Manejo de neonatos caninos prematuros / Management of premature neonatal puppies

Dentre as mais importantes causas de morbidade neonatal na prematuridade, destacam-se os distúrbios respiratórios, complicações infecciosas, instabilidade crítica da termorregulação, inabilidade para homeostase energética e falhas na transferência de imunidade passiva. Dentre os problemas de origem pulmonar intimamente relacionados à prematuridade, destaca-se a imaturidade pulmonar por deficiência de surfactante, evoluindo para diminuição da capacidade pulmonar, hipoxemia, hipercapnia e acidose. Os neonatos caninos prematuros apresentam baixa vitalidade, hipotermia, bradipnéia, irregularidade do padrão respiratório, reduzido tônus e responsividade neuro-muscular. As áreas do parênquima pulmonar para efetuar trocas gasosas são limitadas em filhotes prematuros, culminando em alterações do equilíbrio ácidobase. Além disto, os recém-nascidos prematuros apresentam instabilidade energética e falha de transferência de imunidade passiva. Como medida preventiva à morbidade do neonato prematuro, indicase a corticoterapia pré-natal 48 horas antes do parto em cadelas gestantes, induzindo a maturidade funcional do pulmão fetal, além de melhorar a vitalidade e evolução clínica neonatal. Ademais, a corticoterapia antenatal estimula a transferência placentária de imunoglobulinas e absorção de imunoglobulinas colostrais, bem como aumenta a capacidade glicogênica. Nos casos emergenciais, preconiza-se medidas intensivas aos recém-nascidos prematuros, as quais incluem: reanimação respiratória, controle da hipotermia, reposição glicêmica na hipoglicemia e controle imunológico da falha de transferência imune passiva.(AU)

Among the most important causes of neonatal morbidity in prematurity, respiratory disorders, infectious complications, critical instability of thermoregulation, inability for energy homeostasis and failures in the transfer of passive immunity stand out. Among the problems of pulmonary origin closely related to prematurity, pulmonary immaturity due to surfactant deficiency stands out, evolving to decreased lung capacity, hypoxemia, hypercapnia and acidosis. Premature canine neonates have low vitality, hypothermia, bradypnea, irregular breathing pattern, reduced tone and neuromuscular responsiveness. The areas of the lung parenchyma to carry out gas exchange are limited in premature pups, culminating in changes in acid-base balance. In addition, premature newborns have energetic instability and failure to transfer passive immunity. As a preventive measure against premature neonate morbidity, prenatal corticosteroid therapy is indicated 48 hours before delivery in pregnant bitches, inducing functional maturity of the fetal lung, in addition to improving neonatal vitality and clinical evolution. Furthermore, antenatal corticosteroid therapy stimulates the placental transfer of immunoglobulins and the absorption of colostral immunoglobulins, as well as increasing the glycogenic capacity. In emergency cases, intensive measures are recommended for premature newborns, which include: respiratory resuscitation, hypothermia control, glycemic replacement in hypoglycemia and immunological control of passive immune transfer failure.(AU)

Efeito dos anticorpos maternos sobre a resposta imune induzida pela vacinação em bezerros Holandeses / Effect of maternal antibodies on vaccine-induced immune responses in Holstein calves

Objetivou-se avaliar o efeito dos anticorpos (ACs) maternos sobre resposta imune humoral induzida pela vacinação em bezerros Holandeses. Bezerros foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos: G1 - vacinados no D14 e D44 (n=6); G2 - vacinados no D90 e D120 (n=5); G3 - vacinados no D180 e D210 (n=8); controle: não vacinado (n=5). Utilizaram-se 5mL de vacina comercial (Cattle Master Gold FP5+L5® - Zoetis, Brasil), por via subcutânea. Foi realizada vírus neutralização (VN) no momento da vacinação, booster e 30 dias após a revacinação. Não foram observadas diferenças entre controle e G1 ou G2 para a frequência de soropositivos ou títulos de ACs contra os vírus respiratórios (P≥0,05). G3 apresentou maior produção de ACs em relação ao controle para BoHV-1 (P<0,01), BRSV (P<0,01) e BPIV-3 (P=0,02) após o booster (D240). A análise no tempo também demonstrou aumento nos títulos de ACs no G3 (P≤0,05). O perfil clínico revelou broncopneumonia apenas no grupo controle (n=4/5) entre 80-135 dias de vida. A imunidade colostral e a vacinal apresentaram perfis inversamente proporcionais, com maior produção de ACs aos seis meses de idade. Devido à precocidade da doença respiratória, estudos complementares são necessários para esclarecer o papel da resposta imune celular na vacinação diante dos ACs maternos.(AU)

This research aimed to evaluate the effect of colostral antibodies (ABs) on the humoral immune response induced by vaccination in Holstein calves. Twenty-four calves were randomly assigned into four groups: G1 - vaccinated on D14 and D44 (n= 6); G2 - on D90 and D120 (n= 5); G3 - on D180 and D210 (n= 8); Control: unvaccinated (n= 5). Commercial vaccine (Cattle Master Gold FP5+L5® - Zoetis, Brazil) was administered subcutaneously (5mL). Virus neutralization test (VN) was performed at the time of vaccination, booster and 30 days after booster to determine AB titers. No differences were observed between control and G1 or G2 for seropositive frequencies and ABs titers (P≥ 0.05). G3 showed higher AB production than control for BoHV-1 (P< 0.01), BRSV (P< 0.01) and BPIV-3 (P= 0.02) after booster (D240). Overtime analysis also exhibited increase in AB titers in G3 (P≤ 0,05). Bronchopneumonia was identified in the control group (n= 4/5) between 80-135 days of life. The colostral and vaccinal immunity presented inversely proportional profiles, with higher production of ABs at 6 months of age. Due to the precocity of respiratory disease further studies are required to clarify the role of cellular immune response to vaccination in face of maternal ABs.(AU)

Efeito dos anticorpos maternos sobre a resposta imune induzida pela vacinação em bezerros Holandeses / Effect of maternal antibodies on vaccine-induced immune responses in Holstein calves

Objetivou-se avaliar o efeito dos anticorpos (ACs) maternos sobre resposta imune humoral induzida pela vacinação em bezerros Holandeses. Bezerros foram distribuídos aleatoriamente em quatro grupos: G1 - vacinados no D14 e D44 (n=6); G2 - vacinados no D90 e D120 (n=5); G3 - vacinados no D180 e D210 (n=8); controle: não vacinado (n=5). Utilizaram-se 5mL de vacina comercial (Cattle Master Gold FP5+L5® - Zoetis, Brasil), por via subcutânea. Foi realizada vírus neutralização (VN) no momento da vacinação, booster e 30 dias após a revacinação. Não foram observadas diferenças entre controle e G1 ou G2 para a frequência de soropositivos ou títulos de ACs contra os vírus respiratórios (P≥0,05). G3 apresentou maior produção de ACs em relação ao controle para BoHV-1 (P<0,01), BRSV (P<0,01) e BPIV-3 (P=0,02) após o booster (D240). A análise no tempo também demonstrou aumento nos títulos de ACs no G3 (P≤0,05). O perfil clínico revelou broncopneumonia apenas no grupo controle (n=4/5) entre 80-135 dias de vida. A imunidade colostral e a vacinal apresentaram perfis inversamente proporcionais, com maior produção de ACs aos seis meses de idade. Devido à precocidade da doença respiratória, estudos complementares são necessários para esclarecer o papel da resposta imune celular na vacinação diante dos ACs maternos.(AU)

This research aimed to evaluate the effect of colostral antibodies (ABs) on the humoral immune response induced by vaccination in Holstein calves. Twenty-four calves were randomly assigned into four groups: G1 - vaccinated on D14 and D44 (n= 6); G2 - on D90 and D120 (n= 5); G3 - on D180 and D210 (n= 8); Control: unvaccinated (n= 5). Commercial vaccine (Cattle Master Gold FP5+L5® - Zoetis, Brazil) was administered subcutaneously (5mL). Virus neutralization test (VN) was performed at the time of vaccination, booster and 30 days after booster to determine AB titers. No differences were observed between control and G1 or G2 for seropositive frequencies and ABs titers (P≥ 0.05). G3 showed higher AB production than control for BoHV-1 (P< 0.01), BRSV (P< 0.01) and BPIV-3 (P= 0.02) after booster (D240). Overtime analysis also exhibited increase in AB titers in G3 (P≤ 0,05). Bronchopneumonia was identified in the control group (n= 4/5) between 80-135 days of life. The colostral and vaccinal immunity presented inversely proportional profiles, with higher production of ABs at 6 months of age. Due to the precocity of respiratory disease further studies are required to clarify the role of cellular immune response to vaccination in face of maternal ABs.(AU)

