Percutaneous application of allogeneic adipose-derived mesenchymal stem cell in dogs submitted to minimally invasive plate osteosynthesis of the tibia

Purpose To evaluate clinical outcome following minimally invasive plate osteosynthesis (MIPO) associated with percutaneous transplantation of allogeneic adipose-derived mesenchymal stem cells (AD-MSC) at the tibial fracture site in dogs. Methods Thirty-six dogs presenting with nonarticular complete tibial fracture were included in this study. All fractures were treated by the same MIPO technique. The animals were divided in group 1 (n = 20) received a percutaneous application of 3 × 106 AD-MSC at the fracture site and group 2 (n = 16) did not receive any adjuvant treatment. Postoperative radiographic examinations were made at 15, 30, 60, 90 and 120 days. Results Fifty-eight percent of the patients were classified as skeletally immature. The median weight of the animals was 18.8 kg. The mean radiographic union time differed statistically between the AD-MSC group (28.5 days) and the control group (70.3 days). Sixty percent of dogs in group 1 and 56.25% of the group 2 were considered immature. Conclusions The use of allogeneic AD-MSC cell therapy and MIPO is a safe, viable and effective technique for promoting bone healing in nonarticular tibial fractures in dogs.(AU)

Caprine demineralized bone matrix (DBMc) in the repair of non-critical bone defects in rabbit tibias. A new bone xenograft

Purpose To evaluate the use of demineralized bone matrix of caprine origin in experimental bone defects of the tibia in New Zealand rabbits. Methods Fragments of the tibia diaphysis were collected aseptically from clinically healthy goats. The bones were sectioned into 1 cm fragments and stored at -20°C for subsequent hydrochloric acid (HCL) demineralization. A 70 mg portion of DBMc was used to fill the experimental bone defects. Twenty-four female adult New Zealand rabbits were divided into 2 groups: the MG (matrix group, left tibia) and CG (control group, right tibia). Additionally, they were separated into 4 groups with 6 animals, according to the period of analysis (15, 30, 60 and 90 days postoperatively). Using microCT, volumetric parameters were evaluated: bone volume, relationship between bone volume and total volume, bone surface area, relationship between bone surface area and total volume, number of trabeculae, trabecular thickness and trabecular separation. Results There was a statistically significant difference (P 0.05) between groups considering bone volume (BV) and bone:total volume (BV/TV), on 15, 30 and 90 days postoperatively. Control group showed a statistically significant superiority (P < 0.05) considering the mean of the variables bone surface (BS), number of trabeculae (Tb.N) and between bone surface and total volume (BS/TV) at 15 and 90 days. Conclusions Caprine demineralized bone matrix was safe and tolerable. No signs of material rejection were seen macroscopically. It is an alternative for the treatment of bone defects when autologous graft is not available or in insufficient quantities.(AU)

Using allogeneic cortical graft preserved in glycerin as spacer in the advancement of tibial tuberosity in 34 dogs / Uso de enxerto cortical alogênico preservado em glicerina como espaçador no avanço da tuberosidade tibial em 34 cães

Cranial cruciate ligament is the main responsible for knee stability by preventing cranial tibial displacement regarding the femur. Deficiency in this ligament (CCLD) may cause subluxation of the tibia and dysfunction of the pelvic member due to overloading. Tibial osteotomies are among the more current surgical techniques for treating CCLD in dogs and they proportionate the dynamic stability by means of modifying bone geometry and the distribution of forces acting on the articulation. The objective of this work is to describe the use of the allogeneic cortical bone graft conserved in glycerin as a spacer on the tibial tuberosity advancement (TTA) for treating the CCLD. In order to do that, 34 dogs submitted to TTA surgery correction were evaluated, being 23 males (67.35%) and 11 females (32.35%). Surgical procedures happened from May 2011 to October 2015. Regarding the surgical procedure after osteotomy of the tibial tuberosity, a disk of allogeneic cortical disk, sawn wedge-hapsed, conserved in glycerin, proportions of 2x1mm was applied as spacer, enabling TTA. Advancements from 3 to 12 mm were executed, depending on the need of the patient. For animals with patella dislocation, trochleoplasty and TTA were executed in order to correct the deviation. The mean ± SD age of animals was 6.67±3.58 and weight was 15.16±12.97 kg. Mongrel dogs, Poodles and Yorkshire terriers were the most affected ones. From the 36 evaluated knees, 11 (30.56%) were associated with some traumatic process and in 25 (69.44%) there was no relation with previous trauma. From those wounds, 20 (55.56%) happened in the right limb and 16 (44.44%) in the left limb and two animals had CCLD bilaterally. Animals had continuous support, discreet drawer movement and negative tibial compression 15 days after surgery. At 30 days, 26 cases (72.22%) had firm support (FS); at 45 days, 24 cases (66 test at 7 and 67%) had FS and eight cases (22.22%) without claudication (WC). During subsequent radiographic evaluations the progressive incorporation of the graft and osteotomy union were observed. In this study, most of the diagnosed CCLD occurred in males diverging from results obtained by other authors that found greater frequency in females. Support without claudication it was observed in most of the cases of implants at 60 days. We concluded that the conserved allogeneic cortical bone graft was able to promote bone union in TTA of dogs with CCLD. None of the animals had signs of contamination, infection of the surgical wound or rejection related with the presence of the graft, demonstrated by the complete graft-bone incorporation observed early at 45 days in some animals. The glycerin was a good conservation medium for those fragments intended for grafting because, besides being of low cost, it kept bone fragments free of contamination, reducing antigenicity and preserving the functions of osteoinduction and osteoconduction. The possibility of molding the graft to the animal need is a characteristic favorable to executing the modified technique that could be molded according to the size of the animal, allowing perfect adaptation to the osteotomized local in different breeds. Intercurrences commonly observed in TTA with patellar dislocation, meniscal lesions, tibial crest fracture and displacement were not found in the animals of this study, probably due to the better distribution of forces between the pass screw in TT and the TTA plate confirming that it has good adaptation to the technique conferring to the modified TTA advantages regarding the conventional TTA.(AU)

