Prevalence of Bartonella species in shelter cats and their ectoparasites in southeastern Brazil / Prevalência de espécies de Bartonella em gatos de abrigos e seus ectoparasitas no Sudeste do Brasil

Abstract Feline Bartonella can be transmitted to humans through cat scratches or bites, and between cats, by the flea Ctenocephalides felis. The study was carried out in order to investigate the occurrence of Bartonella DNA in cats living in shelters and their ectoparasites and the relationship between the infection status of cats and ectoparasites they host. Bartonella DNA was detected in 47.8% of the cat blood samples, 18.3% of C. felis fleas, 13.3% of flea egg pools and 12.5% of lice pools. B. henselae and B. clarridgeiae DNA were detected in cat fleas, while B. henselae, B. clarridgeiae and B. koehlerae were found in blood samples from bacteremic cats. Cats infested by positive ectoparasites showed approximately twice the odds of being infected. Our results indicate that shelter cats have high prevalence of Bartonella species that are known to be human pathogens. This highlights the importance of controlling infestations by ectoparasites to avoid cat and human infection.

Resumo Algumas espécies de Bartonella têm os felinos como principais hospedeiros reservatórios. Tais patógenos são transmitidos ao homem por intermédio da arranhadura ou mordedura de gatos e entre os gatos, por meio da pulga Ctenocephalides felis. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de DNA de Bartonella spp. em gatos de abrigos e seus ectoparasitas e a relação entre o estado de infecção dos gatos e dos ectoparasitas albergados por estes. Material genético bacteriano foi detectado em 47,8% das amostras de sangue de gatos, 18,3% das pulgas C. felis, 13,3% dos "pools" de ovos de pulgas e 12,5% dos "pools" de piolhos. DNA de B. henselae e B. clarridgeiae foi detectado em pulgas, e B. henselae, B. clarridgeiae e B. koehlerae, em amostras de sangue de gatos. Gatos infestados por ectoparasitas que carreavam DNA de Bartonella spp. demonstraram aproximadamente o dobro de chance de estarem infectados. Esses resultados indicam que os gatos de abrigos têm alta prevalência de infecção por espécies de Bartonella, capazes de causar doenças no homem. E também destacam a importância do controle e prevenção da infestação por ectoparasitas, no intuito de prevenir a infecção em gatos e humanos.

Molecular detection of vector-borne agents in cats in Southern Brazil / Detecção molecular de agentes transmitidos por vetores em felinos domésticos no Sul do Brasil

This study used serological and molecular methods to investigate the occurrence of vector-borne pathogens (VBP) with zoonotic potential in cats neutered at the University Veterinary Hospital in Canoinhas, Santa Catarina. The combined PCR and serological results revealed that 17 (56.6%) cats were positive for one or more pathogens. The sampled cats had antibodies to Ehrlichia spp. (7/30), Anaplasma phagocytophilum (3/30) and Leishmania infantum (2/30). The PCR assay detected DNA closely related to Ehrlichia canis in 6/30 cats, Mycoplasma haemofelis in 2/30 cats, A. phagocytophilum and Cytauxzoon sp. in one cat each. While Bartonella clarridgeiae and B. henselae were detected in two cats each, and B. koehlerae was detected in one cat.(AU)

Como os felinos podem ser parasitados por diversos patógenos transmitidos por vetores (PTV), alguns com caráter zoonótico, este estudo objetivou detectar por métodos sorológicos e moleculares, patógenos transmitidos por vetores hematófagos, em gatos atendidos em um Hospital Veterinário Universitário em Santa Catarina. Os resultados da PCR e da sorologia combinados, revelaram que 17 (56,6%) gatos foram positivos para um ou mais patógenos. Na sorologia, foram positivos 7/30 gatos para Ehrlichia, 3/30 para Anaplasma phagocytophilum e 2/30 para Leishmania infantum. Na PCR foi detectado DNA filogeneticamente associado a: Ehrlichia canis em 6/30 gatos; Mycoplasma haemofelis, em 2/30 gatos; A. phagocytophilum e Cytauxzoon sp. em 1/30 gatos cada. Enquanto Bartonella clarridgeiae e B. henselae foram detectadas, cada uma, em dois gatos, B. koehlerae foi detectada em um gato.(AU)

A broad-range PCR technique for the diagnosis of infective endocarditis

Infective endocarditis (IE) remains a severe and potentially fatal disease demanding sophisticated diagnostic strategies for detection of the causative microorganisms. The aim of the present study was to develop a broad-range 16S ribosomal RNA gene polymerase chain reaction in the routine diagnostic of IE for the early diagnosis of fatal disease. A broad-range PCR technique was selected and evaluated in terms of its efficiency in the diagnosis of endocarditis using 19 heart valves from patients undergoing cardiovascular surgeries at the Habib Bourguiba Hospital of Sfax, Tunisia, on the grounds of suspected IE. The results demonstrated the efficiency of this technique particularly in cases involving a limited number of bacteria since it helped to increase detection sensitivity. The technique proved to be efficient, particularly, in the bacteriological diagnosis of IE in contexts involving negative results from conventional culture methods and other contexts involving bacterial species that were not amenable to identification by phenotypic investigations. Indeed, the sequencing of the partial 16S ribosomal RNA gene revealed the presence of Bartonella henselae, Enterobacter sp., and Streptococcus pyogenes in three heart valves with the negative culture. It should be noted that the results obtained from the polymerase chain reaction-sequencing identification applied to the heart valve and the strain isolated from the same tissue were not consistent with the ones found by the conventional microbiological methods in the case of IE caused by Gemella morbillorum. In fact, the results from the molecular identification revealed the presence of Lactobacillus jensenii. Overall, the results have revealed that the proposed method is sensitive, reliable and might open promising opportunities for the early diagnosis of IE.(AU)

