First report of Psittacid Avipoxvirus in Agapornis in Mexico

A postmortem study was performed on two lovebirds (Agapornis fischeri and Agapornis personatus) that had scabs in the periocular region and on the eyelid, as well as serous blepharitis. Microscopically, the eyelids showed ulcers, necrosis and serocellular crusts, severe hyperplasia of keratinocytes with eosinophilic intracytoplasmic inclusion bodies (Bollinger's bodies), bacterial colonies of gram-positive coccoid morphology and PAS-positive septate and 45° branching hyphae. The microbiological study identified the colonies as Staphylococcus spp. and Aspergillus fumigatus, respectively. Using molecular techniques, avian pox clade C was identified on the eyelid. This is the first report in Mexico of a case of avian pox in parrots associated with clade C Avipoxvirus.(AU)

Avipoxvirus detected in tumor-like lesions in a white-faced whistling duck (Dendrocygna viduata) / Avipoxvirus detectado em lesões tipo tumorais em uma marreca-irerê (Dendrocygna viduata)

Avipoxvirus is the etiological agent of the avian pox, a well-known disease of captive and wild birds, and it has been associated with tumor-like lesions in some avian species. A white-faced whistling duck (Dendrocygna viduata) raised in captivity was referred to a Veterinary Teaching Hospital in Northeast due to cutaneous nodules present in both wings. A few days after the clinical examination, the animal died naturally. Once submitted to necropsy, histopathological evaluation of the lesions revealed clusters of proliferating epithelial cells expanding toward the dermis. Some of these cells had round, well-defined, intracytoplasmic eosinophilic material suggestive of poxvirus inclusion (Bollinger bodies). PCR performed on the DNA extracted from tissue samples amplified a fragment of the 4b core protein gene (fpv167), which was purified and sequenced. This fragment of Avipoxvirus DNA present in these tumor-like lesions showed high genetic homology (100.0%) with other poxviruses detected in different avian species in several countries, but none of them were related to tumor-like lesions or squamous cell carcinoma. This is the first report of Avipoxvirus detected in tumor-like lesions of a white-faced whistling duck with phylogenetic analysis of the virus.(AU)

Avipoxvirus é o agente etiológico da varíola (bouba) aviária, uma doença bem descrita em aves de cativeiro e selvagens, tendo sido associada a lesões semelhantes a tumores em algumas dessas espécies. Uma marreca piadeira (Dendrocygna viduata), criada em cativeiro, foi atendida em um Hospital Veterinário na região nordeste devido à presença de nódulos cutâneos em ambas as asas. Alguns dias após o exame clínico, o animal veio a óbito naturalmente. A ave foi submetida à necropsia e coletados fragmentos das lesões para análise histopatológica, que revelou proliferação de células epiteliais expandindo para a derme. Algumas dessas células possuíam material eosinofílico intracitoplasmático e bem definido, sugestivo de inclusão de poxvírus (corpúsculos de Bollinger). A PCR realizada a partir do DNA extraído de amostras das lesões amplificou um fragmento do gene da proteína do núcleo 4b (fpv 167), que foi purificado e sequenciado. Esse fragmento de DNA de Avipoxvirus presente nas lesões relevou alta homologia genética (100,0%) com outros poxvírus detectados em diferentes espécies de aves em vários países, mas nenhum deles estava relacionado a lesões tumorais ou carcinoma espinocelular. Este é o primeiro relato de Avipoxvirus detectado em lesões semelhantes a tumores em uma marreca piadeira com caracterização molecular do vírus.(AU)

Avipoxvirus detected in tumor-like lesions in a white-faced whistling duck (Dendrocygna viduata) / Avipoxvirus detectado em lesões tipo tumorais em uma marreca-irerê (Dendrocygna viduata)

Avipoxvirus is the etiological agent of the avian pox, a well-known disease of captive and wild birds, and it has been associated with tumor-like lesions in some avian species. A white-faced whistling duck (Dendrocygna viduata) raised in captivity was referred to a Veterinary Teaching Hospital in Northeast due to cutaneous nodules present in both wings. A few days after the clinical examination, the animal died naturally. Once submitted to necropsy, histopathological evaluation of the lesions revealed clusters of proliferating epithelial cells expanding toward the dermis. Some of these cells had round, well-defined, intracytoplasmic eosinophilic material suggestive of poxvirus inclusion (Bollinger bodies). PCR performed on the DNA extracted from tissue samples amplified a fragment of the 4b core protein gene (fpv167), which was purified and sequenced. This fragment of Avipoxvirus DNA present in these tumor-like lesions showed high genetic homology (100.0%) with other poxviruses detected in different avian species in several countries, but none of them were related to tumor-like lesions or squamous cell carcinoma. This is the first report of Avipoxvirus detected in tumor-like lesions of a white-faced whistling duck with phylogenetic analysis of the virus.(AU)

Avipoxvirus é o agente etiológico da varíola (bouba) aviária, uma doença bem descrita em aves de cativeiro e selvagens, tendo sido associada a lesões semelhantes a tumores em algumas dessas espécies. Uma marreca piadeira (Dendrocygna viduata), criada em cativeiro, foi atendida em um Hospital Veterinário na região nordeste devido à presença de nódulos cutâneos em ambas as asas. Alguns dias após o exame clínico, o animal veio a óbito naturalmente. A ave foi submetida à necropsia e coletados fragmentos das lesões para análise histopatológica, que revelou proliferação de células epiteliais expandindo para a derme. Algumas dessas células possuíam material eosinofílico intracitoplasmático e bem definido, sugestivo de inclusão de poxvírus (corpúsculos de Bollinger). A PCR realizada a partir do DNA extraído de amostras das lesões amplificou um fragmento do gene da proteína do núcleo 4b (fpv 167), que foi purificado e sequenciado. Esse fragmento de DNA de Avipoxvirus presente nas lesões relevou alta homologia genética (100,0%) com outros poxvírus detectados em diferentes espécies de aves em vários países, mas nenhum deles estava relacionado a lesões tumorais ou carcinoma espinocelular. Este é o primeiro relato de Avipoxvirus detectado em lesões semelhantes a tumores em uma marreca piadeira com caracterização molecular do vírus.(AU)

Outbreak of cutaneous form of avian poxvirus disease in previously pox-vaccinated commercial turkeys / Surto de bouba aviária na forma cutânea em perus comerciais previamente vacinados

This study describes an outbreak of avian poxvirus disease in previously pox-vaccinated turkeys in Brazil. The turkeys had suggestive gross lesions of cutaneous avian poxvirus in the skin of the head and cervical area without changes in the flock mortality rates. In the slaughterhouse, 30 carcasses were removed from the slaughter line to collect tissue from cutaneous lesions for histological analyses and characterization of the virus. The virus was identified by conventional polymerase chain reaction (PCR) and subsequent gene sequencing. Acanthosis, hyperkeratosis, and hydropic degeneration were seen on skin histopathology. Eosinophilic intracytoplasmic inclusion bodies (Bollinger) on keratinocytes were observed in 46.6% of the samples. Avian poxvirus DNA was detected on PCR in 83.3% of the total samples. PCR associated with histopathology had 93.3% of positivity for avian poxvirus. In the phylogenetic study, samples show 100% matching suggesting that the outbreak occurred by a single viral strain and was different from those strains affecting other wild birds such as canaries and sparrows. A single mutation (Adenine for Guanine) was detected in our study's strain and in the strains of turkey, chickens, and vaccine strains published in GenBank. Also, when the sequence strain of the present study and sequences from GenBank of canarypox and sparrowpox strains were aligned, a Thymine was found replacing the Adenine or Guanine. The in ovo vaccination method as single-use in turkeys of this study apparently did not provide adequate protection against avianpox disease, but additional vaccination administered by wing-web when turkeys were 45-60 days old in the new flocks controlled the disease. In the subsequent year, new cases of this disease were not found. It was not possible to confirm the source of the virus strain, but infection with a field strain derived from chickens is one possibility, considering the poultry farm population in the area and biosecurity aspects. For wide characterization of avipoxvirus and differentiation among strains, the complete sequence of the viral genome is required.(AU)

