Resumo

Avian pathogenic Escherichia coli (APEC) induces colibacillosis, an acute and systemic disease, resulting in substantial economic losses in the poultry sector. This study aimed to investigate the antibiotic resistance pattern associated with frequent virulence gene distribution in APEC O78:K80 that may cause pathological alterations in chickens. The antibiogram profile showed high resistance to erythromycin, chloramphenicol, tetracycline, ampicillin, and co-trimoxazole, followed by intermediate resistance to ciprofloxacin, levofloxacin, enrofloxacin, norfloxacin, nitrofurantoin, and doxycycline hydrochloride, and sensitive to amikacin, streptomycin, gentamicin, and colistin. Virulence gene distribution identifies eight (irp-2, iutA, ompT, iss, iucD, astA, hlyF, iroN) genes through a conventional polymerase chain reaction. APEC O78:K80 caused significantly high liver enzyme concentrations, serum interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha levels in experimental birds. Also, infected birds have hypoproteinemia, hypoalbuminemia, and hyperglobulinemia. Necropsy examination revealed fibrinous perihepatitis and pericarditis, congested lungs, intestinal ecchymotic hemorrhages and necrotizing granulomatosis of the spleen. Histopathological examination depicted hepatocellular degeneration, myocardial necrosis, interstitial nephritis, intestinal hemorrhages and lymphopenia in the spleen. This study is the first evidence to assess the antibiotic resistance profile linked with virulence genes and clinicopathological potential of APEC O78:K80 in chickens in Pakistan, which could be a useful and rapid approach to prevent and control the disease by developing the control strategies.

A Escherichia coli patogênica aviária (APEC) induz a colibacilose, uma doença aguda e sistêmica, resultando em perdas econômicas substanciais no setor avícola. Este estudo teve como objetivo investigar o padrão de resistência a antibióticos associado à frequente distribuição de genes de virulência em APEC O78:K80 que podem causar alterações patológicas em galinhas. O perfil do antibiograma mostrou alta resistência à eritromicina, cloranfenicol, tetraciclina, ampicilina e cotrimoxazol; resistência intermediária à ciprofloxacina, levofloxacina, enrofloxacina, norfloxacina, nitrofurantoína e cloridrato de doxiciclina; e sensível à amicacina, estreptomicina, gentamicina e colistina . A distribuição de genes de virulência identificou oito genes (irp-2, iutA, ompT, iss, iucD, astA, hlyF e iroN) por meio de uma reação em cadeia da polimerase convencional. A APEC O78:K80 causou concentrações significativamente altas de enzimas hepáticas, níveis séricos de interleucina-6 e fator de necrose tumoral alfa em aves experimentais. Além disso, aves infectadas apresentaram hipoproteinemia, hipoalbuminemia e hiperglobulinemia. O exame de necropsia revelou peri-hepatite e pericardite fibrinosa, pulmões congestos, hemorragias equimóticas do intestino e granulomatose necrosante do baço. O exame histopatológico mostrou degeneração hepatocelular, necrose miocárdica, nefrite intersticial, hemorragias intestinais e linfopenia no baço. Este estudo é a primeira evidência para avaliar o perfil de resistência a antibióticos associado a genes de virulência e potencial clínico-patológico de APEC O78:K80 em galinhas no Paquistão, o que pode ser uma abordagem útil e rápida para prevenir e controlar a doença por meio do desenvolvimento de estratégias de controle.

Resumo

ABSTRACT: Avian colibacillosis is an acute and globally occurring infectious disease of domestic and wild birds caused by Escherichia coli, and it is associated with considerable economic losses mainly due to the morbidity and mortality associated. The present study aimed to describe the pathological, bacteriological and immunohistochemical aspects of avian colibacillosis in broiler chickens of Mozambique. Forty-nine broiler chicken presented anorexia, decreased weight gain, ataxia, diarrhea, dyspnea, and death in a clinical course of 3-5 days. The birds were raised in five farms (small, medium and large farms) with manual and automatic breeding system, with flocks ranging from 100 to 20,000 birds. At the necropsy, all birds had poor body condition, and the pericardium and the Glissons capsule of all avian exhibited different degrees of adherence often associated with severe fibrin deposition. The thoracic and abdominal air sacs were thickened and adhered to the costal wall. Mild, moderate or marked hepatomegaly associated with white pinpoint multifocal areas (100%, 49/49) and mild to moderate splenomegaly in 75.5% (37/49) with a mottled surface were observed. The lungs and kidney were enlarged and reddish. Histologically, a multiorgan fibrinoheterophilic polyserositis was observed in 75.5% of the cases (37/49), which were characterized by inflammatory infiltrates composed mainly of degenerative heterophils, macrophages and plasma cells, associated with fibrin deposits and intermixed by coccobacillary bacterial basophilic aggregates. These affected mainly the pericardium (28.6%, 14/49), the pleura (18.4%, 9/49), the Glissons capsule (10.2%, 5/49), the ventriculus (10.2, 5/33), and the proventriculus (8.2%, 4/49) serosa. Multifocal to coalescing areas of coagulative necrosis associated with similar inflammatory cells were observed mainly in the spleen (28.6%, 14/49), liver (24.5%, 12/49), and intestines (22.4%, 11/49). A similar infiltrate was also observed affecting the the lungs (16.3%, 8/49), the kidney (16.3%, 8/49) and the myocardium (14.3%, 7/49). Isolation and identification of E. coli was obtained in 12 cases through bacterial culture. Some organs (2 cases of each farms) were selected and submitted to immunohistochemistry anti-E. coli, and a positive stain was observed in all tested cases in liver (3/3), heart (4/4), spleen (1/1), lungs (4/4), intestines (4/4), bursa of Fabricius (1/1), ventriculus (1/1), and proventriculus (1/1) tissue sections. These results demonstrate that E. coli was the cause of mortality in these birds. Therefore, biosecurity and management measures should be employed to prevent and control the disease occurrence in Mozambiques poultry farming.

RESUMO: A colibacilose aviária é uma doença aguda de ocorrência mundial que acomete aves domésticas e silvestres, causada por Escherichia coli e resulta em perdas econômicas consideráveis devido à elevada morbidade e mortalidade das aves. O presente estudo teve o objetivo de descrever os aspectos patológicos, bacteriológicos e imuno-histoquímicos de colibacilose aviária em frangos de corte de Moçambique. Um total de 49 frangos de corte apresentaram anorexia, baixo ganho de peso, ataxia, diarreia, dispneia e morte em um curso clínico de 3 a 5 dias. As aves eram provenientes de 5 granjas (pequenas, média e grandes), com sistema de criação manual e automático, com rebanhos que variavam de 100 a 20.000 aves. À necropsia, todas as aves exibiam condição corporal ruim a caquética, além de pericárdio e cápsula de Glisson de todas aves (100%; n=49) com diferentes graus de aderência e deposição de fibrina de forma difusa acentuada. Os sacos aéreos torácicos e abdominais estavam espessados e aderidos à parede costal. Foi observado ainda hepatomegalia discreta, moderada a severa frequentemente associada com áreas multifocais puntiformes brancacentas (100%; 49/49), e esplenomegalia discreta a moderada, associado a áreas multifocais moteadas (75,5%; 37/49). Os pulmões e rins estavam aumentados e com coloração avermelhada. Histologicamente, observou-se majoritariamente serosite fibrinoheterofílica em 75,5% dos casos (37/49), caracterizadas por infiltrado inflamatório composto por heterófilos degenerados, macrófagos, linfócitos e plasmócitos, com deposição de fibrina entremeada por uma miríade de estruturas bacterianas cocobacilares. Esta lesão foi observada principalmente em pericárdio (28,6%; 14/49), pleura (18,4%; 9/49), cápsula de Glisson (10,2%; 5/49), ventrículo (10,2; 5/33) e em proventrículo (8,2%; 4/49). Áreas multifocais a coalescentes de necrose de coagulação associada a infiltrado inflamatório semelhante ao descrito foi observado principalmente no baço (28,6%; 14/49), fígado (24.5%; 12/49), e intestinos (8,2%; 4/49). Um infiltrado inflamatório semelhante também foi visualizado em pulmões (16,3%; 8/49), rins (16,3%; 8/49) e miocárdio (14,3%; 7/49), Colônias puras de E. coli foram identificadas e isoladas em 12 casos. Alguns órgãos (2 de cada granja) foram submetidos ao exame imuno-histoquímico anti-E. coli e marcação positiva foi visualizada em todos casos testados, como em fígado (3/3), coração (4/4), baço (1/1), pulmão (4/4), intestinos (4/4), bursa de Fabricius (1/1), rim (1/1), ventrículo (1/1) e proventrículo (1/1). Estes resultados demonstram que E. coli foi a causa de morte destas aves. Sendo assim, a adoção de boas medidas de biosseguridade e de manejo são indispensáveis para a prevenção e controle da ocorrência da doença nas granjas de frango de corte de Moçambique.

