Evaluation of five parasitological techniques for diagnosing phylum Ciliophora cysts in fecal samples from free-living wild artiodactyls / Avaliação de cinco técnicas parasitológicas para o diagnóstico de cistos do filo Ciliophora em amostras fecais de artiodáctilos silvestres em vida livre

ABSTRACT: A variety of laboratory techniques are used in parasitological diagnosis. However, studies that analyze their laboratory efficiency are very scarce, especially with regard to biological samples from wild animals that are little known, with little popular attachment, such as artiodactyls. These can be infected by different parasites, including protozoa of the phylum Ciliophora, which includes the parasites Balantioides coli and Buxtonella sulcata. In this light, the aim of this study was to compare the efficiency of five coproparasitological techniques for diagnosing protozoan cysts of the phylum Ciliophora in the feces of free-living artiodactyls. To this end, 101 fecal samples were collected from trails in Pedra Selada State Park, Rio de Janeiro state, from 2020 to 2021. All the samples were analyzed using the qualitative techniques of modified Sheather floatation, modified Ritchie sedimentation and Lutz, as well as the quantitative techniques of Mini-FLOTAC and McMaster. Cyst recovery was best achieved using the modified Ritchie technique, in which 62.5% positivity was detected, followed by Lutz (47.5%), modified Sheather (37.5%) and the quantitative techniques of Mini-FLOTAC (30%) and McMaster (17.5%). In most of the comparisons between the techniques, reasonable agreement regarding the diagnosis was observed (Kappa 0.21 to 0.40), which was statistically significant (p≤0.05). McMaster showed higher mean and standard deviation values for counts of cysts per gram of feces than Mini-FLOTAC. However, there was no significant difference in the estimates for cyst counts (Wilcoxon p>0.05). Sedimentation qualitative techniques were more indicated for diagnosing cysts of protozoa of the phylum Ciliophora in the feces of free-living wild artiodactyls. These techniques can therefore be used as laboratory tools for environmental parasite monitoring. In addition, between the two quantitative techniques, Mini-FLOTAC presented better performance, thus showing its potential as a tool for estimating the abundance of cystic forms of the phylum Ciliophora in environmental samples.

RESUMO: Diversas são as técnicas laboratoriais utilizadas no diagnóstico parasitológico. No entanto, estudos que analisam a eficiência laboratorial das mesmas são muito escassos, principalmente quando se trata de amostras biológicas de animais silvestres, que possuem pouca divulgação e apego popular, como os artiodáctilos. Estes podem se infectar por diferentes parasitos, incluindo os protozoários do Filo Ciliophora, no qual se inclui Balantioides coli, bem como Buxtonella sulcata. Mediante o exposto, este estudo objetivou comparar a eficiência entre cinco técnicas coproparasitológicas para o diagnóstico de cistos de protozoário do Filo Ciliophora em fezes de artiodáctilos em vida livre. Entre 2020 e 2021 foram coletadas 101 amostras fecais em trilhas do Parque Estadual da Pedra Selada localizado no estado do Rio de Janeiro. Todas as amostras foram analisadas pelas técnicas qualitativas de flutuação de Sheather modificada, sedimentação de Ritchie modificada e Lutz, bem como por meio das técnicas quantitativas de Mini-FLOTAC e McMaster. Pode-se verificar uma superioridade na recuperação dos cistos por meio da técnica de Ritchie modificada, no qual foi detectado 62,5% de positividade, seguida pelo Lutz (47,5%), Sheather modificada (37,5%) e pelas técnicas quantitativas de Mini-FLOTAC (30%) e McMaster (17,5%). Na maioria das comparações entre as técnicas foi possível verificar uma concordância razoável (Kappa 0,21 a 0,40) em relação ao diagnóstico entre as mesmas, sendo este estatisticamente significativo (p≤0,05). McMaster em comparação com o Mini-FLOTAC foi a que apresentou os maiores valores médio e de desvio padrão na contagem dos cistos por grama de fezes. No entanto, não foi evidenciado diferença significativa na estimativa de contagem dos cistos (Wilcoxon=p>0,05). Pode-se verificar que as técnicas qualitativas de sedimentação foram consideradas as mais indicadas para o diagnóstico de cistos do protozoário do Filo Ciliophora em fezes de artiodáctilos silvestres em vida livre, podendo ser utilizadas como ferramentas laboratoriais de monitoramento parasitário ambiental. Além disso, dentre as técnicas quantitativas, o Mini-FLOTAC foi a que apresentou a melhor performance, denotando o seu potencial como uma ferramenta para se estimar a abundância de formas císticas do Filo Ciliophora em amostra ambiental.

