Resumo

Collecting and analyzing biological specimens leads to unprecedented opportunities for assessing and understanding the complex networks of interactions between biomolecules, and the functional and clinical consequences of their alterations. In this context, the Tissue Bank plays a key role in life science research and development, making its implementation in veterinary medicine essential for developing new research, especially in the forensic and tumor fields. In total, 52 tissues were collected, 15 forensic samples, 25 neoplasms, and 12 cell cultures. The storage, freezing, data management protocols, and the quality of these samples were analyzed. In the same way, the quality of the RNA and DNA in the short and long term was evaluated. The quality of the genetic material was confirmed by polymerase chain reaction. For data comparisons, non-parametric tests were used, with a significance level of p˂0.05. The measures adopted in the Tissue Bank for obtaining and handling the samples and for controlling and guaranteeing the quality were considered adequate, as they enabled optimal preservation of the integrity of the genetic material, a relevant factor for the use of tumor samples and forensic samples stored in the Biobank, thus contributing to future molecular research in the area of pathology and investigations of crimes against fauna.

A coleta e análise de espécimes biológicos é necessária porque abre oportunidades sem precedentes para avaliar e conhecer as complexas redes de interações entre biomoléculas, e as consequências funcionais e clínicas das suas alterações. Nesse contexto, o Banco de Tecidos desempenha um papel fundamental na investigação e desenvolvimento das ciências da vida, tornando a sua implementação na área da medicina veterinária essencial para o desenvolvimento de novas pesquisas em especial na área forense e tumoral. Foram coletadas 52 amostras de tecidos, 15 de amostras forenses, 25 neoplasias e 12 culturas celulares. Nesses tecidos, foram analisados os protocolos de armazenamento, congelamento, gerenciamento de dados e qualidade das amostras. Da mesma forma, foi analisada a qualidade do RNA e do DNA a curto e longo prazo e a qualidade do material genético foi confirmada pela reação em cadeia da polimerase. Para comparação dos dados, foram utilizados testes não paramétricos, com nível de significância p˂0,05. As medidas adotadas no Banco de Tecidos para obtenção e manuseio das amostras, controle e garantia da qualidade foram adequadas, pois possibilitaram a preservação ideal da integridade do material genético, fator relevante para a utilização de amostras tumorais e forenses armazenadas no Biobanco, contribuindo assim para futuras pesquisas moleculares na área de patologia e investigação de crimes contra a fauna.

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There are reports of septicemic salmonellosis in exotic birds caused by Salmonella enterica serotype Typhimurium, although they are scarce and do not address the anatomopathological and immunohistochemical aspects of this condition in blue-fronted Amazon parrots (Amazona aestiva). This study aims to report an outbreak of salmonellosis by S. Typhimurium in 15 blue-fronted parrots introduced to a rehabilitation center in the state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Hepatomegaly and splenomegaly, accompanied by flat white areas in the capsule and parenchyma, were the most frequent gross changes, histologically represented by necrotic and heterophilic hepatitis and splenitis and associated with bacteria in the cytoplasm of macrophages and free in the affected tissue. S. Typhimurium was identified from bacterial culture, PCR, and DNA sequencing. Along with immunohistochemistry samples of liver, spleen, kidney, small intestine, pancreas, thyroid, heart, and lung, immunostaining was used for Salmonella spp. without previous bacterial isolation. The lethality of this outbreak demonstrates the relevance of salmonellosis in blue-fronted parrots, which are known to be carriers of this bacteria.

Apesar de existirem relatos sobre salmonelose septicêmica em aves silvestres por Salmonella enterica sorovar Typhimurium, eles são escassos e não abordam os aspectos anatomopatológicos e imuno-histoquímicos da condição em papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva). Este trabalho visou relatar um surto de salmonelose por S. Typhimurium em 15 papagaios-verdadeiros introduzidos em um centro de reabilitação localizado no estado de Mato Grosso do Sul, Brasil. Hepatomegalia e esplenomegalia acompanhadas por áreas planas brancacentas na cápsula e no parênquima foram as alterações macroscópicas mais frequentes, representadas histologicamente por hepatite e esplenite necróticas e heterofílicas associadas a bactérias no citoplasma de macrófagos e livres no tecido afetado. S. Typhimurium foi identificada a partir de cultura bacteriana, PCR e sequenciamento de DNA. Na imuno-histoquímica, as amostras de fígado, baço, rim, intestino delgado, pâncreas, tireoide, coração e pulmão evidenciaram imunomarcação para Salmonella spp., mesmo quando não houve isolamento bacteriano prévio. A alta letalidade deste surto demonstra relevância da salmonelose em papagaios-verdadeiros, que são majoritariamente atribuídos como hospedeiros carreadores desta bactéria.

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Mesenchymal stem cells (MSCs) have great potential for application in cell therapy and tissue engineering procedures because of their plasticity and capacity to differentiate into different cell types. Given the widespread use of MSCs, it is necessary to better understand some properties related to osteogenic differentiation, particularly those linked to biomaterials used in tissue engineering. The aim of this study was to develop an analysis method using FT-Raman spectroscopy for the identification and quantification of biochemical components present in conditioned culture media derived from MSCs with or without induction of osteogenic differentiation. All experiments were performed between passages 3 and 5. For this analysis, MSCs were cultured on scaffolds composed of bioresorbable poly(hydroxybutyrate co-hydroxyvalerate) (PHBV) and poly(ε-caprolactone) (PCL) polymers. MSCs (GIBCO®) were inoculated onto the pure polymers and 75:25 PHBV/PCL blend (dense and porous samples). The plate itself was used as control. The cells were maintained in DMEM (with low glucose) containing GlutaMAX® and 10% FBS at 37ºC with 5% CO2 for 21 days. The conditioned culture media were collected and analyzed to probe for functional groups, as well as possible molecular variations associated with cell differentiation and metabolism. The method permitted to identify functional groups of specific molecules in the conditioned medium such as cholesterol, phosphatidylinositol, triglycerides, beta-subunit polypeptides, amide regions and hydrogen bonds of proteins, in addition to DNA expression. In the present study, FT-Raman spectroscopy exhibited limited resolution since different molecules can express similar or even the same stretching vibrations, a fact that makes analysis difficult. There were no variations in the readings between the samples studied. In conclusion, FT-Raman spectroscopy did not meet expectations under the conditions studied.

As células-tronco mesenquimais (MSCs) possuem grande potencial para aplicação em procedimentos terapêuticos ligados a terapia celular e engenharia de tecidos, considerando-se a plasticidade e capacidade de formação em diferentes tipos celulares por elas. Dada a abrangência no emprego das MSCs, há necessidade de se compreender melhor algumas propriedades relacionadas à diferenciação osteogênica, particularmente liga à biomateriais usados em engenharia de tecidos. Este projeto objetiva o desenvolvimento de uma metodologia de análise empregando-se a FT-Raman para identificação e quantificação de componentes bioquímicos presentes em meios de cultura condicionados por MSCs, com ou sem indução à diferenciação osteogênica. Todos os experimentos foram realizados entre as passagens 3 e 5. Para essas análises, as MSCs foram cultivadas sobre arcabouços de polímeros biorreabsorvíveis de poli (hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) (PHBV) e o poli (ε-caprolactona) (PCL). As MSCs (GIBCO®) foram inoculadas nos polímeros puros e na mistura 75:25 de PHBV / PCL (amostras densas e porosas). As células foram mantidas em DMEM (com baixa glicose) contendo GlutaMAX® e 10% de SFB a 37oC com 5% de CO2 por 21 dias. A própria placa foi usada como controle. Os meios de cultura condicionados foram coletados e analisadas em FT-Raman para sondagem de grupos funcionais, bem como possíveis variações moleculares associadas com a diferenciação e metabolismo celular. Foi possível discernir grupos funcionais de moléculas específicas no meio condicionado, como colesterol, fosfatidilinositol, triglicerídeos, forma Beta de polipeptídeos, regiões de amida e ligações de hidrogênio de proteínas, além da expressão de DNA. Na presente avaliação, a FT-Raman apresentou como uma técnica de resolução limitada, uma vez que modos vibracionais de estiramento próximos ou mesmo iguais podem ser expressos por moléculas diferente, dificultando a [...].

