Exopolysaccharyde production by Cryptococcus laurentii SD7 using molasses and corn steep liquor as substrates

Microbial polysaccharides are of great biotechnological and commercial interest and have wide application in the food, cosmetic and medicine industries. Exopolysaccharide (EPS) production by the yeast Cryptococcus laurentii SD7, isolated from fresh water molluscs, was studied using agro-industrial byproducts as substrates in the submerged fermentation. The Central Composite Design (CCD) 23 was used to study the influence of pH, different concentrations on sugarcane molasses and corn steep liquor (CSL), for 48 hours. According to the results, the highest EPS production occurred at the initial pH 5 and at 8.4% concentration of sugarcane molasses, which were statistically significant variable at 10% (p < 0.1). The concentration of CSL had no influence in the studied range, thus, it can be used lowest concentration (0.3%). The time course of EPS production showed that while cell growth peaked within 48 hours, the highest EPS production (6.61 g L-1) occurred at 168 hours, with a productivity of about 0.04 g L-1 h-1. The pH of the medium remained approximately constant throughout the fermentation process. The yeast C. laurentii SD7 showed great potential for EPS production at a low cost and with sustainable substrates.(AU)

Exopolysaccharyde production by Cryptococcus laurentii SD7 using molasses and corn steep liquor as substrates / Exopolysaccharyde production by Cryptococcus laurentii SD7 using molasses and corn steep liquor as substrates

Microbial polysaccharides are of great biotechnological and commercial interest and have wide application in the food, cosmetic and medicine industries. Exopolysaccharide (EPS) production by the yeast Cryptococcus laurentii SD7, isolated from fresh water molluscs, was studied using agro-industrial byproducts as substrates in the submerged fermentation. The Central Composite Design (CCD) 23 was used to study the influence of pH, different concentrations on sugarcane molasses and corn steep liquor (CSL), for 48 hours. According to the results, the highest EPS production occurred at the initial pH 5 and at 8.4% concentration of sugarcane molasses, which were statistically significant variable at 10% (p < 0.1). The concentration of CSL had no influence in the studied range, thus, it can be used lowest concentration (0.3%). The time course of EPS production showed that while cell growth peaked within 48 hours, the highest EPS production (6.61 g L-1) occurred at 168 hours, with a productivity of about 0.04 g L-1 h-1. The pH of the medium remained approximately constant throughout the fermentation process. The yeast C. laurentii SD7 showed great potential for EPS production at a low cost and with sustainable substrates.

Microbial polysaccharides are of great biotechnological and commercial interest and have wide application in the food, cosmetic and medicine industries. Exopolysaccharide (EPS) production by the yeast Cryptococcus laurentii SD7, isolated from fresh water molluscs, was studied using agro-industrial byproducts as substrates in the submerged fermentation. The Central Composite Design (CCD) 23 was used to study the influence of pH, different concentrations on sugarcane molasses and corn steep liquor (CSL), for 48 hours. According to the results, the highest EPS production occurred at the initial pH 5 and at 8.4% concentration of sugarcane molasses, which were statistically significant variable at 10% (p < 0.1). The concentration of CSL had no influence in the studied range, thus, it can be used lowest concentration (0.3%). The time course of EPS production showed that while cell growth peaked within 48 hours, the highest EPS production (6.61 g L-1) occurred at 168 hours, with a productivity of about 0.04 g L-1 h-1. The pH of the medium remained approximately constant throughout the fermentation process. The yeast C. laurentii SD7 showed great potential for EPS production at a low cost and with sustainable substrates.

Epidemiologia de micoses, pitiose e micotoxicoses em equinos no sudeste do Rio Grande do Sul

ABSTRACT: The epidemiological aspects of diseases caused by fungi and oomycetes in horses in southeastern Rio Grande do Sul, Brazil, is described. The epidemiological rates, their causes, and health importance in the region were established. A descriptive epidemiology study was carried out in relation of potential risk factors. The impact on these diseases in the region was measured. From 1978 to 2014, pythiosis had a prevalence of 49.71% (86/173), and mycotoxicoses of 30.05% (52/173), with 45 cases of leukoencephalomalacia and 7 of ergotism. The prevalence of fungal infections was 19.65% (34/173) of cases. Dermatophytosis was the most prevalent fungal infection with 58.82% (20/34) of cases. The most isolated dermatophyte species were Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) and Microsporum gypseum, Microsporum canis, and Trichophyton verrucosum, both responsible for 5% (1/20) of infections. Rhinosporidose was diagnosed in 35.29% (12/34) of cases. Uterine mycosis caused by Candida albicans and Cryptococcus laurentii was observed at 5.88% (2/34) of cases. Cladosporium sp. allergy was noted in one record. According to the incidence from 1990 to 2014, pythiosis had median incidence (MI) of 2.98 and interquartile range (DI) of 3.82. Mares were 4.18 times likely to develop the disease then males. The disease occurs in the region in every season. Leukoencephalomalacia had MI of 0.0; DI 1.00 and male horses were 3.4 times more likely than mares to develop the disease. Leukoencephalomalacia was 6 times more likely to occur during winter. Ergotism had MI of 0.00; DI of 0.000, rhinosporidiosis MI of 0.00, DI of 0.088 and ringworm MI of 0.00, and DI of 0.935. In the study pythiosis had the highest prevalence among the diseases observed, and may be considered endemic in the region. The magnitude of the diseases observed may be even greater within the equine herd, since these diseases are not of obligatory notification and some are well known by veterinarians and owners, who often do not obtain a laboratory confirmation of the diagnosis.

