Phylogeography of cliff racer (Platyceps rhodorachis Jan, 1865) from Punjab, Pakistan

Abstract The present study reports the existence of cliff racer, Platyceps rhodorachis from the plains of Punjab, Pakistan. A total of 10 specimens were captured during the field surveys from June to September, 2018 from different sites of Punjab. Platyceps rhodorachis was identify on the basis of morphology and confirmed through COI gene sequences. The obtained DNA sequences have shown reliable and exact species identification. Newly produced DNA sequences of Platyceps rhodorachis were submitted to GenBank and accession numbers were obtained (MK936174.1, MK941839.1 and MT790210.1). N-J tree based on COI sequences of Platyceps rhodorachis clearly separated as out-group with other members of family Colubridae based on p-distance. The intra-specific genetic variation ranges from 12% to 18%. The DNA sequences of Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis and Platyceps ventromaculatus indusai are not available at NCBI to validate their taxonomic positions. In our recommendations, a large scale molecular based identification of Pakistans herpetofauna is required to report more new or subspecies from country.

Resumo O presente estudo relata a existência de um corredor de penhasco, Platyceps rhodorachis, das planícies de Punjab, Paquistão. Um total de 10 espécimes foi capturado durante os levantamentos de campo de junho a setembro de 2018 em diferentes locais de Punjab. Platyceps rhodorachis foi identificada com base na morfologia e confirmada por meio de sequências do gene COI. As sequências de DNA obtidas mostraram identificação de espécies confiável e exata. Sequências de DNA de Platyceps rhodorachis recém-produzidas foram submetidas ao GenBank e os números de acesso foram obtidos (MK936174.1, MK941839.1 e MT790210.1). Árvore N-J baseada em sequências COI de Platyceps rhodorachis claramente separadas como out-group com outros membros da família Colubridae com base na distância-p. A variação genética intraespecífica varia de 12% a 18%. As sequências de DNA de Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis e Platyceps ventromaculatus indusai não estão disponíveis no NCBI para validar suas posições taxonômicas. Em nossas recomendações, uma identificação de base molecular em grande escala da herpetofauna do Paquistão é necessária para relatar mais novas ou subespécies do país.

Spintherobolus papilliferus in the rio Ribeira de Iguape basin: implications for the biogeography and conservation of an endangered species (Ostariophysi: Characiformes)

Spintherobolus papilliferus is an endangered characid endemic of the Atlantic Rainforest, known from sparse locations in the upper rio Tietê basin around the metropolitan area of São Paulo city, and from an affluent of rio Itapanhaú, a coastal stream in Bertioga, São Paulo State. In 2020, S. papilliferus was sampled from the rio Ribeira de Iguape basin in Juquitiba, São Paulo State, representing a new distributional record. We compared 17 morphometric and six meristic characters from all specimens with data from the rios Tietê and Itapanhaú. An overlap in the morphological data from the three populations was detected, except for five measure whose values are lower in rio Ribeira de Iguape. MANOVA and LDA revealed that this population differs significantly from the other two, showing shallower body and caudal peduncle, among other features. These morphological differences may be due to environmental selective pressures since rio Ribeira de Iguape drainage is marked by fast waters which can influence the shape of fish bodies over time. DNA-barcoding of all Spintherobolus species corroborate that the rio Ribeira de Iguape population belongs to S. papilliferus. We also present a hypothesis for the disjunct distribution of S. papilliferus involving headwater capture and discuss the implications for the conservation of this endangered species.

Spintherobolus papilliferus é um caracídeo endêmico da Mata Atlântica e ameaçado de extinção, conhecido de localidades esparsas na bacia do alto rio Tietê, região metropolitana da cidade de São Paulo, e de um afluente do rio Itapanhaú, um riacho costeiro em Bertioga, Estado de São Paulo. Em 2020, S. papilliferus foi amostrada na bacia do rio Ribeira de Iguape em Juquitiba, São Paulo, representando um novo registro de distribuição. Comparamos 17 caracteres morfométricos e seis merísticos dos exemplares com dados dos rios Tietê e Itapanhaú. Houve sobreposição nos valores dos dados exceto em cinco medidas cujos valores são menores no rio Ribeira de Iguape. MANOVA e LDA revelaram que esta população difere significativamente das demais populações, sendo estes exemplares caracterizados pelas menores alturas do corpo e pedúnculo caudal, dentre outras características. Estas diferenças morfológicas possivelmente decorrem de pressões ambientais, pois a drenagem do rio Ribeira de Iguape possui ambientes de corredeiras velozes que podem influenciar no formato do corpo dos peixes. DNA-barcoding de todas as espécies de Spintherobolus corroborou que a população do rio Ribeira de Iguape pertence à S. papilliferus. Apresentamos também uma hipótese para a distribuição disjunta de S. papilliferus envolvendo captura de cabeceiras e discutimos implicações para a conservação dessa espécie ameaçada.