First record of Trichodina heterodentata (Ciliophora: Trichodinidae) in banded knifefish Gymnotus carapo (Gymnotidae) cultured in Brazil / Primeiro registro de Trichodina heterodentata (Ciliophora: Trichodinidae) em tuvira Gymnotus carapo (Gymnotidae), cultivado no Brasil

The aim of this study was to report the first record of Trichodina heterodentata in banded knifefish Gymnotus carapo. Banded knifefish cultivated in the municipality of Jataí, state of Goiás, in the central western region of Brazil, experienced fish mortality rates of 3-4% per tank. Macroscopic analysis found that fish had lesions on their skin and gills. Smears of the integument and gills were confectioned and air-dried at room temperature and impregnated with silver nitrate to identify the Trichodinidae species causing the lesions. The trichodinid were identified as T. heterodentata, and their characteristics were compared to those from T. heterodentata recorded from other species of host fish. It was observed that the presence of T. heterodentata was associated with inadequate fish management, low water quality, high rates of stocking density, and inadequate nutritional management.

O objetivo deste estudo foi relatar o primeiro registro de Trichodina heterodentata em tuviras Gymnotus carapo. Um cultivo de tuviras no município de Jataí, estado de Goiás, na região Centro-Oeste do Brasil, apresentou taxas de mortalidade de peixes de 3-4% por tanque. A análise macroscópica constatou que os peixes tinham lesões na pele e brânquias. Raspados do tegumento e brânquias foram confeccionadas e secas ao ar à temperatura ambiente e impregnadas com nitrato de prata para identificar as espécies de Trichodinidae causadoras das lesões. Os tricodinídeos foram identificados como T. heterodentata, e suas características foram comparadas com as de T. heterodentata registradas para outras espécies de peixes hospedeiros. Observou-se que a presença de T. heterodentata estava associada ao manejo inadequado dos peixes, baixa qualidade da água, altas taxas de densidade de estocagem e manejo nutricional inadequado.

First record of Trichodina heterodentata (Ciliophora: Trichodinidae) in banded knifefish Gymnotus carapo (Gymnotidae) cultured in Brazil

Abstract The aim of this study was to report the first record of Trichodina heterodentata in banded knifefish Gymnotus carapo. Banded knifefish cultivated in the municipality of Jataí, state of Goiás, in the central western region of Brazil, experienced fish mortality rates of 3-4% per tank. Macroscopic analysis found that fish had lesions on their skin and gills. Smears of the integument and gills were confectioned and air-dried at room temperature and impregnated with silver nitrate to identify the Trichodinidae species causing the lesions. The trichodinid were identified as T. heterodentata, and their characteristics were compared to those from T. heterodentata recorded from other species of host fish. It was observed that the presence of T. heterodentata was associated with inadequate fish management, low water quality, high rates of stocking density, and inadequate nutritional management.

Resumo O objetivo deste estudo foi relatar o primeiro registro de Trichodina heterodentata em tuviras Gymnotus carapo. Um cultivo de tuviras no município de Jataí, estado de Goiás, na região Centro-Oeste do Brasil, apresentou taxas de mortalidade de peixes de 3-4% por tanque. A análise macroscópica constatou que os peixes tinham lesões na pele e brânquias. Raspados do tegumento e brânquias foram confeccionadas e secas ao ar à temperatura ambiente e impregnadas com nitrato de prata para identificar as espécies de Trichodinidae causadoras das lesões. Os tricodinídeos foram identificados como T. heterodentata, e suas características foram comparadas com as de T. heterodentata registradas para outras espécies de peixes hospedeiros. Observou-se que a presença de T. heterodentata estava associada ao manejo inadequado dos peixes, baixa qualidade da água, altas taxas de densidade de estocagem e manejo nutricional inadequado.

First record of Trichodina heterodentata (Ciliophora: Trichodinidae) in banded knifefish Gymnotus carapo (Gymnotidae) cultured in Brazil / Primeiro registro de Trichodina heterodentata (Ciliophora: Trichodinidae) em tuvira Gymnotus carapo (Gymnotidae), cultivado no Brasil

The aim of this study was to report the first record of Trichodina heterodentata in banded knifefish Gymnotus carapo. Banded knifefish cultivated in the municipality of Jataí, state of Goiás, in the central western region of Brazil, experienced fish mortality rates of 3-4% per tank. Macroscopic analysis found that fish had lesions on their skin and gills. Smears of the integument and gills were confectioned and air-dried at room temperature and impregnated with silver nitrate to identify the Trichodinidae species causing the lesions. The trichodinid were identified as T. heterodentata, and their characteristics were compared to those from T. heterodentata recorded from other species of host fish. It was observed that the presence of T. heterodentata was associated with inadequate fish management, low water quality, high rates of stocking density, and inadequate nutritional management.

O objetivo deste estudo foi relatar o primeiro registro de Trichodina heterodentata em tuviras Gymnotus carapo. Um cultivo de tuviras no município de Jataí, estado de Goiás, na região Centro-Oeste do Brasil, apresentou taxas de mortalidade de peixes de 3-4% por tanque. A análise macroscópica constatou que os peixes tinham lesões na pele e brânquias. Raspados do tegumento e brânquias foram confeccionadas e secas ao ar à temperatura ambiente e impregnadas com nitrato de prata para identificar as espécies de Trichodinidae causadoras das lesões. Os tricodinídeos foram identificados como T. heterodentata, e suas características foram comparadas com as de T. heterodentata registradas para outras espécies de peixes hospedeiros. Observou-se que a presença de T. heterodentata estava associada ao manejo inadequado dos peixes, baixa qualidade da água, altas taxas de densidade de estocagem e manejo nutricional inadequado.

