Conventional vs. advanced echocardiographic parameters for predicting fluid responsiveness in healthy dogs

Background: Volume replacement is considered an essential component in the treatment of critically ill patients, but excess f luid administration can be as harmful as the lack of fluid therapy. Therefore, the volume replacement is only beneficial in patients deemed to be fluid responsive, that is, when the individual has an increase in their stroke volume after administration of a volume challenge. This study aim to assess whether conventional and advanced echocardiographic parameters for assessing left ventricular systolic function are able to predict fluid responsiveness in healthy spontaneously breathing dogs. The hypothesis was that some of these parameters would differ between responsive and non-responsive animals and could be used as a complementary measure for assessment of fluid responsiveness. Materials, Methods & Results: A prospective study was carried out in which 22 client-owned healthy dogs over 1 year of age that presented to the Veterinary Medical Teaching Hospital for elective neutering procedure were included. All dogs underwent conventional and advanced echocardiographic examination to obtain the left ventricular internal diameter in diastole normalized (LVIDDn), left ventricular internal diameter in systole normalized (LVIDSn), ejection fraction (EF) and shortening fraction (SF) according to the Teischholz methodology, global longitudinal strain (GLS) and tissue motion annular displacement (TMAD). There parameters were evaluated before and after administration of a volume challenge with 10 mL/kg lactate ringer intravenously for 20 min. Based on the variation in aortic velocity integral time, 31.82% of dogs were considered responsive and 68.18% were non-responsive to the volume challenge. For advanced echocardiography, TMAD indexed by body weight (mm/kg) > 0.89 (P = 0.004) and body surface area (mm/m2) >18.9 (P = 0.004) after volume challenge had the best area...

Achados radiográficos e ultrassonográficos de fibrossarcoma em membro torácico de gatos: relato de três casos

O fibrossarcoma é uma neoplasia mesenquimal maligna originada dos fibroblastos que localiza-se especificamente em tecido cutâneo, subcutâneo e cavidade oral. A ressecção cirúrgica do tumor com margem de segurança é conhecida como a principal forma de tratamento. A principal forma de metástase é a via hematógena, atingindo pulmões, e menos comum em linfonodos regionais. A análise histopatológica é o exame diagnóstico de eleição para definição do tipo de tumor e sua graduação. Os exames de imagem são fundamentais no estadiamento das neoplasias e planejamento cirúrgico. A ultrassonografia e radiografia são os métodos mais utilizados e oferecem um grande apoio a oncologia médica veterinária. O exame radiográfico possibilita o achado de neoformações ósseas ou demais alterações como o aumento de volume de tecidos moles, infiltração gordurosa, e cavitações com gás ou fluído. O exame ultrassonográfico permite o conhecimento sobre a ecotextura, organização, e localização da lesão em tecidos moles. Três gatos com fibrosssarcoma em membro torácico realizaram radiografia e ultrassonografia específica da lesão. Os achados radiográficos dos fibrossarcomas foram aumento de volume radiopacidade tecidos moles, sem acometimento ósseo. E os achados ultrassonográficos foram lesões de ecotextura grosseira, altamente heterogêneas. Os exames citológicos e histopatológicos concluíram fibrossarcoma. O

Achados radiográficos e ultrassonográficos de fibrossarcoma em membro torácico de gatos: relato de três casos / Radiographic and ultrasound findings of fibrosarcoma in the cats: reports of three cases / Hallazgos radiográficos y ultrasonidos de fibrosarcoma en la extremidad torácica de gatos: informe de tres casos

