagnosis. The mare was discharged after all surgical wound were healed and after full remission of clinical signs, and did not show relapses or any other complication from tumor lesions. Some cutaneous tumors are well described and commonly occur in horses, such as sarcoids, melanoma, papilloma and squamous cell carcinoma. Cutaneous mastocytoma is considered a rare cutaneous tumor in this species. According to literature, equine mastocytoma do not have breed predilection, however, some authors mention a greater involvement in Purebreed Arabian horses. In order to establish a definitive diagnosis, it is important to associate physical exams to histophatological an immunohistochemical evaluation and, even though rare in horses, this neoplasm must be considered as a differential diagnosis.

Clinical, histopathological and immunohistochemical chacteristics of equine cutaneous mastocytoma: case report / Características clínicas, histopatológicas e imuno-histoquímicas do mastocitoma cutâneo equino: relato de caso

A 3 year-old mare, Arab, that belongs to the experimental herd of FMVZ-USP presented cutaneous tumor lesions on right and left posterior limb with approximately one year of evolution. A new formation with rapid growth was observed on the neck region, and since then, the limbs lesion gained inflammatory characteristics. Aspirative punction was performed on the neck formation in order to submit the sample to cytological analyses, in which eosinophilic infiltrate was identified. At this point, a conservative approach was chosen with three consecutive corticoid infiltrations. With lack of success of infiltrative therapy, neck, right and left posterior limbs lesions were surgically removed. The material obtained from surgical procedures were sent to histophatological and immunohistrochemical evaluation, that confirmed cutaneous mastocytoma diagnosis. The mare was discharged after all surgical wound were healed and after full remission of clinical signs, and did not show relapses or any other complication from tumor lesions. Some cutaneous tumors are well described and commonly occur in horses, such as sarcoids, melanoma, papilloma and squamous cell carcinoma. Cutaneous mastocytoma is considered a rare cutaneous tumor in this species. According to literature, equine mastocytoma do not have breed predilection, however, some authors mention a greater involvement in Purebreed Arabian horses. In order to establish a definitive diagnosis, it is important to associate physical exams to histophatological an immunohistochemical evaluation and, even though rare in horses, this neoplasm must be considered as a differential diagnosis.

Uma égua puro sangue árabe, com 3 anos de idade, pertencente ao rebanho experimental da FMVZ-USP apresentou lesões tumorais cutâneas nos membros pélvicos direito e esquerdo com aproximadamente um ano de evolução. Notou-se nova formação cutânea com crescimento rápido na região do pescoço, e desde então, as lesões dos membros ganharam características inflamatórias. Foi realizada punção aspirativa da lesão do pescoço para análise citológica, em que se identificou infiltrado eosinofílico. Optou-se pelo início de tratamento conservativo com três infiltrações intralesionais consecutivas com corticoesteroide. A partir da falta de sucesso das infiltrações foram realizadas as excisões cirúrgicas totais dos nódulos do pescoço, membro pélvico direito e esquerdo. Todos os materiais obtidos dos procedimentos cirúrgicos foram enviados para avaliação histopatológica e imuno-histoquímica, nas quais se confirmou o diagnóstico de mastocitoma cutâneo. O animal recebeu alta após a cicatrização das feridas cirúrgicas e remissão dos sinais, e não demonstrou recidivas ou outras complicações advindas das lesões tumorais. Algumas neoplasias cutâneas são bem descritas e de comum ocorrência na espécie equina, como o sarcoide, melanoma, papiloma e tumor de células escamosas. Já o mastocitoma cutâneo consiste em neoplasia cutânea rara nessa espécie. Segundo a literatura, não parece existir uma predileção racial para o aparecimento deste tumor, entretanto, alguns autores citam o acometimento maior nos animais Puro Sangue Árabe. Para o estabelecimento do diagnóstico definitivo é importante a associação dos exames físico, histopatológico e imuno-histoquímico e, apesar desta neoplasia ser de raro aparecimento nos equinos, deve ser sempre considerada como diagnóstico diferencial.

Morfometria corporal de equinos utilizados em trabalho, esporte e lazer em três municípios do Mato Grosso do Sul / Morphometry body of equines used in work, sport and leisure in three cities of Mato Grosso do Sul / Morfometría del cuerpo de caballos usados en el trabajo, el deporte y el ocio en tres ciudades de Mato Grosso do Sul