O ligamento cruzado cranial é o principal responsável pela estabilidade do joelho, impedindo o deslocamento da tíbia cranial em relação ao fêmur. A deficiência neste ligamento (CCLD) pode causar subluxação da tíbia e disfunção do membro pélvico devido à sobrecarga. As osteotomias tibiais estão entre as técnicas cirúrgicas mais atuais para o tratamento de CCLD em cães e proporcionam a estabilidade dinâmica por meio da modificação da geometria óssea da distribuição das forças que atuam sobre a articulação. O objetivo desse estudo é descrever o uso do enxerto ósseo cortical alogênico conservado em glicerina como espaçador no avanço da tuberosidade tibial (TTA) para o tratamento do CCLD. Para isso, 34 cães submetidos à cirurgia de TTA foram avaliados, sendo 23 machos (67,35%) e 11 fêmeas (32,35%). Os procedimentos curúrgicos aconteceram entre maio de 2011 e outubro de 2015. Com relação ao procedimento cirúrgico após a osteotomia da tuberosidade tibial, um disco alogênico cortical, em forma de cunha serrada, conservado em glicerina com proporções de 2 x 1mm foi aplicado como espaçador possibilitando a TTA. Avanços de 3 a 12mm foram executados, dependendo da necessidade do paciente. Para animais com luxação da patela, realizou-se a trocleoplastia e a TTA para a correção do desvio. A idade média dos animais foi de 6,67±3,58 anos e pesos médios de 15,16±12,97kg. Cães sem raça definida, Poodles e Yorkshire Terriers foram os mais afetados. Dos 36 joelhos avaliados, 11 (30,56%) foram associados a algum processo traumático e em 25 (69,44%) não havia nenhuma relação com um trauma prévio. Dos ferimentos, 20 (55,56%) aconteceram no membro direito e 16 (44,44%) no esquerdo, sendo que dois animais apresentavam CCLD bilateralmente. Os animais tiveram suporte contínuo, discreto movimento de gaveta e compressão tibial negativa 15 dias após a cirurgia. Aos 30 dias, 26 casos tinham suporte firme (FS); aos 45 dias, 24 casos tinham FS e oito casos sem claudicação (WC). Durante avaliações radiográficas subsequentes, observou-se a incorporação progressiva da união do enxerto e da osteotomia. Neste estudo, a maior parte do CCLD diagnosticado ocorreu em machos, divergindo dos resultados obtidos por outros autores que encontraram maior frequência em fêmeas. Suporte sem claudicação foi observado na maioria dos casos de implantes aos 60 dias. Foi concluído que o enxerto ósseo cortical alogênico conservado foi capaz de promover a união óssea na TTA de cães com CCLD. Nenhum dos animais apresentou sinais de contaminação, infecção da ferida cirúrgica ou rejeição relacionada à presença do enxerto, demonstrada pela incorporação completa do enxerto ósseo observada precocemente aos 45 dias em alguns animais. A glicerina foi um bom meio de conservação para os fragmentos destinados à enxertia porque, além do menor custo, manteve os fragmentos ósseos livres de contaminação, reduzindo a antigenicidade e preservando as funções de osteoindução e osteocondução. A possibilidade de moldagem do enxerto à necessidade do animal é uma característica favorável à execução da técnica modificada que pode ser moldada de acordo com o tamanho do animal, possibilitando perfeita adaptação ao local osteotomizado em diferentes raças. Intercorrências comumente observadas na TTA com luxação patelar, lesões meniscais, fratura da crista tibial e deslocamento não foram encontradas nos animais deste estudo, provavelmente devido à melhor distribuição de forças entre a passagem do parafuso no TT e a placa do TTA, confirmando que tem boa adaptação à técnica conferindo às vantagens da TTA modificada em relação à TTA convencional.(AU)

Using allogeneic cortical graft preserved in glycerin as spacer in the advancement of tibial tuberosity in 34 dogs / Uso de enxerto cortical alogênico preservado em glicerina como espaçador no avanço da tuberosidade tibial em 34 cães