Este estudo descreve um surto de bouba aviária em perus previamente vacinados contra poxvirus aviário no Brasil. Os perus apresentaram lesões macroscópicas, sugestivas de bouba aviaria cutânea, na pele da cabeça e região cervical sem alteração nas taxas de mortalidade do lote. No abatedouro, 30 carcaças foram retiradas da linha de abate para coleta de dois fragmentos de pele com lesões para análise histológica e caracterização do vírus. A identificação do vírus foi realizada por PCR convencional e posterior sequenciamento. No exame histopatológico das lesões de pele, houve acantose, hiperqueratose e degeneração hidrópica. Corpúsculos de inclusão intracitoplasmáticos eosinofílicos (Bollinger) foram encontrados em 46,6% das amostras. A técnica de PCR detectou o DNA do vírus da bouba aviária em 83,3% do total de amostras. PCR associado com a histopatologia resultou em 93,3% de positividade para o vírus da bouba aviária. No estudo filogenético, as sequências resultaram em 100% de identidade, sugerindo que o surto ocorreu por uma única estirpe de vírus diferenciada das outras estirpes que acometem canários e pardais. Uma única mutação (Adenina para Guanina) foi detectada nas estirpes deste estudo e nas sequências de perus, galinhas e estirpes vacinais publicadas no GenBank. Além disso, quando a sequência da estirpe do presente estudo e as sequências das estirpes de canarypox e sparrowpox foram comparadas, a Timina foi encontrada em substituição a Adenina ou Guanina. A vacinação in ovo em dose única utilizada nos perus deste estudo aparentemente não forneceu proteção adequada contra a doença causada pelo poxvirus aviário. Entretanto, a revacinação na membrana da asa em perus com 45-60 dias de idade dos novos lotes controlou a doença. No ano subsequente, novos casos desta doença não foram registrados. Não foi possível confirmar a origem da estirpe viral, mas estirpes de campo oriundas de galinhas seria uma possibilidade, considerando a população na área e os aspectos de biosseguridade. Para caracterização ampla do avipoxvirus e diferenciação entre as estirpes, a sequência completa do genoma viral é requerida.(AU)

Outbreak of cutaneous form of avian poxvirus disease in previously pox-vaccinated commercial turkeys / Surto de bouba aviária na forma cutânea em perus comerciais previamente vacinados

This study describes an outbreak of avian poxvirus disease in previously pox-vaccinated turkeys in Brazil. The turkeys had suggestive gross lesions of cutaneous avian poxvirus in the skin of the head and cervical area without changes in the flock mortality rates. In the slaughterhouse, 30 carcasses were removed from the slaughter line to collect tissue from cutaneous lesions for histological analyses and characterization of the virus. The virus was identified by conventional polymerase chain reaction (PCR) and subsequent gene sequencing. Acanthosis, hyperkeratosis, and hydropic degeneration were seen on skin histopathology. Eosinophilic intracytoplasmic inclusion bodies (Bollinger) on keratinocytes were observed in 46.6% of the samples. Avian poxvirus DNA was detected on PCR in 83.3% of the total samples. PCR associated with histopathology had 93.3% of positivity for avian poxvirus. In the phylogenetic study, samples show 100% matching suggesting that the outbreak occurred by a single viral strain and was different from those strains affecting other wild birds such as canaries and sparrows. A single mutation (Adenine for Guanine) was detected in our study's strain and in the strains of turkey, chickens, and vaccine strains published in GenBank. Also, when the sequence strain of the present study and sequences from GenBank of canarypox and sparrowpox strains were aligned, a Thymine was found replacing the Adenine or Guanine. The in ovo vaccination method as single-use in turkeys of this study apparently did not provide adequate protection against avianpox disease, but additional vaccination administered by wing-web when turkeys were 45-60 days old in the new flocks controlled the disease. In the subsequent year, new cases of this disease were not found. It was not possible to confirm the source of the virus strain, but infection with a field strain derived from chickens is one possibility...(AU)

Este estudo descreve um surto de bouba aviária em perus previamente vacinados contra poxvirus aviário no Brasil. Os perus apresentaram lesões macroscópicas, sugestivas de bouba aviaria cutânea, na pele da cabeça e região cervical sem alteração nas taxas de mortalidade do lote. No abatedouro, 30 carcaças foram retiradas da linha de abate para coleta de dois fragmentos de pele com lesões para análise histológica e caracterização do vírus. A identificação do vírus foi realizada por PCR convencional e posterior sequenciamento. No exame histopatológico das lesões de pele, houve acantose, hiperqueratose e degeneração hidrópica. Corpúsculos de inclusão intracitoplasmáticos eosinofílicos (Bollinger) foram encontrados em 46,6% das amostras. A técnica de PCR detectou o DNA do vírus da bouba aviária em 83,3% do total de amostras. PCR associado com a histopatologia resultou em 93,3% de positividade para o vírus da bouba aviária. No estudo filogenético, as sequências resultaram em 100% de identidade, sugerindo que o surto ocorreu por uma única estirpe de vírus diferenciada das outras estirpes que acometem canários e pardais. Uma única mutação (Adenina para Guanina) foi detectada nas estirpes deste estudo e nas sequências de perus, galinhas e estirpes vacinais publicadas no GenBank. Além disso, quando a sequência da estirpe do presente estudo e as sequências das estirpes de canarypox e sparrowpox foram comparadas, a Timina foi encontrada em substituição a Adenina ou Guanina. A vacinação in ovo em dose única utilizada nos perus deste estudo aparentemente não forneceu proteção adequada contra a doença causada pelo poxvirus aviário. Entretanto, a revacinação na membrana da asa em perus com 45-60 dias de idade dos novos lotes controlou a doença. No ano subsequente, novos casos desta doença não foram registrados. Não foi possível confirmar a origem da estirpe viral, mas estirpes de...(AU)

First phylogenetic analysis of Avipoxvirus (APV) in Brazil / Primeira análise filogenética de Avipoxvirus (APV) no Brasil

