Mieloencefalite protozoária equina: relato de caso / Equine protozoal myeloencephalitis: case report

A Mieloencefalite Protozoária Equina (EPM) é uma doença infecciosa que possui como principal agente o protozoário Sarcocystis neurona. O parasita acomete o sistema nervoso central de equinos podendo causar alterações neurológicas como ataxia, paresia, atrofia muscular e alterações de estado mental. Com ampla distribuição no território nacional, é importante que esta afecção faça parte do diagnóstico diferencial em animais da espécie equina, uma vez que equinos portadores desta afecção podem apresentar desde sinais discretos, como ligeira queda no desempenho, a graves sinais neurológicos. Para isso, o médico veterinário deve compreender suas características e os métodos diagnósticos eficazes para sua identificação. Uma égua da raça Brasileiro de Hipismo, de cinco anos de idade, foi atendida na cidade de Belo Horizonte, em Minas Gerais, com histórico de atrofia na região lombar e garupa. Ainda, foi relatada a presença de gambás na fazenda em que vivia o animal. No exame neurológico foi detectada incoordenação motora de grau 2. O teste SAG ELISA foi realizado, e obtido resultado positivo. Todos os achados e o resultado positivo no teste corroboram o diagnóstico da EPM, o que levou ao tratamento preconizado, e a visível melhora clínica. O objetivo desse trabalho é relatar um caso clínico de EPM em uma égua no município de Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil, levando em consideração a importância do conhecimento dos aspectos epidemiológicos, clínicos, diagnósticos e terapêuticos da doença.

Equine Protozoal Myeloencephalitis (EPM) is an infectious disease whose main agent is the protozoan Sarcocystis neurona. The parasite affects the central nervous system of horses and can cause neurological alterations like ataxia, paresis, muscle atrophy and changes in mental status. With wide distribution in the national territory, it is important that this disease is part of the differential diagnosis in animals of equine species, since equines with this disease can present from discrete signs, such as a slight decrease in performance, to serious neurological signs. That is why the veterinarian must understand its characteristics and effective diagnostic methods for its identification. A five-year-old Brazilian Sport Horse mare was attended in the city of Belo Horizonte, Minas Gerais, with a history of atrophy in the lumbar region and rump. Also, the presence of opossums on the farm where the animal lived was reported. In neurological examination, grade 2 motor incoordination was detected. The SAG ELISA test was performed, and a positive result was obtained. All findings and the positive test result corroborate the diagnosis of EPM, which led to the recommended treatment, and visible clinical improvement. The aim of this paper is to report a clinical case of EPM in a mare in the city of Belo Horizonte, Minas Gerais, Brazil, taking into account the importance of knowledge of the epidemiological, clinical, diagnostic and therapeutic aspects of disease.

Mieloencefalite protozoária equina: relato de caso / Equine protozoal myeloencephalitis: case report

A Mieloencefalite Protozoária Equina (EPM) é uma doença infecciosa que possui como principal agente o protozoário Sarcocystis neurona. O parasita acomete o sistema nervoso central de equinos podendo causar alterações neurológicas como ataxia, paresia, atrofia muscular e alterações de estado mental. Com ampla distribuição no território nacional, é importante que esta afecção faça parte do diagnóstico diferencial em animais da espécie equina, uma vez que equinos portadores desta afecção podem apresentar desde sinais discretos, como ligeira queda no desempenho, a graves sinais neurológicos. Para isso, o médico veterinário deve compreender suas características e os métodos diagnósticos eficazes para sua identificação. Uma égua da raça Brasileiro de Hipismo, de cinco anos de idade, foi atendida na cidade de Belo Horizonte, em Minas Gerais, com histórico de atrofia na região lombar e garupa. Ainda, foi relatada a presença de gambás na fazenda em que vivia o animal. No exame neurológico foi detectada incoordenação motora de grau 2. O teste SAG ELISA foi realizado, e obtido resultado positivo. Todos os achados e o resultado positivo no teste corroboram o diagnóstico da EPM, o que levou ao tratamento preconizado, e a visível melhora clínica. O objetivo desse trabalho é relatar um caso clínico de EPM em uma égua no município de Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil, levando em consideração a importância do conhecimento dos aspectos epidemiológicos, clínicos, diagnósticos e terapêuticos da doença.(AU)

Equine Protozoal Myeloencephalitis (EPM) is an infectious disease whose main agent is the protozoan Sarcocystis neurona. The parasite affects the central nervous system of horses and can cause neurological alterations like ataxia, paresis, muscle atrophy and changes in mental status. With wide distribution in the national territory, it is important that this disease is part of the differential diagnosis in animals of equine species, since equines with this disease can present from discrete signs, such as a slight decrease in performance, to serious neurological signs. That is why the veterinarian must understand its characteristics and effective diagnostic methods for its identification. A five-year-old Brazilian Sport Horse mare was attended in the city of Belo Horizonte, Minas Gerais, with a history of atrophy in the lumbar region and rump. Also, the presence of opossums on the farm where the animal lived was reported. In neurological examination, grade 2 motor incoordination was detected. The SAG ELISA test was performed, and a positive result was obtained. All findings and the positive test result corroborate the diagnosis of EPM, which led to the recommended treatment, and visible clinical improvement. The aim of this paper is to report a clinical case of EPM in a mare in the city of Belo Horizonte, Minas Gerais, Brazil, taking into account the importance of knowledge of the epidemiological, clinical, diagnostic and therapeutic aspects of disease.(AU)

Sarcocystis neurona, seroprevalence of antibodies in equines and research of oocystis in opossum in Ilhéus - Itabuna microregion, Bahia, Brazil / Sarcocystis neurona, seroprevalência de anticorpos em equinos e pesquisa de oocistos em gambás na microrregião de Ilhéus - Itabuna, Bahia, Brasil

Abstract The aims of this study were to determine the seroprevalence of Sarcocystis neurona antibodies in equines in the Ilhéus-Itabuna microregion (BA), and identify possible factors associated with infection. The presence of sporocysts/oocysts of Sarcocystis spp. was also verified in Didelphis spp. A total of 669 serum samples were collected from equines in 56 properties located in 12 municipalities in the region. Indirect fluorescent antibody test was performed with slides containing merozoites of the S. neurona, using a cut-off titer of 1:80. Occurrence of 7.92% of anti-S. neurona antibodies was observed in the sampled equines. The purposes trade and work were significantly associated with the presence of antibodies (p<0.05), and being used for the purpose of work (21.6%) was considered a risk factor, while being used for the purpose of trade (3.6%) was a protective factor. A total of 25 Didelphis spp. was captured for research on sporocysts/oocysts in stool samples and intestinal scrapings, being all negative. Didelphis spp. were all negative for the presence of Sarcocystis spp. and this circumstance does not change the fact that seroprevalence of S. neurona has been observed in horses raised in the southern Bahia.