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Abstract Mesenchymal stem cells (MSCs) have great potential for application in cell therapy and tissue engineering procedures because of their plasticity and capacity to differentiate into different cell types. Given the widespread use of MSCs, it is necessary to better understand some properties related to osteogenic differentiation, particularly those linked to biomaterials used in tissue engineering. The aim of this study was to develop an analysis method using FT-Raman spectroscopy for the identification and quantification of biochemical components present in conditioned culture media derived from MSCs with or without induction of osteogenic differentiation. All experiments were performed between passages 3 and 5. For this analysis, MSCs were cultured on scaffolds composed of bioresorbable poly(hydroxybutyrate-co-hydroxyvalerate) (PHBV) and poly(ε-caprolactone) (PCL) polymers. MSCs (GIBCO®) were inoculated onto the pure polymers and 75:25 PHBV/PCL blend (dense and porous samples). The plate itself was used as control. The cells were maintained in DMEM (with low glucose) containing GlutaMAX® and 10% FBS at 37oC with 5% CO2 for 21 days. The conditioned culture media were collected and analyzed to probe for functional groups, as well as possible molecular variations associated with cell differentiation and metabolism. The method permitted to identify functional groups of specific molecules in the conditioned medium such as cholesterol, phosphatidylinositol, triglycerides, beta-subunit polypeptides, amide regions and hydrogen bonds of proteins, in addition to DNA expression. In the present study, FT-Raman spectroscopy exhibited limited resolution since different molecules can express similar or even the same stretching vibrations, a fact that makes analysis difficult. There were no variations in the readings between the samples studied. In conclusion, FT-Raman spectroscopy did not meet expectations under the conditions studied.

Resumo As células-tronco mesenquimais (MSCs) possuem grande potencial para aplicação em procedimentos terapêuticos ligados a terapia celular e engenharia de tecidos, considerando-se a plasticidade e capacidade de formação em diferentes tipos celulares por elas. Dada a abrangência no emprego das MSCs, há necessidade de se compreender melhor algumas propriedades relacionadas à diferenciação osteogênica, particularmente liga à biomateriais usados em engenharia de tecidos. Este projeto objetiva o desenvolvimento de uma metodologia de análise empregando-se a FT-Raman para identificação e quantificação de componentes bioquímicos presentes em meios de cultura condicionados por MSCs, com ou sem indução à diferenciação osteogênica. Todos os experimentos foram realizados entre as passagens 3 e 5. Para essas análises, as MSCs foram cultivadas sobre arcabouços de polímeros biorreabsorvíveis de poli (hidroxibutirato-co-hidroxivalerato) (PHBV) e o poli (ε-caprolactona) (PCL). As MSCs (GIBCO®) foram inoculadas nos polímeros puros e na mistura 75:25 de PHBV / PCL (amostras densas e porosas). As células foram mantidas em DMEM (com baixa glicose) contendo GlutaMAX® e 10% de SFB a 37oC com 5% de CO2 por 21 dias. A própria placa foi usada como controle. Os meios de cultura condicionados foram coletados e analisadas em FT-Raman para sondagem de grupos funcionais, bem como possíveis variações moleculares associadas com a diferenciação e metabolismo celular. Foi possível discernir grupos funcionais de moléculas específicas no meio condicionado, como colesterol, fosfatidilinositol, triglicerídeos, forma Beta de polipeptídeos, regiões de amida e ligações de hidrogênio de proteínas, além da expressão de DNA. Na presente avaliação, a FT-Raman apresentou como uma técnica de resolução limitada, uma vez que modos vibracionais de estiramento próximos ou mesmo iguais podem ser expressos por moléculas diferente, dificultando a análise. Não houve variações nas leituras entre as amostras estudadas, concluindo-se que a FT-Raman não atendeu às expectativas nas condições estudadas.

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Abstract Endophytic bacteria serve key roles in the maintenance of plant health and growth. Few studies to date, however, have explored the antagonistic and plant growth-promoting (PGP) properties of Prunus cerasifera endophytes. To that end, we isolated endophytic bacteria from P. cerasifera tissue samples and used a dual culture plate assay to screen these microbes for antagonistic activity against Verticillium dahliae, Botryosphaeria dothidea, Fusarium oxysporum, F. graminearum, and F. moniliforme. Of the 36 strains of isolated bacteria, four (strains P1, P10, P16, and P20) exhibited antagonistic effects against all five model pathogens, and the P10 strain exhibited the strongest antagonistic to five pathogens. This P10 strain was then characterized in-depth via phenotypic assessments, physiological analyses, and 16s rDNA sequencing, revealing it to be a strain of Bacillus subtilis. Application of a P10 cell suspension (1×108 CFU/mL) significantly enhanced the seed germination and seedling growth of tomato in a greenhouse setting. This P10 strain further significantly suppressed tomato Verticillium wilt with much lower disease incidence and disease index scores being observed following P10 treatment relative to untreated plants in pot-based experiments. Tomato plants that had been treated with strain P10 also enhanced defense-related enzymes, peroxidase, superoxide dismutase, and catalase activity upon V. dahliae challenge relative to plants that had not been treated with this endophytic bacterium. The results revealed that the P10 bacterial strain has potential value as a biocontrol agent for use in the prevention of tomato Verticillium wilt.

Resumo As bactérias endofíticas desempenham papel fundamental na manutenção da saúde e do crescimento das plantas. Poucos estudos até o momento, no entanto, exploraram as propriedades antagônicas e promotoras de crescimento de plantas (PGP) de endófitos de Prunus cerasifera. Para esse fim, isolamos bactérias endofíticas de amostras de tecido de P. cerasifera e usamos um ensaio de placa de cultura dupla para rastrear esses micróbios quanto à atividade antagonista contra Verticillium dahliae, Botryosphaeria dothidea, Fusarium oxysporum, F. graminearum e F. moniliforme. Das 36 cepas de bactérias isoladas, quatro (cepas P1, P10, P16 e P20) exibiram efeitos antagônicos contra todos os cinco patógenos modelo, e a cepa P10 exibiu o antagonista mais forte para cinco patógenos. Essa cepa P10 foi então caracterizada em profundidade por meio de avaliações fenotípicas, análises fisiológicas e sequenciamento de rDNA 16s, revelando ser uma cepa de Bacillus subtilis. A aplicação de uma suspensão de células P10 (1 × 108 UFC / mL) aumentou significativamente a germinação das sementes e o crescimento das mudas de tomate em casa de vegetação. Essa cepa P10 suprimiu ainda mais a murcha de Verticillium do tomate com incidência de doença muito menor e pontuações de índice de doença sendo observadas após o tratamento com P10 em relação a plantas não tratadas em experimentos baseados em vasos. As plantas de tomate que foram tratadas com a cepa P10 também aumentaram as enzimas relacionadas à defesa, peroxidase, superóxido dismutase e atividade da catalase após o desafio de V. dahliae em relação às plantas que não foram tratadas com essa bactéria endofítica. Os resultados revelaram que a cepa bacteriana P10 tem valor potencial como agente de biocontrole para uso na prevenção da murcha de Verticillium em tomate.

