Detection of Leishmania infantum amastigotes in neutrophil from peripheral blood in a naturally infected dog / Detecção de formas amastigotas de Leishmania infantum em neutrófilos do sangue periférico de cão naturalmente infectado

Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a zoonotic disease of high lethality caused by Leishmania infantum in the Americas. In the infected dog, the amastigotes are scarce in blood, especially in the late phase of the disease. This study aimed to report a rare case of L. infantum amastigotes found in neutrophils from peripheral blood of a naturally infected dog in terminal phase of CVL, also describing its clinical status before and after treatment with miltefosine 2%. The dog, which presented as polysymptomatic and with classical signs and symptoms of CVL was submitted to the following tests: Dual Path Platform (DPP) rapid test, ELISA and parasitological examination of peripheral blood. Hematological and biochemical parameters were obtained before and after treatment. All diagnostic tests were positive for CVL. The identification of L. infantum amastigotes inside neutrophils from peripheral blood was confirmed through microscopy, and the species was confirmed by molecular analysis. At the end of the treatment, peripheral parasitemia was not detected, and improvements were observed in clinical and laboratorial parameters. Finally, this atypical finding can be used as example to raise discussions about the real immunological role of neutrophils in late phases of CVL and its clinical/therapeutic implications.(AU)

A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença zoonótica de alta letalidade causada por Leishmania infantum nas Américas. No cão infectado, as formas amastigotas são escassas no sangue, principalmente na fase tardia da doença. Este estudo teve como objetivo relatar um caso raro de amastigotas de L. infantum encontradas em neutrófilos do sangue periférico de um cão naturalmente infectado e terminal da LVC, descrevendo também seu estado clínico antes e após o tratamento com miltefosina a 2%. O cão, que se apresentou como polissintomático e com sinais e sintomas clássicos da LVC foi submetido aos seguintes testes: teste rápido Dual Path Platform (DPP), ELISA e exame parasitológico de sangue periférico. Os parâmetros hematológicos e bioquímicos foram obtidos antes e após o tratamento. Todos os testes diagnósticos foram positivos para LVC. A identificação de formas amastigotas de L. infantum, dentro de neutrófilos do sangue periférico foi confirmada por microscopia, e a espécie foi confirmada por análise molecular. Ao final do tratamento, não foi detectada parasitemia periférica, observando-se melhora dos parâmetros clínicos e laboratoriais. Por fim, esse achado atípico pode ser usado como exemplo para levantar discussões sobre o real papel imunológico dos neutrófilos nas fases tardias da LVC e suas implicações clínicas/terapêuticas.(AU)

Detection of Leishmania infantum amastigotes in neutrophil from peripheral blood in a naturally infected dog / Detecção de formas amastigotas de Leishmania infantum em neutrófilos do sangue periférico de cão naturalmente infectado

Abstract Canine visceral leishmaniasis (CVL) is a zoonotic disease of high lethality caused by Leishmania infantum in the Americas. In the infected dog, the amastigotes are scarce in blood, especially in the late phase of the disease. This study aimed to report a rare case of L. infantum amastigotes found in neutrophils from peripheral blood of a naturally infected dog in terminal phase of CVL, also describing its clinical status before and after treatment with miltefosine 2%. The dog, which presented as polysymptomatic and with classical signs and symptoms of CVL was submitted to the following tests: Dual Path Platform (DPP) rapid test, ELISA and parasitological examination of peripheral blood. Hematological and biochemical parameters were obtained before and after treatment. All diagnostic tests were positive for CVL. The identification of L. infantum amastigotes inside neutrophils from peripheral blood was confirmed through microscopy, and the species was confirmed by molecular analysis. At the end of the treatment, peripheral parasitemia was not detected, and improvements were observed in clinical and laboratorial parameters. Finally, this atypical finding can be used as example to raise discussions about the real immunological role of neutrophils in late phases of CVL and its clinical/therapeutic implications.

Resumo A leishmaniose visceral canina (LVC) é uma doença zoonótica de alta letalidade causada por Leishmania infantum nas Américas. No cão infectado, as formas amastigotas são escassas no sangue, principalmente na fase tardia da doença. Este estudo teve como objetivo relatar um caso raro de amastigotas de L. infantum encontradas em neutrófilos do sangue periférico de um cão naturalmente infectado e terminal da LVC, descrevendo também seu estado clínico antes e após o tratamento com miltefosina a 2%. O cão, que se apresentou como polissintomático e com sinais e sintomas clássicos da LVC foi submetido aos seguintes testes: teste rápido Dual Path Platform (DPP), ELISA e exame parasitológico de sangue periférico. Os parâmetros hematológicos e bioquímicos foram obtidos antes e após o tratamento. Todos os testes diagnósticos foram positivos para LVC. A identificação de formas amastigotas de L. infantum, dentro de neutrófilos do sangue periférico foi confirmada por microscopia, e a espécie foi confirmada por análise molecular. Ao final do tratamento, não foi detectada parasitemia periférica, observando-se melhora dos parâmetros clínicos e laboratoriais. Por fim, esse achado atípico pode ser usado como exemplo para levantar discussões sobre o real papel imunológico dos neutrófilos nas fases tardias da LVC e suas implicações clínicas/terapêuticas.

Infectious diseases dynamics in growing/finishing pigs in Southern Brazil (2005-2016) / Dinâmica de ocorrência das doenças infecciosas em suínos nas fases de crescimento e terminação no sul do Brasil (2005-2016)

This study aimed to determine the frequency and distribution of infectious diseases diagnosed through necropsy examination and histopathological analysis in growing/finishing pigs along 12 years (2005-2016) in Southern Brazil. We evaluated 1906 anatomopathological exams of pigs at growing/finishing phases, of which the infectious diseases corresponded to 75.6% of the cases (1,441/1,906). Porcine circovirus type 2 (PCV2) infections were the most frequent, accounting for 51.3% of the cases (739/1,441) with a higher frequency from 2005 to 2007, characterizing an epidemic distribution, with a gradual decline after 2008. Infectious diseases affecting the respiratory system were the second major cause with 30.1% of the cases. Among these, necrotizing bronchiolitis caused by swine Influenza (15.1%, 218/1,441) and bacterial pneumonia (15%, 216/1,441) were the main conditions. Influenza was mostly diagnosed from 2010 to 2013, accounting for 43.1% (167/387) of the cases. After this period, both respiratory infectious diseases were endemic. Digestive system infectious diseases accounted for 10.5% of the diagnoses (151/1,441), with the following main conditions: Salmonella spp. enterocolitis (43.7%, 66/151), Lawsonia spp. proliferative enteropathy (41.7%, 63/151), and Brachyspira spp. colitis (14.6%, 22/151). The latter had a higher incidence from 2012 to 2014 with all cases detected in this period. Polyserositis and bacterial meningitis represented, respectively, 5.8% (84/1,441) and 2.3% (33/1,441) of the cases diagnosed, with a constant endemic character.(AU)

O objetivo deste estudo consistiu em determinar a frequência e a distribuição das doenças infecciosas diagnosticadas através de exame de necropsia e análise histopatológica em suínos nas fases de crescimento/terminação ao longo de 12 anos (2005-2016) no sul do Brasil. Foram avaliados 1906 laudos anatomopatológicos de suínos nas fases de crescimento/terminação, dos quais as doenças infecciosas corresponderam a 75,6% (1441/1906) do total. As infecções por circovírus suíno tipo 2 (PCV2) foram as mais frequentes, contabilizando 51,3% (739/1441) dos casos, com uma alta frequência de 2005 a 2007 caracterizando uma distribuição epidêmica neste período, e um declínio gradual após o ano de 2008. A segunda principal causa incluiu as doenças infecciosas que afetam o sistema respiratório (30,1% dos casos). Dentre essas, destacaram-se a influenza suína (15,1%; 218/1441) e pneumonias bacterianas (15%; 216/1441). O diagnóstico de influenza apresentou uma frequência elevada de 2010 a 2013, totalizando 43,1% (167/387) dos casos. Após este período, ambas doenças infecciosas respiratórias exibiram caráter endêmico. As doenças infecciosas do sistema digestório totalizaram 10,5% (151/1441) dos diagnósticos, com as seguintes principais condições: enterocolite por Salmonella spp. (43,7%; 66/151), enteropatia proliferativa por Lawsonia spp. (41,7%; 63/151) e colite por Brachyspira spp. (14,6%; 22/151). A colite por Brachyspira spp. apresentou uma alta incidência de 2012 a 2014 com todos os casos detectados no período. As polisserosites e meningites bacterianas representaram 5,8% (84/1441) e 2,3% (33/1441) dos casos diagnosticados, respectivamente, com um caráter endêmico constante.(AU)

