Effect of a synthetic analogue of the feline facial pheromone on salivary cortisol levels in the domestic cat / Efeito do análogo sintético do feromônio facial felino sobre o nível de cortisol salivar de gatos domésticos

This study aimed to evaluate the ability of a saliva collection device (Salivette®) to measure cortisol levels in saliva samples of domestic cats and to assess the effect of a synthetic analogue of the feline facial pheromone fraction F3 (Feliway®) on cortisol levels. A total of 28 domestic cats from a private high-quality sanctuary were sampled before exposure to the facial pheromone and after 35 days of exposure. Two pheromone devices were placed in the area where the animals ate to guarantee the exposure of all cats. The collecting device yielded a sufficient volume of saliva (≥0.20mL) to allow cortisol measurement. Cortisol measurements ranged from 0.02g/dL to 0.16µg/dL, with a difference between before (42.1%) and after (62.6%) exposure to the pheromone (F=3.2351; p≤0.0002). No difference in cortisol levels was observed between before (x =0.078µg/dL) and after (x =0.066µg/dL) (t=1.79; p=0.08) exposure. However, salivary cortisol levels decreased in 75% (21/28) of the cats after exposure (x 2=12.07; p=0.0005), suggesting that the animals have different susceptibilities to the pheromone or that they spent different lengths of time in the area where the pheromone devices were installed.(AU)

O presente estudo avaliou o uso de um dispositivo de coleta salivar (Salivette®) para mensurar o cortisol salivar de gatos domésticos e avaliar o efeito do análogo sintético do feromônio facial felino - fração F3 (Feliway®) sobre seus níveis de cortisol. Um total de 28 gatos domésticos mantidos em gatil particular tiveram amostras de saliva coletadas antes da exposição ao feromônio facial felino e após 35 dias de exposição. Dois difusores de feromônio foram instalados na área onde os animais se alimentavam, a fim de garantir que todos os gatos fossem expostos. Os dispositivos de coleta salivar permitiram a coleta de volume salivar suficiente (≥0,20 mL) para a mensuração do cortisol. Os níveis de cortisol salivar variaram de 0,02g/dL a 0,16ug/dL, com coeficiente de variação de 42,1% antes e de 62,6% após à exposição ao feromônio (F=3.2351; p≤ 0.0002). Não foi verificada diferença entre os níveis de cortisol salivar nas amostras obtidas antes (x =0,078µg/dL) e após (x =0,066µg/dL) (t=1,79; p=0,08) à exposição. Entretanto, os níveis de cortisol salivar diminuíram em 75% (21/28) dos gatos expostos ao feromônio (x 2=12,07; p=0,0005), sugerindo que os animais apresentam susceptibilidade diferente ao feromônio facial sintético ou que passaram períodos de tempo distintos na área onde os difusores foram instalados.(AU)

Effect of a synthetic analogue of the feline facial pheromone on salivary cortisol levels in the domestic cat / Efeito do análogo sintético do feromônio facial felino sobre o nível de cortisol salivar de gatos domésticos

This study aimed to evaluate the ability of a saliva collection device (Salivette®) to measure cortisol levels in saliva samples of domestic cats and to assess the effect of a synthetic analogue of the feline facial pheromone fraction F3 (Feliway®) on cortisol levels. A total of 28 domestic cats from a private high-quality sanctuary were sampled before exposure to the facial pheromone and after 35 days of exposure. Two pheromone devices were placed in the area where the animals ate to guarantee the exposure of all cats. The collecting device yielded a sufficient volume of saliva (≥0.20mL) to allow cortisol measurement. Cortisol measurements ranged from 0.02g/dL to 0.16µg/dL, with a difference between before (42.1%) and after (62.6%) exposure to the pheromone (F=3.2351; p≤0.0002). No difference in cortisol levels was observed between before (x =0.078µg/dL) and after (x =0.066µg/dL) (t=1.79; p=0.08) exposure. However, salivary cortisol levels decreased in 75% (21/28) of the cats after exposure (x 2=12.07; p=0.0005), suggesting that the animals have different susceptibilities to the pheromone or that they spent different lengths of time in the area where the pheromone devices were installed.(AU)