Resumo

Avian colibacillosis is an acute and globally occurring infectious disease of domestic and wild birds caused by Escherichia coli, and it is associated with considerable economic losses mainly due to the morbidity and mortality associated. The present study aimed to describe the pathological, bacteriological and immunohistochemical aspects of avian colibacillosis in broiler chickens of Mozambique. Forty-nine broiler chicken presented anorexia, decreased weight gain, ataxia, diarrhea, dyspnea, and death in a clinical course of 3-5 days. The birds were raised in five farms (small, medium and large farms) with manual and automatic breeding system, with flocks ranging from 100 to 20,000 birds. At the necropsy, all birds had poor body condition, and the pericardium and the Glisson's capsule of all avian exhibited different degrees of adherence often associated with severe fibrin deposition. The thoracic and abdominal air sacs were thickened and adhered to the costal wall. Mild, moderate or marked hepatomegaly associated with white pinpoint multifocal areas (100%, 49/49) and mild to moderate splenomegaly in 75.5% (37/49) with a mottled surface were observed. The lungs and kidney were enlarged and reddish. Histologically, a multiorgan fibrinoheterophilic polyserositis was observed in 75.5% of the cases (37/49), which were characterized by inflammatory infiltrates composed mainly of degenerative heterophils, macrophages and plasma cells, associated with fibrin deposits and intermixed by coccobacillary bacterial basophilic aggregates. These affected mainly the pericardium (28.6%, 14/49), the pleura (18.4%, 9/49), the Glisson's capsule (10.2%, 5/49), the ventriculus (10.2, 5/33), and the proventriculus (8.2%, 4/49) serosa. Multifocal to coalescing areas of coagulative necrosis associated with similar inflammatory cells were observed mainly in the spleen (28.6%, 14/49), liver (24.5%, 12/49), and intestines (22.4%, 11/49). A similar infiltrate was also observed affecting the the lungs (16.3%, 8/49), the kidney (16.3%, 8/49) and the myocardium (14.3%, 7/49). Isolation and identification of E. coli was obtained in 12 cases through bacterial culture. Some organs (2 cases of each farms) were selected and submitted to immunohistochemistry anti-E. coli, and a positive stain was observed in all tested cases in liver (3/3), heart (4/4), spleen (1/1), lungs (4/4), intestines (4/4), bursa of Fabricius (1/1), ventriculus (1/1), and proventriculus (1/1) tissue sections. These results demonstrate that E. coli was the cause of mortality in these birds. Therefore, biosecurity and management measures should be employed to prevent and control the disease occurrence in Mozambique's poultry farming.(AU)

A colibacilose aviária é uma doença aguda de ocorrência mundial que acomete aves domésticas e silvestres, causada por Escherichia coli e resulta em perdas econômicas consideráveis devido à elevada morbidade e mortalidade das aves. O presente estudo teve o objetivo de descrever os aspectos patológicos, bacteriológicos e imuno-histoquímicos de colibacilose aviária em frangos de corte de Moçambique. Um total de 49 frangos de corte apresentaram anorexia, baixo ganho de peso, ataxia, diarreia, dispneia e morte em um curso clínico de 3 a 5 dias. As aves eram provenientes de 5 granjas (pequenas, média e grandes), com sistema de criação manual e automático, com rebanhos que variavam de 100 a 20.000 aves. À necropsia, todas as aves exibiam condição corporal ruim a caquética, além de pericárdio e cápsula de Glisson de todas aves (100%; n=49) com diferentes graus de aderência e deposição de fibrina de forma difusa acentuada. Os sacos aéreos torácicos e abdominais estavam espessados e aderidos à parede costal. Foi observado ainda hepatomegalia discreta, moderada a severa frequentemente associada com áreas multifocais puntiformes brancacentas (100%; 49/49), e esplenomegalia discreta a moderada, associado a áreas multifocais moteadas (75,5%; 37/49). Os pulmões e rins estavam aumentados e com coloração avermelhada. Histologicamente, observou-se majoritariamente serosite fibrinoheterofílica em 75,5% dos casos (37/49), caracterizadas por infiltrado inflamatório composto por heterófilos degenerados, macrófagos, linfócitos e plasmócitos, com deposição de fibrina entremeada por uma miríade de estruturas bacterianas cocobacilares. Esta lesão foi observada principalmente em pericárdio (28,6%; 14/49), pleura (18,4%; 9/49), cápsula de Glisson (10,2%; 5/49), ventrículo (10,2; 5/33) e em proventrículo (8,2%; 4/49). Áreas multifocais a coalescentes de necrose de coagulação associada a infiltrado inflamatório semelhante ao descrito foi observado principalmente no baço (28,6%; 14/49), fígado (24.5%; 12/49), e intestinos (8,2%; 4/49). Um infiltrado inflamatório semelhante também foi visualizado em pulmões (16,3%; 8/49), rins (16,3%; 8/49) e miocárdio (14,3%; 7/49), Colônias puras de E. coli foram identificadas e isoladas em 12 casos. Alguns órgãos (2 de cada granja) foram submetidos ao exame imuno-histoquímico anti-E. coli e marcação positiva foi visualizada em todos casos testados, como em fígado (3/3), coração (4/4), baço (1/1), pulmão (4/4), intestinos (4/4), bursa de Fabricius (1/1), rim (1/1), ventrículo (1/1) e proventrículo (1/1). Estes resultados demonstram que E. coli foi a causa de morte destas aves. Sendo assim, a adoção de boas medidas de biosseguridade e de manejo são indispensáveis para a prevenção e controle da ocorrência da doença nas granjas de frango de corte de Moçambique.(AU)

Resumo

A alimentação é uma condição básica para a manutenção da vida do ser humano e um direito garantido a todo cidadão. Além disso, passou a ser um item de prazer para a sociedade, sendo muito comum a busca de novos produtos e sabores que saciem o paladar por algo diferente e a saúde humana. Por essa razão, existem políticas nacionais e uma grande preocupação das empresas alimentícias com a segurança de alimentos, visto que a contaminação, principalmente microbiana, converte-os em veiculadores de agentes que originam infecções ou intoxicações no homem, ocasionando as Doenças Transmitidas por Alimentos (DTAs). A carne bovina tem papel relevante na ocorrência dessas doenças devido à sua composição rica em nutrientes, alta atividade de água e pH favorável. A Escherichia coli é uma importante bactéria causadora de DTA, a colibacilose, e merece especial atenção do governo e da indústria, principalmente a cepa STEC (ou VTEC). A carne pode ser contaminada em qualquer ponto da sua linha de produção: na criação dos animais, no abate, no processamento e no varejo. Conhecer como e os principais pontos em que ocorre essa contaminação é essencial para traçar medidas profiláticas contra esse microrganismo e garantir a segurança do alimento ao consumidor.