RESUMO: Descrevem-se os aspectos epidemiológicos das doenças causadas por fungos e oomicetos na população de equinos na região sudeste do Rio Grande do Sul, estabelecendo as taxas epidemiológicas, suas causas e sua importância sanitária na região. Foi realizada a epidemiologia descritiva por meio do cálculo da incidência das doenças encontradas ao longo dos anos e verificada a existência de associação entre a ocorrência dessas enfermidades e o sexo, a raça e a estação do ano. Entre os anos de 1978 e 2014 a pitiose teve prevalência de 49,71% (86/173), as micotoxicoses 30,05% (52/173), sendo 45 casos de leucoencefalomalácia e sete de ergotismo. As micoses tiveram prevalência de 19,65% (34/173), sendo as dermatofitoses as mais prevalentes com 58,82% (20/34) dos casos. As espécies de dermatófitos mais frequentemente isoladas foram Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) e Microsporum gypseum, Microsporum canis e Trichophyton verrucosum ambos responsáveis por 5% (1/20) das infecções. Rinosporidiose foi diagnosticada em 35,29% (12/34) dos casos. Micoses uterinas causadas por Candida albicans e Cryptococcus laurentii foram observadas em 5,88% (2/34) dos casos. Alergia por Cladosporium sp. teve um registro. De acordo com as incidências calculadas entre 1990 e 2014 a pitiose teve incidência mediana (IM) 2,98 e distância interquartil (DI) =3,82, as fêmeas tiveram chance 4,18 vezes maiores de desenvolver a doença, a enfermidade ocorre independente das estações climáticas. A leucoencefalomalácia teve IM=0,0; DI 1,00 e equinos machos tiveram 3,4 vezes mais chance de desenvolver a doença que fêmeas, no inverno a possibilidade de ocorrência dessa enfermidade foi seis vezes maior. O ergotismo teve IM = 0,00; DI = 0,000, rinosporidiose IM=0,00; DI=0,088 e dermatofitose IM=0,00; DI=0,935. A pitiose foi mais prevalente entre as doenças encontradas, podendo ser considerada endêmica na região. Considera-se que a magnitude das doenças possa ser ainda maior dentro do rebanho equino, uma vez que as doenças descritas não são de notificação obrigatória e algumas são bem conhecidas por veterinários e proprietários, que muitas vezes não fazem a confirmação laboratorial do diagnóstico.

Epidemiologia de micoses, pitiose e micotoxicoses em equinos no sudeste do Rio Grande do Sul / Epidemiology of mycoses, pitiosis and micotoxicosis in horses in southeastern Rio Grande do Sul, Brazil

Descrevem-se os aspectos epidemiológicos das doenças causadas por fungos e oomicetos na população de equinos na região sudeste do Rio Grande do Sul, estabelecendo as taxas epidemiológicas, suas causas e sua importância sanitária na região. Foi realizada a epidemiologia descritiva por meio do cálculo da incidência das doenças encontradas ao longo dos anos e verificada a existência de associação entre a ocorrência dessas enfermidades e o sexo, a raça e a estação do ano. Entre os anos de 1978 e 2014 a pitiose teve prevalência de 49,71% (86/173), as micotoxicoses 30,05% (52/173), sendo 45 casos de leucoencefalomalácia e sete de ergotismo. As micoses tiveram prevalência de 19,65% (34/173), sendo as dermatofitoses as mais prevalentes com 58,82% (20/34) dos casos. As espécies de dermatófitos mais frequentemente isoladas foram Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) e Microsporum gypseum, Microsporum canis e Trichophyton verrucosum ambos responsáveis por 5% (1/20) das infecções. Rinosporidiose foi diagnosticada em 35,29% (12/34) dos casos. Micoses uterinas causadas por Candida albicans e Cryptococcus laurentii foram observadas em 5,88% (2/34) dos casos. Alergia por Cladosporium sp. teve um registro. De acordo com as incidências calculadas entre 1990 e 2014 a pitiose teve incidência mediana (IM) 2,98 e distância interquartil (DI) =3,82, as fêmeas tiveram chance 4,18 vezes maiores de desenvolver a doença, a enfermidade ocorre independente das estações climáticas. A leucoencefalomalácia teve IM=0,0; DI 1,00 e equinos machos tiveram 3,4 vezes mais chance de desenvolver a doença que fêmeas, no inverno a possibilidade de ocorrência dessa enfermidade foi seis vezes maior. O ergotismo teve IM = 0,00; DI = 0,000, rinosporidiose IM=0,00; DI=0,088 e dermatofitose IM=0,00; DI=0,935. A pitiose foi mais prevalente entre as doenças encontradas, podendo ser considerada endêmica na região. Considera-se que a magnitude das doenças possa ser ainda maior dentro do rebanho equino, uma vez que as doenças descritas não são de notificação obrigatória e algumas são bem conhecidas por veterinários e proprietários, que muitas vezes não fazem a confirmação laboratorial do diagnóstico.(AU)

The epidemiological aspects of diseases caused by fungi and oomycetes in horses in southeastern Rio Grande do Sul, Brazil, is described. The epidemiological rates, their causes, and health importance in the region were established. A descriptive epidemiology study was carried out in relation of potential risk factors. The impact on these diseases in the region was measured. From 1978 to 2014, pythiosis had a prevalence of 49.71% (86/173), and mycotoxicoses of 30.05% (52/173), with 45 cases of leukoencephalomalacia and 7 of ergotism. The prevalence of fungal infections was 19.65% (34/173) of cases. Dermatophytosis was the most prevalent fungal infection with 58.82% (20/34) of cases. The most isolated dermatophyte species were Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) and Microsporum gypseum, Microsporum canis, and Trichophyton verrucosum, both responsible for 5% (1/20) of infections. Rhinosporidose was diagnosed in 35.29% (12/34) of cases. Uterine mycosis caused by Candida albicans and Cryptococcus laurentii was observed at 5.88% (2/34) of cases. Cladosporium sp. allergy was noted in one record. According to the incidence from 1990 to 2014, pythiosis had median incidence (MI) of 2.98 and interquartile range (DI) of 3.82. Mares were 4.18 times likely to develop the disease then males. The disease occurs in the region in every season. Leukoencephalomalacia had MI of 0.0; DI 1.00 and male horses were 3.4 times more likely than mares to develop the disease. Leukoencephalomalacia was 6 times more likely to occur during winter. Ergotism had MI of 0.00; DI of 0.000, rhinosporidiosis MI of 0.00, DI of 0.088 and ringworm MI of 0.00, and DI of 0.935. In the study pythiosis had the highest prevalence among the diseases observed, and may be considered endemic in the region. The magnitude of the diseases observed may be even greater within the equine herd, since these diseases are not of obligatory notification and some are well known by veterinarians and owners, who often do not obtain a laboratory confirmation of the diagnosis.(AU)