Resumo O presente estudo foi realizado na microrregião de Ilhéus-Itabuna, Bahia. Os objetivos deste estudo foram determinar a soroprevalência de anticorpos contra Sarcocystis neurona em equinos da microrregião Ilhéus-Itabuna (BA) e identificar possíveis fatores associados à infecção. A presença de esporocistos/oocistos de Sarcocystis spp. também foi pesquisada em Didelphis spp. Foram coletadas 669 amostras de soro de equinos em 56 propriedades localizadas em 12 municípios da região. Foi utilizada a reação de imunofluorescência indireta (RIFI), utilizando-se lâminas confeccionadas com merozoítos de Sarcocystis neurona (cepa SN138) e ponto de corte na diluição de 1:80. A ocorrência de anticorpos anti- S. neurona, nos equinos amostrados, foi de 7,92%. As finalidades dos animais - comércio e trabalho - apresentaram-se significativas (p<0.05), sendo que a finalidade trabalho (21,6%) foi considerada fator de risco, enquanto a finalidade comércio (3,6%) foi considerada fator de proteção. Foram capturados 25 Didelphis spp., para pesquisa de esporocistos/oocistos em amostras de fezes e raspado de mucosa intestinal. Todos os Didelphis spp. foram negativos para a presença de Sarcocystis spp., mesmo assim essa circunstância não alterou o fato da ocorrência de S. neurona ter sido observada em cavalos criados na mesorregião do sul da Bahia.

Mieloencefalite equina por protozoario (MEP): revisão de literatura / Equine protozoal myeloencephalitis (EPM): literature review

A mieloencefalite protozoária equina (MEP) é uma doença infecciosa causada principalmente pelo protozoário Sarcocystis neurona que produz disfunção neurológica no cérebro e na medula, porém pode ser causada também pelo Neospora caninum e Neospora huguesi. O equino é o hospedeiro acidental e o vetor do protozoário é o gambá (hospedeiros definitivos). Um exame é o teste imunológico do líquor, que proporciona um diagnóstico preciso. No tratamento é utilizado coccidioestatico, antiinflamatório, vitaminas e analgésicos, e evitar que o hospedeiro definitivo tenha acesso aos alimentos dos equinos. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma revisão de literatura sobre mieloencefalite protozoária equina.(AU)

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is an infectious disease caused mainly by the protozoan Sarcocystis neuron that produces neurological dysfunction in the brain and marrow, but can also be caused by Neospora caninum and Neospora huguesi. The equine is the accidental host and the vector of the protozoan is the opossum (definitive hosts). An examination is the CSF test, which provides an accurate diagnosis. In the treatment coccidiostatic, anti-inflammatory, vitamins and analgesics are used, and to avoid that the definitive host has access to the food of the horses. The objective of the present work was to develop a literature review on equine protozoal myeloencephalitis.(AU)

Mieloencefalite equina por protozoario (MEP): revisão de literatura / Equine protozoal myeloencephalitis (EPM): literature review

A mieloencefalite protozoária equina (MEP) é uma doença infecciosa causada principalmente pelo protozoário Sarcocystis neurona que produz disfunção neurológica no cérebro e na medula, porém pode ser causada também pelo Neospora caninum e Neospora huguesi. O equino é o hospedeiro acidental e o vetor do protozoário é o gambá (hospedeiros definitivos). Um exame é o teste imunológico do líquor, que proporciona um diagnóstico preciso. No tratamento é utilizado coccidioestatico, antiinflamatório, vitaminas e analgésicos, e evitar que o hospedeiro definitivo tenha acesso aos alimentos dos equinos. O objetivo do presente trabalho foi desenvolver uma revisão de literatura sobre mieloencefalite protozoária equina.

Equine protozoal myeloencephalitis (EPM) is an infectious disease caused mainly by the protozoan Sarcocystis neuron that produces neurological dysfunction in the brain and marrow, but can also be caused by Neospora caninum and Neospora huguesi. The equine is the accidental host and the vector of the protozoan is the opossum (definitive hosts). An examination is the CSF test, which provides an accurate diagnosis. In the treatment coccidiostatic, anti-inflammatory, vitamins and analgesics are used, and to avoid that the definitive host has access to the food of the horses. The objective of the present work was to develop a literature review on equine protozoal myeloencephalitis.

Low prevalence of infection by Sarcocystis neurona in horses from the State of Alagoas, Brazil / Baixa prevalência da infecção por Sarcocystis neurona em cavalos do estado de Alagoas, Brasil

The aim of this study was to determine the prevalence of infection by Sarcocystis neurona in horses and identify potential risk factors. Were analyzed 427 samples from 36 farms in 21 municipalities in the Alagoas State, Brazil. Presence of anti-S. neurona antibodies was diagnosed by indirect immunofluorescence antibody test (IFAT) and was confirmed using the immunoblot test. Risk factors were assessed through investigative questionnaires on animal management on the farms. The prevalence of anti-S.neurona antibodies was 2.8% (confidence interval, CI: 1.5-4.9%) from IFAT and 1.6% (CI:0.8-3.34%) from immunoblot, and there were positive horses on 16.6% of the studied farms. None of the variables studied presented associations with serological status for S. neurona. This is the first report on infection by S. neurona in horses reared in Alagoas, Brazil showing a low exposure to S. neurona in this region, but with significant numbers of foci.(AU)

Objetivou-se neste estudo determinar a prevalência e os fatores de risco associados à infecção por Sarcocystis neurona em equinos. Foram analisadas 427 amostras de 36 propriedades localizadas em 21 municípios do estado de Alagoas. O diagnóstico de anticorpos anti-S. neurona foi realizado pela técnica de Imunofluorescência Indireta (IFI) e confirmada por immunoblot. O estudo dos fatores de risco foi realizado a partir de questionários investigativos sobre o manejo dos animais nas propriedades. A prevalência de anticorpos anti-S. neurona foi de 2,8% (I.C. 1,5-4,9%) na IFI e de 1,6% (I.C. 0,8-3,34%) no immunoblot com equinos positivos em 16,6% das propriedades estudadas. Nenhuma variável estudada apresentou associação com o status sorológico para S. neurona. Este é o primeiro relato da infecção por S. neurona em equinos criados no Estado de Alagoas, Brasil, confirmando que os animais desta região têm baixa exposição a S. neurona, mas com significativo número de focos.(AU)

