Aeromonassp. in freshwater fish and antimicrobial resistance: emerging pathogen / Quantificação deAeromonassp. em peixes de água doce e resistência a antimicrobianos: patógeno emergente

ABSTRACT: The bacteria Aeromonassp. are naturally reported in aquatic ecosystems and possess pathogenic potential, being considered as emerging pathogens in humans and animals. They also cause considerable losses in fish farming and, through water, can contaminate numerous foods. This study quantified and analyzed the antimicrobial resistance profile of Aeromonassp. in fish. A total of 72 samples of two fish varieties (leather fish, Pseudoplatystomafasciatumx Leiariusmarmoratusand round fish, Colossomamacropomumx Piaractusmesopotamicusand Colossomamacropomumx Piaractusbrachypomus) were purchased from two types of sources (fresh and frozen) and three commercial establishments (supermarket, market, and fishmonger). The 55 isolated Aeromonascultures were evaluated for their antimicrobial resistance profile by the disc diffusion method. Upon quantification, the count of Aeromonassp. ranged from 4.22 to 6.00 Log CFU/g; ten different species, including A. eucrenophila, A. hydrophila, A. caviae, A. media, A. jandaei, A. veroniibv. sobria, A. trota, A. schubertii, A. veroniibv. veronii, and A. shigelloides, were identified. Among the 55 isolates, 64.45% showed resistance to Ampicillin-sulbactam, and 75% were sensitive to gentamicin and ciprofloxacin. It was concluded that 100% of the evaluated samples were contaminated by Aeromonassp., which may present a risk to consumer health since bacteria can be etiological agents of Foodborne Diseases. The antimicrobial resistance profile showed resistance to ampicillin and multi-resistance to different classes of antimicrobials, demonstrating problems with choosing an antimicrobial for treatment of any disease.

RESUMO: Aeromonas sp. são bactérias presentes naturalmente no ecossistema aquático e apresentam potencial patogênico, sendo considerados patógenos emergentes em humanos e animais. Ainda, causam perdas consideráveis em piscicultura e, através da água, podem também contaminar inúmeros alimentos. Diante disso o objetivo do trabalho foi quantificar e analisar o perfil de resistência aos antimicrobianos de bactérias do gênero Aeromonas sp. em peixes. Um total de 72 amostras foram adquiridas, sendo duas variedades de peixes (peixe de couro Pseudoplatystoma fasciatum x Leiarius marmoratus e os peixes redondos Colossoma macropomum x Piaractus mesopotamicus e Colossoma macropomum x Piaractus brachypomus), dois tipos (fresco e congelado) e de três estabelecimentos comerciais (supermercado, feira e peixaria). As 55 culturas isoladas de Aeromonas foram avaliadas quanto ao perfil de resistência aos antimicrobianos pelo método de difusão em disco. Os valores encontrados na quantificação de Aeromonas sp. variaram de 4,22 a 6,00 Log UFC/g, e foram identificadas dez espécies diferentes, sendo A. eucrenophila, A. hydrophila, A. caviae, A. media, A. jandaei, A. veronii bv. sobria, A. trota, A. schubertii, A. veronii bv. veronii e A. shigelloides. Entre os 55 isolados, 64,45% apresentaram resistência a Ampicilina-sulbactam, 75% foram sensíveis à gentamicina e ciprofloxacina. Concluiu-se que 100% das amostras avaliadas estavam contaminadas por Aeromonas sp. podendo apresentar risco à saúde do consumidor visto que estas podem ser agentes etiológicos de Doenças Transmitidas por Alimentos (DTAs). O perfil de resistência aos antimicrobianos comprovou a resistência a ampicilina e apresentou multirresistência a diferentes classes de antimicrobianos, demonstrando um problema relacionado à opção de antimicrobiano para tratamento no caso do desenvolvimento de alguma doença.

Enterotoxigenic methicillin resistant Staphylococcus aureus contamination in salted fish from Gwadar Balochistan

Abstract Staphylococcus aureus is an important foodborne pathogen associated to food intoxication and other multiple infections in human being. Its presence in salted food is a serious issue due to its salt tolerance potential. A study was conducted to analyze the presence of enterotoxins producing drug resistance S. aureus in salted sea fish from Gwadar. Freshly persevered samples (n=50) of salted fish were subjected to analyze the presence of S. aureus using 16S rRNA and Nuc genes primers. The isolates were then evaluated for drug resistance and enterotoxins producing potential using specific primers for MecA (methicillin resistance gene), (SEA) staphylococcal enterotoxin A and (SEB) staphylococcal enterotoxin B genes. Total 13/50 (26%) of the samples were found positive for the presence of S. aureus, preliminary confirmed with biochemical profiling and finally with the help of target genes presence. The isolates were found showing 100% resistant to methicillin, which were molecularly confirmed by the presence of MecA gene present in genome. The isolates 5/13 (38%) were positive for SEA and 3/13 (23%) for SEB genes, whereas 2/13 (15%) were confirmed having both SEA and SEB genes in its genome. It was also confirmed that all the isolates were capable to form biofilm over the glass surfaces. It was concluded that the study confirmed the presence of enterotoxigenic methicillin resistance Staphylococcus aurous (MRSA) in salted fish product, that poses gross food safety concern. Preventive and control measures are necessary to handle this serious food safety concern.

Resumo Staphylococcus aureus é um importante patógeno de origem alimentar associado à intoxicação alimentar e outras infecções múltiplas em seres humanos. Sua presença em alimentos salgados é um problema sério devido ao seu potencial de tolerância ao sal. Um estudo foi realizado para analisar a presença de enterotoxinas produtoras de resistência a drogas S. aureus em peixes salgados do mar de Gwadar. Amostras recém-perseveradas (n = 50) de peixes salgados foram submetidas à análise da presença de S. aureus usando os primers dos genes 16S rRNA e Nuc. Os isolados foram então avaliados quanto à resistência a drogas e potencial de produção de enterotoxinas usando primers específicos para os genes MecA (gene de resistência à meticilina), (SEA) enterotoxina A estafilocócica e (SEB) enterotoxina B estafilocócica genes. Um total de 13/50 (26%) das amostras foi considerado positivas para a presença de S. aureus, confirmadas preliminarmente com perfis bioquímicos e finalmente com a ajuda da presença de genes-alvo. Os isolados foram encontrados com 100% de resistência à meticilina, os quais foram confirmados molecularmente pela presença do gene MecA no genoma. Os isolados 5/13 (38%) foram positivos para SEA e 3/13 (23%) para genes SEB, enquanto 2/13 (15%) foram confirmados tendo os genes SEA e SEB em seu genoma. Também foi verificado que todos os isolados foram capazes de formar biofilme sobre as superfícies de vidro. Concluiu-se que o estudo confirmou a presença de Staphylococcus aurous resistente à meticilina enterotoxigênica (MRSA) em produtos de peixe salgado, o que representa uma grande preocupação para a segurança alimentar. Medidas preventivas e de controle são necessárias para lidar com essa grave preocupação com a segurança alimentar.

Phagocytotic activity and gene expression of leukocytes isolated from Astyanax lacustris / Atividade fagocítica e expressão gênica de leucócitos isolados de Astyanax lacustris

The constant intensification of aquaculture has considerable increased the stress levels of farmed fish and, consequently, the number and intensity of diseases outbreaks. Thus, studies on fish immune response, especially regarding the interaction of fish leukocytes with potential pathogens and xenobiotics are of great importance in order to develop new prophylactic and curative strategies. We isolated leukocytes from the head kidney of Astyanax lacustris­an important Neotropical fish species for aquaculture and a potential model for Neotropical aquaculture research­using a Percoll centrifugation protocol. The isolated leukocytes were incubated with lipopolysaccharide (LPS), and the expression of genes IL-1ß, IL-8, LysC, and LysG were measured. We assessed the phagocytotic activity of leukocytes using Congo red-dyed yeast, a novel and cost-effective protocol that has been developed in this study. The isolated leukocytes responded to LPS induction, exhibiting strong IL-1ß and IL-8 upregulation, two of the most important pro-inflammatory interleukins for vertebrates immune reponse. The optimal concentration of yeast for the phagocytic assay was 106 cells mL-1, resulting in acceptable phagocytic capacity (PC) but without excess of yeasts during the counting process, ensuring a high precision and accuracy of the method. To the best of our knowledge, the present study is the first to investigate the in vitro gene expression and phagocytic activity of leukocytes isolated from A. lacustris. Our findings will serve as a reference for future studies on the immunology and toxicology of Neotropical fish.