Epidemiologia de micoses, pitiose e micotoxicoses em equinos no sudeste do Rio Grande do Sul / Epidemiology of mycoses, pitiosis and micotoxicosis in horses in southeastern Rio Grande do Sul, Brazil

Descrevem-se os aspectos epidemiológicos das doenças causadas por fungos e oomicetos na população de equinos na região sudeste do Rio Grande do Sul, estabelecendo as taxas epidemiológicas, suas causas e sua importância sanitária na região. Foi realizada a epidemiologia descritiva por meio do cálculo da incidência das doenças encontradas ao longo dos anos e verificada a existência de associação entre a ocorrência dessas enfermidades e o sexo, a raça e a estação do ano. Entre os anos de 1978 e 2014 a pitiose teve prevalência de 49,71% (86/173), as micotoxicoses 30,05% (52/173), sendo 45 casos de leucoencefalomalácia e sete de ergotismo. As micoses tiveram prevalência de 19,65% (34/173), sendo as dermatofitoses as mais prevalentes com 58,82% (20/34) dos casos. As espécies de dermatófitos mais frequentemente isoladas foram Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) e Microsporum gypseum, Microsporum canis e Trichophyton verrucosum ambos responsáveis por 5% (1/20) das infecções. Rinosporidiose foi diagnosticada em 35,29% (12/34) dos casos. Micoses uterinas causadas por Candida albicans e Cryptococcus laurentii foram observadas em 5,88% (2/34) dos casos. Alergia por Cladosporium sp. teve um registro. De acordo com as incidências calculadas entre 1990 e 2014 a pitiose teve incidência mediana (IM) 2,98 e distância interquartil (DI) =3,82, as fêmeas tiveram chance 4,18 vezes maiores de desenvolver a doença, a enfermidade ocorre independente das estações climáticas. A leucoencefalomalácia teve IM=0,0; DI 1,00 e equinos machos tiveram 3,4 vezes mais chance de desenvolver a doença que fêmeas, no inverno a possibilidade de ocorrência dessa enfermidade foi seis vezes maior. O ergotismo teve IM = 0,00; DI = 0,000, rinosporidiose IM=0,00; DI=0,088 e dermatofitose IM=0,00; DI=0,935. A pitiose foi mais prevalente entre as doenças encontradas, podendo ser considerada endêmica na região. Considera-se que a magnitude das doenças possa ser ainda maior dentro do rebanho equino, uma vez que as doenças descritas não são de notificação obrigatória e algumas são bem conhecidas por veterinários e proprietários, que muitas vezes não fazem a confirmação laboratorial do diagnóstico.(AU)

The epidemiological aspects of diseases caused by fungi and oomycetes in horses in southeastern Rio Grande do Sul, Brazil, is described. The epidemiological rates, their causes, and health importance in the region were established. A descriptive epidemiology study was carried out in relation of potential risk factors. The impact on these diseases in the region was measured. From 1978 to 2014, pythiosis had a prevalence of 49.71% (86/173), and mycotoxicoses of 30.05% (52/173), with 45 cases of leukoencephalomalacia and 7 of ergotism. The prevalence of fungal infections was 19.65% (34/173) of cases. Dermatophytosis was the most prevalent fungal infection with 58.82% (20/34) of cases. The most isolated dermatophyte species were Trichophyton mentagrophytes 60% (12/20), Trichophyton equinum 25% (5/20) and Microsporum gypseum, Microsporum canis, and Trichophyton verrucosum, both responsible for 5% (1/20) of infections. Rhinosporidose was diagnosed in 35.29% (12/34) of cases. Uterine mycosis caused by Candida albicans and Cryptococcus laurentii was observed at 5.88% (2/34) of cases. Cladosporium sp. allergy was noted in one record. According to the incidence from 1990 to 2014, pythiosis had median incidence (MI) of 2.98 and interquartile range (DI) of 3.82. Mares were 4.18 times likely to develop the disease then males. The disease occurs in the region in every season. Leukoencephalomalacia had MI of 0.0; DI 1.00 and male horses were 3.4 times more likely than mares to develop the disease. Leukoencephalomalacia was 6 times more likely to occur during winter. Ergotism had MI of 0.00; DI of 0.000, rhinosporidiosis MI of 0.00, DI of 0.088 and ringworm MI of 0.00, and DI of 0.935. In the study pythiosis had the highest prevalence among the diseases observed, and may be considered endemic in the region. The magnitude of the diseases observed may be even greater within the equine herd, since these diseases are not of obligatory notification and some are well known by veterinarians and owners, who often do not obtain a laboratory confirmation of the diagnosis.(AU)

Azole resistance in Candida spp. isolated from Catú Lake, Ceará, Brazil: an efflux-pump-mediated mechanism

Since, there is no study reporting the mechanism of azole resistance among yeasts isolated from aquatic environments; the present study aims to investigate the occurrence of antifungal resistance among yeasts isolated from an aquatic environment, and assess the efflux-pump activity of the azole-resistant strains to better understand the mechanism of resistance for this group of drugs. For this purpose, monthly water and sediment samples were collected from Catú Lake, Ceará, Brazil, from March 2011 to February 2012. The obtained yeasts were identified based on morphological and biochemical characteristics. Of the 46 isolates, 37 were Candida spp., 4 were Trichosporon asahii, 3 were Cryptococcus laurentii, 1 Rhodotorula mucilaginosa, and 1 was Kodamaea ohmeri. These isolates were subjected to broth microdilution assay with amphotericin B, itraconazole, and fluconazole, according to the methodology standardized by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). The minimum inhibitory concentrations (MICs) of amphotericin B, itraconazole, and fluconazole were 0.031252 µg/mL, 0.0625 to 16 µg/mL, and 0.5 to 64 µg/mL, respectively, and 13 resistant azole-resistant Candida isolates were detected. A reduction in the azole MICs leading to the phenotypical reversal of the azole resistance was observed upon addition of efflux-pump inhibitors. These findings suggest that the azole resistance among environmental Candida spp. is most likely associated with the overexpression of efflux-pumps. (AU)

