Assessment of fetal lung maturity using analysis of amniotic fluid from ewes that gave birth prematurely and at term / Avaliação da maturidade pulmonar fetal utilizando a análise de líquido amniótico de ovelhas que deram à luz prematuramente e a termo

The aim of this study was to evaluate the lung maturity of premature and full-term lambs by analyzing amniotic fluid using the following methods: Clements test, Nile blue cytology test, hematoxylin-Shorr stain, lamellar body count, and radiographic tests. The use of these methods is intended to identify high-risk newborns and provide immediate clinical intervention after birth. Altogether, 56 animals (24 ewes and 32 lambs) were included in the study and divided into 3 groups. Group I consisted of 8 ewes that were at approximately 145 days of gestation; this group delivered 10 lambs naturally. Group II consisted of 8 ewes that were at 138 days' gestation; this group delivered 11 lambs by cesarean section. Group III consisted of 8 ewes at 138 days' gestation; this group was administered intramuscular dexamethasone (16mg/animal) 36 hours prior to a cesarean section. Group III delivered11 lambs. Cytological tests were performed using a microscope with a maximum magnification of 1000x, while the Clements test was visually observed by one of the researchers. Amnioticfluid lamellar body counts were measured using transmission electron microscopy. Among the staining methods, hematoxylin-Shorr was reliable, and Group III had a greater number of orangeophilic cells when compared to Group II, probably due to corticoid administration. The Clements test showed pulmonary maturity in approximately 20% of Group I lambs and Group II showed 9.1% of bubbles; however, Group III had the highest pulmonary maturity percentage (36.4%). The lamellar bodies were measured, and all groups had sizes between 0.019 and 0.590μm. Radiographic evaluation revealed that the majority of lambs presented some level of pulmonary radiodensity, indicating an acinar pattern at birth. These results are in line with the expectations of each group. We found that the normal group showed greater pulmonary maturity, whereas Group II presented pulmonary immaturity, which is expected because this group comprised lambs born prematurely and Group III showed pulmonary maturity almost comparable to the normal delivery group (Group I). This is due to the fact that although these animals are premature, the use of dexamethasone helped in pulmonary maturation. Therefore, these pulmonary maturity tests are considered effective when more than one technique is used and can be used routinely in the care of a pregnant ewe in labor, where a simple collection of amniotic fluid can predict a high-risk pregnancy and alert the veterinarian if the newborn needs intensive supportive treatment.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a maturidade pulmonar de cordeiros prematuros e a termo por meio da análise do líquido amniótico utilizando os seguintes métodos: teste de Clements, teste de citologia do azul do Nilo, coloração de hematoxilina-Shorr, contagem de corpos lamelares e testes radiográficos. Um desses métodos tem por objetivo identificar recém-nascidos de alto risco e fornecer intervenção clínica imediata após o nascimento. Ao todo, 56 animais (24 ovelhas e 32 cordeiros) foram incluídos no estudo e divididos em 3 grupos. O grupo I foi composto por 8 ovelhas com aproximadamente 145 dias de gestação; este grupo deu à luz 10 cordeiros naturalmente. O Grupo II foi composto por 8 ovelhas com 138 dias de gestação; este grupo deu à luz 11 cordeiros por cesariana. Grupo III consistiu de 8 ovelhas com 138 dias de gestação; este grupo recebeu dexametasona intramuscular (16 mg / animal) 36 horas antes de uma cesariana. O Grupo III entregou 11 cordeiros. Os testes citológicos foram realizados em microscópio com aumento máximo de 1000x, enquanto o teste de Clements foi observado visualmente por um dos pesquisadores. A contagem de corpos lamelares de líquido amniótico foi medida usando microscopia eletrônica de transmissão. Dentre os métodos de coloração, o hematoxilina-Shorr foi confiável, sendo que o Grupo III apresentou maior número de células orangeofílicas quando comparado ao grupo II, provavelmente devido à administração de corticóide. O teste de Clements mostrou maturidade pulmonar em aproximadamente 20% dos cordeiros do Grupo I e o Grupo II apresentou 9,1% de bolhas; entretanto, o Grupo III apresentou o maior percentual de maturidade pulmonar (36,4%). Os corpos lamelares foram medidos e todos os grupos apresentaram tamanhos entre 0,019 e 0,590μm. A avaliação radiográfica revelou que a maioria dos cordeiros apresentava algum grau de radiodensidade pulmonar, indicando padrão acinar ao nascimento. Esses resultados estão alinhados com as expectativas de cada grupo. Verificamos que o grupo normal apresentou maior maturidade pulmonar, enquanto o Grupo II apresentou imaturidade pulmonar, o que é esperado por se tratar de cordeiros nascidos prematuramente e o Grupo III apresentou maturidade pulmonar quase comparável ao grupo de parto normal (Grupo I). Isso se deve ao fato de que, embora esses animais sejam prematuros, o uso da dexametasona auxiliou na maturação pulmonar. Portanto, esses testes de maturidade pulmonar são considerados eficazes quando mais de uma técnica são utilizadas e podem ser usadas rotineiramente no cuidado de uma ovelha gestante em trabalho de parto, onde uma simples coleta de líquido amniótico pode prever uma gravidez de alto risco e alertar o veterinário se o recém-nascido precisa de tratamento de suporte intensivo.(AU)