Phylogeography of cliff racer (Platyceps rhodorachis Jan, 1865) from Punjab, Pakistan / Filografia de penhasco (Platyceps rhodorachis Jan, 1865) de Punjab, Paquistão

The present study reports the existence of cliff racer, Platyceps rhodorachis from the plains of Punjab, Pakistan. A total of 10 specimens were captured during the field surveys from June to September, 2018 from different sites of Punjab. Platyceps rhodorachis was identify on the basis of morphology and confirmed through COI gene sequences. The obtained DNA sequences have shown reliable and exact species identification. Newly produced DNA sequences of Platyceps rhodorachis were submitted to GenBank and accession numbers were obtained (MK936174.1, MK941839.1 and MT790210.1). N-J tree based on COI sequences of Platyceps rhodorachis clearly separated as out-group with other members of family Colubridae based on p-distance. The intra-specific genetic variation ranges from 12% to 18%. The DNA sequences of Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis and Platyceps ventromaculatus indusai are not available at NCBI to validate their taxonomic positions. In our recommendations, a large scale molecular based identification of Pakistan’s herpetofauna is required to report more new or subspecies from country.

O presente estudo relata a existência de um corredor de penhasco, Platyceps rhodorachis, das planícies de Punjab, Paquistão. Um total de 10 espécimes foi capturado durante os levantamentos de campo de junho a setembro de 2018 em diferentes locais de Punjab. Platyceps rhodorachis foi identificada com base na morfologia e confirmada por meio de sequências do gene COI. As sequências de DNA obtidas mostraram identificação de espécies confiável e exata. Sequências de DNA de Platyceps rhodorachis recém-produzidas foram submetidas ao GenBank e os números de acesso foram obtidos (MK936174.1, MK941839.1 e MT790210.1). Árvore N-J baseada em sequências COI de Platyceps rhodorachis claramente separadas como out-group com outros membros da família Colubridae com base na distância-p. A variação genética intraespecífica varia de 12% a 18%. As sequências de DNA de Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis e Platyceps ventromaculatus indusai não estão disponíveis no NCBI para validar suas posições taxonômicas. Em nossas recomendações, uma identificação de base molecular em grande escala da herpetofauna do Paquistão é necessária para relatar mais novas ou subespécies do país.

Phylogeography of cliff racer (Platyceps rhodorachis Jan, 1865) from Punjab, Pakistan / Filografia de penhasco (Platyceps rhodorachis Jan, 1865) de Punjab, Paquistão

The present study reports the existence of cliff racer, Platyceps rhodorachis from the plains of Punjab, Pakistan. A total of 10 specimens were captured during the field surveys from June to September, 2018 from different sites of Punjab. Platyceps rhodorachis was identify on the basis of morphology and confirmed through COI gene sequences. The obtained DNA sequences have shown reliable and exact species identification. Newly produced DNA sequences of Platyceps rhodorachis were submitted to GenBank and accession numbers were obtained (MK936174.1, MK941839.1 and MT790210.1). N-J tree based on COI sequences of Platyceps rhodorachis clearly separated as out-group with other members of family Colubridae based on p-distance. The intra-specific genetic variation ranges from 12% to 18%. The DNA sequences of Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis and Platyceps ventromaculatus indusai are not available at NCBI to validate their taxonomic positions. In our recommendations, a large scale molecular based identification of Pakistans herpetofauna is required to report more new or subspecies from country.(AU)

O presente estudo relata a existência de um corredor de penhasco, Platyceps rhodorachis, das planícies de Punjab, Paquistão. Um total de 10 espécimes foi capturado durante os levantamentos de campo de junho a setembro de 2018 em diferentes locais de Punjab. Platyceps rhodorachis foi identificada com base na morfologia e confirmada por meio de sequências do gene COI. As sequências de DNA obtidas mostraram identificação de espécies confiável e exata. Sequências de DNA de Platyceps rhodorachis recém-produzidas foram submetidas ao GenBank e os números de acesso foram obtidos (MK936174.1, MK941839.1 e MT790210.1). Árvore N-J baseada em sequências COI de Platyceps rhodorachis claramente separadas como out-group com outros membros da família Colubridae com base na distância-p. A variação genética intraespecífica varia de 12% a 18%. As sequências de DNA de Platyceps rhodorachis kashmirensis, Platyceps rhodorachis ladacensis, Platyceps ventromaculatus, Platyceps ventromaculatus bengalensis e Platyceps ventromaculatus indusai não estão disponíveis no NCBI para validar suas posições taxonômicas. Em nossas recomendações, uma identificação de base molecular em grande escala da herpetofauna do Paquistão é necessária para relatar mais novas ou subespécies do país.(AU)

Fast and novel botanical exploration of a 320-km transect in eastern Amazonia using DNA barcoding / Exploração botânica rápida e inovadora de um transecto de 320 km no leste da Amazônia usando código de barras de DNA

We explored a 320-km transect in the Tumucumaque mountain range along the border between southern French Guiana and Brazil, sampling all trees and lianas with DBH ≥ 10 cm in seven 25 x 25-m plots installed near seven boundary milestones. We isolated DNA from cambium tissue and sequenced two DNA barcodes (rbcLa and matK) to aid in species identification. We also collected fertile herbarium specimens from other species (trees/shrubs/herbs) inside and outside the plots. The selected DNA barcodes were useful at the family level but failed to identify specimens at the species level. Based on DNA barcoding identification, the most abundant families in the plots were Burseraceae, Fabaceae, Meliaceae, Moraceae, Myristicaceae and Sapotaceae. One third of the images of sampled plants posted on the iNaturalist website were identified by the community to species level. New approaches, including the sequencing of the ITS region and fast evolving DNA plastid regions, remain to be tested for their utility in the identification of specimens at lower taxonomic levels in floristic inventories in the Amazon region.(AU)

