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1.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-205254

Resumo

O estudo de lectinas de algas marinhas aponta para a possibilidade de se isolar substâncias com características ímpares, que poderiam contribuir para os estudos da aplicação de substâncias com atividades biológicas nas áreas das ciências biomédicas. O presente estudo constou da purificação e caracterização parcial de duas novas lectinas presentes nas algas marinhas verdes Udotea flabellum, aqui denominada de UFL e da Codium isthmocladum, denominada de CiL-3, respectivamente. Além da avaliação da toxicidade em naúplios de Artemia e das atividades antibacterianas de crescimento planctônico, formação de biofilmes e a agregação de bactérias Gram-positivas Staphylococcus aureus e S. epidermidis e a Gramnegativa Escherichia coli. O isolamento de lectinas foi obtido por uma combinação de diferentes técnicas de purificação. UFL mostrou especificidade para eritrócitos de coelho tratados com enzimas proteolíticas, tripsina e papaína. Aglutinou eritrócitos humanos do sistema ABO e não foi inibida por açúcares simples, apenas pelas glicoproteínas mucina de estômago de porco (PSM) e tiroglobulina. Exibiu uma única banda com massa molecular aparente de 60 kda e duas distintas bandas protéicas com massa molecular de 29 e 20 kDa. Termoestável, os valores mais altos de atividade hemaglutinante foram no pH 6, não dependente de cátions divalentes, sem glicolisações, atóxica contra naúplios de Artemia sp. Não foi capaz de inibir o crescimento planctônico e diminuir a biomassa do biofilme de S. aureus, no entanto, mostrou uma fraca inibição para S. epidermidis, não apresentou redução significativa no número de células viáveis das bactérias Gram-positivas e também não causou aglutinação nas bactérias. No que diz respeito a lectina isolada de Codium, a atividade hemaglutinante da CiL-3 mostrou ser ativa apenas para eritrócitos de coelho tratados com enzimas proteolíticas, não sendo capaz de aglutinar eritrócitos de coelho nativo e humanos do sistema ABO, foi inibida pelo açúcar simples rafinose e a glicoproteína mucina, apresentou como uma única banda de aproximadamente 20 kDa. Relativamente termoestável, a atividade hemaglutinante foi mais elevada em pH 5, não dependência de cátions divalentes. Todas as lectinas isoladas de Codium isthmocaldum (CiL-1, CiL-2 e CiL-3) foram capazes de diminuir a biomassa do biofilme de S. aureus, somente a CiL-2 apresentou inibição para S. epidermidis e foi capaz de apresentar redução no número de células viáveis. Embora a CiL-3 não tenha apresentado aglutinação para as células de Escherichia coli, a lectina foi capaz de aglutinar células formadora do biofilmes de S. aureus e S. epidermidis.


The lectins study seaweed points to the possibility to isolate substances with unique characteristics, which could contribute to the studies of the application of substances with biological activities in the fields of biomedical sciences. This study consisted of purification and partial characterization of two new lectin present in the green algae Udotea flabellum, here called UFL and Codium isthmocladum called CiL-3, respectively. In the evaluation of toxicity in Artemia nauplii and antibacterial activities of planktonic growth, biofilm formation and aggregation of Gram-positive bacteria Staphylococcus aureus and S. epidermidis, and Gram-negative Escherichia coli. The isolation of lectins was obtained by a combination of different purification techniques. UFL showed specificity for rabbit erythrocytes treated with proteolytic enzymes, trypsin and papain. Agglutinates human erythrocytes of ABO system and was not inhibited by simple sugars, only the mucin glycoproteins from pig stomach (PSM) and thyroglobulin. Exhibited a single band with an apparent molecular mass of 60 kDa and two distinct protein bands with molecular mass of 29 and 20 kDa. Thermostable, the highest values of hemagglutination activity was at pH 6, not dependent on divalent cations without glicolisações, not toxic against Artemia sp. We were able to inhibit planktonic growth and reduce the biomass of biofilm of S. aureus, however, it showed poor inhibition of S. epidermidis showed no significant reduction in the number of viable cells of Gram-positive bacteria and also caused no agglutination in bacteria. As regards the lectin from Codium, the hemagglutinating activity of the CiL-3 proved to be active only for rabbit erythrocytes treated with proteolytic enzymes not being able to agglutinate native rabbit erythrocytes and human ABO system was inhibited by the simple sugar raffinose and mucin glycoprotein, presented as a single band of approximately 20 kDa. Relatively thermostable, the hemagglutination activity was higher at pH 5, not dependence on divalent cations. All the isolated lectin Codium isthmocaldum (CiL-1 and CiL-2 CiL-3) were capable of reducing the biomass from the biofilm of S. aureus, only CiL-2 showed inhibition of S. epidermidis and was able to show reduction the number of viable cells. Although CiL-3 agglutination has not presented to cells of Escherichia coli, the lectin was able to agglutinate cells forming the biofilm of S. aureus and S. epidermidis.