Assessment of fetal lung maturity using analysis of amniotic fluid from ewes that gave birth prematurely and at term / Avaliação da maturidade pulmonar fetal utilizando a análise de líquido amniótico de ovelhas que deram à luz prematuramente e a termo

The aim of this study was to evaluate the lung maturity of premature and full-term lambs by analyzing amniotic fluid using the following methods: Clements test, Nile blue cytology test, hematoxylin-Shorr stain, lamellar body count, and radiographic tests. The use of these methods is intended to identify high-risk newborns and provide immediate clinical intervention after birth. Altogether, 56 animals (24 ewes and 32 lambs) were included in the study and divided into 3 groups. Group I consisted of 8 ewes that were at approximately 145 days of gestation; this group delivered 10 lambs naturally. Group II consisted of 8 ewes that were at 138 days' gestation; this group delivered 11 lambs by cesarean section. Group III consisted of 8 ewes at 138 days' gestation; this group was administered intramuscular dexamethasone (16mg/animal) 36 hours prior to a cesarean section. Group III delivered11 lambs. Cytological tests were performed using a microscope with a maximum magnification of 1000x, while the Clements test was visually observed by one of the researchers. Amnioticfluid lamellar body counts were measured using transmission electron microscopy. Among the staining methods, hematoxylin-Shorr was reliable, and Group III had a greater number of orangeophilic cells when compared to Group II, probably due to corticoid administration. The Clements test showed pulmonary maturity in approximately 20% of Group I lambs and Group II showed 9.1% of bubbles; however, Group III had the highest pulmonary maturity percentage (36.4%). The lamellar bodies were measured, and all groups had sizes between 0.019 and 0.590μm. Radiographic evaluation revealed that the majority of lambs presented some level of pulmonary radiodensity, indicating an acinar pattern at birth. These results are in line with the expectations of each group. We found that the normal group showed greater pulmonary maturity, whereas Group II presented pulmonary immaturity, which is expected because this group comprised lambs born prematurely and Group III showed pulmonary maturity almost comparable to the normal delivery group (Group I). This is due to the fact that although these animals are premature, the use of dexamethasone helped in pulmonary maturation. Therefore, these pulmonary maturity tests are considered effective when more than one technique is used and can be used routinely in the care of a pregnant ewe in labor, where a simple collection of amniotic fluid can predict a high-risk pregnancy and alert the veterinarian if the newborn needs intensive supportive treatment.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a maturidade pulmonar de cordeiros prematuros e a termo por meio da análise do líquido amniótico utilizando os seguintes métodos: teste de Clements, teste de citologia do azul do Nilo, coloração de hematoxilina-Shorr, contagem de corpos lamelares e testes radiográficos. Um desses métodos tem por objetivo identificar recém-nascidos de alto risco e fornecer intervenção clínica imediata após o nascimento. Ao todo, 56 animais (24 ovelhas e 32 cordeiros) foram incluídos no estudo e divididos em 3 grupos. O grupo I foi composto por 8 ovelhas com aproximadamente 145 dias de gestação; este grupo deu à luz 10 cordeiros naturalmente. O Grupo II foi composto por 8 ovelhas com 138 dias de gestação; este grupo deu à luz 11 cordeiros por cesariana. Grupo III consistiu de 8 ovelhas com 138 dias de gestação; este grupo recebeu dexametasona intramuscular (16 mg / animal) 36 horas antes de uma cesariana. O Grupo III entregou 11 cordeiros. Os testes citológicos foram realizados em microscópio com aumento máximo de 1000x, enquanto o teste de Clements foi observado visualmente por um dos pesquisadores. A contagem de corpos lamelares de líquido amniótico foi medida usando microscopia eletrônica de transmissão. Dentre os métodos de coloração, o hematoxilina-Shorr foi confiável, sendo que o Grupo III apresentou maior número de células orangeofílicas quando comparado ao grupo II, provavelmente devido à administração de corticóide. O teste de Clements mostrou maturidade pulmonar em aproximadamente 20% dos cordeiros do Grupo I e o Grupo II apresentou 9,1% de bolhas; entretanto, o Grupo III apresentou o maior percentual de maturidade pulmonar (36,4%). Os corpos lamelares foram medidos e todos os grupos apresentaram tamanhos entre 0,019 e 0,590μm. A avaliação radiográfica revelou que a maioria dos cordeiros apresentava algum grau de radiodensidade pulmonar, indicando padrão acinar ao nascimento. Esses resultados estão alinhados com as expectativas de cada grupo. Verificamos que o grupo normal apresentou maior maturidade pulmonar, enquanto o Grupo II apresentou imaturidade pulmonar, o que é esperado por se tratar de cordeiros nascidos prematuramente e o Grupo III apresentou maturidade pulmonar quase comparável ao grupo de parto normal (Grupo I). Isso se deve ao fato de que, embora esses animais sejam prematuros, o uso da dexametasona auxiliou na maturação pulmonar. Portanto, esses testes de maturidade pulmonar são considerados eficazes quando mais de uma técnica são utilizadas e podem ser usadas rotineiramente no cuidado de uma ovelha gestante em trabalho de parto, onde uma simples coleta de líquido amniótico pode prever uma gravidez de alto risco e alertar o veterinário se o recém-nascido precisa de tratamento de suporte intensivo.(AU)