Food is a basic condition for the maintenance of human life and a guaranteed right to all citizens. Also, food has became a pleasure item to society, being common in the search for new products and flavors that satisfy the taste for something new and human health. For this reason, there are national policies and a great concern of food companies to food safety, seen that contaminated food, mainly microbial, converts them into carriers that originate infections or intoxications in human beings, causing foodborne diseases. Beef has an important role in the occurrence of diseases due to their composition rich in nutrients, water activity and pH. Escherichia coli is an important cause of food poisoning, colibacillosis, and deserves a special concern from the government and industry, mainly the STEC (or VTEC). Beef can be contaminated anywhere on the production line: animal breeding, slaughter, processing, and retail. Knowing how and the main points where the contamination occurs is essential to outline prophylactics measures against this microorganism and guarantee food safety to the consumer.

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A família das Enterobacteriaceae possui destacado espaço na avicultura, sendo a Escherichia coli um destes micro-organismos. A E. coli patogênica para aves é responsável pela colibacilose, desenvolvendo diversos sintomas extra-intestinais. Diante disto, o presente estudo buscou relatar achados anatomopatológicos em necrópsia realizada em pintainhas, com idade entre cinco e sete dias, oriundos de criatório da cidade de Primavera do Leste, Mato Grosso, com posterior cultivo bacteriano e identificação bioquímica. Os sinais clínicos relatados foram apatia, asas caídas, penas arrepiadas e diarreia. Os principais achados patológicos foram edema hepático com pontos necróticos esbranquiçados, vesícula biliar edemaciada, inflamação necrótica dos intestinos delgado e grosso, onfalite, pontos necróticos no mesentério e baço congesto. O cultivo bacteriano foi realizado em ágar Cled, MacConkey e CHROMID® CPS® Elite. Para confirmação do agente, foram remetidas amostras para identificação bioquímica e antibiograma, através de swab de transporte contendo meio Stuart, que confirmaram a presença de dois agentes: E. coli e Enterobacter cloacae, sendo o primeiro o mais provável como agente etiológico causador da enfermidade caracterizada pelos sintomas observados. A colibacilose gera diversas perdas para a cadeia produtiva, além de possuir caráter zoonótico. Assim, medidas profiláticas devem ser empregadas para controle do agente dentro do criatório.

The Enterobacteriaceae family has a prominent space in poultry farming, with Escherichia coli being one of these microorganisms. The pathogenic E. coli for poultry is responsible for colibacillosis, developing several extraintestinal symptoms. In view of this, the present study sought to report anatomopathological findings in necropsy performed on chicks, aged between five and seven days, from a nursery in the city of Primavera do Leste, Mato Grosso, with subsequent bacterial culture and biochemical identification. The reported clinical signs were apathy, drooping wings, creepy feathers, and diarrhea. The main pathological findings were hepatic edema with whitish necrotic spots, edemaciate gallbladder, necrotic inflammation of the small and large intestines, omphalitis, necrotic points in the mesentery and spleen congestion. Bacterial culture was performed on Cled, MacConkey and CHROMID® CPS® Elite agar. To confirm the agent, samples were sent for biochemical identification and antibiogram, through a transport swab containing Stuart medium, which confirmed the presence of two agents, E. coli and Enterobacter cloacae, the first one being the most probable as the etiological agent causing the infection. Disease characterized by the observed symptoms. Colibacillosis generates several losses for the productive chain, besides having a zoonotic character. Thus, prophylactic measures should be employed to control the agent within the laboratory.

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Objetivou-se identificar as principais causas de condenação de aves em um abatedouro frigorífico localizado no sul do estado de Mato Grosso do Sul. Os dados foram coletados a partir dos registros do Serviço de Inspeção Federal, com a quantificação das lesões encontradas e o destinado dado às carcaças, divididas em condenação parcial e total. Das aves abatidas entre janeiro de 2011 a dezembro de 2016, 9,08% apresentaram alguma lesão que levou à condenação post-mortem, sendo 8,05% condenações parciais e 1,03% condenações totais. Dentre o total de condenações a que prevaleceu foi a parcial (88,69%) e 11,31%, condenação total. As causas mais frequentes para a condenação parcial foram contusão/fratura (39,14%), aerossaculite (13,34%) e dermatose (11,92%). Já as causas de condenação total mais frequentes foram colibacilose (28,31%), aspecto repugnante (24,79%) e síndrome ascítica (11,39%).

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Enteric diseases of bacterial origin are frequent in the pig industry, of particular notoriety are the colibacillosis that mainly affect piglets and cause great damage to the swine industry worldwide. The aim of the study was to analyze phylogenetics, to detect biofilm production, and to determine antimicrobial resistance profile in 126 strains of Escherichia coli isolated from swabs obtained from fragments of the small intestines of 235 healthy pigs killed in slaughterhouses in Pernambuco (Brazil) using polymerase chain reaction (PCR), adherence to microplates test and disc diffusion technique. Of the analyzed samples, 88.10% (111/126) were classified in phylogenetic group B1; 4.76% (6/126) in group D; 3.97% (5/126) in group B2 and, 3.17% (4/126) in group A. Antimicrobial resistance rates observed were: lincomycin 100% (126/126), erythromycin 100% (126/126), chlortetracycline 94.44% (119/126), cephalothin 51.59% (65/126), ampicillin 38.89% (49/126), sulfamethoxazole + trimethoprim 37.3% (47/126), ciprofloxacin 19.84% (25/126), norfloxacin 14.29% (18/126), gentamicin 8.73% (11/126) and, chloramphenicol 5.55% (7/126). Multiple antibiotic resistance (MAR) ranged from 0.2 to 0.9. Of the strains tested 46.03% (58/126) produced biofilm, and 99.21% (125/126) of the strains exhibited multi-resistance. Further studies are required to elucidate the importance of each phylogenetic group in pigs and to prevent the propagation of multi-resistant E. coli strains.(AU)

Doenças entéricas de origem bacteriana são frequentes na indústria de suínos, destacando-se a colibacilose, que afeta principalmente leitões e causa grandes danos à indústria suína em todo o mundo. Cento e vinte e seis cepas de Escherichia coli foram isoladas de swabs obtidos de fragmentos de intestino delgado de 235 suínos saudáveis abatidos em matadouros de Pernambuco (Brasil). O objetivo do presente estudo foi analisar filogeneticamente essas cepas, bem como detectar a produção de biofilme e determinar o perfil de resistência antimicrobiana delas, utilizando-se a reação em cadeia da polimerase (PCR), o teste de adesão em microplacas e a técnica de disco-difusão. 88,10% (111/126) das amostras foram classificadas no grupo filogenético B1; 4,76% (6/126) no grupo D; 3,97% (5/126) no grupo B2; e 3,17% (4/126) no grupo A. As taxas de resistência antimicrobiana observadas foram: lincomicina 100% (126/126), eritromicina 100% (126/126), clortetraciclina 94,44% (119/126), cefalotina 51,59% (65/126), ampicilina 38,89% (49/126), sulfametoxazol + trimetoprima 37,3% (47/126), ciprofloxacina 19,84% (25/126), norfloxacina 14,29% (18/126), gentamicina 8,73% (11/126) e cloranfenicol 5,55% (7/126). O índice de resistência múltipla (IRMA) variou de 0,2 a 0,9. Entre as amostras, 46,03% (58/126) produziram biofilme e 99,21% (125/126) foram multirresistentes. São necessários mais estudos para elucidar a importância de cada grupo filogenético em suínos e evitar a propagação de estirpes de E. coli multirresistentes.(AU)

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Brazil is the largest exporter of beef of the world and Mato Grosso State is the highest beef producer in this country. To maintain product competitiveness and market expansion, sanitary hygienic control of the entire process is indispensable to ensure the attainment of harmless beef and quality. The objective of this study was to evaluate the hygienic sanitary conditions of vacuum-packed beef produced by establishments qualified for export in the state of Mato Grosso, Brazil. A total of 60 samples were submitted to coliforms counts at 35°C and at 45°C and E. coli. The mean contamination by at 35°C and coliforms at 45°C were 3,1 x 102MPN/g and 7.7MPN/g respectively. The presence of E. coli was verified in five samples, representing an occurrence of 8.3% (5/60), and Salmonella spp. in 5% (03/60) of the analyzed samples. The MPN (Most Probable Number) average of coliforms at 35°C and 45°C are in accordance to national and international legislation; however, the presence of Samonella spp., E. coli in some sample indicates a low risk of occurrence of salmonellosis and colibacillosis transmitted by the evaluated beef. However, transmission risk of these diseases cannot be ruled out, since the presence of E. coli does not depend on the amount of coliforms and national legal standards established for the group of thermotolerant coliforms.

