Perfil sanitário de pequenos ruminantes do estado de Sergipe, Brasil / Sanitary profile of small ruminants the state of Sergipe, Brazil

Objetivou-se com essa revisão realizar um levantamento dos dados disponíveis quanto às características das criações de pequenos ruminantes no estado de Sergipe e a frequência sorológica e bacteriológica das principais enfermidades que acometem essas espécies. As coletas de material dos estudos disponíveis ocorreram entre os anos de 2008 e 2014 e demonstraram que a maioria dos rebanhos são da espécie ovina, da raça Santa Inês, criados em sistema semiextensivo, enquanto os caprinos representam uma menor parte sendo, em geral, de mestiços voltados à produção leiteira. Dentre as enfermidades foi observada a ocorrência principalmente de anticorpos contra o T. gondii, N. caninum e Leptispiras e em menor numero contra Lentivirus de Pequenos Ruminantes, B. ovis e Micoplasma. Pesquisas bacteriológicas evidenciaram a presença da linfadenite caseosa cutânea e visceral, além de ocorrência de falhas no manejo de ordenha e secagem dos animais em lactação. Importantes agentes etiológicos estão presentes nos rebanhos Sergipanos sendo necessária a adoção de práticas de manejo sanitários para a manutenção da saúde dos animais.

The objective of this review was to study the available data regarding the characteristics of small ruminant bred in the state of Sergipe and the serological and bacteriological frequency of the main diseases that affect these species. Material collections from the available studies occurred between 2008 and 2014 and showed that the majority of the herds are of the Santa Inês breed, raised in a semiextensive system, whereas the goats represent a smaller part being in general Mestizos for milk production. Among the diseases, the presence of antibodies against T. gondii, N. caninum and Leptispiras was observed, and in a smaller number against Lentivirus of Small Ruminants, B. ovis and Mycoplasma. Bacteriological research evidenced the presence of cutaneous and visceral caseous lymphadenitis, besides occurrence of failures in the management of milking and drying of lactating animals. Important etiological agents are present in the Sergipe herds and it is necessary to adopt sanitary management practices for the maintenance of animal health.

Perfil sanitário de pequenos ruminantes do estado de Sergipe, Brasil / Sanitary profile of small ruminants the state of Sergipe, Brazil

Objetivou-se com essa revisão realizar um levantamento dos dados disponíveis quanto às características das criações de pequenos ruminantes no estado de Sergipe e a frequência sorológica e bacteriológica das principais enfermidades que acometem essas espécies. As coletas de material dos estudos disponíveis ocorreram entre os anos de 2008 e 2014 e demonstraram que a maioria dos rebanhos são da espécie ovina, da raça Santa Inês, criados em sistema semiextensivo, enquanto os caprinos representam uma menor parte sendo, em geral, de mestiços voltados à produção leiteira. Dentre as enfermidades foi observada a ocorrência principalmente de anticorpos contra o T. gondii, N. caninum e Leptispiras e em menor numero contra Lentivirus de Pequenos Ruminantes, B. ovis e Micoplasma. Pesquisas bacteriológicas evidenciaram a presença da linfadenite caseosa cutânea e visceral, além de ocorrência de falhas no manejo de ordenha e secagem dos animais em lactação. Importantes agentes etiológicos estão presentes nos rebanhos Sergipanos sendo necessária a adoção de práticas de manejo sanitários para a manutenção da saúde dos animais.(AU)

The objective of this review was to study the available data regarding the characteristics of small ruminant bred in the state of Sergipe and the serological and bacteriological frequency of the main diseases that affect these species. Material collections from the available studies occurred between 2008 and 2014 and showed that the majority of the herds are of the Santa Inês breed, raised in a semiextensive system, whereas the goats represent a smaller part being in general Mestizos for milk production. Among the diseases, the presence of antibodies against T. gondii, N. caninum and Leptispiras was observed, and in a smaller number against Lentivirus of Small Ruminants, B. ovis and Mycoplasma. Bacteriological research evidenced the presence of cutaneous and visceral caseous lymphadenitis, besides occurrence of failures in the management of milking and drying of lactating animals. Important etiological agents are present in the Sergipe herds and it is necessary to adopt sanitary management practices for the maintenance of animal health.(AU)

SEROSURVEY OF BRUCELLOSIS IN COMMERCIAL GOATS AND CART HORSES

A brucelose bovina tem sido considerada endêmica em países em desenvolvimento causando problemas reprodutivos nesses animais e portanto gerando grandes prejuízos econômicos, principalmente nos países onde o agronegócio se mostra economicamente importante. As autoridades sanitárias têm desenvolvido programas de controle e erradicação da doença a exemplo dos países desenvolvidos onde a doença já está controlada ou erradicada. No entanto, mesmo com todos os esforços a brucelose humana vem sendo apontada como emergente em países em desenvolvimento. O presente trabalho objetiva demonstrar estudos sorológicos de diferentes espécies de brucellas em diferentes espécies animais as quais não têm sido contempladas nos programas sanitários destes países. Nesse sentido, o trabalho foi dividido em três capítulos. O Primeiro, um texto de opinião demonstrando como as autoridades, em diversas esferas do governo, vêm tratando a brucelose no Brasil. O segundo, um estudo sorológico de anticospos anti- Brucella abortus e anti-Brucella ovis em caprinos de diversas propriedades em municípios da Paraíba, onde foi encontrada a prevalência de 4,83%. E finalmente o terceiro, estudo sorológico de anticorpos anti-Brucella abortus em cavalos de carroça em Foz do Iguaçu, Paraná encontrando 1,64% de prevalência.