Occurrences of antibodies against Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Sarcocystis neurona in horses and dogs in the municipality of Pauliceia, São Paulo, Brazil / Ocorrências de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, Neospora spp. e Sarcocystis neurona em equinos e cães do município de Pauliceia, São Paulo, Brasil

Serum samples from 116 horses and 47 dogs from the municipality of Paulicéia, in the state of São Paulo, Brazil, were examined for anti-Toxoplasma gondii, -Neospora spp. and -Sarcocystis neurona antibodies by means of the indirect fluorescent antibody test (IFAT). The results showed that only one horse was seropositive for T. gondii (0.9%) and anti-Neospora spp. antibodies were detected in three out of the 116 horses tested (2.6%). However, 27 horses showed antibodies against S. neurona (23.8%). Amongst the serum samples from the dogs, 10 out of the 47 dogs showed antibodies against T. gondii (21.3%) and three dogs showed antibodies against Neospora caninum (6.4%). This study reports that in the municipality of Paulicéia dogs in both the rural and the urban area were exposed to T. gondii and N. caninum, while horses in the rural area were exposed to all three protozoa studied, with high occurrence of anti-S. neurona antibodies.(AU)

Amostras de soro de 116 equinos e 47 cães provenientes do município de Paulicéia, São Paulo, foram testadas para detecção de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, -Neospora spp. e -Sarcocystis neurona por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Apenas um equino, entre 116 equinos testados, teve diagnóstico soropositivo para T. gondii (0,9%), e três deles (2,6%) apresentaram anticorpos anti-Neospora spp. Entretanto, 27 equinos apresentaram anticorpos anti-S. neurona (23,8%). Nas amostras de cães, dez dos 47 animais apresentaram anticorpos anti-T. gondii (21,3%) e três tiveram diagnóstico soropositivo para Neospora caninum (6,4%). Este estudo relata que no município de Paulicéia os cães das áreas urbana e rural foram expostos a T. gondii e N. caninum, enquanto os equinos da área rural foram expostos aos três protozoários estudados, com alta ocorrência de anticorpos anti- S. neurona.(AU)

Occurrences of antibodies against Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Sarcocystis neurona in horses and dogs in the municipality of Pauliceia, São Paulo, Brazil / Ocorrências de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, Neospora spp. e Sarcocystis neurona em equinos e cães do município de Pauliceia, São Paulo, Brasil

Serum samples from 116 horses and 47 dogs from the municipality of Paulicéia, in the state of São Paulo, Brazil, were examined for anti-Toxoplasma gondii, -Neospora spp. and -Sarcocystis neurona antibodies by means of the indirect fluorescent antibody test (IFAT). The results showed that only one horse was seropositive for T. gondii (0.9%) and anti-Neospora spp. antibodies were detected in three out of the 116 horses tested (2.6%). However, 27 horses showed antibodies against S. neurona (23.8%). Amongst the serum samples from the dogs, 10 out of the 47 dogs showed antibodies against T. gondii (21.3%) and three dogs showed antibodies against Neospora caninum (6.4%). This study reports that in the municipality of Paulicéia dogs in both the rural and the urban area were exposed to T. gondii and N. caninum, while horses in the rural area were exposed to all three protozoa studied, with high occurrence of anti-S. neurona antibodies.(AU)

Amostras de soro de 116 equinos e 47 cães provenientes do município de Paulicéia, São Paulo, foram testadas para detecção de anticorpos anti-Toxoplasma gondii, -Neospora spp. e -Sarcocystis neurona por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Apenas um equino, entre 116 equinos testados, teve diagnóstico soropositivo para T. gondii (0,9%), e três deles (2,6%) apresentaram anticorpos anti-Neospora spp. Entretanto, 27 equinos apresentaram anticorpos anti-S. neurona (23,8%). Nas amostras de cães, dez dos 47 animais apresentaram anticorpos anti-T. gondii (21,3%) e três tiveram diagnóstico soropositivo para Neospora caninum (6,4%). Este estudo relata que no município de Paulicéia os cães das áreas urbana e rural foram expostos a T. gondii e N. caninum, enquanto os equinos da área rural foram expostos aos três protozoários estudados, com alta ocorrência de anticorpos anti- S. neurona.(AU)

Intra-uterine exposure of horses to Sarcocystis spp. antigens / Exposição intrauterina ao Sarcocystis spp. em equinos

The aim of this study was to examine the intra-uterine exposure to Sarcocystis spp. antigens, determining the number of foals with detectable concentrations of antibodies against these agents in the serum, before colostrum ingestion and collect data about exposure of horses to the parasite. Serum samples were collected from 195 thoroughbred mares and their newborns in two farms from southern Brazil. Parasite specific antibody responses to Sarcocystis antigens were detected using the indirect immunofluorescent antibody test (IFAT) and immunoblot analysis. In 84.1% (159/189) of the pregnant mares and in 7.4% (14/189) of foals we detected antibodies anti-Sarcocystis spp. by IFAT. All samples seropositive from foals were also positive in their respective mares. Serum samples of seropositive foals by IFAT, showed no reactivity on the immunoblot, having as antigens S. neurona merozoites. In conclusion, the intra-uterine exposure to Sarcocystis spp. antigens in horses was demonstrated, with occurrence not only in mares, but also in their foals, before colostrum ingestion these occurrences were reduced.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar a exposição intrauterina ao Sarcocystis spp., para determinar o número de potros que possuem concentrações detectáveis de anticorpos contra esses agentes no soro, antes da ingestão do colostro, por meio da coleta de dados sobre a exposição a esses protozoários nos equinos. Amostras de soro foram coletadas de 195 éguas puro-sangue e seus respectivos potros recém-nascidos, em duas fazendas localizadas na região Sul do Brasil. Os testes utilizados na detecção de anticorpos específicos para o Sarcocystis foram a reação de imunofluorescência indireta (RIFI) e análise por meio de immunoblot. Pela RIFI, em 84,1% (159/189) das éguas e em 7,4% (14/189) dos potros foram detectados anticorpos anti-Sarcocystis spp. Todas as amostras soropositivas dos potros também foram positivas para suas respectivas mães. As amostras de soro dos potros soropositivos na RIFI, não apresentaram reatividade no immunoblot, tendo como antígenos merozoítos de S. neurona. Em conclusão, foi demonstrada a exposição intrauterina de Sarcocystis spp. em equinos, com ocorrência em éguas, porém, em seus respectivos potros, antes da ingestão de colostro a ocorrência foi reduzida.(AU)