Evaluation of pulmonary maturity in bovine neonates: analysis of amniotic fluid

ABSTRACT: Considering the representativeness of dairy cattle in our country, the concern about the mortality rates of the animals increases each time. Regarding to calf mortality, the Respiratory Distress Syndrome (RDS) has an important relevance during the neonatal period, and it is present in immature lungs. The amniotic fluid is in direct contact with the fetus, and it is able to offer evidence about his maturity. The aim of this study was to standardize the characteristics of the amniotic fluid, color, aspect, viscosity, quantification of lamellar body and surfactant evaluation by the Clements test and cytology, of term-born, mature and healthy calves. There were used 50 Black and White Holstein calves, which mothers were observed at calving in order to collect the amniotic fluid by puncture in the moment of exposure of the fetal membrane through the vaginal canal. Most amniotic fluid had a clear and hazy appearance due to varying degrees of viscosity and the presence or absence of clots. The Clements test could be adapted to the bovine species by the modification consisting in the addition of 3mL of amniotic fluid and 1mL of 95% ethanol. The methodology of the lamellar body count by the automated particle counter is not applicable for the bovine because of the small size of their lamellar body. The Nile Blue staining is unsatisfactory on predicting fetal maturity on the bovine species, different from cytology using Hematoxylin-Shorr stain. The presence of orange cells, increase in large amounts at the end of pregnancy. The cell stained orange counting, cells which are found in great amounts at the end of pregnancy. The present study stablished new parameters for evaluation of fetal and pulmonary maturity in the bovine species.