O Brasil é o maior exportador de carne bovina do mundo e Mato Grosso é o maior produtor de carne bovina do país. Para manter a competitividade do produto e a expansão do mercado, o controle higiênico sanitário de todo o processo é indispensável para garantir a obtenção de carne inócua e de qualidade. O objetivo desse estudo foi avaliar as condições higiênico sanitárias da carne bovina resfriada embalada a vácuo, não maturada produzida por estabelecimentos detentores de Serviço de Inspeção Federal (SIF) no estado de Mato Grosso. Um total de 60 amostras foram submetidas a contagem de coliformes à 35°C, coliformes à 45°C, pesquisa de E. coli e Salmonella spp. A contaminação média por coliformes à 35°C e coliformes à 45°C da carne bovina mato-grossense inspecionada pelo SIF foi 3,1 x 102NMP/g e 7,7NMP/g, respectivamente. A presença de E. coli foi verificada em cinco amostras o que representou uma ocorrência de 8,3% (5/60) e Salmonella spp. em 5% (3/60). Foi avaliado que a média NMP de coliformes à 35°C e à 45°C atende a legislação nacional e internacional, no entanto, a verificação da presença de Salmonella spp., E. coli em algumas amostras, evidenciou um baixo risco de ocorrência de salmonelose ou colibacilose transmitidas pela carne. Ainda assim, não se pode descartar o risco de veiculação dessas doenças, uma vez que a presença de E. coli independe da quantidade de coliformes e dos padrões legais nacionais estabelecidos para o grupo dos coliformes termotolerantes.

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Current study determines the population of total coliforms and Escherichia coli and identifies iss and iutA virulence genes in Escherichia coli strains isolated from cellulitis in poultry carcasses retrieved from a slaughterhouse. One hundred cellulitis lesions were collected between August 2013 and January 2014. The population of total coliforms and Escherichia coli was verified by Petrifilm rapid counting method (AOAC 998.8). Escherichia coli samples were analyzed for iss and iutA genes by Polymerase Chain Reaction (PCR) technique. Total coliforms were present in 96.0% (96/100) of the analyzed samples, with a population between 3.4 and 9.5 log CFU/g. Escherichia coli was present in 82.0% (82/100) of cellulitis samples and the population ranged between 1.0 and 9.0 log CFU/g. The iss gene was found in 89.0% of isolates and the iutA gene in 97.6%. High populations of total coliforms and Escherichiacoli in cellulitis samples indicate that hygienic-sanitary failures may have occurred in the production of broilers. When high prevalence of virulence genes under analysis, characteristic of Avian Pathogenic Escherichia coli (APEC) and possible zoonotic character of the pathotype are taken into account, it is important to highlight the need to adopt Good Manufacturing Practices, Standard Procedures of Operational Hygiene and Hazard Analysis and Critical Control Points in poultry slaughterhouses to ensure the safety of the final product.

Objetivou-se determinar a população de coliformes totais e de Escherichia coli e identificar os genes de virulência iss e iutA nas cepas de Escherichia coli isoladas de celulites em carcaças de frangos em um abatedouro. No periodo de agosto de 2013 a janeiro de 2014 foram coletadas 100 lesões de celulite, sendo verificada a população de coliformes totais e Escherichia coli, pelo método rápido de contagem Petrifilm (AOAC 998.8). As amostras de Escherichia coli foram analisadas para verificar a presença dos genes iss e iutA, utilizando a técnica de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Houve a presença de coliformes totais em 96,0 % (96/100) das amostras analisadas, com a população entre 3,4 a 9,5 log UFC/g. Constatou-se também a presença de Escherichia coli em 82,0 % (82/100) das amostras de celulite, com população entre 1,0 e 9,0 log UFC/g. O gene iss foi encontrado em 89,0 % dos isolados e o gene iutA em 97,6 %. As populações elevadas de coliformes totais e de Escherichia coli nas amostras de celulite indicam que falhas higiênico-sanitárias podem ter ocorrido na produção dos frangos de corte. Considerando a prevalência elevada dos genes de virulência pesquisados, característicos de Escherichia coli Patogênica para Aves (APEC) e o possível caráter zoonótico deste patotipo, é importante ressaltar a necessidade da adoção das Boas Práticas de Fabricação, Procedimentos Padrão de Higiene Operacional e da Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle nos abatedouros, para garantir a inocuidade do produto final.

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Esta revisão apresenta os aspectos epidemiológicos da bactéria Escherichia coli produtora da toxina shiga, (STEC) que é reconhecida no mundo todo como agente causador de toxinfecção. Os produtos de origem animal são frequentemente associados aos surtos da doença, mas os alimentos hortifrutigranjeiros também podem ser contaminados e causar toxinfecção em seus consumidores. A incidência da infecção em humanos no Brasil (STEC) é baixa, foi observada essa prevalência nos rebanhos bovinos, ovinos e aves. Por isso, a importância das boas práticas de manipulação do produtor e do consumidor para evitar possível contaminação dos alimentos. Este trabalho teve por objetivo revisar a literatura sobre a ocorrência de Escherichia coli produtora da toxina shiga. Frente aos limitados estudos realizados sobre os agentes etiológicos, novos estudos fazem-se necessários.

This review presents the aspects of shiga toxin-producing Escherichia coli, which are recognized worldwide as toxinfection agents in the world. Products of animal origin are often associated with outbreaks of disease, but horticultural crops can be contaminated and cause toxinfection as well. This study aims to review the literature on the occurrence of shiga toxin-producing Escherichia coli. The incidence of infection in humans in Brasil by STEC and low, prevalence was observed in cattle, sheep and poultry. Therefore, the importance of good practices of manipulation of the producer and the consumer to avoid possible food contamination. Faced with the limited studies of etiological agents, it is necessary to study the subject.

Resumo

A colibacilose é a principal causa infecciosa de condenação total de carcaça em frangos de corte no sul do Brasil. Esse trabalho tem por objetivo determinar o grau de concordância entre a condenação total por colibacilose de frangos de corte abatidos em estabelecimento sob Serviço de Inspeção Federal (SIF) com o diagnóstico anatomopatológico e bacteriológico. O estudo foi realizado com 45 frangos de corte condenados totalmente por colibacilose (caso) e seus respectivos 45 controles (frangos sem lesões). Em todos os frangos condenados pelo SIF havia lesões macroscópicas e, nos controles não se observou. Através do teste Kappa-Cohen´s essas duas variáveis apresentaram concordância quase perfeita. As aves condenadas apresentaram lesões em fígado (27/45); em fígado e sacos aéreos (11/45); em fígado e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e coração (2/45); fígado, sacos aéreos e oviduto (1/45); fígado, sacos aéreos, coração e tecido subcutâneo (1/45); e fígado, sacos aéreos, oviduto e baço (1/45). Observou-se concordância quase perfeita entre condenação e lesão hepática. Histologicamente, em 41 casos e 12 controles observaram-se lesões, sendo os mais frequentes hepatite necrosante aleatória, bronquite fibrino-heterofílica, pericardite aguda e traqueíte linfoplasmocitária. Nas aves com hepatite identificou-se E. coli, Enterococcus sp. e Streptococcus sp. (10/38) e, nas aves com bronquite ou broncopneumonia isolou-se Escherichia coli e Staphylococcus coagulase positiva (9/14). O PCR em tempo real e a imuno-histoquímica para Mycoplasma gallisepticum e M. synoviae foram negativos. Nos casos de condenação total por colibacilose o fígado foi o principal órgão acometido, portanto, o critério de condenação deveria ser revisto, sugerindo condenação por hepatite nesses casos, já que outras bactérias podem causar hepatite, como foi demonstrado nesse estudo.(AU)