Investigação de anticorpos contra Sarcocystis neurona e Sarcocystis cruzi em equinos / Investigation of antibodies against Sarcocystis neurona and Sarcocystis cruzi in equines

Sarcocystis neurona is the primary agent for Equine Protozoal Myeloencephalitis (EPM), important neurological disease characterized by behavior or muscular changes, that impairs animal performance and husbandry. Sarcocystis cruzi is a pathogen related to myositis in cattle. Although related the life cycles of the parasites are distinct. S. neurona has opossums (Didelphis spp.) and S. cruzi, dogs as definitive hosts. However, S. neurona and S. cruzi may undergo cross-reactivity in serological tests, interfering on results of EPM ante-mortem diagnostic tests. In the present study, serology of 189 mares was performed by indirect immunofluorescence antibody test, using antigens of S. neurona and S. cruzi in order to assess the exposure degree of animals to antigens. Analyzing the results, it was observed that most of the animals (84.13%) reacted with at least one protozoal species and the number of animals which showed antibodies against S. cruzi was greater than S. neurona (80.42% and 33.86%, respectively) and a third of seropositive animals reacted to antigens of both species.(AU)

Investigação de anticorpos contra Sarcocystis neurona e Sarcocystis cruzi em equinos / Investigation of antibodies against Sarcocystis neurona and Sarcocystis cruzi in equines

Sarcocystis neurona is the primary agent for Equine Protozoal Myeloencephalitis (EPM), important neurological disease characterized by behavior or muscular changes, that impairs animal performance and husbandry. Sarcocystis cruzi is a pathogen related to myositis in cattle. Although related the life cycles of the parasites are distinct. S. neurona has opossums (Didelphis spp.) and S. cruzi, dogs as definitive hosts. However, S. neurona and S. cruzi may undergo cross-reactivity in serological tests, interfering on results of EPM ante-mortem diagnostic tests. In the present study, serology of 189 mares was performed by indirect immunofluorescence antibody test, using antigens of S. neurona and S. cruzi in order to assess the exposure degree of animals to antigens. Analyzing the results, it was observed that most of the animals (84.13%) reacted with at least one protozoal species and the number of animals which showed antibodies against S. cruzi was greater than S. neurona (80.42% and 33.86%, respectively) and a third of seropositive animals reacted to antigens of both species.(AU)

Avaliação de dois métodos de estocagem de amostras teciduais para diagnóstico molecular de Sarcocystis spp

No Brasil existem três espécies de gambás, Didelphis aurita, Didelphis albiventris e Didelphis marsupialis. Entre os diversos agentes patológicos que estes hospedeiros albergam, estão os protozoários do gênero Sarcocystis de grande interesse na medicina veterinária por causar a Mieloencefalite Protozoária Equina (EPM). Com a evolução dos métodos de diagnóstico a biologia molecular possibilitou a identificação de espécies em hospedeiros diferentes. Com isso o presente trabalho tem por objetivo avaliar dois métodos de conservação tecidual com a finalidade de melhorar o diagnóstico molecular. Para tanto, foram utilizados cinco gambás D. aurita para a obtenção dos esporocistos contidos na lâmina própria do intestino delgado. Estes foram extraídos da mucosa após digestão da mesma com hipoclorito de sódio 10%. Após a contagem e morfometria dos esporocistos, cada amostra foi padronizada em inóculos contendo 60 e 120 esporocistos em 1 mL, que foram inoculados em periquitos australianos (Melopsittacus undulatus). Dois periquitos foram inoculados com solução de soro fisiológico, perfazendo um total de 12 periquitos. De todos os periquitos que morreram ou foram eutanasiados no período de quatro meses, foram coletadas amostras de tecidos e conservadas a temperatura de -20 ºC com e sem a imersão em álcool absoluto. Foi realizada a biologia molecular dos esporocistos com o primer ITS 18S 9L/1H. Utilizando este mesmo primer foi realizado o diagnóstico molecular dos seguintes tecidos: coração, língua, coxa, peito, fígado, pulmão e cérebro, com o intuito de comparar a eficiência dos métodos de conservação. Como resultado dos valores morfométricos em micrômetros dos esporocistos obtivemos o comprimento médio de 11,2 ± 0,9 (7-15,6) e largura média de 7,7 ± 0,6 (3,8-10,9). Todas as amostras de raspado de mucosa contendo os esporocistos foram positivas para a PCR utilizando o primer ITS. O método de conservação a -20°C sem e com imersão em álcool absoluto apresentaram eficiência na preservação do DNA dos tecidos, embora não foram encontradas diferenças estatísticas significativas entre os dois métodos avaliados. Nas infecções agudas foram observadas lesões histopatológicas em região hepática e pulmonar, com formação de merontes nos pulmões. Nas infecções crônicas foram encontrados 20 cistos maduros e imaturos nos tecidos do peito, coxa e da língua que mensurados tiveram valores em micrômetros de 25,4 ± 7,1 (12,7-34,8) de largura e 45,9 ± 24,6 (16,8-113,0) de comprimento. Com os resultados obtidos podemos inferir que os gambás D. aurita estão parasitados com espécies de Sarcosystis spp. que tem aves como hospedeiro intermediário.