Effect of parenteral vaccination of newborn Holstein calves against viral agents involved in bovine respiratory disease (BRD)

Background: Newborn calves are born immunosuppressed, hypogammaglobulinemic, immunologically immature, and therefore more vulnerable to many infectious diseases. During pregnancy, the fetal-placental environment is regulated by Th2-type cytokines that neutralize Th1 responses, an important factor for immune defense against viral agents. The ingestion and absorption of colostral immunoglobulins enhance the immunity of the neonate. However, the presence of maternal antibodies might negatively affect the success of parental vaccination in the first two months of life. This study aimed to evaluate the effecacy of parenteral vaccination in newborn calves with high titers of maternal antibodies against respiratory viruses. Materials, Methods & Results: Twenty-eight Holstein calves were allocated to the vaccinated group (VAC, n = 18) or an unvaccinated control group (NVAC, n = 10). The initial vaccination with 5 mL of a commercial vaccine occurred around the 14th day of life (D14) and the booster at D35. Respiratory and diarrhea symptoms were evaluated at D12, D14, D16, D20, D31, D36, D45, D53, and D60. Blood samples were taken for leukogram, haptoglobin, and seroneutralization of BVDV, BoHV-1, BRSV, and BPI3V, at the time of vaccination at D14 (T1), at booster (D35, T2), and 21 days after the booster (D56, T3). Despite the increased prevalence of BRD during the period of the study, no calves from either group exhibited respiratory disease at D12 or D14. In subsequent assessments, the frequency of BRD increased over time in the VAC group until it reached a maximum prevalence of 38.9% (7/18) at D31. In the NVAC group, the maximum prevalence observed was 40% at D45 and D60. A comparison of the frequencies for BRD cases showed a statistical trend at D36 (P = 0.07), with a higher prevalence for the NVAC group (30%) in relation to the VAC group (5.6%). For the NVAC group, a greater number of total...

Proteinograma e concentração sérica de IgG em potros, do nascimento aos trinta dias de vida, tratados com plasma

ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate serum protein and serum IgG concentrations (after a direct enzyme immunoassay test ELISA optimization) in newborns foals from birth to thirty days of life before and after colostrum consumption and intravenous treatment with plasma. Twenty foals and their respective progenitors as well as four plasma donors horses were used. Blood samples were obtained from newborn foals at five time points, immediately after birth and before colostrum intake (M1), ten hours after birth (M2), 24 hours after birth and prior administration of blood plasma (M3), 48 hours after birth and 24 hours after plasma administration (M4), and 30 days after birth (M5). Blood and colostrum samples were collected from the progenitor mares immediately postpartum. Concentration of total protein (TP) and albumin were determined using a biochemical analyzer. The TP concentration was also measured by refractometer. Fractions of total serum protein were separated using agarose gel electrophoresis. Colostrum density was evaluated using BRIX refractometer and specific density colostrometer. Total IgG concentration was determined by an enzyme-linked immunosorbent assay. With the ELISA system proposed here it was possible to determine IgG concentrations in serum, plasma, and equine colostrum samples with adequate repeatability. Serum IgG concentration in foals at birth was 15±8mg/dL (mean ± standard deviation) raising at ten hours (2,408±608mg/dL) and remaining at similar levels up to 48 hours of life (2,364±784mg/dL), and decreasing significantly at 30 days of age (1,414±586mg/dL). Serum and colostrum IgG concentrations of mares were 1,746±505mg/dL and 7,714±2,619mg/dL, respectively. The plasma IgG concentrations from donor mares were 2,026±148mg/dL. Total protein, total globulins, and -globulin fraction showed correlation with IgG. Ten hours post birth was an adequate time to verify the transfer of passive immunity, allowing to adoption prophylactic and/or therapeutic measures in a horse farms. One liter of plasma administered at 24 hours of life was not sufficient to raise serum IgG concentrations in foals without passive immunity transfer failure.

RESUMO: Este trabalho teve por objetivo avaliar o proteinograma e concentrações séricas de IgG (após a padronização de teste ELISA) em potros do nascimento aos trinta dias de idade, antes e depois de mamarem colostro e serem tratados com plasma por via intravenosa. Foram utilizados 20 potros e suas respectivas mães, além de quatro animais doadores de plasma. Foram colhidas amostras de sangue dos potros em cinco momentos, logo após o nascimento e antes de mamar colostro (M1), dez horas após nascimento (M2), 24 horas após nascimento e previamente administração do plasma sanguíneo (M3), 48 horas de vida e 24 horas após administração do plasma sanguíneo (M4), e 30 dias após nascimento (M5). Foram colhidos sangue e colostro das éguas progenitoras no momento do parto. A concentração de proteína total (PT) e albumina foram determinadas em analisador bioquímico, a concentração de PT também foi avaliada em refratômetro manual. O fracionamento proteico foi realizado utilizando eletroforese em gel de agarose. A densidade do colostro foi avaliada com colostrômetros de refração BRIX e de densidade específica. A concentração de IgG total de todas as amostras foi determinada por teste ELISA. Com o sistema de ELISA aqui proposto foi possível determinar concentrações de IgG em amostras de soro, plasma e colostro equino com adequada repetibilidade. A média ± desvio padrão da concentração sérica de IgG dos potros ao nascer, foi de 15±8mg/dL, com dez horas de vida foi de 2.408±608mg/dL, se manteve em níveis semelhantes até 48 horas (2.364±784mg/dL) e diminuíram significativamente aos 30 dias de vida (1.414±586mg/dL). A concentração sérica e colostral de IgG nas éguas foi de 1.746±505mg/dL e 7.714±2.619mg/dL, respectivamente. A concentração plasmática de IgG dos doadores de plasma foi de 2.026±148mg/dL. Houve correlação positiva entre as concentrações séricas de IgG e PT (r=0,69 para refratômetro e r=0,76 para bioquímico), GT (r=0,81) e gamaglobulina (r=0,85). Dez horas após o nascimento foi possível verificar a transferência de imunidade passiva, possibilitando adotar medidas profiláticas e/ou terapêuticas em haras de criação de cavalos. Considerando que a proteína total, globulinas totais e fração -globulina apresentam correlação com IgG, estas determinações são úteis para monitorar os potros após mamarem o colostro. Um litro de plasma administrado às 24 horas de vida não foi suficiente para aumentar as concentrações séricas de IgG, 24 horas após transfusão, em potros com adequada transferência de imunidade passiva.

Proteinograma e concentração sérica de IgG em potros, do nascimento aos trinta dias de vida, tratados com plasma / Proteinogram and serum IgG concentration in newborn foals up to thirty days of life treated with plasma