Cranial cruciate ligament is the main responsible for knee stability by preventing cranial tibial displacement regarding the femur. Deficiency in this ligament (CCLD) may cause subluxation of the tibia and dysfunction of the pelvic member due to overloading. Tibial osteotomies are among the more current surgical techniques for treating CCLD in dogs and they proportionate the dynamic stability by means of modifying bone geometry and the distribution of forces acting on the articulation. The objective of this work is to describe the use of the allogeneic cortical bone graft conserved in glycerin as a spacer on the tibial tuberosity advancement (TTA) for treating the CCLD. In order to do that, 34 dogs submitted to TTA surgery correction were evaluated, being 23 males (67.35%) and 11 females (32.35%). Surgical procedures happened from May 2011 to October 2015. Regarding the surgical procedure after osteotomy of the tibial tuberosity, a disk of allogeneic cortical disk, sawn wedge-hapsed, conserved in glycerin, proportions of 2x1mm was applied as spacer, enabling TTA. Advancements from 3 to 12 mm were executed, depending on the need of the patient. For animals with patella dislocation, trochleoplasty and TTA were executed in order to correct the deviation. The mean ± SD age of animals was 6.67±3.58 and weight was 15.16±12.97 kg. Mongrel dogs, Poodles and Yorkshire terriers were the most affected ones. From the 36 evaluated knees, 11 (30.56%) were associated with some traumatic process and in 25 (69.44%) there was no relation with previous trauma. From those wounds, 20 (55.56%) happened in the right limb and 16 (44.44%) in the left limb and two animals had CCLD bilaterally. Animals had continuous support, discreet drawer movement and negative tibial compression 15 days after surgery. At 30 days, 26 cases (72.22%) had firm support (FS); at 45 days, 24 cases (66 test at 7 and 67%) had FS and eight cases (22.22%) without claudication (WC).(AU)

O ligamento cruzado cranial é o principal responsável pela estabilidade do joelho, impedindo o deslocamento da tíbia cranial em relação ao fêmur. A deficiência neste ligamento (CCLD) pode causar subluxação da tíbia e disfunção do membro pélvico devido à sobrecarga. As osteotomias tibiais estão entre as técnicas cirúrgicas mais atuais para o tratamento de CCLD em cães e proporcionam a estabilidade dinâmica por meio da modificação da geometria óssea da distribuição das forças que atuam sobre a articulação. O objetivo desse estudo é descrever o uso do enxerto ósseo cortical alogênico conservado em glicerina como espaçador no avanço da tuberosidade tibial (TTA) para o tratamento do CCLD. Para isso, 34 cães submetidos à cirurgia de TTA foram avaliados, sendo 23 machos (67,35%) e 11 fêmeas (32,35%). Os procedimentos curúrgicos aconteceram entre maio de 2011 e outubro de 2015. Com relação ao procedimento cirúrgico após a osteotomia da tuberosidade tibial, um disco alogênico cortical, em forma de cunha serrada, conservado em glicerina com proporções de 2 x 1mm foi aplicado como espaçador possibilitando a TTA. Avanços de 3 a 12mm foram executados, dependendo da necessidade do paciente. Para animais com luxação da patela, realizou-se a trocleoplastia e a TTA para a correção do desvio. A idade média dos animais foi de 6,67±3,58 anos e pesos médios de 15,16±12,97kg. Cães sem raça definida, Poodles e Yorkshire Terriers foram os mais afetados. Dos 36 joelhos avaliados, 11 (30,56%) foram associados a algum processo traumático e em 25 (69,44%) não havia nenhuma relação com um trauma prévio. Dos ferimentos, 20 (55,56%) aconteceram no membro direito e 16 (44,44%) no esquerdo, sendo que dois animais apresentavam CCLD bilateralmente. Os animais tiveram suporte contínuo, discreto movimento de gaveta e compressão tibial negativa 15 dias após a cirurgia. Aos 30 dias, 26 casos tinham suporte firme (FS); aos 45 dias, 24 casos tinham FS e oito casos sem claudicação (WC).(AU)

Effects of local alendronate administration on bone defect healing. Histomorphometric and radiological evaluation in a rabbit model

Purpose: To performed a histomorphometric and radiological study to evaluate the effects of alendronate sodium administered locally in mandibular bone defects created in rabbits. Methods: Two circular defects 5 mm in diameter were created bilaterally in the mandibular corpus of 20 New Zealand rabbits (i.e., four defects per animal). Each defect received one of four treatments: no treatment (EC group), alendronate irrigation (AL group), autogenous bone grafting (AG group), or alendronate irrigation with autogenous bone grafting (AL+AG group). Histomorphometric and radiological assessments were conducted at 4 and 8 weeks after surgery. Results: Between-group comparisons of the new bone area, the value of the AL+AG group was significantly lower thanthe remaining three groups at 4 weeks postoperatively. In all groups, the new bone area was significantly larger at 8 weeks than at 4 weeks. The residual graft area at 4 and 8 weeks was significantly higher in the AL+AG group than in the AG group, although it was significantly smaller at 8 weeks than at 4 weeks in both these groups. Conclusion: The use of alendronate sodium in conjunction with autogenous bone grafting improves the osteoconductive properties of the graft, enhances graft retention in the defect, and improves ossification.(AU)

Aspectos radiográficos do sulco intertroclear de coelhos submetidos ao enxerto osteocondral alógeno associado à terapia com células mononucleares autógenas e dexametasona / Radiographic appearance of intertrochlear groove of rabbits submitted to osteochondral graft allographs associated to the therapy with mononuclear cell autographs and dexamethasone / Aspectos radiológicos de la ranura intertroclear de conejos sometidos a injerto osteocondral alógeno asociado a la terapia con células mononucleares autógenas y dexametasona