O presente estudo avaliou o uso de um dispositivo de coleta salivar (Salivette®) para mensurar o cortisol salivar de gatos domésticos e avaliar o efeito do análogo sintético do feromônio facial felino - fração F3 (Feliway®) sobre seus níveis de cortisol. Um total de 28 gatos domésticos mantidos em gatil particular tiveram amostras de saliva coletadas antes da exposição ao feromônio facial felino e após 35 dias de exposição. Dois difusores de feromônio foram instalados na área onde os animais se alimentavam, a fim de garantir que todos os gatos fossem expostos. Os dispositivos de coleta salivar permitiram a coleta de volume salivar suficiente (≥0,20 mL) para a mensuração do cortisol. Os níveis de cortisol salivar variaram de 0,02g/dL a 0,16ug/dL, com coeficiente de variação de 42,1% antes e de 62,6% após à exposição ao feromônio (F=3.2351; p≤ 0.0002). Não foi verificada diferença entre os níveis de cortisol salivar nas amostras obtidas antes (x =0,078µg/dL) e após (x =0,066µg/dL) (t=1,79; p=0,08) à exposição. Entretanto, os níveis de cortisol salivar diminuíram em 75% (21/28) dos gatos expostos ao feromônio (x 2=12,07; p=0,0005), sugerindo que os animais apresentam susceptibilidade diferente ao feromônio facial sintético ou que passaram períodos de tempo distintos na área onde os difusores foram instalados.(AU)

Epidural levobupivacaine alone or combined with different morphine doses in bitches under continuous propofol infusion / Levobupivacaína isolada ou associada à morfina em diferentes doses pela via peridural em cadelas sob infusão contínua de propofol

The aim of this study was to assess the cardiopulmonary, analgesic, adverse effects, serum concentration of cortisol and plasma levels of levobupivacaine and morphine in bitches undergoing propofol anesthesia and epidural analgesia with levobupivacaine alone or combined with morphine. This was a randomized 'blinded' prospective clinical study using 32 adult bitches weighing 9.8±4.1kg that were admitted for elective ovariohysterectomy. Twenty minutes after administration of acepromazine and midazolam, anesthesia was induced with propofol (4mg kg-1) and maintained by a continuous rate infusion (CRI). Each animal was randomly assigned to one of four epidural groups: GL = levobupivacaine alone (0.33mg kg-1); GLM0.1 = levobupivacaine and morphine (0.1mg kg-1); GLM0.15 = levobupivacaine and morphine (0.15mg kg-1); and GLM0.2 = levobupivacaine and morphine (0.2mg kg-1). Variables obtained during anesthesia were heart rate, respiratory rate, systolic, mean and diastolic arterial blood pressures, oxyhemoglobin saturation, inspired oxygen fraction, end-tidal carbon dioxide tension, blood gases, serum cortisol, and plasma levels of levobupivacaine and morphine. The onset and duration times of the blockade were recorded. Arterial pressures were significantly increased in all groups at the times of ovarian pedicle clamping. There was a decrease in pH, together with an increase in both PaO2and PaCO2 over time. Serum cortisol levels were increased in TESu compared to TB, T30 and TR. Limb spasticity, muscle tremors, opisthotonos and diarrhea were observed in some animals during propofol infusion and ceased with the end of CRI. Reactions happened at different moments and lasted for different periods of time in each individual. Epidural with levobupivacaine alone or combined with morphine allowed for ovariohysterectomy to be performed under low propofol infusion rates, with minimal changes in cardiovascular variables and in serum cortisol levels. Adverse effects were observed in very few animals in each group.(AU)