Este trabalho teve por objetivo avaliar o proteinograma e concentrações séricas de IgG (após a padronização de teste ELISA) em potros do nascimento aos trinta dias de idade, antes e depois de mamarem colostro e serem tratados com plasma por via intravenosa. Foram utilizados 20 potros e suas respectivas mães, além de quatro animais doadores de plasma. Foram colhidas amostras de sangue dos potros em cinco momentos, logo após o nascimento e antes de mamar colostro (M1), dez horas após nascimento (M2), 24 horas após nascimento e previamente administração do plasma sanguíneo (M3), 48 horas de vida e 24 horas após administração do plasma sanguíneo (M4), e 30 dias após nascimento (M5). Foram colhidos sangue e colostro das éguas progenitoras no momento do parto. A concentração de proteína total (PT) e albumina foram determinadas em analisador bioquímico, a concentração de PT também foi avaliada em refratômetro manual. O fracionamento proteico foi realizado utilizando eletroforese em gel de agarose. A densidade do colostro foi avaliada com colostrômetros de refração BRIX e de densidade específica. A concentração de IgG total de todas as amostras foi determinada por teste ELISA. Com o sistema de ELISA aqui proposto foi possível determinar concentrações de IgG em amostras de soro, plasma e colostro equino com adequada repetibilidade. A média ± desvio padrão da concentração sérica de IgG dos potros ao nascer, foi de 15±8mg/dL, com dez horas de vida foi de 2.408±608mg/dL, se manteve em níveis semelhantes até 48 horas (2.364±784mg/dL) e diminuíram significativamente aos 30 dias de vida (1.414±586mg/dL). A concentração sérica e colostral de IgG nas éguas foi de 1.746±505mg/dL e 7.714±2.619mg/dL, respectivamente. A concentração plasmática de IgG dos doadores de plasma foi de 2.026±148mg/dL. Houve correlação positiva entre as concentrações séricas de IgG e PT (r=0,69 para refratômetro e r=0,76 para bioquímico), GT (r=0,81) e gamaglobulina (r=0,85). Dez horas após o nascimento foi possível verificar a transferência de imunidade passiva, possibilitando adotar medidas profiláticas e/ou terapêuticas em haras de criação de cavalos. Considerando que a proteína total, globulinas totais e fração γ-globulina apresentam correlação com IgG, estas determinações são úteis para monitorar os potros após mamarem o colostro. Um litro de plasma administrado às 24 horas de vida não foi suficiente para aumentar as concentrações séricas de IgG, 24 horas após transfusão, em potros com adequada transferência de imunidade passiva.(AU)

The aim of this study was to evaluate serum protein and serum IgG concentrations (after a direct enzyme immunoassay test ELISA optimization) in newborns foals from birth to thirty days of life before and after colostrum consumption and intravenous treatment with plasma. Twenty foals and their respective progenitors as well as four plasma donor's horses were used. Blood samples were obtained from newborn foals at five time points, immediately after birth and before colostrum intake (M1), ten hours after birth (M2), 24 hours after birth and prior administration of blood plasma (M3), 48 hours after birth and 24 hours after plasma administration (M4), and 30 days after birth (M5). Blood and colostrum samples were collected from the progenitor mares immediately postpartum. Concentration of total protein (TP) and albumin were determined using a biochemical analyzer. The TP concentration was also measured by refractometer. Fractions of total serum protein were separated using agarose gel electrophoresis. Colostrum density was evaluated using BRIX refractometer and specific density colostrometer. Total IgG concentration was determined by an enzyme-linked immunosorbent assay. With the ELISA system proposed here it was possible to determine IgG concentrations in serum, plasma, and equine colostrum samples with adequate repeatability. Serum IgG concentration in foals at birth was 15±8mg/dL (mean ± standard deviation) raising at ten hours (2,408±608mg/dL) and remaining at similar levels up to 48 hours of life (2,364±784mg/dL), and decreasing significantly at 30 days of age (1,414±586mg/dL). Serum and colostrum IgG concentrations of mares were 1,746±505mg/dL and 7,714±2,619mg/dL, respectively. The plasma IgG concentrations from donor mares were 2,026±148mg/dL. Total protein, total globulins, and γ-globulin fraction showed correlation with IgG. Ten hours post birth was an adequate time to verify the transfer of passive immunity, allowing to adoption prophylactic and/or therapeutic measures in a horse farms. One liter of plasma administered at 24 hours of life was not sufficient to raise serum IgG concentrations in foals without passive immunity transfer failure.(AU)

Avaliação colostral de búfalas (Bubalus bubalis) com e sem mastite e de níveis imunes séricos de bezerros bubalinos

O objetivo desse estudo foi investigar os efeitos da mastite, clínica e subclínica, em búfalas mestiças da raça Murrah nas características físicas, microbiológicas e imunes do colostro produzido com relação à eficiência de transferência de imunidade passiva em seus respectivos bezerros. Para isso acompanhou-se o parto de 30 búfalas e de seus bezerros que foram divididos em dois grupos de acordo com o resultado do cultivo bacteriano observado na secreção colostral. Avaliou-se a presença de alterações físicas na glândula mamária e macroscópicas das secreções lácteas, foi realizado a contagem de células somáticas, o California Mastitis Test (CMT) e foram mensuradas as concentrações de IL-6 e TNF- e traçado eletroforético das secreções lácteas e séricas dos bezerros, no momento do parto, às 24 e 48 horas após. A CCS e o CMT mostram-se como importantes indicadores da ocorrência de mastite subclínica, porém baixos valores de CCS e/ou resultados negativos do CMT não implicam, necessariamente, na ausência de infecção intramamária. A presença de agentes microbianos provocou alterações físicas discretas no parênquima mamário e nas características macroscópicas das secreções lácteas das búfalas. Os agentes microbianos isolados nas amostras de colostro foram Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Corynebacterium spp., Bacillus spp e Bacillus cereus, sendo o Streptococcus spp. o mais comumente isolado. A ingestão de colostro de vacas bubalinas com mastite subclínica não influencia a transferência de imunidade passiva para os bezerros. As concentrações de IL-6, TNF- , PT, IgG e IgA não diferem em búfalas com e sem isolamento microbiano em suas secreções lácteas. Bezerros que ingeriram colostros positivos ao cultivo apresentaram maiores teores de IL-6, TNF-e menores concentrações de PT e IgG.

The aim of this study was to investigate the effects of clinical and subclinical mastitis on crossbred Murrah buffaloes on the physical, microbiological and immune characteristics of colostrum produced in relation to the passive immunity transfer efficiency in their respective calves. For this, 30 calf buffaloes and their calves were divided into two groups according to the result of the bacterial culture observed in the colostral secretion. The presence of physical changes in the udder and macroscopic glands of milk secretions was evaluated, the somatic cell count, the California Mastitis Test, and the concentrations of IL-6 and TNF- and electrophoretic tracing of milk and serum secretions of the calves, at the time of delivery, at 24 and 48 hours after. CCS and CMT are important indicators of the occurrence of subclinical mastitis, but low CCS values and / or negative CMT results do not necessarily imply the absence of intramammary infection. The presence of microbial agents caused discrete physical alterations in the mammary parenchyma and the macroscopic characteristics of buffalo milk secretions. The microbial agents isolated in the colostrum samples were Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Corynebacterium spp., Bacillus spp. And Bacillus cereus, being Streptococcus spp. the most commonly isolated. The ingestion of colostrum from buffalo cows with subclinical mastitis does not influence the transfer of passive immunity to calves. The concentrations of IL-6, TNF-, PT, IgG and IgA didnt differ in buffaloes with and without microbial isolation in their milk secretions. Calves that ingested positive colostrums had higher levels of IL-6, TNF- and lower concentrations of PT and IgG.

Avaliação da absorção colostral em neonatos ovinos da raça Bergamácia / Evaluation of colostral absorption in neonates of Bergamacia breed

Objetivou-se determinar o período de absorção das macromoléculas colostrais e a transferência de imunidade passiva em cordeiros da raça Bergamácia. Avaliou-se o proteinograma sérico dos cordeiros antes da ingestão de colostro até 48 horas de vida e das frações colostrais ao nascimento e 12 horas pós-parto. Foi avaliada a concentração de proteína total no soro por refratometria e sua relação com a densidade e quantidade de gamaglobulinas presentes no colostro. A concentração sérica de gamaglobulina nos cordeiros variou de 0,111±0,07g/dL antes da ingestão de colostro a 1,609±0,72g/dL às 48 horas. Nas amostras de colostro, a concentração variou de 3,125±1,27g/dL, imediatamente após o parto, para 1,378±0,82g/dL, 12 horas após. A concentração de proteína sérica total teve acréscimo de 4,46±0,58g/dL para 5,61±0,75g/dL entre o nascimento e após 48 horas, apresentando correlação positiva com a densidade e a proteína total colostral. A absorção colostral pelo cordeiro foi ascendente até 24 horas subsequentes ao parto, quando, então, iniciou-se sua estabilização. A quantificação da proteína sérica, com uso de refratômetro nos cordeiros, pode ser usada como método para avaliar a transferência de imunidade passiva, pois está diretamente relacionada com a absorção de gamaglobulina colostral.(AU)