Colibacillosis is the main infectious cause of total carcass condemnation in broilers in southern Brazil. This study aims to determine the degree of agreement between the total carcass condemnation for colibacillosis in broilers slaughtered in establishments under Federal Inspection Service (SIF) with the pathological and bacteriological diagnosis. The study was conducted with 45 broilers totally condemned by colibacillosis (case) and theirs 45 respective controls (chickens without lesions). All broilers condemned had gross lesions and the controls had not. The Kappa-Cohen's test showed that these two variables had almost perfect agreement. Broilers condemned showed lesions in liver (27/45); liver and air sacs (11/45); liver and heart (2/45); liver, heart and air sacs (2/45); liver, air sacs and oviduct (1/45); liver, air sacs, heart and subcutaneous (1/45); and liver, air sacs, oviduct and spleen (1/45). There is almost perfect agreement between carcass condemnation and liver damage. Histologically, in 41 cases and 12 controls were observed lesions, the most frequent diagnoses were random necrotizing hepatitis, fibrinous-heterophilic bronchitis, acute pericarditis and lymphoplasmacytic tracheitis. In hepatitis cases was isolated Escherichia coli, Enterococcus sp. and Streptococcus sp. (10/38) and in bronchitis or bronchopneumonia E. coli and coagulase positive Staphylococcus (9/14). The polymerse chain reaction (PCR) and immunohistochemistry (IHC) tests for Mycoplasma gallisepticum and M. synoviae were negative. In cases of total carcass condemnation by Colibacillosis the liver was the main organ affected. Therefore, the condemnation criteria should be revised, suggesting conviction for hepatitis in these cases, because other bacteria can cause hepatitis, as demonstrated in this study.(AU)

Resumo

This study reports a co-infection of Escherichia coli and Salmonella in a free-living ruddy ground dove (Columbina talpacoti) received at the Laboratory of Ornithological Studies of the State University of Ceará, Brazil. The bird presented diarrhea, leg paralysis and anorexia, and died shortly after. Necropsy was then performed and samples from lung, kidney, liver and intestine were collected for microbiological and histopathological analyses. Escherichia coli was isolated from cloacal swab, lung and kidney samples. Salmonella ser. Saintpaul was identified in liver and spleen samples. Escherichia coli isolates were tested for the presence of eight diagnostic genes for diarrheagenic pathotypes (STEC, ETEC, EPEC, EIEC, EAEC) with conventional polymerase chain reaction (PCR). EAEC was detected in the lung and kidney, and STEC in the intestine. In conclusion, Columbina talpacoti is susceptible to enteroaggregative Escherichia coli and Salmonella ser. Saintpaul infection, which may have public health implications.(AU)

Este estudo relata um caso de coinfecção por Escherichia coli e Salmonella ser. Saintpaul em uma rolinha-roxa (Columbina talpacoti) recebida pelo Laboratório de Estudos Ornitológicos da Universidade Estadual do Ceará, Brasil. A ave apresentava diarreia, paralisia nas pernas e anorexia, indo a óbito rapidamente. A necropsia foi realizada e amostras de pulmão, rim, fígado e intestino foram coletados para isolamento microbiológico e análise histopatológica. Escherichia coli foi identificada em amostras de suabe cloacal, pulmão e rim. Salmonella ser. Saintpaul foi identificada no fígado e baço. Isolados de E. coli foram testados para a presença de oito genes de diagnóstico para patotipos diarreiogênicos (STEC, ETEC, EPEC, EIEC, EAEC) através de reação em cadeia de polimerase (PCR) convencional. EAEC foi detectada no pulmão e rim, e STEC foi identificada no intestino. Em conclusão, Columbina talpacoti é suscetível a infecção por Escherichia coli enteroagregativa e Salmonella ser. Saintpaul, o que pode implicar em risco para a saúde pública.(AU)

Resumo

The role of Escherichia coli in healthy microbiota of psittacine is controversial, and the presence of Salmonella sp. indicates possible disease. Therefore, this study aimed to identify the presence of E. coli and Salmonella spp. in a psittacine pet that died in Fortaleza, Brazil, correlating pathogenicity aspects of the isolates through the evaluation of lesions and antimicrobial susceptibility. Psittacine pets sent to the Laboratory of Ornithological Studies, State University of Ceará, that died in 2014 and 2015 were necropsied. Fragments of liver, kidneys, intestine, lung, heart, spleen and brain were collected for microbiological and histopathological analyses. Scores were attributed to lesions and isolated strains submitted to antimicrobial susceptibility test. From the seventy necropsied birds, nineteen were positive for E. coli and one for Salmonella Typhimurium. Congestive lesions and lymphoplasmocitic inflammatory infiltrate were observed varying from light to moderate and were the main findings. In the analyzed strains, multidrug resistance against different groups of antibiotics was observed. In conclusion, according to the results, E. coli strains and the Salmonella Typhimurium isolate produced significant lesions in the psittacine pets, and multidrug resistance may hinder treatments with antibiotics used in avian pet medicine.(AU)

A participação de Escherichia coli na microbiota saudável de Psicittaciformes e a de Salmonella spp. já indica possível doença. O objetivo deste estudo foi pesquisar a presença de E. coli e Salmonella spp. em psittaciformes de companhia na cidade de Fortaleza/Ceará, traçando os aspectos de patogenicidade destas cepas através das lesões e da sensibilidade antimicrobiana. Foram necropsiados os psittaciformes de companhia encaminhados ao Laboratório de Estudos Ornitológicos da Universidade Estadual do Ceará durante o período de 2014 a 2015. No momento da necropsia foram coletados fragmentos de fígado, rins, intestino, pulmão, coração, baço e encéfalo para posterior processamento microbiológico e histopatológico. As lesões foram graduadas e as cepas isoladas submetidas a antibiograma. Das setenta aves necropsiadas, dezenove foram positivas para E. coli e apenas uma para Salmonella Typhimurium. As lesões de congestão e infiltrado inflamatório linfoplasmocitário variaram de leve a moderado, e foram as principais lesões encontradas. Nas cepas analisadas foi constatada multiresistência a diferentes grupos de antibióticos testados. De acordo com os achados, pode-se concluir que os isolados de E. coli e Salmonella Typhimurium produziram lesões significativas em psittaciformes em Fortaleza, Brasil, e a multirresistência pode dificultar o tratamento com antibióticos usados na clínica de aves de companhia.(AU)