Objetivou-se avaliar os efeitos cardiovasculares, analgésico, adversos, a concentração sérica de cortisol e os níveis plasmáticos de levobupivacaína e morfina em cadelas submetidas à infusão contínua de propofol e analgesia peridural com levobupivacaína isolada ou associada à morfina. Para tanto, realizou-se um estudo clínico prospectivo randomizado com 32 cadelas adultas pesando 9,8 ± 4,1kg, que foram submetidas à ovário-histerectomia eletiva. Vinte minutos após a administração de acepromazina e midazolam, os animais foram induzidos com propofol (4mg/kg) e mantidos por uma infusão contínua (CRI) do mesmo fármaco. Cada animal foi alocado aleatoriamente em um dos quatro grupos: GL = levobupivacaína isolada (0,33mg/kg); GLM0,1 = levobupivacaína + morfina (0,1mg/kg); GLM0,15 = levobupivacaína + morfina (0,15mg/kg) e GLM0,2 = levobupivacaína + morfina (0,2mg/kg). As variáveis obtidas durante a anestesia foram FC, f, PAS, PAM e PAD, SaO2, FiO2, EtCO2, gases sanguíneos, cortisol sérico e os níveis plasmáticos de levobupivacaína e morfina. Foram analisados, ainda, os períodos de latência e a duração dos bloqueios. As pressões arteriais aumentaram significativamente em todos os grupos nos momentos de ligadura dos pedículos ovarianos. Houve uma diminuição do pH, em conjunto com um aumento da PaO2 e da PaCO2 ao longo do tempo. Os níveis séricos de cortisol aumentaram. Espasticidade de membros, tremores musculares, opistótono e diarreia foram observados em alguns animais. Tais reações aconteceram em diferentes momentos e duraram diferentes períodos de tempo em cada indivíduo. A anestesia peridural com levobupivacaína isolada ou associada à morfina permitiu ovário-histerectomia em cadelas sob infusão de propofol, com mínimas alterações nas variáveis cardiovasculares e nos níveis de cortisol sérico e com baixo índice de efeitos adversos.(AU)

AVALIAÇÃO DE MÉTODOS PARA ESTIMAR A DEGRADAÇÃO RUMINAL DAS PROTEÍNAS: IN SITU, IN VITRO/GASES E RUSITEC

O objetivo deste estudo foi avaliar os parâmetros de degradação ruminal dos compostos nitrogenados estimados nos métodos in situ, in vitro/gases e Rusitec, com o intuito de identificar uma superestimação da degradabilidade ruminal estimada pelo método in situ. Amostras de uma dieta composta por silagem de milho (60%), grão de milho (18,6%), farelo de soja (20,2%), fosfato-bicálcio (0,2%), calcário calcítico (0,5), sal comum (0,2%) e ureia (0,3%), foram incubadas em ensaios utilizando os métodos in situ, in vitro/gases e Rusitec. Nos métodos in situ e in vitro foram estimadas as taxas de degradação (kd) e a degradabilidade da proteína. No método Rusitec foram realizados três ensaios com duração de 9 dias cada, utilizando cinco fermentadores. Cada fermentador recebeu diariamente 10 g da dieta em bolsas de nylon com porosidade de 41 m. O efluente líquido foi recolhido diariamente e alíquotas foram coletadas para posteriores analises de N amoniacal, N peptídico e N aminoacidico. O efeito linear da taxa de passagem da fração liquida, obtidos no ensaio com o Rusitec foram analisados utilizando um modelo misto, que incluiu os efeitos fixos da taxa de passagem, os efeitos aleatórios de período e dos vasos de fermentação, usando o procedimento MIXED do SAS. As diferenças entre os parâmetros de degradabilidade estimados pelos métodos in situ e in vitro foram verificados pelo teste F. O método in situ apresentou valores significativamente (P<0,05) maiores de degradabilidade em comparação ao método in vitro. O escape de N no método Rusitec apresentou efeito linear crescente com o aumento da taxa de passagem, isto evidencia um escape considerável de N, atingindo valores de 67% do N que desapareceu das bolsas de nylon nas taxas de 7%/h. Em conclusão, com o presente estudo foi possível verificar que frações de N da dieta incubadas em bolsas de nylon escapam da degradação ruminal sem sofrerem a ação das bactérias e este escape é acentuado pelo aumento da taxa de passagem.