In Brazil there are three species of possums, Didelphis aurita, Didelphis albiventris and Didelphis marsupialis. Among the various pathological agents that these hosts harbor, protozoa of the genus Sarcocystis is object of great interest in veterinary medicine for causing Equine Protozoan Myeloencephalitis (EPM). With the evolution of diagnostic methods, molecular biology has enabled to identify species in different hosts. Thus, the present work aims to evaluate two methods of tissue conservation in order to improve the molecular diagnosis. For this purpose, five D. aurita possums were used to obtain the sporocysts contained in the small intestine lamina propria. These were extracted from the mucosa after digestion with 10% sodium hypochlorite. After sporocyst counting and morphometry, each sample was standardized on inocula containing 60 and 120 sporocysts in 1 mL, which were inoculated into budgerigars (Melopsittacus undulatus). Two parakeets were inoculated with saline solution, making a total of 12 parakeets. From all the parakeets that died or were euthanized in the period of four months, tissue samples were collected and kept at -20 ºC with and without immersion in absolute alcohol. Molecular biology of the sporocysts was performed with the ITS 18S 9L / 1H primer. Using this same primer, the molecular diagnosis of the following tissues was performed: heart, language, thigh, chest, liver, lung and brain, in order to compare the efficiency of conservation methods. As a result of the morphometric values in micrometers of the sporocysts, we obtained an average length of 11.2 ± 0.9 (7-15.6) and an average width of 7.7 ± 0.6 (3.8-10.9). All mucosa scrape samples containing sporocysts were positive for PCR using the ITS primer. The method of conservation at -20 ° C without and with immersion in absolute alcohol showed efficiency in the preservation of DNA tissue, although no statistically significant differences were found between the two methods evaluated. In acute infections, histopathological lesions were observed in the hepatic and pulmonary regions, with formation of merons in the lungs. In chronic infections, 20 mature and immature cysts were found in the chest thigh and tongue tissues, which were measured with micrometers values of 25.4 ± 7.1 (12.7-34.8) in width and 45.9 ± 24.6 (16.8-113.0) in length. With the results obtained, its possible to infer that D. aurita possums are parasitized with Sarcosystis spp. species that have birds as an intermediate host.

Transmissão vertical de Toxoplasma gondii, Neospora spp. e Sarcocystis neurona em éguas da raça Puro Sangue Inglês (PSI)

As doenças infecto-parasitárias causam prejuízos na criação de equinos. Os protozoários Toxoplasma gondii, Neospora spp. e Sarcocystis neurona estão relacionados às doenças neurológicas e reprodutivas em equinos. Em cavalos, T. gondii e Neospora spp. podem ser transmitidos via horizontal e vertical. Sarcocystis neurona causa a Mieloencefalite Protozoária Equina (MEP). Existem poucos estudos que avaliaram a presença dos protozoários em placentas de éguas e até o presente, não foram encontrados trabalhos em amostras de líquido amniótico. A presente dissertação foi dividida em dois capítulos. O capítulo I objetivou detectar e monitorar os anticorpos anti-Toxoplasma gondii, anti-Neospora spp. e anti-Sarcocystis neurona em éguas prenhas e verificar a exposição intra-uterina dos parasitas, pela pesquisa de anticorpos específicos em amostras pré colostrais de potros. Amostras de soro de 31 éguas prenhas foram avaliadas em três momentos: (1º) dois meses antes do parto; (2º) um mês antes do parto e (3º) no dia do parto. As amostras séricas dos potros foram analisadas antes da ingestão do colostro. O método RIFI (Reação de Imunofluorescência Indireta), nos soros maternos foi realizado nas diluições 1:64 para T. gondii, 1:50 para Neospora spp. e 1:16 para S. neurona. Os soros pré colostrais dos potros foram avaliados sem diluição e na diluição 1:16 para os três protozoários. Nenhuma égua apresentou anticorpos para T. gondii. Em 19,35% das éguas, verificou-se anticorpos anti-Neospora spp. e 29,03% anticorpos anti-S. neurona. Nenhum anticorpo foi detectado nas amostras pré colostrais dos potros. Durante o período gestacional, as éguas apresentaram flutuações nos títulos de anticorpos anti-Neospora spp. e anti-S. neurona, com maior soroprevalência no 9º mês para ambos. Neste estudo constatou a presença de anticorpos anti-Neospora spp. e anti-S. neurona em éguas. Nos potros não foram detectados anticorpos. O monitoramento das éguas prenhas soropositivas é importante para a sanidade do animal. O capítulo II objetivou detectar os protozoários Toxoplasma gondii, Neospora spp e Sarcocystis neurona em placentas equinas e líquido amniótico, e descrever lesões causadas pelos parasitas. Amostras de soro de 31 éguas prenhas foram avaliadas pelo método de RIFI como descrito anteriormente. A PCR para os três protozoários foi realizada em amostras de placentas (pool) de 31 éguas e em 30 amostras de líquido amniótico. Para análise histológica foram coletadas quatro regiões da placenta (corno prenhe, corno não prenhe, corpo do útero e estrela cervical). Estruturas parasitárias (cistos) foram observadas em cinco placentas. Na PCR quatro amostras de placenta foram positivas para Neospora spp. e uma para S. neurona. A PCR dos líquidos amnióticos resultou em sete amostras positivas, uma para T. gondii, cinco para Neospora spp. e uma S. neurona. Neospora spp. e Sarcocystis neurona foram detectados em tecidos placentários, demonstrando que estes infectam placenta equina. T. gondii, Neospora spp. e S. neurona foram detectados em amostras de líquido amniótico. Sugere-se que a transmissão transplacentária de T. gondii, Neospora spp. e Sarcocystis neurona ocorra em éguas.

Infectious-parasitic diseases cause damage to horse breeding. Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Sarcocystis neurona are related to neurological and reproductive diseases in horses. In horse T. gondii and Neospora spp. can be transmitted through horizontal and vertical routes. S. neurona causes Equine Protozoan Myeloencephalitis (EPM). There are few studies that have evaluated the presence of protozoa in mares placentas and to date, no studies have been found in samples of amniotic fluid. This dissertation had been divided into two chapters. Chapter I aimed to detect and monitor the antibodies anti-Toxoplasma gondii, antiNeospora spp. and anti-Sarcocystis neurona in pregnant mares and to verify the intrauterine exposure of the parasites by detecting specific antibodies in pre-colostral samples of the foals. Serum samples from 31 pregnant mares were evaluated in three moments: (1st) two months before delivery; (2nd) one month before delivery and (3rd) on the day of the birth. The serum samples from foals were analyzed before ingesting colostrum. The IFAT method (Indirect Immunofluorescence Antibody Test) in maternal serum was performed at 1:64 dilutions for T. gondii, 1:50 for Neospora spp. and 1:16 for S. neurona. Pre colostral serum from foals were tested pure and at 1:16 dilution for the three protozoa. No mare showed antibodies to T. gondii. In 19.35% of the mares were verified anti-Neospora spp.; and 29.03% were verified with anti-S. neurona antibodies. No antibodies were detected in the pre colostral samples of the foals. During the gestational period, the mares showed fluctuations in the anti-Neospora spp. and anti-S. neurona, with higher seroprevalence in the 9th month for both. This study has established the presence of anti-Neospora spp. and anti-S. neurona in mares.This study has established the presence of anti-Neospora spp. and anti-S. neurone in mares. In foals, no antibodies were detected. Monitoring of pregnant seropositive mares is important for the animal's health. Chapter II aimed to detect the protozoa Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Sarcocystis neurona in equine placentas and amniotic fluid, and to describe the lesions caused by the parasites. Serum samples from 31 pregnant mares were evaluated by the IFAT method as previously described. PCR, for the three protozoans, was performed from the placental samples (pool) of 31 mares and 30 samples of amniotic fluid. For histological analysis, four regions (pregnant horn, not pregnant horn, body of the uterus and cervical star) of the placenta were collected. Parasitic structures (cysts) were observed in five placentas. In PCR, four placenta samples were positive for Neospora spp., and one for S. neurona. The amniotic fluids PCR resulted in seven positive sample, one for T gondii, five for Neospora spp. and a S. neurona. Neospora spp. and Sarcocystis neurona were detected in placental tissues, demonstrating that these infect mares placentas. T. gondii, Neospora spp. and S. neurona were detected in samples of amniotic fluid. It is suggested that the transplacental transmission of Toxoplasma gondii, Neospora spp. and Sarcocystis neurona occurs in mares.