Resumo

A domesticação de cães e gatos tornou a convivência do homem cada vez mais próxima e afetuosa com estes animais. Nos últimos anos, a forte interação da sociedade com os animais de companhia, faz com que a atenção á sanidade dos mesmos seja despercebida. Dentre as inúmeras doenças que merecem destaque, a colibacilose é uma doença infectocontagiosa que acomete inúmeras espécies de animais e o homem. Devido a sua importância, Escherichia coli é considerada uma das espécies mais estudada em medicina humana e veterinária. Embora seja um microrganismo comensal da microbiota entérica dos mamíferos domésticos, outros vertebrados e o homem, algumas amostras de E. coli apresentam diferentes mecanismos e fatores de virulência que alteram os processos celulares, tornando-se potencialmente patogênicas, essas linhagens são divididas em duas categorias: entéricas e extraentéricas. O uso arbitrário de antimicrobianos vem impactado diretamente no surgimento de bactérias resistentes. Neste contexto, a E. coli tem favorecido o aumento da resistência e multirresistência aos antimicrobianos, que podem ser responsáveis por falhas de tratamento em humanos e na medicina veterinária. Devido a sua versatilidade e potencial patogênico, a E. coli também afeta animais de companhia, levando a desordens entéricas e geniturinárias. O estreito vínculo entre animais de companhia e seres humanos propiciam a possibilidade de compartilhamento de microrganismos entre as espécies, e, desta forma, vem se discutindo o papel do animal de estimação como sentinelas de resistência no ecossistema humano, podendo adquirir ou compartilhar para o homem E. coli patogênicas ou multirresistentes a antimicrobianos. O objetivo desde trabalho foi caracterizar isolados de E. coli provenientes de amostras de fezes de cães e gatos, enviadas para coproparasitológico a um laboratório particular na cidade de BotucatuSP. Após o isolamento e identificação, foi realizado a caracterização dos fatores de virulência das amostras e submetidas ao teste de susceptibilidade bacteriana e teste de aproximação dos discos (Double-Disk Screening) para a triagem de E. coli com beta-lactamase de espectro estendido (ESBL). Foram analisados 102 isolados de E. coli provenientes de cães e gatos, desses 30,4% (31/102) pertenciam ao filogrupo A, 25,5% (26/102) pertenciam ao filogrupo B2, 18,6% (19/102) ao F, 15,7% (16/102) ao filogrupo D, 3,9% ao B1 (4/102) e C (4/102) e 2% (2/102) ao E. Diante disso, de acordo com os resultados apresentados, conclui-se que, foi possível detectar isolados de E. 9 coli dos patotipos STEC (E. coli shigatoxigênica) e EHEC (E. coli entero-hemorrágica) com diferentes perfis fenotípicos de resistência e de filogrupos distintos. O encontro de isolados multirresistentes, com perfil de betalactamase estendida e isolados multirresistentes, inclusive ao ertapenem em amostras enviadas para diagnóstico coproparasitológico servem de alerta para uma melhor condução no uso de antibióticos e um lembrete aos técnicos e veterinários que fazem o coproparasitológico que mantenham as medidas de biossegurança e de higiene pessoal.

The domestication of dogs and cats made the coexistence of man closer and affectionate with these animals. In recent years, the strong interaction of society with companion animals, makes the attention to their health go unnoticed. Among the numerous diseases that deserve to be highlighted, colibacillosis is an infectious disease that affects many species of animals and man. Due to its importance, Escherichia coli is considered one of the most studied species in human and veterinary medicine. Although it is a commensal microorganism of the enteric microbiota of domestic mammals, other vertebrates and man, some E. coli samples have different mechanisms and virulence factors that alter cellular processes, becoming potentially pathogenic, these strains are divided into two categories: enteric and extraenteric. The arbitrary use of antimicrobials has a direct impact on the emergence of resistant bacteria. In this context, E. coli has favored the increase in resistance and multidrug resistance to antimicrobials, which may be responsible for treatment failures in humans and veterinary medicine. Due to its versatility and pathogenic potential, E. coli also affects companion animals, leading to enteric and genitourinary disorders. The close bond between companion animals and human beings provides the possibility of sharing microorganisms between species, and, in this way, the role of the pet as sentinels of resistance in the human ecosystem, being able to acquire or share for man, has been discussed. E. coli pathogenic or multiresistant to antimicrobials. The objective of this work was to characterize E. coli isolates from samples of feces of dogs and cats, sent for coproparasitology to a private laboratory in the city of Botucatu-SP. After isolation and identification, the virulence factors of the samples were characterized and submitted to the bacterial susceptibility test and the disk approach test (Double-Disk Screening) to screen for E. coli with extended-spectrum betalactamase. (ESBL). A total of 102 E. coli isolates from dogs and cats were analyzed, of which 30.4% (31/102) belonged to phylogroup A, 25.5% (26/102) belonged to phylogroup B2, 18.6% (19/ 102) to F, 15.7% (16/102) to phylogroup D, 3.9% to B1 (4/102) and C (4/102) and 2% (2/102) to E. Therefore, according to the results presented, it was concluded that it was possible to detect E. coli isolates of the STEC (Shiga toxin-producing E. coli) and EHEC (Enterohaemorrhagic E. coli) pathotypes with different phenotypic profiles of resistance and different phylogroups. The finding of multidrug-resistant isolates, with an extended beta-lactamase profile, and multidrug- 11 resistant isolates, including ertapenem in samples sent for coproparasitological diagnosis, serve as an alert for better management in the use of antibiotics and a reminder to technicians and veterinarians who perform coproparasitological measures to maintain the measures biosafety and personal hygiene.

Resumo

In this study, avian extraintestinal Escherichia coli obtained from the liver of poultry carcasses approved for human consumption in the State of Pernambuco-Brazil were tested for antibiotic plus serum-resistance. Liver samples (n=110) were obtained from one slaughterhouse and 88 bacterial isolates were identified as Escherichia coli. The antibiotic-resistance profiles of antibiotics used in human and/or veterinary practice were accessed by the disk-diffusion method. Phenotypes with high resistance to streptomycin (84.0%), tetracycline (44.7%), amikacin (29.8%), gentamicin (21.3%) and ciprofloxacin (21.3%) were identified. Resistance to antibiotics such as ceftazidime, amoxicillin-clavulanic acid and imipenem was also recorded. Twenty isolates with distinct antibiotic-resistance and susceptibility profiles were selected for serum resistance assays, phylogenetic characterization and detection of the iss gene. We have shown that multidrug resistant isolates were often simultaneously resistant to broiler and human sera. Phylogenetic characterization of serum- plus antibiotic-resistant isolates have shown three belonging to group D, eleven to group B1, one to group B2, and five to group A. We concluded that commensal E. coli strains isolated from the liver of healthy poultry carcasses can harbor and potentially share multidrug- plus virulence genes found in pathogenic pathotypes. This suspicion was not related to specific phylogenetic groups or presence of the iss gene.(AU)

Neste estudo, isolados de Escherichia coli extraintestinal aviária obtidos a partir do fígado de carcaças de aves aprovadas para consumo humano no Estado de Pernambuco-Brasil foram testados para resistência a antibióticos e soro. As amostras de fígado (n = 110) foram obtidas de um abatedouro, sendo 88 isolados bacterianos identificados como Escherichia coli. Os perfis de resistência a antibióticos de uso humano e/ou veterinário foram determinados pelo método de disco-difusão. Foram identificados fenótipos com alta resistência à estreptomicina (84,0%), tetraciclina (44,7%), amicacina (29,8%), gentamicina (21,3%) e ciprofloxacina (21,3%). A resistência a antibióticos utilizados na medicina humana e/ou veterinária, tais como a ceftazidima, amoxicilina-ácido clavulânico, estreptomicina e imipenem também foi registrada. Vinte amostras com perfis distintos de resistência/sensibilidade a antibióticos foram selecionadas para os ensaios de resistência ao soro, caracterização filogenética e detecção do gene iss. Foi demonstrado que isolados resistentes a múltiplas drogas foram também simultaneamente resistentes ao soro de frangos e ao soro humano. A caracterização filogenética desses isolados mostraram três pertencentes ao grupo D, onze ao grupo B1, um ao grupo B2 e cinco ao grupo A. Conclui-se que E. coli comensais isoladas do fígado de carcaças de aves saudáveis podem abrigar e potencialmente compartilhar genes de resistência a drogas e de virulência encontrados em patotipos patogênicos. Essa suspeita não foi relacionada com grupos filogenéticos específicos ou com a presença do gene iss.(AU)