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ABSTRACT: Cultivation of soybean and off-season corn is advancing in areas under restricted edaphoclimatic conditions, such as petric plinthosols, which have significant proportions of gravel and are deficiency in micro-nutrients such as copper (Cu) and zinc (Zn). The effects of Cu and Zn concentrations on soybean nutrition cultivated in petric plinthosol are unclear, and it is unknown whether the levels considered adequate for other soils are sufficient for gravely soils, or even if higher Cu and Zn rates can cause a toxic effect in soybean. The objective was to compare the response of soybean grown in petric plinthosol and ferralsol to Cu and Zn doses for identifying the changes induced by gravel soils and to evaluate the residual effect on off-season corn grown in ferralsol. Four experiments were carried out with Cu and Zn doses applied to soil with the soybean crop in ferralsol and plinthosol. The leaf tissues of soybean crops in the two soils showed the same rate of increase in Zn concentrations, for each kg·ha-1 of Zn applied, the increase in Zn was 0.7 mg·kg-1, suggesting no difference in the effect of Zn fertilization between soils with and without gravel. The dosages of Zn and Cu Oxysulfate applied to soil did not cause residual effects in the off-season corn. The highest doses of Cu and Zn did not have any toxic effects on the plants. The main criteria for interpreting Cu and Zn in soil analysis are thus also applicable to soybean crops grown in petric plinthosol.

RESUMO: O cultivo de soja e milho safrinha avança em condições edafoclimáticas restritivas, como nos PLINTOSSOLOS PÈTRICOS, que apresentam proporções consideráveis de cascalho no seu perfil e são deficientes em cobre (Cu) e zinco (Zn). Não se sabe os efeitos de doses de Cu e Zn na nutrição da soja cultivada em PLINTOSSOLO PÉTRICO, nem se os níveis considerados adequados para outros solos são suficientes para solos cascalhentos, ou ainda, se altas doses de Cu e Zn podem causar toxidez nas plantas de soja. O objetivo foi comparar a resposta a doses de Cu e Zn em soja cultivada em PLINTOSSOLO PÉTRICO e em LATOSSOLO, a fim de identificar alterações provocadas pelo solo com cascalho, e adicionalmente, avaliar o efeito residual da adubação feita na soja para o milho safrinha cultivado no LATOSSOLO. Quatro experimentos foram desenvolvidos com doses de Cu e Zn aplicadas via solo na cultura da soja em LATOSSOLO e em PLINTOSSOLO PÉTRICO. Houve a mesma taxa de incremento na concentração de Zn no tecido foliar da soja nos dois solos estudados, para cada kg ha-1 de Zn aplicado, o incremento foi de 0,7 mg·kg-1 demonstrando que não há diferença de um solo com ou sem cascalho para os efeitos da adubação. As doses de oxissulfato de Zn e Cu aplicadas via solo não causaram efeito residual no milho safrinha. As maiores doses de Cu e Zn não causaram efeito tóxico nas plantas. Os principais critérios de interpretação de Cu e Zn em análise do solo se aplicam para soja cultivada em PLINTOSSOLO PÉTRICO.

Resumo

Cultivation of soybean and off-season corn is advancing in areas under restricted edaphoclimatic conditions, such as petric plinthosols, which have significant proportions of gravel and are deficiency in micro-nutrients such as copper (Cu) and zinc (Zn). The effects of Cu and Zn concentrations on soybean nutrition cultivated in petric plinthosol are unclear, and it is unknown whether the levels considered adequate for other soils are sufficient for gravely soils, or even if higher Cu and Zn rates can cause a toxic effect in soybean. The objective was to compare the response of soybean grown in petric plinthosol and ferralsol to Cu and Zn doses for identifying the changes induced by gravel soils and to evaluate the residual effect on off-season corn grown in ferralsol. Four experiments were carried out with Cu and Zn doses applied to soil with the soybean crop in ferralsol and plinthosol. The leaf tissues of soybean crops in the two soils showed the same rate of increase in Zn concentrations, for each kg·ha-1 of Zn applied, the increase in Zn was 0.7 mg·kg-1, suggesting no difference in the effect of Zn fertilization between soils with and without gravel. The dosages of Zn and Cu Oxysulfate applied to soil did not cause residual effects in the off-season corn. The highest doses of Cu and Zn did not have any toxic effects on the plants. The main criteria for interpreting Cu and Zn in soil analysis are thus also applicable to soybean crops grown in petric plinthosol.

O cultivo de soja e milho safrinha avança em condições edafoclimáticas restritivas, como nos PLINTOSSOLOS PÈTRICOS, que apresentam proporções consideráveis de cascalho no seu perfil e são deficientes em cobre (Cu) e zinco (Zn). Não se sabe os efeitos de doses de Cu e Zn na nutrição da soja cultivada em PLINTOSSOLO PÉTRICO, nem se os níveis considerados adequados para outros solos são suficientes para solos cascalhentos, ou ainda, se altas doses de Cu e Zn podem causar toxidez nas plantas de soja. O objetivo foi comparar a resposta a doses de Cu e Zn em soja cultivada em PLINTOSSOLO PÉTRICO e em LATOSSOLO, a fim de identificar alterações provocadas pelo solo com cascalho, e adicionalmente, avaliar o efeito residual da adubação feita na soja para o milho safrinha cultivado no LATOSSOLO. Quatro experimentos foram desenvolvidos com doses de Cu e Zn aplicadas via solo na cultura da soja em LATOSSOLO e em PLINTOSSOLO PÉTRICO. Houve a mesma taxa de incremento na concentração de Zn no tecido foliar da soja nos dois solos estudados, para cada kg ha-1 de Zn aplicado, o incremento foi de 0,7 mg·kg-1 demonstrando que não há diferença de um solo com ou sem cascalho para os efeitos da adubação. As doses de oxissulfato de Zn e Cu aplicadas via solo não causaram efeito residual no milho safrinha. As maiores doses de Cu e Zn não causaram efeito tóxico nas plantas. Os principais critérios de interpretação de Cu e Zn em análise do solo se aplicam para soja cultivada em PLINTOSSOLO PÉTRICO.