Vinte e quatro coelhos adultos foram separados em dois grupos (n=12) - controle (GI) e tratado (GII) e submetidos ao enxerto osteocondral alógeno para reparo ósseo e cartilaginoso do sulco troclear, conservado em glicerina a 98%. Os animais do GII receberam ainda injeção intra-articular de 2,0 x 106 células mononucleares autólogas e dexametasona intramuscular. Foram realizadas avalições radiográficas aos 45 e 90 dias de pós-operatório. Nos coelhos do grupo tratado e controle não foi notado sinais de reação características de enxerto-contra-hospedeiro e aos 45 e 90 dias de pós-operatório ocorre osteólise devido aos micromovimentos na interface implante-osso e pressão efetiva nos espaços articular. A implantação de enxerto alógeno conservado em glicerina, associado à inoculação de células mononucleares autógenas e dexametasona intramuscular promove intensa neoformação óssea e com bom reparo do defeito ósseo em coelhos.(AU)

Twenty-four adult rabbits were divided two groups (n = 12), control (GI) and treated (GII), and submitted to allogenic osteochondral graft for bone and cartilage repair of the trochlear groove, preserved in 98% glycerin. The GII yet received intra-articular injection of 2,0 x 106 autologous mononuclear cells and intramuscular dexamethasone. Radiographs at 45 and 90 days postoperatively avaliations were performed. In rabbits treated and control group was not skimmed signals characteristic reaction of graft-versus-host and at 45 and 90 days postoperatively osteolysis occurs due to micro motion at the implant-bone interface and effective pressure in the joint spaces. The implantation of allograft preserved in glycerol, associated with inoculation of autologous mononuclear cells and intramuscular dexamethasone intense bone and good repair of bone defects in rabbits neogenesis occurs.(AU)

Veinticuatro conejos adultos fueron divididos en dos grupos (n = 12) - control (GI) y tratado (GII) y sometidos a injerto osteocondral alógeno para reparo óseo y cartilaginoso de ranura tróclea, conservado en glicerina a 98%. Los animales del GII recibieron inyección interarticular de 2,0 x 106 células mononucleares autólogas y dexametasona intramuscular. Se realizó evaluaciones radiográficas a los 45 y 90 días posoperatorio. En los conejos tratados y del grupo control no se ha notado señales de reacciones características de injerto contra hospedero, y a los 45 y 90 días de posoperatorio ocurrió osteólisis debido a los micro movimientos en la interfaz, implante óseo y presión efectiva en los espacios articular. La implantación de injerto alógeno conservado en glicerina, asociado a la inoculación de células mononucleares autógenas y dexametasona intramuscular, promueve intensa neo formación ósea y con buen reparo del defecto óseo en conejos.(AU)

Aspectos radiográficos do sulco intertroclear de coelhos submetidos ao enxerto osteocondral alógeno associado à terapia com células mononucleares autógenas e dexametasona / Radiographic appearance of intertrochlear groove of rabbits submitted to osteochondral graft allographs associated to the therapy with mononuclear cell autographs and dexamethasone / Aspectos radiológicos de la ranura intertroclear de conejos sometidos a injerto osteocondral alógeno asociado a la terapia con células mononucleares autógenas y dexametasona

Vinte e quatro coelhos adultos foram separados em dois grupos (n=12) - controle (GI) e tratado (GII) e submetidos ao enxerto osteocondral alógeno para reparo ósseo e cartilaginoso do sulco troclear, conservado em glicerina a 98%. Os animais do GII receberam ainda injeção intra-articular de 2,0 x 106 células mononucleares autólogas e dexametasona intramuscular. Foram realizadas avalições radiográficas aos 45 e 90 dias de pós-operatório. Nos coelhos do grupo tratado e controle não foi notado sinais de reação características de enxerto-contra-hospedeiro e aos 45 e 90 dias de pós-operatório ocorre osteólise devido aos micromovimentos na interface implante-osso e pressão efetiva nos espaços articular. A implantação de enxerto alógeno conservado em glicerina, associado à inoculação de células mononucleares autógenas e dexametasona intramuscular promove intensa neoformação óssea e com bom reparo do defeito ósseo em coelhos.

Twenty-four adult rabbits were divided two groups (n = 12), control (GI) and treated (GII), and submitted to allogenic osteochondral graft for bone and cartilage repair of the trochlear groove, preserved in 98% glycerin. The GII yet received intra-articular injection of 2,0 x 106 autologous mononuclear cells and intramuscular dexamethasone. Radiographs at 45 and 90 days postoperatively avaliations were performed. In rabbits treated and control group was not skimmed signals characteristic reaction of graft-versus-host and at 45 and 90 days postoperatively osteolysis occurs due to micro motion at the implant-bone interface and effective pressure in the joint spaces. The implantation of allograft preserved in glycerol, associated with inoculation of autologous mononuclear cells and intramuscular dexamethasone intense bone and good repair of bone defects in rabbits neogenesis occurs.

Veinticuatro conejos adultos fueron divididos en dos grupos (n = 12) - control (GI) y tratado (GII) y sometidos a injerto osteocondral alógeno para reparo óseo y cartilaginoso de ranura tróclea, conservado en glicerina a 98%. Los animales del GII recibieron inyección interarticular de 2,0 x 106 células mononucleares autólogas y dexametasona intramuscular. Se realizó evaluaciones radiográficas a los 45 y 90 días posoperatorio. En los conejos tratados y del grupo control no se ha notado señales de reacciones características de injerto contra hospedero, y a los 45 y 90 días de posoperatorio ocurrió osteólisis debido a los micro movimientos en la interfaz, implante óseo y presión efectiva en los espacios articular. La implantación de injerto alógeno conservado en glicerina, asociado a la inoculación de células mononucleares autógenas y dexametasona intramuscular, promueve intensa neo formación ósea y con buen reparo del defecto óseo en conejos.