Bovine brucellosis has been considered endemic in developing countries causing reproductive problems in these animals and thus generating major economic losses, especially in countries where agribusiness is economically important. The health authorities have developed programmes for the control and eradication of the disease in the case of developed countries where the disease is already controlled or eradicated. However, even with all the efforts human brucellosis has been pointed out as emerging in developing countries. The present work aims to demonstrate serological studies of different species of brucellas in different animal species which have not been contemplated in the sanitary programmes of these countries. In this sense, the work was divided into three chapters. The first, a text of opinion demonstrating how the authorities in various spheres of the government have been treating brucellosis in Brazil. The second, a serological study of Anticospos anti-Brucella abortus and Abortus Ovis in goats of several properties in municipalities of Paraíba, where the prevalence of 4.83% was found. And finally the third, serological study of antibodies Brucella abortus in wagon horses in Foz do Iguaçu, Paraná meeting 1.64% of prevalence.

Relato do primeiro caso de orquite e epididimite unilateral ovina causada por Actinobacillus seminis no estado de São Paulo, Brasil / The first isolation of Actinobacillus semnis in ovine Dorper breed with unilateral orchites and epididymitis in the state of São Paulo, Brazil

Relato de caso de isolamento de Actinobacillus seminis em sêmen ovino da raça Dorper localizado em propriedade no estado de São Paulo, com manifestações clínicas iniciais de orquite, epididimite unilateral e queda de fertilidade, apresentando um quadro final de atrofia testicular unilateral. Os resultados das amostras seminais foram negativos para Brucellas sp, Campylobacter sp, Histophilus somni, Mycoplasma sp e Ureaplasma sp.(AU)

Case report of the first isolation of Actinobacillus seminis in ovine semen, from a Dorper ram, in São Paulo State, Brazil. Initial clinical manifestations were orchitis, epididymitis unilateral and low of fertility, finaly there was unilateral testicular atrophy. Microbiological culture of semen was negative for seminal Brucellas sp, Campylobacter sp, Histophilus somni, Mycoplasma sp and Ureaplasma sp.(AU)

Relato do primeiro caso de orquite e epididimite unilateral ovina causada por Actinobacillus seminis no estado de São Paulo, Brasil / The first isolation of Actinobacillus semnis in ovine Dorper breed with unilateral orchites and epididymitis in the state of São Paulo, Brazil

Relato de caso de isolamento de Actinobacillus seminis em sêmen ovino da raça Dorper localizado em propriedade no estado de São Paulo, com manifestações clínicas iniciais de orquite, epididimite unilateral e queda de fertilidade, apresentando um quadro final de atrofia testicular unilateral. Os resultados das amostras seminais foram negativos para Brucellas sp, Campylobacter sp, Histophilus somni, Mycoplasma sp e Ureaplasma sp.

Case report of the first isolation of Actinobacillus seminis in ovine semen, from a Dorper ram, in São Paulo State, Brazil. Initial clinical manifestations were orchitis, epididymitis unilateral and low of fertility, finaly there was unilateral testicular atrophy. Microbiological culture of semen was negative for seminal Brucellas sp, Campylobacter sp, Histophilus somni, Mycoplasma sp and Ureaplasma sp.

Perfil da expressão gênica induzida pela infecção experimental por Brucella ovis em tecidos reprodutivos e linfóides ovinos

Mundialmente a brucelose continua sendo um problema econômico e de saúde pública. A brucelose ovina é reconhecida como a mais importante causa de epididimite, sendo uma das principais causadoras de infertilidade em ovinos. Os mecanismos imunes envolvidos na defesa e eventualmente na persistência e manutenção do agente são desconhecidos. Brucellas spp. geram somente uma resposta inflamatória moderada e os estudos da patogenia da brucelose ovina são escassos. Recentes avanços demonstram que a resposta inflamatória induzida pelas Brucellas spp. representam provavelmente o resultado de uma tentativa de evasão e supressão da resposta imune hospedeira. Utilizando as tecnologias de RT-PCR em tempo real (q) e microarranjos este trabalho avaliou a expressão gênica da resposta imune e inflamatória na brucelose experimental ovina. O estudo apresenta a primeira análise do perfil de expressão gênica de citocinas através de RT-qPCR em tecidos reprodutivos e não reprodutivos de carneiros experimentalmente infectados com cepa de B. ovis PA até 240 dias pós infecção (dpi). O estudo também demonstra a primeira análise geral da expressão gênica por meio de microarranjos em tecidos reprodutivos e pool de linfonodos de carneiros experimentalmente infectados com cepa de B. ovis PA até 240 dpi. Neste trabalho demonstrou a persistência da B. ovis e o perfil inflamatório da resposta imune gerado pela infecção. Com este estudo espera-se aumentar o conhecimento da patogênese da B. ovis em carneiros infectados

Globally, brucellosis remains an economic problem and public health threat. The ovine brucellosis is recognized as the most important cause of epididymitis, one of the main causes of infertility in sheep. The mechanisms involved in immune defense and possibly the persistence and maintenance of the agent are unknown. Brucellas spp. generate only a moderate inflammatory response, and studies of the pathogenesis of ovine brucellosis are scarce. Recent developments have shown that Brucella spp. induces a moderate inflammatory response probably the result of an attempt to escape and to suppress the host immune response. Through real time (q) RT-PCR and microarrays the purpose this study evaluated the gene expression of immune and inflammatory response in experimental ovine brucellosis. The study demonstrated for the first time the gene expression profile of cytokines by RT-qPCR in reproductive and non reproductive tissues of rams experimentally infected with B. ovis PA strain up to 240 days post infection (dpi). The research also showed the first overall analysis of gene expression using microarrays in reproductive tissues and pool of lymph nodes of rams experimentally infected with B. ovis PA strain up to 240 dpi. The study demonstrated the persistence of B. ovis and the inflammatory profile of immune response occasioned due the infection. These results are expected to increase the knowledge of the pathogenesis of B. ovis in sheep