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Pythium insidiosum é o agente etiológico da pitiose, sendo ele um microrganismo da classe dos oomicetos, patogênico e causador da pitiose em várias espécies animais, incluindo humanos. A doença é caracterizada por lesões no tecido cutâneo/subcutâneo, lesões gastrointestinais, vasculares, oculares, podendo se disseminar para órgãos internos. A forma cutânea gera granulomas exsudativos, sendo comum a formação de "kunkers", um material necrótico de coloração amarelada, apenas nos equídeos. O diagnóstico é feito através dos sinais clínicos e histórico do paciente, cultura e identificação do agente e alguns testes como os sorológicos (imunodifusão, ELISA, Western blot, hemaglutinação e teste imunocromatográfico), histopatológico, imunohistoquímica, testes moleculares e recentemente, análises proteômicas, como o MALDI ­TOF. O tratamento baseia-se na exérese cirúrgica da lesão com margens livre do patógeno, sendo apenas possível em regiões sem comprometimento de importantes estruturas anatômicas; uso de medicamentos como Anfotericina B e Iodeto de Potássio e a imunoterapia como forma de modular a resposta imune do hospedeiro. Não existe fator predisponente para a aquisição da doença, sendo o principal risco a permanência em águas estagnadas com presença de material vegetal. Dessa forma, a principal forma de infecção é evitar, quando possível, a manutenção por longos períodos de animais no interior de lagoas, rios/riachos ou açudes, bem como utilizar equipamentos de proteção individual em humanos quando necessitarem adentrar em tais ambientes.

Pythium insidiosumis the etiological agent of pythiosis. This microorganism is a pathogenic oomycete that causes disease in several animal species, such as horses, dogs, cattle, sheep, goats, cats, birds and also humans. It is a disease characterized by lesions in the cutaneous/subcutaneous tissues in the form of exudative granulomas, the formation of "kunkers" being common in horses. It can also cause damage in gastrointestinal tract, vascular, ocular, and disseminated to internal organs. The diagnostic methods are, in addition to clinical signs and patient history, culture and identification of the agent, serological tests (immunodiffusion, ELISA, Western blot, hemagglutination and immunochromatographic tests), histopathological, immunohistochemical, molecular tests and recently, proteomic analysis, like MALDI-TOF. The treatment is based on surgical exeresis of the lesion with margins free of the pathogen, and this treatment is only possible in regions without involviment of important anatomical structures; use of drugs such as Amphotericin B and Potassium Iodide and immunotherapy as a way to modulate the host immune response. There is no predisposing factor for acquiring the disease, the main risk being staying in stagnant water with the presence of plant material. Thus, the main form of infection is to avoid, when possible, keeping animals inside ponds, rivers/streams or dams for long periods, as well as using personal protective equipment on humans when they need to enter such environments.

Pythium insidiosumes el agente etiológico de la pitiosis. Este microorganismo es un oomicetopatógeno que causa enfermedad en varias especies animales, como caballos, perros, bovinos, ovinos, caprinos, felinos, aves y también humanos. Es una enfermedad caracterizada por lesiones en el tejido cutáneo/subcutáneo en forma de granulomas exudativos, siendo frecuente la formación de kunkers en los caballos. También puede causar lesiones gastrointestinales, vasculares y oculares y diseminarse a los órganos internos. Los métodos diagnósticos son, además de los signos clínicos y la historia del paciente, el cultivo e identificación del agente, las pruebas serológicas (inmunodifusión, ELISA, Western blot, hemaglutinación y prueba inmunocromatográfica), la histopatología, la inmunohistoquímica, las pruebas moleculares y, recientemente, el análisis proteómico,como el MALDI-TOF. El tratamiento se basa en la escisión quirúrgica de la lesión con márgenes libres de patógenos, y este tratamiento solo es posible en regiones sin compromiso de estructuras anatómicas importantes; uso de fármacos como la anfotericina B y el yoduro de potasio y la inmunoterapia como forma de modular la respuesta inmunitaria del huésped. No existe un factor predisponente para adquirir la enfermedad, siendo el principal riesgo permanecer en aguas estancadas con presencia de material vegetal. Así, la principal forma de infección es evitar, en lo posible, mantener a los animales dentro de estanques, ríos/arroyos o represas por períodos prolongados, así como usar equipo de protección personal en humanos cuando necesitan ingresar a dichos ambientes.

Resumo

Abstract Endophytic bacteria serve key roles in the maintenance of plant health and growth. Few studies to date, however, have explored the antagonistic and plant growth-promoting (PGP) properties of Prunus cerasifera endophytes. To that end, we isolated endophytic bacteria from P. cerasifera tissue samples and used a dual culture plate assay to screen these microbes for antagonistic activity against Verticillium dahliae, Botryosphaeria dothidea, Fusarium oxysporum, F. graminearum, and F. moniliforme. Of the 36 strains of isolated bacteria, four (strains P1, P10, P16, and P20) exhibited antagonistic effects against all five model pathogens, and the P10 strain exhibited the strongest antagonistic to five pathogens. This P10 strain was then characterized in-depth via phenotypic assessments, physiological analyses, and 16s rDNA sequencing, revealing it to be a strain of Bacillus subtilis. Application of a P10 cell suspension (1×108 CFU/mL) significantly enhanced the seed germination and seedling growth of tomato in a greenhouse setting. This P10 strain further significantly suppressed tomato Verticillium wilt with much lower disease incidence and disease index scores being observed following P10 treatment relative to untreated plants in pot-based experiments. Tomato plants that had been treated with strain P10 also enhanced defense-related enzymes, peroxidase, superoxide dismutase, and catalase activity upon V. dahliae challenge relative to plants that had not been treated with this endophytic bacterium. The results revealed that the P10 bacterial strain has potential value as a biocontrol agent for use in the prevention of tomato Verticillium wilt.

Resumo As bactérias endofíticas desempenham papel fundamental na manutenção da saúde e do crescimento das plantas. Poucos estudos até o momento, no entanto, exploraram as propriedades antagônicas e promotoras de crescimento de plantas (PGP) de endófitos de Prunus cerasifera. Para esse fim, isolamos bactérias endofíticas de amostras de tecido de P. cerasifera e usamos um ensaio de placa de cultura dupla para rastrear esses micróbios quanto à atividade antagonista contra Verticillium dahliae, Botryosphaeria dothidea, Fusarium oxysporum, F. graminearum e F. moniliforme. Das 36 cepas de bactérias isoladas, quatro (cepas P1, P10, P16 e P20) exibiram efeitos antagônicos contra todos os cinco patógenos modelo, e a cepa P10 exibiu o antagonista mais forte para cinco patógenos. Essa cepa P10 foi então caracterizada em profundidade por meio de avaliações fenotípicas, análises fisiológicas e sequenciamento de rDNA 16s, revelando ser uma cepa de Bacillus subtilis. A aplicação de uma suspensão de células P10 (1 × 108 UFC / mL) aumentou significativamente a germinação das sementes e o crescimento das mudas de tomate em casa de vegetação. Essa cepa P10 suprimiu ainda mais a murcha de Verticillium do tomate com incidência de doença muito menor e pontuações de índice de doença sendo observadas após o tratamento com P10 em relação a plantas não tratadas em experimentos baseados em vasos. As plantas de tomate que foram tratadas com a cepa P10 também aumentaram as enzimas relacionadas à defesa, peroxidase, superóxido dismutase e atividade da catalase após o desafio de V. dahliae em relação às plantas que não foram tratadas com essa bactéria endofítica. Os resultados revelaram que a cepa bacteriana P10 tem valor potencial como agente de biocontrole para uso na prevenção da murcha de Verticillium em tomate.