A constante intensificação da aquicultura tem aumentado consideravelmente os níveis de estresse dos animais cultivados e, consequentemente, o número e a intensidade dos surtos de doenças. Logo, estudos sobre a resposta imune dos peixes, especialmente relacionados com a interação dos leucócitos de peixes com potenciais patógenos e xenobióticos, são de grande importância para o desenvolvimento de novas estratégias profiláticas e curativas. No presente trabalho, nós obtivemos sucesso ao isolar leucócitos oriundos do rim cranial de Astyanax lacustris ­ uma importante espécie de peixe Neotropical para a aquicultura e um modelo em potencial para pesquisas em aquicultura Neotropical ­ usando um protocolo de centrifugação com Percoll. Os leucócitos isolados foram incubados com lipossacarídeo (LPS) e, a expressão dos genes IL-1ß, IL-8, LysC, e LysG foi avaliada. Ainda, um novo protocolo para avaliação da atividade fagocítica dos leucócitos utilizando leveduras coradas com Vermelho Congo foi estabelecido. Os leucócitos isolados responderam à indução com LPS, exibindo up regulation dos genes IL-1ß e IL-8, duas das interleucinas pró-inflamatórias mais importantes para a resposta imune de vertebrados. Além do mais, a concentração ótima de leveduras para a avaliação da fagocitose foi de 106 células mL-1, resultando em uma capacidade fagocítica (PC) aceitável, mas sem excesso de leveduras durante o processo de contagem, garantindo maior precisão e eficácia do método. Até o presente momento, o presente estudo é o primeiro a investigar a expressão gênica e atividade fagocítica de leucócitos isolados de A. lacustris através da abordagem in vitro. Ainda, nossos resultados servirão de referência para futuros estudos em imunologia e toxicologia de peixes Neotropicais.

Eustrongylides spp. (Nematoda: Eustrongylidae) in Polypterus endlicheri in central Rio Grande do Sul, Brazil / Eustrongylides spp. (Nematoda: Eustrongylidae) em Polypterus endlicheri na região central do Rio Grande do Sul, Brasil

The demand for ornamental fish has increased in recent years in Brazil, however, the aquatic environment of artificial breeders facilitates the invasion of pathogens, including parasitic zoonoses, which are a limiting factor for production causing economic losses in creations. Knowledge of the distribution of agents causing parasitic diseases is important so that we can intervene in breeders, therefore, the objective of the present work is to report the occurrence of infection by Eustrongylides sp. (Nematoda: Eustrongylidae) in Polypterus endlicherii (Polypteriformes: Polypteridae) in central Rio Grande do Sul, Brazil. The nematode was identified after being released a cyst in the scales, of a fish of the species P. endlicherii. It can be concluded that this is the first record of the occurrence of Eustrongylides sp. larvae in fish in Rio Grande do Sul, showing that the parasite is present in the central region of the state. Therefore, further studies should be carried out in order to verify the presence of the parasites in fish intended for human consumption. It should also be noted the need to be more careful when feeding fish with oligochaetes, especially those intended for human consumption.

A criação de peixes para ornamentação teve sua demanda aumentada nos últimos anos no Brasil, no entanto, o ambiente aquático dos criatórios artificiais facilita a invasão por agentes patogênicos, incluindo zoonoses parasitárias, que são um fator limitante para produção causando perdas econômicas nas criações. O conhecimento da distribuição de agentes causadores de enfermidades parasitárias é importante para que se possa intervir nos criatórios, portanto, o objetivo do presente trabalho é relatar a ocorrência da infecção por larva de Eustrongylides sp. (Nematoda: Eustrongylidae) em Polypterus endlicherii (Polypteriformes: Polypteridae) na região central do Rio Grande do Sul, Brasil. O nematódeo foi identificado após ser liberado de um cisto nas escamas, de um peixe da espécie P. endlicherii. Pode-se concluir que este é o primeiro registro da ocorrência de larvas de Eustrongylides sp. em peixes no Rio Grande do Sul, evidenciando que o parasito está presente na região central do estado. Portanto, mais estudos devem ser realizados a fim de verificar a presença dos parasitos em peixes destinados ao consumo humano. Salienta-se ainda, a necessidade de se ter maior cuidado ao alimentar peixes com oligoquetas, principalmente os destinados para alimentação humana.

Enterotoxigenic methicillin resistant Staphylococcus aureus contamination in salted fish from Gwadar Balochistan / Contaminação de Staphylococcus aureus resistente à meticilina enterotoxigênica em peixes salgados de Gwadar Balochistan

Staphylococcus aureus is an important foodborne pathogen associated to food intoxication and other multiple infections in human being. Its presence in salted food is a serious issue due to its salt tolerance potential. A study was conducted to analyze the presence of enterotoxins producing drug resistance S. aureus in salted sea fish from Gwadar. Freshly persevered samples (n=50) of salted fish were subjected to analyze the presence of S. aureus using 16S rRNA and Nuc genes primers. The isolates were then evaluated for drug resistance and enterotoxins producing potential using specific primers for MecA (methicillin resistance gene), (SEA) staphylococcal enterotoxin A and (SEB) staphylococcal enterotoxin B genes. Total 13/50 (26%) of the samples were found positive for the presence of S. aureus, preliminary confirmed with biochemical profiling and finally with the help of target genes presence. The isolates were found showing 100% resistant to methicillin, which were molecularly confirmed by the presence of MecA gene present in genome. The isolates 5/13 (38%) were positive for SEA and 3/13 (23%) for SEB genes, whereas 2/13 (15%) were confirmed having both SEA and SEB genes in its genome. It was also confirmed that all the isolates were capable to form biofilm over the glass surfaces. It was concluded that the study confirmed the presence of enterotoxigenic methicillin resistance Staphylococcus aurous (MRSA) in salted fish product, that poses gross food safety concern. Preventive and control measures are necessary to handle this serious food safety concern.

Staphylococcus aureus é um importante patógeno de origem alimentar associado à intoxicação alimentar e outras infecções múltiplas em seres humanos. Sua presença em alimentos salgados é um problema sério devido ao seu potencial de tolerância ao sal. Um estudo foi realizado para analisar a presença de enterotoxinas produtoras de resistência a drogas S. aureus em peixes salgados do mar de Gwadar. Amostras recém-perseveradas (n = 50) de peixes salgados foram submetidas à análise da presença de S. aureus usando os primers dos genes 16S rRNA e Nuc. Os isolados foram então avaliados quanto à resistência a drogas e potencial de produção de enterotoxinas usando primers específicos para os genes MecA (gene de resistência à meticilina), (SEA) enterotoxina A estafilocócica e (SEB) enterotoxina B estafilocócica genes. Um total de 13/50 (26%) das amostras foi considerado positivas para a presença de S. aureus, confirmadas preliminarmente com perfis bioquímicos e finalmente com a ajuda da presença de genes-alvo. Os isolados foram encontrados com 100% de resistência à meticilina, os quais foram confirmados molecularmente pela presença do gene MecA no genoma. Os isolados 5/13 (38%) foram positivos para SEA e 3/13 (23%) para genes SEB, enquanto 2/13 (15%) foram confirmados tendo os genes SEA e SEB em seu genoma. Também foi verificado que todos os isolados foram capazes de formar biofilme sobre as superfícies de vidro. Concluiu-se que o estudo confirmou a presença de Staphylococcus aurous resistente à meticilina enterotoxigênica (MRSA) em produtos de peixe salgado, o que representa uma grande preocupação para a segurança alimentar. Medidas preventivas e de controle são necessárias para lidar com essa grave preocupação com a segurança alimentar.