First record of Trichodina heterodentata (Ciliophora: Trichodinidae) in banded knifefish Gymnotus carapo (Gymnotidae) cultured in Brazil / Primeiro registro de Trichodina heterodentata (Ciliophora: Trichodinidae) em tuvira Gymnotus carapo (Gymnotidae), cultivado no Brasil

The aim of this study was to report the first record of Trichodina heterodentata in banded knifefish Gymnotus carapo. Banded knifefish cultivated in the municipality of Jataí, state of Goiás, in the central western region of Brazil, experienced fish mortality rates of 3-4% per tank. Macroscopic analysis found that fish had lesions on their skin and gills. Smears of the integument and gills were confectioned and air-dried at room temperature and impregnated with silver nitrate to identify the Trichodinidae species causing the lesions. The trichodinid were identified as T. heterodentata, and their characteristics were compared to those from T. heterodentata recorded from other species of host fish. It was observed that the presence of T. heterodentata was associated with inadequate fish management, low water quality, high rates of stocking density, and inadequate nutritional management.(AU)

O objetivo deste estudo foi relatar o primeiro registro de Trichodina heterodentata em tuviras Gymnotus carapo. Um cultivo de tuviras no município de Jataí, estado de Goiás, na região Centro-Oeste do Brasil, apresentou taxas de mortalidade de peixes de 3-4% por tanque. A análise macroscópica constatou que os peixes tinham lesões na pele e brânquias. Raspados do tegumento e brânquias foram confeccionadas e secas ao ar à temperatura ambiente e impregnadas com nitrato de prata para identificar as espécies de Trichodinidae causadoras das lesões. Os tricodinídeos foram identificados como T. heterodentata, e suas características foram comparadas com as de T. heterodentata registradas para outras espécies de peixes hospedeiros. Observou-se que a presença de T. heterodentata estava associada ao manejo inadequado dos peixes, baixa qualidade da água, altas taxas de densidade de estocagem e manejo nutricional inadequado.(AU)

Parasitic lesions in fish in the Federal District, Brazil

Brazil has a vast territory and favorable climatic conditions that allow the cultivation of freshwater fish. The intensification of the productive system can cause an imbalance in the aquatic environment as a result of poor water quality, nutritional deficiencies and infectious or parasitic diseases. The laboratory diagnosis and the determination of the prevalence of the main lesions, which occur in a certain region, help to guide towards the etiological diagnosis. This study aimed to describe the main parasitic lesions in fish in the routine at the Veterinary Pathology Laboratory of the Universidade de Brasília (UnB). All records of fish with parasitic lesions were recovered. Those cases in which there was an intralesional parasite and which presented lesions compatible with the parasite were included. The screening of ectoparasites was done by scraping the superficial mucus from the gills and skin. Organ sections were routinely processed for histopathologyand stained with hematoxylin-eosin (HE). In some records, parasitological identification was carried. The information was divided into the species of the affected fish, epidemiology of the outbreak (water quality, temperature, type of breeding), lesion distribution, etiology and macroscopic and microscopic changes. The resulting data was organized in absolute frequency and percentage. In this study, 22 cases were counted, between individual deaths and outbreaks, totaling 83 necropsied teleost fish. Inflammatory changes of parasitic origin were seen in 13/22 (59%) of the cases had lesions of parasitic origin. Skin lesions and gills were the most relevant. Macroscopically, red areas or spots of hyperemia or hemorrhage on the body surface were the most prevalent findings. Under microscopy, proliferative gill inflammation was the most relevant diagnosis. Pscinoodinium pilullare (Dinoflagellida), Ichthyophthirius multifiliis (Ciliophora), and monogenetic worms (Monogenea) were the main parasites found. Trichodina sp. (Ciliophora), Ichtyobodo sp. (Kinetoplastida), Amoebas, and Chilodonella sp. (Ciliophora), were seen in fewer numbers. An unusual case suggestive of parasitism by Eustrongylides sp. (Nematoda), in a pirá-brasília (Simpsonichthys boitonei), specimen has been recorded. The diagnoses were based on epidemiology, anatomopathological and parasitological findings. The most frequent and significantly lethal lesion in the study was proliferative and / or hyperplastic branchitis. Proliferative branchitis with lamellar epithelial hyperplasia (LEH) is a response to some type of chemical or mechanical injury to the gill epithelium in order to protect the capillaries from further damage or microbial penetration. However, it also increases the diffusion distance between capillaries and the environment and, therefore, hinders breathing, excretory and osmoregulatory functions. Protozoan infections and monogenetic worms in general generated LEH and skin lesions of mechanical origin. Secondary bacterial infection, were observed in this parasitosis determining the cause of death of the fish. Its pathogenicity comes from the lesions caused by the colonization and histophagy of the epithelial surfaces, mainly gills and skin, causing epithelial proliferation, lamellar cell fusion, epithelial cell degeneration and necrosis forming several ulcers in the epithelium after the release of mature trophies. The pathogenesis of parasitism by Eustrongylides spp. is considerable when there is a large quantity of these larvae that can cause intestinal obstruction, rupture and compression of viscera, of greater importance in small fish. The main parasites of necropsied fish were protozoa and monogenetic worms, which mainly cause branquitis and dermatitis in varying grades.(AU)