2.
Hig. aliment ; 26(208/209): 156-161, maio-jun. 2012. tab
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-12729

Resumo

Objetivou-se verificar a sensibilidade de cepas de Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae e Enterobacter aerogenes isoladas de carne de frango, comercializada na cidade de Fortaleza, CE, frente a vários antimicrobianos e detecção de cepas produtoras de ESBL. As 80 amostras de carne de frango foram submetidas ao teste de susceptibilidade de antimicrobianos (método Kirby-Bauer) e detecção de cepas produtoras de ESBL (CLSI). Constatou-se que a carne de frango apresentou microorganismos multirresistentes a antimicrobianos e produtos de ESBL. Os antibióticos usados foram: amicacina(30µg), ampicilina (10µg), ciprofloxacina(05µg), ceftazidima (30µg),estreptomicina (10µg), doxiciclina(30µg), gentarnicina (10µg), irnipenem(10µg), sulfonarnida (300µg) esulfametoxazol/trimetroprim (25µg).Para o teste de susceptibilidade antimicrobiana,o maior percentual deresistência encontrado nas 11 cepasde Escherichia coli foi à doxiciclina(91 %); 27% das cepas foram 100%sensíveis à amicacina, gentamicinae irnipenem. Das 22 cepas de Klebsiellapneumonia e isoladas, a maiorresistência foi à ampicilina (94,5%);maior sensibilidade à gentamicina,sulfametoxazol/trimetroprim, 94,5% e94,5%, respectivamente. Das 19 cepasde Enterobacter aerogenes, 90,1 %foram resistentes à ampicilina e 95,4%apresentaram sensibilidade à ciprofloxacina.Somente 3 (33%) das cepasde Klebsiella pneumoniae e 3 (60%)das cepas de Enterobacter aerogenesforam confirmadas como produtorasde ESBL's. Constatou-se que a carne de frango apresentou microorganismosmultirresistentes a antimicrobianos eprodutores de ESBL.(AU)


Detection of Expanded-SpectrumBeta-Lactamase (ESBL) in coliformstrains isolated from poultry meatmarketed in the city of Fortaleza,State of Ceara. This study was aimedto test the sensitivity of Escherichiacoli, Klebsiella pneumoniae and Enterobacteraerogenes strains isolatedfrom poultry meat marketed in thecity of Fortaleza, State of Ceara, toseveral antimicrobial agents, and todetect ESBL-producing strains. 80poultry meat samples were submittedto an antimicrobial agents susceptibilitytest (Kirby-Bauer method) andto an ESBL-producing strains (CLSI)screening. The tested antibioticswere amikacine (30µg), ampicillin(10µg), ciprofioxacin (0,5µg), ceftazidime(30µg), streptomycin (10µg),doxycycline (30µg), gentamicin(10µg), imipenem (10µg), sulphonamide(300µg) and sulfamethoxazol/trimetroprim (25µg). The highestresistance percentagefound in the J 1Escherichia coli strains was againstdoxycycline (91%); 27% of the isolatedstrains were 100% sensitive toamikacin, gentamicin and imipenem.In the 22 isolated strains of Klebsiellapneumoniae, the highest resistancewas found to be against ampicillin(94.5%), and the highest sensitivityto gentamicin and sulphamethoxarol/trimetoprim, with 94.5% forboth antibiotics. Of the 19 strains ofEnterobacter aerogenes, 90.1 % wereresistant to ampicillin and 94.5%were sensitive to ciprofioxacin. Only 3(33%) Klebsiella pneumoniae strainsand 3 (60%) Enterobacter aerogenesstrains were confirmed as being ESBLproducers. We found the poultry meat to bear microorganisms resistant tomultiple antimicrobial agents andESBL producers. (AU)


Assuntos
Humanos , Animais , Microbiologia de Alimentos , Testes de Sensibilidade Microbiana , Aves Domésticas/microbiologia , Escherichia coli/isolamento & purificação , Enterobacter aerogenes/isolamento & purificação , Klebsiella pneumoniae/isolamento & purificação
3.
Botucatu; s.n; 21/04/2007. 78 p.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-4364