Infectious diseases dynamics in growing/finishing pigs in Southern Brazil (2005-2016) / Dinâmica de ocorrência das doenças infecciosas em suínos nas fases de crescimento e terminação no sul do Brasil (2005-2016)

This study aimed to determine the frequency and distribution of infectious diseases diagnosed through necropsy examination and histopathological analysis in growing/finishing pigs along 12 years (2005-2016) in Southern Brazil. We evaluated 1906 anatomopathological exams of pigs at growing/finishing phases, of which the infectious diseases corresponded to 75.6% of the cases (1,441/1,906). Porcine circovirus type 2 (PCV2) infections were the most frequent, accounting for 51.3% of the cases (739/1,441) with a higher frequency from 2005 to 2007, characterizing an epidemic distribution, with a gradual decline after 2008. Infectious diseases affecting the respiratory system were the second major cause with 30.1% of the cases. Among these, necrotizing bronchiolitis caused by swine Influenza (15.1%, 218/1,441) and bacterial pneumonia (15%, 216/1,441) were the main conditions. Influenza was mostly diagnosed from 2010 to 2013, accounting for 43.1% (167/387) of the cases. After this period, both respiratory infectious diseases were endemic. Digestive system infectious diseases accounted for 10.5% of the diagnoses (151/1,441), with the following main conditions: Salmonella spp. enterocolitis (43.7%, 66/151), Lawsonia spp. proliferative enteropathy (41.7%, 63/151), and Brachyspira spp. colitis (14.6%, 22/151). The latter had a higher incidence from 2012 to 2014 with all cases detected in this period. Polyserositis and bacterial meningitis represented, respectively, 5.8% (84/1,441) and 2.3% (33/1,441) of the cases diagnosed, with a constant endemic character.(AU)

O objetivo deste estudo consistiu em determinar a frequência e a distribuição das doenças infecciosas diagnosticadas através de exame de necropsia e análise histopatológica em suínos nas fases de crescimento/terminação ao longo de 12 anos (2005-2016) no sul do Brasil. Foram avaliados 1906 laudos anatomopatológicos de suínos nas fases de crescimento/terminação, dos quais as doenças infecciosas corresponderam a 75,6% (1441/1906) do total. As infecções por circovírus suíno tipo 2 (PCV2) foram as mais frequentes, contabilizando 51,3% (739/1441) dos casos, com uma alta frequência de 2005 a 2007 caracterizando uma distribuição epidêmica neste período, e um declínio gradual após o ano de 2008. A segunda principal causa incluiu as doenças infecciosas que afetam o sistema respiratório (30,1% dos casos). Dentre essas, destacaram-se a influenza suína (15,1%; 218/1441) e pneumonias bacterianas (15%; 216/1441). O diagnóstico de influenza apresentou uma frequência elevada de 2010 a 2013, totalizando 43,1% (167/387) dos casos. Após este período, ambas doenças infecciosas respiratórias exibiram caráter endêmico. As doenças infecciosas do sistema digestório totalizaram 10,5% (151/1441) dos diagnósticos, com as seguintes principais condições: enterocolite por Salmonella spp. (43,7%; 66/151), enteropatia proliferativa por Lawsonia spp. (41,7%; 63/151) e colite por Brachyspira spp. (14,6%; 22/151). A colite por Brachyspira spp. apresentou uma alta incidência de 2012 a 2014 com todos os casos detectados no período. As polisserosites e meningites bacterianas representaram 5,8% (84/1441) e 2,3% (33/1441) dos casos diagnosticados, respectivamente, com um caráter endêmico constante.(AU)

Equine pythiosis in the eastern wetlands of Uruguay

ABSTRACT: Equine pythiosis is an ulcerative and granulomatous disease of the skin, caused by the oomycete Pythium insidiosum (Pythiaceae). The objective of this study was to describe seven cases of equine pythiosis that occurred from 2012 to 2017 in the eastern region of Uruguay. Six of the seven cases occurred in the eastern wetland ecosystems of the Merin basin, and the remaining case occurred in the wetland fluvial plains of the Tacuarembó River. Lesions consisted of a large, rapidly growing ulcerated tumor with abundant granulation tissue, serosanguineous secretion, and fistulous tracts containing large concretions or kunkers. The animals presented intense pruritus, claudication and loss of body condition, with death or euthanasia in extremis in six cases. The main histological lesions consisted of an eosinophilic and pyogranulomatous inflammatory process, with numerous foci of eosinophilic necrosis (kunkers), collagenolysis, and a Splendore-Hoeppli reaction. In all cases, silver coloration (Grocott) showed intralesional hyphae compatible with P. insidiosum, which was confirmed by immunohistochemistry in three cases. A horse in the terminal phase of the disease was treated with triamcinolone acetonide (50mg IM every 15 days), and fully recovered after 1 year. It is concluded that equine pythiosis is prevalent in the wetland ecosystems of eastern Uruguay and that treatment with triamcinolone is auspicious.

RESUMO: Pitiose é uma doença granulomatosa e ulcerativa da pele dos equinos causada pelo oomyceto Pythium insidiosum (Pythiaceae). O objetivo deste trabalho foi descrever sete casos de pitiose equina que ocorreram de 2012 a 2017 na região leste do Uruguai. Seis dos sete casos ocorreram no ecossistema de áreas pantanosas da bacia da bacia da Lagoa Mirim Merin e o restante nas planícies fluviais pantanosas do rio Tacuarembó. As lesões se caracterizaram por tumores ulcerados de crescimento rápido com abundante tecido de granulação, secreção serossanguinolenta e presença de tratos fistulosos contendo material coraloide ou kunkers. Os equinos apresentavam prurido intenso, claudicação e perda da condição corporal e seis morreram ou foram eutanasiados in extremis. As principais lesões histológicas consistiam de um processo inflamatório piogranulomatoso com numerosos focos de necrose eosinofílicos (kunkers), colagenólise e reação de Splendori-Hoepli. Em todos os casos a impregnação pela prata (Grocott) revelou a presença de hifas intralesionais compatíveis com P. insidiosum, o que foi confirmado pela imuno-histoquímica em três casos. Um equino em fase terminal da doença foi tratado com triamcinolona acetonida (50mg, IM, a cada 15 dias), recuperando-se completamente após um ano. Conclui-se que a pitiose é uma enfermidade presente em áreas úmidas na região leste do Uruguai e o tratamento com triamcinolona pode ser uma alternativa promissora.