Em diversos casos, observam-se equinos submetidos a atividades não compatíveis com sua estrutura corporal, assim, analisou-se medidas morfométricas, de 41 machos e 45 fêmeas (adultos), pertencentes às raças Árabe, Quarto de Milha, Puro Sangue Inglês, Crioulo, Brasileiro de Hipismo e grupamento genético Petiço, utilizadas para esporte, lazer e trabalho em três municípios do MS. Com auxílio de fita métrica e hipômetro mensuraram-se alturas: cernelha (AC), joelho (AJ), garupa (AG), codilho ao solo (ACS), jarrete (AJA); comprimentos: corporal (CC), cabeça (CCab), pescoço (CP), espádua (CE), dorso lombar (CDL), garupa (CG); perímetros: joelho (PJ), canela (PC), torácico (PT), antebraço (PAB); larguras: garupa (LG), peito (LP), cabeça (LCab). Modelo estatístico continha efeitos fixos de raça, sexo e interação raça*sexo e todos foram significativos (P<0,05), observando baixos valores de coeficientes de variação. O Brasileiro de Hipismo apresentou maiores valores entre os caracteres, exceto para CDL. O Petiço não apresentou valores inferiores apenas para CP e CDL, observados no Crioulo e Árabe respectivamente. Correlações entre comprimento, altura, perímetro e largura foram moderadas (r= 0,79), não sendo significativas (P<0,05) apenas entre CDL com PT e AG. As multivariadas determinaram AC e AG como variáveis que melhor justificaram. Com base no cluster, as raças e o PE demonstraram dispersão dentre seus exemplares, com portes maiores ou menores. Categorizou-se 5 grupos, onde o Puro Sangue Inglês e Quarto de Milha obtiveram mesmo grupamento, se ligando ao Brasileiro de Hipismo, demonstrando que o grupo 2, possuí perfil de animais com estaturas altas. O Árabe e Crioulo, representaram o grupo 3, com estaturas intermediárias. As raças, exceto o Petiço se ligarão no grupo 4. Conclui-se que a morfometria do Petiço foram baixas, podendo sobrecarregar sua estrutura corporal. Puro Sangue Inglês e Brasileiro de hipismo apresentaram perfil que proporcionam impulso e velocidade, enquanto Quarto de Milha e Crioulo, explosão e agilidade. O Árabe apresentou perfil de agilidade e rapidez. Considerando fins de esporte, trabalho e lazer, torna-se interessante a seleção de pais de gerações futuras com base no cluster.

In several cases, are observed horses subjected to activities that are not compatible with your body structure, so we analyzed morphometric measurements, of 41 males and 45 females (adults), belonging to breeds Arabian, Quarter Horse, Thoroughbred, Creole, Brazilian Equestrian and genetic group Petiço, used for sport, leisure and work in three counties of MS. With the help of measuring tape and measured up hipômetro heights: withers (AC), knee (AJ), croup (AG), elbows to the ground (ACS), hock (AJA); lengths: body (CC), head (CCAB) neck (CP), shoulder (EC), dorsal lumbar (CDL), croup (CG); perimeters: knee (PJ), cinnamon (PC), thoracic (PT), forearm (PAB); widths: croup (LG) chest (LP), head (LCab). Statistical model contained fixed effects of breed, sex and race sex interaction and all were significant (P <0.05), observing low values of coefficients of variation. The Brazilian Equestrian showed the highest values among the characters, except for CDL. The Petiço not only showed lower values for CP and CDL, observed in Creole and Arabian respectively. Correlations between length, height, width and circumference were moderate (r=0.79), not significant (P<0.05) only between CDL with PT and AG. The multivariate AC and AG determined as variables that best justified. Based on the cluster, races and PE showed dispersion among their copies, with larger or smaller sizes. Categorized by 5 groups, where the Thorough bred and Quarter Horse got same group, calling itself the Brazilian Equestrian, demonstrating that the group 2 animals possess profile with tall stature. The Arabian and Creole represented the group 3, with intermediate heights. The breeds except Petiço will bind in group 4. We conclude that morphometry of Petiço were low and may overload your body structure. Thoroughbred and Brazilian equestrian profile presented that provide momentum and speed, while Quarter Horse and Criollo, explosion and quickness. The Arabian profile showed agility and speed. Considering the purpose of sport, work and leisure, it becomes interesting selection of parents of future generations based on the cluster.

Varios casos se observan caballos sometidos a actividades que no sean compatibles con su estructura morfométricas, por lo tanto, se analizaron las mediciones morfométricas de 41 machos e 45 hembras (adultos), pertenecientes las razas Árabe, Cuarto de Milla, Puro Sangre Ingles, Criollo, Brasilero de Hipismo e agrupamiento genético Petizo, utilizado para el deporte, el ocio y el trabajo en tres condados de MS. Con la ayuda de la cinta y hipometro se midieron alturas: la cruz (AC), rodilla (AJ), Grupa (AG), con los codos en el suelo (ACS), corvejón (AJA); longitudes: corporal (CC), cabeza (CCAB), cuello (CP), hombro (CE), la espalda lumbar (CDL), crup (CG); perímetros: rodilla (PJ), canela (PC), torácica (PT), el antebrazo (PAB); anchuras: grupa (LG), mama (LP), cabeza (LCab). Modelo estadístico contenida efectos fijos de raza, sexo y raza * interacción sexo y todas fueron significativas (P <0,05), observándose valores bajos de coeficientes de variación. El Brasilero de Hipismo tuvo mayor entre las caracteristicas, a excepción de CDL. El Petizo no sólo mostró valores más bajos para PC y CDL, observada en Criollo y los Árabe, respectivamente. Las correlaciones entre la longitud, altura, ancho y la circunferencia fueron moderadas (r= 0,79), no significativa (P <0,05) entre solo CDL con PT y AG. El multivariado determinó AC y AG como variables que mejor justificaron. Con base en el clúster, las razas y el PE mostraron una gran dispersión entre sus copias, con tamaños grandes o pequeños. Se clasifica 5 grupos, donde el grupo Puro Sangre Ingles y Cuarto de Milla obtenieron la misma vinculación, junto con el Brasilero de Hipismo, lo que demuestra que el grupo 2, los animales poseen perfil con alturas elevadas. El ARB y CR representa el grupo 3, con tallas intermedias. Las carreras excepto la EP se unirá en el grupo 4. Se concluye que la morfometria del Petizo fueron bajas y puede sobrecargar la estructura de su cuerpo. Puro Sangre Ingles y Brasilero de Hipismo mostró perfil que propocionará un impulso y velocidad, enquanto Cuarto de Milla e Criollo, explosión y agilidad. El Árabe mostró agilidad y velocidad. Teniendo en cuenta el propósito de deporte, el trabajo y el ocio, se hace interesante selección de los padres de las generaciones futuras basadas en el clúster.