O fibrossarcoma é uma neoplasia mesenquimal maligna originada dos fibroblastos que localiza-se especificamente em tecido cutâneo, subcutâneo e cavidade oral. A ressecção cirúrgica do tumor com margem de segurança é conhecida como a principal forma de tratamento. A principal forma de metástase é a via hematógena, atingindo pulmões, e menos comum em linfonodos regionais. A análise histopatológica é o exame diagnóstico de eleição para definição do tipo de tumor e sua graduação. Os exames de imagem são fundamentais no estadiamento das neoplasias e planejamento cirúrgico. A ultrassonografia e radiografia são os métodos mais utilizados e oferecem um grande apoio a oncologia médica veterinária. O exame radiográfico possibilita o achado de neoformações ósseas ou demais alterações como o aumento de volume de tecidos moles, infiltração gordurosa, e cavitações com gás ou fluído. O exame ultrassonográfico permite o conhecimento sobre a ecotextura, organização, e localização da lesão em tecidos moles. Em três gatos com fibrosssarcoma em membro torácico, foram realizadas radiografia e ultrassonografia específica da lesão. Os achados radiográficos foram aumento de volume, radiopacidade dos tecidos moles, sem acometimento ósseo. Os achados ultrassonográficos foram lesões de ecotextura grosseira, altamente heterogêneas. Os exames citológicos e histopatológicos revelaram tratar-se de fibrossarcoma. O presente relato tem como objetivo descrever os achados radiográficos e ultrassonográficos de fibrossarcoma em membro torácico de três gatos.

Fibrosarcoma is a malignant mesenchymal neoplasm originating from fibroblasts, which is specifically located in the skin tissue, subcutaneous tissue and oral cavity. Surgical resection of the tumor with a safety margin is known as the main form of treatment. The main form of metastasis is the hematogenous route, reaching the lungs, and less common in regional lymph nodes. histopathological analysis is the diagnostic test of choice for defining the type of tumor and its graduation. Imaging exams are essential in the staging of neoplasms and surgical planning. Ultrasonography and radiography are the most used methods and offer great support to veterinary medical oncology. The radiographic exam allows the finding of bone neoformations or other alterations such as the increase in soft tissue volume, fatty infiltration, and cavitations with gas or fluid. The ultrasound examination allows knowledge about the echotexture, organization, and location of the soft tissue lesion. Three cats with fibrosarcoma in the thoracic limb underwent lesion-specific radiography and ultrasound. The radiographic findings of fibrosarcomas were increased soft tissue radiopacity volume, without bone involvement. And the ultrasonographic findings were gross echotexture lesions, highly heterogeneous. Cytological and histopathological examinations were performed for definitive diagnosis. The present report aims to describe the radiographic and ultrasonographic findings of fibrosarcoma in the thoracic limb of three cats.

RESUMEN El fibrosarcoma es una neoplasia mesenquimatosa maligna que se origina a partir de fibroblastos, que se localiza específicamente en el tejido cutáneo, tejido subcutáneo y cavidad oral. La resección quirúrgica del tumor con un margen de seguridad se conoce como la forma principal de tratamiento. La principal forma de metástasis es la vía hematógena, que llega a los pulmones y es menos común en los ganglios linfáticos regionales. El análisis histopatológico es la prueba diagnóstica de elección para definir el tipo de tumor y su graduación. Los exámenes por imágenes son esenciales en la estadificación de las neoplasias y la planificación quirúrgica. La ecografía y la radiografía son los métodos más utilizados y ofrecen un gran apoyo a la oncología médica veterinaria. El examen radiográfico permite encontrar neoformaciones óseas u otras alteraciones como aumento de volumen de tejidos blandos, infiltración grasa y cavitaciones con gas o líquido. El examen ecográfico permite conocer la ecotextura, organización y ubicación de la lesión de tejidos blandos. A tres gatos con fibrosarcoma en la extremidad torácica se les realizó una radiografía y una ecografía específicas de la lesión. Los hallazgos radiográficos de los fibrosarcomas fueron un aumento del volumen de radiopacidad de los tejidos blandos, sin afectación ósea. Y los hallazgos ecográficos fueron lesiones macroscópicas de ecotextura, muy heterogéneas. Se realizaron exámenes citológicos e histopatológicos para el diagnóstico definitivo. El presente informe tiene como objetivo describir los hallazgos radiográficos y ecográficos del fibrosarcoma en la extremidad torácica de tres gatos.