Um transecto de 320 km foi explorado na Serra do Tumucumaque, ao longo da fronteira entre o sul da Guiana Francesa e o Brasil por meio da amostragem de todas as árvores e lianas com DAP ≥ 10 cm em sete parcelas de 25 x 25 m instaladas perto de sete marcos fronteiriços. Isolamos DNA de tecido cambial e sequenciamos dois códigos de barra de DNA (rbcLa e matK) para auxiliar na identificação das espécies. Também coletamos espécimes de herbário férteis de outras espécies (árvores/arbustos/ervas) dentro e fora das parcelas. Os códigos de barra de DNA selecionados foram úteis em nível de família, mas não conseguiram identificar espécimes em nível de espécie. Com base na identificação de DNA barcoding, as famílias mais abundantes nas parcelas foram Burseraceae, Fabaceae, Meliaceae, Moraceae, Myristicaceae e Sapotaceae. Um terço das imagens de plantas amostradas postadas no website iNaturalist foram identificadas em nível de espécie. Novas abordagens, incluindo o sequenciamento da região ITS e regiões de DNA plastidial de rápida evolução, ainda precisam ser testadas quanto à sua utilidade na identificação de espécimes até níveis taxonômicos mais baixos em inventários florísticos na região amazônica.(AU)

Diversity, seasonal and diel distribution of snappers (Lutjanidae: Perciformes) in a tropical coastal inlet in the southwestern Gulf of Mexico

Snappers are marine fishes, but juveniles of many species migrate to estuaries, using these systems as nursery areas. The purpose of this study was to know the environmental factors mainly related to the migration patterns of lutjanids in La Mancha lagoon inlet. During 19 months, 24-hour cycles were performed monthly, taking samples every two hours (442 samples). Environmental variables recorded in situ and with regional records such as rainfall, atmospheric temperature and day length were considered. Genetic barcoding (COI) was used to validate species identity. Significant differences were evaluated by PERMANOVA and a Canonical Correspondence Analysis was used to determine the importance of environmental variables. Six species were recorded and the most abundant showed significant differences among months, with migration patterns during the warm-rainy season. Day length, salinity and rainfall (two of them with regional incidence) were the variables significantly associated with the distribution of the species. The abundance of Lutjanus analis, L. jocu, and L. cyanopterus was inversely associated with the length of daylight and directly related to rainfall, while L. synagris and L. griseus showed segregation along a salinity gradient. Thus, migration patterns were mainly correlated with factors of regional coverage and greater seasonal influence.(AU)

Los pargos son peces marinos, pero los juveniles de muchas especies migran a los estuarios, utilizándolos como áreas de crianza. El propósito del estudio fue conocer los factores ambientales principalmente relacionados con los patrones de migración de lutjánidos en la boca de la laguna La Mancha. Durante 19 meses se realizaron ciclos de 24 horas, tomando muestras cada dos horas (442 muestras). Se consideraron variables ambientales registradas in situ y con registros regionales tales como lluvias, temperatura atmosférica y duración del día. Se utilizó código de barras genético (COI) para validar la identidad de las especies. Diferencias significativas fueron evaluadas por PERMANOVA y un Análisis de Correspondencia Canónica permitió determinar la importancia de las variables ambientales. Se registraron seis especies y las más abundantes mostraron diferencias significativas entre meses, con patrones de migración durante la época cálida-lluviosa. La duración del día, la salinidad y la precipitación (dos con incidencia regional) fueron las variables asociadas significativamente a la distribución de las especies. La abundancia de Lutjanus analis, L. jocu y L. cyanopterus estuvo inversamente asociada con la duración del día y directamente con las lluvias, mientras que L. synagris y L. griseus mostraron segregación a lo largo de un gradiente de salinidad. Así, los patrones de migración se correlacionaron principalmente con factores de cobertura regional y de mayor influencia estacional.(AU)

Review of the armoured catfish genus Hypostomus (Siluriformes: Loricariidae) from the Parnaíba River basin, Northeastern Brazil, with description of a new species

The species of Hypostomus from the Parnaíba River basin were reviewed through molecular and morphological analysis. Five species were found in the basin, including a new species herein described. The distribution of H. pusarum was expanded to this basin, and a closely related species was recorded (H. aff. pusarum), also the presence of H. johnii and H. vaillanti was confirmed. The new species is distinguished from most congeners by its large number of premaxillary and dentary teeth, a wide dental angle of 115° to 135°, presence of a rounded dark spots on a lighter background and anteromedial region of the abdomen depleted of plaques (vs. anteromedial region of the abdomen covered by platelets and odontodes in H. johnii, H. pusarum, H. aff. pusarum and H. vaillanti). Furthermore, an identification key of the species from the Maranhão-Piauí ecoregion and maps with the geographic distribution of these species are presented. The species of Hypostomus in the Parnaíba River basin have different geographic distributions, suggesting different niches or geographical barriers, providing an opportunity for ecological and evolutionary studies.(AU)