Population Structure and Genetic Characterization of the Mangalarga Marchador Horse Breed

O Mangalarga Marchador (MM) é a maior raça equina do Brasil, e com a análise de pedigree e de marcadores moleculares tornou-se possível a melhor investigação genética na raça. Os objetivos neste trabalho foram avaliar a estrutura populacional e pré-caracterizar geneticamente o MM com dados de pedigree e genotipagens. Pedigree de 514.283 animais foram utilizados para estimações da endogamia (F), probabilidade de origem gênica e de estruturação da raça. Genotiparam-se 3.193 equinos para 13 microssatélites (SSR) e em chip de polimorfismo de nucleotídeo único, SNP70K, 244 animais das raças MM, Andaluz (AND), Puro Sangue Lusitano (PSL), Puro Sangue Inglês (PSI), Árabe (ARA), Campolina (CAM), Mangalarga (MAN), Puro Sangue Espanhol (PSE) e Sorraia (SOR). Assim, calcularam-se o número de alelos raros (AR), heterozigosidades esperadas (He) e observadas (Ho), homozigosidades esperadas (Home) e observadas (Homo), frequência de alelos menores (MAF), estatísticas F (Fis, Fit e Fst), distância genética (DG), análise de componentes principais (ACP), equilíbrio de Hardy-Weinberg (EHW), desequilíbrio de ligação (DL), diferenciação populacional, estruturação populacional por agrupamento e presença de haplótipos comuns entre as raças. Por análise de pedigree da raça MM, o intervalo de geração foi de 9,48 a 10,43, F de 1,02% a 1,10%, relação genética aditiva de 0,0023 a 0,0045, números efetivos de ancestrais, fundadores e genomas fundadores foram de 198 a 1.038, 225 a 1.062 e 133 a 150, números de fundadores que apresentam 50% e 10% do pool genético representaram 7,94% a 19,09% e 0,69% a 6,64% dos fundadores. Por análise de SSR, o AR médio no MM foi de dois alelos/locus, médias de He e Ho oscilaram de 0,5767 a 0,8450 e 0,5331 a 0,7949, médias de Fis (-0,0195), Fit (0,0566) e Fst (0,0748) e observou-se desvios de EHW, além de diferenciação populacional nos loci e 60,26% dos alelos tinham forte DL. As DG foram maiores no ARA e PSI com as demais raças e menores entre o MM, MAN e CAM e estas com o AND e PSL, resultado corroborado pelo ACP. O MM foi uma entidade genética subestruturada, porém com alguns haras mais estruturados. Com os SNP, no MM obteve-se o maior valor de Homo (34.916,70), 51% dos animais possuíam perda de heterozigosidade, MAF médio de 0,2010, houve desvios de EHW nos cromossomos, He variou de 0,2940 a 0,3231 e extensões menores de DL. Encontrou-se bloco de haplótipo semelhante entre o MAN e MM. A menor diferenciação ocorreu entre o CAM e MM (Fst = 0,0411), e a maior entre PSI e SOR (Fst = 0,2284). A raça MM foi pouca estruturada ao contrário do PSL, PSE, PSI e SOR, e observou-se o compartilhamento de alelos entre MM e MAN. ACP discriminou em maior magnitude a SOR e PSI das demais raças, moderadamente o PSL e PSE, e menor entre MM, MAN e CAM. O MM não está em severa endogamia, o que não prejudica sua evolução como espécie. Contudo, é necessário o monitoramento contínuo da diversidade genética com o uso de marcadores e registros precisos de pedigree.