RESUMO: O objetivo desse estudo foi reunir novos dados práticos sobre a avaliação da maturidade pulmonar em neonatos bovinos, padronizando as características do líquido amniótico de bezerros maduros e hígidos, o que proporcionará a oportunidade de tratamento precoce dos animais prematuros, evitando prejuízos econômicos, principalmente quando consideramos os animais de alto valor genético. Amostras de líquido amniótico foram coletadas de 50 vacas da Raça Holandesa Preta e Branca. Corpos lamelares foram identificados por microscopia eletrônica de transmissão como estruturas de tamanho aproximado de 130nm, o que impede sua contagem em analisadores automáticos. O teste de Clements sofreu adaptações de técnica e se mostrou viável com a diluição de 3mL de líquido amniótico em 1mL de etanol a 95%. A citologia utilizando o método de Hematoxilina-Shorr, diferentemente do teste de Azul de Nilo, foi eficaz na identificação das células orangiofílicas, indicativas de maturidade fetal. Esses métodos mostraram-se originais e úteis ferramentas para a avaliação de maturidade pulmonar na espécie bovina, porém estudos com bezerros prematuros ainda são necessários.

Evaluation of pulmonary maturity in bovine neonates: analysis of amniotic fluid / Avaliação maturidade pulmonar em neonatos bovinos: análise do líquido amniótico

Considering the representativeness of dairy cattle in our country, the concern about the mortality rates of the animals increases each time. Regarding to calf mortality, the Respiratory Distress Syndrome (RDS) has an important relevance during the neonatal period, and it is present in immature lungs. The amniotic fluid is in direct contact with the fetus, and it is able to offer evidence about his maturity. The aim of this study was to standardize the characteristics of the amniotic fluid, color, aspect, viscosity, quantification of lamellar body and surfactant evaluation by the Clements test and cytology, of term-born, mature and healthy calves. There were used 50 Black and White Holstein calves, which mothers were observed at calving in order to collect the amniotic fluid by puncture in the moment of exposure of the fetal membrane through the vaginal canal. Most amniotic fluid had a clear and hazy appearance due to varying degrees of viscosity and the presence or absence of clots. The Clements test could be adapted to the bovine species by the modification consisting in the addition of 3mL of amniotic fluid and 1mL of 95% ethanol. The methodology of the lamellar body count by the automated particle counter is not applicable for the bovine because of the small size of their lamellar body. The Nile Blue staining is unsatisfactory on predicting fetal maturity on the bovine species, different from cytology using Hematoxylin-Shorr stain. The presence of orange cells, increase in large amounts at the end of pregnancy. The cell stained orange counting, cells which are found in great amounts at the end of pregnancy. The present study stablished new parameters for evaluation of fetal and pulmonary maturity in the bovine species.(AU)

O objetivo desse estudo foi reunir novos dados práticos sobre a avaliação da maturidade pulmonar em neonatos bovinos, padronizando as características do líquido amniótico de bezerros maduros e hígidos, o que proporcionará a oportunidade de tratamento precoce dos animais prematuros, evitando prejuízos econômicos, principalmente quando consideramos os animais de alto valor genético. Amostras de líquido amniótico foram coletadas de 50 vacas da Raça Holandesa Preta e Branca. Corpos lamelares foram identificados por microscopia eletrônica de transmissão como estruturas de tamanho aproximado de 130nm, o que impede sua contagem em analisadores automáticos. O teste de Clements sofreu adaptações de técnica e se mostrou viável com a diluição de 3mL de líquido amniótico em 1mL de etanol a 95%. A citologia utilizando o método de Hematoxilina-Shorr, diferentemente do teste de Azul de Nilo, foi eficaz na identificação das células orangiofílicas, indicativas de maturidade fetal. Esses métodos mostraram-se originais e úteis ferramentas para a avaliação de maturidade pulmonar na espécie bovina, porém estudos com bezerros prematuros ainda são necessários.(AU)

Evaluation of pulmonary maturity in bovine neonates: analysis of amniotic fluid / Avaliação maturidade pulmonar em neonatos bovinos: análise do líquido amniótico