As espécies de Hypostomus da bacia do rio Parnaíba foram revisadas por meio de análises moleculares e morfológicas. Cinco espécies foram encontradas na bacia, incluindo uma nova espécie aqui descrita. A distribuição de H. pusarum foi expandida para esta bacia, uma espécie intimamente relacionada foi registrada (H. aff. pusarum), e a presença de H. johnii e H. vaillanti foi confirmada. A nova espécie se distingue da maioria das congêneres por seu grande número de dentes nos pré-maxilares e dentários, um amplo ângulo do dentário de 115° a 135°, presença de manchas escuras arredondadas em um fundo mais claro e região anteromedial do abdômen sem placas (vs. região anteromedial do abdômen coberta por placas e odontódios em H. johnii, H. pusarum, H. aff. pusarum e H. vaillanti). Além disso, é apresentada uma chave de identificação das espécies da ecorregião Maranhão-Piauí e mapas com a distribuição geográfica dessas espécies. As espécies de Hypostomus na bacia do rio Parnaíba apresentam diferentes distribuições geográficas, sugerindo diferentes nichos ou barreiras geográficas, proporcionando oportunidade para estudos ecológicos e evolutivos.(AU)

Mini DNA barcodes reveal the details of the foraging ecology of the largehead hairtail, Trichiurus lepturus (Scombriformes: Trichiuridae), from São Paulo, Brazil

The largehead hairtail, Trichiurus lepturus, is an opportunistic, voracious, and piscivorous predator. Studies of fish feeding behavior based on the analysis of stomach contents are limited by the potential for the visual identification of the ingesta. However, molecular tools, in particular DNA barcoding, have been used successfully to identify stomach contents. When morphological analyses are not possible, molecular tools can precisely identify the components of the diet of a fish based on its stomach contents. This study used mini barcoding to identify food items ingested by T. lepturus off the northern coast of São Paulo State, Brazil. Forty-six sequences were obtained and were diagnosed as belonging to six different fish species: Pimelodus maculatus, Paralonchurus brasiliensis, Isopisthus parvipinnis, Opisthonema oglinum, Harengula clupeola, and Pellona harroweri or as belonging to the genera Lycengraulis and Sardinella. Trichiurus lepturus is an opportunistic predator that will exploit an available prey of an appropriate size. The results indicate that these fish migrate to warmer waters, such as those found in estuarine environments, at certain times of the year, where they exploit prey species that reproduce in this environment. One example was Pimelodus maculatus, which was the prey species most exploited based on the analysis of the material collected.(AU)

O peixe-espada, Trichiurus lepturus, é um predador oportunista, voraz e piscívoro. Os estudos do comportamento alimentar dos peixes com base na análise do conteúdo estomacal são limitados pelo potencial de identificação visual do material ingerido. No entanto, ferramentas moleculares, em particular o DNA barcode, têm sido utilizadas com sucesso para identificar o conteúdo do estômago. Quando as análises morfológicas não são possíveis, essas ferramentas moleculares podem identificar com precisão os componentes da dieta de um peixe com base em seu conteúdo estomacal. Este estudo utilizou o mini barcode (uma sequencia parcial do gene COI do DNA mitocondrial) para identificar alimentos ingeridos por T. lepturus no litoral Norte do estado de São Paulo, Brasil. Quarenta e seis sequências foram obtidas e combinadas com seis espécies diferentes de peixes: Pimelodus maculatus, Paralonchurus brasiliensis, Isopisthus parvipinnis, Opisthonema oglinum, Harengula clupeola e Pellona harroweri ou como pertencente aos gêneros Lycengraulis e Sardinella. Trichiurus lepturus é um predador oportunista que explora qualquer presa disponível que possua tamanho apropriado. Os resultados indicam que esses peixes migram para águas mais quentes em determinadas épocas do ano, como as encontradas em ambientes estuarinos, onde exploram espécies que se reproduzem neste ambiente. Um exemplo foi Pimelodus maculatus, sendo a espécie mais explorada por T. lepturus, a partir da análise do material coletado.(AU)

Amphibians and reptiles from a protected area in western Brazilian Amazonia (Reserva Extrativista do Baixo Juruá)

Sampling gaps across the logistically challenging and extremely biodiverse Amazonia largely hamper our understanding of broad-scale amphibian and reptile diversity patterns in this ecosystem. The Juruá River basin, a southwestern tributary of the Amazon River, is one of these undersampled areas, with only punctual information documented for these vertebrates that are spatially or temporally biased. This is especially the case for the lower-middle courses of the Juruá River, which also has comparatively less protected areas than its upper course. In order to fill some biodiversity knowledge gaps associated with amphibians and reptiles in this river basin, we combined results of our field expeditions carried out in 1992, 2005-2007, and 2018 to the Reserva Extrativista (Extractive Reserve) do Baixo Juruá, a Brazilian protected area in the right bank of the lower Juruá River. Amphibians and reptiles were sampled using four complementary methods: active surveys, pitfall traps, funnel traps, and trammel nets. We identified species or updated their taxonomic status with a reanalysis of the external morphology of the preserved material in the light of novel taxonomic literature (more than 1,500 specimens) and employment of DNA barcoding analyses for some newly collected specimens with contentious taxonomic status. Our combined sampling evidenced 149 species of amphibians and reptiles occurring in this protected area (72 amphibians, 68 squamates, six chelonians, and three crocodilians). Recorded species highlight the value of the lower Juruá River region as harboring quite diverse assemblages for these vertebrates, with species typical of the western and southwestern Amazonia sub-regions. Remarkable species records are presented, as well as accounts on species with lower taxonomic resolution. Furthermore, we discuss the biogeographic affinities of recorded assemblages based on the species geographic range and preferred habitats, and the value of this protected area to preserve the regional biological diversity.(AU)