ISOLATION AND GENOTYPING OF Bartonella henselae IN DOMESTIC CATS FROM SÃO PAULO AND MINAS GERAIS STATES

A Bartonella henselae é o agente causador da Doença da Arranhadura do Gato (DAG), que pode ser fatal. Os felinos domésticos e selvagens são conhecidos por serem os seus principais reservatórios mamíferos. O presente estudo investigou a ocorrência e diversidade genética de Bartonella spp. em gatos amostrados nos estados de São Paulo (SP) e Minas Gerais (MG), sudeste do Brasil. Com base em um ensaio quantitativo de PCR em tempo real (qPCR), o fragmento do gene nuoG de Bartonella sp. foi detectado em 39,9% (122/306) das amostras de sangue (46/151 de SP; 76/155 de MG). As amostras de sangue foram submetidas a uma técnica de cultura de pré-enriquecimento que permitiu a detecção de 12 amostras positivas adicionais, que se revelaram negativas na qPCR das amostras de sangue correspondentes. Além disso, cinco isolados de B. henselae foram obtidos a partir de amostras qPCR-negativas tanto para cultura de sangue como para cultura de pré-enriquecimento. Sete das 24 pulgas de Ctenocephalides felis foram positivas para Bartonella spp. no ensaio qPCR; 4/7 pulgas positivas foram colhidas de gatos negativos para Bartonella spp. Vinte e três sequências clonadas do gene rpoB de B. henselae foram obtidas a partir de nove amostras de sangue de gatos, mostrando a ocorrência de 13 genótipos diferentes. A análise de Median-joining network e a análise à distância SplitsTree mostraram que as sequências obtidas representavam genótipos distintos de B. henselae quando comparadas com as anteriormente depositadas no GenBank. Foi encontrada diversidade intra-hospedeiro, uma vez que foram detectados xiii diferentes genótipos do gene rpoB de B. henselae em gatos individuais. Os isolados de B. henselae apresentaram dois perfis alélicos (ST37 em gatos do estado MG e ST9 no estado SP) pela análise de MLST (Multilocus Sequence Typing) baseada no sequenciamento de oito marcadores moleculares. O presente estudo é o primeiro relatório molecular de Bartonella sp. em gatos do estado de Minas Gerais. Em resumo, este trabalho mostrou a ocorrência de diferentes genótipos B. henselae do gene rpoB a um nível de hospedeiro intra-reservo. Com base no qPCR de amostras de sangue e de cultura líquida pré-enriquecimento e isolamento, a ocorrência de 33,1% (50/151) e 56,8% (88/155) de Bartonella sp. em gatos dos estados de SP e MG, respectivamente. Dois perfis alélicos diferentes de B. henselae foram encontrados em gatos dos estados de São Paulo (ST9) e Minas Gerais (ST37), sugerindo uma evolução clonal de bartonellae numa determinada região geográfica.

Bartonella henselae is the causative agent for the infectious disease Cat Scratch Disease (CSD), which can be fatal. Domestic and wild felines are known to be its main mammal reservoirs. The present study aimed to investigate the occurrence and genetic diversity of Bartonella spp. in cats sampled in São Paulo (SP) and Minas Gerais (MG) States, Southeastern Brazil. Based on a quantitative real-time PCR (qPCR) assay, a Bartonella sp. nuoG gene fragment was detected in 39.9% (122/306) of the blood samples (46/151 cats of SP; 76/155 cats of MG). The blood samples were submitted to a pre-enrichment culture technique that allowed the detection of 12 additional positive samples, which showed to be negative in the qPCR using DNA blood samples as templates. Furthermore, five B. henselae isolates were obtained from qPCR-negative samples for both blood and pre-enrichment culture. Seven out of 24 Ctenocephalides felis fleas were positive for Bartonella spp. in the qPCR assay; 4/7 positive fleas were collected from Bartonella-negative cats. Twenty-three rpoB B. henselae cloned sequences were obtained from nine cats blood samples, showing the occurrence of 13 different genotypes. Median-joining network and SplitsTree distance analysis showed that the obtained sequences represented distinct B. henselae genotypes when compared to those previously deposited in GenBank. Intra-host diversity was found, since different rpoB genotypes of B. henselae were detected in individual single cats. Bartonella henselae isolates showed two allelic profiles (ST37 in cats from MG state and xv ST9 in SP state) by MLST (Multilocus Sequence Typing) based on sequencing of eight molecular markers. The present study is the first molecular report of Bartonella sp. in cats from Minas Gerais State. In summary, this body of work showed the occurrence of different B. henselae rpoB genotypes at an intra-reservoir host level. Based on qPCR from blood samples and pre-enrichment liquid culture and isolation, occurrence of 33.1% (50/151) and 56.8% (88/155) for Bartonella sp. was found in cats from SP and MG states, respectively. Two different allelic profiles of B. henselae were found in cats from the states of São Paulo (ST9) and Minas Gerais (ST37), suggesting a clonal evolution of bartonellae in a certain geographical region.

OCORRÊNCIA DE Bartonella spp. NO SANGUE E UNHAS DE FELINOS DOMÉSTICOS DA REGIÃO SUL DA BAHIA AVALIAÇÃO DOS FATORES DE RISCO, PERFIL HEMATOLÓGICO E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR

Os gatos domésticos são os hospedeiros naturais de diversas espécies de Bartonella, dentre elas Bartonella henselae, B. koehlerae e B. clarridgeiae, que são descritas como causadoras da Doença da Arranhadura do Gato (DAG). Os felinos são infectados através das fezes das pulgas da espécie Ctenocephalides felis. A transmissão aos seres humanos ocorre através das arranhaduras ou mordeduras de gatos infetados pela bactéria. Com o objetivo de determinar a prevalência da infecção por B. henselae, B. koehlerae e B. clarridgeia, bem como determinar a presença do agente das unhas dos animais infectados, foram coletados amostras de sangue e raspados de unhas de 188 gatos. As amostras de sangue foram submetidas a realização de hemograma, teste sorológico para diagnóstico de infecção pelo Vírus da Imunodeficiência Felina (FIV) e Vírus da Leucemia Felina (FELV) e análise molecular para detecção do DNA de Bartonella spp. As amostras dos raspados das unhas foram submetidas à avaliação molecular para detecção do DNA de Bartonella spp. Dos 188 animais incluídos no estudo, em 39 (20,7%) houve detecção do DNA de Bartonella sp. nas amostras de sangue. Não houve presença de co-infecçao com FIV-FELV. Com relação à analise hematológica, os animais positivos apresentaram hiperproteinemia e linfopenia. Os fatores de risco associados à infecção foram idade (<1 ano), acesso à rua e não ser castrado. Quanto a caracterização das espécies, foi detectado DNA de B. henselae, B. koehlerae e B. clarridgeiae. Nos animais positivos foi detectado DNA de Bartonella spp. em 35,9% (14/39) amostras. Conclui-se que a região estudada apresenta significa prevalência de Bartonella spp. na população de gatos domésticos e que os fatores de riso associados a sua infecção são idade, acesso a rua, presença de pulgas e não ser castrado