Use of oral fluids to detect anti Lawsonia intracellularis antibodies in experimentally infected pigs / Utilização de fluidos orais para detecção de anticorpos anti Lawsonia intracellularis em suínos experimentalmente infectados

Several pathogens and antibodies derived from serum or produced in tissues associated with the oral cavity are present in the oral fluid (OF). Considering the applicability of this alternative sample, recent studies in veterinary medicine have tested OF as a replacement for serum in diagnostic assays. The aim of this study was to standardize the immunoperoxidase monolayer assay (IPMA) to detect anti-Lawsonia intracellularis immunoglobulin A (IgA) and immunoglobulin G (IgG) in OF samples from experimentally infected pigs. Sixty-two pigs were divided into two groups: control (T1, n=30) and inoculated with L. intracellularis (T2, n=32). Blood, OF and fecal samples were collected at 0, 7, 14, 21, 28 and 42 days post-inoculation (dpi). Some adaptations of the standard technique for serum were made to IPMA for the detection of IgA and IgG in OF. The IPMA showed high specificity and sensitivity for serum samples and high specificity and moderate sensitivity for the detection of IgA and IgG in OF. There was high agreement between the results of serum IgG and OF IgA and IgG. Based on our results, oral fluid samples may be used for the evaluation and determination of anti-L. intracellularis antibodies in pigs, but not for individual diagnosis of swine proliferative enteropathy.(AU)

Vários patógenos e anticorpos derivados do soro ou produzidos em tecidos associados a cavidade oral estão presentes no fluido oral (FO). Considerando a aplicabilidade dessa amostra alternativa, estudos recentes em medicina veterinária têm testado o FO como substituto do soro para testes diagnósticos. O objetivo desse estudo foi padronizar a imunoperoxidase em monocamada de célula (IPMC) para a detecção de imunoglobulina A e imunoglobulina G anti-Lawsonia intracellularis em amostras de FO de suínos experimentalmente infectados. Um total de 62 suínos foram divididos em dois grupos: controle (T1, n=30) e inoculados com L. intracellularis (T2, n=32). Sangue, FO e amostras de fezes foram coletados aos 0, 7,14, 21, 28 e 42 dias após a inoculação (dpi). Algumas adaptações da técnica foram realizadas na técnica padrão da IPMC para a detecção de IgA e IgG. A IPMC demostrou alta especificidade e sensibilidade para amostras de soro e alta especificidade de moderada sensibilidade para a detecção de IgA e IgG em FO. Houve alta concordância entre resultados de detecção de IgG em soro com a IgA e IgG em amostras de FO. Baseado em nossos resultados, amostras de fluido oral podem ser usadas em avaliações e detecção de anticorpos anti-L. intracellularis em suínos, porém não de forma individual.(AU)

Use of oral fluids to detect anti Lawsonia intracellularis antibodies in experimentally infected pigs / Utilização de fluidos orais para detecção de anticorpos anti Lawsonia intracellularis em suínos experimentalmente infectados

Several pathogens and antibodies derived from serum or produced in tissues associated with the oral cavity are present in the oral fluid (OF). Considering the applicability of this alternative sample, recent studies in veterinary medicine have tested OF as a replacement for serum in diagnostic assays. The aim of this study was to standardize the immunoperoxidase monolayer assay (IPMA) to detect anti-Lawsonia intracellularis immunoglobulin A (IgA) and immunoglobulin G (IgG) in OF samples from experimentally infected pigs. Sixty-two pigs were divided into two groups: control (T1, n=30) and inoculated with L. intracellularis (T2, n=32). Blood, OF and fecal samples were collected at 0, 7, 14, 21, 28 and 42 days post-inoculation (dpi). Some adaptations of the standard technique for serum were made to IPMA for the detection of IgA and IgG in OF. The IPMA showed high specificity and sensitivity for serum samples and high specificity and moderate sensitivity for the detection of IgA and IgG in OF. There was high agreement between the results of serum IgG and OF IgA and IgG. Based on our results, oral fluid samples may be used for the evaluation and determination of anti-L. intracellularis antibodies in pigs, but not for individual diagnosis of swine proliferative enteropathy.(AU)