DNA barcoding revels first records of three rare coleopteran genera in northern lakes of Egypt / O código de barras de DNA revela os primeiros registros de três gêneros raros de coleópteros nos lagos do norte do Egito

One aquatic coleopteran species from family Dytiscidae and two aquatic coleopteran genera from family Hydrophilidae were recorded in the summer period and represent first records in the Egyptian lakes. Beetles were collected from two northern lakes, Lake Idku and Lake Burullus. They were identified by morphological characteristics as well as the mtDNA barcoding method. A molecular phylogenetic approach was used to determine the genetic identity of the collected samples based on the mitochondrial cytochrome oxidase I (COI). Prodaticus servillianus (Dytiscidae) from Egypt showed no significant difference in the COI region and they are highly similar to P. servillianus from Madagascar. The phylogenetic analysis revealed that the other two coleopteran genera belong to family Hydrophilidae. Based on COI only, there is no clear evidence for their genetic identity at the species level. So, we defined them to the closest taxon and denoted them as Cymbiodyta type A and B. The results indicated that resolving the molecular identity of the aquatic beetles from northern lakes of Egypt need more considerations in the field of biological conservation. We concluded that utilization of COI as a barcoding region for identifying some coleopteran species is not sufficient and additional molecular markers are required to uncover the molecular taxonomy at deep levels.(AU)

Uma espécie de coleópteros aquático da família Dytiscidae e dois gêneros de coleópteros aquáticos da família Hydrophilidae foram registrados no período de verão e representam os primeiros registros nos lagos egípcios. Os besouros foram coletados em dois lagos do norte, o lago Idku e o lago Burullus, e identificados por características morfológicas e pelo método de código de barras mtDNA. Uma abordagem filogenética molecular foi usada para determinar a identidade genética das amostras coletadas com base no citocromo oxidase I mitocondrial (COI). Prodaticus servillianus (Dytiscidae) do Egito não mostrou diferença significativa na região COI e é altamente semelhante a P. servillianus de Madagascar. A análise filogenética revelou que os outros dois gêneros de coleópteros pertencem à família Hydrophilidae. Com base apenas no COI, não há evidências claras de sua identidade genética no nível da espécie. Assim, nós os agrupamos no táxon mais próximo e os denominamos Cymbiodyta tipo A e B. Os resultados indicaram que a identidade molecular dos besouros aquáticos dos lagos do norte do Egito precisa de mais considerações no campo da conservação biológica. Concluímos que a utilização de COI como região de código de barras para identificar algumas espécies de coleópteros não é suficiente, sendo necessários marcadores moleculares adicionais para descobrir a taxonomia molecular em níveis profundos.(AU)

CO1-based DNA barcoding for assessing diversity of Pteropus giganteus from the state of Azad Jammu Kashmir, Pakistan / Código de barras de DNA à base de CO1 para avaliar a diversidade de Pteropus giganteus do estado de Azad Jammu e Caxemira, Paquistão

The flying fox (Pteropus giganteus) also familiar with the name of the greater Indian fruit Bat belongs to the order Chiroptera and family Pteropodidae. Current research emphasis on the DNA barcoding of P. giganteus in Azad Jammu Kashmir. Bat sequences were amplified and PCR products were sequenced and examined by bioinformatics software. Congeneric and conspecific, nucleotide composition and K2P nucleotide deviation, haplotype diversity and the number of haplotypes were estimated. The analysis showed that all of the five studied samples of P. giganteus had low G contents (G 19.8%) than C (27.8%), A (25.1%) and T (27.3%) contents. The calculated haplotype diversity was 0.60% and the mean intraspecific K2P distance was 0.001% having a high number of transitional substitutions. The study suggested that P. giganteus (R=0.00) do not deviate from the neutral evolution. It was determined from the conclusion that this mtDNA gene is a better marker for identification of Bat species than nuclear genes due to its distinctive characteristics and may serve as a landmark for the identification of interconnected species at the molecular level and in the determination of population genetics.(AU)

A raposa-voadora (Pteropus giganteus), também conhecida como morcego indiano, pertence à ordem dos Chiroptera e à família Pteropodidae. A presente pesquisa dá ênfase ao código de barras de DNA de P. giganteus em Azad Jammu e Caxemira. Sequências genéticas dos morcegos foram amplificadas, e os produtos de PCR foram sequenciados e examinados por software de bioinformática. De espécies congenérica e coespecífica, foram estimados composição nucleotídica e desvio de nucleotídeos K2P, diversidade de haplótipos e número de haplótipos. A análise mostrou que todas as cinco amostras estudadas de P. giganteus apresentaram baixos teores de G (19,8%) em comparação com C (27,8%), A (25,1%) e T (27,3%). A diversidade de haplótipos calculada foi de 0,60%, e a distância média intraespecífica de K2P foi de 0,001%, com um elevado número de substituições transicionais. O estudo sugeriu que P. giganteus (R = 0,00) não se desviou da evolução neutra. É possível concluir que o gene mtDNA é um marcador favorável para identificação de espécies de morcegos do que genes nucleares por causa de suas características distintivas e pode servir como um marco para a identificação de espécies interconectadas em nível molecular e para a determinação genética de populações.(AU)