Equine pythiosis in the eastern wetlands of Uruguay / Pitiose equina em áreas úmidas do leste do Uruguai

Equine pythiosis is an ulcerative and granulomatous disease of the skin, caused by the oomycete Pythium insidiosum (Pythiaceae). The objective of this study was to describe seven cases of equine pythiosis that occurred from 2012 to 2017 in the eastern region of Uruguay. Six of the seven cases occurred in the eastern wetland ecosystems of the Merin basin, and the remaining case occurred in the wetland fluvial plains of the Tacuarembó River. Lesions consisted of a large, rapidly growing ulcerated tumor with abundant granulation tissue, serosanguineous secretion, and fistulous tracts containing large concretions or kunkers. The animals presented intense pruritus, claudication and loss of body condition, with death or euthanasia in extremis in six cases. The main histological lesions consisted of an eosinophilic and pyogranulomatous inflammatory process, with numerous foci of eosinophilic necrosis (kunkers), collagenolysis, and a Splendore-Hoeppli reaction. In all cases, silver coloration (Grocott) showed intralesional hyphae compatible with P. insidiosum, which was confirmed by immunohistochemistry in three cases. A horse in the terminal phase of the disease was treated with triamcinolone acetonide (50mg IM every 15 days), and fully recovered after 1 year. It is concluded that equine pythiosis is prevalent in the wetland ecosystems of eastern Uruguay and that treatment with triamcinolone is auspicious.(AU)

Pitiose é uma doença granulomatosa e ulcerativa da pele dos equinos causada pelo oomyceto Pythium insidiosum (Pythiaceae). O objetivo deste trabalho foi descrever sete casos de pitiose equina que ocorreram de 2012 a 2017 na região leste do Uruguai. Seis dos sete casos ocorreram no ecossistema de áreas pantanosas da bacia da bacia da Lagoa Mirim Merin e o restante nas planícies fluviais pantanosas do rio Tacuarembó. As lesões se caracterizaram por tumores ulcerados de crescimento rápido com abundante tecido de granulação, secreção serossanguinolenta e presença de tratos fistulosos contendo material coraloide ou kunkers. Os equinos apresentavam prurido intenso, claudicação e perda da condição corporal e seis morreram ou foram eutanasiados in extremis. As principais lesões histológicas consistiam de um processo inflamatório piogranulomatoso com numerosos focos de necrose eosinofílicos (kunkers), colagenólise e reação de Splendori-Hoepli. Em todos os casos a impregnação pela prata (Grocott) revelou a presença de hifas intralesionais compatíveis com P. insidiosum, o que foi confirmado pela imuno-histoquímica em três casos. Um equino em fase terminal da doença foi tratado com triamcinolona acetonida (50mg, IM, a cada 15 dias), recuperando-se completamente após um ano. Conclui-se que a pitiose é uma enfermidade presente em áreas úmidas na região leste do Uruguai e o tratamento com triamcinolona pode ser uma alternativa promissora.(AU)

Equine pythiosis in the eastern wetlands of Uruguay / Pitiose equina em áreas úmidas do leste do Uruguai

Equine pythiosis is an ulcerative and granulomatous disease of the skin, caused by the oomycete Pythium insidiosum (Pythiaceae). The objective of this study was to describe seven cases of equine pythiosis that occurred from 2012 to 2017 in the eastern region of Uruguay. Six of the seven cases occurred in the eastern wetland ecosystems of the Merin basin, and the remaining case occurred in the wetland fluvial plains of the Tacuarembó River. Lesions consisted of a large, rapidly growing ulcerated tumor with abundant granulation tissue, serosanguineous secretion, and fistulous tracts containing large concretions or kunkers. The animals presented intense pruritus, claudication and loss of body condition, with death or euthanasia in extremis in six cases. The main histological lesions consisted of an eosinophilic and pyogranulomatous inflammatory process, with numerous foci of eosinophilic necrosis (kunkers), collagenolysis, and a Splendore-Hoeppli reaction. In all cases, silver coloration (Grocott) showed intralesional hyphae compatible with P. insidiosum, which was confirmed by immunohistochemistry in three cases. A horse in the terminal phase of the disease was treated with triamcinolone acetonide (50mg IM every 15 days), and fully recovered after 1 year. It is concluded that equine pythiosis is prevalent in the wetland ecosystems of eastern Uruguay and that treatment with triamcinolone is auspicious.(AU)

Pitiose é uma doença granulomatosa e ulcerativa da pele dos equinos causada pelo oomyceto Pythium insidiosum (Pythiaceae). O objetivo deste trabalho foi descrever sete casos de pitiose equina que ocorreram de 2012 a 2017 na região leste do Uruguai. Seis dos sete casos ocorreram no ecossistema de áreas pantanosas da bacia da bacia da Lagoa Mirim Merin e o restante nas planícies fluviais pantanosas do rio Tacuarembó. As lesões se caracterizaram por tumores ulcerados de crescimento rápido com abundante tecido de granulação, secreção serossanguinolenta e presença de tratos fistulosos contendo material coraloide ou kunkers. Os equinos apresentavam prurido intenso, claudicação e perda da condição corporal e seis morreram ou foram eutanasiados in extremis. As principais lesões histológicas consistiam de um processo inflamatório piogranulomatoso com numerosos focos de necrose eosinofílicos (kunkers), colagenólise e reação de Splendori-Hoepli. Em todos os casos a impregnação pela prata (Grocott) revelou a presença de hifas intralesionais compatíveis com P. insidiosum, o que foi confirmado pela imuno-histoquímica em três casos. Um equino em fase terminal da doença foi tratado com triamcinolona acetonida (50mg, IM, a cada 15 dias), recuperando-se completamente após um ano. Conclui-se que a pitiose é uma enfermidade presente em áreas úmidas na região leste do Uruguai e o tratamento com triamcinolona pode ser uma alternativa promissora.(AU)

Intoxicação experimental por Niedenzuella stannea (Malpighiaceae) em ovinos

ABSTRACT: Niedenzuella stannea a sodium monofluoroacetate-containing plant cause sudden death in cattle in southern Mato Grosso State. This investigation describes the toxicity and clinical and pathological findings of experimental poisoning by N. stannea in sheep. Fruits, mature leaves and young leaves of the plant collected in properties near the margins of the Araguaia river basins with history of sudden death in cattle were used in the experiment. No clinical signs were observed in sheep ingesting doses between 10 and 40g/kg of mature leaves and 10g/kg of fruits. The animals had shown clinical signs when received young leaves of the plant orally in a single dose of 5, 10, 20g/kg, and death occurred in sheep receiving 30g/kg. The plant at the dose of 30g/kg of fresh leaves maintained its toxicity after being dried. The main clinical signs observed were anorexia, lethargy, dyspnea, tachycardia, and arrhythmia with a clinical course ranging 16-20 hours after the onset of clinical signs. In an hyperacute terminal phase the animals showed reluctance to move, frequent urination, engorged jugular, evident venous pulse, muscle tremor, sternal recumbence, lateral decubitus, and death. At necropsy engorgement of the atrium and large veins of the heart, and pulmonary edema were observed. Microscopically, the kidney had hydropic-vacuolar degeneration in the cytoplasm of the epithelial cells of the distal convoluted tubules. It is concluded that young leaves of N. stannea can cause intoxication in sheep and should be considered in the differential diagnosis of acute diseases or sudden death in sheep in regions where the plant exist.

RESUMO: Niedenzuella stannea é uma planta que contém monofluoracetato de sódio e é incriminada como causa de morte súbita em bovinos na Região Sul do Estado de Mato Grosso. Este estudo descreve a toxidez e achados clínicos e patológicos da intoxicação experimental por N. stannea em ovinos. Foram utilizados no experimento, frutos, folhas maduras e folhas jovens de N. stannea coletadas em propriedades as margens de afluentes das bacias hidrográficas do Rio Araguaia onde havia histórico de morte súbita em bovinos. Folhas maduras em doses entre 10 e 40g/kg e frutos na dose de 10 g/kg não causaram alterações clínicas. Alterações clínicas foram observadas em ovinos que receberam a partir de 5g/kg de folhas jovens em dose única e a morte ocorreu nos que receberam a partir de 30g/kg. A toxicidade na dose de 30g/kg se manteve após a secagem da planta. Os principais sinais clínicos foram anorexia, apatia, dispneia, arritmia e taquicardia em evolução clínica que variou de 16 às 20h. Notou-se em uma fase terminal hiperaguda, com evolução de 13 a 20 min., relutância ao movimento, micção frequente, jugular ingurgitada, pulso venoso evidente, tremor muscular, decúbito esternal e decúbito lateral e morte. Na necropsia os principais achados foram ingurgitamento de grandes veias, das aurículas do coração e edema pulmonar. Microscopicamente a principal alteração ocorreu no rim e caracterizou-se por degeneração hidrópico-vacuolar no citoplasma de epitélio de túbulos contorcidos distais. Conclui-se que N. stannea na fase de brotação é tóxica para ovinos e que a intoxicação por esta planta deve ser incluída no diagnóstico diferencial das doenças com curso clínico hiperagudo ou morte súbita em ovinos em regiões onde a planta existe.