Domestic cats are the natural hosts of several species of Bartonella, among them Bartonella henselae, B. koehlerae and Bartonella clarridgeiae, which are described as causing cat scratch disease (DAG). Felines are infected through the feces of the fleas of the species Ctenocephalides felis. Transmission to humans occurs through the scratches or bites of cats infected by the bacteria. In order to determine the prevalence of infection by B. henselae, B. koehlerae and B. clarridgeia, as well as to determine the presence of the nail agent of the infected animals. blood samples were collected and nail scraped from 188 cats. The blood samples were submitted to a blood count, serological test for Feline Immunodeficiency Virus (FIV) and Feline Leukemia Virus (FeLV) and molecular analysis for the detection of Bartonella spp. Samples of nail scrapings will subsequently be used for culture and molecular evaluation. Of the 188 animals included in the study, 39 (20.7%) had DNA detection of Bartonella sp. in blood samples. There was no co-infection with FIV-FeLV. Regarding the hematological analysis, the positive animals presented hyperproteinemia and lymphopenia. The risk factors associated with infection were age (<1 year), street access and not castration. Regarding the species characterization, B. henselae, B. koehlerae and B. clarridgeiae DNA were detected. Bartonella spp. DNA was detected in positive animals. in 35.9% (14/39) samples. It is concluded that the region studied shows the prevalence of Bartonella spp. in the population of domestic cats and that the laughter factors associated with their infection are age, access to the street, presence of fleas and not being castrated.

Molecular detection of feline arthropod-borne pathogens in cats in Cuiabá, state of Mato Grosso, central-western region of Brazil

Hemotrophic mycoplasmas (hemoplasmas), Bartonellasp., Hepatozoon sp. and Cytauxzoon felis are prominent pathogens that circulate between cats and invertebrate hosts. The present study aimed to detect the presence of DNA from hemoplasmas,Bartonella sp., Hepatozoon sp. andCytauxzoon felis, and then confirm it by means of sequencing, in blood samples from cats in Cuiabá, MT, Brazil. From February 2009 to February 2011, blood samples with added EDTA were collected from 163 cats that were being housed in four different animal shelters in the city of Cuiabá, state of Mato Grosso, Brazil and from 15 cats that were admitted to the veterinary hospital of the Federal University of Mato Grosso (UFMT). Out of the 178 cats sampled, 15 (8.4%) were positive for hemoplasmas: four (2.2%) forMycoplasma haemofelis, 12 (6.7%) for Candidatus M. haemominutum and one (0.5%) for Candidatus M. turicensis. One cat (0.5%), a patient that was attended at the veterinary hospital, was coinfected with M. haemofelis, Candidatus M. haemominutum and Candidatus M. turicensis, based on sequencing confirmation. Four cats were positive for Bartonella spp.: three (1.7%) for B. henselae and one (0.5%) for B. clarridgeiae. None of the animals showedCytauxzoon sp. or Hepatozoon sp. DNA in their blood samples. This study showed that cats housed in animal shelters in the city of Cuiabá, state of Mato Grosso, are exposed to hemoplasmas andBartonella species.

Micoplasmas hemotróficos (hemoplasmas), Bartonellasp., Hepatozoon sp. e Cytauxzoon felis se destacam como importantes patógenos que circulam entre gatos e hospedeiros invertebrados. O presente estudo objetivou detectar e, posteriormente confirmar por seqüenciamento, a presença de DNA de hemoplasmas,Bartonella sp., Hepatozoon sp. eCytauxzoon felis em amostras de sangue de gatos de Cuiabá, MT, Brasil. Entre fevereiro/2009 e fevereiro de 2011, amostras de sangue acrescidas de EDTA foram coletadas de 163 gatos mantidos em quatro diferentes abrigos na cidade de Cuiabá, estado do Mato Grosso, Brasil, e de 15 gatos atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal do Mato Grosso (UFTM). Dos 178 gatos amostrados, 15 (8,4%) foram positivos para hemoplasmas: quatro (2,2%) para Mycoplasma haemofelis, 12 (6,7%) para Candidatus M. haemominutum e um (0,5%) para Candidatus M. turicensis. Um (0.5%) gato, atendido no Hospital Veterinário da UFMT, estava co-infectado com M. haemofelis, Candidatus M. haemominutum e Candidatus M. turicensis, baseado na confirmação por sequenciamento. Quatro gatos mostraram-se positivos paraBartonella spp.: três (1,7%) para B. henselae e um (0.5%) para B. clarridgeiae. Todos os gatos amostrados mostraram-se negativos para Cytauxzoon sp. e Hepatozoon sp. Este estudo mostrou que gatos mantidos em abrigos na cidade de Cuiabá, estado do Mato Grosso, são expostos a hemoplasmas e espécies de Bartonella sp.

Molecular detection of feline arthropod-borne pathogens in cats in Cuiabá, state of Mato Grosso, central-western region of Brazil / Detecção molecular de patógenos transmitidos por artrópodes em gatos de Cuiabá, estado do Mato Grosso, centro-oeste do Brasil

Hemotrophic mycoplasmas (hemoplasmas), Bartonellasp., Hepatozoon sp. and Cytauxzoon felis are prominent pathogens that circulate between cats and invertebrate hosts. The present study aimed to detect the presence of DNA from hemoplasmas, Bartonella sp., Hepatozoon sp. and Cytauxzoon felis, and then confirm it by means of sequencing, in blood samples from cats in Cuiabá, MT, Brazil. From February 2009 to February 2011, blood samples with added EDTA were collected from 163 cats that were being housed in four different animal shelters in the city of Cuiabá, state of Mato Grosso, Brazil and from 15 cats that were admitted to the veterinary hospital of the Federal University of Mato Grosso (UFMT). Out of the 178 cats sampled, 15 (8.4%) were positive for hemoplasmas: four (2.2%) for Mycoplasma haemofelis, 12 (6.7%) for 'Candidatus M. haemominutum' and one (0.5%) for 'Candidatus M. turicensis'. One cat (0.5%), a patient that was attended at the veterinary hospital, was coinfected with M. haemofelis, 'Candidatus M. haemominutum' and 'Candidatus M. turicensis', based on sequencing confirmation. Four cats were positive for Bartonella spp.: three (1.7%) for B. henselae and one (0.5%) for B. clarridgeiae. None of the animals showed Cytauxzoon sp. or Hepatozoon sp. DNA in their blood samples. This study showed that cats housed in animal shelters in the city of Cuiabá, state of Mato Grosso, are exposed to hemoplasmas and Bartonella species.