Resumo

Endophytic bacteria serve key roles in the maintenance of plant health and growth. Few studies to date, however, have explored the antagonistic and plant growth-promoting (PGP) properties of Prunus cerasifera endophytes. To that end, we isolated endophytic bacteria from P. cerasifera tissue samples and used a dual culture plate assay to screen these microbes for antagonistic activity against Verticillium dahliae, Botryosphaeria dothidea, Fusarium oxysporum, F. graminearum, and F. moniliforme. Of the 36 strains of isolated bacteria, four (strains P1, P10, P16, and P20) exhibited antagonistic effects against all five model pathogens, and the P10 strain exhibited the strongest antagonistic to five pathogens. This P10 strain was then characterized in-depth via phenotypic assessments, physiological analyses, and 16s rDNA sequencing, revealing it to be a strain of Bacillus subtilis. Application of a P10 cell suspension (1×108 CFU/mL) significantly enhanced the seed germination and seedling growth of tomato in a greenhouse setting. This P10 strain further significantly suppressed tomato Verticillium wilt with much lower disease incidence and disease index scores being observed following P10 treatment relative to untreated plants in pot-based experiments. Tomato plants that had been treated with strain P10 also enhanced defense-related enzymes, peroxidase, superoxide dismutase, and catalase activity upon V. dahliae challenge relative to plants that had not been treated with this endophytic bacterium. The results revealed that the P10 bacterial strain has potential value as a biocontrol agent for use in the prevention of tomato Verticillium wilt.

As bactérias endofíticas desempenham papel fundamental na manutenção da saúde e do crescimento das plantas. Poucos estudos até o momento, no entanto, exploraram as propriedades antagônicas e promotoras de crescimento de plantas (PGP) de endófitos de Prunus cerasifera. Para esse fim, isolamos bactérias endofíticas de amostras de tecido de P. cerasifera e usamos um ensaio de placa de cultura dupla para rastrear esses micróbios quanto à atividade antagonista contra Verticillium dahliae, Botryosphaeria dothidea, Fusarium oxysporum, F. graminearum e F. moniliforme. Das 36 cepas de bactérias isoladas, quatro (cepas P1, P10, P16 e P20) exibiram efeitos antagônicos contra todos os cinco patógenos modelo, e a cepa P10 exibiu o antagonista mais forte para cinco patógenos. Essa cepa P10 foi então caracterizada em profundidade por meio de avaliações fenotípicas, análises fisiológicas e sequenciamento de rDNA 16s, revelando ser uma cepa de Bacillus subtilis. A aplicação de uma suspensão de células P10 (1 × 108 UFC / mL) aumentou significativamente a germinação das sementes e o crescimento das mudas de tomate em casa de vegetação. Essa cepa P10 suprimiu ainda mais a murcha de Verticillium do tomate com incidência de doença muito menor e pontuações de índice de doença sendo observadas após o tratamento com P10 em relação a plantas não tratadas em experimentos baseados em vasos. As plantas de tomate que foram tratadas com a cepa P10 também aumentaram as enzimas relacionadas à defesa, peroxidase, superóxido dismutase e atividade da catalase após o desafio de V. dahliae em relação às plantas que não foram tratadas com essa bactéria endofítica. Os resultados revelaram que a cepa bacteriana P10 tem valor potencial como agente de biocontrole para uso na prevenção da murcha de Verticillium em tomate.

Resumo

The corn snake (Pantherophis guttatus) is a non-venomous snake from the Colubridae family. The pair of scent glands is indispensable in the physiology of reproduction and defense of the species. This structure is located caudal to the cloaca. It is responsible for releasing a thick material based on lipids containing pheromones that perform functions associated with animal behavior and survival. This work aims to report infection by Morganella sp. in a scent gland in a female corn snake, evidencing the diagnosis and treatment. An increase in volume was seen in the final third, proximal to the cloaca, firm consistency, immobile, and approximately 4 cm long and painful to touch. Samples of the material were collected for bacterial culture and antibiogram examination, being positive for bacteria of the genus Morganella. Based on the result of the antibiogram, it was possible to determine the most appropriate therapeutic protocol, with the referral to perform the surgical procedure to remove the tissue compromised by the infection, remaining stable until the removal of the stitches 40 days after the procedure, with total surgical wound healing.(AU)

A corn snake (Pantherophis guttatus) é uma serpente não peçonhenta, da família Colubridae. Na fisiologia da reprodução e defesa da espécie, o par de glândulas de cheiro é indispensável. Essa estrutura está localizada caudal à cloaca e é responsável pela liberação de um material espesso à base de lipídeos, contendo feromônios que exercem funções associadas ao comportamento animal e à sua sobrevivência. O objetivo desse trabalho é relatar uma infecção por Morganella sp. em glândula de cheiro em uma fêmea de corn snake, evidenciando o diagnóstico e tratamento. Observou-se um aumento de volume no terço final, proximal a cloaca, de consistência firme, imóvel e com aproximadamente 4 cm de comprimento e sensibilidade dolorosa ao toque. Foram coletadas amostras do material para cultura bacteriana e exame de antibiograma, sendo positivo para bactérias do gênero Morganella. Com base no resultado do antibiograma, foi possível determinar o protocolo terapêutico mais adequado, como o encaminhamento para realização do procedimento cirúrgico para remoção do tecido comprometido pela infecção, se mantendo estável até a remoção dos pontos, 40 dias após o procedimento, com total cicatrização da ferida cirúrgica.(AU)

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The application of quality control tests, such as the comet assay, are essential when adipose-derived stem cells are cultured for therapeutic purposes. However, the steps involved in the development of this assay should be investigated, in order to reduce their influence on genomic damage in cells. The study aimed to evaluate if the cell culture process causes DNA damage, and if variations in the lysis time and pH of the electrophoresis buffer interfere in the genotoxicity results. Four different comet assay protocols were evaluated, and the effects of lysis time and pH conditions of the electrophoresis buffer solution were stated as follows: 2 hours and pH 12; 24 hours and pH 12; 2 hours and pH ≥ 13 and 24 hours and pH ≥ 13. The tail moment was analyzed, and results indicated that at the time cells were detached from the flasks, there was little damage to the DNA in the adipose-derived stem cells, which was confirmed by evaluation of the expression of mRNA genes involved in damage and repair processes of genetic material. Also, the tail moment values ​​did not show significant differences among the four evaluated protocols (p < 0.05), with no indication of damage when compared to the positive control (p < 0.05). Thus, any of the tested protocols can be applied in genotoxicity tests with adipose-derived stem cells, without causing damage to them.(AU)

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Correlation between proximal sensing techniques and laboratory results of qualitative variables plus agronomic attributes was evaluated of a 3,0 ha vineyard in the county of Muitos Capões, Northeast of Rio Grande do Sul State, Brazil, in Vitis vinifera L. at 2017/2018 harvest, aiming to evaluate the replacement of conventional laboratory analysis in viticulture by Vegetation Indexes, at situations were laboratory access are unavailable. Based on bibliographic research, looking for vegetative indexes developed or used for canopy reflectance analysis on grapevines and whose working bands were within the spectral range provided by the equipment used, a total of 17 viable candidates were obtained. These chosen vegetation indices were correlated, through Pearson (5%), with agronomic soil attributes (apparent electrical conductivity, clay, pH in H2O, phosphorus, potassium, organic matter, aluminum, calcium, magnesium, effective CTC, CTC at pH 7.0, zinc, copper, sulfur and boron) for depths 0 -20 cm and 20-40 cm, and plant tissue (Nitrogen, phosphorus, potassium, calcium, magnesium, sulfur, copper, zinc, iron, manganese and boron) , in addition to some key oenological and phytotechnical parameters for the quantification of wine production and quality. One hundred and thirty ninesignificant correlations were obtained from this cross, with 36 moderate coefficients between 19 parameter variables versus 12 of the indexes. We concluded that in cases where access or availability of laboratory analyzes is difficult or impracticable, the use of vegetation indices is possible if the correlation coefficients reach, at least, the moderate magnitude, serving as a support to decision making until the lack analytical structure to be remedied.