Considering the representativeness of dairy cattle in our country, the concern about the mortality rates of the animals increases each time. Regarding to calf mortality, the Respiratory Distress Syndrome (RDS) has an important relevance during the neonatal period, and it is present in immature lungs. The amniotic fluid is in direct contact with the fetus, and it is able to offer evidence about his maturity. The aim of this study was to standardize the characteristics of the amniotic fluid, color, aspect, viscosity, quantification of lamellar body and surfactant evaluation by the Clements test and cytology, of term-born, mature and healthy calves. There were used 50 Black and White Holstein calves, which mothers were observed at calving in order to collect the amniotic fluid by puncture in the moment of exposure of the fetal membrane through the vaginal canal. Most amniotic fluid had a clear and hazy appearance due to varying degrees of viscosity and the presence or absence of clots. The Clements test could be adapted to the bovine species by the modification consisting in the addition of 3mL of amniotic fluid and 1mL of 95% ethanol. The methodology of the lamellar body count by the automated particle counter is not applicable for the bovine because of the small size of their lamellar body. The Nile Blue staining is unsatisfactory on predicting fetal maturity on the bovine species, different from cytology using Hematoxylin-Shorr stain. The presence of orange cells, increase in large amounts at the end of pregnancy. The cell stained orange counting, cells which are found in great amounts at the end of pregnancy. The present study stablished new parameters for evaluation of fetal and pulmonary maturity in the bovine species.(AU)

O objetivo desse estudo foi reunir novos dados práticos sobre a avaliação da maturidade pulmonar em neonatos bovinos, padronizando as características do líquido amniótico de bezerros maduros e hígidos, o que proporcionará a oportunidade de tratamento precoce dos animais prematuros, evitando prejuízos econômicos, principalmente quando consideramos os animais de alto valor genético. Amostras de líquido amniótico foram coletadas de 50 vacas da Raça Holandesa Preta e Branca. Corpos lamelares foram identificados por microscopia eletrônica de transmissão como estruturas de tamanho aproximado de 130nm, o que impede sua contagem em analisadores automáticos. O teste de Clements sofreu adaptações de técnica e se mostrou viável com a diluição de 3mL de líquido amniótico em 1mL de etanol a 95%. A citologia utilizando o método de Hematoxilina-Shorr, diferentemente do teste de Azul de Nilo, foi eficaz na identificação das células orangiofílicas, indicativas de maturidade fetal. Esses métodos mostraram-se originais e úteis ferramentas para a avaliação de maturidade pulmonar na espécie bovina, porém estudos com bezerros prematuros ainda são necessários.(AU)

Avaliação da maturidade pulmonar de cabritos nascidos a termo e prematuros pela análise citológica, teste de Clements e contagem de corpos lamelares do líquido amniótico

O objetivo do estudo foi avaliar a maturidade pulmonar de cabritos, por meio do teste de Clements, da análise citológica pela coloração de Azul de Nilo e Shorr, e da contagem de corpos lamelares no líquido amniótico de cabras. Utilizando- se também a avaliação do escore Apgar, dos parâmetros vitais, dos valores glicêmicos e de lactato, dos parâmetros hemogasométricos, dos valores de cortisol, de hemoglobina e volume globular, bem como os achados radiográficos de cabritos nascidos a termo e prematuros. Obtendo-se assim uma avaliação completa quanto ao grau de maturidade pulmonar desses animais. Para tanto, foram utilizados 44 animais (20 cabras e 24 cabritos), divididos em três grupos, a saber: Grupo I: constituído por oito cabras, com gestação de 149 dias, e por oito cabritos nascidos de cesarianas; grupo II: composto por seis cabras, com 143 dias de gestação, e por oito cabritos nascidos de cesarianas; e, grupo III : constituído por seis cabras com 143 dias de gestação e que receberam 20mg/cabra de dexametasona, por via intramuscular, 36 horas antes da cirurgia eletiva, e por oito cabritos delas nascidos. Foi observado que a citologia pela coloração de Shorr, assim como o a contagem de corpos lamelares mostraram ser meios diagnósticos eficazes para a avaliação da maturidade pulmonar em neonatos caprinos. Enquanto o teste de Clements modificado no presente estudo, apresentou um alto índice de resultados inconclusivos. As análises clínicos-laboratoriais evidenciaram que os animais do presente estudo estavam perfeitamente adaptados as 48 horas de vida, ao meio extrauterino. Cabritos com idade gestacional de 143 dias são perfeitamente viáveis, contrariando o relato de alguns autores. O tratamento materno com dexametasona não mostrou resultados significativos em relação à maturidade fetal nos cabritos do presente estudo.