CARACTERIZAÇÃO AMBIENTAL DO COMPLEXO DE ESPÉCIES Cryptococcus neoformans E C. gattii NO INTERIOR DO ESTADO DE SÃO PAULO, BRASIL

A criptococose é uma doença sistêmica causada pela inalação de basidiosporos desidratados de espécies patogênicas do gênero Cryptococcus presentes no ambiente. Os complexos espécies mais associados à doença são os complexos de espécies Cryptococcus neoformans e C. gattii. O complexo de espécies C. neoformans está associado a casos de criptococose em pacientes imunossuprimidos, sendo comumente isolados do solo e de fezes de aves. O complexo de espécies de C. gattii, por sua vez, afeta principalmente indivíduos imunocompetentes e geralmente é isolado em espécies de árvores nativas ou exóticas em estado de biodegradação. Este estudo teve como objetivo realizar o mapeamento ambiental de espécies patogênicas do gênero Cryptococcus em amostras ambientais arbóreas em locais públicos da cidade de Birigui, São Paulo. Para a coleta das amostras, foram selecionadas regiões com maior trânsito neste município. Após processamento, foram realizados testes morfo-fisiológicos, bioquímicos, teste de assimilação de carbono e nitrogênio e PCR URA5 e RFLP com dupla digestão enzimática para caracterização do complexo de espécies/espécie de Cryptococcus. Entre fevereiro de 2018 e março de 2019, foram coletadas 100 amostras de diferentes árvores em locais arborizados públicos. A porcentagem de colonização das árvores por C. gattii VGII foi de 5%, por C. neoformans VNIV de 1% e foram encontrados 6% de C. laurentii e 3% de C. albidus. Estes resultados sugerem a existência de micro-focos e diversidade de espécies patogênicas de Cryptococcus em algumas árvores dos ambientes investigados neste estudo.

Cryptococcosis is a systemic disease caused by the inhalation of dehydrated basidiospores of pathogenic species of Cryptococcus genus present in the environment. The two species complex associated with the disease are the Cryptococcus neoformans and C. gattii species complex. C. neoformans species complex are associated with cases of cryptococcosis in immunosuppressed patients, being commonly isolated from the soil and birds feces. C. gattii species complex affects mainly immunocompetent individuals and are often isolated in native or exotic tree species in some state of biodegradation. This study aimed to perform the environmental mapping of pathogenic species of the genus Cryptococcus in tree samples of public places of the city of Birigui, São Paulo. For collection, the samples were collected from regions with greater traffic in this city. After processing, morphophysiological, biochemical, carbon and nitrogen assimilation and URA5 PCR and RFLP with double enzymatic digestion tests were performed to characterize the Cryptococcus species/species complex. Between february 2018 and march 2019 was collected a total of 100 samples from different trees in public arborized locations. The percentage of tree colonization by the C. gattii VGII was 5%, for C. neoformans VNIV was 1% and was found 6% of C. laurentii and 3% of C. albidus species. These results obtained suggests that there are a micro-foci and diversity of pathogenic Cryptococcus species in some arboreal environment locations investigated in this study.

Optimization of lipids production by Cryptococcus laurentii 11 using cheese whey with molasses

This study aimed the optimization of culture condition and composition for production of Cryptococcus laurentii 11 biomass and lipids in cheese whey medium supplemented with sugarcane molasses. The optimization of pH, fermentation time, and molasses concentration according to a full factorial statistical experimental design was followed by a Plackett-Burman experimental design, which was used to determine whether the supplementation of the culture medium by yeast extract and inorganic salts could provide a further enhancement of lipids production. The following conditions and composition of the culture medium were found to optimize biomass and lipids production: 360 h fermentation, 6.5 pH and supplementation of (g L-1): 50 molasses, 0.5 yeast extract, 4 KH2PO4, 1 Na2HPO4, 0.75 MgSO4•7H2O and 0.002 ZnSO4•H2O. Additional supplementation with inorganic salts and yeast extract was essential to optimize the production, in terms of product concentration and productivity, of neutral lipids by C. laurentii 11. Under this optimized condition, the production of total lipids increased by 133% in relation to control experiment (from 1.27 to 2.96 g L-1). The total lipids indicated a predominant (86%) presence of neutral lipids with high content of 16- and 18- carbon-chain saturated and monosaturated fatty acids. This class of lipids is considered especially suitable for the production of biodiesel.

Yeast diversity associated to sediments and water from two Colombian artificial lakes

In Colombia, knowledge of the yeast and yeast-like fungi community is limited because most studies have focused on species with clinical importance. Sediments and water represent important habitats for the study of yeast diversity, especially for yeast species with industrial, biotechnological, and bioremediation potential. The main purpose of this study was to identify and compare the diversity of yeast species associated with sediment and water samples from two artificial lakes in Universidad del Valle (Cali-Colombia). Yeast samplings were performed from fifteen sediment samples and ten water samples. Grouping of similar isolates was initially based on colony and cell morphology, which was then complemented by micro/mini satellite primed PCR banding pattern analysis by using GTG5 as single primer. A representative isolate for each group established was chosen for D1/D2 domain sequencing and identification. In general, the following yeast species were identified: Candida albicans, Candida diversa, Candida glabrata, Candida pseudolambica, Cryptococcus podzolicus, Cryptococcus rajasthanensis, Cryptococcus laurentii, Williopsis saturnus, Hanseniaspora thailandica, Hanseniaspora uvarum, Rhodotorula mucilaginosa, Saccharomyces cerevisiae, Torulaspora delbrueckii, Torulaspora pretoriensis, Tricosporon jirovecii, Trichosporon laibachii and Yarrowia lypolitica. Two possible new species were also found, belonging to the Issatchenkia sp. and Bullera sp. genera. In conclusion, the lakes at the Universidad del Valle campus have significant differences in yeast diversity and species composition between them.(AU)