Parasitos em trutas-arco-íris (Oncorhynchus mykiss) criadas em sistema intensivo na região serrana de Santa Catarina, Brasil / [Parasites in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) raised in an intensive system in the mountain region of Santa Catarina, Brazil]

With the aim to determine the prevalence and mean parasite intensity in Oncorhynchus mykiss, 120 specimens were analyzed between April and September 2018. The cavity analysis was done by visual inspection, scraping of mucus, and extraction of the branchial arches. In the evisceration process, the intestine, the liver, and the kidney were separated, while the musculature was analyzed using the "candling table" method. All the collected material was preserved in 10% buffered formaldehyde and sent to the Laboratory of Parasitology and Parasitic Diseases, of the Center for Agroveterinary Sciences (CAV) of the University of the State of Santa Catarina (UDESC) for making the slides and identifying the parasites. Parasites were detected only in the analysis of the scraping of body mucus. Only specimens of the genus Trichodina were identified, in 34 of the 120 fish analyzed, in two collections, resulting in a prevalence of 28.33%. In total, 144 specimens of Trichodina were observed. The overall mean intensity was of 4.24 parasites in each fish analyzed. Characteristic lesions of infection by protozoa were not identified. This is the first report of the occurrence of Trichodina spp. in O. mykiss bred in an intensive system in Brazil, with low rates of parasitic infection in the mountain region of Santa Catarina.(AU)

Occurrence and diversity of ciliated protozoa in the most commonly consumed leafy greens in Brazil: a qualitative study / Ocorrência e diversidade de protozoários ciliados nos vegetais folhosos mais consumidos no Brasil: um estudo qualitativo

Ciliated protozoa are an ubiquitous group of eukaryotes that have been poorly reported on leafy greens. The present study aimed to verify the occurrence and diversity of ciliated protozoa in the leaves and roots of three of the most commonly consumed leafy greens in Brazil – lettuce, rocket and coriander. The vegetable samples were washed by manual agitation (3 minutes) in two different media (mineral water and Page ́s Amoeba Saline solution). After washing, the contents were incubated in Petri dishes and aliquots were removed for microscopic identification and in vivo observation. A total of 21 ciliated protozoa species were found, most of which were bacterivorous. Leafy greens have commonly been associated with foodborne outbreaks and ciliated protozoa, which although they are not a Public Health concern, can act as “Trojan Horses” harboring bacteria, viruses and other protozoa cysts and oocysts and can suggest a new route towards microbiological quality related to the food chain. This is the first report of ciliated protozoa on leafy greens consumed in Brazil.

Os protozoários ciliados constituem um grupo onipresente de eucariotos pouco relatados em vegetais folhosos. O presente estudo teve como objetivo verificar a ocorrência e a diversidade de protozoários ciliados nas folhas e raízes de três dos vegetais folhosos mais consumidos no Brasil - alface, rúcula e coentro. As amostras de vegetais foram lavadas por agitação manual (3 minutos) em dois meios diferentes (água mineral e Solução Salina para Ameba). Após a lavagem, o conteúdo foi incubado em placas de Petri e alíquotas foram retiradas para identificação microscópica e observação in vivo dos organismos. Um total de 21 espécies de protozoários ciliados foi encontrado, a maioria das quais era bacterívora. Tais hortaliças têm sido comumente associadas a surtos transmitidos por alimentos e os protozoários ciliados que, embora não sejam um problema de saúde pública, podem atuar como “Cavalos de Tróia” ao abrigar bactérias, vírus além de cistos e oocistos de protozoários o que pode sugerir uma nova rota para a avaliação da qualidade microbiológica relacionada à cadeia alimentar. Este é o primeiro relato de protozoários ciliados em folhas verdes consumidas no Brasil.

Occurrence and diversity of ciliated protozoa in the most commonly consumed leafy greens in Brazil: a qualitative study / Ocorrência e diversidade de protozoários ciliados nos vegetais folhosos mais consumidos no Brasil: um estudo qualitativo

Ciliated protozoa are an ubiquitous group of eukaryotes that have been poorly reported on leafy greens. The present study aimed to verify the occurrence and diversity of ciliated protozoa in the leaves and roots of three of the most commonly consumed leafy greens in Brazil lettuce, rocket and coriander. The vegetable samples were washed by manual agitation (3 minutes) in two different media (mineral water and Page ́s Amoeba Saline solution). After washing, the contents were incubated in Petri dishes and aliquots were removed for microscopic identification and in vivo observation. A total of 21 ciliated protozoa species were found, most of which were bacterivorous. Leafy greens have commonly been associated with foodborne outbreaks and ciliated protozoa, which although they are not a Public Health concern, can act as “Trojan Horses” harboring bacteria, viruses and other protozoa cysts and oocysts and can suggest a new route towards microbiological quality related to the food chain. This is the first report of ciliated protozoa on leafy greens consumed in Brazil.(AU)