Avaliação da sensibilidade de zigotos murinos a brucella abortus para o estabelecimento de um modelo experimental em estudos de interações embriões-patógenos

ABSTRACT The aim of this study was evaluate in-vitro the susceptibility of mouse zygotes to Brucella abortus, with the purpose of establishing an accessible model for embryo-pathogen interaction studies. The female mice (Swiss Webster) were superovulated and mated with fertile males of the same strain, and then the zygote retrieval was performed. The bacterial suspension was prepared at the moment of inoculation, and the dilution was 106 brucellas/mL. The zygotes were divided into control and infected groups (30 µL of the bacterial suspension); after 24 and 96h their morphology and viability were analyzed. Morphological changes were not observed in the control group, but the infected one presented irregular blastomers, defective cleavage, granular cytoplasm with degenerative-like morphology. The cleavage rates were 77.4% (control) and 59.2% (infected) (2 de 0.001674; p 0.05) after 24h, and after 96h 14.5% (control) and 7% (infected) (2 de 0.141616; p 0.05). According to the data, mice zygotes are susceptible to B. abortus in-vitro infection. Probably they could be used as an efficient and accessible experimental model for studies of embryo-pathogen interactions.

RESUMO O objetivo desse trabalho foi avaliar in vitro a sensibilidade de zigotos murinos à Brucella abortus, a fim de estabelecer um modelo acessível para o estudo de interações embriões-patógenos. Para a coleta dos zigotos, foram utilizados camundongos fêmeas (Swiss Webster) acasaladas com machos inteiros, após superestimulação ovariana. Para a infecção foi utilizada a bactéria B. abortus 1119.3 e a suspensão foi preparada no momento da inoculação (diluição de 106 bactérias/mL). Os zigotos foram separados em controle e infectados (30 µL da suspensão de bactérias), e após 24 e 96h foram analisados quanto à morfologia e taxa de clivagem. No grupo controle não foram verificadas alterações morfológicas, já no infectado foi possível verificar a presença de blastômeros irregulares, falha de divisão, citoplasma com granulação e aspecto degenerativo. As taxas de clivagem após 24h foram de 77,4% (controle) e 59,2% (infectados) (2 de 0,001674; p 0,05) e após 96h de infecção 14,5% (controle) e 7% (infectados) (2 de 0,141616; p 0,05). Considerando os resultados pode-se concluir que os zigotos murinos são sensíveis à B. abortus após exposição in vitro. Provavelmente os zigotos murinos possam ser utilizados como modelo experimental, de baixo custo e fácil acesso, para estudos da interação embrião-B. abortus.

Avaliação sanitária de animais silvestres de produção abatidos em abatedouro / Sanitary evaluation of commercially produced wild animals slaughtered in abattoir

Muitas espécies de mamíferos selvagens são criadas para produção de carne. No Brasil, a capivara (Hydrochaeris hydrochaeris), a paca (Agouti paca), o cateto (Tayassu tajacu) e a queixada (Tayassu pecari) são criadas comercialmente para este fim, porém são escassas as informações sanitárias a respeito dessas espécies. Assim, o presente estudo teve por objetivo estudar a presença de infecção causada por leptospiras, micobactérias, brucelas e Erysipelothrix spp. em 138 animais dessas quatro espécies, provenientes de nove criadouros e abatidos em estabelecimento com Serviço de Inspeção Federal. Nenhum animal apresentou anticorpos séricos contra brucelas lisas. As capivaras apresentaram a maior freqüência de animais sorologicamente reagentes para leptospiras (54,5%), seguidas das queixadas (39%) e dos catetos (21,7%). O sorovar mais provável mais freqüente para as espécies estudadas foi o Grippotyphosa, seguido do Hardjobovis e do Tarassovi. Das capivaras foram isolados Leptospira santarosai a partir de rim e Mycobacterium xenopi a partir de linfonodo mesentérico. Das queixadas foi isolado Erysipelothrix rhusiopathiae a partir de tonsila. Segundo os bancos de dados Scopus, Pubmed e Cab Abstracts (Ovid), trata-se dos primeiros relatos de isolamento de M. xenopi em capivara e de E. rhusiopathiae em queixada

Many species of wild mammals are raised for meat production. In Brazil, the capybara (Hydrochaeris hydrochaeris), paca (Agouti paca), collared peccary (Tayassu tajacu) and the white-lipped peccary (Tayassu pecari) are commercially bred, however there is limited sanitary information related to these species. This study aimed to search for the presence of infection caused by Leptospira spp., Mycobacteria spp., Brucella spp. and Erysipelothrix spp. in 138 animals belonging to those species, coming from nine commercial breeders and slaughtered under the Federal Inspection Service. None of these animals presented antibodies against smooth brucellas. The capybaras showed the highest frequency of seropositive animals for leptospirosis (54.4%), followed by the white-lipped peccaries (39%) and the collared peccaries (21.7%). The most frequent serovar was Grippotyphosa, followed by Hardjobovis and Tarassovi. Leptospira santarosai was isolated from the kidneys and Mycobacterium xenopi from the mesenteric lymph nodes of the examined capybaras. Erysipelothrix rhusiopathiae was isolated from the tonsils of one white-lipped peccary. According to the data banks Scopus, Pubmed e Cab Abstracts (Ovid), this is the first report of M. xenopi isolation from capybara and of E. rhusiopathiae from white-lipped peccary

Brucellas / Brucelas

A number of strains of Br. abortus, Br. melitensis and Br. suis has been tested concerning the nitrate reduction. According to the author, nitrate is rapidly reduced to nitrite by all of them when tested in the nitrate-broth recommended by the Society of American Bacteriologists. Reduction has been noted after one hour"s incubation with some strains, but after five hours" incubation they all showed reduction. The reactions given by the abortus and suis types are much stronger than by the melitensis strains. Further analyses show that the nitrite disappears; this begins after 18 hours" incubation with some strains. However, three strains of Br. abortus, which reduced vigorol1sly nitrate to nitrite, did not exhibit disappearance of nitrite under identical conditions, for the five days during which they were under observation. Because of the complicated technic and the difficulty in interpreting resl1lts when the nitrite reaction given by the microorganism in a medium with nitrate is negative; also, because many of these reactions would be positive if they were verified earlier, the following is suggested by the author. If the microorganism grows well in the above-mentioned nitrate-broth, testing for nítrite would begin some hours after the inoculation. Furthermore several tests would be made, at intervals of some hours.