The period of absorption of colostrum macromolecules and the passive immunity transfer of Bergamacia lambs was determined. The serum proteinogram of lambs before the intake of colostrum up 48 hours of life and colostrum fractions between delivery and twelve hours after birth were measured. The total protein concentration in serum was evaluated by refractometry and also its relationship with the density and amount in colostrum. The serum concentration of gamma globulin in lambs from 0.111±0.07g/dL before the intake of colostrum was 1.609±0.72g/dL at 48 hours. In the colostrum samples, the concentration was 3.125±1.27g/dL immediately after delivery and 1.378±0.82g/dL twelve hours after birth. Serum total protein concentration increased from 4.46±0.58g/dL to 5.61±0.75g/dL between birth and after 48 hours, there was positive correlation with the density and total protein colostrum. The lamb had ascendant colostrum absorption subsequent to delivery, for twelve hours and then began its stabilization. The quantification of serum protein with the use of the refractometer in lambs can be used as a method to evaluate the transfer of passive immunity because it is directly related to the absorption of colostral gammaglobulin.(AU)

Duration of passive immunity to small ruminant lentiviruses in lambs / Duração da imunidade passiva para lentivírus de pequenos ruminantes em cordeiros

In order to evaluate the passive immunity against small ruminant lentiviruses (SRLV) in lambs, this study was conducted from two experimental groups. The first one (G1) was established by nine lambs subjected to artificial feeding of colostrum of goats positive for SRLV. The second one (G2) was the control group, consisting of ten lambs subjected to suckling of colostrum from their negative mothers. Blood samples were obtained before the first feeding, after 24 hours of birth and at 7, 15, 30, 50, 70, 90 and 120 days of age. The concentrations of total serum protein (TSP), albumin (ALB), globulin (GLOB) and immunoglobulin G (IgG) were determined and antibodies to SRLV were surveyed from the techniques of agar gel immunodiffusion (AGID), enzyme linked immunosorbent assay (Elisa) and immunoblotting (IB). In both groups, the lowest averages of TSP, GLOB and IgG were observed at birth and the highest averages were observed at 24 hours of life, due to absorption of colostral immunoglobulins. For G1, transfer of immunity could also be detected by immunodiagnostic tests. At birth, the animals were seronegative. After 24 hours, all animals were positive in three serological tests. Negative results began to be observed after 15 days of age by the AGID test. As for Elisa testing, all animals remained reagent until 50 days old. Only IB was able to detect anti-SRLV at 70 days. Regarding G2, all animals tested negative in AGID and IB, from birth until 120 days of age. However,false-positive results were observed until day 15 in Elisa, due to nonspecific reactions. These data areconsistent with the sensitivity and specificity of serological tests and show that starting at 90 days ofage, colostral antibodies to SRLV are no longer detected in the serum of lambs.(AU)

Com a finalidade de avaliar a imunidade passiva contra lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR), em cordeiros, este estudo foi conduzido a partir de dois grupos experimentais. O primeiro (G1) foi estabelecido por nove cordeiros submetidos à mamada artificial de pool de colostro de cabras positivas para LVPR. O segundo (G2) foi o controle, constituído por dez cordeiros submetidos à mamada natural de colostro das suas mães negativas. Amostras de sangue foram obtidas antes da primeira mamada, após 24h do nascimento e com sete, 15, 30, 50, 70, 90 e 120 dias de vida. Determinaram-se as concentrações de proteína sérica total (PST), albumina (ALB), globulinas (GLOB) e imunoglobulina G (IgG) e anticorpos anti-LVPR foram pesquisados a partir das técnicas de imunodifusão em gel de agarose (IDGA), ensaio imunoadsorvente ligado à enzima (Elisa) e immunoblotting (IB). Em ambos os grupos, as menores médias de PST, GLOB e IgG foram observadas ao nascimento e as maiores médias foram constatadas às 24 horas de vida, devido à absorção de imunoglobulinas colostrais. Para o G1, a transferência de imunidade também pôde ser constatada pelas provas de imunodiagnóstico. Ao nascimento, os animais estavam soronegativos. Com 24 horas, todos foram reagentes nos três testes sorológicos. Posteriormente, resultados negativos começaram a ser observados, a partir dos 15 dias de idade, pela prova de IDGA. Já pelo teste de Elisa, todos os animais permaneceram reagentes até os 50dias de vida. Apenas o IB foi capaz de detectar anticorpos anti-LVPR aos 70 dias. Em relação ao G2,todos os animais apresentaram resultados negativos nos testes de IDGA e IB, do nascimento aos 120dias de idade. Entretanto, resultados falso-positivos foram observados até os 15 dias nos testes de Elisa,devido a reações inespecíficas.(AU)

Proteinograma sérico de bezerros recém-nascidos alimentados com colostro de vacas com mastite / Serum protein concentration in newborn calves fed with colostrum from cows wirh mastitis

O objetivo do presente estudo foi o de avaliar o proteinograma sérico de bezerros alimentados com colostro oriundo de vacas sadias (n = 10 ), com mastite assintomática (n = 10 ) e mastite clínica (n =10 ). As vacas foram alocadas em seus respectivos grupos de acordo com o exame macroscópico da secreção colostral, contagem de células somáticas, CMT e isolamento microbiano. As amostras de sangue dos conceptos foram colhidas logo após o nascimento, 24 e 48 horas após a ingestão do colostro dos quartos infectados e dos sadios. Foi avaliada a concentração de proteína total pelo método do biureto e as concentrações de imunoglobulina A (IgA), imunoglobulina G (IgG), transferrina, albumina e haptoglobina por meio da eletrofoerese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE). Não foram observadas diferenças entre os grupos nas concentrações de albumina, proteína total e IgA. Os bezerros alimen- tados com colostro de vacas com mastite assintomática e clínica apresentaram teores de haptoglobina superiores aos animais sadios. As concentrações de IgG e transferrina foram significativamente inferiores nos bezerros tratados com colostro de vacas com mastite clínica. Concluiu-se que a ingestão de colostro de quartos sadios e infectados de vacas que pariram com mastite (GII e GIII) não resulta em falha de transferência da imunidade passiva.(AU)

The aim of this study was to evaluate the serum protein concentration in newborns fed with colostrum derived from healthy cows (n = 10), cows with subclinical mastitis (n = 10) and cows with clinical mastitis (n = 10). 30 Holstein cows were assigned to their respective groups according to macroscopic examination of colostral secretion, somatic cell count, CMT and presence of bacteria in colostrum samples. Blood samples of the calves were collected immediately after birth, at 24 and 48 hours after ingestion of colostrum. The total protein was measured by the biuret method and the concentrations of immunoglobulin A (IgA), immunoglobulin G (IgG), transferrin, albumin and haptoglobin was determined by sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). No differences were observed amongst groups in the concentrations of albumin, total protein and IgA. In animals from cows with subclinical and clinical mastitis haptoglobin concentrations were higher than those of healthy animals. The concentrations of IgG and transferrin were significantly lower in calves from cows with mastitis. We concluded that the ingestion of colostrum from infected and uninfected glands from cows with mastitis (GII e GIII) is unlikely to be an important contributor to the high rate of failure of passive transfer of immunoglobulins in calves.(AU)

Cinética dos anticorpos de origem colostral contra a toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D em cordeiros / Kinetics of colostral antibodies against epsilon toxin produced by Clostridium perfringens type D in lambs

Enterotoxemia, uma das mais importantes enfermidades que acomete os pequenos ruminantes domésticos, é causada principalmente pela toxina épsilon de Clostridium perfringens tipo D. O presente estudo avaliou a cinética de anticorpos colostrais antitoxina épsilon em cordeiros nascidos de ovelhas submetidas a dois diferentes tipos de manejo sanitário. Um grupo de ovelhas prenhes (n=6) foi vacinado com uma dose única de vacina comercial polivalente contra clostridioses contendo toxóide épsilon na sua formulação cerca de 30 dias antes da data prevista para a parição. Outro grupo de ovelhas (n=6) de mesma idade gestacional não foi vacinado. Imediatamente após o parto, antes da ingestão do colostro, foram colhidas amostras sanguíneas dos respectivos cordeiros, bem como aos 30 e 60 dias de idade e submetidas à avaliação sorológica pelo teste de ELISA indireto. Os resultados encontrados permitem concluir que a vacinação de ovelhas prenhes 30 dias antes do parto contra a enterotoxemia causada pela toxina épsilon, com dose única de produto comercial, induz imunidade passiva em níveis considerados protetores (>0,5UI/ml) aos cordeiros por, no mínimo, 60 dias de idade.(AU)