Mangalarga Marchador (MM) is the largest equine breed in Brazil, and the analysis of pedigree and molecular markers has made possible the best genetic research in the breed. The objectives of this work were to evaluate the population structure and to pre-characterize the MM with pedigree and genotyping data. Pedigree of 514,283 animals were used for estimates of inbreeding (F), probability of gene origin and breed structuring. Genotyped 3193 equines for 13 microsatellites (SSR) and in chip of the single nucleotide polymorphism, SNP70K, 244 animals of the breeds MM, Andalusian (AND), Lusitano (LUS), Thoroughbred (THO), Arabian (ARA), Campolina (CAM), Mangalarga (MAN), Puro Sangue Espanhol (PSE) and Sorraia (SOR). Thus, calculated the number of rare alleles (RA), expected heterozygosities (He) and observed (Ho), expected homozygosity (Home) and observed (Homo), minor allele frequency (MAF), F statistics (Fis, Fit e Fst), genetic distance (GD), principal component analysis (PCA), Hardy-Weinberg equilibrium (HWE), linkage disequilibrium (LD), population differentiation, population structuring by clustering and presence of common haplotypes between breeds. By pedigree analysis in the MM, the generation interval was from 9.48 to 10.43, F from 1.02% to 1.10, additive genetic ratio from 0.0023 to 0.0045, effective numbers of ancestors, founders, and genomes founders were from 198 to 1038, 225 to 1062 and 133 to 150, numbers of founders who presented 50% and 10% of the genetic pool accounted for 7.94% to 19.09% and 0.69% to 6.64% of the founders. For SSR analysis, the mean RA in the MM was two alleles/locus, He and Ho mean values ranged from 0.5767 to 0.8450 and 0.5331 to 0.7949, Fis averages (-0.0195), Fit (0.0566) and Fst (0.0748) and deviations of HWE were observed such as population differentiation in the loci and 60.26% of the alleles had strong LD. The GD were higher in the ARA and THO with the other breeds and minors between the MM, MAN and CAM and these with the AND and LUS, a result corroborated by the PCA. The MM was a substructured genetic entity, however with some more structured farms. With the SNP, in the MM the highest value of Homo (34,916.70) was found, 51% of the animals had loss of heterozygosity, mean MAF of 0.2010, there were deviations of EHW in the chromosomes, He ranged from 0.2940 to 0.3231 and smaller extensions of DL. A similar haplotype block was found between MAN and MM. The lowest differentiation occurred between CAM and MM (Fst = 0.0411), and the highest between THO and SOR (Fst = 0.2284). The MM was poorly defined unlike the LUS, PSE, THO and SOR, and the alleles sharing between MM and MAN was observed. PCA discriminated to a greater extent the SOR and THO of the other breeds, moderately the LUS and PSE, and smaller between MM, MAN and CAM. The MM is not in severe endogamy, which does not affect its evolution as a species. However, continuous monitoring of genetic diversity is necessary with the use of molecular and accurate pedigree records.

POLYMORPHISMS IN CANDIDATE GENES FOR ATHLETIC PERFORMANCE AND QUANTIFICATION OF MCT1 AND CD147 IN RED BLOOD CELLS OF ARABIAN AND QUARTER HORSES

O transportador de monocarboxilato isoforma 1 (MCT1), presente na membrana das hemácias, e sua proteína auxiliar CD147 têm como função transportar H+e lactato do plasma para dentro das hemácias, mantendo assim, a homeostase ácido-base e retardando a acidose sistêmica e fadiga muscular. Dessa forma, o objetivo desse estudo foi comparar as quantidades das proteínas MCT1 e CD147 em hemácias de cavalos Árabes e Quartos de Milha com diferentes níveis de desempenho atlético. Além disso, objetivou-se buscar por polimorfismos para os genes MCT1, CD147, DMRT3 e PDK4, a fim de checar associações entre os polimorfismos e o desempenho nas raças. Cavalos Árabes e Quartos de Milha foram divididos em dois grupos de acordo com o desempenho em provas de enduro e provas de corridas, respectivamente. A quantidade de MCT1 e CD147 na membrana plasmática das hemácias foi determinada por western blotting com unidades arbitrárias de densidade óptica (OD) e anticorpos reagentes à espécie humana anti-MCT1 e anti-CD147. Os dados para as quantidades de proteínas foram analisados pelo PROC MIXED do SAS. O modelo incluiu a idade como covariável e os efeitos fixos de sexo, raça e grupo de desempenho dentro de raça. As correlações foram analisadas pelo teste de Pearson pelo procedimento PROC CORR. P-valores <0,01 foram considerados estatisticamente significantes. Os polimorfismos dos genes foram analisados por sequenciamento (MCT1 e CD147), PCR-RFLP (DMRT3) e ARMS-PCR (PDK4). Os pacotes estatísticos Genetics, Lattice e GenABEL foram utilizados para comparar as frequências dos grupos de desempenho no software R, com o teste exato de Fisher a 5% de significância. As proteínas MCT1 e CD147 foram encontradas nas hemácias de todos os animais. A quantidade de MCT1 foi significativamente (p<0,0001) maior em Quartos de Milha (2,99 ± 0,35 OD) do que em Árabes (1,04± 0,08 OD). Quartos de Milha (3,23± 0,38 OD) também apresentaram maior conteúdo de CD147 do que Árabes (0,88 ± 0,06 OD). Não houve diferença estatística nas quantidades de proteínas para os grupos de desempenho de ambas as raças. Correlação positiva foi encontrada entre as quantidades de MCT1 e CD147 (r=0,95; p<0,0001). O Alelo A dos polimorfismos Lys457Gln:1573A>C do gene MCT1 e Ile51Val:168A>G do gene CD147 estavam fixados em ambas as raças. Um novo polimorfismo (AY457175.1:c1498G>A) foi encontrado na sequência do gene MCT1. Para o DMRT3, todos os animais apresentaram o alelo C fixado para o polimorfismo. Árabes mostraram maior frequência para o alelo G do que Quartos de Milha (p<0,01) para o polimorfismo no gene PDK4. Entretanto, não houve diferença entre os grupos de desempenho para as duas raças. Dessa forma, conclui-se que Quartos de Milha têm maiores quantidades de MCT1 e CD147 do que Árabes. Não foi possível determinar a influência dos polimorfismos nos genes MCT1, CD147 e DMRT3 no desempenho atlético das duas raças visto que seus alelos estavam fixados. Além disso, houve diferença significativa nas frequências do polimorfismo no gene PDK4 entre Árabes e Quartos de Milha, mas não houve diferença entre os grupos de desempenho.