Enterotoxigenic methicillin resistant Staphylococcus aureus contamination in salted fish from Gwadar Balochistan / Contaminação de Staphylococcus aureus resistente à meticilina enterotoxigênica em peixes salgados de Gwadar Balochistan

Staphylococcus aureus is an important foodborne pathogen associated to food intoxication and other multiple infections in human being. Its presence in salted food is a serious issue due to its salt tolerance potential. A study was conducted to analyze the presence of enterotoxins producing drug resistance S. aureus in salted sea fish from Gwadar. Freshly persevered samples (n=50) of salted fish were subjected to analyze the presence of S. aureus using 16S rRNA and Nuc genes primers. The isolates were then evaluated for drug resistance and enterotoxins producing potential using specific primers for MecA (methicillin resistance gene), (SEA) staphylococcal enterotoxin A and (SEB) staphylococcal enterotoxin B genes. Total 13/50 (26%) of the samples were found positive for the presence of S. aureus, preliminary confirmed with biochemical profiling and finally with the help of target genes presence. The isolates were found showing 100% resistant to methicillin, which were molecularly confirmed by the presence of MecA gene present in genome. The isolates 5/13 (38%) were positive for SEA and 3/13 (23%) for SEB genes, whereas 2/13 (15%) were confirmed having both SEA and SEB genes in its genome. It was also confirmed that all the isolates were capable to form biofilm over the glass surfaces. It was concluded that the study confirmed the presence of enterotoxigenic methicillin resistance Staphylococcus aurous (MRSA) in salted fish product, that poses gross food safety concern. Preventive and control measures are necessary to handle this serious food safety concern.(AU)

Staphylococcus aureus é um importante patógeno de origem alimentar associado à intoxicação alimentar e outras infecções múltiplas em seres humanos. Sua presença em alimentos salgados é um problema sério devido ao seu potencial de tolerância ao sal. Um estudo foi realizado para analisar a presença de enterotoxinas produtoras de resistência a drogas S. aureus em peixes salgados do mar de Gwadar. Amostras recém-perseveradas (n = 50) de peixes salgados foram submetidas à análise da presença de S. aureus usando os primers dos genes 16S rRNA e Nuc. Os isolados foram então avaliados quanto à resistência a drogas e potencial de produção de enterotoxinas usando primers específicos para os genes MecA (gene de resistência à meticilina), (SEA) enterotoxina A estafilocócica e (SEB) enterotoxina B estafilocócica genes. Um total de 13/50 (26%) das amostras foi considerado positivas para a presença de S. aureus, confirmadas preliminarmente com perfis bioquímicos e finalmente com a ajuda da presença de genes-alvo. Os isolados foram encontrados com 100% de resistência à meticilina, os quais foram confirmados molecularmente pela presença do gene MecA no genoma. Os isolados 5/13 (38%) foram positivos para SEA e 3/13 (23%) para genes SEB, enquanto 2/13 (15%) foram confirmados tendo os genes SEA e SEB em seu genoma. Também foi verificado que todos os isolados foram capazes de formar biofilme sobre as superfícies de vidro. Concluiu-se que o estudo confirmou a presença de Staphylococcus aurous resistente à meticilina enterotoxigênica (MRSA) em produtos de peixe salgado, o que representa uma grande preocupação para a segurança alimentar. Medidas preventivas e de controle são necessárias para lidar com essa grave preocupação com a segurança alimentar.(AU)

Impact of alien fishes on the distribution pattern of indigenous freshwater fishes of Punjab, Pakistan

Abstract Pakistan is the country with mega freshwater fish diversity of native and alien species. In the presence of enormous native fishes varies species of exotic fishes have been introduced into the freshwater bodies of Pakistan which are competing with native freshwater fish fauna and making them deprive of food and habitat as well. Intentional or accidental introductions of animals, plants and pathogens away from their native niche is considered as major leading problem for biodiversity of invaded habitat. Three years study (from January 2017 to December 2019) was conducted in freshwater bodies of Province Punjab, Pakistan. Study was designed to know exotic species impacts on the distribution of native species of fishes. During current survey a total of 68 (indigenous and exotic) fish species belonging to 14 families were recorded from head Qadirabad, head Baloki, Islam headworks and Rasul barrage. Statistical analysis showed that Shannon-Wiener diversity index was the highest (1.41) at both Rasul barrage and Islam headworks but, invasive species were present in very less number in these study sites i.e. Oreochromis mozambicus, O. niloticus, Hypophthalmichthys nobilis, Carassius auratus, Ctenophryngdon idella, Cyprinus carpio and H. molitrix. The diversity index showed that comparatively low diversity was present in both area head Qadirabad (1.30) and head Baloki (1.4) due to high pressure of invasive species. Direct observation of species and statistical analysis showed that aliens species produced negative impact on the local fish fauna diversity, evenness, and numbers. It is concluded that many factors are impacts on the diversity of native fishes, but alien (invasive) species also play a major role to reduction of native species, because aliens species produce competition for native species. So it is urgent need to analysis the aliens and native food web and roosting sites in Pakistan, in future.

Resumo O Paquistão é um país com ampla diversidade de espécies nativas e exóticas de peixes de água doce. Contudo, diversas espécies de peixes exóticos estão sendo introduzidas nos corpos de água doce paquistanês, as quais estão competindo com a fauna nativa de peixes, tornando-os privados de alimento e habitat. A introdução intencional ou acidental de animais, plantas e patógenos fora de seu nicho nativo é considerada o principal problema da biodiversidade do habitat recém-invadido. Assim, foi realizado um estudo de três anos, de janeiro de 2017 a dezembro de 2019, em corpos de água doce na província de Punjab, Paquistão. A pesquisa foi desenvolvida para conhecer os impactos de espécies exóticas na distribuição de espécies nativas de peixes. Durante a pesquisa, foi registrado um total de 68 espécies de peixes (nativas e exóticas), pertencentes a 14 famílias, nas nascentes dos rios Qadirabad, Baloki e Islam e na barragem de Rasul. A análise estatística mostrou que o índice de diversidade de Shannon-Wiener foi mais alto (1,41) na barragem Rasul (RB) e na nascente do rio Islam (IH); e que a maioria das espécies introduzidas estava presente em um número muito menor, isto é, Oreochromis mossambicus, Oreochromis niloticus, Hypophthalmichthys nobilis, Carassius auratus, Ctenopharyngodon idella, Cyprinus carpio e Hypophthalmichthy smolitrix nessa área de estudo. Por outro lado, o índice Shannon-Wiener mostrou que a diversidade estava baixa nas nascentes dos rios Qadirabad (1,30) e Baloki (1,4) em razão da alta pressão de espécies invasoras. A observação direta das espécies e a análise estatística indicaram que as espécies invasoras produziram impacto negativo na diversidade, uniformidade e números de peixes da fauna local. Conclui-se que muitos fatores impactam na diversidade de peixes nativos, mas as espécies exóticas (invasoras) também desempenham um papel importante na redução das espécies nativas, em razão da competição existente entre elas. Portanto, é urgente uma análise futura das espécies invasoras e da teia alimentar nativa no Paquistão..