This study represents the first phylogenetic analysis of avian poxvirus recovered from turkeys in Brazil. The clinical disorders related to fowlpox herein described occurred in a turkey housing system. The birds displaying characteristic pox lesions which were observed on the neck, eyelids and beak of the turkeys. Four affected turkeys were randomly chosen, euthanized and necropsied. Tissues samples were submitted for histopathological analysis and total DNA was further extracted, amplified by conventional PCR, sequenced and phylogenetically analyzed. Avian poxviruses specific PCR was performed based on P4b core protein gene sequence. The histological analysis revealed dermal inflammatory process, granulation tissue, hyperplasia of epithelial cells and inclusion bodies. The P4b gene was detected in all samples. Sequencing revealed a 100% nucleotide and amino acid sequence identity among the samples, and the sequences were deposited in GenBank®. The four Avian poxviruses fragments sequenced in this study clustered along the A1 clade of avipoxviruses, and were classified as Avipoxvirus (APV). Additional studies, such as virus isolation, PCR and sequencing includinga large number of specimens from the Brazilian turkey production must be conducted due to the hazardous risk that poxvirus infections may cause to the Brazilian poultry production scenario, given that Brazil's turkey production attracts attention due to its economic importance worldwide. Our findings point to the need to identify the prevalence of APV in Brazilian turkey production, to perform risk assessment studies and continued surveillance of APV infections in both wild and commercial avian species.(AU)

Este trabalho representa a primeira análise filogenética de Poxvirus aviário detectado em perus no Brasil. Os distúrbios clínicos relacionados com bouba aviária aqui descritos ocorreram em um sistema de alojamento de perus. As aves apresentaram lesões características de varíola observadas no pescoço, pálpebras e bico das aves. Quatro perus com sinais característicos foram escolhidos aleatoriamente, sacrificados e submetidos à autópsia. Amostras de tecido foram submetidas à análise histopatológica e o DNA total foi extraído, amplificado por PCR convencional e os amplicons foram sequenciados e analisados ​​filogeneticamente. A PCR específica para Poxvírus aviário foi realizada com base na seqüência do gene da proteína do núcleo P4b. A análise histológica revelou um processo inflamatório dérmico, tecido de granulação, hiperplasia de células epiteliais e corpúsculos de inclusão. O gene P4b foi detectado em todas as amostras. O sequenciamento revelou uma identidade entre nucleotídeos e aminoácido de 100% entre as amostras e as sequências foram depositadas no GenBank®. Os quatro fragmentos de poxvírus aviário sequenciado neste estudo foram agrupados no clado A1 de avipoxvirus e foram classificados como Avipoxvirus (APV). Estudos adicionais, como isolamento viral, PCR e sequenciamento, incluindo um grande número de perus da produção brasileira devem ser conduzidos devido ao grave risco que a infecção por poxvírus pode causar ao cenário de produção avícola brasileira, tendo em vista que a produção brasileira de perus atrai atenção devido a sua importância mundial. Nossos resultados apontam para a necessidade de identificar a prevalência da APV na produção de peru no Brasil, para realizar estudos de avaliação de risco e continuada monitoração de infecções por APV nas espécies de aves comerciais e silvestres.(AU)

DETECÇÃO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DO POXVÍRUS AVIÁRIO EM Culex sp. COLETADOS NO PERIDOMICÍLIO DE ÁREAS RURAIS E PERIURBANAS NO MUNICÍPIO DE SEROPÉDICA, ESTADO DO RIO DE JANEIRO

A Bouba Aviária é uma enfermidade viral altamente contagiosa cuja maior abrangência geográfica de casos contempla regiões tropicais e subtropicais, afetando aves domésticas e selvagens. Estudos experimentais apontam que a principal forma de transmissão se dá através do repasto sanguíneo com dispersão viral realizada por mosquitos vetores do gênero Culex, alimentados com sangue de aves infectadas. Desta forma, o objetivo desse estudo foi estabelecer a frequência de Culex sp. com material genético de Avipoxvírus através da técnica de PCR no peridomicílio de áreas rurais e periurbanas do município de Seropédica, no Rio de Janeiro e realizar análise filogenética com base no gene p4b a partir de amostras positivas. Foram coletados 2839 mosquitos dos gêneros Anopheles, Aedes e Culex, sendo o gênero Culex o mais abundante, compreendendo 96,23% (2732/2839) do montante total, onde a pesquisa de Avipoxvírus foi realizada em 300 fêmeas alimentadas oriundas dos bairros de São Miguel, Valão das Louças e Campo Lindo. Dos espécimes coletados, um total de 13,66% (41/300) das amostras de fêmeas testadas apresentaram-se positivas na reação de detecção, onde 13,63% das positivas (21/154) foram coletadas no bairro de Campo Lindo, 16,67% (16/96) em São Miguel e 12% (6/50) em Valão das Louças. Não houve diferença significativa na frequência de Avipoxvírus em Culex sp. entre os bairros analisados (p>0,05). A análise filogenética foi realizada comparando 347 sequências disponíveis no GenBank, de forma a agrupar os subclados A1 a A7, B1 a B3 e C. Pela primeira vez no Brasil, foi possível reportar a presença do subclado A1 em amostras oriundas de Culex sp. contendo DNA de Avipoxvírus. A distância evolutiva do gene p4b das amostras sequenciadas, comparada entre as áreas avaliadas, foi capaz de demonstrar maior divergência genética em áreas rurais (0,0061±0,0021) quando comparada a áreas periurbanas (0,0038±0,0016) nesse estudo. Esse trabalho possibilitou a otimização de uma técnica de PCR eficaz para detecção de Avipoxvírus diretamente do DNA extraído de Culex sp., além da complementação de dados referentes à biologia do vetor e melhoria das técnicas de monitoramento e de controle da Bouba Aviária no Estado do Rio de Janeiro.

Avian Pox is a highly contagious viral disease whose largest geographical range of cases covers tropical and subtropical regions, affecting both domestic and wild birds. Experimental studies show that the main form of transmission occurs during blood feeding by vectors of the genus Culex, previously fed with the blood of infected birds. Therefore, the aim of this study was to establish the frequency of Culex sp. with Avipoxvirus DNA through PCR assay, in the municipality of Seropédica, Rio de Janeiro and then perform a phylogenetic analysis based on the p4b gene from positive samples. In this study, 2839 mosquitoes belonging to Anopheles, Aedes and Culex genera were collected, with the Culex sp. genus being the most abundant, comprising 96.23% (2732/2839) of the total amount, where the Avipoxvirus detection was conducted on 300 fed females from the neighborhoods: São Miguel, Valão das Louças and Campo Lindo. Of the collected specimens, a total of 13.66% (41/300) of the samples of females tested were positive in the detection reaction, where 13.63% of the positives (21/154) were collected at Campo Lindo neighborhood, 16.67% (16/96) at São Miguel and 12% (6/50) at Valão das Louças. There was no significant difference in the frequency of Avipoxvirus in Culex sp. among the neighborhoods analyzed (p>0.05).The phylogenetic analysis was performed comparing 347 sequences available in GenBank, in order to group the subclades A1 to A7, B1 to B3 and C, and, for the first time in Brazil, it was possible to report the presence of subclade A1 in samples of Culex sp. with Avipoxvirus DNA. The evolutionary distance of the p4b gene of the sequenced samples, compared between the evaluated areas, was able to demonstrate larger genetic divergence in rural areas (0.0061±0.0021) when compared to periurban areas (0.0038±0.0016) in this study. This work enabled the improvement of an effective PCR technique for the detection of Avipoxvirus directly in Culex sp. DNA, in addition to complementing data on vector biology and improving the monitoring and control techniques of Avian Pox in the State of Rio de Janeiro.