The objective of this study was to evaluate ruminal degradation parameters of the nitrogen compounds estimated in the in situ, in vitro / gas and Rusitec methods, in order to identify an overestimation of ruminal degradability estimated by the in situ method. Samples of a diet composed of corn silage (60%), corn grain (18.6%), soybean meal (20.2%), phosphate-bicalcium (0.2%), calcitic limestone (0.5%), common salt (0.2%) and urea (0.3%) were incubated in assays using the in situ, in vitro / gas and Rusitec methods. In situ and in vitro methods, degradation rates (kd) and protein degradability were estimated. In the Rusitec method, three trials were carried out for 9 days each, using five fermenters. Each fermenter received 10 g of the diet daily in nylon bags with porosity of 41 m. The liquid effluent was collected daily and aliquots were collected for further analysis of ammoniacal N, peptidic N and aminoacid N. The linear effect of the rate of passage of the liquid fraction obtained in the Rusitec assay was analyzed using a mixed model, which included fixed effects of passage rate, random effects of period and fermentation vessels, using the MIXED procedure of SAS. The differences between the degradability parameters estimated by the in situ and in vitro methods were verified by the "F" test. The in situ method showed significantly higher values of degradability (P <0.05) compared to the in vitro method. The N escape in the Rusitec method presented a linear effect increasing with the increase of the passage rate, this shows a considerable escape of N, reaching values of 67% of the N that disappeared from the nylon bags at rates of 7% / h. In conclusion, with the present study it was possible to verify that N fractions of the diet incubated in nylon bags escape ruminal degradation without undergoing the action of the bacteria and this escape is accentuated by the increase of the passage rate.

ECOLOGIA ESPACIAL E FUNCIONAL DA COMUNIDADE ZOOPLANCTÔNICA NO MÉDIO CURSO DO RIO TOCANTINS

A utilização de rios para o aproveitamento energético é uma realidade que afeta os principais corpos hídricos brasileiros. Os aspectos sobre a ecologia espacial e funcional da comunidade planctônica, na área de influência da barragem da Usina Hidroelétrica de Estreito, no médio curso do rio Tocantins, foram estudados com base em amostragens realizadas, por arrasto superficial com redes de plâncton, em 20 pontos de coleta, distribuídos nos 20 km a montante e a jusante da barragem, durante os períodos chuvoso e seco. As análises físico-químicas revelaram a formação de um gradiente ambiental diretamente relacionado ao estabelecimento do reservatório. Na avaliação do estado trófico o ambiente lago teve comportamento oligotrófico enquanto o rio apresentou padrão mesotrófico. Foram identificados 22 tipos morfofuncionais de algas planctônicas na amostragem, 13 destes apresentando relação significante com as variações observadas na densidade da comunidade zooplanctônica. Com 145 taxa de organismos zooplanctônicos identificados, a diversidade estimada pelo índice de Shannon-Winer foi de 3,22±0,01 nat.ind-1, com 64,7% de equabilidade. Os rotíferos apresentaram a maior riqueza de espécies com 90 taxa, seguidos de cladóceros (42) e copépodos (12). A riqueza e diversidade variaram de forma significante em relação as variações sazonais e ambientais, enquanto a densidade de organismos apresentou variação significante apenas em relação ao tipo de ambiente. A densidade no período chuvoso foi dominada pela espécie de rotífero Filinia camasecla e pelo cladócero Bosmina longirostris, enquanto que as espécies de rotíferos Ptygura libera e Conochilus unicornis foram as mais representativas durante a estiagem. A análise de agrupamento Two-way revelou a formação de grupos de amostras que se relacionam com a sazonalidade e o tipo de ambiente, um padrão semelhante tendo sido encontrado nos grupos de espécies formados. A aplicação do índice de valor de Importância IndVal revelou que 36 das espécies amostradas são potenciais indicadoras ambientais. As espécies F. camasecla e Plationus patulus macrocanthus, foram fortes indicadoras do período chuvoso, enquanto que o gênero Gastropus, e as espécies P. libera, C. unicornis, Trichocerca cylindrica e Brachionus dolabratus dolabratus apresentaram forte poder de indicação para o período seco, estes dois últimos se destacando no ambiente rio. A análise de redundância canônica (RDA) da variação da densidade zooplanctônica, levou a explicação de 41,9% da variância, sendo 32,8% desta concentrada nos dois primeiros eixos canônicos. A análise de partição de variância demonstrou que a fração da variação da densidade que pode ser atribuída exclusivamente aos aspectos ambientais correspondeu a 13% em comparação a 23,7% da fração ambiente-tempo, atribuída a modificação dos aspectos ambientais ao longo da variação temporal. As metacomunidades estudadas apresentaram o padrão geral semi aninhado, havendo diferenciação ao longo do tempo dos padrões das comunidades de cladóceros e rotíferos, o que demonstra que estas respondem as variações ambientais ao longo dos períodos sazonais. A comunidade zooplanctônica estudada, foi composta por 8 grupo funcionais de organismos, que apresentaram distribuição relacionada aos tipos de ambientes e períodos sazonais. Contudo, não houve variação significativa na diversidade funcional ao longo da amostragem. Apesar de não terem sido identificados, pela técnica do quarto-canto, relações significantes entre os aspectos ambientais e os traços funcionais da comunidade zooplanctônica, a aplicação da análise RLQ demonstrou haver interação significante entre os traços funcionais e os eixos que representam o gradiente ambiental ao longo da amostragem, assim como entre os parâmetros ambientais e o espaço funcional das espécies.