Os protozoários ciliados constituem um grupo onipresente de eucariotos pouco relatados em vegetais folhosos. O presente estudo teve como objetivo verificar a ocorrência e a diversidade de protozoários ciliados nas folhas e raízes de três dos vegetais folhosos mais consumidos no Brasil - alface, rúcula e coentro. As amostras de vegetais foram lavadas por agitação manual (3 minutos) em dois meios diferentes (água mineral e Solução Salina para Ameba). Após a lavagem, o conteúdo foi incubado em placas de Petri e alíquotas foram retiradas para identificação microscópica e observação in vivo dos organismos. Um total de 21 espécies de protozoários ciliados foi encontrado, a maioria das quais era bacterívora. Tais hortaliças têm sido comumente associadas a surtos transmitidos por alimentos e os protozoários ciliados que, embora não sejam um problema de saúde pública, podem atuar como “Cavalos de Tróia” ao abrigar bactérias, vírus além de cistos e oocistos de protozoários o que pode sugerir uma nova rota para a avaliação da qualidade microbiológica relacionada à cadeia alimentar. Este é o primeiro relato de protozoários ciliados em folhas verdes consumidas no Brasil.(AU)

First report of Trichodinella and new geographical records of trichodinids in Nile tilapia (Oreochromis niloticus) farmed in Brazil / Primeiro relato de Trichodinella e novos registros geográficos de tricodinídeos em tilapia do Nilo (Oreochromis niloticus) cultivada no Brasil

Massive occurrence of trichodinids is frequently accompanied by serious disease in fish farms. In this study, trichodinid species from the gills and skin of Nile tilapia (Oreochromis niloticus) farmed in the central-western region of Brazil (state of Goiás) were morphologically characterized. Dried slides were prepared from the parasites and were impregnated with silver nitrate (2%). Morphometric characteristics were determined and schematic drawings of the denticles were made using photomicrographs produced from the slides. Seven species of trichodinid ectoparasites (Protozoa: Ciliophora: Trichodinidae) were found parasitizing the gills: four of the genus Trichodina Ehrenberg, 1838; one of Tripartiella Lom, 1959; one of Paratrichodina Lom, 1963; and one of Trichodinella rámek-Huek, 1953. On the body surface, three specimens of the genus Trichodina were identified. This study presents new geographical records of trichodinids in Brazil, thus confirming that Trichodina centrostrigeata, Trichodina compacta, Trichodina heterodentata, Paratrichodina africana and Tripartiella orthodens are widely distributed worldwide. Additionally, the first record of the genus Trichodinella in Brazil is presented.(AU)

O parasitismo intenso por tricodinídeos está frequentemente relacionado à doença grave em fazendas de peixes. Neste estudo, espécies de tricodinídeos das brânquias e da pele de tilápias do Nilo (Oreochromis niloticus) cultivadas na região centro-oeste do Brasil (estado de Goiás) foram caracterizadas morfologicamente. As lâminas secas foram preparadas a partir dos parasitas e impregnadas com nitrato de prata (2%). As características morfométricas foram determinadas e desenhos esquemáticos dos dentículos foram confeccionados com fotomicrografias produzidas a partir das lâminas. Sete espécies de ectoparasitos tricodinídeos (Protozoa: Ciliophora: Trichodinidae) foram encontradas parasitando as brânquias: quatro do gênero Trichodina Ehrenberg, 1838; um de Tripartiella Lom, 1959; um de Paratrichodina Lom, 1963; e um de Trichodinella rámek-Huek, 1953. Na superfície do corpo, três espécimes do gênero Trichodina foram identificados. Este estudo apresenta novos registros geográficos de tricodinídeos no Brasil, confirmando que Trichodina centrostrigeata, Trichodina compacta, Trichodina heterodentata, Paratrichodina africana e Tripartiella orthodens estão amplamente distribuídas mundialmente. Adicionalmente, é apresentado o primeiro registro do gênero Trichodinella no Brasil.(AU)

Cryptocaryon irritans, a ciliate parasite of an ornamental reef fish yellowtail tang Zebrasoma xanthurum / Cryptocaryon irritans, parasito ciliado do peixe ornamental de recife “yellowtail tang” Zebrasoma xanthurum

Cryptocaryon irritans is an obligate parasitic ciliate protozoan of wild and cultured marine fish. It causes white spot disease, and infections with this pathogen can cause significant losses for aquarists and commercial marine cultures worldwide. This study reports the occurrence of C. irritans parasitizing the ornamental reef fish, yellowtail tang, Zebrasoma xanthurum. Six days after being introduced to a new environment, 11 yellowtail tangs had white spots scattered across their bodies and fins. Suspicion of infection with C. irritans was evaluated by scraping the skin to confirm clinical diagnosis. After confirmation, the yellowtail tangs were transferred to a hospital aquarium and treated with the therapeutic agent Seachem Cupramine® for 15 days. During the treatment period, the copper concentration was monitored daily. At the end of the treatment, none of the yellowtail tangs showed clinical signs of white spots on their bodies, and skin scraping confirmed the yellowtail tangs were no longer infected. Subsequently, the yellowtail tangs were released for sale.(AU)