In vitro selection of autochthonous bacterium with probiotic potential for the neotropical fish piauçu Megaleporinus microcephalus / [Seleção in vitro de bactéria autóctone com potencial probiótico para o peixe neotropical piauçu Megaleporinus macrocephalus]

The study aimed to isolate, identify, and apply in vitro tests on bacteria with autochthonous probiotic potential isolated from fifteen healthy specimens of Megaleporinus macrocephalus. The strains were selected from the intestinal tract of fish and inoculated in the Petri plate containing Sharp Man Rogosa Agar (MRS) for (48 hours at 35ºC). They were isolated based on a test of catalase, Gram stain, tolerance to different gradients NaCl (1, 2 and 3%), pH (4, 5, 6, 8 and 9) values and bile salts (2.5 and 5%), in addition to the inhibition zone against pathogens. Of the 42 strains isolated, ST1 and ST9 had higher values (p<0.05) for total viable cells (31.80±0.07 and 32.51±0.05 CFU/mL × 108) respectively. In the resistance tests, strains ST1 and ST9 presented the best results, with emphasis on ST9 in the gradients of pH, high values of bile salts and larger inhibition zones against Aeromonas hydrophila and Aeromonas jandaei. The strains with the best results in the tests, ST1 and ST9, were identified by the MALDI-TOF-MS method as Enterococcus faecium. Thus, the isolated E. faecium bacteria, may be recommended as for probiotic use in farming the M. macrocephalus.

O presente estudo visou isolar, identificar e aplicar testes in vitro em bactérias com potencial probiótico, autóctones, isoladas de 15 espécimes saudáveis de Megaleporinus macrocephalus. As cepas foram selecionadas do trato intestinal dos peixes e inoculadas em placas de Petri contendo Man Rogosa Sharped Agar (MRS), por 48 horas, a 35ºC. Foram isoladas com base em teste de catalase, coloração de Gram, tolerância a diferentes gradientes de NaCl (1, 2 e 3%), valores de pH (4, 5, 6, 8 e 9) e sais biliares (2,5 e 5%), além do halo de inibição contra patógenos. Das 42 cepas isoladas, ST1 e ST9 apresentaram maiores valores (P<0,05) para células viáveis totais (31,80±0,07 e 32,51±0,05 UFC/mL × 108), respectivamente. Nos testes de resistência, as cepas ST1 e ST9 apresentaram os melhores resultados, com destaque para ST9 nos gradientes de pH, altos valores de sais biliares e maiores halos de inibição contra Aeromonas hydrophila e Aeromonas jandaei. As cepas com melhores resultados nos testes, ST1 e ST9, foram identificadas pelo método de MALDI-TOF-MS como Enterococcus faecium. Assim, a bactéria isolada Enterococcus faecium, pode ser recomendada para uso probiótico na criação do M. macrocephalus.

Impact of alien fishes on the distribution pattern of indigenous freshwater fishes of Punjab, Pakistan / Impacto de peixes invasores no padrão de distribuição de peixes de água doce em Punjab, Paquistão

Pakistan is the country with mega freshwater fish diversity of native and alien species. In the presence of enormous native fishes varies species of exotic fishes have been introduced into the freshwater bodies of Pakistan which are competing with native freshwater fish fauna and making them deprive of food and habitat as well. Intentional or accidental introductions of animals, plants and pathogens away from their native niche is considered as major leading problem for biodiversity of invaded habitat. Three years study (from January 2017 to December 2019) was conducted in freshwater bodies of Province Punjab, Pakistan. Study was designed to know exotic species impacts on the distribution of native species of fishes. During current survey a total of 68 (indigenous and exotic) fish species belonging to 14 families were recorded from head Qadirabad, head Baloki, Islam headworks and Rasul barrage. Statistical analysis showed that Shannon-Wiener diversity index was the highest (1.41) at both Rasul barrage and Islam headworks but, invasive species were present in very less number in these study sites i.e. Oreochromis mozambicus, O. niloticus, Hypophthalmichthys nobilis, Carassius auratus, Ctenophryngdon idella, Cyprinus carpio and H. molitrix. The diversity index showed that comparatively low diversity was present in both area head Qadirabad (1.30) and head Baloki (1.4) due to high pressure of invasive species. Direct observation of species and statistical analysis showed that aliens’ species produced negative impact on the local fish fauna diversity, evenness, and numbers. It is concluded that many factors are impacts on the diversity of native fishes, but alien (invasive) species also play a major role to reduction of native species, because aliens’ species produce competition for native species. So it is urgent need to analysis the aliens and native food web and roosting sites in Pakistan, in future.

O Paquistão é um país com ampla diversidade de espécies nativas e exóticas de peixes de água doce. Contudo, diversas espécies de peixes exóticos estão sendo introduzidas nos corpos de água doce paquistanês, as quais estão competindo com a fauna nativa de peixes, tornando-os privados de alimento e habitat. A introdução intencional ou acidental de animais, plantas e patógenos fora de seu nicho nativo é considerada o principal problema da biodiversidade do habitat recém-invadido. Assim, foi realizado um estudo de três anos, de janeiro de 2017 a dezembro de 2019, em corpos de água doce na província de Punjab, Paquistão. A pesquisa foi desenvolvida para conhecer os impactos de espécies exóticas na distribuição de espécies nativas de peixes. Durante a pesquisa, foi registrado um total de 68 espécies de peixes (nativas e exóticas), pertencentes a 14 famílias, nas nascentes dos rios Qadirabad, Baloki e Islam e na barragem de Rasul. A análise estatística mostrou que o índice de diversidade de Shannon-Wiener foi mais alto (1,41) na barragem Rasul (RB) e na nascente do rio Islam (IH); e que a maioria das espécies introduzidas estava presente em um número muito menor, isto é, Oreochromis mossambicus, Oreochromis niloticus, Hypophthalmichthys nobilis, Carassius auratus, Ctenopharyngodon idella, Cyprinus carpio e Hypophthalmichthy smolitrix nessa área de estudo. Por outro lado, o índice Shannon-Wiener mostrou que a diversidade estava baixa nas nascentes dos rios Qadirabad (1,30) e Baloki (1,4) em razão da alta pressão de espécies invasoras. A observação direta das espécies e a análise estatística indicaram que as espécies invasoras produziram impacto negativo na diversidade, uniformidade e números de peixes da fauna local. Conclui-se que muitos fatores impactam na diversidade de peixes nativos, mas as espécies exóticas (invasoras) também desempenham um papel importante na redução das espécies nativas, em razão da competição existente entre elas. Portanto, é [...].

Impact of alien fishes on the distribution pattern of indigenous freshwater fishes of Punjab, Pakistan / Impacto de peixes invasores no padrão de distribuição de peixes de água doce em Punjab, Paquistão

Pakistan is the country with mega freshwater fish diversity of native and alien species. In the presence of enormous native fishes varies species of exotic fishes have been introduced into the freshwater bodies of Pakistan which are competing with native freshwater fish fauna and making them deprive of food and habitat as well. Intentional or accidental introductions of animals, plants and pathogens away from their native niche is considered as major leading problem for biodiversity of invaded habitat. Three years study (from January 2017 to December 2019) was conducted in freshwater bodies of Province Punjab, Pakistan. Study was designed to know exotic species impacts on the distribution of native species of fishes. During current survey a total of 68 (indigenous and exotic) fish species belonging to 14 families were recorded from head Qadirabad, head Baloki, Islam headworks and Rasul barrage. Statistical analysis showed that Shannon-Wiener diversity index was the highest (1.41) at both Rasul barrage and Islam headworks but, invasive species were present in very less number in these study sites i.e. Oreochromis mozambicus, O. niloticus, Hypophthalmichthys nobilis, Carassius auratus, Ctenophryngdon idella, Cyprinus carpio and H. molitrix. The diversity index showed that comparatively low diversity was present in both area head Qadirabad (1.30) and head Baloki (1.4) due to high pressure of invasive species. Direct observation of species and statistical analysis showed that aliens' species produced negative impact on the local fish fauna diversity, evenness, and numbers. It is concluded that many factors are impacts on the diversity of native fishes, but alien (invasive) species also play a major role to reduction of native species, because aliens' species produce competition for native species. So it is urgent need to analysis the aliens and native food web and roosting sites in Pakistan, in future.