Intoxicação experimental por Niedenzuella stannea (Malpighiaceae) em ovinos / Experimental poisoning by Niedenzuella stannea (Malpighiaceae) in sheep

Niedenzuella stannea é uma planta que contém monofluoracetato de sódio e é incriminada como causa de morte súbita em bovinos na Região Sul do Estado de Mato Grosso. Este estudo descreve a toxidez e achados clínicos e patológicos da intoxicação experimental por N. stannea em ovinos. Foram utilizados no experimento, frutos, folhas maduras e folhas jovens de N. stannea coletadas em propriedades as margens de afluentes das bacias hidrográficas do Rio Araguaia onde havia histórico de morte súbita em bovinos. Folhas maduras em doses entre 10 e 40g/kg e frutos na dose de 10 g/kg não causaram alterações clínicas. Alterações clínicas foram observadas em ovinos que receberam a partir de 5g/kg de folhas jovens em dose única e a morte ocorreu nos que receberam a partir de 30g/kg. A toxicidade na dose de 30g/kg se manteve após a secagem da planta. Os principais sinais clínicos foram anorexia, apatia, dispneia, arritmia e taquicardia em evolução clínica que variou de 16 às 20h. Notou-se em uma fase terminal hiperaguda, com evolução de 13 a 20 min., relutância ao movimento, micção frequente, jugular ingurgitada, pulso venoso evidente, tremor muscular, decúbito esternal e decúbito lateral e morte. Na necropsia os principais achados foram ingurgitamento de grandes veias, das aurículas do coração e edema pulmonar. Microscopicamente a principal alteração ocorreu no rim e caracterizou-se por degeneração hidrópico-vacuolar no citoplasma de epitélio de túbulos contorcidos distais. Conclui-se que N. stannea na fase de brotação é tóxica para ovinos e que a intoxicação por esta planta deve ser incluída no diagnóstico diferencial das doenças com curso clínico hiperagudo ou morte súbita em ovinos em regiões onde a planta existe.(AU)

Niedenzuella stannea a sodium monofluoroacetate-containing plant cause sudden death in cattle in southern Mato Grosso State. This investigation describes the toxicity and clinical and pathological findings of experimental poisoning by N. stannea in sheep. Fruits, mature leaves and young leaves of the plant collected in properties near the margins of the Araguaia river basins with history of sudden death in cattle were used in the experiment. No clinical signs were observed in sheep ingesting doses between 10 and 40g/kg of mature leaves and 10g/kg of fruits. The animals had shown clinical signs when received young leaves of the plant orally in a single dose of 5, 10, 20g/kg, and death occurred in sheep receiving 30g/kg. The plant at the dose of 30g/kg of fresh leaves maintained its toxicity after being dried. The main clinical signs observed were anorexia, lethargy, dyspnea, tachycardia, and arrhythmia with a clinical course ranging 16-20 hours after the onset of clinical signs. In an hyperacute terminal phase the animals showed reluctance to move, frequent urination, engorged jugular, evident venous pulse, muscle tremor, sternal recumbence, lateral decubitus, and death. At necropsy engorgement of the atrium and large veins of the heart, and pulmonary edema were observed. Microscopically, the kidney had hydropic-vacuolar degeneration in the cytoplasm of the epithelial cells of the distal convoluted tubules. It is concluded that young leaves of N. stannea can cause intoxication in sheep and should be considered in the differential diagnosis of acute diseases or sudden death in sheep in regions where the plant exist.(AU)

Intoxicação experimental por Niedenzuella stannea (Malpighiaceae) em ovinos / Experimental poisoning by Niedenzuella stannea (Malpighiaceae) in sheep

Niedenzuella stannea é uma planta que contém monofluoracetato de sódio e é incriminada como causa de morte súbita em bovinos na Região Sul do Estado de Mato Grosso. Este estudo descreve a toxidez e achados clínicos e patológicos da intoxicação experimental por N. stannea em ovinos. Foram utilizados no experimento, frutos, folhas maduras e folhas jovens de N. stannea coletadas em propriedades as margens de afluentes das bacias hidrográficas do Rio Araguaia onde havia histórico de morte súbita em bovinos. Folhas maduras em doses entre 10 e 40g/kg e frutos na dose de 10 g/kg não causaram alterações clínicas. Alterações clínicas foram observadas em ovinos que receberam a partir de 5g/kg de folhas jovens em dose única e a morte ocorreu nos que receberam a partir de 30g/kg. A toxicidade na dose de 30g/kg se manteve após a secagem da planta. Os principais sinais clínicos foram anorexia, apatia, dispneia, arritmia e taquicardia em evolução clínica que variou de 16 às 20h. Notou-se em uma fase terminal hiperaguda, com evolução de 13 a 20 min., relutância ao movimento, micção frequente, jugular ingurgitada, pulso venoso evidente, tremor muscular, decúbito esternal e decúbito lateral e morte. Na necropsia os principais achados foram ingurgitamento de grandes veias, das aurículas do coração e edema pulmonar. Microscopicamente a principal alteração ocorreu no rim e caracterizou-se por degeneração hidrópico-vacuolar no citoplasma de epitélio de túbulos contorcidos distais. Conclui-se que N. stannea na fase de brotação é tóxica para ovinos e que a intoxicação por esta planta deve ser incluída no diagnóstico diferencial das doenças com curso clínico hiperagudo ou morte súbita em ovinos em regiões onde a planta existe.(AU)

Niedenzuella stannea a sodium monofluoroacetate-containing plant cause sudden death in cattle in southern Mato Grosso State. This investigation describes the toxicity and clinical and pathological findings of experimental poisoning by N. stannea in sheep. Fruits, mature leaves and young leaves of the plant collected in properties near the margins of the Araguaia river basins with history of sudden death in cattle were used in the experiment. No clinical signs were observed in sheep ingesting doses between 10 and 40g/kg of mature leaves and 10g/kg of fruits. The animals had shown clinical signs when received young leaves of the plant orally in a single dose of 5, 10, 20g/kg, and death occurred in sheep receiving 30g/kg. The plant at the dose of 30g/kg of fresh leaves maintained its toxicity after being dried. The main clinical signs observed were anorexia, lethargy, dyspnea, tachycardia, and arrhythmia with a clinical course ranging 16-20 hours after the onset of clinical signs. In an hyperacute terminal phase the animals showed reluctance to move, frequent urination, engorged jugular, evident venous pulse, muscle tremor, sternal recumbence, lateral decubitus, and death. At necropsy engorgement of the atrium and large veins of the heart, and pulmonary edema were observed. Microscopically, the kidney had hydropic-vacuolar degeneration in the cytoplasm of the epithelial cells of the distal convoluted tubules. It is concluded that young leaves of N. stannea can cause intoxication in sheep and should be considered in the differential diagnosis of acute diseases or sudden death in sheep in regions where the plant exist.(AU)

Normal mesenteric lymph ameliorates lipopolysaccharide challenge-induced spleen injury