Infecção por pox vírus e Aspergillus fumigatus em Bubo virginianus (Coruja jacurutu) / Avipoxvirus infecction in Bubo virginianus (great horned owl)

Este trabalho descreve um caso de infecção mista por pox vírus e Aspergillus fumigatus em Bubo virginianus (coruja jacurutu). A ave, um macho adulto, foi encaminhada ao Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre do Instituto de Biologia da Universidade Federal de Pelotas (NURFS/CETAS/UFPEL). Apresentava bom estado corporal, estava ativa, porém com incapacidade de voo. Após três dias apresentou lesões crostosas e de aspecto verrucoso na superfície dorsal das patas. Havia, também, nódulos de mesmo aspecto na pálpebra esquerda e na cera. A ave morreu após 15 dias de sua chegada ao NURFS e foi necropsiada no Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas (LRD/UFPel). Histologicamente, as lesões verrucosas caracterizavam-se por hiperplasia do epitélio e nas células das camadas basal, espinhosa, granular e córnea havia corpúsculos de inclusão intracitoplasmáticos do tipo Bollinger. Na microscopia eletrônica foram visualizadas partículas virais características de pox vírus, incluindo Bubo virginianus como um hospedeiro do vírus. Havia, ainda, infiltrado inflamatório de células mononucleares e focos de colônias bacterianas na derme. Nos pulmões havia congestão e presença de granulomas com hifas fúngicas, que pela técnica de Grocott, apresentaram ramificação dicotômica compatível com Aspergillus spp., identificado na cultura como A. fumigatus. O diagnóstico de infecção por avipoxvirus pode contribuir para estudos relacionados com a ocorrência desta doença nas populações de vida livre e como informação auxiliar para o manejo e conservação desta espécie. Sugere-se, ainda, a inclusão do uso de raios-X nos protocolos de centros de reabilitação como o diagnostico de aspergilose em aves rapinantes com bom estado corporal, porém incapazes de voar.(AU)

This paper describes a case of mixed infection by pox virus and Aspergillus fumigatus in Bubo virginianus (Owl Jacurutu). An adult male Bubo virginianus was referred to the Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre, Instituto de Biologia, Universidade Federal de Pelotas (NURFS/CETAS/UFPEL). The owl was active and had a good body condition but with flight disability. After three days of their admission at NURFS the owl developed crusty and verrucous lesions at the dorsal surface of their feet. Also it had nodes on the left eyelid and cera with the same aspect. The owl died 15 days after its arrival. Necropsy and histopatological examination were carried out. The warty lesions had hyperplasia of the epithelium and intracytoplasmic Bollinger-like inclusion bodies in the basal, spinal, granulosa layer and cornea. Viral particles characteristic of pox viruses were shown by electron microscopy. This case includes Bubo virginianus as a host of the avipoxvirus. There were also a mononuclear inflammatory cell infiltrate and bacterial colonies in the dermis. In the lugs, there was congestion and presence of granulomas with intralesional fungal hyphae. With the Grocott stain those structures showed dichotomous branching which was later identified in mycological culture as characteristic for A. fumigates. The diagnosis of avipoxvirus infection can contribute to studies related to the occurrence of this disease in free-living populations and as auxiliary information for the management and conservation of this raptor species. It is also suggested to include the use of X-rays in rehabilitation center protocols as screening test to diagnose aspergillosis in birds of prey with good body condition but inability to fly.(AU)

Infecção por pox vírus e Aspergillus fumigatus em Bubo virginianus (Coruja jacurutu) / Avipoxvirus infecction in Bubo virginianus (great horned owl)

Este trabalho descreve um caso de infecção mista por pox vírus e Aspergillus fumigatus em Bubo virginianus (coruja jacurutu). A ave, um macho adulto, foi encaminhada ao Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre do Instituto de Biologia da Universidade Federal de Pelotas (NURFS/CETAS/UFPEL). Apresentava bom estado corporal, estava ativa, porém com incapacidade de voo. Após três dias apresentou lesões crostosas e de aspecto verrucoso na superfície dorsal das patas. Havia, também, nódulos de mesmo aspecto na pálpebra esquerda e na cera. A ave morreu após 15 dias de sua chegada ao NURFS e foi necropsiada no Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas (LRD/UFPel). Histologicamente, as lesões verrucosas caracterizavam-se por hiperplasia do epitélio e nas células das camadas basal, espinhosa, granular e córnea havia corpúsculos de inclusão intracitoplasmáticos do tipo Bollinger. Na microscopia eletrônica foram visualizadas partículas virais características de pox vírus, incluindo Bubo virginianus como um hospedeiro do vírus. Havia, ainda, infiltrado inflamatório de células mononucleares e focos de colônias bacterianas na derme. Nos pulmões havia congestão e presença de granulomas com hifas fúngicas, que pela técnica de Grocott, apresentaram ramificação dicotômica compatível com Aspergillus spp., identificado na cultura como A. fumigatus. O diagnóstico de infecção por avipoxvirus pode contribuir para estudos relacionados com a ocorrência desta doença nas populações de vida livre e como informação auxiliar para o manejo e conservação desta espécie. Sugere-se, ainda, a inclusão do uso de raios-X nos protocolos de centros de reabilitação como o diagnostico de aspergilose em aves rapinantes com bom estado corporal, porém incapazes de voar.(AU)

This paper describes a case of mixed infection by pox virus and Aspergillus fumigatus in Bubo virginianus (Owl Jacurutu). An adult male Bubo virginianus was referred to the Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre, Instituto de Biologia, Universidade Federal de Pelotas (NURFS/CETAS/UFPEL). The owl was active and had a good body condition but with flight disability. After three days of their admission at NURFS the owl developed crusty and verrucous lesions at the dorsal surface of their feet. Also it had nodes on the left eyelid and cera with the same aspect. The owl died 15 days after its arrival. Necropsy and histopatological examination were carried out. The warty lesions had hyperplasia of the epithelium and intracytoplasmic Bollinger-like inclusion bodies in the basal, spinal, granulosa layer and cornea. Viral particles characteristic of pox viruses were shown by electron microscopy. This case includes Bubo virginianus as a host of the avipoxvirus. There were also a mononuclear inflammatory cell infiltrate and bacterial colonies in the dermis. In the lugs, there was congestion and presence of granulomas with intralesional fungal hyphae. With the Grocott stain those structures showed dichotomous branching which was later identified in mycological culture as characteristic for A. fumigates. The diagnosis of avipoxvirus infection can contribute to studies related to the occurrence of this disease in free-living populations and as auxiliary information for the management and conservation of this raptor species. It is also suggested to include the use of X-rays in rehabilitation center protocols as screening test to diagnose aspergillosis in birds of prey with good body condition but inability to fly.(AU)