Monocarboxylate transporter isoform 1 (MCT1), present in the red blood cell membranes and its ancillary protein CD147 have as function transport H+ and lactate ions from the plasma into the red blood cells, thereby maintaining acid/base homeostasis and retarding systemic acidosis and muscular fatigue. Thereby, the aim of this study was to compare the amount of MCT1 and CD147 proteins in the red blood cells of Arabian and Quarter Horses with different levels of athletic ability. Furthermore, we investigated polymorphisms for MCT1, CD147, DMRT3, and PDK4 genes in Arabian and Quarter Horses in order to check associations between the polymorphisms and the performance in these breeds. Arabian horses were divided into two groups according to their performance in endurance competition and Quarter Horses were separated by its performance in races, determined by Speed Index. The amount of MCT1 and CD147 proteins in the plasma membrane of red blood cells was determined by western blotting analysis with arbitrary optical density units (OD), using a human specific anti-MCT1 and anti-CD147 antibody. Data for the amounts of proteins were analyzed using the PROC MIXED procedure of SAS software. The model for the analysis included the effects of sex, breed and performance group within breed as fixed effect and age as covariate. The correlations were analyzed by Pearson correlation test using the PROC CORR procedure of SAS software. P values <0.01 were considered statistically significant. Polymorphisms of the genes were analyzed by sequencing (MCT1 and CD147), PCR-RFLP (DMRT3) and ARMS-PCR (PDK4) techniques.The statistical packages Genetics, Lattice and GenABEL were used to compare the frequencies of the groups using the software R, with the Fisher's exact test being performed with significance level of 5%. MCT1 and CD147 proteins were found in the red blood cell membranes of all studied animals. The amount of MCT1 was significantly (p<0.0001) higher in Quarter Horses (2.99 ± 0.35 OD) than in Arabians (1.04± 0.08 OD). Quarter Horses (3.23± 0.38 OD) also showed bigger contents of CD147 than Arabians (0.88 ± 0.06 OD). There was not statistical difference in the amounts of MCT1 and CD147 between the performance groups of both breeds. Positive correlation was found between the amounts of MCT1 and CD147 (r=0.95; p<0.0001). The A allele from the polymorphisms Lys457Gln:1573A>C of MCT1 and Ile51Val:168A>G of CD147 gene, were fixed in both breeds. A new polymorphism (AY457175.1:c1498G>A) was found in the MCT1 gene sequence. For DMRT3 mutation, all the animals shown to have the C allele fixed for the polymorphism. Arabians showed significant greater frequency of the G allele than Quarter Horses (p<0.01) for the PDK4 polymorphism. However, there was not difference between the groups of performance for both breeds. In summary, it follows that the Quarter Horses have greater amount of MCT1 and CD147 proteins than Arabian. It was not possible to determine the influence of polymorphisms in MCT1, CD147 and DMRT3 genes in the athletic performance of these breeds since they had alleles fixed. There was a significant difference in the frequencies of the PDK4 polymorphism between Arabians and Quarter Horses, but there was not difference between the performance groups.

Avaliação de nova técnica de biopsia intestinal assistida por videolaparoscopia em equinos

As doenças do trato digestório nos equinos apresentam altas taxas de morbidade e mortalidade, com diferentes etiologias. Em alguns casos, o emprego da biopsia intestinal se faz necessário para auxílio no diagnóstico dessas enfermidades. No entanto, as técnicas convencionais podem trazer riscos aos pacientes, por serem invasivas, ou não serem elucidativas por apresentarem limitações de acesso a determinados segmentos. O presente estudo teve como objetivo validar uma técnica de biopsia intestinal, intracorpórea, assistida por videolaparoscopia, ainda não descrita na literatura, para coleta de fragmentos de mucosa de jejuno e cólon menor de equinos, que sejam considerados adequados para avaliação histológica. Para tanto, foram utilizados seis equinos machos, da raça Puro Sangue Árabe, com idade de dois anos, sem histórico prévio de doenças do trato digestório, com peso médio de 267 kg. Todos os animais foram submetidos ao mesmo procedimento laparoscópico, instituindo-se apenas jejum alimentar prévio de oito horas. Os equinos foram acompanhados com exame físico e de ultrassonografia abdominal, desde o dia precedente às laparoscopias, até o 15º dia do período pós-operatório, bem como avaliados por meio de hemograma, provas de funções hepática e renal, e análise do líquido peritoneal nos dias 0, 1, 2, 3, 5, 7, 10, 14, 21 e 30. O tempo cirúrgico foi cronometrado, sendo registrado o tempo total, iniciado na criação do primeiro portal de acesso e finalizado ao término da sutura de pele, e os tempos parciais para biopsia de jejuno e cólon menor separadamente, com início na apreensão do segmento intestinal e término quando constatada a polimerização da cola cirúrgica sobre o orifício de acesso da agulha. De cada segmento obtiveram-se dez fragmentos, e posteriormente submetidos à análise histológica. Atribuiu-se escore para cada um deles, sendo considerado 0 fragmentos com qualidade ruim; 1 para qualidade boa e 2 para qualidade ótima. Por sua vez, os considerados viáveis foram somente os que se enquadraram nos escores 1 e 2. Amostras avaliadas como adequadas apresentaram no mínimo 50% dos fragmentos viáveis. A média do tempo total de procedimento foi de 66,50 minutos (± 7,87), enquanto a média do tempo parcial para biopsia de jejuno foi de 14,2 minutos (± 4,3) e a de cólon menor 12,7 minutos (± 5,0). Clinicamente, os animais apresentaram desconforto abdominal nas primeiras 48 horas. Os exames ultrassonográficos do abdômen não revelaram alterações condizentes com peritonite ao longo de todo experimento. Os parâmetros laboratoriais apresentaram apenas características inflamatórias, sendo que o líquido peritoneal permaneceu alterado até o 21º de pós-operatório, havendo normalização de todos os seus valores no 30º dia do estudo. Na inspeção laparoscópica de dois equinos (E2, E4) foi identificada aderência de porção de omento no diafragma. Nas avaliações histológicas de jejuno, uma amostra (E5) de seis foi considerada inadequada, com 5/12 fragmentos viáveis, e em cólon menor, duas (E1, E2) de seis, foram inadequadas, com 4/9 e 5/10 fragmentos viáveis respectivamente. A nova técnica de biopsia intestinal possibilitou a coleta de amostras adequadas de mucosa para análise histológica, de forma segura para os animais, uma vez que as alterações clínicas e laboratoriais foram aquelas relacionadas ao processo inflamatório, compatível com procedimentos laparoscópicos na espécie.