This study was conducted to investigate the effect of normal mesenteric lymph (NML) from mice on the spleen injury induced by lipopolysaccharide (LPS) challenge. Mice in the LPS and LPS+NML groups received an intraperitoneal injection of LPS (35 mg/kg) and kept for 6 h.. The mice in the LPS+NML group received NML treatment at 1 h after LPS injection. Afterward, the splenic morphology, the levels of lipopolysaccharide-binding protein (LBP), cluster of differentiation 14 (CD14), phosphorylation mitogen-activated protein kinases (MAPKs), and inflammatory mediators in splenic tissue were investigated.RESULTS:LPS injection induced spleen injury, increased the levels of LBP, CD14, tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin 6 (IL-6), and interferon γ (IFN-γ), and decreased the IL-4 content in the spleen. By contrast, NML treatment reversed these changes. Meanwhile, the LPS challenge decreased the phosphorylation levels of p38 MAPK, extracellular regulated protein kinases 1/2, and c-Jun N-terminal kinase (JNK). Moreover, the phosphorylation levels of p38 MAPK and JNK were further decreased by the NML administration. rRdThe normal mesenteric lymph treatment alleviated lipopolysaccharide induced spleen injury by attenuating LPS sensitization and production of TNF-α, IL-6, and IFN-γ.(AU)

Regulation of ovarian function: structural characterization and role of anti-müllerian hormone (AMH) / Regulação da função ovariana: caracterização estrutural e papel do hormônio anti-mülleriano (AMH)

Background: The anti-müllerian hormone (AMH) is a member of the transforming growth factor (TGF-) superfamily, which exerts important functions on local regulation of folliculogenesis. Although in vivo and in vitro studies suggest that AMH affects the primordial follicle assembly and activation, as well as the responsiveness of growing follicles to folliclestimulating hormone (FSH), the physiological mechanisms involved in these actions remain to be fully elucidated. Given the relevance of AMH in the folliculogenesis, this review aimed to describe the structural features, expression and the main biological effects of AMH on the follicular development. Review: Originally identified as a testicular product, AMH is responsible for regression of the Müllerian ducts during sexual differentiation of male embryos. In females, AMH is produced almost exclusively by granulosa cells of ovarian growing follicles, whose serum levels are positively related to the number of ovarian follicles, making AMH an excellent clinic marker of ovarian reserve. Along this work, it was shown aspects related to the structural characterization of AMH and its specific type II receptor (AMHRII). AMH is a glycoprotein dimer linked by disulfide bonds. The mature protein comprises two unequal domains: a long N-terminal domain (110-kDa) and a short C-terminal domain (25-kDa), responsible for the biological act

A foliculogênese é um evento complexo que envolve o recrutamento do pool de folículos primordiais, seguido por uma fase de crescimento e diferenciação. É sabido que para a sua regulação são requeridos vários fatores parácrinos e autócrinos, especialmente fatores de crescimento produzidos pelas células da granulosa. Dentre esses fatores, destaca-se o hormônio anti-mülleriano (AMH), uma glicoproteína membro da superfamília de fatores de crescimento transformantes (TGF-). Inicialmente o AMH foi estudado por seu papel regulatório no processo de diferenciação sexual masculina. [...]

AÇÃO DA MIRICETINA NA MATURAÇÃO IN VITRO DE OÓCITOS BOVINOS

Nos sistemas in vitro de produção de embriões (PIVE), a maturação oocitária (MIV) é um dos passos limitantes, inclusive devido à agressão de EROs produzidas no sistema. A miricetina é um dos flavonoides naturais, conhecida por seu potencial antioxidante, que pode proporcionar avanços na PIVE, sendo suplementada no meio de MIV. Com o objetivo de testar os efeitos da miricetina sobre a MIV de bovinos, oócitos foram maturados por 24 h na presença (1, 5 e 10 M) ou na ausência (grupo controle) de miricetina. Os oócitos foram corados com Hoechst e visualizados em microscópio de fluorescência para avaliação nuclear. A percentagem de maturação nuclear não diferiu entre os grupos controle (64,5%), e tratamentos 1 M (66,9%) e 5 M (70.8%), porém o tratamento com 10 M (42,7%) mostrou-se desfavorável para os oócitos. Quanto à avaliação do desenvolvimento embrionário, os oócitos foram fertilizados e cultivados in vitro, sendo as taxas de desenvolvimento embrionário determinadas no sétimo dia de cultivo. Na fase de produção de embriões foi-se testado apenas o tratamento controle e o 1 M de miricetina, onde não houve variação significativa (P < 0,05) nas as taxas de desenvolvimento embrionário, entre o grupo controle (47,2%) e o tratamento 1 M (33,3%). Os embriões produzidos foram corados pela técnica do TUNEL, a fim de avaliar sinais de apoptose celular, revelando que, o grupo tratamento 1 M apresenta menor taxa de blastômeros apoptóticos (27%), quando comparados ao grupo controle (41,2%) (P < 0,05). Conclui-se que a suplementação da maturação in vitro com antioxidante miricetina em dose de 10 M de miricetina interfere na taxa de maturação oocitária, já quanto a produção embrionária, o uso de 1 M de miricetina não interfere a taxa de produção de blastocistos e diminui o número de blastômeros apoptóticos.

In the in vitro embryo production systems (PIVE), culture maturation (IVM) is one of the limiting steps, specially due to the action of EROs produced in the system. Myricetin is one of the natural flavonoids, known for its antioxidant potential, which may improve the PIVE, being supplemented in the medium of IVM. In order to test the effects of myricetin on bovine IVM, oocytes were matured for 24 h in the presence (1, 5 and 10 M) or in the absence (control group) of myricetin. The oocytes were stained with Hoechst and visualized under a fluorescence microscope for nuclear evaluation. The percentage of nuclear maturation did not differ between the control group (64.5%), and treatments 1 M (66.9%) and 5 M (70.8%), but treatment with 10 M (42.7%) was damaging for oocytes. Regarding the evaluation of the embryonic development, the oocytes were fertilized and cultured in vitro, being the embryonic development rates determined after 7 days of culture. In the embryo production phase, only myricetin 1 M was used. Relative to embryonic development rates, there was not difference (P > 0.05) between control group (47.2%) and treatment 1 M (33.3%). The embryos were stained by the TUNEL technique, in order to evaluate cell apoptosis signs, revealing that the myricetin 1 M treatment resulted in a lower rate of apoptotic blastomers (27%) when compared to the control group (41.2%) (P < 0.05). It was concluded that the IVM supplementation with 10 M myricetin interferes in oocyte maturation rate, however, 1 M myricetin does not interfere in the rate of blastocyst production and decreases the number of apoptotic blastomers.

ESTUDO DAS ALTERAÇÕES HISTOPATOLÓGICAS RENAIS EM CÃES COM CINOMOSE

O presente estudo teve como objetivo analisar as alterações glomerulares e tubulares por meio da microscopia de luz, imunofluorescência e microscopia eletrônica em cães com cinomose em fase terminal. Para tanto foram utilizadas neste estudo grupo controle (GC) composto por 10 animais clinicamente saudáveis e sem quaisquer manifestações ou sinais de doença, e com exames negativos para Ehrlichia sp., A. plattys, Babesia sp. e 13 animais com diagnóstico de cinomose acompanhado de sinais neurológicos compatíveis com a doença. A avaliação do tecido renal foi realizada por tru-cut logo após a realização da ováriohisterectomia, onde os mesmos foram avaliados por microscopia de luz, imunofluorescência e microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados mostraram que cães com cinomose apresentaram anemina, hipergamaglobulinemia e proteinúria. Lesões glomerulares e tubulares foram confirmadas pela microscopia de luz em 84,6% destes animais. Ademais a associação desses achados ao depósito de diferentes classes de imunoglobulinas destacando IgM em 92,3%, depósito de fibrinogênio em 69,2% na imunofluorescência renal, e a presença de depósitos eletrodensos sub-endoteliais e mesangiais confirmam a existência de alterações renais relacionados a cinomose em estágio terminal.