The use of the rivers for the generation of energy is a reality that affects the main Brazilian rivers. The aspects of the spatial and functional ecology of the plankton community in the area of influence of the Hydroelectric dam Estreito, in the medium course of the Tocantins river, were studied based on samples collected by the surface trawling with plankton nets in the 20 collection points, distributed in the 20 km upstream and downstream of the dam, in the wet season and dry. The physico-chemical analysis revealed the formation of an environmental gradient directly related to the establishment of the reservoir. In the assessment of the trophic state, the lake environment had oligotrófico behavior as the river presented a mesotrophic condition. They were identified 22 morphofunctional types of planktonic algae in the sample, 13 of them showing a significant correlation with the observed variations in the density of the zooplanktonic community. Having identified 145 rate of planktonic organisms, the diversity estimated by Shannon-Winer index was 3.22 ± 0.01 nat.ind-1, with 64.7% of evenness. The rotífers presented the highest richness of species with 90 rate, followed by cladocerans (42) and copepods (12). The richness and diversity vary significantly in relation to seasonal and environmental variations, while the density of organisms showed significant variation only in the type of environment. The density in the rainy season was dominated by the species of rotifer Filinia camasecla and the cladocera Bosmina longirostris, while the rotifer species Ptygura libera and Conochilus unicornis were the most significant during the dry season. The two-way cluster analysis revealed the formation of groups of samples relating to the seasonality and the type of environment, a similar pattern which was found in the species of groups formed. Application of Importance of value of index - IndVal reveled that 36 of the species shoved are potential environmental indicators. The species F. camasecla and Plationus patulus macrocanthus were strong indicators of the rainy season, while gender Gastropus, and the species P. libera, C. unicornis, Trichocerca cylindrica and Brachionus dolabratus dolabratus, showed strong power of indication for the dry season, these last two ones standing out on the river environment. The canonical redundancy analysis (RDA) of the variation of zooplanktonic density led the explanation of 41.9% of the variance, with 32.8% of this concentrated one in the first two canonical axes. The analysis of variance showed that the partition fraction of the variation of the density that can be attributed just to the environmental aspects, corresponding to 13% compared to 23.7% of the environment-weather fraction, attributed of the change of the environmental aspects throughout the temporal range. The structural pattern of metacommunities in both seasonal periods was estimated by the EMS technique - Elements of Metacommunites Struture, showing the general pattern semi-nested, with differentiation over the time the standards of the Cladocera and the rotifers communities, which shows that they answer the environmental variations over the seasonal periods. The zooplanktonic community studied consisted of eight functional group of organisms that presented distribution related to the types of environments and seasons. However, there was no significant variation in functional diversity along the sampling. Despite of not having been identified through the quarter-corner technique, significant relationships between the environmental aspects and the functional features of the zooplankton community, the application of the HRC analysis showed that there was significant interaction between the functional trace and the axes representing the environmental gradient along the sampling as well as the environmental parameters and the functional space species.