Identificação molecular de poxvírus aviário clado E na região sul do Brasil

A avicultura comercial constitui uma das principais atividades econômicas do Brasil, classificando o país como o maior exportador e segundo maior produtor de carne de frango do mundo. Além disso, criações de fundo de quintal envolvendo animais para fins de postura, corte ou pet também fazem parte do cenário nacional. Atualmente, a natureza da avicultura moderna aumenta a probabilidade de ocorrência de surtos de diversas doenças devido a concentração das unidades produtoras e da densidade dos animais nos alojamentos. A Bouba Aviária é uma das enfermidades de importância na produção avícola, podendo levar a perda significativa de produtividade ou até mesmo a morte das aves. A doença é causada por vírus pertencentes ao gênero Avipoxvirus, podendo ser transmitida através de artrópodes ou através do contato direto do tecido lesionado com o agente. A vacinação é o principal meio para controle e prevenção da doença, porém, ainda existem relatos de ocorrência de surtos em aves vacinadas, provavelmente devido à baixa proteção cruzada contra novas cepas circulantes oferecida pela vacina. Ainda existe pouco conhecimento quanto à epidemiologia e distribuição do vírus em relação as suas características moleculares. Com base nisso, realizou-se a caracterização molecular do vírus em amostra de uma galinha domestica criada em fundo de quintal no município de Pelotas, que apresentava sinais clínicos característicos da enfermidade. Através da técnica de PCR e construção da árvore filogenética das sequencias obtidas dos genes que codificam a proteína de núcleo 4b (P4b) e DNA polimerase, classificou-se a primeira cepa de Avipoxvirus pertencente ao proposto clado E no Brasil. Com o resultado desse trabalho, evidencia-se a necessidade de um maior estudo sobre a epidemiologia do vírus no país, devido a capacidade do mesmo de acometer aves já vacinadas.

Commercial poultry farming is one of Brazil's main economic activities, ranking the country as the largest exporter and second largest chicken meat producer in the world. In addition, backyard creations involving animals for laying, cutting or pet purposes are also part of the national scene. Currently, the nature of modern poultry farming increases the likelihood of outbreaks of various diseases due to the concentration of production units and the density of animals in housing. Fowl pox disease is one of the important diseases in poultry production and can lead to significant loss of productivity or even death of birds. The disease is caused by viruses belonging to the genus Avipoxvirus, which can be transmitted through arthropods or through direct contact of the injured tissue with the agent. Vaccination is the primary means of disease control and prevention, but there are still reports of outbreaks in vaccinated birds, probably due to the low cross-protection against new circulating strains offered by the vaccine. There is still little knowledge about the epidemiology and distribution of the virus in relation to it molecular characteristics. Based on this, the molecular characterization of the virus was performed in a sample of a domesticated chicken reared in the backyard of Pelotas, which presented characteristic clinical signs of the disease. Through the PCR technique and construction of the phylogenetic tree of the sequences obtained from the genes encoding the 4b nucleus protein and DNA polymerase, the first Avipoxvirus strain belonging to the proposed clade E was classified in Brazil. With the result of this work, it is evident the need for a larger study on the epidemiology of the virus in the country, due to its capacity to affect already vaccinated birds.

Lesões cutâneas tipo tumorais associadas à infeção por avipoxvirus em uma marreca-cabocla (Dendrocygna autumnalis) / Cutaneous tumor-like lesions associated with infection by avipoxvirus in a Dendrocygna Autumnalis

The fowlpox, also known as contagiosum epithelioma, is caused by a poxvirus of the genus Avipoxvirus and affects both domestic and wild birds. The disease has two forms cutaneous and diphtheria. In March 2008 the sector of rehabilitation of wild birds from Mangual das Garças Park, located in Belém, Pará attended a duck (Dendrocygna autumnalis) that had nodular lesions in regions of the wing devoid of feathers. The lesions consisted of two large cutaneous tumor-like nodules that measured 4,2 x 3,8 cm and 2,8 x 2,2 cm in length and width, respectively. The nodules were surgically removed, fixed in 10% formalin, processed and stained with hematoxylin-eosin. Histopathology showed acanthosis and expressive hyperkeratosis, some cells showed spongiosis. The confirmatory diagnosis of fowlpox was established by the pathognomonic sign of the presence of large intracytoplasmic eosinophilic inclusion corpuscles (Bollinger bodies) in epithelial cells. This is the first report of poxvirus infection in a wild bird in the State of Pará, Brazil.

O setor de reabilitação de aves selvagens do Parque Mangual das Garças, localizado em Belém, Pará, recebeu um espécime de Marreca-cabocla (Dendrocygna autumnalis). O animal apresentava lesões nodulares em regiões desprovidas de penas na asa, que consistiam de dois grandes nódulos cutâneos de aspecto tumoral, que mediram 4,2 x 3,8 cm e 2,8 x 2,2 cm de comprimento e largura, respectivamente. Os nódulos foram removidos cirurgicamente, fixados em formol a 10%, e as amostras foram processadas para histopatologia, coradas pela hematoxilina-eosina. Na análise histopatológica, observaram-se acantose e expressiva hiperceratose; várias células mostraram espongiose. O diagnóstico da bouba foi estabelecido pelo sinal patognomônico da presença de grandes corpúsculos de inclusão eosinofílicos intracitoplasmáticos  (corpúsculos de Bollinger) nas células epiteliais da lesão tumoral. Este é o primeiro relato de infecção por poxvírus em ave selvagen no Estado do Pará, Brasil.

Lesões cutâneas tipo tumorais associadas à infeção por avipoxvirus em uma marreca-cabocla (Dendrocygna autumnalis) / Cutaneous tumor-like lesions associated with infection by avipoxvirus in a Dendrocygna Autumnalis

The fowlpox, also known as contagiosum epithelioma, is caused by a poxvirus of the genus Avipoxvirus and affects both domestic and wild birds. The disease has two forms cutaneous and diphtheria. In March 2008 the sector of rehabilitation of wild birds from Mangual das Garças Park, located in Belém, Pará attended a duck (Dendrocygna autumnalis) that had nodular lesions in regions of the wing devoid of feathers. The lesions consisted of two large cutaneous tumor-like nodules that measured 4,2 x 3,8 cm and 2,8 x 2,2 cm in length and width, respectively. The nodules were surgically removed, fixed in 10% formalin, processed and stained with hematoxylin-eosin. Histopathology showed acanthosis and expressive hyperkeratosis, some cells showed spongiosis. The confirmatory diagnosis of fowlpox was established by the pathognomonic sign of the presence of large intracytoplasmic eosinophilic inclusion corpuscles (Bollinger bodies) in epithelial cells. This is the first report of poxvirus infection in a wild bird in the State of Pará, Brazil.(AU)

O setor de reabilitação de aves selvagens do Parque Mangual das Garças, localizado em Belém, Pará, recebeu um espécime de Marreca-cabocla (Dendrocygna autumnalis). O animal apresentava lesões nodulares em regiões desprovidas de penas na asa, que consistiam de dois grandes nódulos cutâneos de aspecto tumoral, que mediram 4,2 x 3,8 cm e 2,8 x 2,2 cm de comprimento e largura, respectivamente. Os nódulos foram removidos cirurgicamente, fixados em formol a 10%, e as amostras foram processadas para histopatologia, coradas pela hematoxilina-eosina. Na análise histopatológica, observaram-se acantose e expressiva hiperceratose; várias células mostraram espongiose. O diagnóstico da bouba foi estabelecido pelo sinal patognomônico da presença de grandes corpúsculos de inclusão eosinofílicos intracitoplasmáticos  (corpúsculos de Bollinger) nas células epiteliais da lesão tumoral. Este é o primeiro relato de infecção por poxvírus em ave selvagen no Estado do Pará, Brasil.(AU)