The study aimed to evaluate lung maturity of goat kids using Clements test, cytologic analysis through Nile Blue and Shorr staining, and lamellar body count from the amniotic fluid of goat does. In addition, evaluation of Apgar score, vital parameters, blood glucose and lactate, blood gas parameters, cortisol, hemoglobin and packed cell volume, as well as radiographic findings of full-term and premature goat kids were carried out in order to obtain a complete assessment of the degree of lung maturity of these animals. Forty-four animals (20 does and 24 kids) were enrolled in the study and divided into three groups: Group I: constituted by eight does with 149 days of gestation, and eight kids delivered by cesarean section; Group II: constituted by six does with 143 days of gestation, and eight kids delivered by cesarean section; and Group III: constituted by six does with 143 days of gestation, which received intramuscular dexamethasone (20mg/doe) 36 hours prior to elective cesarean section, and their eight kids. It was observed that the staining of cytological Shorr, as well as the a count of lamellar bodies found to be effective diagnostic tools for assessing the lung maturity in goats neonates. While the shake test modified in this study showed a high rate of inconclusive results. The clinical-laboratory tests showed that the animals in this study were perfectly adapted to the 48 hours of life, in half extrauterino. Goats with gestational age of 143 days are perfectly feasible, contrary to the reports of some authors. Maternal treatment with dexamethasone did not show significant results in relation to fetal maturity in goats in this study.

MATURIDADE PULMONAR E FETAL DE BEZERROS DA RAÇA HOLANDESA PRETA E BRANCA RECÉM-NASCIDOS, A TERMO E HÍGIDOS: ANÁLISE DO LÍQUIDO AMNIÓTICO

Considerando a representatividade da bovinocultura de leite em nosso país, a preocupação com índices de mortalidade dos animais torna-se cada vez maior. No que se refere à mortalidade em bezerros, a Síndrome de Angústia Respiratória (SAR) tem importante relevância no período perinatal, sendo causada pela inadequada produção do surfactante no pulmão imaturo. Animais advindos de técnicas como fertilização in vitro e clonagem são acometidos pela SAR com maior frequência, assim como neonatos prematuros. O líquido amniótico encontra-se em contato íntimo com o feto, podendo fornecer indícios de sua maturidade. O objetivo deste estudo foi padronizar as características do líquido amniótico - coloração, aspecto, viscosidade, avaliação dos corpos lamelares e do surfactante presente pelo teste de Clements e citologia - de bezerros nascidos a termo, maduros, hígidos e com vitalidade comprovadas por escore Apgar, exame físico geral e medidas de coluna, amplitude respiratória (expansão torácica) e pH sanguíneo. Para tal finalidade, foram utilizados 50 bezerros da raça Holandesa Preta e Branca, cujas mães tiveram o parto acompanhado para colheita do líquido amniótico por punção no momento da exposição da bolsa fetal no canal vaginal. O líquido amniótico apresentou coloração clara e com turvação decorrente de variados graus de viscosidade e presença ou ausência de grumos. O teste de Clements foi adaptado à espécie bovina por meio de modificação caracterizada pela adição de 3mL de líquido amniótico em 1mL de etanol 95%. A metodologia de contagem de corpos lamelares no contador de partículas automático (hematológico) não foi aplicável à espécie bovina devido ao pequeno tamanho do corpo lamelar, que apresentou diâmetro aproximado de 130nm. O teste do Azul de Nilo não foi satisfatório para predizer a maturidade fetal na espécie bovina, diferentemente da citologia usando a coloração de HematoxilinaShorr, que se mostrou eficiente para a contagem das células orangiofílicas, que atingem grande proporção no final da gestação. Medidas do comprimento de coluna e da amplitude torácica são úteis para o clínico que deseja avaliar a maturidade fetal, dentro de um conjunto de ferramentas utilizadas com esta finalidade. O presente trabalho estabeleceu novos parâmetros de avaliação da maturidade fetal e pulmonar para a espécie bovina, porém são necessários mais estudos para que os conhecimentos sobre o amadurecimento fetal no âmbito da Medicina Veterinária evoluam a patamares semelhantes aos da Medicina.