Estudando o autor amostras de Br. abortus, Br. melitensis e Br. suis, relativamente à sua ação sobre nitrato, conclui que todas reduzem, rapidamente, nitrato a nitrito em o caldo-nitrato recomendado pela Sociedade de Bacteriologistas Americanos. Observou redução após 1 hora de incubação para algumas amostras e, para todas, após 5 horas. Verifica que as Br. abortus e Br. suis dão reações fortes de redução de nitrato a nitrito que, ao contrário, são fracas com as Br.melitensis. Verifica, também, que há desaparecimento do nitrito formado, a partir, para diversos casos, de 18 horas, o que não se deu, entretanto, durante 5 dias de observação, com três amostras de Br. abortus fortemente redutoras de nitrato a nitrito. Considerando as complicações de técnica e dificuldades de interpretação de resultados decorrentes das reações nitrito-negativas dos germes, em meio com nitrato; considerando, ainda, que muitas dessas reações seriam positivas se verificadas em mais curto prazo, propõe, para germes que crescem bem em caldo-nitrato acima referido, a pesquisa de nitrito em provas repetidas, com intervalos de poucas horas, a partir de algumas horas após a semeadura.

Brucellas / Brucelas

A number of strains of Br. abortus, Br. melitensis and Br. suis has been tested concerning the nitrate reduction. According to the author, nitrate is rapidly reduced to nitrite by all of them when tested in the nitrate-broth recommended by the Society of American Bacteriologists. Reduction has been noted after one hour"s incubation with some strains, but after five hours" incubation they all showed reduction. The reactions given by the abortus and suis types are much stronger than by the melitensis strains. Further analyses show that the nitrite disappears; this begins after 18 hours" incubation with some strains. However, three strains of Br. abortus, which reduced vigorol1sly nitrate to nitrite, did not exhibit disappearance of nitrite under identical conditions, for the five days during which they were under observation. Because of the complicated technic and the difficulty in interpreting resl1lts when the nitrite reaction given by the microorganism in a medium with nitrate is negative; also, because many of these reactions would be positive if they were verified earlier, the following is suggested by the author. If the microorganism grows well in the above-mentioned nitrate-broth, testing for nítrite would begin some hours after the inoculation. Furthermore several tests would be made, at intervals of some hours.  

Estudando o autor amostras de Br. abortus, Br. melitensis e Br. suis, relativamente à sua ação sobre nitrato, conclui que todas reduzem, rapidamente, nitrato a nitrito em o caldo-nitrato recomendado pela Sociedade de Bacteriologistas Americanos. Observou redução após 1 hora de incubação para algumas amostras e, para todas, após 5 horas. Verifica que as Br. abortus e Br. suis dão reações fortes de redução de nitrato a nitrito que, ao contrário, são fracas com as Br.melitensis. Verifica, também, que há desaparecimento do nitrito formado, a partir, para diversos casos, de 18 horas, o que não se deu, entretanto, durante 5 dias de observação, com três amostras de Br. abortus fortemente redutoras de nitrato a nitrito. Considerando as complicações de técnica e dificuldades de interpretação de resultados decorrentes das reações nitrito-negativas dos germes, em meio com nitrato; considerando, ainda, que muitas dessas reações seriam positivas se verificadas em mais curto prazo, propõe, para germes que crescem bem em caldo-nitrato acima referido, a pesquisa de nitrito em provas repetidas, com intervalos de poucas horas, a partir de algumas horas após a semeadura.

Avaliação de diferentes protocolos de extração de DNA para detecção de Brucella abortus a partir de materiais colhidos de feto abortado ou bezerros nascidos de vacas experimentalmente infectadas com a cepa 2308 / Evaluation of differents protocols of DNA extraction for Brucella abortus detection from aborted featus materials or from calves born from experimentally infected cows with 2308 strain