Lesões cutâneas tipo tumorais associadas à infeção por avipoxvirus em uma marreca-cabocla (Dendrocygna autumnalis)

The fowlpox, also known as contagiosum epithelioma, is caused by a poxvirus of the genus Avipoxvirus and affects both domestic and wild birds. The disease has two forms cutaneous and diphtheria. In March 2008 the sector of rehabilitation of wild birds from Mangual das Garças Park, located in Belém, Pará attended a duck (Dendrocygna autumnalis) that had nodular lesions in regions of the wing devoid of feathers. The lesions consisted of two large cutaneous tumor-like nodules that measured 4,2 x 3,8 cm and 2,8 x 2,2 cm in length and width, respectively. The nodules were surgically removed, fixed in 10% formalin, processed and stained with hematoxylin-eosin. Histopathology showed acanthosis and expressive hyperkeratosis, some cells showed spongiosis. The confirmatory diagnosis of fowlpox was established by the pathognomonic sign of the presence of large intracytoplasmic eosinophilic inclusion corpuscles (Bollinger bodies) in epithelial cells. This is the first report of poxvirus infection in a wild bird in the State of Pará, Brazil.

O setor de reabilitação de aves selvagens do Parque Mangual das Garças, localizado em Belém, Pará, recebeu um espécime de Marreca-cabocla (Dendrocygna autumnalis). O animal apresentava lesões nodulares em regiões desprovidas de penas na asa, que consistiam de dois grandes nódulos cutâneos de aspecto tumoral, que mediram 4,2 x 3,8 cm e 2,8 x 2,2 cm de comprimento e largura, respectivamente. Os nódulos foram removidos cirurgicamente, fixados em formol a 10%, e as amostras foram processadas para histopatologia, coradas pela hematoxilina-eosina. Na análise histopatológica, observaram-se acantose e expressiva hiperceratose; várias células mostraram espongiose. O diagnóstico da bouba foi estabelecido pelo sinal patognomônico da presença de grandes corpúsculos de inclusão eosinofílicos intracitoplasmáticos (corpúsculos de Bollinger) nas células epiteliais da lesão tumoral. Este é o primeiro relato de infecção por poxvírus em ave selvagen no Estado do Pará, Brasil.

Canarypox virus expressing infectious bursal disease VP2 protein as immunogen for chickens

Canarypox viruses (CNPV) carrying the coding sequence of VP2 protein from infectious bursal disease virus (IBDV) were obtained. These viruses were able to express VP2 protein in vitro and to induce IBDV-neutralizing antibodies when inoculated in specific pathogen-free chickens demonstrating that CNPV platform is usefulness to develop immunogens for chickens.

Canarypox virus expressing infectious bursal disease VP2 protein as immunogen for chickens

Canarypox viruses (CNPV) carrying the coding sequence of VP2 protein from infectious bursal disease virus (IBDV) were obtained. These viruses were able to express VP2 protein in vitro and to induce IBDV-neutralizing antibodies when inoculated in specific pathogen-free chickens demonstrating that CNPV platform is usefulness to develop immunogens for chickens.(AU)

COINFECÇÕES FÚNGICAS ASSOCIADAS À VARÍOLA AVIÁRIA E SARCOMA EM GANSO

Esta dissertação apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciência e Saúde Animal da Universidade Federal de Campina Grande é composta de dois capítulos constituídos por artigos científicos. O primeiro artigo, a ser submetido à revista Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia consiste em um estudo retrospectivo que tem por objetivo descrever os aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos de sete casos de coinfecções fúngicas associada a lesões cutâneas de varíola aviária. Para isso foi realizado um levantamento das necropsias e biópsias de aves no período de janeiro de 2002 a dezembro de 2017 no Laboratório de Patologia Animal do Hospital Veterinário Universitário Profº. Dr. Ivon Macêdo Tabosa, onde foram coletados dados relacionados aos aspectos epidemiológicos e clínicos, além das descrições macroscópicas e microscópicas das lesões. As espécies aviárias acometidas foram galinhas (Gallus gallus) e perus (Meleagris gallopavo) jovens, criados sob regime extensivo. Clinicamente as aves apresentavam lesões cutâneas nodulares e crostosas nas regiões desprovidas de penas. A enfermidade foi diagnosticada predominantemente em forma de surtos, onde de um total de treze surtos, sete apresentavam infecções fúngicas secundárias. O diagnóstico de coinfecção fúngica associada à varíola aviária foi realizado através dos dados epidemiológicos, clínicos e patológicos e confirmado pela presença das inclusões intracitoplasmáticas em ceratinócitos na microscopia, bem como pela visualização de estruturas morfologicamente compatíveis com hifas, pseudo-hifas e leveduras fúngicas. Ressalta-se a ocorrência de infecções fúngicas secundárias a varíola aviária, ocasionando maior debilidade e morte dos animais, sendo assim, um fator agravante da doença. O segundo capítulo é um relato de caso a ser submetido a Acta Scientiae Veterinariae no qual descreve um leiomiossarcoma metastático em ganso Africano, abordando as suas principais características clínicas, anatomopatológicas e morfotintoriais. A neoplasia foi observada em um ganso Africano (Anser cygnoides) macho, de 10 meses de idade, oriundo no município de Acopiara no Estado do Ceará, Nordeste do Brasil. Clinicamente o animal apresentava andar cambaleante, tremores de intenção na cabeça e nistagmo há aproximadamente um mês. Devido ao prognóstico desfavorável foi sugerida a eutanásia e encaminhado para realização de necropsia no setor de Patologia Animal do Hospital Veterinário Universitário Profº Dr. Ivon Macêdo Tabosa na Universidade Federal de Campina Grande. Macroscopicamente foram observados nódulos multifocais a coalescentes amarelados e firmes distribuídos pela superfície capsular do fígado. No rim esquerdo e no hemisfério cerebral esquerdo observou-se presença de massa tumoral, que ao corte se aprofundava ao parênquima, causando compressão do tecido adjacente. O diagnóstico de leiomiossarcoma foi realizado através das características histológicas das células neoplásicas, bem como pela marcação positiva para vimentina e actina de músculo liso. Os leiomiossarcomas são raramente diagnosticados em aves domésticas na rotina do Laboratório de Patologia Animal da Universidade Federal de Campina Grande, não sendo descrito até então no Nordeste do Brasil, em ganso Africano (Anser cygnoides). Destaca-se nesse caso, o alto poder metastático com disseminação para sistema nervoso central, culminando em quadro clínico neurológico.