Avaliou-se a correlação entre as técnicas de sensoriamento proximal e os resultados laboratoriais de variáveis qualitativas, mais os atributos agronômicos do solo de um vinhedo de 3,0 ha no município de Muitos Capões, região nordeste do estado do Rio Grande do Sul, Brasil, na safra 2017/2018. Objetivou avaliar a substituição das análises laboratoriais convencionais em viticultura por Índices de Vegetação, em situações de indisponibilidade de acesso ao laboratório. Com base em pesquisa bibliográfica, buscaram-se índices vegetativos desenvolvidos ou utilizados para análise de refletância de dossel em videiras e cujas bandas de trabalho estavam dentro do intervalo espectral fornecido pelo equipamento utilizado, obtendo-se um total de 17 candidatos viáveis. Esses índices de vegetação escolhidos foram correlacionados, por meio de Pearson (5%), com atributos agronômicos do solo (condutividade elétrica aparente, argila, pH em H2O, fósforo, potássio, matéria orgânica, alumínio, cálcio, magnésio, CTC efetivo, CTC em pH 7,0, zinco, cobre, enxofre e boro) para profundidades de 0 - 20 cm e 20 - 40 cm, e tecido vegetal (nitrogênio, fósforo, potássio, cálcio, magnésio, enxofre, cobre, zinco, ferro, manganês e boro), além de alguns parâmetros enológicos e fitotécnicos essenciais para a quantificação da produção e qualidade do vinho. Deste cruzamento foram obtidas 139 correlações significativas, resultando 36 coeficientes moderados entre 19 variáveis de parâmetros versus 12 dos índices. Concluímos que nos casos em que o acesso ou disponibilidade de análises laboratoriais é difícil ou impraticável, a utilização de índices de vegetação é possível, desde que os coeficientes de correlação atinjam, pelo menos, a magnitude moderada, servindo como suporte para a tomada de decisão até a falta de estrutura analítica ser remediada.

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The present study aimed to isolate endophilic fungi from plant tissues (leaves, stems and roots) of beans, in addition to identifying them at the genus level. The experiment was conducted at IDR-Londrina. Bean samples were collected at the Londrina Research Station and at UENP-Bandeirantes. The leaves, stems and roots were separated; fragments of 5 mm diameter were cut and disinfested. They were later transferred to BDA culture medium. The plates were incubated at room temperature for seven days for growth of the microorganisms present. The presence and absence, colonization rate (TC) for each tissue and gender identification of fungi were evaluated. The experiment was conducted in a completely randomized design, with five replications. Forty-eight endophilic isolates were found, 13 in root, 17 in stem and 18 in leaf. CT ranged from 17-100% (leaf), 17-83% (stem) and 16-100% (root). The genus Alternaria sp. and Cladosporium sp. have greater specificity with the leaf and stem, Penicillium sp. root and stem. The genera Fusarium sp. and Aspergillus sp. are found in all organs, Curvularia sp., Nigrospora sp. and Thichoderma sp. demonstrated leaf specificity, Macrophomina sp. the root, and Colletotrichum sp. to the stem. Thus, the identified fungi present potential for future studies in their application in the biocontrol of various plant diseases.

O presente estudo teve como objetivo realizar o isolamento de fungos endofíticos dos tecidos vegetais (folhas, caules e raízes) de feijão, além de identifica-los a nível de gênero. O experimento foi conduzido no IDR-Londrina. Amostras de feijão foram coletadas na Estação de Pesquisa de Londrina e na UENP-Bandeirantes. Foram separadas as folhas, caules e raízes, cortados fragmentos de 5 mm diâmetro e desinfestados. Posteriormente foram transferidos para meio de cultura BDA. As placas foram incubadas à temperatura ambiente por sete dias, para crescimento dos microrganismos presentes. Foram avaliados a presença e ausência, taxa de colonização (TC) para cada tecido e identificação a nível de gênero dos fungos. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado, com cinco repetições. Encontrou-se 48 isolados endofíticos, sendo 13 em raiz, 17 em caule e 18 em folha. A TC variou de 17-100% (folha), de 17-83% (caule) e 16-100% (raiz). O gênero Alternaria sp. e Cladosporium sp. apresentam especificidade maior com a folha e caule, o Penicillium sp. com raiz e caule. Os gêneros Fusarium sp. e Aspergillus sp. são encontrados em todos os órgãos, Curvularia sp., Nigrospora sp. e Thichoderma sp. demonstraram especificidade em folha, Macrophomina sp. a raiz, e Colletotrichum sp. ao caule. Dessa forma, os fungos identificados apresentam-se com potencial para futuros estudos em sua aplicação no biocontrole de diversas doenças de plantas.

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Considering that crop nutrition is essential to obtain high yields, the objective of this study was to determine the optimal economicaldose of nitrogen (N) associated with maximum technical and economical yield. Additionally, to correlate cowpea cultivars with N contents and yield. The experimentwas conducted under the edaphoclimatic conditions of Teresina, PI, Brazil, in Entisol (Fluvic Neosol), in the second half of 2017, in a randomized block design in a factorial scheme (2x2x5), whose factors were: (i) cowpea genotypes (BRS Imponente and BRS Itaim), (ii) form of application of N fertilization (basal + top-dressing or fully top-dressing) and (iii) N doses (zero, 10, 30, 50 and 70 kg ha-1-urea as source). The variables measured were the total N content in the plant tissue, with a collection ofleaves +1 and +3, and grain yield. When analyzing the effect of the interaction, there was significance only for the factors form of application and N doses. However, when the doses were further analyzed for each form of N fertilization, the best responsemodel was the quadratic, whose point of maximum physical yield was verified with N doses of 34 and 44 kg ha-1for basal + top-dressing and fully top-dressing applications, respectively. Furthermore, the most economical doses for basal + top-dressing and fully top-dressing N applications were 26.0 and 35.6 kg ha-1, respectively. For N, the leaf that best represents the nutritional status for leaf diagnosis was +3.(AU)