Estudo biomecânico comparativo da resistência de segmentos ósseos de rádios de cães autoclavados ou desvitalizados em nitrogênio líquido / Biomechanical comparative study of the strength of bone segments from the radius of dogs autoclaved and devitalized in liquid nitrogen

O presente estudo comparou, por meio do ensaio de flexão em quatro pontos, a resistência de segmentos de rádios de cães autoclavados e desvitalizados em nitrogênio líquido. Avaliaram-se 40 rádios, que foram divididos em quatro grupos: grupo autoclave (GA), grupo controle autoclave (GCA), grupo nitrogênio (GN) e grupo controle nitrogênio (GCN). Os corpos de prova dos grupos GCA e GCN pertenciam ao lado contralateral dos grupos GA e GN, respectivamente. Os ossos foram autoclavados a 121°C, por 20min a 2atm. A desvitalização em nitrogênio foi realizada por meio da imersão em nitrogênio líquido, por 20min, seguida de descongelamento à temperatura ambiente, sendo finalizada por imersão em solução de NaCL a 0,9%, por mais 15min. Após os testes biomecânicos, foram comparadas as variáveis força máxima, rigidez, altura máxima à secção transversa do corpo de prova, deslocamento do baricentro em relação ao eixo x, flecha, tensão-tração, tensão-compressão e tensão máxima. Não foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos GN e GCN. Foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos GA e GCA somente na comparação da variável força máxima. A análise das variáveis tensão-tração, tensão-compressão e tensão máxima evidenciou diferenças estatisticamente significantes entre os grupos GA e GN, sendo os valores maiores para o grupo GA. Também foi realizada comparação entre os deltas (GN menos GCN e GA menos GCA), em que não foram observadas diferenças estatísticas.(AU)

The study compared through the four points bending test, the strength of bone segments autoclaved and devitalized in liquid nitrogen radius segments. 40 radius were used, collected and divided into 4 groups, as follows: Autoclave Group (GA), Control Autoclave Group (GCA), Nitrogen Group (NG) and Control Nitrogen Group (GCN). Bone segments from groups GCA and GCN were contralateral to GA and NG. The segments were autoclaved at 121ºC and 2 atm for 20 minutes. Nitrogen devitalization of the bone segments was obtained by 20 minutes immersion, followed by thawing at room temperature and 15 minutes immersion in 0.9% NaCL solution. After biomechanical tests the variables compared were maximum strength, stiffness, maximum hight trough the transverse section of the bone segment, centers of mass dislocation in relation to x axe, arrow, stress-tension, stress-compression and maximum stress. No statistically significant differences between the GN and GCN groups were found. Statistically significant differences were found between GA and GCA groups only in the comparison of the maximum force variable. The analysis of variable stress-tension, stress-compression and maximum stress showed statistically significant differences between the GA and GN groups, with higher values for the GA group. Comparison of the deltas (GN least GCN and GA least GCA) where no statistical differences were observed was also performed.(AU)

Estudo biomecânico comparativo da resistência de segmentos ósseos de rádios de cães autoclavados ou desvitalizados em nitrogênio líquido / Biomechanical comparative study of the strength of bone segments from the radius of dogs autoclaved and devitalized in liquid nitrogen

O presente estudo comparou, por meio do ensaio de flexão em quatro pontos, a resistência de segmentos de rádios de cães autoclavados e desvitalizados em nitrogênio líquido. Avaliaram-se 40 rádios, que foram divididos em quatro grupos: grupo autoclave (GA), grupo controle autoclave (GCA), grupo nitrogênio (GN) e grupo controle nitrogênio (GCN). Os corpos de prova dos grupos GCA e GCN pertenciam ao lado contralateral dos grupos GA e GN, respectivamente. Os ossos foram autoclavados a 121°C, por 20min a 2atm. A desvitalização em nitrogênio foi realizada por meio da imersão em nitrogênio líquido, por 20min, seguida de descongelamento à temperatura ambiente, sendo finalizada por imersão em solução de NaCL a 0,9%, por mais 15min. Após os testes biomecânicos, foram comparadas as variáveis força máxima, rigidez, altura máxima à secção transversa do corpo de prova, deslocamento do baricentro em relação ao eixo x, flecha, tensão-tração, tensão-compressão e tensão máxima. Não foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos GN e GCN. Foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos GA e GCA somente na comparação da variável força máxima. A análise das variáveis tensão-tração, tensão-compressão e tensão máxima evidenciou diferenças estatisticamente significantes entre os grupos GA e GN, sendo os valores maiores para o grupo GA. Também foi realizada comparação entre os deltas (GN menos GCN e GA menos GCA), em que não foram observadas diferenças estatísticas.(AU)

The study compared through the four points bending test, the strength of bone segments autoclaved and devitalized in liquid nitrogen radius segments. 40 radius were used, collected and divided into 4 groups, as follows: Autoclave Group (GA), Control Autoclave Group (GCA), Nitrogen Group (NG) and Control Nitrogen Group (GCN). Bone segments from groups GCA and GCN were contralateral to GA and NG. The segments were autoclaved at 121ºC and 2 atm for 20 minutes. Nitrogen devitalization of the bone segments was obtained by 20 minutes immersion, followed by thawing at room temperature and 15 minutes immersion in 0.9% NaCL solution. After biomechanical tests the variables compared were maximum strength, stiffness, maximum hight trough the transverse section of the bone segment, centers of mass dislocation in relation to x axe, arrow, stress-tension, stress-compression and maximum stress. No statistically significant differences between the GN and GCN groups were found. Statistically significant differences were found between GA and GCA groups only in the comparison of the maximum force variable. The analysis of variable stress-tension, stress-compression and maximum stress showed statistically significant differences between the GA and GN groups, with higher values for the GA group. Comparison of the deltas (GN least GCN and GA least GCA) where no statistical differences were observed was also performed.(AU)