O Paquistão é um país com ampla diversidade de espécies nativas e exóticas de peixes de água doce. Contudo, diversas espécies de peixes exóticos estão sendo introduzidas nos corpos de água doce paquistanês, as quais estão competindo com a fauna nativa de peixes, tornando-os privados de alimento e habitat. A introdução intencional ou acidental de animais, plantas e patógenos fora de seu nicho nativo é considerada o principal problema da biodiversidade do habitat recém-invadido. Assim, foi realizado um estudo de três anos, de janeiro de 2017 a dezembro de 2019, em corpos de água doce na província de Punjab, Paquistão. A pesquisa foi desenvolvida para conhecer os impactos de espécies exóticas na distribuição de espécies nativas de peixes. Durante a pesquisa, foi registrado um total de 68 espécies de peixes (nativas e exóticas), pertencentes a 14 famílias, nas nascentes dos rios Qadirabad, Baloki e Islam e na barragem de Rasul. A análise estatística mostrou que o índice de diversidade de Shannon-Wiener foi mais alto (1,41) na barragem Rasul (RB) e na nascente do rio Islam (IH); e que a maioria das espécies introduzidas estava presente em um número muito menor, isto é, Oreochromis mossambicus, Oreochromis niloticus, Hypophthalmichthys nobilis, Carassius auratus, Ctenopharyngodon idella, Cyprinus carpio e Hypophthalmichthy smolitrix nessa área de estudo. Por outro lado, o índice Shannon-Wiener mostrou que a diversidade estava baixa nas nascentes dos rios Qadirabad (1,30) e Baloki (1,4) em razão da alta pressão de espécies invasoras. A observação direta das espécies e a análise estatística indicaram que as espécies invasoras produziram impacto negativo na diversidade, uniformidade e números de peixes da fauna local. Conclui-se que muitos fatores impactam na diversidade de peixes nativos, mas as espécies exóticas (invasoras) também desempenham um papel importante na redução das espécies nativas, em razão da competição existente entre elas. Portanto, é urgente uma análise futura das espécies invasoras e da teia alimentar nativa no Paquistão.

Impact of alien fishes on the distribution pattern of indigenous freshwater fishes of Punjab, Pakistan / Impacto de peixes invasores no padrão de distribuição de peixes de água doce em Punjab, Paquistão

Pakistan is the country with mega freshwater fish diversity of native and alien species. In the presence of enormous native fishes varies species of exotic fishes have been introduced into the freshwater bodies of Pakistan which are competing with native freshwater fish fauna and making them deprive of food and habitat as well. Intentional or accidental introductions of animals, plants and pathogens away from their native niche is considered as major leading problem for biodiversity of invaded habitat. Three years study (from January 2017 to December 2019) was conducted in freshwater bodies of Province Punjab, Pakistan. Study was designed to know exotic species impacts on the distribution of native species of fishes. During current survey a total of 68 (indigenous and exotic) fish species belonging to 14 families were recorded from head Qadirabad, head Baloki, Islam headworks and Rasul barrage. Statistical analysis showed that Shannon-Wiener diversity index was the highest (1.41) at both Rasul barrage and Islam headworks but, invasive species were present in very less number in these study sites i.e. Oreochromis mozambicus, O. niloticus, Hypophthalmichthys nobilis, Carassius auratus, Ctenophryngdon idella, Cyprinus carpio and H. molitrix. The diversity index showed that comparatively low diversity was present in both area head Qadirabad (1.30) and head Baloki (1.4) due to high pressure of invasive species. Direct observation of species and statistical analysis showed that aliens species produced negative impact on the local fish fauna diversity, evenness, and numbers. It is concluded that many factors are impacts on the diversity of native fishes, but alien (invasive) species also play a major role to reduction of native species, because aliens species produce competition for native species. So it is urgent need to analysis the aliens and native food web and roosting sites in Pakistan, in future.(AU)

O Paquistão é um país com ampla diversidade de espécies nativas e exóticas de peixes de água doce. Contudo, diversas espécies de peixes exóticos estão sendo introduzidas nos corpos de água doce paquistanês, as quais estão competindo com a fauna nativa de peixes, tornando-os privados de alimento e habitat. A introdução intencional ou acidental de animais, plantas e patógenos fora de seu nicho nativo é considerada o principal problema da biodiversidade do habitat recém-invadido. Assim, foi realizado um estudo de três anos, de janeiro de 2017 a dezembro de 2019, em corpos de água doce na província de Punjab, Paquistão. A pesquisa foi desenvolvida para conhecer os impactos de espécies exóticas na distribuição de espécies nativas de peixes. Durante a pesquisa, foi registrado um total de 68 espécies de peixes (nativas e exóticas), pertencentes a 14 famílias, nas nascentes dos rios Qadirabad, Baloki e Islam e na barragem de Rasul. A análise estatística mostrou que o índice de diversidade de Shannon-Wiener foi mais alto (1,41) na barragem Rasul (RB) e na nascente do rio Islam (IH); e que a maioria das espécies introduzidas estava presente em um número muito menor, isto é, Oreochromis mossambicus, Oreochromis niloticus, Hypophthalmichthys nobilis, Carassius auratus, Ctenopharyngodon idella, Cyprinus carpio e Hypophthalmichthy smolitrix nessa área de estudo. Por outro lado, o índice Shannon-Wiener mostrou que a diversidade estava baixa nas nascentes dos rios Qadirabad (1,30) e Baloki (1,4) em razão da alta pressão de espécies invasoras. A observação direta das espécies e a análise estatística indicaram que as espécies invasoras produziram impacto negativo na diversidade, uniformidade e números de peixes da fauna local. Conclui-se que muitos fatores impactam na diversidade de peixes nativos, mas as espécies exóticas (invasoras) também desempenham um papel importante na redução das espécies nativas, em razão da competição existente entre elas. Portanto, é [...].(AU)

Frequency of pathogens in routine bacteriological diagnosis in fish and their antimicrobial resistance / Frequência de patógenos na rotina de diagnóstico bacteriológico em peixes e sua resistência a antimicrobianos

Aquaculture is one of the sectors of animal husbandry with the fastest growth rate. However, the increase in the sector's production chain without proper management can result in factors that favor the development of diseases, especially infectious diseases caused by bacteria. Many factors, such as agriculture or industry resides, improper use of antibiotics in animals or humans, have contributed to increased environmental pressure and the appearance of antibiotic-resistant bacteria, while residues from these drugs can remain in the carcasses and in water a risk to public and environmental health. From that, we identified the bacterial genus/species and their bacterial resistance to antibiotics from samples received from fish disease outbreaks for bacteriosis diagnosis between January 2017 and October 2020. Isolated bacteria were subjected to the Kirby and Bauer sensitivity test for five classes of antibiotics (penicillins, fluoroquinolones, aminoglycosides, amphenicols, and tetracyclines). Of the 181 analyzed outbreaks, 232 bacteria were isolated, including Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum. Of the 232 bacteria, 40 strains were classified as multidrug resistant (MDR), with Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp., and Edwardsiella spp. representing more than half of this number (22/total). With several bacteria demonstrating resistance to Brazilian aquaculture-legalized drugs (tetracycline and florfenicol), it is mandatory to research, not only for alternatives to the use of antibiotics, but also for other drugs effective against the main circulating bacterial pathogens. In addition, vigilance over the occurrence of resistant bacteria is necessary, considering the appearance of zoonotic bacteria with multi-resistant characteristics, becoming a public health concern.(AU)