Micoplasmas hemotróficos (hemoplasmas), Bartonellasp., Hepatozoon sp. e Cytauxzoon felis se destacam como importantes patógenos que circulam entre gatos e hospedeiros invertebrados. O presente estudo objetivou detectar e, posteriormente confirmar por seqüenciamento, a presença de DNA de hemoplasmas, Bartonella sp., Hepatozoon sp. e Cytauxzoon felis em amostras de sangue de gatos de Cuiabá, MT, Brasil. Entre fevereiro/2009 e fevereiro de 2011, amostras de sangue acrescidas de EDTA foram coletadas de 163 gatos mantidos em quatro diferentes abrigos na cidade de Cuiabá, estado do Mato Grosso, Brasil, e de 15 gatos atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal do Mato Grosso (UFTM). Dos 178 gatos amostrados, 15 (8,4%) foram positivos para hemoplasmas: quatro (2,2%) para Mycoplasma haemofelis, 12 (6,7%) para 'Candidatus M. haemominutum' e um (0,5%) para 'Candidatus M. turicensis'. Um (0.5%) gato, atendido no Hospital Veterinário da UFMT, estava co-infectado com M. haemofelis, 'Candidatus M. haemominutum' e 'Candidatus M. turicensis', baseado na confirmação por sequenciamento. Quatro gatos mostraram-se positivos para Bartonella spp.: três (1,7%) para B. henselae e um (0.5%) para B. clarridgeiae. Todos os gatos amostrados mostraram-se negativos para Cytauxzoon sp. e Hepatozoon sp. Este estudo mostrou que gatos mantidos em abrigos na cidade de Cuiabá, estado do Mato Grosso, são expostos a hemoplasmas e espécies de Bartonella sp.

OCORRÊNCIA DE INFECÇÃO POR Bartonella spp. EM CÃES (Canis familiaris) E GATOS (Felis catus) QUE HABITAM O PARQUE ESTADUAL DA SERRA DA TIRIRICA (PESET) RIO DE JANEIRO

Bartonelose é uma doença causada por bactérias do gênero Bartonella e provoca enfermidades em humanos podendo, nos casos dos imunocomprometidos, levar ao óbito. Bartonella henselae é o principal agente causal. Os felinos domésticos são infectados por vetores artrópodes e estão envolvidos na transmissão desta bactéria para humanos por meio de arranhaduras e mordeduras. Há relatos da presença deste agente em caninos domésticos, porém estes são considerados hospedeiros acidentais. Os objetivos deste estudo foram identificar a presença da Bartonella spp. em cães e gatos domésticos sem doença clínica evidente, que habitam o Parque Estadual da Serra da Tiririca - PESET, que abrange os municípios de Niterói e Maricá no estado do Rio de Janeiro, pelo método molecular (Reação em Cadeia da Polimerase PCR) e avaliar as possíveis alterações hematológicas e bioquímicas séricas dos animais positivos. Amostras sanguíneas de 213 animais, sendo 124 cães e 89 gatos foram processadas. Um total de 24,71% (22/89) dos gatos apresentaram DNA de Bartonella henselae, porém, não foi encontrado nenhum cão positivo. Não foram observadas alterações hematológicas e/ou bioquímicas nos animais infectados. Concluiu-se que Bartonella spp. circula entre os gatos que habitam o PESET, sem gerar alterações clinicas ou hematológicas e que os cães que habitam este local e se encontram clinicamente saudáveis não apresentaram bacteremia no momento deste estudo.

Bartonellosis is a disease caused by bacteria of the genus Bartonella and causes diseases in humans and, in cases of immunocompromised people, lead to death. Bartonella henselae is the main causal agent. Domestic cats are infected with arthropod vectors and are involved in transmitting this agent to humans through scratches and bites. Presence of this agent in domestic dogs has been reported, however they are considered accidental hosts. This study aim to identify Bartonella spp. DNA in domestic dogs and cats with no evident clinical illness that inhabit Parque Estadual da Serra da Tiririca, which covers municipalities of Niterói and Maricá in Rio de Janeiro state, using molecular method (Polymerase Chain Reaction - PCR) and evaluate possible hematological and biochemical changes on positive animals. Blood samples from 213 animals, 124 dogs and 89 cats were processed. A total of 24.71% (22/89) cats presented Bartonella henselae s DNA, however, no positive dogs were found. No haematological and/or biochemical changes were observed in infected animals. It was concluded that Bartonella spp. circulates among cats inhabiting PESET, without generating clinical or hematological changes and that dogs that inhabit this place and are clinically healthy do not present the bacteremia at the time of this study.

Detection of hemoplasma and Bartonella species and co-infection with retroviruses in cats subjected to a spaying/neutering program in Jaboticabal, SP, Brazil / Detecção de hemoplasmas e Bartonella sp. e co-infecção com retrovírus em gatos submetidos a um programa de castração/esterilização em Jaboticabal, SP, Brasil

Hemotrophic mycoplasmas and Bartonella species are important pathogens that circulate between cats and invertebrate hosts, occasionally causing diseases in humans. Nevertheless, there are few reports on occurrences of these agents in cats in Brazil. The present study aimed to detect the presence of hemoplasma and Bartonella DNA by means of PCR and sequencing. FIV antigens and anti-FeLV antibodies, were studied by using a commercial kit on blood and serum samples, respectively, among 46 cats that were sampled during a spaying/neutering campaign conducted in Jaboticabal, SP. Three (6.5%) cats were positive for hemoplasmas: two (4.3%) for 'Candidatus M. haemominutum' and one (2.2%) for both M. haemofelis and 'Candidatus M. turicensis'. One of the two 'Candidatus M. haemominutum'-infected cats was also positive for FeLV antigens and showed antibodies for FIV. Two cats (4.3%) were positive for B. henselae. One of them was also positive for FeLV antigens. Eight cats (17.4%) were positive for FeLV, and just one (2.2%) showed anti-FIV antibodies. Bartonella species and hemoplasmas associated with infection due to retroviruses can circulate among apparently healthy cats.(AU)