Resumo

A colibacilose aviária é uma doença bacteriana que causa elevados prejuízos na avicultura de todo o mundo. O objetivo deste estudo é descrever os aspectos patológicos, moleculares e bacteriológicos da colibacilose em frangos de corte e em galinhas provenientes de Moçambique e Brasil, respectivamente. O trabalho foi dividido em dois artigos. O primeiro descreve a colibacilose em 49 frangos de três a 35 dias e o segundo faz a pesquisa dos genes de virulência em 15 amostras de frangos e oito de galinhas poedeiras provenientes de Moçambique e Brasil, respectivamente, que vieram a óbito após e submetidos a necropsia para coleta de diversos órgãos para processamento histológico, microbiológico, imuno-histoquímico e molecular. Macroscopicamente, em frangos foi observado deposição acentuada de fibrina principalmente no coração [100% (49/49)], fígado [100% (49/49)], rins [8,2% (4/49)] e pulmão [18,4% (9/49)]. Na histologia, a lesão prevalente foi serosite fibrinoheterofílica entremeada em fibrina e acompanhada por agregados bacterianos cocobacilares. Em galinhas poedeiras foi observado durante a necropsia desidratação, palidezda crista, bem como aumento difuso do baço e material friável amarelado na luz intestinal. Microscopicamente, a enterite fibrinoheterofílica associado à fibrina, macrófagos e ocasionais células gigantes multinucleadas e plasmócitos foi a lesão mais prevalente. Na microbiologia, foram isoladas colônias puras de Escherichia coli em frangos [24,5% (12/49)] e galinhas poedeiras [12,5% (1/8)], com acentuada marcação positiva na imunohistoquímica para anticorpo anti-Escherichia coli em amostras de frango em amostras de frango analisadas. Foi realizada a reação em cadeia de polimerase (PCR) multiplex para pesquisa de cinco genes de virulência de E. coli onde houve positividade em 80% (12/15) de frangos de corte e 62,5% (5/8) em galinhas. Com os resultados obtidos, concluiu-se que a colibacilose foi a causa da morte dos frangos e das galinhas em estudo infectadas por cepas patogênicas resistentes e multirresistentes para vários antimicrobianos apesar destas terem proveniência bem como manejo diferente.

Colibacillosis is a bacterial disease that causes high economic losses in the poultry industry worldwide. The aimed of this study is describe the pathological, molecular and bacteriological aspects of colibacillosis in broiler chickens and in layers from Mozambique and Brazil, respectively. The study was separated in two papers. The first describe the disease in Forty-nine broiler chickens with 3 to 35 days, the second paper screams virulance genes in fifteen poultry and in eight layer samples from Mozambique and Brazil repectively that died and necropsied to histologic, microbiology, imuno-histoquimic and molecular analise. Macroscopically, was observed in broiler chickens severe fibrin deposition mainly in the heart [100% (49/49)], liver [100% (49/49)], kidneys [8.2% (4/49)] and in the lungs [18.4% (9/49)]. Microscopically, the fibrin-hecterofilic enteritis associated with fibrin, macrophags and occasional multinucleated giant cells and plasm cells was prevalent lesion observed. In microbiological culture was isolated E. coli colonies in broilers [24,5% (12/49)] and in hens chickens [12,5% (1/8). 49)], with marked positive staining for anti-Escherichia coli antibody in the immunohistochemistry to broilers sample. Multiplex polymerase chain reaction (PCR) was performed for despite to five E. coli virulence genes, there were positivity in 80% (12/15) of broiler chickens and 20% (1/5) in layer. With the results obtained, can conclude that colibacillosis was the cause of death for broiler chickens and layers that were infected with pathogenic and resistant strains for many antimicrobial, although they had origins and management differences.

Resumo

Compostos de amônia quaternária (Quaternary ammonium compounds QAC) são bioativos catiônicos surfactantes utilizados como detergentes e desinfetantes, com atividade contra fungos, bactérias Gram positivas, Gram negativas e vírus envelopados. Os desinfetantes a base de cloreto de benzalcônio (composto de amônia quaternária) são amplamente utilizados na avicultura brasileira. Relatos de resistência a QAC estão cada vez mais frequentes, de forma cosmopolita, sendo relacionados a mutação de genes ou transferência horizontal de elementos genéticos móveis. O objetivo deste trabalho foi analisar a presença de genes de resistência a QAC em estirpes de Escherichia coli isoladas de aves comerciais. Amostras cloacais e clínicas foram coletadas para isolamento de E. coli. A pesquisa dos genes qacE e sugE, codificadores de bombas de efluxo, foi realizada por meio de PCR convencional. Foram analisadas 422 estirpes, 302 de origem cloacal e 120 de origem clínica. Um total de 271 (64,21%) estirpes foram positivas para qacE e 180 (42,65%) foram positivas para sugE. O gene qacE foi detectado em isolados de amostras fecais (62,25%) e clínicas (69,16%). Em menor frequência, foram detectados isolados positivos para sugE em isolados fecais (37,41%) e clínicos (55, 83%). Os resultados encontrados confirmam a importância de bombas de efluxo na resistência a QAC e a presença desses genes na cadeia produtiva de aves.

Quaternary ammonium compounds (QAC) are cationic bioactive surfactants used as detergents and disinfectants, with activity against fungi, Gram positive and negative bacteria and enveloped viruses. Disinfectants based on benzalkonium chloride (quaternary ammonium compound) are widely used in Brazilian aviculture. Reports of QAC resistance are frequent increasing, in a cosmopolitan way, through gene mutation or horizontal transfer of mobile genetic elements. The aim of this study was to analyze the presence of QAC resistance genes in strains of Escherichia coli isolated from poultry. Cloacal and clinical samples were collected to isolate E. coli. The research for genes qacE and sugE, encoders of efflux pumps, was carried out by conventional PCR. 422 strains were analyzed, 302 from cloacal samples and 120 from clinical samples. 271 total strains (64.21%) were positive for qacE and 180 (42.65%) were positive for sugE(c). The qacE gene was detected among fecal isolates (62.25%) and clinical strains (69.16%). In a lower frequency, were detected positive sugE(c) strains from fecal samples (37.41%) and clinical samples (55.83%). The results found confirm the importance of efflux pumps in QAC resistance and the presence of these genes in the poultry production.

Resumo

O Brasil se destaca mundialmente na produção e criação de aves domésticas; contudo, vários aspectos sobre as principais doenças que acometem estas aves não são totalmente esclarecidos, incluindo as hepáticas. O presente estudo teve como objetivo avaliar a ocorrência e a frequência das alterações hepáticas em aves domésticas incluindo frangos de corte (FC), galinhas de postura (GP) e aves de subsistência (AS). Foi realizado um estudo retrospectivo e prospectivo com os dados do serviço de diagnóstico do setor de patologia (últimos 15 anos), com um total de 300 casos com diagnósticos de alterações hepáticas. Aves industriais (FC e GP) foram as mais frequentes (88%) e as alterações não infecciosas as mais diagnosticadas (69%). Considerando a etiologia, a frequência das alterações hepáticas foi classificada da seguinte forma: alterações degenerativas (42%), bacterianas (28%), metabólicas (15%), tóxicas (8%), virais (3%), neoplásicas (2%), doenças por protozoários (1,5%) e por fim, distúrbios circulatórios (0,5%). Em relação ao tipo de criação, as alterações degenerativas, tóxicas, e as hepatites virais foram mais frequentes em FC. As alterações circulatórias, doenças metabólicas e hepatites bacterianas foram mais diagnosticadas em GP. Dentre estas, se destacaram a amiloidose, a salmonelose e a colibacilose. As neoplasias e as hepatites protozoárias ocorreram com maior frequência em AS. O exame macroscópico, associado a histopatologia possibilitaram o diagnóstico em 59% dos casos. Nos casos de hepatite bacteriana, a associação do exame histopatológico com o bacteriológico foi fundamental para o diagnóstico definitivo da etiologia. O fígado das aves pode ser acometido por uma variedade de causas sistêmicas, sendo o principal alvo de várias etiologias. Considerando as hepatites bacterianas e tóxicas em aves comerciais, o diagnóstico etiológico é de suma importância, considerando o risco para a saúde pública, apesar da óbvia importância devido às perdas de produtividade e condenação no processamento de alimentos.