CAPACIDADE PROBIÓTICA E ADSORVENTE DE AFLATOXINA B1 POR LEVEDURAS ISOLADAS DE VIVEIROS DE PISCICULTURA

As micotoxinas são metabólitos secundários produzidos por diversos fungos, com destaque para os gêneros Aspergillus, Penicillium e Fusarium que contaminam matérias-primas, alimentos e rações para animais. A utilização de adsorventes biológicos, como a levedura Sacharomyces cerevisiae, para remoção de micotoxinas apresenta-se como alternativa para minimizar o impacto negativo destes contaminantes na sanidade animal. Dessa forma, objetivou-se isolar, identificar e testar in vitro a capacidade probiótica e adsorvente de aflatoxina B1 (AFB1) por cepas de Saccharomyces cerevisiae isoladas de viveiros de piscicultura; avaliar o rendimento dos agentes encapsulantes: amido e maltodextrina e a recuperação de células viáveis da cepa Saccharomyces cerevisiae A8L3, isolada da água de viveiros de piscicultura, após o processo de encapsulamento por spray drying com os mesmos agentes, assim como avaliar a viabilidade das células encapsuladas durante o tempo de armazenamento e analisar a capacidade destas na adsorção in vitro de AFB1; avaliar os efeitos da inclusão da cepa microencapsulada Saccharomyces cerevisiae A8L3 em rações contaminadas com AFB1 sobre o desempenho zootécnico e a resposta imunológica de alevinos de tilápia-do-Nilo. A identificação das leveduras foi realizada através de técnicas morfológicas e moleculares (fingerprinting e sequenciamento da região ITS - 5.8S) para confirmação das espécies. Foram indentificadas quatro cepas provenientes da água: Saccharomyces cerevisiae (n = 3) e Debaryomyces nepalensis (n = 1); e seis cepas obtidas do substrato: Saccharomyces cerevisiae (n =3), Candida parapsilosis (n = 1), Cryptococcus laurentii (n = 1) e Meyerozyma caribbica (n = 1). Todas as cepas isoladas de Saccharomyces cerevisiae (A8L1, A8L2, A8L3, S11L2, S12L1 e S12L2) seguiram para os testes in vitro de capacidade de adsorção de AFB1 e de avaliação do potencial probiótico pelos testes: autoagregação, co-agregação e atividade antimicrobiana contra bactérias patogénicas, inibição homóloga e sobrevivência às condições gastrointestinais. Todas as seis cepas apresentaram capacidade probiótica, no entanto apenas as cepas A8L2 e A8L3 tiveram habilidade de adsorver AFB1. A cepa A8L3 foi escolhida para o encapsulamento por spray drying com os agentes encapsulantes amido e maltodextrina. Posteriormente as microcápsulas de amido e maltodextrina contendo a levedura foram armazenadas em refrigeração a 4ºC e avaliadas a sua viabilidade durante 60 dias. A maltodextrina tem potencial como encapsulante devido a uma maior recuperação de células viáveis, viabilidade das células constante por 60 dias e capacidade de adsorção in vitro de AFB1. No ensaio in vivo foram avaliados os parâmetros: qualidade da água, desempenho zootécnico, alterações histopatológicas e determinação da concentração de AFB1 em músculo e órgãos hematopoiéticos, contagem e isolamento das leveduras da ração e intestino. Constatou-se que a suplementação com Saccharomyces cerevisiae A8L3 microencapsulada com maltodextrina em rações contaminadas com AFB1 não exerceu influência negativa sobre o desempenho zootécnico e apresentou efeito imunoestimulante nos órgãos hematopoiéticos de alevinos de tilápia-do-Nilo.

Mycotoxins are secondary metabolites produced by fungi belonging to the Aspergillus, Penicillium and Fusarium genera that contaminate food and animal feeds. The use of biological adsorbents, such as the yeast Sacharomyces cerevisiae, to remove mycotoxins is an alternative to minimize the negative impact of these contaminants on animal health. The aims of this study were to isolate, identify and conduct in vitro tests regarding the probiotic and adsorbent capacity of aflatoxin B1 (AFB1) by Saccharomyces cerevisiae strains isolated from fish farms; evaluate the yield of the starch and maltodextrin as encapsulating agents and the recovery of viable cells from the Saccharomyces cerevisiae A8L3 strain, isolated from fish tank water, after the encapsulation process by spray drying with the same agents, as well as evaluate encapsulated cell viability during storage and analyze their in vitro AFB1 adsorption capacity. In addition, the effects of the inclusion of the microencapsulated Saccharomyces cerevisiae A8L3 strain in contaminated feeds on the zootechnical performance and immune response of Nile tilapia fingerling hematopoietic organs were also evaluated. Yeast identification proceeded through morphological and molecular techniques (fingerprinting and sequencing of the ITS-5.8S region) for species confirmation. Four strains from the water samples were identified, namely: Saccharomyces cerevisiae (n=3) and Debaryomyces nepalensis (n=1); and six strains from the substrate: Saccharomyces cerevisiae (n=3), Candida parapsilosis (n=1), Cryptococcus laurentii (n=1) and Meyerozyma caribbic (n=1). Saccharomyces cerevisiae A8L1, A8L2, A8L3, S11L2, S12L1 and S12L2 strains were then studied by in vitro AFB1 adsorption capacity tests and their probiotic potential was evaluated by autoaggregation, co-aggregation and antimicrobial activity assays against pathogenic bacteria, homologous inhibition and survival to gastrointestinal conditions. All six strains displayed probiotic capacity, however only the A8L2 and A8L3 strains exhibited the ability to adsorb AFB1. Strain A8L3 was chosen for spray drying encapsulation using starch and maltodextrin as the encapsulating agents. Subsequently the yeast-containing maltodextrin and starch microcapsules were stored at 4°C and evaluated for viability for 60 days. Maltodextrin shows potential as an encapsulant due to increased viable cell recovery, constant cell viability for 60 days, and in vitro AFB1 adsorption capacity. The following parameters were evaluated in the in vivo assays: water quality, zootechnical performance, histopathological changes, determination of AFB1 concentrations in hematopoietic organs and yeast counts and isolation in feeds and intestine. Supplementation with Saccharomyces cerevisiae A8L3 microencapsulated with maltodextrin in feeds contaminated with AFB1 showed no negative influence on zootechnical performance and had an immunostimulatory effect on the hematopoietic organs of Nile tilapia fingerlings.