Enterotoxemia, a disease that affect small ruminants, is caused mainly by the epsilon toxin from Clostridium perfringens type D. This study evaluated the kinetics of epsilon antitoxin colostral antibodies in lambs born to ewes submitted to two different types of health management. A group of pregnant ewes (n=6) was vaccinated with a single dose of commercial vaccine against polyvalent clostridial toxoid containing epsilon in its formulation some 30 days before the expected date of birth. Another group of ewes (n=6) of the same gestational age were not vaccinated. Immediately after birth, before intake of colostrum, blood samples were collected from their lambs as well as 30 and 60 days of age for serum evaluation by ELISA. The results allow to conclude that vaccination of pregnant ewes 30 days before parturition allowed the transfer of colostral antibodies specific enough to guarantee the immunity considered protective (0,5UI/ml) of the newborn lamb against enterotoxemia until its entry into the feedlot, with 60 days of age.(AU)

Bovine respiratory syncytial virus (brsv) activity in dairy calves / Atividade viral do vírus respiratório sincicial bovino (brsv) em bezerros leiteiros

Bovine respiratory syncytial virus (BRSV) is one of the major pathogens affecting the respiratory system of young cattle, causing serious economic losses. Data on its epidemiology and occurrence in animals under one-year of age are still scarce in the literature. This study aimed to determine the occurrence of viral activity in three of BRSV seropositive dairy herds (A, B, and C), by serological monitoring of calves from the first day of life until the age of one year, by virus neutralization test. Results showed that in animals from farms A and B, antibody titers increased in the first month, characterizing passive transfer of immunity through colostrums. Over time, the titers decreased till total absence in the sixth and eighth months respectively and then antibodies titration increased in the final months of the study, probably due to natural infection. On property C, although there was a similar antibodies dynamics to the others, a period of total absence did not occurred, suggesting that animals may have been infected in the first months of life, despite the presence of colostral antibodies. This study demonstrated fluent BRSV activity amongst animals in all properties.KEYWORDS: antibody titer; bovine respiratory syncytial virus; screening; viral activity; virus neutralization.

O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) é um dos principais patógenos que acometem o sistema respiratório de bovinos jovens, causando sérios prejuízos econômicos. Dados sobre sua epidemiologia e ocorrência em animais até um ano de idade são escassos na literatura brasileira. Assim, este estudo teve como objetivo determinar a ocorrência da atividade viral do BRSV em três rebanhos leiteiros soropositivos, por meio do monitoramento sorológico de bezerros, desde o primeiro dia de vida até os animais completarem um ano, utilizando a técnica de vírus-neutralização. Os resultados mostraram que, nos animais das propriedades A e B, os títulos de anticorpos aumentaram nos primeiros meses, caracterizando uma resposta à ingestão do colostro e que, com o passar do tempo, foram decrescendo e apresentando total ausência no sexto e oitavo mês, respectivamente, com aumento de títulos nos meses finais do período de colheita, devido provavelmente a uma infecção natural a campo. Na propriedade C, apesar de ocorrer dinâmica semelhante às demais, não houve período de total ausência de anticorpos, sugerindo que os animais podem ter sido infectados nos primeiros meses de vida, mesmo na presença de anticorpos colostrais. Por meio do monitoramento sorológico de bezerros foi demonstrada a atividade fluente da infecção pelo BRSV entre os animais, em todas as propriedades analisadas.PALAVRAS-CHAVE: at

Passive immunity transfer and serum constituents of crossbred calves / Transferência de imunidade passiva e constituintes séricos de bezerros mestiços

Passive immunity transfer (PIT) evaluation is an essential tool for the maintenance of healthy calves during the first months of life. Since lactation number and breed have been proven to influence immunoglobulin levels in colostrum, the aim of this study was to evaluate PIT from primiparous and multiparous Canchim cows to their calves. Blood samples were collected from the calves before colostrum intake and 1, 2, 7, 15 and 30 days thereafter, while colostrum samples from the cows were taken immediately after parturition. Activities of gamma-glutamyl transferase (GGT), alkaline phosphatase (ALP), and concentrations of total protein, albumin, globulins, immunoglobulin A (IgA), immunoglobulin G (IgG), total and ionized calcium, inorganic phosphorus, magnesium, sodium and potassium were evaluated in calves' serum and activities of GGT and ALP and concentrations of total protein, IgA and IgG were assessed in cow's colostrum whey. Immunoglobulins concentrations were evaluated by electrophoresis in polyacrylamide gels. Serum biochemistry evaluations revealed an increase in gamma-glutamyl transferase and alkaline phosphatase activities and in total protein, globulins, immunoglobulin A and immunoglobulin G levels in calves' serum after colostrum intake. Only total protein and light chain immunoglobulin G levels in colostrum whey were affected by the cows' lactation number. Phosphorus and magnesium levels in blood serum increased after colostrum intake, while sodium and potassium levels oscillated in the experimental period. PIT was influenced by the cows' lactation number but was efficient in both groups.(AU)

A avaliação da transferência de imunidade passiva (TIP) é uma ferramenta essencial para manutenção de bezerros saudáveis nos primeiros meses de vida. Uma vez que há influência do número de lactações e da raça de vacas nos teores de imunoglobulinas do colostro, o presente estudo foi conduzido com o objetivo de avaliar a TIP de vacas Canchim primíparas e pluríparas aos seus bezerros. Amostras de sangue dos bezerros foram coletadas antes da ingestão de colostro e 1, 2, 7, 15 e 30 dias após o nascimento e amostras de colostro das vacas foram coletadas imediatamente após o parto. As atividades de gamaglutamiltransferase (GGT), fosfatase alcalina (ALP) e as concentrações de proteína total, albumina, globulinas, imunoglobulina A (IgA) e imunoglobulina G (IgG), cálcio total e ionizado, fósforo, magnésio, sódio e potássio foram avaliadas no soro dos bezerros e as atividades de GGT e ALP e as concentrações de proteína total, IgA e IgG foram avaliadas no soro colostral. A concentração de imunoglobulinas foi avaliada por meio de eletroforese em gel de poliacrilamida. As avaliações bioquímicas do soro sanguíneo dos bezerros revelaram aumento nas atividades das enzimas gamaglutamiltransferase e fosfatase alcalina e nos teores de proteína total, globulinas, imunoglobulina A e imunoglobulina G após a ingestão do colostro. Apenas os teores de proteína total e imunoglobulina G de cadeia leve no soro colostral foram influenciados pelo número de lactações das vacas. Os teores de fósforo e magnésio aumentaram após a ingestão de colostro, enquanto as concentrações de sódio e potássio oscilaram no decorrer do período experimental. A TIP foi influenciada pelo número de lactações das vacas, no entanto mostrou-se eficiente em ambos os grupos.(AU)

Produção de IgY anti-Cryptosporidium parvum e padronização do Elisa para avaliação da cinética de IgG em bezerros experimentalmente infectados.