Considerando que a nutrição da cultura é preponderante para obtenção de elevadas produtividades, objetivou-se determinar a dose ótima econômica de N associada à máxima produtividade técnica e econômica. Adicionalmente, realizar correlações entre cultivares de feijão-caupi com os teores de N e a produtividade. O experimento foi conduzido nas condições edafoclimáticas de Teresina, PI, em um Neossolo Flúvico, no segundo semestre de 2017, em delineamento em blocos casualizados em esquema fatorial (2x2x5), cujos fatores foram: (i) genótiposde feijão-caupi (BRS Imponente e BRS Itaim), (ii) época de aplicação da adubação nitrogenada (fundação+cobertura ou totalmente em cobertura) e (iii) doses de N (zero, 10, 30, 50 e 70 kg ha-1­fonte ureia). As variáveis mensuradas foram a análise do N total do tecido vegetal com a coleta da folha +1 e +3, além da produtividade de grãos. Quando analisamos o efeito da interação houve significância somente para os fatores época de aplicação e doses de N, e quando desdobramos as doses para cada época de adubação nitrogenada o melhor modelo de resposta foi o quadrático, cujo ponto de máxima produtividade física foram verificados com as doses de 34 e 44 kg ha-1de N para a aplicação na fundação+cobertura e totalmente em cobertura, respectivamente. Ainda, a doses mais econômica para a aplicação de N em fundação+cobertura e totalmente em cobertura foram de 26,0 e 35,6 kg ha-1, respectivamente. Para o N a folha que melhor representa o estado nutricional para a diagnose foliar mostrou-se ser a +3.(AU)

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Blackleg, an acute myonecrosis caused by Clostridium chauvoei, is usually underdiagnosed since the rapid transport of adequate samples for laboratory testing is difficult. This study tested a direct polymerase chain reaction (PCR) technique using common filter paper impregnated with cattle tissue samples obtained from animals suspected with blackleg. Twenty-five samples, belonging to eleven animals from Rio Grande do Sul State, Brazil, were analyzed. The direct PCR technique identified eight positive animals corroborating with results from microbiological culture. Skeletal muscle was the most common tissue type used in this study and when the animal was positive the pathogen was always detected in this tissue. Storage time of the impregnated filter paper at room temperature did not prove to be a limiting factor for the quality of the results indicating that this procedure can be carried out in the field and samples be sent in regular mail. Our results suggested that direct PCR of common filter paper impregnated with cattle tissue is a practical and economical alternative for the diagnosis of blackleg.

Carbúnculo sintomático, uma mionecrose aguda causada por Clostridium chauvoei, costuma ser subdiagnosticada, pois o transporte rápido de amostras adequadas para exames laboratoriais é complicado. O objetivo deste estudo foi testar a técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) direta, utilizando papel filtro comum impregnado com amostras de tecido bovino obtidas de animais suspeitos de carbúnculo sintomático. Foram analisadas 25 amostras, pertencentes a onze animais do estado do Rio Grande do Sul, Brasil. A técnica de PCR direta identificou oito animais positivos, corroborando com os resultados da cultura microbiológica. O músculo esquelético foi o tecido mais utilizado neste estudo e quando o animal foi positivo, o patógeno sempre foi detectado neste tecido. O tempo de armazenamento do papel filtro impregnado, à temperatura ambiente, não se mostrou um fator limitante para a qualidade dos resultados, indicando que esse procedimento pode ser realizado no local e as amostras enviadas por correio normal. Nossos resultados sugerem que a PCR direta usando papel filtro comum impregnado com tecido bovino é uma alternativa prática e econômica para o diagnóstico de carbúnculo sintomático.

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The release of endometrial prostaglandin-F2α (PGF2α) in bovine females can be induced in vivo by estradiol (E2). However, its role in this mechanism has not been clarified. We hypothesized that E2 stimulates the activity and abundance of protein kinase C (PKC) and phospholipase A2 (PLA2). Our objective in this study was to analyze the effects of PKC and PLA2 inhibitors on PGF2α synthesis induced by E2 and calcium ionophore (CI) in bovine endometrial cells (BEND cells; Experiment 1). Additionally, we evaluated the abundance of PKC and PLA2 in endometrial explants of cows treated or not with E2 17 days after estrus (D17, D0 = estrus; Experiment 2). In Experiment 1, BEND cells were submitted to a PKC inhibitor (10 µM of C25H24N4O2; bisindolylmaleimide I, or BIS I), a PLA2 inhibitor (20 µM of arachydoniltrifluoromethane or AACOCF3), or none. The BEND cells were subsequently treated with E2 and CI, and PGF2α concentrations were measured in the culture medium through radioimmunoassay. For DIF-12 (PGF2α concentration 12 h after treatment subtracted from PGF2α concentration at hour 0), no PKC inhibitor effect was observed (P= 0.2709). However, DIF-12 was lower (P < 0.05) for groups treated with the PLA2 inhibitor and PLA2 inhibitor + CI + E2 groups than the control and CI + E2 groups. Thus, AACOCF3 was an efficient PLA2 inhibitor in the BEND cells culture system, and E2 did not stimulate the synthesis of PKC and PLA2. In Experiment 2, cyclic Nellore heifers received none (n = 5) or 3 mg (n = 6) of 17ß-E2 on D17 and were slaughtered 2 h after administration. The abundance of PKC and PLA2 in the endometrial tissue was evaluated using Western blotting analysis. No E2 effect was observed on PKC (P = 0.08) and PLA2 (P = 0.56). We concluded that E2 did not stimulate the activity and abundance of PKC and PLA2.(AU)

A liberação endometrial de prostaglandina-F2α (PGF2α) em fêmeas bovinas pode ser induzida in vivo pelo estradiol (E2). Entretanto o seu mecanismo de ação ainda não foi bem esclarecido. Nossa hipótese é que o E2 estimula a atividade e a abundância da proteína quinase C (PKC) e da fosfolipase A2 (PLA2). Nosso objetivo com este estudo foi analizar os efeitos de inibidores de PKC e PLA2 na síntese de PGF2α induzida por E2 e ionóforo de cálcio (CI) em células endometriais bovinas (células BEND; Experimento 1). Adicionalmente, nós avaliamos a abundância de PKC e PLA2 em explantes endometriais de vacas tratadas com ou sem E2 17 dias após o estro (D17, D0 = estro; Experimento 2). No Experimento 1, células BEND foram submetidas ao inibidor de PKC (10 µM de C25H24N4O2; bisindolylmaleimide I, ou BIS I), e ao inibidor de PLA2 (20 µM de arachydoniltrifluoromethane ou AACOCF3) ou a nenhum inibidor. As células BEND foram subsequentemente tratadas com E2 e CI e concentrações de PGF2α foram mensuradas no meio de cultura por radioimunoenssaio. Para DIF-12 (concentração de PGF2α 12 horas depois do tratamento, subtraída da concentração de PGF2α na hora 0), não foi observado efeito do inibidor de PKC (P = 0.2709). Entretanto DIF-12 foi menor (P < 0.05) nos grupos tratados com inibidor de PLA2 e inibidor de PLA2 + CI + E2 quando comparados com o grupo controle e o grupo CI + E2. O AACOCF3 foi um eficiente inibidor de PLA2 em sistema de cultura de células BEND e o E2 não estimulou a síntese de PKC e PLA2. No Experimento 2, novilhas Nelore cíclicas receberam 3 mg de 17ß-E2 (n = 6) ou nenhum tratamento (n = 5) no D17 e foram abatidas duas horas depois da administração dos tratamentos. A quantidade de PKC and PLA2 no tecido endometrial foi avaliada pela técnica de Western Blotting. Não foi observado efeito do E2 sobre a PKC (P= 0.08) e nem sobre a PLA2 (P= 0.56). Conclui-se que o E2 não estimulou a atividade e abundância de PKC e PLA2.(AU)

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Osteitis deformans (Pagets disease) is a chronic bone disorder characterized by excessive osteoclast-mediated bone resorption followed by new bone formation. The present paper reports this condition in an 18-year-old captive golden lancehead (Bothrops insularis) from Brazil. This patient initially exhibited anorexia and swelling in the middle third of the spine associated with locomotor disability. For diagnosis, radiography, ultrasound, computed tomography, cytology, and microbiological culture were performed. Diagnostic imaging showed bone changes, vertebral fusion, and bone proliferation. Cytology revealed blood cells how toxic heterophiles, reactive monocytes, young red blood cells, and polychromasia compatible with an infectious process. A bacterial culture identified an ampicillin-susceptible strain of Enterococcus faecalis. Antibiotic treatment was promptly started, but the snake died 25 days later. Histopathologically, the bone tissue showed a generalized thickening of the vertebral trabeculae. For the first time, the presence of E. faecalis associated with the development of osteitis deformans in snakes was presented.