Gastrointestinal diseases in horses result in high rates of morbidity and mortality, with different aetiologies. In some cases, an intestinal biopsy is needed to aid in the diagnosis of such diseases. However, the conventional techniques can pose risks to patients for being invasive or for not being elucidating due to having limitations in accessing certain segments. The objective of this study was to validate an intestinal biopsy technique, intracorporeal, assisted by laparoscopy, which has not yet been described in the literature, to collect mucosal fragments from the jejuno and small colon, which might be considered suitable for histological assessment. For such, six male horses were used, Arabian breed, with two years of age, without any records of abdominal diseases, weighing 267 kg in average. All horses were subjected to the same laparoscopic procedure, fasting for eight hours previously to the procedure. All horses were monitored through physical examination and abdominal ultrasonography, from the day previous to laparoscopy, until the 15th postoperative day, as well as hemogram, tests of liver and kidney functions, and analysis of the peritoneal fluid in days 0, 1, 2, 3, 5, 7, 10, 14, 21 and 30. The total laparoscopic procedure time was registered, starting at the moment of the first incision and ending at the moment of the skin closure. The partial times for the jejunal biopsy and small colon biopsy were recorded as well, starting at the grasping of the intestinal segment and ending at the moment of polymerization of the surgical adhesive on the needle access site. From each segment, ten fragments were collected and later subjected to histological analysis. A score was assigned for each one of them, being scored "0" fragments of poor quality; "1" fragments of good quality and "2" fragments of optimal quality. The samples considered viable were only the ones which scored 1 and 2. The samples deemed as adequate showed at least 50% of it fragments to be viable. The average of the surgery total time was of 66,50 minutes (± 7.87), whereas the average of the jejunal biopsy was of 14.2 minutes (± 4.3) and the small colon biopsy time was of 12.7 minutes ( ± 5.0). Clinically, the animals showed mild abdominal discomfort in the first 48 hours. Ultrasonographic examination of the abdomen did not reveal any alterations consistent with peritonitis throughout the entire experiment period. Laboratory parameters presented inflammatory characteristics, and the peritoneal fluid remained altered until the 21th postoperative day, with normalization of all its values on the 30th day of the study. During the laparoscopic inspection of two horses (E2, E4) was identified partial omental adhesion with the diaphragm. In the jejunal histological evaluations, one sample (E5) of six was considered inadequate, with 5/12 viable fragments, and as for the small colon, two (E1, E2) of six were inadequate, with 4/9 and 5/10 viable fragments respectively. The new technique proposed allowed a safe collection of adequate mucosal samples for histological analysis, since clinical and laboratory abnormalities identified were related to the inflammatory process associated to the laparoscopic techniques in horses.

ESTRUTURA POPULACIONAL E DIVERSIDADE GENÉTICA DA RAÇA ÁRABE NO BRASIL

Reconhecida como uma das raças equinas mais antigas e influentes, o cavalo Árabe tem sua origem indefinida e supostamente heterogênea, a partir dos resultados de estudos de DNA-mitocondrial, que apontaram importante diversidade genética. Considerando o contexto dos desafios ecológicos a que as espécies são submetidas, tais como competição, predação, patologias e outros, a diversidade genética é fundamental na sua adaptação e evolução. Sua avaliação dentro da população é necessária durante a implementação do programa de seleção para estabelecer uma gestão apropriada do estoque genético, sendo determinada pelo tamanho da população base, mas também pelas estratégias de acasalamento. A análise genética de uma população pode ser levada a termo utilizando-se informação genealógica ou molecular. No caso do presente estudo, seu objetivo foi avaliar a diversidade genética do cavalo Árabe no Brasil, através das informações genealógicas contidas do Stud Book Brasileiro do Cavalo Árabe. Foram utilizados os dados de 54506 animais, cuja consistência de seus pedigrees foi avaliada pelo programa Breed Mate Pedigree Software® e os parâmetros populacionais determinados pela análise com o programa Poprep. A idade média dos machos e fêmeas em reprodução foi, respectivamente, 9,8 e 9,0 anos. A rotatividade de éguas em reprodução pode ser considerada alta (59,02%) e o intervalo médio de gerações ao longo do tempo considerado foi de 9,1 anos. Para a análise da endogamia foram definidas 11 classes com intervalos de 5%, onde 4,32% da população correspondeu a níveis acima dos 10%. A média F de endogamia encontrada para a população foi de 1,98%, considerando-se os dados de ancestrais desde 1808, e 2,90%, considerando-se os dados a partir de 1964, quando da criação do Stud Book Brasileiro do cavalo Árabe. Estes resultados são inferiores a alguns encontrados para populações de cavalos Árabes na Europa, observando-se ampla diversidade genética populacional, podendo estar relacionados ao considerável tamanho da população, ao fluxo gênico de um grande número de importações de animais e à ausência de gargalos genéticos importantes. Todavia, a elevada proporção de animais endogâmicos na população e o aumento das médias de endogamia nas últimas duas décadas, sugerem ajustes de seleção, no sentido de prevenir perdas de diversidade genética no futuro.