A criptosporidiose é uma doença parasitária causada por um protozoário oportunista do gênero Cryptosporidium que acomete humanas e diferentes espécies de animais. Em bezerros neonatos, C. parvum é um dos principais enteropatógenos e mais frequente causador de diarreia. Apesar do manejo de colostro ser de grande importância para controle de vários enteropatógenos, como os patotipos de E. coli e Salmonella spp, a imunidade passiva não tem demonstrado efeitos sobre a criptosporidiose. Uma vez que não existe tratamento eficiente para criptosporidiose, a imunoterapia com IgY a partir de gemas hiperimune pode ser uma nova alternativa. Diante disso, o trabalho foi realizado em duas etapas. A primeira etapa, objetivou-se produzir e avaliar in vitro IgY anti-.C. parvum de galinhas imunizadas com antígenos de oocistos sonicados ou esporozoíto sonicado de C. parvum. Em uma segunda etapa do trabalho foi avaliado o comportamento da resposta humoral de bezerros com de 3 a 31 dias de vida com criptospordiose induzida, relacionando a resposta imune com a dinâmica de excreção de oocistos. Na primeira etapa da pesquisa, para obtenção de oocistos de Cryptosporidium spp, foi realizada indução experimental de criptospordiose em bezerros e em quatro cabritos e realizado o PCR e sequenciamento para identificação da espécie das amostras. A amostra mais rica em oocisto foi utilizada para obtenção de antígeno de oocisto sonicado e de esporozoíto sonicado. Para produção de IgY, foram utilizadas 18 galinhas distribuídas em três grupos. O grupo 1 foi imunizado com tampão fosfato salino, o grupo 2 com oocisto sonicado e o grupo 3 com esporozoíto sonicado com quatro doses a cada duas semanas. Foram coletadas amostras de sangue, semanalmente, até a sétima semana e, posteriormente realizadas mais duas coletas. Os ovos das galinhas foram coletados uma vez por semna até a sétima semana e a partir da oitava a décima semana, foram coletados diariamente. A purificação do IgY dos ovos foi realizada através da separação, delipidação da gema e precipitação do IgY com sulfato de amônia. A avaliação da curva de IgY anti- C. parvum foi avaliado pelo ELISA. Os grupos imunizados apresentaram diferença significativa, sendo a resposta do grupo 2 maior do que do grupo 3 e ambas maior do que o grupo 1. Na segunda etapa do experimento, foi realizada padronização do ELISA com 30 amostras de soro de bezerros negativos e 30 amostras positivas de bezerros com criptosporidiose induzida. Amostras de soro de 23 bezerros de bezerros infectados experimentalmente com Cryptosporidium spp foram coletadas semanalmente de 3 aos 31 dias de vida e avaliado pela técnica de ELISA comparando com o comportamento da excreção de oocisto de Cryptosporidium spp avaliada pela técnica de Ziehl Neelsen modificado. O IgG anti oocisto sonicado de C. parvum avaliado pelo Elisa apresentou uma relação positiva clara no tempo T0 com os valores encontrados nos tempos T1, T2, T3 e T4, devido ao IgG colostral. Além disso, o IgG anti- oocisto sonicado de C. parvum encontrado no tempo 0 apresentou relação positiva significativa com a variável número de oocistos totais excretados no terceiro dia de diarreia (p=0,004) e tendência para variável eliminação total de oocistos no período do pico (8 a 12 dias de vida) (p=0,056) e soma de excreção diária de oocistos a partir do pico de eliminação até 31 dias de vida (0,084).

Cryptosporidiosis is a parasitic disease caused by an opportunistic protozoan of the genus Cryptosporidium that affects humans and different species of animals. In neonatal calves, C. parvum is one of the main enteropathogens and most frequently causes diarrhea. Althoughcolostrum management is of great importance for the control of various enteropathogens, such as the E. coli pathotypes and Salmonella spp, passive immunity has shown no effects on cryptosporidiosis. Since there is no efficient treatment for cryptosporidiosis, immunotherapy with IgY from hyperimmune gems may be a new alternative. Therefore, the work was carried out in two stages. The first step was to produce and evaluate in vitro IgY anti - C. Parvum of chickens immunized with sonicated oocyst antigens or sonicated sporozoite of C. parvum. In a second stage of the work the behavior of the humoral response of calves with 3 to 31 days of life with induced cryptosporidiosis was evaluated, correlating the immune response with the dynamics of oocyst excretion. In the first stage of the research, to obtain Cryptosporidium spp oocysts, experimental induction of cryptosporidiosis was carried out in calves and four goats and PCR and sequencing were performed to identify the species of the samples. The richest oocyst sample was used to obtain sonicated oocyst antigen and sonicated sporozoite. For IgY production, 18 hens distributed in three groups were used. Group 1 was immunized with phosphate buffered saline, group 2 with sonicated oocysts and group 3 with sporozoites sonicated with four doses every two weeks. Blood samples were collected weekly, until the seventh week, and then two more collections were performed. The hens' eggs were collected once per semen until the seventh week and from the eighth to the tenth week, were collected daily. Purification of IgY from the eggs was accomplished by separation, delipidation of the yolk and precipitation of IgY with ammonium sulfate. The evaluation of the anti-C. parvum IgY curve was evaluated by the ELISA. The immunized groups showed a significant difference, being the response of group 2 higher than that of group 3 and both higher than group 1. In the second stage of the experiment, ELISA was standardized with 30 serum samples from calves negative and 30 samples positive results of calves with induced cryptosporidiosis. Serum samples from 23 calves of calves experimentally infected with Cryptosporidium spp. Were collected weekly from 3 to 31 days of age and evaluated by the ELISA technique comparing with the behavior of oocyst excretion of Cryptosporidium spp evaluated by the modified Ziehl Neelsen technique. The IgG anti-oocyst IgG of C. parvum evaluated by Elisa presented a clear positive relation in the T0 time with the values found at times T1, T2, T3 and T4 due to colostral IgG. In addition, the sonicated anti-oocyst IgG of C. parvum found at time 0 presented a significant positive relation with the variable number of total oocysts excreted on the third day of diarrhea (p = 0.004) and tendency for total elimination of oocysts in the period peak (8 to 12 days of life) (p = 0.056) and sum of daily excretion of oocysts from the elimination peak to 31 days of life (0.084).

Perfil celular do colostro de éguas: estudo preliminar / Cellular profile of mares colostrum: a preliminary study

Existem poucos trabalhos na literatura relativos aos tipos de leucócitos presentes no colostro e no leite de éguas. Recentes trabalhos realizados em animais de produção sugerem que os leucócitos do colostro podem desempenhar um importante papel na transferência passiva de imunidade da mãe para o neonato. Esse estudo teve como objetivo caracterizar a população de leucócitos presente no colostro de éguas clinicamente sadias utilizando a microscopia óptica. As amostras de colostro utilizadas foram provenientes de 20 éguas, 12 da raça Mangalarga Marchador e 8 da raça Quarto de Milha. O tipo celular predominante na maioria das amostras estudadas foi o macrófago, seguida pelos neutrófilos e linfócitos. Esses resultados podem proporcionar um ponto de partida para futuros estudos de investigação sobre o papel dos leucócitos colostrais na transferência de imunidade da égua para o potro.

There are few reports on which leukocytes are present in the colostrum and milk of mares. Recent studies in farm animals suggest a role for colostral leukocytes in the transfer of passive immunity from dam to neonate. The aim of this study was to characterize the population of leukocytes present in colostrum from clinically healthy mares, using the light microscopy. Colostrum samples were collected from 20 mares, 12 Mangalarga Marchador and 8 Quarter Horse. Macrophages were the predominant cell type in most samples studied followed by neutrophils and lymphocytes. These results may be a starting point for future studies investigating the role of colostral leukocytes in the transfer of immunity from mare to foal.

Perfil celular do colostro de éguas: estudo preliminar / Cellular profile of mares colostrum: a preliminary study

Existem poucos trabalhos na literatura relativos aos tipos de leucócitos presentes no colostro e no leite de éguas. Recentes trabalhos realizados em animais de produção sugerem que os leucócitos do colostro podem desempenhar um importante papel na transferência passiva de imunidade da mãe para o neonato. Esse estudo teve como objetivo caracterizar a população de leucócitos presente no colostro de éguas clinicamente sadias utilizando a microscopia óptica. As amostras de colostro utilizadas foram provenientes de 20 éguas, 12 da raça Mangalarga Marchador e 8 da raça Quarto de Milha. O tipo celular predominante na maioria das amostras estudadas foi o macrófago, seguida pelos neutrófilos e linfócitos. Esses resultados podem proporcionar um ponto de partida para futuros estudos de investigação sobre o papel dos leucócitos colostrais na transferência de imunidade da égua para o potro.(AU)

There are few reports on which leukocytes are present in the colostrum and milk of mares. Recent studies in farm animals suggest a role for colostral leukocytes in the transfer of passive immunity from dam to neonate. The aim of this study was to characterize the population of leukocytes present in colostrum from clinically healthy mares, using the light microscopy. Colostrum samples were collected from 20 mares, 12 Mangalarga Marchador and 8 Quarter Horse. Macrophages were the predominant cell type in most samples studied followed by neutrophils and lymphocytes. These results may be a starting point for future studies investigating the role of colostral leukocytes in the transfer of immunity from mare to foal.(AU)