Cryptocaryon irritans é um protozoário ciliado parasita obrigatório de peixes marinhos selvagens e cultivados. Causa a doença dos pontos brancos. Infecções por esse patógeno pode causar perdas significativas para aquaristas e para marinocultura comercial em todo o mundo. Este estudo relata a ocorrência de C. irritans parasitando a espécie de peixe ornamental de recife Zebrasoma xanthurum. Seis dias após serem introduzidos no novo ambiente, onze peixes apresentaram pontos brancos espalhados pelo corpo e nadadeiras. Suspeitando de infecção por C. irritans foi realizado raspado de pele para confirmar o diagnóstico clínico. Após a confirmação, os peixes foram transferidos para um aquário hospital e tratados com o agente terapêutico Seachem Cupramine® por 15 dias. Durante o período de tratamento o monitoramento da concentração de cobre foi diário através da utilização de um fotômetro. Após o final do tratamento, todos os peixes já não apresentavam mais sinais clínicos de pontos brancos pelo corpo, e foram negativos no raspado de pele, sendo foram encaminhados para comercialização.(AU)

Dolops carvalhoi as a vector of Epistylis sp. between cultivated and wild specimens of Oreochromis niloticus in Brazil / Dolops carvalhoi como vetor de Epistylis sp. entre espécimes cultivados e silvestres de Oreochromis niloticus no Brasil

Epistyliasis has been characterized as an emergent disease which has a great impact on fish farms, especially on Oreochromis niloticus production systems. Although epidemiological important, information about the dispersion of these parasites and their mechanical vectors is scarce. The present study reported the cooccurrence of Epistylis sp. as an epibiont of Dolops carvalhoi, a parasitic crustacean of cultivated/wild specimens (from accidental release) of O. niloticus from a cage fish farm area in the Ilha Solteira Reservoir, Grande River, SP, Brazil. The co-occurrence of Epistylis sp. and D. carvalhoi, and their epibiont relationship registered in this study suppose that the Epistylis may use the crustaceans for dispersion and as mechanical vectors for the dissemination of diseases in wild and cultivated hosts. Moreover, exchange of parasites between wild and cultivated hosts is possible, considering both organisms (protozoan and argulid). Furthermore, the results of the present study demonstrate the need to monitor the areas adjacent to cage fish farms as a preventive measure for the dispersion of pathogens. This is the first report of epibiosis between Epistylis sp. and argulid parasites of cultivated and wild O. niloticus, contributing to knowledge about host-parasite specificity, geographical distribution, dispersion of etiological agents and epidemiology in aquaculture.(AU)

Epistilíase tem sido caracterizada como uma doença emergente de grande impacto nas pisciculturas, especialmente em sistemas de produção de Oreochromis niloticus. Embora seja importante epidemiologicamente, informações sobre a dispersão desses parasitas e seus vetores mecânicos são escassos. O presente estudo relata a coocorrência de Epistylis sp. como um epibionte de Dolops carvalhoi, um crustáceo parasita de espécimes cultivados e silvestres (de escapes acidentais) de O. niloticus em área de piscicultura de tanques-rede no reservatório de Ilha Solteira, Rio Grande, SP, Brasil. A coocorrência de Epistylis sp. e D. carvalhoi, e sua relação epibionte registrada neste estudo, supõem que Epistylis sp. possa utilizar os crustáceos para dispersão e como vetores mecânicos para a disseminação de doenças em hospedeiros silvestres e cultivados. Além disso, a troca de parasitas entre hospedeiros silvestres e cultivados é possível, considerando ambos os organismos (protozoários e argulídeos). Os resultados deste estudo, também demonstram a necessidade de monitorar as áreas adjacentes às pisciculturas como medida preventiva para a dispersão de patógenos. Este é o primeiro relato de epibiose entre Epistylis sp. e parasitas argulídeos de O. niloticus cultivados e silvestres, contribuindo para o conhecimento da especificidade parasitária do hospedeiro, distribuição geográfica, dispersão de agentes etiológicos e epidemiologia na aquicultura.(AU)

Ciliated microeukaryotes (Alveolata: Ciliophora) of a lotic urban system located in Minas Gerais - Brazil