This dissertation presented to the Programa de Pós-Graduação em Ciência e Saúde Animal of the Universidade Federal de Campina Grande is composed of two chapters consisting of scientific articles. The first article to be submitted to the Arquivo Brasileiro de Medicina Veterináriar e Zootecnia magazine consists of a retrospective study that aims to describe the epidemiological, clinical and pathological aspects of seven cases of fungal coinfections associated with cutaneous lesions of avian pox. For this, a necropsy and biopsy of birds were collected from January 2002 to December 2017 at the Laboratório de Patologia Animal of the Hospital Veterinário Universitário Profº. Dr. Ivon Macêdo Tabosa, where data related to epidemiological and clinical aspects were collected, as well as macroscopic and microscopic descriptions of the lesions. The avian species affected were chickens (Gallus gallus) and young turkeys (Meleagris gallopavo), reared under extensive arrangements. Clinically the birds had nodular and crustal cutaneous lesions in the regions without feathers. The disease was diagnosed predominantly in the form of outbreaks, where out of a total of thirteen outbreaks, seven had secondary fungal infection. The diagnosis of fungal coinfection associated with avian pox was carried out through epidemiological, clinical and pathological data and confirmed by the presence of intracytoplasmic inclusions in keratinocytes under microscopy, as well as the visualization of morphologically compatible structures with hyphae, pseudohyphas and fungal yeasts. It is noteworthy the occurrence of fungal infections secondary to avian pox, causing greater weakness and death of the animals, being, therefore, an aggravating factor of the disease. The second chapter is a case report to be submitted to Acta Scientiae Veterinariae in which it describes a metastatic leiomiosarcoma in African goose, addressing its main clinical, anatomopathological and morpho-functional characteristics. The neoplasia was observed in a male African goose (Anser cygnoides), 10 months old, from the municipality of Acopiara in the State of Ceará, Northeast Brazil. Clinically the animal had staggered gait, intention tremors in the head and nystagmus for about a month. Due to the unfavorable prognosis, euthanasia was suggested and sent to perform necropsy in the Setor de Patologia Animal of the Hospital Veterinário Universitário Profº. Dr. Ivon Macêdo Tabosa at the Universidade Federal de Campina Grande. Macroscopically, multifocal nodules were observed at yellowish and firm coalescents distributed over the capsular surface of the liver. In the left kidney and in the left cerebral hemisphere there was presence of tumor mass, which at the cut entered the parenchyma, causing compression of the adjacent tissue. The diagnosis of leiomiosarcoma was made through the histological characteristics of neoplastic cells, as well as by the positive labeling for vimentin and smooth muscle actin. Leiomiosarcomas are rarely diagnosed in domestic fowl in the routine of the Laboratório de Patologia Animal of the Universidade Federal de Campina Grande, and were not described in the Northeast of Brazil in an African goose (Anser cygnoides). It stands out in this case, the high metastatic power with dissemination to the central nervous system, culminating in neurological clinical picture.

Caracterização molecular de Avipoxvirus isolados de casos clínicos de bouba aviária em aves domésticas.

Os poxvírus formam uma complexa família de vírus (Poxviridae), dentre os mais antigos conhecidos, capazes de infectar diversas classes de animais. Os avipoxvírus (APV) são membros do gênero Avipoxvirus, caracterizados, como todos poxvirus, por grandes vírions envelopados, de genoma DNA de fita dupla linear. Os APV causam a bouba aviária, uma doença nodular de caráter proliferativo, em mais de 200 espécies de aves comerciais e silvestres, acarretando prejuízos econômicos e ambientais. Esse trabalho descreve a caracterização molecular de dez isolados do gênero Avipoxvirus diagnosticadas em casos clínicos naturais de aves domésticas atendidas no laboratório de doenças das aves da Universidade Federal de Minas Gerais. Quatro estirpes de galinhas, duas de perus, duas de pombos e duas de canários foram submetidas à diagnóstico de PCR e sequenciamento. A reconstrução filogenética, a partir do sequenciamento do gene que codifica a proteína 4b mostrou que essas estirpes se agruparam nos clado A e clado B. Enfatiza-se a importância de estudos destinados a caracterização de isolados de APV, principalmente em espécies de grande capacidade de disseminação de agentes, como os pombos analisados nesse estudo

The poxviruses form a complex family of viruses, among the oldest known, capable of infecting several classes of animals. Avipoxviruses (APV) are members of genus Avipoxvirus and, as all poxviruses, characterized as large enveloped viruses with a double - stranded DNA. APV cause avian pox, a nodular disease of a proliferative nature, in more than 200 species of commercial and wild birds, causing economic and environmental losses. This study describes the molecular characterization of ten isolates of APV diagnosed in natural clinical cases birds attended at the avian diseases laboratory of the Federal University of Minas Gerais. Four strains of chickens, two of turkeys, two of pigeons and two of canaries were submitted to PCR and sequencing analyses. The phylogenetic reconstruction, from the sequencing of the gene encoding the 4b protein (fwp167), showed that these strains clustered in clade A and clade B. We emphasize the importance of studies for the characterization of APV isolates, especially in species with great capacity for agent dissemination, such as the pigeons analyzed in the study

DOENÇAS DE PSITTACIFORMES NA REGIÃO CENTRAL DO RIO GRANDE DO SUL

Esta tese objetivou o estudo de doenças de Psittaciformes diagnosticadas no Núcleo de Estudos e Pesquisas em Animais Silvestres da Universidade Federal de Santa Maria (NEPAS/UFSM). Para a elaboração deste trabalho, foram examinadas as fichas das 495 necropsias de animais silvestres realizadas no período de janeiro de 2013 a dezembro de 2016, além dos resultados da investigação da presença de Salmonella spp. realizada em atendimentos clínicos a dois criatórios de psitacídeos. As principais alterações macroscópicas verificadas nas necropsias foram agrupadas por sistemas, analisadas através de uma meta-análise descritiva, onde se verificou que o sistema digestório foi o que apresentou maior número de alterações (29,4%), seguido pelo respiratório (18,6%), cardiovascular (14,6%), musculoesquelético (12,6%) e presença de parasitos ou fungos (8,4%). Em um expressivo número de casos (16,5%) não foi possível identificar as lesões devido ao avançado estado de decomposição dos cadáveres, ou por serem alterações macroscópicas que não levariam o animal à morte. Durante o período de estudo, surgiram dois casos de maior relevância, para os quais a investigação da causa mortis teve sequência, com a realização de exames histopatológicos e moleculares que resultaram em dois relatos: primeiro registro, no Brasil, da presença de um avipoxvírus do clado C e outro, do primeiro registro, no Brasil, do herpesvírus dos Psitacídeos tipo 3, ambos em Psittaciformes de cativeiro. Desta forma, este estudo resultou em quatro trabalhos científicos: (1) Meta-análise descritiva das alterações patológicas de aves e mamíferos silvestres diagnosticadas na região central do Rio Grande do Sul: 495 casos; (2) Identification and phylogenetic analysis of clade C avipoxvirus in a fowlpox outbreak in exotic Psittaciformes in southern Brazil ; (3) Psittacid Herpesvirus 3 infection in rose-ringed parakeets (Psittacula krameri) in Southern Brazil e (4) Investigação de Salmonella spp. em Psittaciformes exóticos e nativos mantidos em cativeiro na região central do Rio Grande do Sul. Este trabalho deverá contribuir com médicos veterinários clínicos e patologistas no diagnóstico de doenças presentes na região central do Rio Grande do Sul.