Micoplasmas hemotróficos e espécies de Bartonella são importantes patógenos que circulam entre gatos e hospedeiros invertebrados, causando ocasionalmente doenças no homem. Apesar disto, poucos são os estudos acerca da ocorrência destes agentes entre gatos no Brasil. O presente estudo objetivou detectar o DNA de hemoplasmas e Bartonella sp. pela PCR e sequenciamento. Antígeno de FIV e anticorpos anti-FeLV foram estudados utilizando um "kit" comercial, em amostras de sangue e soro, respectivamente, de 46 gatos amostrados em uma campanha de castração em Jaboticabal, SP. Três gatos (6,5%) foram positivos para hemoplasmas: dois (4,3%) para 'Candidatus M. haemominutum' e um (2,2%) para M. haemofelis and 'Candidatus M. turicensis'. Um dos gatos positivos para 'Candidatus M. haemominutum' mostrou-se também positivo na detecção de antígeno de FeLV e de anticorpos para FIV. Dois (4,3%) gatos mostraram-se positivos para B. henselae, sendo que um deles também se mostrou positivo para antígeno de FeLV. Oito gatos (17,4%) foram positivos para FeLV, e apenas um gato mostrou anticorpos anti-FIV. Bartonella sp. e hemoplasmas associados à infecção por retrovírus podem circular entre gatos aparentemente saudáveis.(AU)

ASPECTOS ETIOLÓGICOS E EPIDEMIOLÓGICOS DE HEMOPARASITOSES EM FELINOS DOMÉSTICOS DE CUIABÁ E VÁRZEA GRANDE, MATO GROSSO

Hemoparasitoses transmitidas por artrópodes que infectam felinos domésticos têm sido consideradas emergentes na medicina veterinária e humana. A erliquiose felina tem sido descrita em diversas regiões do mundo, porém pouco se sabe sobre as espécies envolvidas, transmissão e patogenia da mesma. Outra hemoparasitose importante é a bartonelose, que se destaca por ser de caráter zoonótico. Os felinos domésticos são considerados os principais reservatórios e portadores de Bartonella henselae, B. clarridgeiae e B. koehlerae, sendo o principal vetor, a pulga Ctenocephalides felis. Alguns protozoários transmitidos por artrópodes como, Hepatozoon spp., Cytauxzoon spp., Babesia spp. também têm sido descritos circulando em felinos domésticos em diversos países. O objetivo deste é fornecer dados sobre os aspectos etiológicos e epidemiológicos de determinadas hemoparasitoses em felinos domésticos dos municípios de Cuiabá e Várzea Grande do estado de Mato Grosso, dando subsídios para a melhor compreensão destas enfermidades em felinos. Sendo assim, técnicas moleculares e sorológicas foram aplicadas em amostras de sangue e soro de felinos oriundos de distintas localidades de ambos os municípios, com o intuito de descrever as espécies de parasitas circulantes na região.

Arthropod-borne hemoparasites infecting domestic felines have been considered emerging in veterinary and human medicine. Feline ehrlichiosis has been described in several regions of the world, but little is known about the species involved, transmission and pathogenesis of it. Another important hemoparasitosis is bartonellosis, which stands out because of its zoonotic nature. Domestic felids are considered the main reservoirs and carriers of Bartonella henselae, B. clarridgeiae and B. koehlerae, being the main vector, the flea Ctenocephalides felis. Some protozoa transmitted by arthropods such as Hepatozoon spp., Cytauxzoon spp., Babesia spp. Have also been described circulating in domestic felines in several countries. The objective of this study is to provide data on the etiological and epidemiological aspects of certain hemoparasitoses in domestic felines in the municipalities of Cuiabá and Várzea Grande in the state of Mato Grosso, providing subsidies for a better understanding of these diseases in felines. Thus, molecular and serological techniques were applied in blood and serum samples from felines from different localities of both municipalities, with the purpose of describing the species of circulating parasites in the region.

Detection of Bartonella henselae in defibrinated sheep blood used for culture media supplementation

Bartonella henselae was detected in defibrinated sheep blood employed in supplementing a selective bacteria culture medium by nested PCR. We recommended that highly sensitive technical tests be run to ensure a sterile culture medium for Bartonella spp. isolation, since infected blood samples used in preparation could lead to false-positive results.

Bartonelose: análise molecular e sorológica em gatos do Rio de Janeiro Brasil / Bartonellosis: molecular and serological analysis in cats from Rio de Janeiro Brazil

Bartonella henselae e mais recentemente B. quintana têm sido apontados como agentes causais de diversas moléstias emhumanos, entre as quais a doença da arranhadura do gato, endocardite, meningoencefalite e neuroretinite, podendo levarao óbito, principalmente os imunocomprometidos. O gato doméstico é considerado o principal animal envolvido na transmissãodestes patógenos. Constituiu-se objetivo deste estudo a avaliação da frequência de Bartonella spp. em gatos domésticosdomiciliados do município de Vassouras (RJ) comparando-se os achados na reação em cadeia pela polimerase (PCR) e nasorologia por imunofluorescência indireta (IFA). Amostras sanguíneas de 37 (100%) gatos de um abrigo da cidade deVassouras (RJ) foram analisadas, sendo 36 (97,3%) positivas na PCR para Bartonella spp. Das amostras PCR positivas,nove (25%) e 27 (75%) apresentaram, respectivamente, reatividade e ausência de reatividade ao IFA. Apenas uma (2,7%)amostra de sangue foi concomitantemente negativa na PCR e IFA para Bartonella spp. Este é o primeiro registro de infecçãopor Bartonella spp. em felinos domésticos no estado do Rio de Janeiro (Brasil) identificada por análise molecular e sorológica,o que nos permite concluir que este agente zoonótico está presente em alta frequência em gatos domésticos do municípiode Vassouras (RJ).(AU)