Brazil stands out worldwide in the production and breeding of poultry; however, several aspects regarding major diseases that affect poultry are not fully understood, including liver diseases. The present study aimed to assess the occurrence and the frequency of hepatic changes in poultry including broilers (B), layer hens (LH) and backyard poultry (BP). A retrospective and prospective study was conducted with data from the diagnostic service of the pathology sector (last 15 years), with a total of 300 cases with diagnoses of liver disorders. Industrial poultry (B and LH) were frequent affected (88%) and noninfectious changes were the most commonly diagnosed (69%). Considering etiology, the frequency of hepatic changes was classified as follows: degenerative changes (42%), bacterial (28%), metabolic (15%), toxic (8%), viral (3%), neoplastic (2%), as well as protozoal diseases (1,5%) and circulatory disorders (0,5%). Regarding the type of bird, degenerative, toxic changes and viral hepatitis were more frequent in broilers. Circulatory and metabolic disorders, as well as bacterial hepatitis, were more frequently diagnosed in layer hens. Among these, amyloidosis, salmonellosis and colibacillosis were paramount. Neoplastic and protozoal hepatitis occurred more frequently in backyard poultry. The macroscopic examination in association with histopathology enabled the diagnosis in 59% of the cases. In cases of bacterial hepatitis, the association of the histopathological examination with the bacteriological analyses was essential for the definitive diagnosis of the etiology. The liver of poultry can be affected by a variety of systemic causes, being the primary target of several etiologies. Considering bacterial and toxic hepatitis in commercial poultry, the etiological diagnosis is highly important, considering the risk for public health, despite the obvious importance due to the productivity losses and condemnation at food processing.

Resumo

Escherichia coli patogênica aviária (APEC) é responsável por diversos quadros anatomopatológicos nas aves, os quais acarretam grandes prejuízos para o setor avícola. Esse microrganismo tem apresentado grande potencial de resistência aos antimicrobianos e difícil eliminação a nível ambiental. Conhecer a epidemiologia desta bactéria é fundamental para realizar um controle efetivo deste patógeno, para tanto, o objetivo do trabalho foi avaliar a patogenicidade das cepas de Escherichia coli isoladas de frangos de corte e realizar testes in vitro das cepas classificadas como APEC para identificar a sua capacidade de formação de biofilme e susceptibilidade a antimicrobianos e sanitizantes rotineiramente utilizados no processo de criação das aves. Neste estudo foram utilizados 60 isolados de Escherichia coli provenientes de um banco de cepas do laboratório de Saúde Animal, obtidos de casos clínicos de colibacilose em frangos de cortes de granjas localizadas no Oeste de Santa Catarina, no ano de 2020. No teste de Reação em Cadeia Polimerase em tempo real identificou-se que 100% dos isolados apresentavam os genes hlyF e ompT, 98,3% os genes iroN e iss e 83,33% o gene iutA, sendo todas as cepas avaliadas classificadas como APEC. Nas avaliações in vitro quanto à formação e caracterização dos biofilmes, as amostras de APEC foram caracterizadas como 71,66% fracamente formadora de biofilme e 28,33% não apresentaram formação de biofilme bacteriano. No teste de susceptibilidade a antibióticos, através da técnica de disco-difusão, os percentuais de maior resistência foram encontrados nas moléculas de oxitetraciclina 33% e doxiciclina 31,66% porém 58,33% das amostras apresentaram perfil de multirresistência aos antimicrobianos. Enquanto que no teste de sensibilidade a sanitizantes, as cepas de APEC multirresistentes avaliadas, foram sensíveis aos desinfetantes a base de amônia quaternária + glutaraldeído e ao composto fenol. Apesar das cepas avaliadas não se mostrarem fortemente formadoras de biofilme bacteriano e apresentarem sensibilidade aos sanitizantes, o alto percentual de detecção dos genes de virulência de APEC e a multirresistência das cepas aos antimicrobianos são fatores que demandam maiores estudos devido ao impacto que acarretam no setor avícola e o potencial risco a saúde pública.

Escherichia coli pathogenic avian (APEC) is responsible for several anatomopathological conditions in poultry, which cause great damage to the poultry sector. This microorganism has shown great potential for resistance to antimicrobials and difficult to eliminate at the environmental level. Knowing the epidemiology of this bacterium is essential to effectively control this pathogen, therefore, the objective of this work was to evaluate the pathogenicity of Escherichia coli strains isolated from broiler chickens and to perform in vitro tests on strains classified as APEC to identify their capacity for biofilm formation and susceptibility to antimicrobials and sanitizers routinely used in the poultry breeding process. In this study, 60 Escherichia coli isolates from a strain bank of the Animal Health laboratory were used, obtained from clinical cases of colibacillosis in broiler chickens located in the west of Santa Catarina, in 2020. In the real-time Polymerase Chain Reaction test it was identified that 100% of the isolates had the hlyF and ompT genes, 98.3% the iroN and iss genes and 83.33% the iutA gene, being all evaluated strains classified as APEC. In the in vitro evaluations regarding the formation and characterization of biofilms, the APEC samples were characterized as 71.66% weakly forming biofilms and 28.33% did not show bacterial biofilm formation. In the antibiotic susceptibility test, through the disk-diffusion technique, the highest resistance percentages were found in the molecules of oxytetracycline 33% and doxycycline 31.66%, but about 58,33% of the samples had a profile of multi-resistance to antimicrobials. While in the test of sensitivity to sanitizers, the multiresistant APEC strains evaluated were sensitive to disinfectants based on quaternary ammonia + glutaraldehyde and to the compound phenol. Although the strains evaluated did not show strong formation of bacterial biofilm and showed sensitivity to sanitizers, the high percentage of detection of APEC virulence genes and the multi-resistance of the strains to antimicrobials are factors that require further studies due to the impact they have on the poultry industry and the potential risk to public health.

Resumo

Avian pathogenic Escherichia coli (APEC) strains are isolated from lesions of poultry presenting colibacillosis, which is a disease that causes either systemic or localized clinical signs. Such strains share many characteristics with E. coli strains that cause extra-intestinal illness in humans. There is not a consensus on how to define the APEC pathotype with regard to the presence of virulence traits. On the other hand, in the past few years, five minimal predictors for APEC detection were proposed. The E.  coli isolates in this work were tested through polymerase chain reaction (PCR) to the five proposed minimal predictors and cvaC. The strains presenting them were categorized as potential APEC. The APEC and non-APEC categories showed high resistance (> 50%) to cephalotin, erythromycin, streptomycin, sulphametoxazol/trimethoprim, ampicillin, and amoxicillin. Potential APEC strains were significantly more resistant to cephalotin (p    0.05) and neomcycin (p    0.01) than non-APEC. These latter were significantly more resistant to tetracycline (p    0.01) than the potential APEC strains. These results demonstrate that feces of poultry present E. coli strains with resistant features, showing or not the potential of causing colibacillosis in poultry. Because APEC and extra-intestinal illness in humans may be similar, these resistant strains are of interest to public health.

Cepas de Escherichia coli patogênica para aves (APEC) estão isoladas das lesões de frangos com colibacilose, uma doença que causa sinais clínicos sistêmicos ou localizados. As APEC compartilham algumas características com as cepas de Escherichia coli que produzem doenças extraintestinais nos seres humanos. Ainda não há um consenso sobre a definição de patotipos das cepas de APEC, no que diz respeito à presença das características de virulência. Entretanto, nos últimos anos, foram definidos cinco indicadores mínimos para a identificação de patotipos das cepas de APEC. Os isolados de E. coli utilizados neste trabalho foram testados por meio de reação em cadeia de polimerase (PCR) para os cinco indicadores mínimos e para cvaC. Os isolados que possuíam os cinco indicadores mínimos foram definidos como potenciais cepas de APEC. As categorias APEC e não APEC apresentaram alta resistência (> 50%) à cefalotina, eritromicina, estreptomicina, sulfametoxazol mais trimetoprim, ampicilina e amoxicilina. Possíveis cepas de APEC foram significativamente mais resistentes à cefalotina (p   0,05) e neomicina (p   0,01) do que as cepas não-APEC. Estas foram significativamente mais resistentes à tetraciclina (p   0,01) do que as possíveis cepas de APEC. Esses resultados demonstram que as fezes dos frangos de corte albergam cepas de E.coli com características de resistência, apresentando ou não potencialidade de causar colibacilose. Em função das características de similaridade entre APEC e doenças extraintestinais nos seres humanos, estas cepas resistentes são de interesse à saúde pública.