Description of the immature stages, biology and DNA-barcoding of Quichuana pogonosa (Diptera: Syrphidae) collected in Bromeliaceae in Paraná, Brazil

ABSTRACT Quichuana Knab, 1913 is a Neotropical genus of flower flies (Diptera: Syrphidae) with 50 valid species. Adults of this genus are flower visitors and their larvae are usually associated with the phytotelmata of bromeliads and heliconias, actively participating in the recycling of nutrients in forest environments. Despite their importance in ecosystem dynamics, Quichuana larvae are poorly known. Herein we describe the immature stages of Quichuana pogonosa Fluke, 1937 from samples collected from the phytotelmata of two terrestrial bromeliad species in the state of Paraná, Brazil. We provide illustrations of the egg, third instar larva and puparium, as well as information on the life cycle of the species. Additionally, we describe and illustrate the male genitalia and present the DNA-barcoding based on larva and adult specimens.

Patterns of ichthyofaunal diversity and distribution across Jebba Hydro-Electric Power (HEP) dam, Jebba, north-central Nigeria / Padrões de diversidade e distribuição da ictiofauna na barragem de hidroelétricas (HEP) de Jebba, Jebba, Nigéria norte-central

The ichthyofauna diversity of the Jebba Hydroelectric Power (HEP) Dam, Jebba, North-central Nigeria was studied. Fishes were sampled for 24 months using gill net, hook and line, and cast net. Individuals were identified using morphological and molecular (mitochondrial Cytochrome c Oxidase subunit I) data. A total of 9605 freshwater fishes were recorded during the sampling period. The use of an integrative taxonomic approach enabled the identification of 83 species belonging to 42 genera. Additionally, the study recorded three unidentified species ­ Ctenopoma sp, Malapterurus sp., and Protopterus sp. Analyses showed that individuals belonging to families Cichlidae and Mochokidae dominated the dam. The diversity analyses revealed relatively high fish diversity during the rainy season at the downstream section of Jebba HEP dam compared to the upstream section. The study, therefore, showed the presence of a diverse fish community comprising high species richness and diversity across the Jebba HEP dam. Finally, we recommend proper biodiversity monitoring and assessment of freshwater fish diversity across Nigeria. In addition, the use of an integrated taxonomic approach is recommended for appropriate species' identification and studies of freshwater fishes from Nigeria.

A diversidade da ictiofauna da hidrelétrica de Jebba (HEP), Jebba, centro-norte da Nigéria foi estudada. Os peixes foram amostrados por 24 meses, utilizando rede de emalhar, anzol e linha, e rede de arrasto. Os indivíduos foram identificados usando a abordagem combinada morfológica e molecular (citocromo c Oxidase mitocondrial subunidade I). Um total de 9605 peixes de água doce foram registrados durante o período de amostragem. A identificação das espécies utilizando a abordagem taxonômica integrada possibilitou a identificação de 83 espécies pertencentes a 42 gêneros. Além disso, o estudo registrou três espécies não identificadas - Ctenopoma sp, Malapterurus sp e Protopterus sp. Análises mostraram que indivíduos pertencentes às famílias Cichlidae e Mochokidae dominaram a barragem. As análises dos índices de diversidade revelaram uma diversidade de peixes relativamente alta durante a estação chuvosa na seção a jusante da barragem Jebba HEP em comparação com a seção a montante. O estudo mostrou, portanto, a presença de diversas comunidades de peixes, que incluem alta riqueza e diversidade de espécies através da barragem Jebba HEP. Finalmente, recomendamos o monitoramento adequado da biodiversidade e a avaliação da diversidade de peixes de água doce em toda a Nigéria. Além disso, recomenda-se o uso de abordagem taxonômica integrada para a identificação adequada das espécies e estudos de peixes de água doce da Nigéria.

Molecular identification of Brachygenys and Haemulon species (Perciformes: Haemulidae) from the Brazilian coast

The fishes of the Haemulidae family are currently allocated to 19 genera with a worldwide distribution in the tropical and subtropical waters of the world's oceans. Brachygenys and Haemulon are important genera of reef fish in Brazil, as they occur in large shoals, which are both ecologically and commercially valuable. This study identified the Brazilian species of the genera Brachygenys and Haemulon using DNA barcodes. While we found only a single lineage in Brachygenys chrysargyrea, Haemulon melanurum, H. parra, and H. squamipinna, more than one molecular operational taxonomic unit (MOTU) was identified in H. atlanticus, H. aurolineatum, and H. plumieri, indicating the possible existence of discrete populations or cryptic species.(AU)

Os peixes da família Haemulidae estão atualmente distribuídos em 19 gêneros, com distribuição mundial em águas oceânicas tropicais e subtropicais. Brachygenys e Haemulon são importantes gêneros de peixes recifais do Brasil, visto que ocorrem em grandes cardumes, de valores ecológicos e comerciais. Este estudo identificou as espécies brasileiras dos gêneros Brachygenys e Haemulon usando o código de barras de DNA. Embora apenas uma única linhagem de Brachygenys chrysargyrea, Haemulon melanurum, H. parra e H. squamipinna tenha sido encontrada em nosso conjunto de dados, mais de uma unidade taxonômica operacional molecular (MOTU) foi identificada em H. atlanticus, H. aurolineatum e H. plumieri, indicando a possível existência de populações discretas ou espécies crípticas.(AU)