Osteíte deformante (Doença de Paget) é um distúrbio ósseo crônico caracterizado por reabsorção óssea excessiva mediada por osteoclastos, seguida por nova formação óssea. O presente trabalho relata essa condição em uma serpente jararaca-ilhoa (Bothrops insularis) do Brasil de 18 anos. O paciente apresentou inicialmente anorexia e um inchaço no primeiro terço médio da coluna associado com a incapacidade locomotora. O diagnóstico foi estabelecido com o apoio de radiografia, ultrassonografia, tomografia computadorizada, citologia e cultura microbiológica. O diagnóstico por imagem mostrou alterações ósseas, fusão de vértebras e proliferação óssea. A citologia mostrou células sanguíneas como heterófílos tóxicos, monócitos reativos, células sanguíneas jovens e policromasia compatíveis com um processo infeccioso. A cultura bacteriana identificou uma cepa de Enterococcus faecalis suscetível à ampicilina. O tratamento com antibióticos foi iniciado imediatamente, mas a serpente morreu 25 dias depois. Histopatologicamente, o tecido ósseo mostrou um espessamento generalizado das trabéculas vertebrais. Portanto, foi demonstrado pela primeira vez a presença de E. faecalis associada ao desenvolvimento de osteíte deformante em uma serpente.

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Osteitis deformans (Pagets disease) is a chronic bone disorder characterized by excessive osteoclast-mediated bone resorption followed by new bone formation. The present paper reports this condition in an 18-year-old captive golden lancehead (Bothrops insularis) from Brazil. This patient initially exhibited anorexia and swelling in the middle third of the spine associated with locomotor disability. For diagnosis, radiography, ultrasound, computed tomography, cytology, and microbiological culture were performed. Diagnostic imaging showed bone changes, vertebral fusion, and bone proliferation. Cytology revealed blood cells how toxic heterophiles, reactive monocytes, young red blood cells, and polychromasia compatible with an infectious process. A bacterial culture identified an ampicillin-susceptible strain of Enterococcus faecalis. Antibiotic treatment was promptly started, but the snake died 25 days later. Histopathologically, the bone tissue showed a generalized thickening of the vertebral trabeculae. For the first time, the presence of E. faecalis associated with the development of osteitis deformans in snakes was presented.

Osteíte deformante (Doença de Paget) é um distúrbio ósseo crônico caracterizado por reabsorção óssea excessiva mediada por osteoclastos, seguida por nova formação óssea. O presente trabalho relata essa condição em uma serpente jararaca-ilhoa (Bothrops insularis) do Brasil de 18 anos. O paciente apresentou inicialmente anorexia e um inchaço no primeiro terço médio da coluna associado com a incapacidade locomotora. O diagnóstico foi estabelecido com o apoio de radiografia, ultrassonografia, tomografia computadorizada, citologia e cultura microbiológica. O diagnóstico por imagem mostrou alterações ósseas, fusão de vértebras e proliferação óssea. A citologia mostrou células sanguíneas como heterófílos tóxicos, monócitos reativos, células sanguíneas jovens e policromasia compatíveis com um processo infeccioso. A cultura bacteriana identificou uma cepa de Enterococcus faecalis suscetível à ampicilina. O tratamento com antibióticos foi iniciado imediatamente, mas a serpente morreu 25 dias depois. Histopatologicamente, o tecido ósseo mostrou um espessamento generalizado das trabéculas vertebrais. Portanto, foi demonstrado pela primeira vez a presença de E. faecalis associada ao desenvolvimento de osteíte deformante em uma serpente.

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Tissue engineering replaces injured tissues by manipulating cells, making scaffolds, and using molecules that stimulate the tissue. Mesenchymal stem cells (MSCs) are good candidates for tissue engineering, as this is one of the cell types which are recruited to repair injured tissues. Scaffolds are structural devices that allow cell fixation and migration, with polypropylene meshes being an example. This study aims to evaluate the culture of adipose tissue-derived mesenchymal stem cells (ADSCs), isolated from C57Bl/6 GFP + mice, in two types of polypropylene meshes (macroporous and microporous) in conventional culture plates and plates coated with methacrylate, over a period of fifteen days. The objective was to obtain the best interaction protocol between the mesh and the cells. The choice of the best method was based on adherence, maintenance of adherence and viability during culture. The amount of ADSCs adhering was checked daily by counting in a Neubauer Chamber and by using a growth curve performed with the MTT assay. The ADSCs adhering to the meshes were visualized with DAPI, panotic, hematoxylin and eosin, immunohistochemistry (integrin), and immunofluorescence (actin). ADSCs adhere to all forms of culture and to the two types of polypropylene mesh. ADSCs adhered more to the microporous mesh, within the seven day period of culture and in the plates without methacrylate. Thus, polypropylene meshes offer a good scaffold for ADSCs to adhere to.

A engenharia de tecidos substitui tecidos danificados com a manipulação de células, confecção de arcabouços e a utilização de moléculas que estimulem o tecido. As células-tronco mesenquimais (MSCs) são boas candidatas para engenharia de tecido, pois são um dos tipos celulares recrutadas para a reparação de tecidos lesionados. O arcabouço deve ser um dispositivo estrutural que forneça uma estrutura para o crescimento e a diferenciação celular no sítio, sendo a tela de polipropileno um exemplo. O objetivo deste estudo foi avaliar o cultivo de células-tronco mesenquimais de tecido de adiposo (ADSCs), isoladas de camundongos C57Bl/6 GFP+, em dois tipos de telas de polipropileno (macroporosa e microporosa) em placas de cultura convencionais e revestidas com metacrilato, durante quinze dias, para obter o melhor protocolo de interação entre a tela e as células. A escolha do melhor método foi baseada na adesão, manutenção da adesão e viabilidade durante cultivo. A quantidade de ADSCs aderidas foi verificada diariamente em contagem em Câmara de Neubauer e através de uma curva de crescimento realizada através de ensaio de MTT. As ADSCs aderidas nas telas foram visualizadas com a marcação de DAPI, panótico, hematoxilina e eosina, imumo-histoquímica (integrina) e imunofluorescência (actina). Nas duas formas de cultivo e nos dois tipos de telas de polipropileno houve aderência das ADSCs. Houve maior aderência na tela microporosa, no período de sete dias de cultivo e em placas sem metacrilato. Conclui-se que a tela de polipropileno oferece um bom arcabouço para as ADSCs se aderirem.