Penile reconstruction using mesenchymal stem cells

To compare the reconstruction of corpus cavernosum segments when seeded with mesenchymal stem cells and when stem cells are infused intravenously.METHODS: Sixteen New Zealand rabbits were submitted to reconstruction of the corpus cavernosum and distributed in Group A - decellularized matrices, Group B - decellularized matrices seeded with mesenchymal stem cells Group C - decellularized matrices submitted to intravenous infusion of mesenchymal stem cells. The mesenchymal stem cells were obtained by bone marrow aspiration. The venous filling aspect of the distal end of the corpus cavernosum was evaluated and the specimens were submitted to histological analisis and to immunohistochemistry. Cavernosometry was done in one animal of each groupRESULTS: Three animals on B and three animals on C presented full filling of distal end of the corpus cavernosum. No animals in A presented filling of the distal end of corpus cavernosum. At cavernosometry the animal on B attained 50 cmH2O, on C 110 cmH2O and on A 20 cmH2O. Trabeculae forming cavernous sinuses were found in groups B and C.CONCLUSION: The reconstruction of corpus cavernosum using descellularized matrices and mesenchymal stem cells, either by intravenous injection or directly seeded is possible, with growth of corpus cavernosum-like tissue.(AU)

Experimental ovarian transplantation on stomach for bone repair in ovariohysterectomized rabbits

PURPOSE: To evaluate the bone repair process in ovariohysterectomized rabbit submitted to an ovarian transplant to stomach that may supplying some quantity of estrogen occurs to improve bone healing. METHODS: In 20 female rabbits three holes of 1, 2 and 3mm diameter in tibial shaft were made and after that all animals received OHE through a ventral incision and they were randomly divided into two groups of ten rabbits each. In group one, animals received one of their self-ovaries that transplanted on serosal layer of stomach and group two did not receive treatment. Animals were kept during bone healing for a period of 45 days and radiological, biochemical, biomechanical and histopathological evaluation. RESULTS: The tibial defects in group one healed completely after 45 days and had more callous than second group. There is significant difference between two groups after operation in 21, 28 and 35 days about estrogen, progesterone and phosphatase Alkaline. The maximum forces in group one, were significantly higher than that for the group two. CONCLUSION:Ovarian transplantation prevents the effects of ovariohysterectomized on bone healing of rabbit tibia, suggesting that unilateral transplanted ovaries can substitute for the action of ovaries on the skeleton in ovariohysterectomized animals.(AU)

Miniplate fixation for the repair of segmental mandibular defects filled with autogenous bone in cats / Uso de miniplacas na fixação de mandíbulas de gatos com defeitos segmentares preenchidos com osso autógeno

PURPOSE: To evaluate the use of maxillofacial miniplate 1.5 in the repair of segmental mandibular defects filled with autogenous bone in cats. METHODS: Twelve adult cats were divided into two groups. A segmental defect of 4mm was created in one of the hemimandibles and filled with autogenous iliac crest bone graft. The operated hemimandible was fixed with a 1.5mm titanium miniplate. In group 1 (n=6), the defect was performed in the body of the mandible, behind the 1st molar. In group 2 (n=6), the defect was performed between the 4nd premolar and 1st molar, with extraction of the 1st molar. Oral alimentation was reinitiated 24 hours after surgery. Cats were euthanized at 20 weeks postoperative. RESULTS: Incorporation of the graft was suggested by the radiographs taken 20 weeks after surgery. Macroscopic examination confirmed alignment and bone union of operated hemimandibles. Histological examination showed formation of woven bone in rostral and caudal mandible/graft interfaces. The percentage of bone tissue at these areas was measured by the histometry. There was no statistically significant difference between the values of group 1(64.48 ± 4.51) and group 2 (71.69 ± 14.47) (Mann-Whitney's test p= 0.294). CONCLUSION: The use of miniplate 1.5 for the fixation of mandibular defects filled with autogenous bone in cats provided the main goals in the treatment of mandibular fractures: bone union, normal dental occlusion and immediate return to oral alimentation.(AU)