Acao de protease do latex de Ficus benjamina L. sobre nematodeo e bacterias de interesse na producao animal.

Helmintoses e infecções bacterianas são um grande desafio para a produção pecuária porque provocam perda de produtividade nos rebanhos. Para reduzir prejuízos, os produtores realizam o controle de parasitos e bactérias principalmente utilizando produtos químicos sintéticos, mas a resistência aos princípios ativos desses produtos insta a busca contínua por moléculas biologicamente ativas. Essa pesquisa foi conduzida com o objetivo de obter frações proteicas e protease a partir do látex de Ficus benjamina, além de avaliar uso potencial dessas amostras proteicas no controle do nematóide parasito de pequenos ruminantes, Haemonchus contortus, bem como sobre as bactérias patogênicas Salmonella enterica, Staphylococcus aureus e Enterobacter aerogenes. O látex foi obtido a partir de uma incisão feita no ápice do galho das plantas e coletado em tampão fosfato de sódio (75 mM, pH 7,0). O látex foi centrifugado (12.000 x g a 4 °C por 15 min), dialisado contra água (cut-off 14 kDa), novamente centrifugado nas mesmas condições anteriores e, então, denominado EPL (Extrato Proteico do Látex). O EPL foi fracionado com sulfato de amônio a 30-60% e 60-90% de saturação para a obtenção das frações denominadas F30-60 e F60-90, respectivamente. A F60-90 foi fracionada por cromatografia de troca iônica em matriz de CM-Cellulose e a fração com maior atividade proteolítica obtida foi denominada FbP (Ficus benjamina Protease). De posse dessas frações, foram conduzidos ensaios de análise de proteínas, atividade proteolítica e identificação da FbP. Adicionalmente foram realizados ensaios de inibição do desenvolvimento larvar do nematódeo H. contortus e inibição do crescimento das bactérias S. enterica, S. aureus e E. aerogenes em meio líquido. Os teores de proteína totais obtidos foram, respectivamente, 121,6, 21,2, 75,7 mg para EPL, F30-60 e F60-90. A atividade proteolítica das amostras proteicas foi de 43.471, 13.245 e 57.857 UA/mL/mgP para EPL, F30-60 e F60-90, respectivamente. A FbP apresentou atividade proteolítica de 36.393,8 UA/mL/mgP. A análise em gel mostrou a FbP com uma banda proteica com massa entre 20 e 30 kDa e por espectrometria de massa identificou-se a FbP como protease cisteínica, com massa molecular de 23,97 kDa. FbP manteve atividade proteolítica estável na faixa de pH entre 6 e 10 e em uma ampla faixa de temperatura, com atividade ótima à 60 °C. Em testes de inibição do desenvolvimento larvar, EPL, F30-60, F60-90 e a FbP apresentaram IC50 de 0,22, 1,38, 0,42 e 0,26 mg/mL, respectivamente. Foi verificado que EPL, F30-60 e F60-90 não exerceram ação inibitória sobre o crescimento das bactérias, mas FbP inibiu o crescimento de S. aureus e S. enterica com mínima concentração inibitória (MIC) de 3,12 g/mL. Conclui-se que a FbP obtida a partir do látex de F. benjamina possui propriedades biológicas promissoras para o desenvolvimento de produtos que possam ser utilizados no controle do nematóide gastrointestinal, H. contortus, e das bactérias patogênicas S. aureus e S. enterica.