This study aimed to analyze glomerular and tubular changes by light microscopy, immunofluorescence and electron microscopy in dogs with distemper in the terminal stage. Were used in this study the control group (CG) consisted of 10 clinically healthy animals and without any clinical signs of illness, and negative for Ehrlichia sp., A. plattys, Babesia sp. and 13 diagnosed with distemper accompanied by neurological signs compatible with the disease. Renal biopsy was performed by trucut needele, after the ovariohysterectomy. Renal samples were evaluated by light microscopy, immunofluorescence and transmission electron microscopy. The results showed that dogs with distemper presented anemina, hypergammaglobulinemia and proteinuria; glomerular and tubular lesions were confirmed by light microscopy in 84.6% of these animals. Furthermore the association of these findings to deposit different classes of immunoglobulins, specially IgM (92.3%) andfibrinogen (69.2%),in kidney immunofluorescence, associatedwiththe presence of electronsubendothelial and mesangial deposits confirming the existence of renal alterations related withdistemper in the terminal stage.

Pharmacological and partial biochemical characterization of Bmaj-9 isolated from Bothrops marajoensis snake venom

Bmaj-9, a basic PLA2 (13679.33 Da), was isolated from Bothrops marajoensis snake venom through only one chromatographic step in reversed phase HPLC on »-Bondapak C-18 column. The amino acid composition showed that Bmaj-9 had a high content of Lys, His, and Arg, typical of a basic PLA2. The sequence of Bmaj-9 contains 124 amino acid residues with a pI value of 8.55, such as DLWQWGQMIL KETGKLPFSY YTAYGCYCGW GGRGGKPKAD TDRCCFVHDC, revealing a high homology with Asp49 PLA2 from other snake venoms. It also exhibited a pronounced phospholipase A2 activity when compared with crude venom. In chick biventer cervicis preparations, the time for 50 percent and 100 percent neuromuscular paralysis was respectively (in minutes): 110 ± 10 (1 µg/mL); 40 ± 6 and 90 ± 2 (5 µg/mL); 30 ± 3 and 70 ± 5 (10 µg/mL); 42 ± 1 and 60 ± 2 (20 µg/mL), with no effect on the contractures elicited by either exogenous ACh (110 µM) or KCl (20 mM). Bmaj-9 (10 µg/mL) neither interfered with the muscular response to direct electrical stimulation in curarized preparations nor significantly altered the release of CK at 0, 15, 30 and 60 minutes incubations (27.4 ± 5, 74.2 ± 8, 161.0 ± 21 and 353.0 ± 47, respectively). The histological analysis showed that, even causing blockade at the maximum dosage (5 µg/mL), the toxin does not induce significant morphological alterations such as necrosis or infiltration of inflammatory cells. These results identified Bmaj-9 as a new member of the basic Asp49 PLA2 family able to interact with the motor nerve terminal membrane, thereby inducing a presynaptic neuromuscular blockade.(AU)

Potencial envolvimento da adiponectina e seus receptores na modulação da esteroidogênese em corpo lúteo de cadelas ao longo do diestro / Potential involvement of adinopectin and its receptors in the modulation of steroidogenesis in corpus luteum of bitches during diestrus

No ciclo estral de cadelas a fase luteínica, denominada diestro, compreende um período que varia de 60 a 100 dias em animais não-prenhes, caracterizado pela elevação plasmática de progesterona nos primeiros 20 dias pós ovulação (p.o). A adiponectina é a mais abundante proteína secretada pelo tecido adiposo, porém sua concentração plasmática diminui significativamente em alterações metabólicas como resistência insulínica e Diabetes mellitus tipo2, alterações descritas como relacionadas em algumas cadelas com o período de diestro. O objetivo do estudo foi determinar a expressão e imunolocalização do sistema adiponectina (adiponectina e seus receptores, adipoR1 e adipoR2) no corpo lúteo de cadelas ao longo do diestro, correlacionando-o ao perfil hormonal de 17β-estradiol e progesterona, assim como à expressão de um dos genes alvo do sistema, o PPAR-γ. Para realização do estudo foram coletados corpos lúteos de 28 cadelas durante ovariosalpingohisterectomia de eleição nos dias 10, 20, 30, 40, 50, 60 e 70 pós ovulação (o dia zero da ovulação foi considerado aquele no qual a concentração plasmática de progesterona atingiu 5ng/mL). Os corpos lúteos foram avaliados por imunohistoquímica para adiponectina e seus receptores e a expressão do RNAm do PPAR-γ por PCR em tempo real. A análise estatística da avaliação gênica foi realizada com o teste ANOVA, seguido por comparação múltipla Newman-Keuls. O sinal da adiponectina apresentou-se mais intenso até os primeiros 20 dias p.o, momento de regência da progesterona; houve queda gradativa após este período, coincidindo com a ascensão do 17β-estradiol, cujo pico foi notado próximo do dia 40 p.o. A queda marcante da adiponectina ocorreu após 50 dias p.o. O sinal do adipoR1 mostrou-se bem evidente até os 40 dias p.o e o do adipoR2 até os 50 dias p. o, decaindo posteriormente. Foi observada maior expressão do gene PPAR-γ aos 10, 30 e 70 dias p.o. Estes resultados mostram que a expressão protéica da adiponectina e de seus receptores se altera ao longo do diestro e que estas alterações podem estar relacionados às alterações hormonais e expressão do PPAR- γ, participando do mecanismo fisiológico de desenvolvimento, manutenção, atividade e regressão luteínica em cadelas.(AU)

In the estrous cycle of bitches, the luteal phase or diestrus includes a period ranging from 60 to 100 days in non-pregnant animals, characterized by elevated serum progesterone during the first 20 days post-ovulation (p.o). Adiponectin is the most abundant protein secreted by adipose tissue, but plasma concentration decreases significantly in metabolic disorders like insulin resistance and diabetes mellitus type 2, described as related changes in some bitches in diestrus. The aim of this study was to determine the expression and immunolocalization of the adiponectin system (adiponectin, and adipoR1 adipoR2) in the corpus luteum during diestrus, and correlate it to hormonal profile of 17β-estradiol and progesterone, as well as the expression of a gene target of the system, the PPAR-γ. For the study, corpora lutea were collected from 28 dogs during ovariosalpingohysterectomy on days 10, 20, 30, 40, 50, 60 and 70 post ovulation (day zero of ovulation was considered the day when the plasma progesterone concentration reached 5ng/mL). The corpora lutea were evaluated by immunohistochemistry for adiponectin, adipoR1 and adipoR2 and mRNA expression of PPAR-γ by real-time PCR. Statistical analysis of gene expression was performed with ANOVA followed by Newman-Keuls multiple comparisons. Adiponectin positive signal was stronger during the first 20 days p.o, time of the regency of progesterone; there was a gradual adiponectin and progesterone decline after this period, coinciding with the rise of 17β-estradiol, whose peak was near the 40 days p.o. The markedly adiponectin decrease occurred after 50 days p.o. The signal of adipoR1 was markedly evident at 40 days p.o and that of adipoR2 up to 50 days p.o, declining afterwards. We observed higher expression of PPAR-γ gene at 10, 30 and 70 days p.o. These results show that adiponectin and its receptors protein expression is altered during the diestrus and that these changes may be related to hormonal changes and expression of PPAR-γ, participating in the physiological mechanism of development, maintenance, activity and luteal regression in bitches.(AU)

Caracterização molecular e análise filogenética da cepa AmRio1 de Anaplasma marginale em bezerro e carrapatos experimentalmente infectados.