A Brucella abortus causa diminuição da eficiência reprodutiva em bovinos e é também o agente de uma das zoonoses mais difundidas no mundo. A doença é alvo de programas de controle em muitos países e, no Brasil, seu combate foi melhor organizado a partir de 2001, com o lançamento de programa nacional pelo MAPA. O objetivo do presente estudo foi aperfeiçoar a detecção de B. abortus em homogeneizados de órgãos de fetos abortados por vacas infectadas. Assim, foram comparados diferentes protocolos de extração de DNA, visando à detecção de B. abortus pela PCR em amostras clínicas colhidas de fetos abortados ou bezerros oriundos de vacas experimentalmente desafiadas com B. abortus cepa 2308. Para tanto, foram construídos dois grupos padrão ouro com base na bacteriologia clássica, constituídos por: 32 pulmões (17 positivos ao isolamento), 26 baços (11 positivos ao isolamento), 23 fígados (8 positivos ao isolamento) e 22 linfonodos bronquiais (7 positivos ao isolamento). Todas essas amostras foram submetidas a três distintos protocolos de extração de DNA, seguidos do mesmo processo de amplificação com os primers B4 e B5. A análise dos resultados consolidados mostrou uma sensibilidade de 95% para o protocolo da proteinase K (PK), 86% para o do isotiocianato de guanidina (GT) e de 88% para o de Boom. Os valores encontrados de Sensibilidade para pulmão, baço, fígado e linfonodo foram, respectivamente, 100%, 100%, 100% e 71% (PK), 82%, 100%, 88% e 71% (GT) e 94%, 100%, 63% e 86% (Boom). No grupo dos animais dos quais não foi possível isolar brucellas (gold standard negativo), a PCR resultou positiva em 8 amostras para o protocolo de extração PK (4 pulmões, 1 fígado e 3 linfonodos), em 6 amostras para o protocolo de extração GT (1 pulmão, 3 fígados e 2 linfonodos) e em 37 amostras para o protocolo de extração Boom (10 pulmões, 10 baços, 10 fígados e 7 linfonodos). Esses resultados permitem afirmar que o protocolo de extração PK apresentou a melhor sensibilidade diagnóstica e que o protocolo de extração de Boom apresentou o melhor desempenho nas amostras onde o isolamento foi negativo. Dentre os órgãos estudados, o baço apresentou a maior probabilidade de detecção de B. abortus. Assim, a melhor estratégia para detecção de B. abortus em homogeneizados de órgãos de fetos abortados é a utilização do isolamento e da PCR em paralelo

Infection by Brucella abortus diminishes the reproductive efficiency in bovines and it is also the agent of one of the most spread zoonosis in the world. In many countries control programs aim this disease, and in Brazil its combat was better organized since 2001 with the creation of the national program by the Ministry of Agriculture, Livestock and Supplies (MAPA). The objective of the present study was to improve the detection of B. abortus in aborted fetus homogenates from infected cows. For that reason, different DNA extraction protocols were compared, focusing the PCR detection of B. abortus in clinical samples collected from aborted fetus or calves obtained from cows experimentally defied with the 2308 B. abortus strain. Therefore, two gold standard groups were built based on classical bacteriology, formed by: 32 lungs (17 isolation positives samples), 26 spleens (11 isolation positives samples), 23 livers (8 isolation positives samples) and 22 bronchial lymph nodes (7 isolation positives samples). All samples were submitted to three distinct DNA extraction protocols, followed by the same amplification process with the primers B4 and B5. The analysis of the consolidated results showed a 95% sensibility for the proteinase K protocol (PK), 86 % for the guanidine isotiocianate (GT) and 88% for the Boom. The sensibility values obtained for lungs, spleen, liver and lymph node were, respectively, 100%, 100%, 100% and 71% (PK), 82%, 100%, 88% and 71% (GT) and 94%, 100%, 63% and 86% (Boom). In the group of animals in which it was not possible to isolate brucellas (negative gold standard), the PCR resulted positively in 8 samples for the PK extraction protocol (4 lungs, 1 liver and 3 lymph nodes), in 6 samples for the GT extraction protocol (1 lung, 3 livers and 2 lymph nodes) and in 37 samples for the Boom extraction protocol (10 lungs, 10 spleens, 10 livers and 7 lymph nodes). These results permit affirming that the PK extraction protocol showed the best diagnostic sensibility and that the Boom extraction protocol showed the best performance in negative isolation samples. Within the studied organs, the spleen showed the highest probability of B. abortus detection. Therefore, the best strategy for B. abortus detection in organs homogenates from aborted fetus is the utilization of isolation and in parallel, the PCR

Anti-Brucella spp. antibodies in working equids in a semiarid region of Northeastern Brazil / Anticorpos anti-Brucella spp. em equídeos de tração em uma região semiárida do Nordeste do Brasil

The present study described the prevalence and factors associated with the seropositivity for anti-Brucella spp. antibodies in working equids in the semiarid regionofnortheastern Brazil. Blood samples were collected from 322 equids (76 horses, 155 mules and 91 donkeys). The Rose Bengal plate test (RBPT) was used as a screening method. Samples that were reactive in the RBPT were tested for confirmation using 2-mercaptoethanol (2-ME) and the standard tube agglutination test (STAT). Overall, 7.1% (23/322) of the samples were positive according to the RBPT. After confirmatory tests, the prevalence of brucellosis was found to be 6.5% (21/322). Among these cases, 33.3% (7/21) were horses, 42.8% (9/21) were mules and 23.9% (5/21) were donkeys. In the multivariate analysis, age over 10 years was considered to be a factor associated with the seropositivity (OR: 17.17; 95% CI: 2.582-164.7, P = 0.006) for anti-Brucella spp. antibodies. The significant prevalence of anti-Brucella spp. antibodies found in working equids and the wide distribution of positive animals demonstrates a worrying epidemiological situation regarding brucellosis in the study region. Age over 10 years was a risk factor associated with the seropositivity for anti-Brucella spp. antibodies in animals.

O objetivo do presente estudo foi descrever a prevalência e os fatores associados à infecção por Brucellaspp. em equídeos de trabalho na região semiárida do Nordeste do Brasil. Amostras de sangue foram coletadas de 322 equídeos (76 equinos, 155 muares e 91 asininos). O teste de placa Rosa Bengala (RBPT) foi usado como método de triagem. As amostras que foram reativas no RBPT foram enviadas para confirmação usando 2-mercaptoetanol (2-ME) e o teste padrão de aglutinação em tubo (STAT). Ao todo, 7,1% (23/322) das amostras foram positivas segundo o RBPT. Após testes confirmatórios, a prevalência de brucelose foi de 6,5% (21/322). Destes casos, 33,3% (7/21) foram equinos, 42,8% (9/21) muares e 23,9% (5/21) asininos. Na análise multivariada, idade acima de 10 anos foi considerada fator associado à infecção (OR: 17,17; 95% CI: 2,582-164,7, P = 0.006) por Brucellas pp. A prevalência significativa de anticorpos anti-Brucella spp. encontrados em equídeos de trabalho e a ampla distribuição de animais positivos demonstra uma situação epidemiológica preocupante em relação à brucelose na região de estudo. A idade superior a 10 anos foi um fator de risco associado à infecção em animais.