Resumo

pt


Milk is considered a nutritious food, due it composition, with protein, vitamins and mineral salts and could be consumed as cheeses, yogurts, butter and desserts. However, it can be vehicle of several pathogenic bacteria as L. monocytogenes, Campylobacter jejuni, E. coli O157: H7, Salmonella sp and S. aureus. Those microorganisms can contaminate the milk in any production stage, improvement, distribution and consumption. The aim of this study was search the hygienic condition of milk in several stages, as the raw milk, pasteurized and in the validity date, through the determination of the Most Probable Number of thermotolerants coliforms, besides the research of the presence of Salmonella and Listeria and enumeration of Staphylococcus aureus and its genes encoded A, B, C, D, E, G, H, I and J enterotoxins. Among 54 raw milk samples, all of them presented thermotolerants coliforms, invalue that varied from 2.1 x 102 MPN/ml to 1.1 x 106 MPN/ml. S. aureus was present in 38 (70.4%) of those samples, in values of up to 8,9 x 105 CFU/ml. About Listeria sp presence, using the traditional methodology, 16 samples were positive (29.6%) and 7 were L. monocytogenes (13% of the total of samples). PCR technique detected L. monocytogenes in 12 samples (22.2%). Analyzing 54 samples of milk pasteurized, 18 (33.3%) were out of the patterns according to RDC N°12, in relation to the number of thermotolerants coliforms, witth values up to 1,5 x 102 MPN/ml. Five samples (9.3%) reveled the presence of Listeria sp, with 3 L. monocytogenes (5.6%) and 2 L. innocua (3.7%). S. aureus was observed in 8 (14.7%) of the 54 samples, in concentration up to 8.7 x 103 CFU/ml. Of the 54 pasteurized milk in the validity date, 32 (59%) were in disagreement with the patterns, reaching values up to 2.1 x 102 MPN/ml of thermotolerants coliforms. Listeria sp was detected em 10 samples (18.5%), and 4 were L. monocytogenes and L. innocua (7.4%) and three, L. ivanovii (5.6%). Salmonella was

4.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-7589

Resumo

A mastite é a doença de maior importância econômica na atividade leiteira, muito freqüente em vacas adultas e em lactação. Entretanto, recentemente tem sido identificado elevada freqüência também em novilhas. A infecção intramamária tem sido descrita em até 97% em novilhas, com alta contagem de células somáticas no leite. O tratamento preventivo no pré-parto destas novilhas com infusão de antibiótico, nos esquemas do tratamento de vaca seca, em quartos mamários mostra-se de grande eficácia. Visando avaliar estes procedimentos aliado a vacinação com vacinas contra mastite ambiental, 33 novilhas holandesas divididas em 4 grupos: tratadas com antibiótico Albadry plus? e vacinadas com vacina contra mastite ambiental Enviracor J5? (G1); somente tratadas - Albadry plus? (G2); somente vacinadas Enviracor J5? (G3) e grupo controle sem tratamento e sem vacinação (G4), foram tratadas 60 dias antes do parto e vacinadas, 60 e 30 dias antes e 15 dias depois do parto. No dia do parto foram coletadas amostras para análises microbiológicas dos quartos, resultando em uma freqüência de 21,0% (G1); 37,0% (G3); 37,0% (G4) e 50,0% (G2). Staphylococcus coagulase negativo (SCN) foi o microrganismo mais isolado (14,06%). No final do experimento, os índices foram de apenas 12,5% no G1 e G3, 25% no G4 e 44% no G2. Foram avaliadas também a CCS, CBT e a composição do leite (teores de gordura, proteína, lactose e extrato seco total). Em relação à composição, verificou-se diferença estatisticamente significativa (p<0,001) apenas para gordura, sendo mais elevada no leite dos animais do G1 e G3. Os demais constituintes não foram diferentes (p>0,05). A CCS foi igual entre os grupos na primeira coleta (p>0,05), porém na média das 12 coletas, foi estatisticamente inferior no leite de G2 (p<0,05). A CBT também não diferiu no leite dos animais dos grupos experimentais (p>0,05). Contudo, o índice de mastite clínica nos animais do G4 foi altamente significativo (p<0,001), sendo de 3,98% contra 0,99%; 1,01% e 1,04% nas primíparas de G1, G2 e G3, respectivamente. A média de produção foi de 30,75 kg de leite/dia no G1; de 29,61 kg/dia no G2; de 27,61 kg no G3 e de 26,57 no G4. O ganho financeiro em função do maior número de casos clínicos no G4 e a maior produção de leite no G1 resultou em um ganho de R$3.092,67 no G1 comparado ao (G4), que teve um custo com a mastite clínica de R$ 1.318,34. Conclui-se que a maior produção de leite observada nos animais tratados com Albadry plus? e vacinados com Enviracor J5?, bem como o menor índice de mastite clínica podem ser considerados mais importantes e confirmam a eficácia dos protocolos propostos, originando um ganho financeiro altamente significativo

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