Bartonella henselae and B. quintana have been pointed as causal agents of many diseases in humans, and can lead to death, mainly immunodefficient people. Domestic cat is considered the unique animal in transmission of these pathogens. The purpose of this study was to evaluate the frequency of Bartonella spp. in domestic cats from Vassouras city (RJ) by polimerase chain reaction (PCR) and indirect immunofluorescence test assay (IFA) and compare the results. Blood samples from 37 (100%) domestic cats from a shelter of Vassouras city (RJ) were analyzed and 36 (97.3%) were considered positive by polymerase chain reaction (PCR). The indirect immunofluorescence test assay (IFA) revealed 9 (25.0%) and 27 (75.0%) of that PCR positive samples showed, respectively, reaction and absence of reaction to IFA. Only one sample (2.7%) was negative in PCR and IFA. This is the first communication of Bartonella spp. infection in domestic cats in Rio de Janeiro State (Brazil) identified by molecular and serological assays, thus it can be concluded that this zoonotic agent is present in high frequencies in domestic cats from Vassouras city (RJ).(AU)

Bartonelose: análise molecular e sorológica em gatos do Rio de Janeiro Brasil / Bartonellosis: molecular and serological analysis in cats from Rio de Janeiro – Brazil

Bartonella henselae e mais recentemente B. quintana têm sido apontados como agentes causais de diversas moléstias emhumanos, entre as quais a doença da arranhadura do gato, endocardite, meningoencefalite e neuroretinite, podendo levarao óbito, principalmente os imunocomprometidos. O gato doméstico é considerado o principal animal envolvido na transmissãodestes patógenos. Constituiu-se objetivo deste estudo a avaliação da frequência de Bartonella spp. em gatos domésticosdomiciliados do município de Vassouras (RJ) comparando-se os achados na reação em cadeia pela polimerase (PCR) e nasorologia por imunofluorescência indireta (IFA). Amostras sanguíneas de 37 (100%) gatos de um abrigo da cidade deVassouras (RJ) foram analisadas, sendo 36 (97,3%) positivas na PCR para Bartonella spp. Das amostras PCR positivas,nove (25%) e 27 (75%) apresentaram, respectivamente, reatividade e ausência de reatividade ao IFA. Apenas uma (2,7%)amostra de sangue foi concomitantemente negativa na PCR e IFA para Bartonella spp. Este é o primeiro registro de infecçãopor Bartonella spp. em felinos domésticos no estado do Rio de Janeiro (Brasil) identificada por análise molecular e sorológica,o que nos permite concluir que este agente zoonótico está presente em alta frequência em gatos domésticos do municípiode Vassouras (RJ).

Bartonella henselae and B. quintana have been pointed as causal agents of many diseases in humans, and can lead to death, mainly immunodefficient people. Domestic cat is considered the unique animal in transmission of these pathogens. The purpose of this study was to evaluate the frequency of Bartonella spp. in domestic cats from Vassouras city (RJ) by polimerase chain reaction (PCR) and indirect immunofluorescence test assay (IFA) and compare the results. Blood samples from 37 (100%) domestic cats from a shelter of Vassouras city (RJ) were analyzed and 36 (97.3%) were considered positive by polymerase chain reaction (PCR). The indirect immunofluorescence test assay (IFA) revealed 9 (25.0%) and 27 (75.0%) of that PCR positive samples showed, respectively, reaction and absence of reaction to IFA. Only one sample (2.7%) was negative in PCR and IFA. This is the first communication of Bartonella spp. infection in domestic cats in Rio de Janeiro State (Brazil) identified by molecular and serological assays, thus it can be concluded that this zoonotic agent is present in high frequencies in domestic cats from Vassouras city (RJ).

Levantamento de anticorpos anti-bartonella henselae em felinos domiciliados na cidade de São Paulo, estado de São Paulo e sua importância em saúde pública

A Doença da Arranhadura do Gato (DAG) é uma zoonose transmitida pelos gatos que caracteriza-se por linfoadenopatiaregional acompanhada por febre, anorexia e perda de peso. Em pacientes imunodeprimidos, como os aidéticos, o quadroevolui para outras formas, desde encefalopatias até para a Angiomatose e a Peliose Bacilares, de evolução fatal. Os felídeos,principalmente os gatos domésticos, são o reservatório do agente, a Bartonella henselae, restando confirmar a idade na qualeles estão mais aptos a transmitir a doença. Foram analisados 200 soros de felinos na cidade de São Paulo, estado de SãoPaulo, no período de janeiro de 1996 até dezembro de 1997 através da técnica da imunofluorescência indireta. A metade delesera saudável e a outra metade era composta por animais atendidos no Ambulatório do Hospital Veterinário da Universidade deSão Paulo. Os animais foram divididos em 4 grupos baseados em sua faixa etária: animais de até 6 meses de idade, entre 7e 12 meses, animais de mais de 1 ano até 2 anos e outros com mais de 2 anos. O objetivo foi avaliar a presença de anticorposIgG anti-B henselae nos quatro grupos de animais, bem como o encontro desses anticorpos e o sexo ou o estado de higidezdos felinos. Foi encontrada soropositividade de 16% para B. henselae e observou-se que o maior número de animaisreagentes se encontrava na faixa etária de 7 a 12 meses, e que não houve diferença

Detecção de micoplasmas, bartonelas e vírus da leucemia felina em pequenos felídeos neotropicais mantidos em cativeiro no Refúgio Bela Vista, Foz do Iguaçu / Detection of mycoplasmas, bartonellas and feline leukemia vírus in small neotropical felids maintained in captivity at Refúgio Bela Vista, Foz do Iguaçu