Avaliação da sensibilidade de zigotos murinos à Brucella abortus para o estabelecimento de um modelo experimental em estudos de interações embriões-patógenos / Sensibility evaluation of mouse zygotes to Brucella abortus for establishment of an experimental model to pathogen-embryo interaction studies

Os objetivos desse trabalho foram avaliar in vitro a sensibilidade de zigotos murinos à Brucella abortus, assim como a eficácia das lavagens seqüenciais e do tratamento com tripsina, padronizados pela International Embryo Transfer Society, na sua remoção e/ou inativação, a fim de estabelecer um modelo acessível para o estudo de interações embriões-patógenos. Para a coleta dos zigotos, foram utilizados camundongos fêmeas (Swiss Webster), púberes, nulíparas, 6-8 semanas de idade, acasaladas com machos inteiros da mesma linhagem, após superestimulação ovariana. Para a infecção foi utilizada a bactéria B.abortus 1119.3. A suspensão de bactérias foi preparada no momento da inoculação, na diluição de 106 bactérias/ml. Os zigotos obtidos foram separados em controle e infectados. A infecção dos zigotos foi feita com 30µl da suspensão de bactérias, e após 24h e 96h foram analisados quanto à morfologia e taxa de clivagem. Os procedimentos de lavagem seqüencial e tratamento com tripsina foram realizados após 24h. Para detecção da bactéria após os procedimentos de lavagem, as amostras foram inoculadas em cultura de bactérias e submetidas ao teste de reação em cadeia pela polimerase (PCR). Uma amostra da última gota de lavagem de cada grupo também foi testada. Para analise estatística dos resultados foi utilizado o teste do χ2. No grupo controle não foram verificadas alterações morfológicas, já no infectado foi possível verificar a presença de blastômeros irregulares, falha de divisão, citoplasma com granulação e aspecto degenerativo. As taxas de clivagem obtidas foram de 77,4% (controle) e 59,2% (infectados) (χ2 de 0,001674; p<0,05) após 24h e após 96h de infecção 14,5% (controle) e 7% (infectados) (χ2 de 0,141616; p<0,05). Não foi possível isolar B.abortus em cultura após os procedimentos de lavagem para ambos os grupos. As amostras do grupo controle apresentaram-se negativas na PCR. Já no grupo infectado foram obtidos resultados positivos e negativos, para os embriões e para a alíquota da última gota de lavagem dos grupos tratados com a lavagem seqüencial. Foi verificada apenas em uma amostra a presença de embriões positivos para a B.abortus com amostra da última gota de lavagem negativa. Para outras duas amostras os embriões apresentaram-se livres de B.abortus, mas foram detectadas na alíquota da última gota de lavagem. Apenas em uma amostra foram obtidos resultados negativos tanto para os embriões, quanto para o meio de lavagem. Os resultados da PCR para os grupos infectados tratados com tripsina foram positivos para praticamente todas as amostras, contendo embriões ou apenas da alíquota da última gota de lavagem, com exceção dos embriões de uma amostra que apresentaram-se negativos. As novas tecnologias desenvolvidas em reprodução animal promovem manipulação invasiva do embrião. Portanto, tratamentos preconizados para a remoção de patógenos podem não ser eficazes. O risco a ser considerado é da presença de patógenos associados à zona pelúcida ou nas proximidades, que possam ser introduzidos, ou ter sua entrada facilitada no embrião. Considerando os dados apresentados, torna-se clara a importância do desenvolvimento de um modelo animal para estudos de interações embriões- patógenos, a fim de se evitar a transmissão e disseminação de doenças

The aim of this study was evaluate in vitro mouse zygotes sensitivity to Brucella abortus, such as the embryo washing procedure and trypsin treatment, recommended by the International Embryo Transfer Society, efficacy in its removal and/or inactivation, with the purpose of established an accessible model for embryo- pathogen interaction studies. The female mice (Balb C) aging 6 to 8 weeks were superovulated and matted with fertile males of the same strain, then the zygote retrieval was performed. The bacterial suspension was prepared in the moment of inoculation and the dilution was 106 brucellas/ml. The zygotes were divided in control and infected groups (30µl of the bacterial suspension); after 24h and 96h their morphology and viability were analised. The zygotes of each group were washed sequentially or treated with trypsin after 24h exposition. To verify the presence of B. abortus pos-washing the zygotes and a sample of the last wash drop of each group were tested on bacterial culture system and polimerase chain reaction (PCR). The statistical analyses was performed with the χ2 test. Morphological changes were not observed at the control group, but the infected one presented irregular blastomeres, clivage defective, granular cytoplasm with degenerative like morphology. The clivage rates were 77,4% (control) and 59,2% (infected) (χ2 de 0,001674; p<0,05) after 24h and after 96h 14,5% (control) e 7% (infected) (χ2 de 0,141616; p<0,05). Our results showed that the bacterial culture presented negative growing for all groups tested. The control group presented only negative results on PCR analyses. The infected group presented positive and negative results on PCR, for embryos or last wash drop sample, submitted to the sequential washing procedure. Positive embryos were found in just one sample with the last wash drop negative. To two other samples embryos presented negative PCR results but positive at the last wash drop. Negative results for embryos and last wash drop was found in just one sample. The PCR results for the groups treated with trypsin were almost all positives, for embryos or last wash drop samples, except one embryo sample that presented negative. The recent developed reproductive technologies promote excessive manipulation of the embryo. Therefore, preexistent procedures for microorganisms\ removal could not be efficient. The preeminent risk to be considered here is the potential or probability of the presence of pathogens associated with or in proximity to the zona pelúcida, which could be introduced, or facilitated its entrance on embryo. According to the data presented become clear the importance of develop a model for studies of embryo- pathogen interactions, with the aim of avoid disease transmission