Considering the representativeness of dairy cattle in our country, the concern about the mortality rates of the animals increases each time. Regarding to calf mortality, the Respiratory Distress Syndrome (RDS) has an important relevance during the neonatal period, and it is present in immature lungs. The amniotic fluid is in direct contact with the fetus, and it is able to offer evidence about his maturity. The aim of this study was to standardize the characteristics of the amniotic fluid color, aspect, viscosity, lamellar body and presence of surfactant evaluation by the Clements test and cytology of term-born, mature, healthy calves and with proved vitality by the Apgar score, general physical exam and measurement of the spinal column and respiratory amplitude (thoracic expansion). There were used 50 Black and White Holstein calves, which mothers were observed at calving in order to collect the amniotic fluid by puncture in the moment of exposure of the fetal membrane through the vaginal canal. The amniotic fluid had a clear color and it was hazy because of the different degrees of viscosity and the presence or absence of clots. The Clements test could be adapted to the bovine species by the modification consisting in the addition of 3mL of amniotic fluid and 1mL of 95% ethanol. The methodology of the lamellar body count by the automated particle counter is not applicable for the bovine because of the small size of their lamellar body. The Nile Blue staining is unsatisfactory on predicting fetal maturity on the bovine species, different from cytology using Hematoxylin-Shorr stain. The cell stained orange counting, cells which are found in great amounts at the end of pregnancy. Measurements of the spine and thoracic amplitude are useful for the clinician who wants to evaluate fetal maturity, within a set of tools used with this purpose. The present study stablished new parameters for evaluation of fetal and pulmonary maturity in the bovine species.

USO DO TESTE DE CLEMENTS MODIFICADO E DENSIDADE ÓPTICA DO LÍQUIDO AMNIÓTICO E ALANTOIDEANO PARA AVALIAÇÃO DA MATURIDADE PULMONAR EM CÃES

O feto prematuro não sobrevive à vida extra-uterina devido à imaturidade de órgãos vitais, como os pulmões. O objetivo desse trabalho foi avaliar a maturidade pulmonar pelo teste de Clements modificado e densidade óptica dos fluidos fetais. Foram avaliadas 40 amostras de líquidos amniótico e alantoideano colhidos durante a cesariana de 16 cadelas. Ajustes realizados no teste de Clements permitiram a análise dos líquidos fetais na espécie canina, promovendo resultados confiáveis (p 0,05) para as diluições gradativas (de 0,9mL a 0,6mL) com etanol a 95%. Na densidade óptica (DO) dos líquidos fetais foram encontrados valores médios de 0,220±0,190 para o amniótico e 0,250±0,02 para o alantoideano, sendo indicativo de maturidade pulmonar, visto que são superiores a 0,150, valor proposto na medicina humana como indicativo de maturidade do orgão. Portanto, conclui-se que informações básicas sobre a maturidade e a viabilidade do feto canino podem ser avaliadas pelo teste de Clements modificado e densitometria óptica dos fluidos fetais. Palavras-chave: maturidade, fluidos fetais, canino. USE OF CLEMENTS  MODIFIED TEST AND OPTICAL DENSITY IN AMNIOTIC AND ALLANTOID FLUIDS FOR EVALUATION OF PULMONARY MATURITY IN DOGSABSTRACT  The premature fetus cannot survive in the extra uterine life due to immaturity of vital organs like the lungs. The aim of this study was to assess lung maturity

Uso do teste de clements modificado e densidade óptica do líquido amniótico e alantoideano para avaliação da maturidade pulmonar em cães