Recognized as one of the oldest and most influential horse breeds, the Arabian horse has an undefined and, supposedly heterogeneous origin, from the study results of mitochondrial-DNA, which indicate that significant genetic diversity. Considering the context of the ecological challenges that species are submitted, such as competition, predation, disease and others, genetic diversity is crucial in adaptation and evolution. Evaluation within the population is necessary for the implementation of the screening program to establish a proper management of the genetic stock, being determined by the size of the base population, but also for mating strategies. Genetic analysis of a population may be brought to completion by using family or molecular information. In the present study, its purpose was to evaluate the Arabian horse genetic diversity in Brazil, through the genealogical information in the Stud Book Brazilian Arabian Horse. The data of 54,506 animals were used, whose consistency was assessed by their pedigrees Breed Mate Pedigree Software® program and population parameters determined by analysis with Poprep program. The average age of males and females in reproduction was respectively 9.8 and 9.0 years. The turnover of mares in breeding can be considered high (59.02%) and the average generation interval over time considered was 9.1 years. For the analysis of inbreeding 11 classes were defined with 5% intervals where 4.32% of the population corresponded to levels above 10%. The average F of inbreeding found for the population was 1.98%, considering the data ancestors since 1808, and 2.90%, considering the data from 1964, when the creation of the Brazilian Stud Book of Arabian horse. These results are lower than those found in populations of Arabian horses in Europe, observing large population genetic diversity and may be related to the large size of the population, the gene flow of a large number of animal imports and the absence of important genetic bottlenecks. However, the high proportion of inbred animals in the population and the increase in mean inbreeding in the past two decades, suggest selection of adjustments, in order to prevent loss of genetic diversity in the future.

Avaliação da transferência passiva da imunidade através da proteína total sangüínea, em potros da raça Árabe / Measurement of blood total protein for assessment of passive immunity transference in the newborn Arabian foals

To study the passive immunity transference to the new born foal via colostrum, the total serum protein of 27 foals, being 13 females and 14 males, born from multiparae and primiparae mares was estimated. The blood samples were colected at 6, 12, 18, 24 and 30 hours after the first suckling. The total protein values increase significantly between 6 and 12 hours after the first suckling, being not influenced by the sex of the foal. The total protein values of new borns from multiparae mares were significantly higher than primiparae mares at 12 hours after the first suckling and was mantained in the same levels for 30 hours. It was concluded that the newborn Arabian foals had the highest immunoglobulin absortion between 6 and 12 hours after the first suckling and it is higher in foals born from multiparae than from primiparae mares.(AU)

Alterações nas concentrações séricas de glicose, sódio, potássio, uréia e creatinina, em eqüinos submetidos a provas de enduro de 30km com velocidade controlada

Some plasmatic biochemical parameters of equines submitted to an endurance race of 30km, with controled speed between 12 to 14km/h, taken place at State of São Paulo, Brazil, were studied. Forty five adult equines (4 to 10 years old) were used. They were divided into three groups, according to the breed features: group I: 15 Arabian animals; group II: 15 Mangalarga animals; group III: 15 mixed breed animals. Each group was constituted by 11 males and 4 females. Blood samples were collected in three different times: before the race, 20 to 30 minutes and 80 to 90 minutes after the race, with the animal resting. Seric values of potassium, glucose and creatinine were similar in all groups but there was statistical significant differences according to time collection. Concerning to sodium, all groups showed a variation statistically significcant but the Arabian equines presented a different variation pattern from the other two groups. All groups showed the same variation pattern for seric urea but significant differences for seric urea levels were observed between Mangalarga and mixed breed animals.

Foram estudadas as alterações dos parâmetros de alguns constituintes da bioquímica sérica em eqüinos submetidos a provas de enduro de 30km de percurso, com velocidade controlada de 12 a 14km/h, realizadas no Estado de São Paulo. Para tanto, foram utilizados 45 eqüinos adultos (de 4 a 10 anos de idade), divididos em três grupos, de acordo com as características raciais, da seguinte forma: grupo I constituído por 15 eqüinos da raça Árabe, grupo II, por 15 eqüinos da raça Mangalarga e grupo III, por 15 eqüinos mestiços, sendo que, nos três grupos, 11 dos animais eram machos e 4 fêmeas. As amostras de sangue foram obtidas em três tempos, a saber: antes do início da prova, 20 a 30 minutos após o seu término e 80 a 90 minutos após a realização da prova, com os animais já em repouso. As variações observadas nos valores séricos de potássio, glicose e creatinina foram semelhantes nos três grupos e apresentaram diferenças estatisticamente significativas quanto ao tempo; com relação à variação do sódio sérico, o grupo composto por animais da raça Árabe não se comportou de maneira semelhante aos demais, porém, para os três grupos, foi observada significância estatística.Todos os grupos apresentaram o mesmo padrão de variação para uréia, porém, só se comprovou diferença significante nos teores de uréia para os animais da raça Mangalarga e para os Mestiços.