EXPOSIÇÃO DE CÃES A Sarcocystis neurona NA ZONA RURAL DO MUNICÍPIO DE ILHÉUS, BAHIA

OLIVEIRA DEIRÓ, C. M. C. Exposição de cães a Sarcocystis neurona na zona rural do município de Ilhéus, Bahia. Salvador, 2018. 44p. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal nos Trópicos. Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal da Bahia. Sarcocystis neurona é um protozoário coccídio, considerado o principal causador da mieloencefalite protozoária equina. A infecção por S. neurona e indução de doença neurológica em cães têm sido relatadas na América do Norte, sendo o cão considerado um hospedeiro aberrante ou acidental do protozoário. Objetivou-se com este estudo testar soros caninos provenientes da zona rural de Ilhéus, Bahia, quanto à reatividade a S. neurona. Avaliou-se também a reatividade cruzada com o protozoário Sarcocystis cruzi, que tem cães como hospedeiros definitivos. Foram testadas 353 amostras de soro caninos pela técnica da reação de imunofluorescência indireta (RIFI) com ponto de corte de 1:25, utilizando-se merozoítos de S. neurona produzidos em cultivo celular e bradizoítos de S. cruzi obtidos a partir de cistos de miocárdio bovino confirmados na PCR e sequenciamento, e 14 amostras aleatórias foram testadas no WB/imunoblot. Os resultados obtidos foram comparados com os seguintes dados dos cães: idade, sexo, domicílio, hábito de caça, contato com cavalos, bovinos e animais silvestres, zona de mata e disfunção neurológica para traçar um perfil epidemiológico. Os resultados da RIFI indicaram uma frequência de animais expostos a S. neurona de 3,39% (12/353) e a S. cruzi de 4,81% (17/353). Duas amostras (0,56%) foram positivas para ambas as espécies. No WB/imunoblot bandas de proteínas específicas para S. neurona foram observadas em oito amostras reativas na RIFI. A análise estatística demonstrou associação entre a variável contato com animais silvestres e a presença de anticorpos anti-S. neurona. Em conclusão, os soros dos cães foram reativos a antígenos de S. neurona e S. cruzi na região estudada, sem evidência de reação sorológica cruzada entre os parasitos na RIFI, porém, apresentam reatividade cruzada no imunoblot. Provavelmente, os animais foram expostos a formas infectantes de ambos os parasitos ou a espécies de Sarcocystis geneticamente semelhantes.

OLIVEIRA DEIRÓ, C. M. C. Dogs exposure to Sarcocystis neurona in rural areas of the city of Ilhéus, Bahia. Salvador, 2018. 44p. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal nos Trópicos. Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal da Bahia. Sarcocystis neurona is a coccidian parasite that is the major cause of equine protozoal myeloencephalitis. Infection by S. neurona and induction of neurologic disease in dogs have been reported in North America, where the dog is considered an aberrant or accidental host of the protozoa. The aim of this study was to test dog sera from rural areas of the city of Ilhéus, Bahia, to S. neurona .Potential serologic cross-reactivity to the protozoan Sarcocystis cruzi was also evaluated, as the dog is definitive host of this parasite. Sera from 353 dogs were tested by immunofluorescent antibody technique (IFAT) to S. neurona with a cut of 1:25, using merozoites produced in cell culture, and to S. cruzi, employing bradyzoites extracted from bovine myocardium confirmed by PCR and sequencing, and 14 samples were random chosen for immunoblot. The results obtained were evaluated with the following data about the dogs: age, gender, residence, hunting habits, contact with horses, stockyard and wild animals, inhabiting close to forest and neurological disease in order to gather better epidemiological information. The results obtained by IFAT indicated a frequency of 3.83% (12/353) of dogs exposed to S. neurona, and 4.81% (17/353) to S. cruzi. Two samples (0.56%) were simultaneously positive for both antigens. In the immunoblot, proteins bands for S. neurona were observed in eight samples that tested positive in IFAT. Statistical analysis indicate association between the variable contact with wild animals and antibodies to S. neurona. In conclusion, sera from dogs were reactive to S. neurona and S. cruzi antigens in the studied region, without evidence of serologic cross-reactivity between the parasites by IFAT, however, cross-reactivity occurred in immunoblot. The dogs were probably exposed to infectivity forms from both parasites or to genetically-related Sarcocystis species.

Frequency of antibodies against Sarcocystis neurona and Neospora caninum in domestic cats in the state of Bahia, Brazil / Frequência de anticorpos contra Sarcocystis neurona e Neospora caninum em gatos domésticos do Estado da Bahia, Brasil

Sarcocystis neurona is the major agent of equine protozoal myeloencephalitis. It infects several mammalian species in the Americas, where the definitive hosts, marsupials of the genus Didelphis (D. virginiana and D. albiventris) are found. Domestic cats are one of the confirmed intermediate hosts of the parasite; however, antibodies against S. neurona had never before been demonstrated in Brazilian cats. The aim of this study was to determine whether cats in Bahia, Brazil, are exposed to the parasite. A total of 272 feline serum samples (134 from feral and 138 from house cats) were subjected to an indirect fluorescent antibody test using cultured merozoites of S. neurona as antigen. Positivity was detected in 4.0% (11/272) of the tested samples, with titers ranging from 25 to 800. The feline sera were also tested for antibodies against the protozoan Neospora caninum, with an observed antibody frequency of 2.9%. To the author's knowledge, this is the first study to report antibodies against S. neurona in Brazilian cats. We conclude that cats are exposed to the parasite in the region of this study. Further investigations are needed to confirm the role of cats in the transmission cycle of S. neurona in Brazil.