Amostras de sangue total e suabes de orofaringe e conjuntiva foram coletadas de 57 felídeos Neotropicais (1 Leopardus geoffroyi, 17 L. wiedii, 22 L. tigrinus, 14 L. pardalis e 3 Puma yagouaroundi) mantidos em cativeiro no Refúgio Bela Vista, Foz do Iguaçu. Dados clínicos, hemograma e histórico dos animais foram disponibilizados. Materiais clínicos obtidos a partir dos suabes de orofaringe e conjuntiva foram submetidos ao cultivo para Mycoplasma spp em meio específico. DNA do sangue e suabes foram extraídos por meio de um kit comercial e pelo método de fervura, respectivamente. DNA extraído de amostras de sangue foram submetidos à PCR para detecção de Mycoplasma haemofelis (Mhf), Candidatus M. haemominutum (CMhm), DNA proviral do vírus da leucemia felina (FeLV) e Bartonella spp. DNA extraído dos suabes foram submetidos à PCR para detecção de Mollicutes e M. felis. Foi realizada uma análise de associação entre alterações clínicas e a infecção por Bartonella spp e um estudo de fator de risco da infecção por esse microrganismo. Apenas 1 (1,75%) animal foi positivo a reação para Mhf e nenhum foi positivo a reação para CMhm. Dois (3,5%) animais foram positivos a reação para FeLV e 6 (10,52%) foram positivos para Bartonella spp. Não houve co-infecção entre os agentes pesquisados nas amostras de sangue. Foram obtidos 5 (8,77%) isolados de Mycoplasma spp da orofaringe e nenhum de conjuntiva. DNA de Mollicutes foi detectado em 53 (93%) e 27 (47,36%) amostras de orofaringe e conjuntiva, respectivamente. Nenhuma amostra apresentou resultado positivo na detecção de DNA alvo de M. felis. Não houve associação entre as alterações hematológicas (anemia, desidratação, leucocitose, leucopenia, histórico de anemia) e a infecção por Bartonella spp. Machos apresentam maior risco de adquirir bartonelose do que fêmeas. Este é o primeiro relato da presença de DNA proviral de FeLV em L. tigrinus e L. pardalis no sul do aís, de DNA de B. henselae em L. tigrinus, L. pardalis, L. geoffroyii e P. yagouaroundi, e de um estudo de fator de risco associado a infecção por Bartonella spp em felídeos neotropicais

Total blood samples and oropharinx and conjunctival swabs were collected from 57 neotropical felids (1 Leopardus geoffroyi, 17 L. wiedii, 22 L. tigrinus, 14 L. pardalis and 3 Puma yagouaroundi) maintained in captivity at Refúgio Bela Vista, Foz do Iguaçu. Clinical data, hemogram and clinical history of these animals were available. Clinical materials obtained from oropharinx and conjunctiva were cultured in specific media for Mycoplasma spp isolation. DNA of blood and swabs were extracted using a commercially available kit and a boiling method, respectively. DNA samples from swabs were submitted to a PCR for the detection of Mollicutes and M. felis. DNA samples from blood were submitted to a PCR for detection of Mycoplasma haemofelis (Mhf), Candidatus M. haemominutum (CMhm), feline leukemia virus (FeLV) proviral DNA , and Bartonella spp. The association between hematological alterations and bartonella infection was evaluated and a risk factor analysis was performed. Only 1 (1.75%) animal was positive for Mhf reaction, whereas all animals were negative for CMhm detection. Two (3.5%) animals were positives for FeLV and 6 (10.52%) animals were positive for Bartonella spp, by PCR. Co-infections among these agents were not observed. Five (8.77%) mycoplasma isolates were obtained from oropharinx samples and none was obtained from conjunctival samples. Mollicutes DNA was detected in 53 (93%) and 27 (47.36%) samples from oropharinx and conjunctiva, respectively. All samples were negative for M. felis detection. Hematological alterations (anemia, dehydration, leukocytosis, leucopenia, history of anemia) were not associated to Bartonella spp infection. Males are more likely to be infected than females. This is the first report of FeLV proviral DNA in L. tigrinus and L. pardalis in Southern Brazil, of B. henselae DNA in L. trigrinus, L. pardalis, L. geoffroyi and P. yagouaroundi, and the first study of risk factors for Bartonella spp infection in neotropical felids

Exposição de felídeos selvagens a agentes infecciosos selecionados / Exposure of wild felids to selected infectious agents

Este estudo avaliou a exposição de 12 espécies de felídeos selvagens de vida livre (n=22) e mantidas em cativeiro (n=210) no Brasil a 16 agentes potencialmente patogênicos para membros da família Felidae, como herpesvírus felino 1 (FHV 1), calicivírus felino (FCV), parvovírus felino (FPV), coronavírus felino (FCoV), vírus da leucemia felina (FeLV), vírus da imunodeficiência felina (FIV), lentivírus de puma (PLV), vírus da cinomose canina (CDV), Bartonella henselae, Ehrlichia canis, Anaplasma phagocytophilum, Mycoplasma haemofelis, ′Candidatus Mycoplasma haemominutum′, Candidatus Mycoplasma turicensis′, Theileria sp e Cytauxzoon sp, através do emprego de IFA, Western blot, ELISA e TaqMan® PCR e RT-PCR em amostras de soro, sangue, fezes e suabes orais, conforme as amostras disponíveis para cada animal. A detecção direta de patógenos ou de anticorpos demonstrou que populações de felídeos selvagens no Brasil estão expostas pelo menos ao FHV 1, FCV, FPV, FCoV, FeLV e lentivírus felinos, Bartonella henselae, Ehrlichia canis, Mycoplasma haemofelis, ′Candidatus Mycoplasma haemominutum′ e Cytauxzoon sp, ou agentes relacionados, quais provavelmente contribuem em quadros não diagnosticados de morbidade e/ou mortalidade das populações de felídeos selvagens no País. A presença de patógenos comuns de carnívoros domésticos em felídeos selvagens aponta para a necessidade de cuidadoso monitoramento destas infecções através de uma abordagem integrada e multidisciplinar

This study evaluated exposure of 12 nondomestic felid species, both free-ranging (n=22) and captive (n=210) in Brazil to 16 potential pathogenic agents for members of Felid family, as feline herpesvirus 1 (FHV 1), feline calicivirus (FCV), feline parvovirus (FPV), feline coronavirus (FCoV), feline leukemia virus (FeLV), feline immunodeficiency virus (FIV), puma lentivirus (PLV), canine distemper virus (CDV), Bartonella henselae, Ehrlichia canis, Anaplasma phagocytophilum, Mycoplasma haemofelis, ′Candidatus Mycoplasma haemominutum′, Candidatus Mycoplasma turicensis′, Theileria sp, and Cytauxzoon sp, using IFA, Western blot, ELISA, and TaqMan® PCR and RT-PCR in serum, blood, feces and oral swabs, according to available samples for each animal. The antibody or agents detection demonstrated that Brazilian wild felid populations are exposed to at least FHV 1, FCV, FPV, FCoV, FeLV, puma lentivirus (PLV), Bartonella henselae, Ehrlichia canis, Mycoplasma haemofelis, ′Candidatus Mycoplasma haemominutum′, and Cytauxzoon sp, related agents, which probably contribute to undiagnosed morbidity and/or mortality scenarios for the Brazilian populations of wild felids. The presence of common domestic carnivore pathogens in wild felids address the need of close monitoring of such infections throughout an integrative and multidisciplinary approach