OBJETIVO: Avaliar o uso de miniplacas na fixação de mandíbulas de gatos com defeitos segmentares preenchidos com osso autógeno. MÉTODOS: Foram utilizados 12 gatos adultos divididos em dois grupos de seis animais cada. Em uma das hemimandíbulas foi criado um defeito segmentar de 4mm, preenchido com enxerto autógeno do osso ilíaco. A hemimandíbula operada foi fixada com uma miniplaca 1.5 de titânio. No grupo 1, o defeito foi realizado caudalmente ao 1º molar e no grupo 2, entre o 4º pré-molar e 1º molar, com extração do 1º molar. A alimentação oral foi reiniciada 24 horas após a cirurgia. Os animais foram submetidos à eutanásia 20 semanas após a cirurgia. RESULTADOS: As radiografias realizadas 20 semanas após a cirurgia sugeriram a incorporação do enxerto. O exame macroscópico confirmou redução cirúrgica satisfatória e união óssea das hemimandibulas operadas. Os exames histológicos demonstraram a presença de tecido ósseo esponjoso nos locais de transição do enxerto com o osso da mandíbula. Os exames histométricos demonstraram que não houve diferença estatisticamente significante nos valores observados de porcentagem de tecido ósseo nas áreas de incorporação do enxerto das hemimandíbulas operadas dos gatos do grupo 1 (64,48 ± 4,51) e grupo 2 (71,69 ± 14,47) (Teste de Mann-Whitney p=0,294). CONCLUSÃO: Os resultados deste experimento permitiram concluir que o uso de miniplacas na fixação de mandíbulas de gatos com defeitos segmentares preenchidos com osso autógeno garante os principais objetivos no tratamento de fraturas da mandíbula: união óssea, oclusão dentária normal e alimentação oral imediata.(AU)

Obtenção de células mononucleares da medula óssea pela punção do tubérculo umeral de coelhos / Acquirement of bone marrow mononuclear cells by puncture of the humerus tubercle of rabbits

As células-tronco mesenquimais têm sido isoladas da medula óssea e utilizadas na reparação e regeneração de defeitos osteocondrais. O objetivo desse estudo foi avaliar eficiência da técnica de colheita da medula óssea em 12 coelhos adultos, machos, da raça Nova Zelândia, com peso entre 3,0 kg a 4,5 kg. Após flexão da articulação escapulo-umeral, foi inserida no tubérculo umeral uma agulha de biópsia de Rosenthal heparinizada, sendo aspirados 2,0 mL de medula óssea. No isolamento pelo gradiente de densidade Ficoll-paque, obteve-se um rendimento médio de 6,25 x 10° células mononucleares/mL. A técnica de colheita de medula óssea por punção do tubérculo umeral demonstrou ser eficaz e de fácil execução, devido ao alto rendimento de células mononucleares isoladas das amostras.

Bone marrow derived-mesenchymal stem cells have been isolated and used for osteochondral defects regeneration and repair. The aim of this study was evaluate the efficiency of bone marrow harvest technique using twelve adult male New Zealand rabbits, with weight between 3.0 kg to 4.5 kg. After shoulder joint flexion, a heparinized Rosenthal biopsy needle was inserted through the humeral tubercle and further aspiration of 2.0 mL bone marrow. In the isolation with Ficoll-paque gradient density, was achieved a mean yield of 6.25 x 10° mononuclear cells per milliliter. The bone marrow harvest technique by puncture of the humerus tubercle was easily accomplished and effective, due to high yield of isolated mononuclear cells of samples.

Aspecto radiológico de heteroenxerto ósseo cortical fragmentado na reparação de falhas ósseas em coelhos / Radiologic aspects of fragmented cortical bone heterograft in bone defect repair in rabbits

Foi realizada falha segmentar de 6mm na região metafisária da tíbia de 12 coelhos,sendo utilizado enxerto ósseo cotical heterólogo fragmentado conservado em glicerina (98 por cento), para a sua reconstrução. O enxerto foi depositado no leito receptor e a integração deste foi avaliada radiologicamente por 20, 40 e 60 dias. Houve incorporação gradativa, em relação ao tempo, do enxerto no leito receptor, em 100 por cento dos casos. O uso de heteroenxerto ósseo cortical fragmentado e conservado em glicerina a 98 por cento promove a reparação das falhas ósseas, sem sinais de infecção ou rejeição, podendo ser utilizado como substituto ósseo na medicina veterinária [...](AU)

It was realized a 6mm of segmental defect at the metaphyseal region of the tibia of 12 rabbits and fragmented heterolog cortical bone graft conserved in glycerin (98 percent) was used to the reconstruction. The graft was placed in the receptor bed and its integration was evaluated by radiological exam after 20, 40, and 60 days. There was gradative graft incorporation, by the time, in the receptor bed, in 100 percent of the cases. The use of fragmented cortical bone heterograf conserved in glycerin 98 percent promotes bone defect reparation without signs of infection and can be used like osseous substitute in the veterinary medicine [...](AU)

Proteínas morfogenéticas ósseas associadas a osso esponjoso autógeno na reparação de falhas experimentais na calota craniana de coelhos (Oryctolagus cuniculus) / Bone morphogenetic proteins associated with autogenous bone graft in the reparation of calvarial experimental defects of rabbits (Oryctolagus cuniculus)