Avaliação da sensibilidade de zigotos murinos à Brucella abortus para o estabelecimento de um modelo experimental em estudos de interações embriões-patógenos / Sensibility evaluation of mouse zygotes to Brucella abortus for establishment of an experimental model to pathogen-embryo interaction studies

Os objetivos desse trabalho foram avaliar in vitro a sensibilidade de zigotos murinos à Brucella abortus, assim como a eficácia das lavagens seqüenciais e do tratamento com tripsina, padronizados pela International Embryo Transfer Society, na sua remoção e/ou inativação, a fim de estabelecer um modelo acessível para o estudo de interações embriões-patógenos. Para a coleta dos zigotos, foram utilizados camundongos fêmeas (Swiss Webster), púberes, nulíparas, 6-8 semanas de idade, acasaladas com machos inteiros da mesma linhagem, após superestimulação ovariana. Para a infecção foi utilizada a bactéria B.abortus 1119.3. A suspensão de bactérias foi preparada no momento da inoculação, na diluição de 106 bactérias/ml. Os zigotos obtidos foram separados em controle e infectados. A infecção dos zigotos foi feita com 30µl da suspensão de bactérias, e após 24h e 96h foram analisados quanto à morfologia e taxa de clivagem. Os procedimentos de lavagem seqüencial e tratamento com tripsina foram realizados após 24h. Para detecção da bactéria após os procedimentos de lavagem, as amostras foram inoculadas em cultura de bactérias e submetidas ao teste de reação em cadeia pela polimerase (PCR). Uma amostra da última gota de lavagem de cada grupo também foi testada. Para analise estatística dos resultados foi utilizado o teste do χ2. No grupo controle não foram verificadas alterações morfológicas, já no infectado foi possível verificar a presença de blastômeros irregulares, falha de divisão, citoplasma com granulação e aspecto degenerativo. As taxas de clivagem obtidas foram de 77,4% (controle) e 59,2% (infectados) (χ2 de 0,001674; p<0,05) após 24h e após 96h de infecção 14,5% (controle) e 7% (infectados) (χ2 de 0,141616; p<0,05). Não foi possível isolar B.abortus em cultura após os procedimentos de lavagem para ambos os grupos. As amostras do grupo controle apresentaram-se negativas na PCR. Já no grupo infectado foram obtidos resultados positivos e negativos, para os embriões e para a alíquota da última gota de lavagem dos grupos tratados com a lavagem seqüencial. Foi verificada apenas em uma amostra a presença de embriões positivos para a B.abortus com amostra da última gota de lavagem negativa. Para outras duas amostras os embriões apresentaram-se livres de B.abortus, mas foram detectadas na alíquota da última gota de lavagem. Apenas em uma amostra foram obtidos resultados negativos tanto para os embriões, quanto para o meio de lavagem. Os resultados da PCR para os grupos infectados tratados com tripsina foram positivos para praticamente todas as amostras, contendo embriões ou apenas da alíquota da última gota de lavagem, com exceção dos embriões de uma amostra que apresentaram-se negativos. As novas tecnologias desenvolvidas em reprodução animal promovem manipulação invasiva do embrião. Portanto, tratamentos preconizados para a remoção de patógenos podem não ser eficazes. O risco a ser considerado é da presença de patógenos associados à zona pelúcida ou nas proximidades, que possam ser introduzidos, ou ter sua entrada facilitada no embrião. Considerando os dados apresentados, torna-se clara a importância do desenvolvimento de um modelo animal para estudos de interações embriões- patógenos, a fim de se evitar a transmissão e disseminação de doenças

The aim of this study was evaluate in vitro mouse zygotes sensitivity to Brucella abortus, such as the embryo washing procedure and trypsin treatment, recommended by the International Embryo Transfer Society, efficacy in its removal and/or inactivation, with the purpose of established an accessible model for embryo- pathogen interaction studies. The female mice (Balb C) aging 6 to 8 weeks were superovulated and matted with fertile males of the same strain, then the zygote retrieval was performed. The bacterial suspension was prepared in the moment of inoculation and the dilution was 106 brucellas/ml. The zygotes were divided in control and infected groups (30µl of the bacterial suspension); after 24h and 96h their morphology and viability were analised. The zygotes of each group were washed sequentially or treated with trypsin after 24h exposition. To verify the presence of B. abortus pos-washing the zygotes and a sample of the last wash drop of each group were tested on bacterial culture system and polimerase chain reaction (PCR). The statistical analyses was performed with the χ2 test. Morphological changes were not observed at the control group, but the infected one presented irregular blastomeres, clivage defective, granular cytoplasm with degenerative like morphology. The clivage rates were 77,4% (control) and 59,2% (infected) (χ2 de 0,001674; p<0,05) after 24h and after 96h 14,5% (control) e 7% (infected) (χ2 de 0,141616; p<0,05). Our results showed that the bacterial culture presented negative growing for all groups tested. The control group presented only negative results on PCR analyses. The infected group presented positive and negative results on PCR, for embryos or last wash drop sample, submitted to the sequential washing procedure. Positive embryos were found in just one sample with the last wash drop negative. To two other samples embryos presented negative PCR results but positive at the last wash drop. Negative results for embryos and last wash drop was found in just one sample. The PCR results for the groups treated with trypsin were almost all positives, for embryos or last wash drop samples, except one embryo sample that presented negative. The recent developed reproductive technologies promote excessive manipulation of the embryo. Therefore, preexistent procedures for microorganisms\' removal could not be efficient. The preeminent risk to be considered here is the potential or probability of the presence of pathogens associated with or in proximity to the zona pelúcida, which could be introduced, or facilitated its entrance on embryo. According to the data presented become clear the importance of develop a model for studies of embryo- pathogen interactions, with the aim of avoid disease transmission