Miocardite em cães com erliquiose monocítica

As hemoparasitoses caninas são enfermidades de incidência crescente no Brasil. Caracterizam-se pelo envolvimento multi-sistêmico, podendo provocar o óbito. Este estudo objetivou avaliar a ocorrência de miocardite por meio da avaliação da eletrocardiografia (ECG), ecocardiografia, da pressão arterial não-invasiva (PAS) e da troponina I cardíaca (TnIc) em 194 cães com alto risco de estarem infectados por Anaplasma platys, Babesia canis, Bartonella spp, Ehrlichia canis, E. chaffeensis e/ou E. ewingii, diagnosticados por PCR. Foram excluídos 13 animais soropositivos para Leptospira interrogans e Leishmania chagasi. Além disso, em 20 cães que vieram a óbito, objetivou-se caracterizar as anormalidades histopatológicas e o índice apoptótico (determinado pela imunoistoquímica para caspase-3 ativa) do tecido miocárdico. Dentre os 181 cães sintomáticos, 156 (86%) foram positivos para os parasitos pesquisados. Infecções únicas por E. canis foram detectadas em 104 cães (57,5%), por A. platys em 9 cães (5%), por B. canis em 4 (2%) e co-infectados por dois ou mais destes agentes em 38 pacientes (21%). Um cão (0,5%) foi positivo para B. henselae e nenhum foi positivo para E. chaffeensis ou E. ewingii. Na erliquiose canina, 33% dos cães apresentaram elevações na TnIc (média ± DP: 0,37 ± 1,18 ng/mL; mediana: 0,05 ng/mL; 3º quartil: 1,36 ng/mL) sendo 9 vezes superior do que em cães normais (média ± DP: 0,04 ± 0,01 ng/mL; mediana: 0,04 ng/mL; 3º quartil: 0,08 ng/mL; p<0,05). Anormalidades no ECG foram estatisticamente mais freqüentes na infecção por E. canis (36%), na co-infecção (35%) e em cães sintomáticos mas negativos (24%) do que em cães normais. Diferenças significativas na avaliação ecocardiográfica e na PAS não foram detectadas entre os grupos. Cães infectados por E. canis apresentaram risco maior para lesões miocárdicas (OR: 2,32; IC 95%: 1,11 - 4,87; p=0,026), sendo o grau de anemia correlacionado com o aumento do risco (r = -0,96, p=0,0007). Dentre os 20 cães avaliados na histopatologia, 11 (55%) foram positivos para E. canis, 8 (40%) co-infectados por E. canis e A. platys ou B. canis e 1 (5%) negativo. Necrose e hemorragia intramiocárdica foi detectadas em 100% dos cães co-infectados e em 82% dos positivos para E. canis. Infiltrado inflamatório foi observado em 86% dos co-infectados e em 73% dos positivos para E. canis. O índice apoptótico foi 48 vezes maior nos cães com erliquiose (média ± DP: 0,15 ± 0,107 céls/mm2; mediana: 0,144 céls/mm2; 3º quartil: 0,4 céls/mm2) que em cães normais (média ± DP: 0,004 ± 0,006 céls/mm2; mediana: 0,003 céls/mm2; 3º quartil: 0,012 céls/mm2; p<0,05), e apresentou correlação com a PAS (r = 0,632, p = 0,008). Os resultados desta tese indicam que um terço dos cães infectados por Ehrlichia canis desenvolve miocardite. A erliquiose monocítica canina - detectada em três de cada quatro animais sintomáticos - aumenta em 2,3 vezes a chance da ocorrência de miocardite. Os mecanismos fisiopatogênicos ainda não são completamente elucidados, contudo, a ocorrência de infecção crônica, hipóxia miocárdica, ativação da resposta inflamatória sistêmica, necrose e apoptose podem estar envolvidas

Miocardite em cães com erliquiose monocítica

As hemoparasitoses caninas são enfermidades de incidência crescente no Brasil. Caracterizam-se pelo envolvimento multi-sistêmico, podendo provocar o óbito. Este estudo objetivou caracterizar e quantificar a ocorrência de miocardite por meio da avaliação da eletrocardiografia (ECG), ecocardiografia, da pressão arterial não-invasiva (PAS) e da troponina 1 cardíaca (TnIc) em 194 cães com alto risco de estarem infectados por Anaplasma platys, Babesia canis, Bartonella spp, Ehrlichia canis, E. chaffeensis e/ou E. ewingii, diagnosticados por PCR. Foram excluídos 13 animais soropositivos para Leptospíra interrogans e Leishmania chagas!. Além disso, em 20 cães que vieram a óbito, objetivou-se caracterizar as anormalidades histopatológicas e o índice apoptótico (determinado pela imunoistoquímica para caspase-3 ativa) do tecido miocárdico. Dentre os 181 cães sintomáticos, 156 (86%) foram positivos para os parasitos pesquisados. Infecções únicas por E. canis foram detectadas em 104 cães (57,5%), por A. platys em 9 cães (5%), por B. canis em 4 (2%) e co- infectados por dois ou mais destes agentes em 38 pacientes (21%). Um cão (0,5%) foi positivo para B. henselae e nenhum foi positivo para E. chaifeensis ou E. ewingii. Na erliquiose canina, 33% dos cães apresentaram elevações na Tnlc (média l DP: 0,37 l 1,18 ng/mL; mediana: 0,05 ng/mL; 3° quartil: 1,36 ng/mL) sendo 9 vezes superior do que em cães normais (média l DP: 0,04 l 0,01 ng/mL; mediana: 0,04 ng/mL; 3° quartil: 0,08 ng/mL; p