This thesis aimed to study the diseases of Psittaciformes diagnosed at the Center for Studies and Research in Wild Animals of the Federal University of Santa Maria (NEPAS / UFSM). For the preparation of this paper, the records of the 495 necropsies of wild animals carried out from January 2013 to December 2016 were examined, in addition to the results of the investigation of the Salmonella spp. presence carried out in clinical care to two psittacids breeders. The main macroscopic alterations observed at necropsies were grouped by systems, analyzed through a descriptive meta-analysis, where it was verified that the digestive system presented the highest number of alterations (29.4%), followed by the respiratory system (18.6 %), cardiovascular (14.6%), musculoskeletal (12.6%) and presence of parasites or fungi (8.4%). In an expressive number of cases (16.5%) it was not possible to identify the lesions due to the advanced stage of decomposition of the cadavers, or because they were macroscopic alterations that would not lead the animal to death. During the study period, two cases of greater relevance appeared, for which the investigation of the causa mortis was sequenced, with the accomplishment of histopathological and molecular tests that resulted in two reports: the first report in Brazil of the clade C avipoxvirus presence and another, the first report in Brazil of the herpesvirus of the Psittacidae type 3, both in captive Psittaciformes. Thus, this study resulted in four scientific studies: (1) Descriptive meta-analysis of the pathological alterations of wild birds and mammals diagnosed in the central region of Rio Grande do Sul: 495 cases; (2) Identification and phylogenetic analysis of clade C avipoxvirus in a fowlpox outbreak in exotic Psittaciformes in Southern Brazil; (3) Psittacid herpesvirus 3 infection in rose-ringed parakeets (Psittacula krameri) in Southern Brazil and (4) Investigation of Salmonella spp. in exotic and native Psittaciformes kept in captivity in the central region of Rio Grande do Sul. This work will contribute with clinical and pathologists veterinarians in the diagnosis of diseases present in the central region of Rio Grande do Sul

Infecção por pox vírus aviário em coruja de igreja (Tyto alba) no sul do Brasil / Avian pox virus infection in a common barn owl (Tyto alba) in southern Brazil

A young common barn owl (Tyto alba) was referred to the Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre (Nurfs), Federal University of Pelotas (UFPel), after been found in a barn of a brick factory in the urban area of Pelotas, Rio Grande do Sul, Brazil. The bird was apathic, weak and with crusty lesions in the featherless areas (eyes, beak, legs), and died soon after arrival at Nurfs. Necropsy and histopathological examination of the lesions were carried out. The hyperplasia and hypertrophy of the cutaneous lesions, several eosinophilic intracyto-plasmic inclusion bodies in epithelial cells (Bollinger bodies), as well as particles characteristic of poxvirus, observed by electronic microscopy, confirmed the infection by avian poxvirus, what highlights the importance of Tyto alba as carrier of the virus in the wild.(AU)

Uma coruja-de-igreja (Tyto alba) em idade juvenil foi encaminha ao Núcleo de Reabilitação da Fauna Silvestre (Nurfs), Universidade Federal de Pelotas (UFPel), após ter sido encontrada num galpão de uma olaria na região urbana da cidade de Pelotas, RS. A ave apresentava-se apática, debilitada e com lesões crostosas nas áreas sem penas do corpo (olhos, patas e bico), e morreu logo após a chegada ao Nurfs. Foram realizados necropsia e exame histopatológico. A presença de hiperplasia e hipertrofia epidérmica nas lesões cutâneas, várias inclusões intracitoplasmáticas eosinofílicas nas células epiteliais (Corpúsculos de Bollinger), assim como partículas características de poxvirus, demonstradas por microscopia eletrônica, confirmaram a infecção por poxvirus aviário, o que ressalta a importância da espécie Tyto alba como portadora do vírus na natureza.(AU)

Padronização de técnicas de diagnóstico em virologia utilizando ovos embrionados de codorna como modelo biológico

Os ovos embrionados de codorna podem ser utilizados para inoculação de diversos tipos de vírus, por diferentes vias, como técnicas já conhecidas e aplicadas em ovos embrionados de galinha (Gallus domesticus) com algumas adequações. Podem ser atribuídas vantagens a esse processo, tais como: custo menor de produção, redução do tempo de incubação, necessidade de menor espaço físico e, talvez a mais importante, ser de uma espécie diferente do Gallus domesticus e desta forma não ser portadora de antígenos e anticorpos de interesse na avicultura comercial moderna, não interferindo no diagnóstico e na replicação viral. Para avaliar o potencial de replicação viral, foram utilizados 351 ovos embrionados de codorna de casca branca (Coturnix coturnix japonica) da linhagem NISSEI e amostras dos vírus que acometem aves (Vírus da Doença de Newcastle, Avipoxvírus e Vírus da Bronquite Infecciosa das Galinhas) e também em outras espécies como Vírus da Influenza Equina. Nos ovos inoculados com o vírus de Newcastle foi coletado o liquido alantoíde para a realização do teste de HA, que apresentou melhor resultado no tempo de 72 horas com o volume de 100l. Na inoculação do vírus da Varíola Aviária foram coletadas as membranas corioalantoídes para analisar as les es pox e an lise histopatol gica, sendo que todos os volumes utilizados (20, 40, 80 e 100l) apresentaram lesões características desta enfermidade. Nos vírus da Bronquite Infecciosa das Galinhas, de todos os volumes utilizados, somente o de 40l produziu lesões no embrião, como nanismo e enrolamento. A replicação do vírus Influenza Equina, assim como aconteceu com o VDN, foi dependente da concentração e o tempo de incubação, sendo o melhor tempo o intervalo de 48 horas, utilizando o volume de 40l. Os ovos embrionados de codornas de casca branca também foram utilizados para testar a viabilidade de uso em cultivo primário de fibroblastos, sendo que os mesmos permaneceram viáveis após quatro passagens in vitro. Este modelo biológico foi eficiente para replicação do vírus da doença de Newcastle, vírus da Varíola Aviária, vírus da Bronquite Infecciosa das Galinhas e vírus da Influenza Equina. Estes embriões se mostraram aptos também para serem utilizados em cultivo primário de fibroblastos.

The embryonated quail eggs may be used for inoculation of different virus types, by different ways, such as known and applied techniques in embryonated chicken eggs (Gallus domesticus) with some adjustments. Advantages can be attributed to this process, such as: lower production costs, reducinge the time of incubation, less physical space needed, and, perhaps the most important, it is from a different species of Gallus domesticus and thus not being a carrier of antibodies or antigens of interest in modern commercial poultry production, not interfering in the diagnosis and viral replication. For assess the potential for viral replication, we used 351 embryonated white bark quail eggs (Coturnix coturnix japonica) of NISSEI strain and samples of virus affecting birds (Newcastle Disease Virus, Avipoxvirus and Infectious Bronchitis Virus) and also in other species such as Equine Influenza Virus. From the eggs inoculated with Newcastle virus allantoic fluid was collected for HA test, which showed better results in time of 72 hours with a volume of 100 l. In inoculation of virus Fowlpox the chorioallantoic membranes were collected to analyze the pox lesions and histopathological analysis and all the volumes used (20, 40, 80 and 100l) showed characteristic lesions of the disease. In the Infectious Bronchitis virus of chickens, of all volumes used, only 40l produced embryo lesions presented as nanism and winding. Replication of Influenza Equine virus such as NDV was dependent on the concentration and the incubation time, and the best range was 48 hours, using the volume of 40l. The white bark quail embryonated eggs were also used to test its feasibility of use in primary culture of fibroblasts, and they kept viable after four in vitro passages. These biological model was efficient for replication of the virus of Newcastle disease, Avian pox virus, infectious Bronchitis virus of chickens and Equine Influenza. These embryos also proved apt to be used in primary culture fibroblasts.