Molecular identification of Brachygenys and Haemulon species (Perciformes: Haemulidae) from the Brazilian coast

The fishes of the Haemulidae family are currently allocated to 19 genera with a worldwide distribution in the tropical and subtropical waters of the world's oceans. Brachygenys and Haemulon are important genera of reef fish in Brazil, as they occur in large shoals, which are both ecologically and commercially valuable. This study identified the Brazilian species of the genera Brachygenys and Haemulon using DNA barcodes. While we found only a single lineage in Brachygenys chrysargyrea, Haemulon melanurum, H. parra, and H. squamipinna, more than one molecular operational taxonomic unit (MOTU) was identified in H. atlanticus, H. aurolineatum, and H. plumieri, indicating the possible existence of discrete populations or cryptic species.(AU)

Os peixes da família Haemulidae estão atualmente distribuídos em 19 gêneros, com distribuição mundial em águas oceânicas tropicais e subtropicais. Brachygenys e Haemulon são importantes gêneros de peixes recifais do Brasil, visto que ocorrem em grandes cardumes, de valores ecológicos e comerciais. Este estudo identificou as espécies brasileiras dos gêneros Brachygenys e Haemulon usando o código de barras de DNA. Embora apenas uma única linhagem de Brachygenys chrysargyrea, Haemulon melanurum, H. parra e H. squamipinna tenha sido encontrada em nosso conjunto de dados, mais de uma unidade taxonômica operacional molecular (MOTU) foi identificada em H. atlanticus, H. aurolineatum e H. plumieri, indicando a possível existência de populações discretas ou espécies crípticas.(AU)

Molecular analysis reveals high diversity in the Hoplias malabaricus (Characiformes, Erythrinidae) species complex from different Amazonian localities

ABSTRACT DNA barcoding proposes that a fragment of DNA can be used to identify species. In fish, a fragment of cytochrome oxidase subunit I (COI) has been effective in many studies with different foci. Here we use this molecular tool to provide new insights into the cryptic diversity found in the Hoplias malabaricus species complex. Popularly known as trahira, H. malabaricus is widely distributed in South America. The clade shows molecular and cytogenetic diversity, and several studies have supported the occurrence of a complex of species. We performed molecular and karyotypic analysis of H. malabaricus individuals from eight Amazonian localities to assess the diversity present in the nominal taxon, and to clarify relationships within this group. We used 12 samples in cytogenetic analyses and found two karyomorphs: 2n = 40 (20m + 20sm) (karyomorph C) and 2n = 42 (22m + 20sm) (karyomorph A). We used 19 samples in molecular analyses with COI as a molecular marker, maximum likelihood analyses, and the Kimura-2-parameter evolutionary model with bootstrap support. We found karyomorph-related differentiation with bootstrap of 100%. However, we found high molecular diversity within karyomorph C. The observed pattern allowed us to infer the presence of cryptic diversity, reinforcing the existence of a species complex.

RESUMO O DNA barcoding propõe que um fragmento de DNA possa servir para identificar espécies. Em peixes, um fragmento do gene COI tem se mostrado eficaz em muitos estudos com focos diferentes. Nós usamos essa ferramenta molecular para fornecer novas informações sobre a diversidade críptica encontrada no complexo de espécies Hoplias malabaricus. Popularmente conhecida como traíra, H. malabaricus tem uma ampla distribuição na América do Sul. Esse clado mostra diversidade molecular e citogenética, e vários estudos dão suporte à ocorrência de um complexo de espécies. Realizamos análises molecular e cariotípica em indivíduos de H. malabaricus de oito localidades amazônicas, para acessar a diversidade no taxon nominal e elucidar as relações nesse grupo. Usamos 12 amostras em análises citogenéticas e encontramos dois cariomorfos: 2n = 40 (20m + 20sm) (cariomorfo C) e 2n = 42 (22m + 20sm) (cariomorfo A). Usamos 19 amostras em análise molecular, utilizando COI como marcador molecular, análises de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo de Kimura-2-parâmetros com estimativa de bootstrap. Encontramos diferenciação relacionada aos cariomorfos com bootstrap de 100%. No entanto, encontramos alta diversidade molecular no cariomorfo C. O padrão observado nos permitiu inferir a presença de diversidade oculta, reforçando a existência de um complexo de espécies.