"Vigor, variação na concentração de metabólitos sanguíneos e avaliação da transferência de imunidade passiva em bezerros leiteiros neonatos"

O objetivo deste trabalho foi identificar o padrão de vigor e status metabólico através da determinação da frequência dos sinais objetivos e metabólitos sanguíneos após o nascimento, possivelmente associados à transferência de imunidade passiva, além de determinar o melhor horário para o uso do refratômetro de Brix na avaliação da transferência de imunidade passiva em bezerros neonatos após a ingestão de colostro. No primeiro experimento foram utilizados 46 bezerros neonatos de ambos os sexos, nascidos entre setembro de 2013 e julho de 2014. A avaliação do vigor dos animais foi realizada entre 15 e 30 minutos após o nascimento com o auxílio da escala APGAR modificada pela Universidade de Guelph. A colheita de sangue para análise de metabólitos seguiu os horários de 0h (antes da ingestão), 1h, 2h, 4h, 6h, 12h, 24h, 48h contadas a partir da ingestão do colostro. Os parâmetros sanguíneos foram determinados por kit enzimático específico para cada parâmetro em Sistema Automático para Bioquímica. Todos os animais utilizados neste estudo foram oriundos de partos eutócicos e apresentaram, de acordo com a escala APGAR, vigor satisfatório. As concentrações de metabólicos sanguíneos dos neonatos mostraram que o consumo de colostro aumentou a disponibilidade de energia e a concentração de frações proteicas, comumente utilizadas como indicativos da transferência de imunidade passiva. No segundo experimento foram utilizados 47 bezerros neonatos de ambos os sexos, nascidos entre março e julho de 2014. O colostro foi ordenhado após o parto e a qualidade determinada com auxílio do colostrômetro e do refratômetro digital. A colheita do sangue para a análise dos parâmetros sanguíneos seguiu os horários de 0h (antes da ingestão), 1h, 2h, 4h, 6h, 12h, 24h, 48h, 72h, 96 e 120h, contadas a partir da ingestão do colostro. A concentração de proteína total foi determinada por refratômetro de Brix e por kit enzimático em Sistema Automático para Bioquímica. Os demais parâmetros sanguíneos foram determinados por kit enzimático específico para cada parâmetro em Sistema Automático para Bioquímica. A contagem global e diferenciada das células sanguíneas foi realizada nos tempos 0, 12 e 24h após o fornecimento do colostro. O colostro se manteve na faixa de boa qualidade, segundo os critérios de classificação de medidas pelo colostrômetro e refratômetro digital de Brix. O consumo de colostro foi o principal fator de variação dos parâmetros estudados neste trabalho. A avaliação da transferência de imunidade passiva em bezerros recém-nascidos deve ser realizada por volta das 24 horas após a ingestão do colostro, pois neste momento a absorção de macromoléculas colostrais já está encerrada e a PT alcança estabilidade. A partir deste período, não é possível determinar se as frações proteicas avaliadas são de origem colostral ou endógena, o que não garante avaliação segura sobre a transferência de imunidade passiva.

The objective of this study was to identify the vigor and metabolic status through the determination of objective signs and blood metabolites just after birth of dairy calves, possibly associated with the passive immunity transfer. Also, determine the best time after colostrum intake to estimate the passive immunity transfer using a Brix refractometer. The first trial evaluated 46 newborn calves, males and females, born from September 2014 to July 2014. Animals' vigor evaluations were carried out between 15 and 30 minutes after birth using the APGAR scale modified by the University of Guelph. The blood sample collection for metabolites analysis were done at 0h (before intake), 1h, 2h, 4h, 6h, 12h, 24h, and 48h after colostrum intake. Blood parameters were analyzed by enzymatic kits using an automatic biochemical system. All animals were born from eutocic births and presented, according to the APGAR scale, satisfactory vigor. The newborns metabolites blood concentrations revealed that colostrum intake increased the energy availability and the concentration of protein fractions, commonly used as indicative of passive immunity transfer. For the second trial 47 newborn calves of both sexes, born from March and July 2014, were used. The colostrum was milked after parturition and quality was determined using a colostrometer and digital Brix refractometer. Blood samples were taken from calves at 0h (before intake), 1h, 2h, 4h, 6h, 12h, 24h, 48h, 72h, 120h and 96, after colostrum intake. The total protein (TP) concentration was measured by a Brix refractometer and an enzymatic kit using an automatic biochemical system. Other blood parameters were determined by specific enzyme kit for each parameter in Automatic System for Biochemistry. The global and differential blood cell count were performed at times 0, 12 and 24h after colostrum feeding. Colostrum has remained in the range of good quality according to the criteria of classification measures by colostrometer and digital Brix refractometer. Colostrum intake was the main factor of variation of the studied parameters. The evaluation of the passive transfer of immunity to newborn calves should be performed at about 24 hours after colostrum intake, because at this time, the absorption of colostral macromolecules is already finished and TP reaches stability. From this period, it is not possible to determine whether the assessed protein fractions are from colostrum or endogenous origin, which does not guarantee reliable assessment on the transfer of passive immunity.

Florfenicol Therapy During Natural Mannheimia haemolytica Infection in Sakiz Sheep

Background: Bronchopneumonia caused by Mannheimia haemolytica affects sheep of all ages worldwide and may be devastating especially in young animals undergone recent stress (i.e. transportation, weaning, mixing with animals from different farms. It is a common cause of morbidity and mortality in lambs and kids, especially in those that have not received adequate colostrum or in which passive colostral immunity is waning. Yearly herd losses costing millions of dollars have led to research focused on theurapeutic trials and vaccine production because of various strains isolated demonstrating the continuing economic importance of Mannheimia haemolytica infection. A field trial was performed under commercial sheep farm located in Western Turkey, Aydin in an attempt to investigate the efficacy of an injectable formulation of florfenicol against naturally occuring Mannheimia haemolytica. Materials, Methods & Results: A total of 27 Sakiz breed lambs at the age of 36–60 days old, of both sexes, with naturally occuring M. haemolytica infection were included in the present study. Prior to allocation into groups, a detailed clinical examination carried out in all the lambs, revealed a variety of abnormal findings: coughing, presence of nasal and ophthalmic discharge increased respiratory rate and rectal temperature and abnormal sounds at lung auscultation. A total of 27 samples taken from transtracheal aspiration bronchoalveolar fluid in the Sakiz breed lambs were taken into sterile containers in an attemp to perf orm isolation and identification of Mannheimia haemolytica . The antibiotic susceptibility tests for Mannheimia haemolytica strains isolated from transtracheal aspiration bronchoalveolar fluid were carried out by disc diffusion as described previously. [...]

Florfenicol Therapy During Natural Mannheimia haemolytica Infection in Sakiz Sheep

Background: Bronchopneumonia caused by Mannheimia haemolytica affects sheep of all ages worldwide and may be devastating especially in young animals undergone recent stress (i.e. transportation, weaning, mixing with animals from different farms. It is a common cause of morbidity and mortality in lambs and kids, especially in those that have not received adequate colostrum or in which passive colostral immunity is waning. Yearly herd losses costing millions of dollars have led to research focused on theurapeutic trials and vaccine production because of various strains isolated demonstrating the continuing economic importance of Mannheimia haemolytica infection. A field trial was performed under commercial sheep farm located in Western Turkey, Aydin in an attempt to investigate the efficacy of an injectable formulation of florfenicol against naturally occuring Mannheimia haemolytica. Materials, Methods & Results: A total of 27 Sakiz breed lambs at the age of 36–60 days old, of both sexes, with naturally occuring M. haemolytica infection were included in the present study. Prior to allocation into groups, a detailed clinical examination carried out in all the lambs, revealed a variety of abnormal findings: coughing, presence of nasal and ophthalmic discharge increased respiratory rate and rectal temperature and abnormal sounds at lung auscultation. A total of 27 samples taken from transtracheal aspiration bronchoalveolar fluid in the Sakiz breed lambs were taken into sterile containers in an attemp to perf orm isolation and identification of Mannheimia haemolytica . The antibiotic susceptibility tests for Mannheimia haemolytica strains isolated from transtracheal aspiration bronchoalveolar fluid were carried out by disc diffusion as described previously. [...](AU)