Mycological contamination in dental unit waterlines in Istanbul, Turkey

Studies on dental units (DUs) are conducted either for the prevention or the reduction of the density of bacterial contamination in dental unit waterlines (DUWLs). However, the existence of fungi in the these systems requires more attention. During dental treatment, direct contact with water contaminated with fungi such as Candida, Aspergillus, or inhalation of aerosols from high-speed drill may cause various respiratory infections, such as asthma, allergies, and wounds on mucose membranes, especially on immunocompromised patients and dentists. The aims of this study are to investigate the number and colonization of fungi in DUWLs in the city of Istanbul, Turkey. Water samples were collected from air-water syringes, high-speed drills, and inlet waters from 41 DUs. The aerobic mesophilic fungi count in highspeed drills was higher than inlet waters and air-water syringes. Non-sporulating fungi were found in 7 DUs. The isolated fungi were identified as Penicillium waksmanii, Cladosporium spp., Penicillium spp., Candida famata, Cryptococcus laurentii, Candida guilliermondii, Penicillium verrucosum, Aspergillus pseudoglaucus, Penicillium decumbens, and Acremonium sp. Some of these fungal genera are known as opportunistic pathogens that led to respiratory diseases such as allergic rhinits. This study shows the importance of regular control of mycological contamination on water at DUs.(AU)

Comparison of primers for RAPD-PCR from environmental isolates of Cryptococcus neoformans, Cryptococcus albidus and Cryptococcus laurentii complex

Various organisms have been characterized by molecular methods, including fungi of the genus Cryptococcus. The purposes of this study were: to determine the discriminatory potential of the RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) primers, the pattern of similarity of the Cryptococcus species, and discuss their useful application in epidemiological studies. We analyzed 10 isolates of each specie/group: C. albidus, C. laurentii complex, C. neoformans var. grubii, all from environmental source, and two ATCC strains, C. neoformans var. grubii ATCC 90112, and C. neoformans var. neoformans ATCC 28957 by RAPD-PCR using the primers CAV1, CAV2, ZAP19, ZAP20, OPB11 and SEQ6. The primers showed a good discriminatory power, revealing important differences between them and between species; the SEQ6 primer discriminated a larger number of isolates of three species. Isolates of C. laurentii showed greater genetic diversity than other species revealed by all six primers. Isolates of C. neoformans were more homogeneous. Only the primer CAV2 showed no amplification of DNA bands for C. albidus. It was concluded that the use of limited number of carefully selected primers allowed the discrimination of different isolates, and some primers (e.g., CAV2 for C. albidus) may not to be applied to some species.

Cryptococcus spp. E ECTOPARASITOS ASSOCIADOS A POMBOS (Columba livia) EM HOSPITAIS, ESCOLAS, PRAÇAS, IGREJAS E PRÉDIOS ANTIGOS NA CIDADE DE SALVADOR, BAHIA

Objetivou-se neste estudo avaliar o risco da ocorrência de Cryptococcus spp. e ectoparasitos associados à presença de pombos (Columba livia) em hospitais, escolas, praças, igrejas e prédios antigos na cidade de Salvador, nordeste do Brasil. No período de 2015 a 2016, foram coletadas 851 amostras, sendo: de swab da cloaca de pombo (n= 229), material aderido às patas de pombo (n=26), fezes de pombos do ambiente (n= 315), poeira do interior de recintos (n=218) e detrito de árvores (n=63). Nos hospitais todos os tipos de amostras foram coletados o que variou para os demais locais de estudo. Os pombos foram capturados com rede, anilhados e coletadas amostras de cloaca e de resíduos de patas. Em três exemplares foram acoplados mini-GPSs. Foi realizada identificação fenotípica e bioquímica de Cryptococcus spp. O Risco Relativo [RR] de contaminação de Cryptococcus spp. foi calculado entre os locais com a presença de pombos e suas fezes em relação à poeira de recintos internos em hospitais e escolas, bem como, para locais com a presença de pombos e suas fezes em igrejas e prédios antigos em relação às praças. A positividade geral nas amostras foi de 15,0% (128/851), sendo 72,3% (99/137) de C. albidus, 17,5% (24/137) de C. laurentii, 10,2% (14/137) de C. neoformans, nove amostras apresentaram contaminação mista. Segundo os resultados de isolamento, as áreas externas dos hospitais apresentaram 3,6 vezes risco mais elevado de contaminação por Cryptococcus spp. em relação aos seus recintos internos (RR 3·6, 95% IC 1·5 - 7·4; p = 0·001). As igrejas e prédios antigos apresentaram duas vezes mais risco de contaminação em relação às praças (RR 20, 95% CI 10 39; p=0036). C. albidus e C. laurentii foram isolados em amostras de cloaca (56/229), patas de pombos (8/26) e detritos de árvores (2/63). C. neoformans (n=14) foi isolado apenas em amostras de fezes. Foram registradas infestações nosocomiais por Ornithonyssus bursa, Pseudolynchia canariensis e Peckia intermutans em um dos hospitais estudados, todas associadas à presença de Columba livia. Medidas estruturais são necessárias para evitar a permanência de pombos e a formação de seus ninhos, além de ações de educação no sentido de não alimentar essas aves e aprimorar o manejo do lixo em espaços públicos e nos hospitais, evitando a exposição das pessoas às contaminações e infestações associadas a Columba livia.