Sarcocystis neurona é o principal agente da mieloencefalite protozoária equina. Esse parasito infecta várias espécies de mamíferos nas Américas, onde são encontrados os hospedeiros definitivos, os marsupiais do gênero Didelphis (D. virginiana and D. albiventris). O gato doméstico é um dos hospedeiros intermediários do parasito. Contudo, anticorpos contra S. neurona ainda não tinham sido demonstrados em gatos brasileiros. O objetivo deste trabalho foi determinar se gatos da Bahia, Brasil, são expostos ao parasito. Amostras séricas de 272 felinos (134 de gatos errantes e 138 de gatos domiciliados) foram testadas pelo teste de imunofluorescência indireta, utilizando-se como antígeno, merozoítos produzidos em cultura celular. Entre as amostras testadas, 4,0% (11/272) foram positivas com títulos entre 25 e 800. Os soros dos felinos foram também testados para anticorpos contra o protozoário Neospora caninum, cuja frequência de anticorpos foi de 2,9%. Esse é o primeiro relato de anticorpos contra S. neurona em gatos brasileiros. Conclui-se que os gatos da região estudada são expostos a S. neurona. Estudos futuros são necessários, a fim de se confirmar o papel dos gatos no ciclo de transmissão de S. neurona no Brasil.

DETECÇÃO DA INFECÇÃO POR Neospora spp. EM EQUÍDEOS

Em equídeos, a neosporose é causada pelos coccídeos Neospora caninum e N. hughesi. O primeiro está associado a abortamentos e doença neonatal, e N. hughesi, a ocorrência da Mieloencefalite Protozoária Equina (MPE) em muares e equinos, sendo identificada apenas nestas espécies animais. A diferenciação sorológica entre N. caninum e N. hughesi ainda não é possível devido à reatividade cruzada entre anticorpos contra esses parasitos. Apesar de já relatada a exposição de asininos a Neospora spp., o seu papel como possível hospedeiro não foi elucidado. Objetivou-se no estudo corrente determinar a frequência de infecção, por reatividade sorológica e detecção molecular, de Neospora spp. em equídeos e isolar in vitro cepa(s) de Neospora spp. a partir de tecido de equinos e asininos soropositivos. A reação de imunofluorescência indireta para Neospora spp. foi realizada em 142 amostras sorológicas de equinos e 150 soros de asininos, com ponto de corte de 1:50. Amostras de cérebro de equinos e asininos foram testadas por meio da reação de polimerase em cadeia (PCR) nested específica para o Espaço Transcrito Interno 1 (ITS1) do DNA ribossômico da subfamília Toxoplasmatinae, com os primers JS4/CT2b e CT1/CT2. Realizou-se ainda a partir destas amostras, a tentativa de isolamento in vivo e in vitro de Neospora spp. Verificou-se a presença de anticorpos anti-Neospora spp. em 4,9% (7/142) dos equinos e 12,0% (18/150) dos asininos, com títulos que variaram entre 1:50 e 1:200. Não foi verificada a presença de DNA de coccídeos da subfamília Toxoplasmatinae nos tecidos analisados por PCR. Dos oito bioensaios realizados (três a partir de tecidos de equinos e cinco a partir de tecido de asininos), não foi obtido êxito.

In equids, neosporosis is caused by the protozoan coccidia Neospora caninum and N. hughesi.The former is associated with abortions and neonatal disease, and N. hughesi causes Equine Protozoal Myeloencephalitis (EPM) in mules and horses, which was identified only in these species. The serological differentiation between N. caninum and N. hughesi is not possible due to cross-reactivity between antibodies against these parasites. The exposure of donkeys to Neospora spp. was already related, but its role as a possible host has not been elucitaded. The objective of this study was to determine the serological and molecular frequencies of Neospora spp. in equids and to in vitro isolate Neospora spp. from seropositive equines and donkeys tissues. Serology for Neospora spp. was performed on serum samples from 142 horses and 150 donkeys by Indirect Immunofluorescence, with a 1:50 cutoff. Brain tissues from horses and donkeys were tested by a nested polymerase chain reaction (nested PCR), specific for the Toxoplasmatinae Internal Transcribed Spacer 1 (ITS1) of the ribosomal DNA (rDNA), with primers JS4/CT2b and CT1/CT2. Was carried out from these samples, the attempt to isolate in vivo and in vitro Neospora spp. Antibodies to Neospora spp. were found in 4.9% (7/142) of horses and 12.0% (18/150) of donkeys, with titles ranging from 1:50 to 1: 200. Molecular analysis of nervous tissue samples were negative. For the isolation of Neospora spp. eight experiments were performed in immunosuppressed mice (three tissue from horses and five tissue donkeys), but was not successful.