Aquicultura é um dos setores da produção animal com o mais rápido crescimento. Muitos fatores, como resíduos industriais e/ou de agricultura e o uso indevido de antibióticos em animais ou humanos têm contribuído para aumentar a pressão ambiental e o aparecimento de bactérias resistentes a antibióticos contribuindo para os resíduos dessas drogas permanecerem nas carcaças e na água, o que é um risco para a saúde pública / ambiental. A partir disso, foram identificados o gênero / espécie de bactérias e sua resistência bacteriana aos antibióticos de amostras recebidas de surtos de doenças em peixes para diagnóstico bacteriológico no período entre janeiro de 2017 e outubro de 2020. As bactérias isoladas foram submetidas ao teste de sensibilidade de Kirby e Bauer para cinco classes de antibióticos (penicilinas, fluoroquinolonas, aminoglicosídeos, anfenicóis e tetraciclinas). Nos 181 surtos analisados, 232 bactérias foram isoladas, sendo estas Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum dentre outras. Destas 232 bactérias, 40 cepas foram classificadas como multirresistentes (MDR), com Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp. e Edwardsiella spp. representando mais da metade destas (22 / total). Com várias bactérias demonstrando resistência aos medicamentos legalizados na aquicultura brasileira (tetraciclina e florfenicol), torna-se obrigatória a pesquisa, não apenas de alternativas ao uso de antibióticos, mas também de outros medicamentos eficazes contra os principais patógenos circulantes. Além disso, a vigilância sobre a ocorrência de cepas resistentes é necessária levando-se em consideração o aparecimento de bactérias zoonóticas com essa característica, tornando-se um ponto de interesse à saúde pública.(AU)

Frequency of pathogens in routine bacteriological diagnosis in fish and their antimicrobial resistance / Frequência de patógenos na rotina de diagnóstico bacteriológico em peixes e sua resistência a antimicrobianos

Aquaculture is one of the sectors of animal husbandry with the fastest growth rate. However, the increase in the sector's production chain without proper management can result in factors that favor the development of diseases, especially infectious diseases caused by bacteria. Many factors, such as agriculture or industry resides, improper use of antibiotics in animals or humans, have contributed to increased environmental pressure and the appearance of antibiotic-resistant bacteria, while residues from these drugs can remain in the carcasses and in water a risk to public and environmental health. From that, we identified the bacterial genus/species and their bacterial resistance to antibiotics from samples received from fish disease outbreaks for bacteriosis diagnosis between January 2017 and October 2020. Isolated bacteria were subjected to the Kirby and Bauer sensitivity test for five classes of antibiotics (penicillins, fluoroquinolones, aminoglycosides, amphenicols, and tetracyclines). Of the 181 analyzed outbreaks, 232 bacteria were isolated, including Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum. Of the 232 bacteria, 40 strains were classified as multidrug resistant (MDR), with Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp., and Edwardsiella spp. representing more than half of this number (22/total). With several bacteria demonstrating resistance to Brazilian aquaculture-legalized drugs (tetracycline and florfenicol), it is mandatory to research, not only for alternatives to the use of antibiotics, but also for other [...].

Aquicultura é um dos setores da produção animal com o mais rápido crescimento. Muitos fatores, como resíduos industriais e/ou de agricultura e o uso indevido de antibióticos em animais ou humanos têmc ontribuído para aumentar a pressão ambiental e o aparecimento de bactérias resistentes a antibióticos contribuindo para os resíduos dessas drogas permanecerem nas carcaças e na água, o que é um risco para a saúde pública / ambiental. A partir disso, foram identificados o gênero / espécie de bactérias e sua resistência bacteriana aos antibióticos de amostras recebidas de surtos de doenças em peixes para diagnóstico bacteriológico no período entre janeiro de 2017 e outubro de 2020. As bactérias isoladas foram submetidas ao teste de sensibilidade de Kirby e Bauer para cinco classes de antibióticos (penicilinas, fluoroquinolonas, aminoglicosídeos, anfenicóis e tetraciclinas). Nos 181 surtos analisados, 232 bactérias foram isoladas, sendo estas Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp.,Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum dentre outras. Destas 232 bactérias, 40 cepas foram classificadas como multirresistentes (MDR), com Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp. e Edwardsiella spp. representando mais da metade destas (22 / total). Com várias bactérias demonstrando resistência aos medicamentos legalizados na aquicultura brasileira (tetraciclina e florfenicol), torna-se obrigatória a pesquisa, não apenas de alternativas ao uso de antibióticos, mas também de outros medicamentos eficazes contra os principais patógenos circulantes. Além disso, a vigilância sobre a ocorrência de cepas resistentes é necessária levando-se em consideração o aparecimento de bactérias zoonóticas com essa característica, tornando-se um ponto de interesse à saúde pública.

Frequency of pathogens in routine bacteriological diagnosis in fish and their antimicrobial resistance / Frequência de patógenos na rotina de diagnóstico bacteriológico em peixes e sua resistência a antimicrobianos

Aquaculture is one of the sectors of animal husbandry with the fastest growth rate. However, the increase in the sector's production chain without proper management can result in factors that favor the development of diseases, especially infectious diseases caused by bacteria. Many factors, such as agriculture or industry resides, improper use of antibiotics in animals or humans, have contributed to increased environmental pressure and the appearance of antibiotic-resistant bacteria, while residues from these drugs can remain in the carcasses and in water a risk to public and environmental health. From that, we identified the bacterial genus/species and their bacterial resistance to antibiotics from samples received from fish disease outbreaks for bacteriosis diagnosis between January 2017 and October 2020. Isolated bacteria were subjected to the Kirby and Bauer sensitivity test for five classes of antibiotics (penicillins, fluoroquinolones, aminoglycosides, amphenicols, and tetracyclines). Of the 181 analyzed outbreaks, 232 bacteria were isolated, including Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp., Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum. Of the 232 bacteria, 40 strains were classified as multidrug resistant (MDR), with Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp., and Edwardsiella spp. representing more than half of this number (22/total). With several bacteria demonstrating resistance to Brazilian aquaculture-legalized drugs (tetracycline and florfenicol), it is mandatory to research, not only for alternatives to the use of antibiotics, but also for other [...].(AU)

Aquicultura é um dos setores da produção animal com o mais rápido crescimento. Muitos fatores, como resíduos industriais e/ou de agricultura e o uso indevido de antibióticos em animais ou humanos têmc ontribuído para aumentar a pressão ambiental e o aparecimento de bactérias resistentes a antibióticos contribuindo para os resíduos dessas drogas permanecerem nas carcaças e na água, o que é um risco para a saúde pública / ambiental. A partir disso, foram identificados o gênero / espécie de bactérias e sua resistência bacteriana aos antibióticos de amostras recebidas de surtos de doenças em peixes para diagnóstico bacteriológico no período entre janeiro de 2017 e outubro de 2020. As bactérias isoladas foram submetidas ao teste de sensibilidade de Kirby e Bauer para cinco classes de antibióticos (penicilinas, fluoroquinolonas, aminoglicosídeos, anfenicóis e tetraciclinas). Nos 181 surtos analisados, 232 bactérias foram isoladas, sendo estas Streptococcus spp., Aeromonas spp., Edwardsiella spp., Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Chromobacterium violaceum, Flavobacterium spp.,Citrobacter spp., Enterococcus spp., Vibrio spp., Enterobacter spp., Chryseobacterium meningosepticum dentre outras. Destas 232 bactérias, 40 cepas foram classificadas como multirresistentes (MDR), com Plesiomonas shigelloides, Aeromonas spp. e Edwardsiella spp. representando mais da metade destas (22 / total). Com várias bactérias demonstrando resistência aos medicamentos legalizados na aquicultura brasileira (tetraciclina e florfenicol), torna-se obrigatória a pesquisa, não apenas de alternativas ao uso de antibióticos, mas também de outros medicamentos eficazes contra os principais patógenos circulantes. Além disso, a vigilância sobre a ocorrência de cepas resistentes é necessária levando-se em consideração o aparecimento de bactérias zoonóticas com essa característica, tornando-se um ponto de interesse à saúde pública.(AU)

Antibacterial effects of seven essential plant oils on fish pathogens / Efeitos antibacterianos de sete óleos de plantas essenciais em patógenos de peixe

The use of natural products which have the least harmful effects on the environment has recently been taken as a novel approach against fish diseases. References on in vitro studies have demonstrated antibacterial activity of essential oils (EOs) against certain fish pathogens. The aim of this study was to evaluate the antibacterial effect of some plant essential oils against fish pathogenic bacteria in vitro conditions. Seven plant EOs: lavender (Lavandula angustifolia), clove (Eugenia caryophyllus), peppermint (Mentha piperitae), basil (Ocimum sanctum), rosemary (Rosmarinus officinalis), cinnamon (Cinnamomum zeylanicum) and black cumin (Nigella sativa) were used to identify their antibacterial properties against Yersinia ruckeri, Aeromonas hydrophila, Vibrio anguillarum, Vibrio alginolyticus, Lactococcus garvieae and Vagococcus salmoninarum at five concentrations using disc diffusion method. Especially the EOs of clove, cinnamon and rosemary showed the strongest antibacterial activities than other oils against the three most susceptible bacterial strains (Y. ruckeri, A. hydrophila and V. salmoninarum). Besides, the EOs of clove, rosemary, cinnamon and black cumin showed similar inhibition zones with OTC against A. hydrophila. The minimum inhibitory concentrations of the used EOs found between 500 and 62.5 µl mL-1. As a result, three of the EOs used in this study were...