The objective of this study was to evaluate the risk of Cryptococcus spp. And ectoparasites associated with the presence of Columba livia pigeons in hospitals, schools, squares, churches and old buildings in the city of Salvador, northeastern Brazil. In the period from 2015 to 2016, 851 samples of pigeon cloaca swab (n = 229), material adhered to the pigeon paws (n=26), pigeon feces from the environment (n = 315), dust from the interior of rooms (n = 218) and detritus of trees (n=63). In the hospitals, all types of samples were collected, which varied for the other study sites. The pigeons were captured with net, ringed and collected samples of cloaca and paws. In three birds were coupled mini-GPS. Phenotypic and biochemical identification of Cryptococcus spp. The Relative Risk [RR] of contamination of Cryptococcus spp. Was calculated between sites with the presence of pigeons and their feces in relation to dust from interior of rooms in hospitals and schools, as well as for sites with pigeons and their feces in churches and old buildings in relation to squares. The overall positivity in the samples was 15.0% (128/851), with 72.3% (99/137) of C. albidus, 17.5% (24/137) of C. laurentii, 10.2% (14/137) of C. neoformans, nine samples showed mixed contamination. According to the isolation results, the external areas of the hospitals presented a 3.6 times higher risk of Cryptococcus spp. contamination in relation to its interior of rooms (RR 3 · 6, 95% CI 1 · 5 - 7 · 4, p = 0 · 001). Churches and old buildings had twice the risk of contamination compared to squares (RR 2 0, 95% CI 1 0 - 3 9, p = 0 036). C. albidus and C. laurentii were isolated in cloacal samples (56/229), pigeon paws (8/26) and tree debris (2/63). C. neoformans (n = 14) was isolated only in feces samples. Nosocomial infestations by Ornithonyssus bursa, Pseudolynchia canariensis and Peckia intermutans were recorded in one of the hospitals studied, all associated with the presence of Columba livia. Structural measures are necessary to prevent pigeons from permanence and nesting, as well as educational actions in order not to feed these birds and improve waste management in public spaces and hospitals, avoiding the exposure of people to the contamination and infestations associated with Columba livia.

Identificação e avaliação da resistência antimicrobiana de leveduras em vegetais minimamente processados / Identification and evaluation of antimicrobial resistance of yeast in minimally processed vegetables

O consumo de vegetais minimamente processados vem crescendo devido às exigências dos consumidores por produtos de fácil preparo. Este produto, por ser extremamente manipulado, pode ser contaminado por microorganismos deteriorantes, como as leveduras, que possuem a capacidade de diminuir a vida útil do alimento. Neste sentido, visando à preocupação com a resistência de micro-organismos aos métodos de sanitização utilizados pelas indústrias de alimentos e diante da necessidade de maiores estudos do poder antimicrobiano do ozônio, este estudo teve por objetivo isolar e identificar as leveduras presentes nos vegetais minimamente processados e verificar sua resistência antimicrobiana frente ao hipoclorito de sódio e ozônio. Foram coletadas 84 amostras de vegetais minimamente processados. Destas, foram isoladas 47 culturas de leveduras que foram submetidas à identificação e ao ensaio de resistência ao hipoclorito de sódio (50, 100, 200 e 400 ppm) e ozônio (0,25 e 0,5 ppm). Do total de leveduras isoladas, 85,1 corresponderam à Cryptococcus laurentii, 12,8 à Arxula adeninivorans e 2,1 à Debaryomyces hansenii var. fabryii. Todas elas apresentaram resistência aos sanitizantes hipoclorito de sódio e ozônio em todas as concentrações testadas. Diante destas observações, medidas devem ser adotadas durante o processamento para evitar a contaminação por microbiota deteriorante.(AU)

Isolamento de Cryptococcus neoformans, C. gattii e C. laurentii de sistema nervoso central de cães na cidade do Rio de Janeiro, RJ, Brasil

A criptococose é uma micose sistêmica com caráter oportunista, que pode acometer homens e diferentes espécies animais, principalmente em casos de imunodepressão. A infecção pode ser adquirida através da inalação, e por via hematógena, tem a capacidade de atingir e colonizar o sistema nervoso central. Objetivando o isolamento da levedura Cryptococcus neoformans a partir de sistema nervoso central de cães e gatos, no Município do Rio de Janeiro, procederam-se coletas no Laboratório de Diagnóstico de Raiva do Instituto Municipal de Medicina Veterinária Jorge Vaitsman, Rio de Janeiro. A etapa de isolamento e identificação se deu no Laboratório de Leveduras Patogênicas e Ambientais da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (LLPA-UFRRJ). Obteve-se um total de duzentas e uma amostras, sendo 166 de cães e 35 de gatos, resultando em quatro isolamentos positivos para o gênero nas amostras provenientes de cães; sendo um de Cryptococcus laurentii, dois de Cryptococcus neoformans e um de Cryptococcus gattii. Com este trabalho, obteve-se o primeiro isolamento descrito de Cryptococcus laurentii de sistema nervoso central de cão.