O feto prematuro não sobrevive à vida extra-uterina devido à imaturidade de órgãos vitais, como os pulmões. O objetivo desse trabalho foi avaliar a maturidade pulmonar pelo teste de Clements modificado e densidade óptica dos fluidos fetais. Foram avaliadas 40 amostras de líquidos amniótico e alantoideano colhidos durante a cesariana de 16 cadelas. Ajustes realizados no teste de Clements permitiram a análise dos líquidos fetais na espécie canina, promovendo resultados confiáveis (p 0,05) para as diluições gradativas (de 0,9mL a 0,6mL) com etanol a 95%. Na densidade óptica (DO) dos líquidos fetais foram encontrados valores médios de 0,220±0,190 para o amniótico e 0,250±0,02 para o alantoideano, sendo indicativo de maturidade pulmonar, visto que são superiores a 0,150, valor proposto na medicina humana como indicativo de maturidade do orgão. Portanto, conclui-se que informações básicas sobre a maturidade e a viabilidade do feto canino podem ser avaliadas pelo teste de Clements modificado e densitometria óptica dos fluidos fetais. Palavras-chave: maturidade, fluidos fetais, canino. USE OF CLEMENTS  MODIFIED TEST AND OPTICAL DENSITY IN AMNIOTIC AND ALLANTOID FLUIDS FOR EVALUATION OF PULMONARY MATURITY IN DOGSABSTRACT  The premature fetus cannot survive in the extra uterine life due to immaturity of vital organs like the lungs. The aim of this study was to assess lung maturity

Aspectos fisiológicos da maturidade fetal em cães

O feto prematuro não sobrevive à vida extra-uterina devido a imaturidade de órgãos vitais como os pulmões e rins. O objetivo desse trabalho foi avaliar a maturidade renal através da identificação de proteínas de baixa massa molecular; pulmonar através da citologia com azul de Nilo (0,1%), teste de Clements modificado e densidade óptica dos fluidos; alfa-fetoproteína através da eletroforese em SDS-PAGE (12%) e concentração de cortisol nos líquidos fetais por radioimunoensaio. Foram obtidas 40 amostras de líquido amniótico e alantoideano de 16 cadelas gestantes pela cesariana. Ajustes no teste de Clements favorecem a análise de fluidos caninos promovendo resultados confiáveis (p<0,05) para as diluições. Células morfologicamente diferentes e com porcentagem de células orangeofílicas e cianofílicas refletem a maturidade pulmonar sugerindo feto em estágio de pós-maturidade. Na densidade óptica (DO) dos líquidos fetais encontramos 220l0,190 para os líquidos amniótico e 0,250l0,02 para o alantoideano sendo indicativo de maturidade (= 0,150). A concentração proteica nos fluidos estudados reflete a fisiologia fetal (p<0,05). A dosagem de cortisol indica a exposição do feto no ambiente uterino (p<0,05). A IOD da banda protéica de 66kDa foi de 15,94 para o líquido amniótico e 13,3 para o alantoideano. Cinco bandas proteicas presentes nos dois fluidos podem espelhar a maturidade renal (32; 30; 28; 20 e 12). Com base nestes dados conclui-se que a obtenção de informações básicas sobre a maturidade e viabilidade do feto canino podem ser avaliada com os testes propostos

The premature fetus is unable to survive in extra-uterine environment due to immaturity of its vital organs as the lungs and kidneys. The objective of this work was to evaluate the renal maturity through the identification of low molecular mass proteins; pulmonary maturity through the cytology with Nile blue (0,1%), modified Clements test and optic density of fluids; moreover, the alpha-fetoprotein was evaluated through electrophoresis using SDS-PAGE (12%); and the cortisol concentration from fetal liquids was determinated by radioimunoassay. Forty amniotic and allantoic liquid samples from 16 pregnant bitches were colleted by punction during cesarean section. The Clements test was adapted to canine fluid analysis to promote true results (p<0,05) for the diluitions. Cells morphologically and with percentage of different orangeo and cyanophilia cells reflect the maturity. The optic density (DO) of the fetal fluids liquids were 220l0,190 and 0,250l0,02 to the amniotic and allantoic liquid, respectively, indicating maturity (= 0,150). The protein concentractions reflect the fetal physiology (p<0,05) in evaluated fluids. The cortisol concentration indicates the fetal exposition in the uterine environment (p<0,05). The IOD of 66 kDa protein band was 15,94 to amniotic and 13,30 to allantoic liquid. Five protein band in two fluids can reflect the renal maturity (32; 30; 28; 20 e 12). Based in these results we conclude that the tests considered in the study can evaluate the maturity and viability of canine fetus