Helminthes and bacterial infections are a major challenge for livestock production because they cause loss of productivity in herds. To reduce losses, producers control parasites and bacteria mainly using synthetic chemicals, but the resistance to the active principles of these products calls for the continuous search for biologically active molecules. This research was conducted with the objective of obtaining protein fractions and protease from the latex of Ficus benjamina, in addition to evaluating the potential use of these protein samples in the control of the parasite nematode of small ruminants, Haemonchus contortus, as well as on the pathogenic bacteria Salmonella enterica, Staphylococcus aureus and Enterobacter aerogenes. Latex was obtained from an incision made at the apex of the plant limb and collected in sodium phosphate buffer (75 mM, pH 7.0). The latex was centrifuged (12,000 x g at 4 ° C for 15 min), dialysed against water (14 kDa cut-off), again centrifuged under the same conditions as before and then referred to as EPL (Latex Protein Extract). The EPL was fractionated with ammonium sulphate at 30-60% and 60-90% saturation to obtain the fractions denominated F30-60 and F60-90, respectively. F60-90 was fractionated by ion exchange chromatography on CM-Cellulose matrix and the fraction with the highest proteolytic activity obtained was denominated FbP (Ficus benjamina Protease). With these fractions, protein analysis, proteolytic activity and FbP identification were carried out. In addition, inhibition of larval development of the nematode H. contortus and inhibition of the growth of S. enterica, S. aureus and E. aerogenes in a liquid medium were carried out. The total protein levels obtained were, respectively, 121.5, 21.2, 75.7 mg for EPL, F30-60 and F60-90. The proteolytic activity of the protein samples was 43,471, 13,245 and 57,857 UA/mL/mgP for EPL, F30-60 and F60-90, respectively. The FbP presented proteolytic activity of 36,393.8 AU/mL/mgP. Gel analysis showed FbP with a protein band with mass between 20 and 30 kDa and by mass spectrometry the FbP was identified as cysteine protease, with a molecular weight of 23.97 kDa. FbP maintained stable proteolytic activity in the pH range between 6 and 10 and over a wide temperature range, with optimum activity at 60 °C. In tests for inhibition of larval development, EPL, F30-60, F60-90 and FbP presented IC50 of 0.22, 1.38, 0.42 and 0.26 mg/mL, respectively. It was verified that EPL, F30-60 and F60-90 did not exert an inhibitory action on the growth of bacteria, but FbP inhibited the growth of S. aureus and S. enterica with minimum inhibitory concentration (MIC) of 3.12 g/mL. It is concluded that FbP obtained from latex of F. benjamina has promising biological properties for the development of products that can be used in the control of the gastrointestinal nematode, H. contortus, and the pathogenic bacteria S. aureus and S. enterica.

Right-to-left shunt determination in dog lungs under inhalation anesthesia with rebreathing and non-rebreathing system / Determinação de shunt venoso–arterial em pulmões de cães sob anestesia geral inalatória por sistemas com e sem reinalação

PURPOSE: To investigatge right-to-left shunt determination in dog lungs under inhalantion anesthesia with non-rebreathing and rebreathing systems and fraction of inspired oxygen (F I O2) of 0.9 and 0.4, respectively. METHODS: Two groups of 10 dogs each under inhalation anesthesia with sevoflurane: GI in which it was utilized non-rebreathing semiclosed system and F I O2 = 0.9, and GII in which it was utilized rebreathing semiclosed system and F I O2 = 0.4. The study parameters were: heart rate, medium arterial pressure, right-to-left intrapulmonary shunt, hematocrit, hemoglobin, arterial partial pressure of oxygen, mixed venous partial pressure of oxygen, mixed venous oxygen saturation, arterial partial pressure of carbon dioxide, partial pressure of water in the alveoli. RESULTS: Shunt results were significantly different between the two groups - GI data were higher than GII in all the evaluated moments. Hence, the group with nonrebreathing (GI) developed a superior grade of intrapulmonary shunt when compared with the rebreathing group (GII). The partial pressure of water in the alveoli was significantly higher in GII. CONCLUSION: The inhalation anesthesia with non-rebreathing system and F I O2 = 0.9 developed a higher grade of intrapulmonary right-to-left shunt when compared with the rebreathing system and F I O2 = 0.4. The higher humidity in GII contributed to the result.(AU)