A anaplasmose bovina, causada pela rickettsia intraeritrocítica Anaplasma marginale (Rickettsiales: Anaplasmataceae), é uma doença economicamente importante de bovinos que é endêmica em regiões tropicais e subtropicais do mundo. As Proteínas Principais de Superfície (MSPs) têm sido muito utilizadas em estudos envolvendo a rickettsia A. marginale, sendo MSP1a uma das mais estudadas, pois esta é uma adesina de eritrócitos bovinos e células de carrapato, possuindo assim um papel importante no fenótipo de transmissão do agente. Ao mesmo tempo, é considerada um marcador estável para cepas de A. marginale, uma vez que possui uma região C-terminal altamente conservada e uma região N- terminal, altamente variável, porém, constante para cepas. Acredita-se que esta proteína pode sofrer pressão seletiva pois possui um epítopo sensível à neutralização em sua região variável. Assim, em alterações casuais da estrutura das sequências repetidas devido à mutação, cepas bem adaptadas poderiam prevalecer no ambiente. Desta forma, o objetivo deste estudo foi avaliar a diversidade do gene msp1 de A. marginale na infecção aguda e crônica em um bezerro imunocompetente experimentalmente infectado e em carrapatos. No estudo, foi utilizado um bezerro, que foi infectado experimentalmente com a cepa AmRio 1 de A. marginale por via endovenosa. Este bezerro foi acompanhado através da observação de sinais clínicos, temperatura retal, esfregaços sanguíneos e hematócrito do dia 2 após infecção experimental até o dia 28 após infecção. O bovino posteriormente foi infestado com 1g de larvas de carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus. O sangue do bezerro foi colhido do dia 2 ao dia 28 pós infecção. Os carrapatos foram recuperados na fase de partenógina e foram submetidos à dissecção para remoção de intestino e glândula salivar, e também foi colhida saliva de uma parte destes carrapatos. As amostras foram submetidas a PCR, possuindo como gene alvo msp1 . O produto desta reação foi enviado para sequenciamento em ambas as direções. Após a inoculação da cepa AmRio 1 de A. marginale, o bovino apresentou sinais clínicos e alterações em hematócrito e temperatura, havendo necessidade de tratamento de suporte para a recuperação do animal. Isto demonstra a patogenicidade da cepa. Todas as amostras do bezerro e dos carrapatos foram positivas na PCR. As sequências revelaram uma estabilidade nas sequências repetidas de MSP1a, tanto na infecção aguda quanto na crônica no bezerro e em todos os órgãos e salivas de carrapato. A positividade das salivas de carrapato indica que a cepa AmRio 1 de A. marginale é transmitida biologicamente por R. (Boophilus) microplus. Além disto, nos órgãos de carrapato haviam grandes quantidades de DNA de A. marginale, indicando a replicação do agente nos órgãos de R. (Boophilus) microplus.

Bovine anaplasmosis, caused by intraerythrocytic rickettsia Anaplasma marginale (Rickettsiales: Anaplasmataceae), is an economically important disease of cattle which is endemic in tropical and subtropical regions of the world. Major surface proteins (MSP) have been widely used in studies involving A. marginale rickettsia, being MSP1a one of the most studied because it is an adhesin for bovine erythrocytes and tick cells, thus having an important role in the transmission phenotype agent. At the same time, it is regarded as a stable marker for strains of A. marginale, since it has a highly conserved C-terminal region and a highly variable N-terminal region, but constant for strains. It is believed that this protein can undergo selective pressure because it has a neutralization-sensitive epitope in its variable region. Therefore, in random changes in the structure of tandem repeats due to mutation, well adapted strains could prevail in the environment. Thus, the aim of this study was to evaluate the diversity of msp1 gene of A. marginale in acute and chronic infection in one experimentally infected immunocompetent calf and in ticks. In the study, a calf, which was experimentally infected intravenously with AmRio 1 strain of A. marginale, was used. This calf was monitored by observing clinical signs, rectal temperature, blood smears and hematocrit of day-2 after experimental infection until the day 28 after infection. The bovine was subsequently infested with 1g of Rhipicephalus (Boophilus) microplus larvae. The calf's blood was collected from day 2 to day 28 after infection. Ticks were recovered parthenogenetic phase and underwent dissection of the intestines and salivary glands, and also saliva was collected from a number of these ticks. The samples were subjected to PCR, with msp1 as target gene. The product of this reaction was sent to sequencing in both directions. After inoculation of the strain AmRio 1 of A. marginale, the calf expressed clinical signs and changes in hematocrit and temperature, needing supportive treatment necessary for its recovery. This demonstrates the pathogenicity of the strain. All samples from the calf and ticks were positive in PCR. The sequences revealed a stability in tandem repeats of MSP1a, both in acute and chronic infection in the calf, and in all of the ticks' organs and saliva. The positivity of tick salivae indicates that the strain AmRio 1 A. marginale is biologically transmitted by R. (B.) microplus. In addition, ticks' organs had large quantities of DNA of A. marginale, indicating the agent's replication in organs of R. (B.) microplus.

IMPORTÂNCIA DA INTOXICAÇÃO ESPONTÂNEA POR Niedenzuella stannea (MALPIGHIACEAE) EM BOVINOS NO ESTADO DE MATO GROSSO E REPRODUÇÃO DO QUADRO CLÍNICO E LESIONAL DA INTOXICAÇÃO EM OVINOS

1 RESUMO IMPORTÂNCIA DA INTOXICAÇÃO ESPONTÂNEA POR Niedenzuella stannea (MALPIGHIACEAE) EM BOVINOS NO ESTADO DE MATO GROSSO E REPRODUÇÃO DO QUADRO CLÍNICO E LESIONAL DA INTOXICAÇÃO EM OVINOS O objetivo deste trabalho é relatar os aspectos epidemiológicos de uma enfermidade de caráter agudo, caracterizada por morte súbita associada ao exercício, que acomete bovinos na região de bacias hidrográficas do Rio Araguaia, especialmente no município de Torixoréu, sudeste do estado de Mato Grosso, Brasil, e também relatar os achados clínicos e patológicos da intoxicação experimental por Niedenzuella stannea em ovinos. Entre agosto e setembro de 2013, foram visitadas e inspecionadas as pastagens em 80 propriedades rurais do município, e em 65 aplicado um questionário epidemiológico. Uma planta identificada como Niedenzuella stannea (Malpighiaceae), é incriminada como causadora de morte súbita em bovinos gerando grandes prejuízos econômicos. Surtos ocorreram em diferentes meses do ano, variando de maio à outubro, sendo a maior parte concentrada durante o período de seca, especialmente nos meses de junho à agosto. N. stannea foi identificada em 41 propriedades, sendo presente próxima aos leitos de rios. Os métodos de controle da planta relatados como mais eficazes foram o arar da pastagem e roça manual seguida da aplicação de Tordon® (Picloran e 2,4D). Coletou-se N. stannea onde havia histórico de morte súbita em bovinos. Foram avaliados dois estágios vegetativos de Folhas: maduras, que eram fibrosas e com coloração verde escuro e em brotações que se apresentavam tenras e de coloração verde clara. Onze ovinos receberam folhas de N. stannea. Folhas adultas não causaram alterações clínicas em doses de 5-40g/kg. Alterações clínicas e patológicas foram observadas no grupo de animais que receberam brotações de N. stannea. Os sinais clínicos observados em ovinos que receberam dose única de 30g/kg foram anorexia, apatia, dispneia, arritmia e taquicardia em evolução clínica que variou de 16 a 20h. Notava-se uma fase terminal hiperaguda caracterizada por relutância ao movimento, micção frequente, jugular ingurgitada, pulso venoso evidente, tremor muscular, decúbito esternal e decúbito lateral e morte em evolução clínica média de 10min. Na necropsia os principais achados foram ingurgitamento de grandes veias e aurícula do coração e edema pulmonar. Microscopicamente observou-se degeneração hidrópico-vacuolar citoplasmática com cariopicnose nuclear no epitélio de túbulos contorcidos distais. Monofluoracetato de sódio foi caracterizado como princípio da N. stannea relacionado ao 2 quadro clínico. Neste estudo, os sinais de intoxicação foram precipitados pela movimentação em todos os ovinos, o que também é relatado nos casos de intoxicação espontânea principalmente nos manejos para as vacinações obrigatórias. Este fator coloca N. stannea no grupo de plantas que causam morte súbita devendo assim ser considerada como diagnóstico diferencial de quadros clínicos de evolução aguda nas regiões centrais do Brasil. Conclui-se que as mortes súbitas em bovinos em áreas da bacia hidrográfica do rio Araguaia se devem ao consumo de N. stannea.