Isolamento de Cryptococcus neoformans, C. gattii e C. laurentii de sistema nervoso central de cães na cidade do Rio de Janeiro, RJ, Brasil

A criptococose é uma micose sistêmica com caráter oportunista, que pode acometer homens e diferentes espécies animais, principalmente em casos de imunodepressão. A infecção pode ser adquirida através da inalação, e por via hematógena, tem a capacidade de atingir e colonizar o sistema nervoso central. Objetivando o isolamento da levedura Cryptococcus neoformans a partir de sistema nervoso central de cães e gatos, no Município do Rio de Janeiro, procederam-se coletas no Laboratório de Diagnóstico de Raiva do Instituto Municipal de Medicina Veterinária Jorge Vaitsman, Rio de Janeiro. A etapa de isolamento e identificação se deu no Laboratório de Leveduras Patogênicas e Ambientais da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (LLPA-UFRRJ). Obteve-se um total de duzentas e uma amostras, sendo 166 de cães e 35 de gatos, resultando em quatro isolamentos positivos para o gênero nas amostras provenientes de cães; sendo um de Cryptococcus laurentii, dois de Cryptococcus neoformans e um de Cryptococcus gattii. Com este trabalho, obteve-se o primeiro isolamento descrito de Cryptococcus laurentii de sistema nervoso central de cão.

Isolamento de Cryptococcus neoformans, C. gattii e C. laurentii de sistema nervoso central de cães na cidade do Rio de Janeiro, RJ, Brasil

A criptococose é uma micose sistêmica com caráter oportunista, que pode acometer homens e diferentes espécies animais, principalmente em casos de imunodepressão. A infecção pode ser adquirida através da inalação, e por via hematógena, tem a capacidade de atingir e colonizar o sistema nervoso central. Objetivando o isolamento da levedura Cryptococcus neoformans a partir de sistema nervoso central de cães e gatos, no Município do Rio de Janeiro, procederam-se coletas no Laboratório de Diagnóstico de Raiva do Instituto Municipal de Medicina Veterinária Jorge Vaitsman, Rio de Janeiro. A etapa de isolamento e identificação se deu no Laboratório de Leveduras Patogênicas e Ambientais da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (LLPA-UFRRJ). Obteve-se um total de duzentas e uma amostras, sendo 166 de cães e 35 de gatos, resultando em quatro isolamentos positivos para o gênero nas amostras provenientes de cães; sendo um de Cryptococcus laurentii, dois de Cryptococcus neoformans e um de Cryptococcus gattii. Com este trabalho, obteve-se o primeiro isolamento descrito de Cryptococcus laurentii de sistema nervoso central de cão.

Isolamento de Cryptococcus neoformans, C. gattii e C. laurentii de sistema nervoso central de cães na cidade do Rio de Janeiro, RJ, Brasil

A criptococose é uma micose sistêmica com caráter oportunista, que pode acometer homens e diferentes espécies animais, principalmente em casos de imunodepressão. A infecção pode ser adquirida através da inalação, e por via hematógena, tem a capacidade de atingir e colonizar o sistema nervoso central. Objetivando o isolamento da levedura Cryptococcus neoformans a partir de sistema nervoso central de cães e gatos, no Município do Rio de Janeiro, procederam-se coletas no Laboratório de Diagnóstico de Raiva do Instituto Municipal de Medicina Veterinária Jorge Vaitsman, Rio de Janeiro. A etapa de isolamento e identificação se deu no Laboratório de Leveduras Patogênicas e Ambientais da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (LLPA-UFRRJ). Obteve-se um total de duzentas e uma amostras, sendo 166 de cães e 35 de gatos, resultando em quatro isolamentos positivos para o gênero nas amostras provenientes de cães; sendo um de Cryptococcus laurentii, dois de Cryptococcus neoformans e um de Cryptococcus gattii. Com este trabalho, obteve-se o primeiro isolamento descrito de Cryptococcus laurentii de sistema nervoso central de cão.

Isolamento de Cryptococcus neoformans, C. gattii e C. laurentii de sistema nervoso central de cães na cidade do Rio de Janeiro, RJ, Brasil

A criptococose é uma micose sistêmica com caráter oportunista, que pode acometer homens e diferentes espécies animais, principalmente em casos de imunodepressão. A infecção pode ser adquirida através da inalação, e por via hematógena, tem a capacidade de atingir e colonizar o sistema nervoso central. Objetivando o isolamento da levedura Cryptococcus neoformans a partir de sistema nervoso central de cães e gatos, no Município do Rio de Janeiro, procederam-se coletas no Laboratório de Diagnóstico de Raiva do Instituto Municipal de Medicina Veterinária Jorge Vaitsman, Rio de Janeiro. A etapa de isolamento e identificação se deu no Laboratório de Leveduras Patogênicas e Ambientais da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (LLPA-UFRRJ). Obteve-se um total de duzentas e uma amostras, sendo 166 de cães e 35 de gatos, resultando em quatro isolamentos positivos para o gênero nas amostras provenientes de cães; sendo um de Cryptococcus laurentii, dois de Cryptococcus neoformans e um de Cryptococcus gattii. Com este trabalho, obteve-se o primeiro isolamento descrito de Cryptococcus laurentii de sistema nervoso central de cão.

Isolamento de Cryptococcus neoformans, C. gattii e C. laurentii de sistema nervoso central de cães na cidade do Rio de Janeiro, RJ, Brasil

A criptococose é uma micose sistêmica com caráter oportunista, que pode acometer homens e diferentes espécies animais, principalmente em casos de imunodepressão. A infecção pode ser adquirida através da inalação, e por via hematógena, tem a capacidade de atingir e colonizar o sistema nervoso central. Objetivando o isolamento da levedura Cryptococcus neoformans a partir de sistema nervoso central de cães e gatos, no Município do Rio de Janeiro, procederam-se coletas no Laboratório de Diagnóstico de Raiva do Instituto Municipal de Medicina Veterinária Jorge Vaitsman, Rio de Janeiro. A etapa de isolamento e identificação se deu no Laboratório de Leveduras Patogênicas e Ambientais da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (LLPA-UFRRJ). Obteve-se um total de duzentas e uma amostras, sendo 166 de cães e 35 de gatos, resultando em quatro isolamentos positivos para o gênero nas amostras provenientes de cães; sendo um de Cryptococcus laurentii, dois de Cryptococcus neoformans e um de Cryptococcus gattii. Com este trabalho, obteve-se o primeiro isolamento descrito de Cryptococcus laurentii de sistema nervoso central de cão.