A utilização de produtos naturais com menos efeitos nocivos para o ambiente foi recentemente considerada uma nova abordagem contra as doenças dos peixes. Referências em estudos in vitro demonstraram atividade antibacteriana de óleos essenciais (OE) contra certos patógenos de peixes. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antibacteriano de alguns óleos essenciais de plantas contra bactérias patogênicas de peixes em condições in vitro. Sete EOs de plantas: alfazema (Lavandula angustifolia), cravo (Eugenia caryophyllus), hortelã-pimenta (Mentha piperitae), manjericão (Ocimum sanctum), alecrim (Rosmarinus officinalis), canela (Cinnamomum zeylanicum) e cominho preto (Nigella sativa) foram usados para identificar suas propriedades antibacterianas contra Yersinia ruckeri, Aeromonas hydrophila, Vibrio anguillarum, Vibrio alginolyticus, Lactococcus garvieae e Vagococcus salmoninarum em cinco concentrações usando o método de difusão em disco. Especialmente os OEs de cravo, canela e alecrim mostraram as atividades antibacterianas mais fortes do que outros óleos contra as três cepas bacterianas mais suscetíveis (Y. ruckeri, A. hydrophila e V. salmoninarum). Além disso, os OEs de cravo, alecrim, canela e cominho preto mostraram zonas de inibição semelhantes com OTC contra A. hydrophila. As concentrações inibitórias mínimas dos OE usados encontradas entre 500 e 62.5 µl mL-1...

Antibacterial effects of seven essential plant oils on fish pathogens / Efeitos antibacterianos de sete óleos de plantas essenciais em patógenos de peixe

The use of natural products which have the least harmful effects on the environment has recently been taken as a novel approach against fish diseases. References on in vitro studies have demonstrated antibacterial activity of essential oils (EOs) against certain fish pathogens. The aim of this study was to evaluate the antibacterial effect of some plant essential oils against fish pathogenic bacteria in vitro conditions. Seven plant EOs: lavender (Lavandula angustifolia), clove (Eugenia caryophyllus), peppermint (Mentha piperitae), basil (Ocimum sanctum), rosemary (Rosmarinus officinalis), cinnamon (Cinnamomum zeylanicum) and black cumin (Nigella sativa) were used to identify their antibacterial properties against Yersinia ruckeri, Aeromonas hydrophila, Vibrio anguillarum, Vibrio alginolyticus, Lactococcus garvieae and Vagococcus salmoninarum at five concentrations using disc diffusion method. Especially the EOs of clove, cinnamon and rosemary showed the strongest antibacterial activities than other oils against the three most susceptible bacterial strains (Y. ruckeri, A. hydrophila and V. salmoninarum). Besides, the EOs of clove, rosemary, cinnamon and black cumin showed similar inhibition zones with OTC against A. hydrophila. The minimum inhibitory concentrations of the used EOs found between 500 and 62.5 µl mL-1. As a result, three of the EOs used in this study were...(AU)

A utilização de produtos naturais com menos efeitos nocivos para o ambiente foi recentemente considerada uma nova abordagem contra as doenças dos peixes. Referências em estudos in vitro demonstraram atividade antibacteriana de óleos essenciais (OE) contra certos patógenos de peixes. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito antibacteriano de alguns óleos essenciais de plantas contra bactérias patogênicas de peixes em condições in vitro. Sete EOs de plantas: alfazema (Lavandula angustifolia), cravo (Eugenia caryophyllus), hortelã-pimenta (Mentha piperitae), manjericão (Ocimum sanctum), alecrim (Rosmarinus officinalis), canela (Cinnamomum zeylanicum) e cominho preto (Nigella sativa) foram usados para identificar suas propriedades antibacterianas contra Yersinia ruckeri, Aeromonas hydrophila, Vibrio anguillarum, Vibrio alginolyticus, Lactococcus garvieae e Vagococcus salmoninarum em cinco concentrações usando o método de difusão em disco. Especialmente os OEs de cravo, canela e alecrim mostraram as atividades antibacterianas mais fortes do que outros óleos contra as três cepas bacterianas mais suscetíveis (Y. ruckeri, A. hydrophila e V. salmoninarum). Além disso, os OEs de cravo, alecrim, canela e cominho preto mostraram zonas de inibição semelhantes com OTC contra A. hydrophila. As concentrações inibitórias mínimas dos OE usados encontradas entre 500 e 62.5 µl mL-1...(AU)

Assessment and incidence of fish associated bacterial pathogens at hatcheries of Azad Kashmir, Pakistan / Avaliação e incidência de patógenos bacterianos associados a peixes em incubadoras da Caxemira de Azad, Paquistão

Fish is the most indispensable source of proteins for individuals and have high nutritional value. On the other hand, the fish culturing raised issues of fish health due to close contact between the aquatic environment and the fish pathogens. So, the aim of the current study was to identify the bacterial pathogens and screen the injured Rainbow trout rearing in different trout hatcheries run under fisheries department of the government of Azad Jammu and Kashmir, Pakistan. Seven bacterial pathogens such as Shigella flexneri, Enterobacter amnigenus, Salmonella Typhimurium, Serratia odorifera, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes, and Bacillus cereus were isolated and identified. Results revealed that the injury of fish specimens was due to overcrowding. Instead of rainbow coloration, specimens have darker black in color. The water of ponds was not clean and clear and such conditions was because of the greater quantity of feed thrown in the water. It was concluded that poor hygienic water condition and overloading allowed the opportunistic bacterial contaminations to succeed which cause a serious threat to hatcheries.(AU)

O peixe é a fonte mais indispensável de proteínas para os indivíduos e tem alto valor nutricional. Por outro lado, a cultura dos peixes levantou questões sobre a saúde dos peixes devido ao próximo contato entre o ambiente aquático e os agentes patogênicos desses peixes. Assim, o objetivo do presente estudo foi identificar os patógenos bacterianos e rastrear a criação da truta arco-íris que apresentou lesões em diferentes incubadoras de trutas, com supervisão do departamento de pesca do governo de Azad Jammu e Caxemira, Paquistão. Sete patógenos bacterianos foram isolados e identificados, tais como: Shigella flexneri, Enterobacter amnigenus, Salmonella typhimurium, Serratia odorifera, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes e Bacillus cereus. Os resultados revelaram que a lesão de espécimes de peixes foi devido à superlotação. Em vez da coloração do arco-íris, os espécimes tiveram uma coloração preta mais escura. A água das lagoas não era limpa e nem clara, e tais condições ocorreram devido a maior quantidade de alimento lançada na água. Concluiu-se que a precária condição higiênica da água e também a sobrecarga permitiram que as contaminações bacterianas oportunistas fossem bem-sucedidas, causando séria ameaça às incubadoras.(AU)

Assessment and incidence of fish associated bacterial pathogens at hatcheries of Azad Kashmir, Pakistan

Abstract Fish is the most indispensable source of proteins for individuals and have high nutritional value. On the other hand, the fish culturing raised issues of fish health due to close contact between the aquatic environment and the fish pathogens. So, the aim of the current study was to identify the bacterial pathogens and screen the injured Rainbow trout rearing in different trout hatcheries run under fisheries department of the government of Azad Jammu and Kashmir, Pakistan. Seven bacterial pathogens such as Shigella flexneri, Enterobacter amnigenus, Salmonella Typhimurium, Serratia odorifera, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes, and Bacillus cereus were isolated and identified. Results revealed that the injury of fish specimens was due to overcrowding. Instead of rainbow coloration, specimens have darker black in color. The water of ponds was not clean and clear and such conditions was because of the greater quantity of feed thrown in the water. It was concluded that poor hygienic water condition and overloading allowed the opportunistic bacterial contaminations to succeed which cause a serious threat to hatcheries.