The phylum Ciliophora is organized in 14 classes with ~8,000 described species ( Gao et al., 2016 ). Among unicellular microeukaryotes, ciliates are the most specialized, diversified and with the highest complexity in terms of cellular organization ( Puytorac, 1994 ). They typically occupy basal trophic levels and display a wide geographical distribution occurring in almost all environments such as marine, fresh and brackish waters, and also in edaphic systems like soils, mosses and lichens ( Lynn, 2008 ). Their diversity in lotic systems have been extensively studied in the northern hemisphere because of their potential use as water quality bioindicators ( Wiackowski, 1981 ; Primc, 1988 ; Groliére et al., 1990; Madoni, 2005 ). However, scarce information is available in literature about their diversity in aquatic ecosystems in Brazil, even though its privileged hydrological condition. The access to ciliate diversity and biogeography is a challenge tasks because they are diminute organisms, difficult to identify ( Finlay and Fenchel, 1999 ), there is a lack of experienced specialists ( Foissner, 2006 ) and a number of species stay encysted for most of their life cycles ( Foissner, 2004 ). In Brazil, significant works were performed with this emphasis such as conducted in Rio Grande do Sul (Safi et al., 2014), Paraná ( Pauleto et al., 2009 ; Buosi et al., 2011 ; Velho et al., 2005 , 2013 ), São Paulo ( Bagantini et al., 2013 ; Regali-Seleghim et al., 2011 ), Pará ( Castro et al., 2014 ), Minas Gerais ( Dias et al., 2008 , 2010 ) and Rio de Janeiro ( Paiva and Silva-Neto, 2004a , b ) states. Inventory studies constitute the first step for development of applied biotechnological usage of ciliates. Regali-Seleghim et al. (2011) highlight the importance of more works surveying the diversity of ciliates in less studied regions of Brazil given their ecological importance. Moreover, establishment of in vitrocultures will contribute with information to biomonitoring programs ( Madoni and Romeo, 2006 ; Shi et al., 2012 ) and for better evaluation of the biotechnological potential of these organisms ( Mansano et al., 2016 ). This present work aimed to survey the diversity of the species of ciliated protists in a neotropical lotic urban system located in Southern region of Minas Gerais state, Brazil.(AU)

Diet and breed alter community structures of rumen protozoa in cattle subjected to different feeding systems / Dieta e raça alteram a estrutura da comunidade de protozoários ruminais em bovinos submetidos a diferentes sistemas de alimentação

The objective were to identify and quantify the rumen protozoa from two genetic groups of beef cattle (Nellore and crossbred European beef cattle) subjected to three feeding systems (pasture, pasture supplement, and confined). Samples of rumen contents were obtained from the center of the ruminal mass after slaughter. Quantification and identification of rumen protozoa were performed with a Sedgewick-Rafter counting chamber by optic microscopy. Data were analyzed using general linear analysis methodology with a Poisson distribution (1 %). In addition, the data underwent of Analisys Principal Component. A effect on ruminal protozoa was observed for the diets and breeds analyzed. Was identified 14 genera, among which Entodinium was predominant in all animals analyzed. Ciliates belonging to Entodiniomorphida, Eodinium, Epidinium, Eremoplastron, Eudiplodinium, Metadinium, and Ostracodinium showed highest density in Nellore animals when compared with the crossbreed, Nellore × European. Larger numbers of protozoa from the family Isotrichidae (Dasytricha and Isotricha) were observed in animals maintained by pasture or pasture supplement feeding. According to the kind of feeding, those fed exclusively with pasture had a greater diversity of ciliates in comparison to those restricted to, or supplemented with pasture. In one animal, the occurrence of ciliates belonging to the genus Buetschlia, was observed (prevalence of 1.66 %), which is one of only a few records of this genusin ruminants.(AU)

O objetivo do presente estudo foi identificar e quantificar os protozoários do rúmen de dois grupos genéticos de bovinos de corte (Nelore e cruzados Nelore x Europeu) submetidos a três sistemas de alimentação (pastagem, pastagem com suplementação e confinado). Amostras do conteúdo ruminal foram obtidas do centro da massa ruminal após o abate. A quantificação e identificação dos protozoários do rúmen foram realizadas por meio de câmara de contagem de Sedgewick-Rafter por microscopia óptica. Os dados foram analisados por meio de metodologia de análise linear geral com distribuição de Poisson (1%). Além disso, os dados foram submetidos à análise de componentes principais. Houve efeito sobre os protozoários ruminais (P < 0,001) para as dietas e raças analisadas. Foram identificados 14 gêneros, dentre os quais, o gênero Entodinium foi predominante em todos os animais analisados. Os ciliados pertencentes a Entodiniomorphida, Eodinium, Epidinium, Eremoplastron, Eudiplodinium, Metadinium e Ostracodinium apresentaram maior densidade em animais Nelore quando comparados com os cruzados Nelore × Europeu. Um maior número de protozoários da família Isotrichidae (Dasytricha e Isotricha) foi observado em animais mantidos por pastagem ou suplemento alimentar. De acordo com o tipo de alimentação, aqueles alimentados exclusivamente com pasto apresentaram maior diversidade de ciliados em comparação àqueles restritos ou suplementados com pastagem. Em umdos animais do experimento, foi observada a ocorrência de ciliados pertencentes ao gênero Buetschlia(prevalência de 1,66%), que é um dos poucos registros desse gênero em ruminantes.(AU)

Using in situ flow cytometry images of ciliates and dinoflagellates for aquatic system monitoring / Usando imagem de citometria de fluxo in situ de ciliados e dinoflagelados para o monitoramento de sistemas aquáticos