Description of the immature stages, biology and DNA-barcoding of Quichuana pogonosa (Diptera: Syrphidae) collected in Bromeliaceae in Paraná, Brazil

Quichuana Knab, 1913 is a Neotropical genus of flower flies (Diptera: Syrphidae) with 50 valid species. Adults of this genus are flower visitors and their larvae are usually associated with the phytotelmata of bromeliads and heliconias, actively participating in the recycling of nutrients in forest environments. Despite their importance in ecosystem dynamics, Quichuana larvae are poorly known. Herein we describe the immature stages of Quichuana pogonosa Fluke, 1937 from samples collected from the phytotelmata of two terrestrial bromeliad species in the state of Paraná, Brazil. We provide illustrations of the egg, third instar larva and puparium, as well as information on the life cycle of the species. Additionally, we describe and illustrate the male genitalia and present the DNA-barcoding based on larva and adult specimens.(AU)

DNA barcoding of a tropical anguillid eel, Anguilla bicolor (Actinopterygii: Anguilliformes), in Indo-Pacific region and notes on its population structure

ABSTRACT The tropical anguillid eel, Anguilla bicolor McCelland, 1844, includes two subspecies, Anguilla bicolor bicolor McCelland, 1844 and Anguilla bicolor pacifica Schmidt, 1928, and is distributed across the Indo-Pacific region. Although A. bicolor is widely distributed and recognized as an important fish resource in the Indo-Pacific region, few studies have been conducted on its genetic variation and population structure. DNA barcoding of A. bicolor specimens collected in the Indo-Pacific region was carried out in this study using mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I. Anguilla bicolor was found to diverge genetically, which supported its classification into two different subspecies. In addition, our study showed that A. bicolor bicolor had two genetically distinct populations/groups, and these different populations co-occur geographically in Indonesia and Malaysia in the eastern Indian Ocean. Our findings suggest that the eel larvae might be transported from at least two geographically different spawning grounds in the Indian Ocean, and then recruited to and settled in the same habitats in Indonesian and Malaysian waters. The molecular evidence calls for further research on the life history, stock assessment and protection of the populations of A. bicolor bicolor in Indonesia and Malaysia.

First record of cannibalism in the giant mottled eel Anguilla marmorata (Actinopterygii: Anguilliformes) as revealed by DNA barcoding

Although the giant mottled eel, Anguilla marmorata Quoy & Gaimard, 1824, is widely distributed in the Indo-Pacific region, few ecological studies have been conducted on the species. We investigated the stomach contents of A. marmorata visually and used the DNA-barcode region of the mitochondrial cytochrome c oxidase subunit 1 (CO1) to confirm the species' identification. The stomach content analysis revealed that teleosts and crustaceans are the major prey items of A. marmorata. Interestingly, the stomach content of one of the specimens, which was 1029 mm in total length (TL), contained an eel-like fish identified as A. marmorata measuring 510 mm in TL. This study is the first to record cannibalism in the diet of A. marmorata. Although the diet of anguillid eels is generally selective for a single prey species, larger eels are more likely to adopt a diverse feeding habit that includes cannibalism in the tropical river ecosystems.(AU)

Molecular analysis reveals high diversity in the Hoplias malabaricus (Characiformes, Erythrinidae) species complex from different Amazonian localities / Análise molecular revela alta diversidade no complexo de espécies Hoplias malabaricus (Characiformes, Erythrinidae) de diferentes localidades amazônicas

DNA barcoding proposes that a fragment of DNA can be used to identify species. In fish, a fragment of cytochrome oxidase subunit I (COI) has been effective in many studies with different foci. Here we use this molecular tool to provide new insights into the cryptic diversity found in the Hoplias malabaricus species complex. Popularly known as trahira, H. malabaricus is widely distributed in South America. The clade shows molecular and cytogenetic diversity, and several studies have supported the occurrence of a complex of species. We performed molecular and karyotypic analysis of H. malabaricus individuals from eight Amazonian localities to assess the diversity present in the nominal taxon, and to clarify relationships within this group. We used 12 samples in cytogenetic analyses and found two karyomorphs: 2n = 40 (20m + 20sm) (karyomorph C) and 2n = 42 (22m + 20sm) (karyomorph A). We used 19 samples in molecular analyses with COI as a molecular marker, maximum likelihood analyses, and the Kimura-2-parameter evolutionary model with bootstrap support. We found karyomorph-related differentiation with bootstrap of 100%. However, we found high molecular diversity within karyomorph C. The observed pattern allowed us to infer the presence of cryptic diversity, reinforcing the existence of a species complex.(AU)

O DNA barcoding propõe que um fragmento de DNA possa servir para identificar espécies. Em peixes, um fragmento do gene COI tem se mostrado eficaz em muitos estudos com focos diferentes. Nós usamos essa ferramenta molecular para fornecer novas informações sobre a diversidade críptica encontrada no complexo de espécies Hoplias malabaricus. Popularmente conhecida como traíra, H. malabaricus tem uma ampla distribuição na América do Sul. Esse clado mostra diversidade molecular e citogenética, e vários estudos dão suporte à ocorrência de um complexo de espécies. Realizamos análises molecular e cariotípica em indivíduos de H. malabaricus de oito localidades amazônicas, para acessar a diversidade no taxon nominal e elucidar as relações nesse grupo. Usamos 12 amostras em análises citogenéticas e encontramos dois cariomorfos: 2n = 40 (20m + 20sm) (cariomorfo C) e 2n = 42 (22m + 20sm) (cariomorfo A). Usamos 19 amostras em análise molecular, utilizando COI como marcador molecular, análises de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo de Kimura-2-parâmetros com estimativa de bootstrap. Encontramos diferenciação relacionada aos cariomorfos com bootstrap de 100%. No entanto, encontramos alta diversidade molecular no cariomorfo C. O padrão observado nos permitiu inferir a presença de diversidade oculta, reforçando a existência de um complexo de espécies.(AU)