The aim of this study was to investigate the importance of an acute disease that is characterized by sudden death associated with exercise, which affects cattle in the region of the Araguaia River, especially in the municipality of Torixoréu, in the southeastern region of the State of Mato Grosso, Brazil, and also report the clinical and pathological findings of experimental poisoning by Niedenzuella stannea in sheep. Between August and September 2013, 80 farms in the municipality were visited, and the pastures of these farms were inspected. Epidemiological questionnaires were completed in 65 farms. A plant identified as Niedenzuella stannea (Malpighiaceae) was attributed to the cause of sudden death in cattle causing major economic losses. Sudden death reports have occurred since 1970 when livestock was introduced in the region, and sudden death reports still occur to date. Outbreaks were reported to occur in different months of the year, ranging from May to October, mainly during the dry season between June and August. N. stannea was identified at 41 properties, and it was always found close to rivers. The most effective plant control methods included plowing the pastures and fields followed by manual application of Tordon® (Picloran and 2.4D). N. stannea was collected in areas with history of sudden death in cattle. We evaluated two growing stages of the plant: mature, which were fibrous and dark green color and young leaves which had tender and bright green. Leaves of N. stannea were administered to eleven sheep. Adult leaves caused no clinical changes in doses of 5-40g/kg. Clinical and pathological changes were only observed in the group of animals who received shoots of N. stannea. Clinical signs observed in sheep received a single dose of 30g/kg were anorexia, lethargy, dyspnea, tachycardia arrhythmia and clinical course varying from 16 to 20h. Was noted a hyperacute terminal phase characterized by reluctance to move, frequent urination engorged jugular, obvious venous pulse, muscle tremor, sternal recumbency and lateral recumbency and death in clinical evolution average of 10 minutes. At necropsy the main findings were engorgement of the large veins and atrium of the heart and pulmonary edema. Microscopically observed degeneration with nuclear picnosis in the epithelium of distal convoluted tubules. Sodium monofluoroacetate was characterized as a principle of N. stannea 4 related to the clinical picture. In this study, the signs of intoxication were precipitated by the movement in all sheep, which is also reported in cases of spontaneous poisoning mainly in the managements for obligatory vaccinations. This factor puts N. stannea the group of plants that cause sudden death and should therefore be considered in the differential diagnosis of clinical cases of acute evolution in the central regions of Brazil. It was concluded that the sudden deaths in cattle in areas of the basin of the Araguaia river are due to the consumption of N. stannea.

Estudo da morbidade e mortalidade em confinamento de bovinos para terminação e seus impactos econômicos

O confinamento de gado corte é uma atividade crescente no Brasil e é uma forma de oferecer um produto de melhor qualidade ao consumidor, aumentar a produtividade do rebanho, melhorar a taxa de retorno do capital investido e otimizar as áreas das propriedades. No entanto, quando ocorre a concentração de animais há maior probabilidade de transmissão de patógenos, além de outros fatores de risco pelos quais os bovinos passam durante essa fase terminal do ciclo de produção, como transporte, alimentação com inclusão de altos teores de concentrado, ressocialização com outros indivíduos, estresse térmico e excesso de poeira, que podem predispor a doenças. O presente estudo teve como objetivo avaliar as principais causas de morbidade e mortalidade de bovinos confinados. Foi realizado em um confinamento comercial, onde 15.269 animais foram avaliados diariamente durante seis meses por inspeção, e os animais que morriam eram realizadas necropsias. A morbidade e a mortalidade foi maior em bovinos com mais de noventa dias de confinamento. A morbidade observada foi de 2,43 %, 1,01%, 0,24%, 0,11%, 3,95%. 0,75% e 0,60% para doenças neurológicas, respiratórias, urinárias, comportamentais, locomotoras, oculares e outras doenças, respectivamente, e as taxas de mortalidade foram 0,55%, 0,39%, 0,12%, 0,22%, 0,007% e 0,22% para mortes causadas por doenças respiratórias, neurológicas, urinárias, fraturas e acidentes, outras causas e causas indeterminadas, respectivamente. As doenças foram responsáveis por um tempo médio maior de confinamento e menor ganho de peso médio diário, quando comparado animais doentes com animais saudáveis. Os animais que tiveram algum quadro de doença durante o confinamento tiveram maior custo de produção e margem liquida produtiva negativa, em relação aos animais saudáveis.

The beef cattle feedlot is an activity that is growing in Brazil and is a way to offer a better quality product to the consumer, increase herd productivity, improve the rate of return on invested capital and optimize areas of the properties. However, when there is the concentration of animals is most likely transmission of pathogens, and other risk factors by which the cattle pass through during this final phase of the production cycle, such as transportation, powered inclusion of high concentrate grades, rehabilitation with others, heat stress and excessive dust, which may predispose to disease. This study aimed to evaluate the main causes of morbidity and mortality of confined cattle. It was conducted in a commercial feedlot, where 15,269 animals were assessed daily for six months for inspection, and the animals that died were performed necropsies. Morbidity and mortality was higher for cattle aged over ninety days of confinement. The morbidity was observed 2,43 %, 1,01%, 0,24%, 0,11%, 3,95%. 0,75% and 0,60% for neurological diseases, respiratory, urinary, behavior, locomotion, ophtalmological and other diseases, respectively. Mortality rates were 0,55%, 0,39%, 0,12%, 0,22%, 0,007% and 0,22% for deaths from respiratory diseases, neurological, urinary, fractures and accidents, and other undetermined causes, respectively. The disease accounted for a higher average time of confinement and lower average daily gain weight when compared sick animals to healthy animals. The animals that had any illness in the feedlot above had higher production cost and production negative net margin, compared to healthy animals.

A novel antifungal protein from seeds of Sesbania virgata (Cav.) Pers. (Leguminosae-Faboideae) / Uma nova proteína antifúngica obtida de sementes de Sesbania virgata (Cav.) Pers. (Leguminosae-Faboideae)

A novel antifungal protein with a molecular mass around 50 kDa was purified from seeds of Sesbania virgata (Cav.) Pers. using ammonium sulfate fractionation followed by gel filtration on a Sephadex G-75 Superfine (Sigma) column and reverse-phase high performance liquid chromatography on a C8 column. The protein, designated FP1-A, with a novel N-terminal sequence AMVHSPGG(S)FS(P), showed growth inhibitory activity of filamentous fungi Aspergillus niger, Cladosporium cladosporioides, Colletotrichum gloeosporioides and Fusarium solani.(AU)

Uma nova proteína com atividade antifúngica, com massa molar de cerca de 50 kDa, foi purificada de sementes de Sesbania virgata (Cav.) Pers. utilizando precipitação com sulfato de amônia, filtração em gel em coluna de Sephadex G-75 Superfine (Sigma) e cromatografia líquida de alta eficiência em fase reversa (coluna C8). A proteína purificada foi designada FP1-A, com a sequência N-terminal AMVHSPGG(S)FS(P), apresentando atividade inibitória do crescimento dos fungos filamentosos Aspergillus niger, Cladosporium cladosporioides, Colletotrichum gloeosporioides e Fusarium solani.(AU)