Foi avaliada a reparação óssea após implantação de proteínas morfogenéticas ósseas (BMP) em diferentes concentrações e períodos de observação, carreadas por auto-enxerto ósseo esponjoso (EOE), em falhas ósseas, produzidas na região fronto-parietal do crânio de 20 coelhas. A falha I não foi preenchida, a II foi completamente preenchida com 3mg de EOE e as falhas III, IV, V e VI foram preenchidas com EOE associado a 0,5; 1; 2 e 5mg de BMP, respectivamente. Nas avaliações mesoscópicas, post mortem, verificou-se que, independentemente do período de tratamento, o preenchimento ósseo iniciou-se a partir das bordas para o centro e do fundo para a superfície das falhas. Na falha I manifestou-se o menor preenchimento ósseo quando comparada com as demais falhas, em todos os períodos, e nas que receberam 2mg de BMP exibiu-se a melhor cobertura óssea. Microscopicamente, verificou-se que, aos sete dias, o preenchimento ósseo iniciou-se a partir das bordas e do fundo da lesão, com mobilização e diferenciação de células provenientes do periósteo e das meninges, respectivamente e, nas avaliações subseqüentes, a atividade osteoblástica originou-se, também, de "ilhas de ossificação" semelhantes a centros de ossificação, localizadas no centro da falha. A formação trabecular aumentou, proporcionalmente, com a concentração utilizada de BMP, e a aposição e organização óssea aumentaram com o tempo de observação. Verificou-se também a presença de tecido cartilaginoso. A BMP associada ao EOE contribuiu para a formação de novo tecido ósseo, promovendo maior mobilização, diferenciação e organização celular, e abreviou o tempo de formação óssea, sugerindo processo de ossificação endocondral. Os melhores resultados foram observados com a associação de 2mg de BMP a 3mg de enxerto, e a adição de BMP, mesmo em menor quantidade, determinou precocidade de formação óssea. A maior quantidade de BMP não determinou maior preenchimento ósseo(AU)

Aspects of bone repair were evaluated after implantation of bone morphogenetic proteins (BMP) in different concentrations. They were carried by autogenous bone graft in defects created on skulls of 20 adult, young female rabbits, randomizedly divided into five experimental groups and were observed at five times. After exposure of skull bones, six bone defects on the fronto-parietal region of each animal were performed. The defect I was not filled, the II was completed filled with 3mg of autogenous bone graft and the defects III, IV, V, and VI were filled with autogenous bone graft associated with 0.5; 1; 2 and 5mg of BMP, respectively. In the post-mortem mesoscopic evaluations, it was observed that, independently of the treatment period of the defects, the bony filling began from the borders to the center, and from the botton to the surface of the lessions. The bony filling of the defect I was the smallest when compared with the others defects, in all the observation moments. It was also verified that until 2mg the higher the concentration of BMP used, better was the bone cover. Microscopically, it was verified in the first evaluations, on the seventh day, that the bony growth started from the borders and from the bottom of the lesion, with mobilization and differentiation of cells deriving from the periosteum and the meninges, respectively. In the subsequent evaluations, the osteoblastic activity also derived from "ossification islands" to ossification centers, located in the center of the flaw. The trabecular formation increased proportionally with the concentration of BMP used, and the apposition and bony organization increased proportionally with the time of observation. The presence of cartilaginous tissue was verified in all the flaws. In conclusion, the use the higher concentration of BMP did not determinate the better new bone formation. The association of BMP with autogenous bone graft contributed to the formation of new bony...(AU)

Medial meniscus transplantation using cyanoacrylate in rabbits / Transplante de menisco medial utilizando cianoacrilato em coelhos

OBJETIVO: Avaliar macroscópica e histologicamente o transplante meniscal, utilizando-se a cola sintética derivada do ácido cianoacrilato como método de fixação. MÉTODOS: Foram utilizados 20 coelhos, tendo 10 realizado transplante autólogo e 10, homólogo. Para o transplante autólogo, o menisco foi retirado e em seguida transplantado no mesmo animal, sendo fixado com a cola sintética. Para o transplante homólogo o estudo foi dividido em duas etapas: 1- retirada do menisco e manutenção a uma temperatura de 73ºC negativos. 2- Utilização do adesivo cirúrgico derivado do ácido cianoacrilato para reimplantar num coelho diferente 30 dias após o congelamento. RESULTADOS: Devido às complicações foi necessário antecipar as eutanásias para o 15º dia do grupo homólogo e 18º para o grupo autólogo. Macroscopicamente, os joelhos submetidos aos transplantes apresentavam secreções esbranquiçadas desde a incisão cirúrgica até planos profundos. Histologicamente, necrose estava presente em ambos os grupos. A análise estatística mostrou que as complicações leves (p=0,043) e moderadas (p=0,001) surgiram de forma significantemente mais precoce no grupo homólogo, sendo, também, a eutanásia realizada mais precocemente neste grupo (p=0,005). CONCLUSÃO: Os adesivos cirúrgicos sintéticos, derivados do ácido cianoacrilato, provocaram necrose desde a cortical até a medular óssea para ambos os grupos.(AU)

PURPOSE: To evaluate meniscal transplantation using as fixation method a synthetic glue derived from cyanoacrylate acid.METHODS: Twenty rabbits were used, of which 10 for autologous transplantation and 10 for homologous transplantation. For the autologous transplantation the meniscus was removed, and then transplanted in the same animal, using the synthetic glue. For the homologous transplantation, the study was divided into two stages: 1- Removal of the meniscus which was maintained at a temperature of 73ºC. 2- Use of cyanoacrylate acid-derived surgical adhesive for meniscal retransplantation in a different rabbit 30 days after the transplant.RESULTS: Due to complications, euthanasia had to be anticipated to the 15th day in the homologous group and to the 18th day in the autologous group. Macroscopically, knees submitted to transplantation presented whitish secretions from the surgical incision up to deep planes. Necrosis was observed in both groups. Statistical analysis has shown that mild (p=0.043) and moderate (p=0.001) complications emerged in a significantly earlier way in the homologous group, where euthanasia was also performed earlier (p=0,005).CONCLUSION: Synthetic surgical adhesives derived from cyanoacrylate acid promoted cortical to medullary bone necrosis bone in both groups.(AU)