Infecção em Sarcocystis spp. em ovinos e equinos

As infecções causadas por protozoários da família Sarcocystidae têm distribuição mundial e são comuns em ruminantes, causando perdas econômicas importantes. Este estudo avaliou infecções de Sarcocystis spp., Toxoplasma gondii e Neospora caninum em ovinos da região sudoeste do Rio Grande do Sul, Brasil. Foram coletadas amostras de miocárdio de 80 ovelhas criadas em sistema extensivo. Cistos de tecido foram detectados por exame direto e a presença dos agentes também foi confirmada por PCR. A avaliação macroscópica não revelou alterações, mas o exame microscópico direto mostrou cistos em 76,2% (61/80) das amostras e todos os cistos eram morfologicamente semelhantes a Sarcocystis tenella ou Sarcocystis arieticanis. A PCR detectou DNA de Sarcocystis spp. em 21,2% (17/80) das amostras testadas e DNA de T. gondii em 15% (12/80). Em 6,2% (5/80) foram detectados DNA de ambas os protozoários. Todas as amostras de PCR positivas (23,7% - 19/80) também foram positivas pelo exame direto (cistos microscópicos). Assim, uma alta ocorrência de cistos teciduais microscópicos em ovinos da região do sudoeste do estado do Rio Grande do Sul foi detectada. Apesar de o PCR não ter mostrado boa sensibilidade para identificar os agentes causadores destes cistos, foi possível verificar a presença de Sarcocystis spp. e T. gondii em amostras do músculo cardíaco de ovinos. Isso pode ser um fator de risco para animais e contaminação humana, não só através do consumo, mas também através de manipulação das carcaças desses animais. A Mieloencefalite Equina por Protozoário (MEP) é uma enfermidade neurológica que acomete equinos e possui como principal agente o protozoário Sarcocystis neurona. Porém o papel dos equinos no ciclo deste protozoário não está completamente esclarecido. O objetivo deste trabalho foi elucidar o papel dos equinos como hospedeiros intermediários no ciclo do protozoário S. neurona, através da ocorrência de cistos nestes animais e determinar a frequência de detecção de anticorpos anti- Sarcocystis spp., Neospora spp. e T. gondii em equinos abatidos em frigorífico no Estado do Rio Grande do Sul, Brasil. Foram coletadas 197 amostras de soro e coração de equinos. Das amostras pesquisadas, não houve detecção de cistos, ácidos nucléicos ou alterações histopatológicas relacionadas ao Sarcocystis spp. Relacionado com a detecção de anticorpos, 146 (74,1%) foram positivos para pelo menos um dos protozoários pesquisados. Anticorpos para Sarcocystis spp. foram encontrados em 36% (71/197), para Neospora spp. em 39,1% (77/197) e para T. gondii em 47,2% (93/197). Assim a não detecção de cistos teciduais, associado com a detecção de anticorpos anti-Sarcocystis spp., reforça a participação dos equinos como hospedeiros acidentais no ciclo deste protozoário, minimizando a participação destes animais na epidemiologia da infecção por Sarcocystis spp.

Infections by protozoa of the Sarcocystidae family have worldwide distribution and are common in ruminants, causing important economic losses. This study evaluated Sarcocystis spp., Toxoplasma gondii and Neospora caninum infections in sheep from Southwest region of Rio Grande do Sul, Brazil. Myocardium samples of 80 sheep raised on extensive system were collected. Tissue cysts were detected by direct examination and the presence of the agents was also confirmed by PCR. Macroscopic evaluation did not reveal changes, but direct microscopic examination showed cysts in 76.2% (61/80) of samples and all cysts were morphologically similar with Sarcocystis tenella or Sarcocystis arieticanis. PCR detected Sarcocystis spp. DNA in 21.2% (17/80) of samples tested and T. gondii DNA in 15% (12/80). In 6.2% (5/80) DNA of both protozoan were detected. Presence of N. caninum nucleic acids was not observed in the samples tested. All PCR-positive samples (23.7% - 19/80) were also positive by direct examination (microscopic cysts). Thus, a high occurrence of microscopic tissue cysts in sheep from the Southwest region of the state of Rio Grande do Sul was detected. Although PCR did not show a good sensitivity to identify the causative agents of these cysts, was possible to verify the presence of Sarcocystis spp. and T. gondii in cardiac muscle samples of the ovine. This may be a risk factor for animal and human contamination, not only through consumption, but also through handling the carcasses of these animals. Equine protozoal myeloencephalitis is a neurologic disease of horses, most often caused by the Sarcocystis neurona. However, the role of horses in the life cycle this parasite is not completely understood. This study attempts to elucidate the role of horses as intermediate hosts in S. neurona cycle, through occurrence of cysts in these animals and determine the antibodies frequency for Sarcocystis spp., Neospora spp. and T. gondii in slaughtered horses. Were collected 197 serum and heart samples of equines. None of the myocardium samples were detected tissue cysts, nucleic acids or histopathological changes associated to Sarcocystis spp. In antibodies detection, 146 (74.1%) serum samples were positive for studied protozoa. Antibodies against Sarcocystis spp. were detected in 36% (71/197), to Neospora spp. in 39.1% (77/197) and to T. gondii in 47,2% (93/197). Thus, the failure in detect tissue cysts, associated with antibodies anti-Sarcocystis spp. detection, increases the role of horses as accidental hosts in the cycle this protozoan, declining your participation in the epidemiology of Sarcocystis infection.

Pesquisa de anticorpos séricos e liquóricos anti-Neospora caninum em equinos com taxa ataxia

A neosporose equina é causada pelos protozoários Neospora caninum e Neospora hughesi. A maioria dos animais acometidos desenvolve problemas reprodutivos, caracterizado principalmente pelo aborto, contudo a ocorrência de doença neurológica pós-infecção já foi previamente relatada. Os sinais clínicos neurológicos incluem paresia e ataxia. A carência de informações acerca da ocorrência e relevância da infecção por Neospora spp. em equinos e o fato da neosporose não ser incluída no diagnóstico diferencial da mieloencefalite protozoária equina (EPM), possivelmente pelo desconhecimento de que estes agentes podem causar sintomatologia neurológica, justificam a realização deste estudo. Foram analisadas 26 amostras de soro sanguíneo e de líquido cefalorraquidiano (LCR) de 38 equinos adultos com sinaL clínico neurológico de ataxia. Para pesquisa de anticorpos anti-Neospora caninum foi utilizada a reação de imunofluorescência indireta (RIFI). Das amostras de soro sanguíneo testadas neste grupo de equinos, 15/26 (57,6%) mostraram-se positivas, enquanto que as amostras de LCR (0/26 ? 0%) foram negativas. Conclui-se que, de acordo com os resultados encontrados, no soro sanguíneo, houve exposição de 57,6% dos equinos ao protozoário Neospora caninum, enquanto nas amostras liquóricas analisadas, não foram detectados anticorpos anti- Neospora caninum neste grupo de equinos

Equine neosporosis is caused by protozoan Neospora caninum and Neospora hughesi. Affected animals develop reproductive problems, mainly abortion. However, the occurrence of neurological disease after infection has been previously reported. Neurological signs include paresis and ataxia. There is a lack of information about the occurrence and significance of infection by Neospora spp. in horses. Neosporosis is not included in the differential diagnosis of equine protozoal myeloencephalitis (EPM), and it has never been shown to cause neurological symptoms. In the current study we analyzed 26 samples of blood serum and cerebrospinal fluid (CSF) of 38 adult horses with neurological clinical sign of ataxia. For detection of anti-Neospora caninum antibodies, indirect immunofluorescence was used (IFAT). From tested blood samples 15 of 26 (57.6%) were positive, while in CSF samples (0 of 26 ? 0%) were positive. It follows that, according to the results found in blood serum, was exposed for 57,6% of horses to the protozoan Neospora caninum, while in CSF samples analyzed were not detected antibodies to Neospora caninum in this group of horses