OBJETIVO: Comparar a formação de shunt venoso-arterial em pulmões de cães submetidos a anestesia geral inalatória utilizando-se sistemas de anestesia com e sem reinalação, com fração inspirada de oxigênio de 0,4 e 0,9, respectivamente. MÉTODOS: Empregaram-se 20 cães induzidos com tiopental sódico (30mg/kg) e mantidos com sevoflurano (3 por cento) e alocados em dois grupos (n=10); os animais de GI foram ventilados com modalidade controlada em sistema semifechado, sem reinalação, F I O2 = 0,9, e os de GII, com modalidade controlada, sistema semifechado, com reinalação e F I O2 = 0,4. Os atributos analisados durante o experimento foram: freqüência cardíaca, pressão arterial média, shunt pulmonar venoso-arterial, hematócrito, hemoglobina, pressão parcial de oxigênio arterial, pressão parcial de oxigênio no sangue venoso misto, saturação de oxigênio no sangue venoso misto, pressão parcial de dióxido de carbono arterial e pressão de vapor de água nos alvéolos (P VA). RESULTADOS: A P VA foi significativamente maior em GII. A análise estatística dos valores encontrados de shunt mostrou que GI e GII apresentaram diferenças significativas, sendo que os resultados de GI são maiores que os de GII em todos os momentos avaliados. Já a análise de momentos dentro de um mesmo grupo não demonstrou diferenças. CONCLUSÃO: O sistema de anestesia sem reinalação com F I O2 = 0,9 desenvolveu maior grau de shunt pulmonar venoso-arterial que o sistema de anestesia com reinalação e F I O2 = 0,4. A umidificação dos gases em GII contribuiu para diminuir o shunt.(AU)

Glicosidases e sulfatases no molusco marinho aplysia cervina / Glycosidases and sulfatases from the marine mollusc aplysia cervina

RESUMO Glicosaminoglicanos (GAGs) são carboidratos presentes em todos os organismos que apresentam organização tissular. Glicosidases e sulfatases são as enzimas envolvidas na degradação destes compostos em vertebrados e invertebrados. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença destas enzimas em diferentes tecidos do molusco Aplysiacervina. O molusco foi dissecado em esôfago, fígado, moela e músculo e homogeneizados separadamente. Após centrifugação os sobrenadantes (extratos brutos) foram fracionados com sulfato de amônio nas concentrações de 0-30% (F-I), 30-50% (FII) e 50-80% (FIII). Foi identificada a presença de sulfatase, β-glucuronidase, β-D-N-acetilgalactosaminidase e α-glucosaminidase nos extratos brutos de todos os tecidos investigados. A enzima α-fucosidase não foi detectada em esôfago, nos extratos brutos e F-I de moela, mas sim nas frações de fígado e músculo. A sulfatase apresentou-se mais ativa na F-III de fígado e moela com atividades específicas de 3,0 e 4,8, respectivamente. A α-glucosaminidase foi mais ativa nas frações F-III de esôfago e músculo apresentando atividades específicas de 3,9 e 2,0, respectivamente. Estes resultados indicam a existência de atividade catabólica sobre os GAGs neste invertebrado marinho.

ABSTRACT Glycosaminoglycans (GAGs) are carbohydrates present in all organisms with tissue organization. Glycosidases and sulfatases are the enzymes involved in their degradation in vertebrates and invertebrates. The objective of this work was to identify the presence of these enzymes in different tissues of the mollusc Aplysia cervina. The mollusc was dissected, separating out the esophagus, liver, gizzard and muscle, which were homogenized separately. After centrifugation the supernatants (crude extracts) were fractionated with ammonium sulfate in the concentrations of 0-30% (F-I), 30-50% (FII) and 50-80% (FIII). The presence of the sulfatase,β-glucuronidase, β-D-N-acetilgalactosaminidase and α-glucosaminidase was identified in the crude extracts of all studied tissues. α-fucosidasewasnot found in the esophagus or in the crude extracts and F-I from gizzard, but was detected in the fractions from liver and muscle. Sulfatase was more active in F-III from liver and gizzard, demonstrating specific activity of the 3.0 and 4.8, respectively. α-glucosaminidase was more active in the F-III fraction from esophagus and muscle presenting 3.9 and 2.0 specifics activities, respectively. These results indicate the existence of catabolic activity on GAGs in these marine invertebrate.