Perfil sorológico de algumas infecções em capivara (Hydrochaeris hydrochaeris) capturadas nos estados de São Paulo e Minas Gerais, Brasil / Epidemiologist survey of diseases related to capibaras (Hydrochaeris hydrochaeris) in Brazil

A capivara (Hydrochaeris hydrochaeris) é um roedor de hábitos semiaquáticos, herbívoros, forrageando gradientes aquáticos, onde outros herbívoros normalmente não alcançam, principalmente em áreas sazonalmente inundáveis; sendo distribuída por todo o território brasileiro. O seu habitat natural é caracterizado pela existência de curso dágua permanente, também requerem uma área de pastagem para forragear e uma área de mata utilizada para repouso e para ter filhotes. Apesar de ser um animal silvestre, encontra-se em um estado tão avançado no processo de domesticação, que pode ser considerado como um novo animal doméstico, com manejo e uso bem estabelecidos. As capivaras regularmente são mantidas em próximos contatos com suínos, eqüinos e bovinos, sendo que este estreito relacionamento conduz a uma maior dispersão de doenças, podendo atuar a capivara como reservatório, desempenhando importante papel na saúde pública e nas perdas econômicas em animais de produção e em criadouros comerciais da espécie. Relatos de identificação de alguns agentes infecciosos em capivaras de vida livre, tanto em áreas silvestres como em rurais, contribuem com essa hipótese. Desta forma, este trabalho teve como objetivo analisar o perfil sorológico de capivaras, quanto à presença de anticorpos contra Herpes vírus bovino, Vírus da Leucose bovina, Vírus da influenza eqüina, Rickettsia, Anaplasma marginale, Babesia bovis, Babesia bigemina, Brucellas e Leptospira. Foram colhidas amostras sangüineas de capivaras de diferentes regiões do Estado de Minas Gerais e São Paulo. Estas amostras foram processadas no laboratório de Virologia do Setor de Medicina Veterinária Preventiva da Universidade Federal de Viçosa, sendo submetidos aos testes de imunodifusão em agar-gel para o vírus da leucose bovina, soroneutralização para o herpes vírus bovino, inibição da hemaglutinação para o vírus da influenza eqüina, imunofluorescência indireta para Rickettsia, eliza para Anaplasma marginale, dot-elisa para Babesia bovis e Babesia bigemina, soroaglutinação rápida para Brucellas e soroaglutinação microscópica para Leptospira (15 diferentes sorovares). Os resultados (18/144) obtidos indicam a prevalência de anticorpos contra leptospira de 10,42% (15/144) e 2,09% (3/144) contra o vírus da influenza eqüina. Não foram encontrados anticorpos para os outros agentes testados. Há grande evidencia que a criação de capivaras tem um papel importante na epidemiologia da infecção por Leptospira, servindo como reservatório e potencial disseminador para o ambiente. Porém, existe uma necessidade de uma avaliação mais apurada, nos aspectos sanitários e econômicos relacionados a outras enfermidades de ocorrência em capivaras, assim como um aprofundamento na relação com outros animais de produção

Capybara (Hydrochaeris hydrochaeris) is a rodent of half-aquatic habits, herbivores, exploring aquatic gradients where other herbivores normally dont reach, mainly in flooding areas, being distributed for all the Brazilian territory. Its natural habitat is characterized by the permanent existence of watercourse, and they also require an area of pasture to explore and an area of bush used for rest and to have younglings. Although being a wild animal, it in a so advanced way in the domestication process that can be considered as a new domestic animal, with well established handling and use. Capybaras are regularly kept in close contact with swine, equines and bovines, leading to a bigger dispersion of illnesses, with capybaras being able to act as reservoir, doing important paper in public health and the economic losses in production animals and commercial breeding of the species. Identification stories of some infectious agents in free-life capybaras, as much in wild as in agricultural areas, contribute to this hypothesis. On this way this work had the objective of analyzing the serologic profile of capybaras, as soon as the presence of antibodies against bovine Herpesvirus, bovis Viruses of bovine leukemia, Viruses of equine influenza, Rickettsia, Anaplasma marginale, Babesia bovis, Babesia bigemina, brucellas and leptospires. Blood samples of capybaras from different region had been collected. These samples had been processed in the laboratory of Virology of the Sector of Preventive Veterinary Medicine of the Universities Federal de Viçosa, being submitted to the tests of immuno-diffusion in agar-gel for the virus of bovine leukemia, serum-neutralization for bovine herpes virus, inhibition of the hemaglutination for the virus of equine influenza, indirect immunofluorescence for Rickettsia, elisa for Anaplasma marginale, dot-elisa for Babesia bovis and bigemina Babesia, fast serum agglutination for brucellas and microscopically serum aglutination for Leptospires (15 different sorovares). Gotten results (18/144) indicate the prevalence of antibodies against leptospires of 10,42% (15/144) and 2,09% (3/144) against the equine influenza virus. Antibodies for the other tested agents had not been found. There is great evidence that the creation of capybaras has an important paper in the epidemiologist of the infection for Leptospires, serving as reservoir and potential disseminator for the environment. However, there is a necessity of a more refined evaluation, related to the sanitary and economic aspects to other diseases occurring in capybaras, as well as a deeper relation with other production animals