Short-period variability in plankton communities is poorly documented, especially for variations occurring in specific groups in the assemblage because traditional analysis is laborious and time-consuming. Moreover, it does not allow the high sampling frequency required for decision making. To overcome this limitation, we tested the submersible CytoSub flow cytometer. This device was anchored at a distance of approximately 10 metres from the low tide line at a depth of 1.5 metres for 12 hours to monitor the plankton at a site in the biological reserve of Barra da Tijuca beach, Rio de Janeiro. Data analysis was performed with two-dimensional scatter plots, individual pulse shapes and micro images acquisition. High-frequency monitoring results of two interesting groups are shown. The abundance and carbon biomass of ciliates were relatively stable, whereas those from dinoflagellates were highly variable along the day. The linear regression of biovolume measures between classical microscopy and in situ flow cytometry demonstrate high degree of adjustment. Despite the success of the trial and the promising results obtained, the large volume of images generated by the method also creates a need to develop pattern recognition models for automatic classification of in situ cytometric images.(AU)

A variabilidade de curto período em comunidades do plâncton é pouco documentada, especialmente as variações que ocorrem em grupos específicos das assembleias por causa das análises tradicionais serem muito trabalhosas e demoradas. Além disso, não permitem que a alta frequência amostral necessária para a tomada de decisão. Para superar esta limitação, nós testamos o CytoSub, um citômetro de fluxo submersível. Este aparelho foi ancorado a aproximadamente 10 metros de distância da linha de maré baixa a uma profundidade de 1,5 metros por 12 horas para monitorar o plâncton em um sítio da reserva biológica da praia da Barra da Tijuca, Rio de Janeiro. A análise dos dados foi realizada a partir de gráficos de dispersão bidimensionais, pelas assinaturas ópticas individuais escaneadas (pulse shape profile) e aquisição de micro imagens. Resultados do monitoramento de alta frequência de dois grupos interessantes são apresentados. A abundância e a biomassa de carbono de um grupo de ciliados foram relativamente estáveis, ao passo que o grupo de dinoflagelado, foi altamente variável ao longo do dia. O modelo de regressão linear das medidas de biovolume entre a clássica microscopia e a citometria de fluxo in situ apresentou alto grau de ajustamento. Apesar do sucesso deste ensaio e dos resultados promissores obtidos, o grande volume de imagens geradas por este método também gerou a necessidade de se desenvolver modelos de reconhecimento de padrões para a classificação automática de imagens de citometria in situ.(AU)

Association of Epistylis spp. (Ciliophora: Peritrichia) with parasitic crustaceans in farmed piava Megaleporinus obtusidens (Characiformes: Anostomidae) / Associação de Epistylis spp. (Ciliophora: Peritrichia) com crustáceos parasitas em piava Megaleporinus obtusidens de cultivo (Characiformes: Anostomidae)

Parasitic diseases have caused significant problems to global aquaculture production. These studies will further our knowledge of this complex problem and help implement adequate prevention measures and control strategies. The present study aimed to investigate the presence of parasites in Megaleporinus obtusidens and to describe the epidemiology and pathology of parasitic infections in these fish. Five moribund fish were sent for parasitological examination. The integument and gills were scrapped off with a glass slide, and samples were examined under a light microscope. Parasitic crustaceans found in these specimens were submitted for scanning electron microscopy and histological analyses. The crustaceans Dolops carvalhoi and Lernaea cyprinacea and the Epistylis spp. were present in all fish examined. Epistylis spp. were also seen on the entire surface of the crustacean integument. Microscopic lesions observed in the parasitized gills included hyperplasia and hypertrophy of the lamellar epithelium, an inflammatory infiltrate, telangiectasia, foci of hemorrhage and necrosis, fusion of the secondary lamellae, and detachment of the lamellar epithelium. Crustacean parasites are important mechanical vectors of Epistylis infection and disseminate the disease in fish farming operations. Epistylis spp. infection affects the health of fish and has significant ecological and economical impact on aquaculture.(AU)

Doenças parasitárias causam problemas significativos a produção mundial de peixes. Esse estudo aprofundará nosso conhecimento neste complexo problema e ajudará implementar estratégias de prevenção e controle. O objetivo deste trabalho foi analisar os parasitas encontrados em Megaleporinus obtusidens de piscicultura extensiva e descrever as relações epidemiológicas e patológicas entre eles. Cinco peixes moribundos foram enviados para análise parasitológica. O tegumento e as brânquias foram raspados com lâminas de vidro e examinados em microscópio óptico. Os crustáceos parasitas foram processados para análises histologicas e de microscopia eletrônica de varredura. Todos os peixes analisados foram infestados pelos crustáceos Dolops carvalhoi, Lernaea cyprinacea e pelo Epistylis spp. Epistylis spp. foram também encontrados na superfície de todo tegumento dos crustáceos parasitas. As brânquias parasitadas apresentaram hiperplasia e hipertrofia do epitélio lamelar, infiltrado inflamatório, telangectasia, focos hemorrágicos e necróticos, extensas áreas com fusão de lamelas secundárias e desprendimento de epitélio lamelar. Os crustáceos parasitas são vetores mecânicos importantes da epistilíase, disseminando o microorganismo nas criações de peixes. A infestação por Epistylis spp. afeta a saúde dos peixes e tem impacto ecológico e econômico significativo na aquacultura.(AU)