Alterações nas concentrações séricas de glicose, sódio, potássio, uréia e creatinina, em eqüinos submetidos a provas de enduro de 30km com velocidade controlada

Some plasmatic biochemical parameters of equines submitted to an endurance race of 30km, with controled speed between 12 to 14km/h, taken place at State of São Paulo, Brazil, were studied. Forty five adult equines (4 to 10 years old) were used. They were divided into three groups, according to the breed features: group I: 15 Arabian animals; group II: 15 Mangalarga animals; group III: 15 mixed breed animals. Each group was constituted by 11 males and 4 females. Blood samples were collected in three different times: before the race, 20 to 30 minutes and 80 to 90 minutes after the race, with the animal resting. Seric values of potassium, glucose and creatinine were similar in all groups but there was statistical significant differences according to time collection. Concerning to sodium, all groups showed a variation statistically significcant but the Arabian equines presented a different variation pattern from the other two groups. All groups showed the same variation pattern for seric urea but significant differences for seric urea levels were observed between Mangalarga and mixed breed animals.

Foram estudadas as alterações dos parâmetros de alguns constituintes da bioquímica sérica em eqüinos submetidos a provas de enduro de 30km de percurso, com velocidade controlada de 12 a 14km/h, realizadas no Estado de São Paulo. Para tanto, foram utilizados 45 eqüinos adultos (de 4 a 10 anos de idade), divididos em três grupos, de acordo com as características raciais, da seguinte forma: grupo I constituído por 15 eqüinos da raça Árabe, grupo II, por 15 eqüinos da raça Mangalarga e grupo III, por 15 eqüinos mestiços, sendo que, nos três grupos, 11 dos animais eram machos e 4 fêmeas. As amostras de sangue foram obtidas em três tempos, a saber: antes do início da prova, 20 a 30 minutos após o seu término e 80 a 90 minutos após a realização da prova, com os animais já em repouso. As variações observadas nos valores séricos de potássio, glicose e creatinina foram semelhantes nos três grupos e apresentaram diferenças estatisticamente significativas quanto ao tempo; com relação à variação do sódio sérico, o grupo composto por animais da raça Árabe não se comportou de maneira semelhante aos demais, porém, para os três grupos, foi observada significância estatística.Todos os grupos apresentaram o mesmo padrão de variação para uréia, porém, só se comprovou diferença significante nos teores de uréia para os animais da raça Mangalarga e para os Mestiços.

Eletroforetograma das proteínas do soro de equinos submetidos a diferentes protocolos de exercícios

O exercício de alta intensidade em animais está associado à lesão de células musculares e à indução da resposta de fase aguda (RFA). Uma das alterações provocada por esta RFA é o estimulo da síntese de proteínas de fase aguda pelo fígado e por órgãos extra-hepáticos. Esta RFA é rápida e não específica. Foram utilizados dez equinos das raças Puro sangue Árabe (n=5) e Crioula (n=5), submetidos a testes de exercício de rápida aceleração e curta duração predominantemente anaérobico (TRA) e exercícios de baixa intensidade e longa duração (TLD) predominantemente aeróbico em esteira. Amostras de sangue venoso foram colhidas antes do inicio do exercíco (T0) e em diferentes momentos após o exercício: imediatamente após (T1), 30 minutos (T2), 03h (T3), 12h (T4), 24h (T5) e 48h (T6) após o exercício. A avaliação dos protocolos de exercício baseou-se na avaliação da atividade sérica de creatina quinase (CK) e na dosagem de fibrinogênio e proteínas de fase aguda por SDS-PAGE. Observou-se diminuição nas concentrações de haptoglobina (p?0,05) no TRA, entre os momentos T1 e T2 e entre T1 e T4 após a prática do mesmo. As concentrações de albumina apresentaram aumento (p<0,05) no T2, no protocolo TLD. Os valores de ?-1 glicoproteína ácida apresentaram aumento significativo (p<0,05) quando comparados os protocolos TRA E TLD no T2

The high intensity exercise in animals is associated with muscle cell lesions and an acute phase response (APR). One of the changes promoted by this APR is the stimulus to produce acute phase proteins by the liver and extrahepatic organs. This APR is fast and non-specific. Ten horses were used: five Arabian breed and five Creole breed. These animals were submitted to rapid acceleration and short duration exercises (TRA) and low intensity and long duration exercises on treadmill. Blood samples were obtained before (T0) and in different moments after exercise: immediately after (T1), 30 minutes(T2), 3 hours(T3), 12 hours(T4), 24 hours (T4)and 48 hours(T5) after the exercises. To evaluate the different exercise protocols, the creatine kinase serum activity and fibrinogen concentration were determined. Serum electrophoresis was also performed by means of SDS-PAGE. Observed a decrease in the concentrations of haptoglobin (p ? 0.05) in TRA, between T1 and T2 and between T1 and T4 after practice the same. Albumin concentrations showed an increase (p <0.05) in T2, the protocol TLD. The values of ? 1-acid glycoprotein showed a significant increase (p <0.05) when compared protocols TRA AND TLD in T2