Resumo O peixe é a fonte mais indispensável de proteínas para os indivíduos e tem alto valor nutricional. Por outro lado, a cultura dos peixes levantou questões sobre a saúde dos peixes devido ao próximo contato entre o ambiente aquático e os agentes patogênicos desses peixes. Assim, o objetivo do presente estudo foi identificar os patógenos bacterianos e rastrear a criação da truta arco-íris que apresentou lesões em diferentes incubadoras de trutas, com supervisão do departamento de pesca do governo de Azad Jammu e Caxemira, Paquistão. Sete patógenos bacterianos foram isolados e identificados, tais como: Shigella flexneri, Enterobacter amnigenus, Salmonella typhimurium, Serratia odorifera, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes e Bacillus cereus. Os resultados revelaram que a lesão de espécimes de peixes foi devido à superlotação. Em vez da coloração do arco-íris, os espécimes tiveram uma coloração preta mais escura. A água das lagoas não era limpa e nem clara, e tais condições ocorreram devido a maior quantidade de alimento lançada na água. Concluiu-se que a precária condição higiênica da água e também a sobrecarga permitiram que as contaminações bacterianas oportunistas fossem bem-sucedidas, causando séria ameaça às incubadoras.

Identification of pathogens in fish polyculture systems in southern Minas Gerais, Brazil / Identificação de patógenos em pisciculturas de policultivo no sul de Minas Gerais, Brasil

Fish diseases represent a significant limiting factor in aquaculture systems. Among the many pathogens, bacteria are probably the most significant group of etiological agents. Thus, the objective of this work was to isolate and to report the incidence of streptococcosis and other possible pathogens in fish polyculture systems in the region of Lavras, state of Minas Gerais, Brazil. Fish samples were randomly collected from seven fish polyculture systems in the region, including the following municipalities: Lavras, Itutinga, Itumirim, Nepomuceno, Carrancas, São Sebastião da Vitória, and Ingaí. The specimens analyzed were: Tilapia (Oreochromis niloticus), Dourado (Salminus brasiliensis), Cará (Geophagus brasiliensis), Curimba (Prochilodus lineatus), Surubim (Pseudoplatystoma corruscans), and Piracanjuba (Brycon orbignyanus). Samples of kidney, brain, liver, spleen, and intestinal tract, and skin scraping was collected and sown in a culture medium. After the incubation period, the microorganisms were identified according to the culture, morphology, dyeing, and biochemical characteristics of the bacteria. Colonies of Streptococci, Aeromonas, and Edwardsiella were identified in Tilapia, Cara, Curimba, and Surubim fish species. The results showed the identification of the bacteria in fish polyculture systems in the region of Lavras, southern Minas Gerais. Therefore, greater sanitary control and the development of other studies to treat diseases related to these pathogens are necessary.

As doenças em peixes representam um fator limitante nos sistemas de aquicultura, e as bactérias, dentre vários patógenos, provavelmente constituam o grupo de agente etiológicos economicamente mais significante. Desta forma, o objetivou-se com este trabalho, isolar e relatar a ocorrência da estreptococose e outros prováveis patógenos em pisciculturas de policultivo da região de Lavras – MG. Foram coletadas amostras aleatórias de peixes em sete criatórios de policultivo de peixes da região, que englobam os seguintes munícipios: Lavras, Itutinga, Itumirim, Nepomuceno, Carrancas, São Sebastião da Vitória e Ingaí. Exemplares de tilápia, dourado, cará, curimba, surubim e piracanjuba foram analisados. Amostras de órgãos dos peixes foram coletadas e semeadas em meio de cultura. Após o período de incubação, a identificação dos microrganismos foi realizada de acordo com as características de cultura da bactéria, morfológicas, tintoriais e bioquímicas. Foram identificadas colônias de estreptococos, aeromonas e edwardsiella, nas espécies de tilápia, cará, curimba e surubim. Os resultados demonstraram que foram identificadas as bactérias nas pisciculturas de policultivo da região de Lavras, sul de Minas Gerais. Portanto, há uma necessidade de maior controle sanitário e o desenvolvimento de outros estudos para tratamentos de doenças relacionadas a esses patógenos.

Identification of pathogens in fish polyculture systems in southern Minas Gerais, Brazil / Identificação de patógenos em pisciculturas de policultivo no sul de Minas Gerais, Brasil

Fish diseases represent a significant limiting factor in aquaculture systems. Among the many pathogens, bacteria are probably the most significant group of etiological agents. Thus, the objective of this work was to isolate and to report the incidence of streptococcosis and other possible pathogens in fish polyculture systems in the region of Lavras, state of Minas Gerais, Brazil. Fish samples were randomly collected from seven fish polyculture systems in the region, including the following municipalities: Lavras, Itutinga, Itumirim, Nepomuceno, Carrancas, São Sebastião da Vitória, and Ingaí. The specimens analyzed were: Tilapia (Oreochromis niloticus), Dourado (Salminus brasiliensis), Cará (Geophagus brasiliensis), Curimba (Prochilodus lineatus), Surubim (Pseudoplatystoma corruscans), and Piracanjuba (Brycon orbignyanus). Samples of kidney, brain, liver, spleen, and intestinal tract, and skin scraping was collected and sown in a culture medium. After the incubation period, the microorganisms were identified according to the culture, morphology, dyeing, and biochemical characteristics of the bacteria. Colonies of Streptococci, Aeromonas, and Edwardsiella were identified in Tilapia, Cara, Curimba, and Surubim fish species. The results showed the identification of the bacteria in fish polyculture systems in the region of Lavras, southern Minas Gerais. Therefore, greater sanitary control and the development of other studies to treat diseases related to these pathogens are necessary.(AU)

As doenças em peixes representam um fator limitante nos sistemas de aquicultura, e as bactérias, dentre vários patógenos, provavelmente constituam o grupo de agente etiológicos economicamente mais significante. Desta forma, o objetivou-se com este trabalho, isolar e relatar a ocorrência da estreptococose e outros prováveis patógenos em pisciculturas de policultivo da região de Lavras MG. Foram coletadas amostras aleatórias de peixes em sete criatórios de policultivo de peixes da região, que englobam os seguintes munícipios: Lavras, Itutinga, Itumirim, Nepomuceno, Carrancas, São Sebastião da Vitória e Ingaí. Exemplares de tilápia, dourado, cará, curimba, surubim e piracanjuba foram analisados. Amostras de órgãos dos peixes foram coletadas e semeadas em meio de cultura. Após o período de incubação, a identificação dos microrganismos foi realizada de acordo com as características de cultura da bactéria, morfológicas, tintoriais e bioquímicas. Foram identificadas colônias de estreptococos, aeromonas e edwardsiella, nas espécies de tilápia, cará, curimba e surubim. Os resultados demonstraram que foram identificadas as bactérias nas pisciculturas de policultivo da região de Lavras, sul de Minas Gerais. Portanto, há uma necessidade de maior controle sanitário e o desenvolvimento de outros estudos para tratamentos de doenças relacionadas a esses patógenos.(AU)