Influência etária na resposta imunológica de bezerros à vacinação intranasal

Devido à intensa oscilação de funções e mecanismos de defesa respiratórios evidenciados nos primeiros meses de vida dos bezerros, o discernimento do limiar etário para a resposta vacinal intranasal efetiva, atrelado ao risco de infecção e perfil da vacina são fundamentais para a pecuária racional. Diante disto, o estudo buscou comparar a resposta imune humoral e mediada por células, local e sistêmica, entre bezerros vacinados intranasalmente aos 15 ou 45 dias de vida com vacina polivalente contendo vírus sincicial respiratório bovino vivo modificado, cepas quimicamente alteradas de herpesvirus bovino tipo 1 e vírus da parainfluenza tipo 3, vírus da diarreia viral bovina tipos 1 e 2 inativados, além de culturas inativadas dos cinco sorotipos de Leptospira e adjuvante Quil-A. Foram utilizados 16 bezerros holandeses alocados em três grupos, o grupo GA composto por seis animais primovacinados aos 15 dias de idade, o grupo GB composto por cinco animais primovacinados aos 45 dias de idade e o grupo controle composto por cinco animais não vacinados. Os animais vacinados receberam uma segunda dose vacinal 21 dias após a primeira. Para avaliação da interferência da vacinação intranasal no estado geral dos bezerros, na expressão das populações leucocitárias, na capacidade fagocítica e microbicida, além da investigação de anticorpos humorais e locais, foram realizados exames clínicos e colhidas amostras de sangue e lavado broncoalveolar (LBA) antes da primeira e da segunda dose vacinal, bem como uma terceira colheita 21 dias após a segunda dose. Foi observado que após a vacinação a maioria dos animais vacinados apresentou manifestações clínicas respiratórias, acompanhadas de leucograma com declínio de leucócitos totais e linfócitos nos animais do GA em relação ao CTLA. Nos animais do GB além das manifestações clínicas, foi encontrada somente uma tendência ao aumento de neutrófilos em relação ao CTLB. Houve diminuição de macrófagos alveolares e aumento de neutrófilos sanguíneos e alveolares tanto na citologia do LBA quanto na imunofenotipagem dos animais do GA em relação ao CTLA e diminuição de macrófagos na citologia do LBA ao longo dos momentos do GA, enquanto que nos animais do GB houve diminuição de monócitos-like CD14+ ao longo dos momentos. Simultaneamente ao aumento de monócitos CD14+ ao longo dos momentos, foi notado o aumento de linfócitos TCD3+CD4-CD8- nos animais do GA ao longo dos momentos e em relação ao CTLA. Além disso, a porcentagem de linfócitos sanguíneos TCD3+ aumentou no GA em relação ao CTLA, porém não acompanhada pelo aumento na porcentagem de células TCD4+ ou TCD8+ mas sim pelas populações TCD3+CD4-CD8- ao longo dos momentos e em relação ao CTLA e TCD3+CD4+CD8+ em relação ao CTLA. No LBA a porcentagem de células CD4+ diminuiu em relação ao CTLA. Nos animais do GB não houve diferença entre essas populações celulares, somente a diminuição de células CD4+CD8+ em relação ao CTLB no LBA. Ao se avaliar as funções de fagocitose e microbicida dos grupos vacinados, foi constatada diminuição expressiva na maioria das avaliações após a vacinação, principalmente em relação ao GA. Em relação à resposta humoral por anticorpos, o estudo demonstrou que a vacina por via intranasal não sofreu influência de anticorpos colostrais, tampouco induziu imunidade sérica específica por anticorpos, no entanto, no LBA foi capaz de induzir aumento de IgA nos animais do GA e uma tendência ao aumento em animais do GB. Diante dos resultados, conclui-se que: a resposta à vacina utilizada por via intranasal em bezerros com 15 dias de idade é diferente de quando utilizada aos 45 dias, e que causou alterações de exame clínico, leucograma e citologia do LBA mais intensas nos animais vacinados aos 15 dias de idade. Embora não apresente resposta anticorpo específica sistêmica em ambos os casos, aos 15 dias apresentou resposta neutrofílica e monocítica sistêmica acompanhada de aumento de linfócitos T duplo negativos e duplo positivos, enquanto a resposta local celular foi pobre em macrófagos e rica em neutrófilos e IgA, porém com comprometimento das funções celulares. Dessa forma, a vacina utilizada nesse período, por via intranasal, em especial aos 15 dias de idade pode predispor o animal a infecções bacterianas secundárias. No entanto, deve-se ficar claro que este resultado se aplica somente a estas condições de vacina, via e idade

Due to the intense oscillating of functions and respiratory defense mechanisms evidenced in the first months of life of calves, the discernment about the age threshold for the effective intranasal vaccine response, linked to the risk of infection and vaccines profile are fundamental to rational livestock. In view of this, the study aimed to compare the humoral immune response and local and systemic cell-mediated among calves vaccinated intranasally to 15 or 45 days of life with polyvalent vaccine containing bovine respiratory syncytial modified live virus, chemically altered strains of bovine herpesvirus type 1 and parainfluenza virus type 3, inactivated bovine viral diarrhea types 1 and 2, inactivated cultures of five Leptospira serovars and Quil-A adjuvant. 16 Holstein calves were allocated in three groups, the GA group consisting of six animals vaccinated at 15 days of age, the GB group consisting of five animals vaccinated at 45 days of age and the control group of five animals not vaccinated. Vaccinated animals received a second immunization dose 21 days after the first one. To evaluate the impact of intranasal vaccination in the general condition of the calves, in the expression of leukocyte populations, phagocytic and microbicide capacity, as well as research of humoral and local antibodies, clinical examinations were performed and blood and bronchoalveolar lavage (BAL) samples were collected before the first and second vaccine vaccination, as well as a third sample 21 days after the second dose. It was observed that after vaccination most vaccinated animals showed respiratory clinical manifestations, accompanied by white blood cell count with decline of total leukocytes and lymphocytes in GA animals compared to CTLA. In GB animals beyond the clinical manifestations, it was only found a tendency to increase in neutrophils in relation to CTLB. There was a decrease in alveolar macrophages and increased blood and alveolar neutrophils in both BAL cytology and immunophenotyping of GA animals compared to the CTLA and reduction of macrophages in BAL cytology over the times in GA animals, whereas in GB animals there was a decreased in CD14+ monocyte-like along time. Simultaneously with the increase in CD14+ monocytes over the time, it was noted an increase in TCD3+CD4-CD8- lymphocytes in GA animals along time and compared to CTLA. Furthermore, the percentage of TCD3+ blood lymphocytes increased in GA compared to the CTLA but it was not accompanied by an increase in the percentage of CD4+ or CD8+ T cells but by TCD3+CD4-CD8- population along time and compared to the CTLA and TCD3+CD4+CD8+ cells compared to CTLA. In BAL the percentage of CD4+ cells decreased compared to CTLA. In animals GB there was no difference between these cell populations, only the reduction of CD4+CD8+ BAL cells compared to CTLB. When evaluating the phagocytosis and microbicidal functions of the vaccinated groups it was observed significant decrease in most evaluations after vaccination, especially in relation to GA. Regarding the humoral antibody response, the study demonstrated that for this vaccine the intranasally rout was not influenced by colostral antibodies, either induced serum specific immunity antibodies, however, in BAL was able to induce increase of IgA in GA animals and a tendency to increase in GB animals. Given the results, it is concluded that: the response to the vaccine used intranasally in 15 days old calves is different than when used at 45 days, and it caused clinical examination, WBC and BAL fluid cytology more intense changes in animals vaccinated at 15 days of age. Although it has not systemic specific antibody response in both cases, after 15 days showed neutrophilic and monocytic systemic response accompanied by increase of double negative and double positive T lymphocytes, while the local cell response was poor in macrophages and rich in neutrophils and IgA, but with impairment of cellular functions. Thus, the vaccine used intranasally in that period, particularly at 15 days of age may predispose an animal to secondary bacterial infections. However, it should be clear that this result applies only to these conditions of vaccine, route and age