Vários patógenos e anticorpos derivados do soro ou produzidos em tecidos associados a cavidade oral estão presentes no fluido oral (FO). Considerando a aplicabilidade dessa amostra alternativa, estudos recentes em medicina veterinária têm testado o FO como substituto do soro para testes diagnósticos. O objetivo desse estudo foi padronizar a imunoperoxidase em monocamada de célula (IPMC) para a detecção de imunoglobulina A e imunoglobulina G anti-Lawsonia intracellularis em amostras de FO de suínos experimentalmente infectados. Um total de 62 suínos foram divididos em dois grupos: controle (T1, n=30) e inoculados com L. intracellularis (T2, n=32). Sangue, FO e amostras de fezes foram coletados aos 0, 7,14, 21, 28 e 42 dias após a inoculação (dpi). Algumas adaptações da técnica foram realizadas na técnica padrão da IPMC para a detecção de IgA e IgG. A IPMC demostrou alta especificidade e sensibilidade para amostras de soro e alta especificidade de moderada sensibilidade para a detecção de IgA e IgG em FO. Houve alta concordância entre resultados de detecção de IgG em soro com a IgA e IgG em amostras de FO. Baseado em nossos resultados, amostras de fluido oral podem ser usadas em avaliações e detecção de anticorpos anti-L. intracellularis em suínos, porém não de forma individual.(AU)

Efeito da fluidoterapia transcirúrgica sobre o hematócrito pós-cirúrgico em cadelas submetidas a ovariossalpingo-histerectomia eletiva / Effects of trans surgical fluid therapy over the post surgical packed cell volume in bitches undergoing elective ovariohisterectomy

Apesar dos inúmeros benefícios da fluidoterapia transcirúrgica, sobrecarga de volume pode trazer efeitos deletérios, como a alteração de parâmetros hematimétricos. Dessa maneira, o presente trabalho teve como objetivo avaliar duas diferentes taxas de infusão de solução cristaloide no período transanestésico e seus efeitos até 24 horas pós-operatório. Foram utilizados dois grupos de seis animais cada, um deles recebeu solução de cloreto de sódio 0,9% a 10mL/kg/h (G10) e o outro a 5mL/kg/h (G5). Os valores de hematócrito foram avaliados no período de 24 horas em 10 diferentes momentos. Os resultados não apontaram diferenças significativas entre os grupos, porém foi observada redução significativa do hematócrito após indução anestésica. Foi ainda observada redução de hematócrito após o término da cirurgia em ambos os grupos, e o retorno aos valores basais de hematócrito ocorreu de forma significativa 12 horas após o procedimento cirúrgico em G10, e após oito horas em G5, mostrando uma tendência à hemodiluição mais persistente em G10.(AU)

Despite the beneficial goals of fluid therapy administered during surgery, volume overload can cause deleterious effects, such as alterations on hematimetric parameters. Thus, the objective of this paper was to evaluate two different cristaloid infusion rates during the surgical period and its effects on the 24-hour post-surgical period. Two groups of six animals each were used in the present study, one received 10mL/kg/h (G10) of 0,9% sodium chloride solution and the other 5mL/kg/h (G5) of the same solution. Packed cell volume (PCV) was evaluated in 10 different times during the 24 hours following surgery. The results did not show significant differences between groups, but they showed a major tendency of hemodilution in G10. A significant decrease of PCV was observed after induction of anesthesia. Decrease of PCV after the end of surgery in both groups was also observed, and the return to PCV basal values was observed 12 hours after the procedure in G10 and after eight hours in G5, showing a tendency of prolonged hemodilution in G10.(AU)

Efeito da fluidoterapia transcirúrgica sobre o hematócrito pós-cirúrgico em cadelas submetidas a ovariossalpingo-histerectomia eletiva / Effects of trans surgical fluid therapy over the post surgical packed cell volume in bitches undergoing elective ovariohisterectomy

Apesar dos inúmeros benefícios da fluidoterapia transcirúrgica, sobrecarga de volume pode trazer efeitos deletérios, como a alteração de parâmetros hematimétricos. Dessa maneira, o presente trabalho teve como objetivo avaliar duas diferentes taxas de infusão de solução cristaloide no período transanestésico e seus efeitos até 24 horas pós-operatório. Foram utilizados dois grupos de seis animais cada, um deles recebeu solução de cloreto de sódio 0,9% a 10mL/kg/h (G10) e o outro a 5mL/kg/h (G5). Os valores de hematócrito foram avaliados no período de 24 horas em 10 diferentes momentos. Os resultados não apontaram diferenças significativas entre os grupos, porém foi observada redução significativa do hematócrito após indução anestésica. Foi ainda observada redução de hematócrito após o término da cirurgia em ambos os grupos, e o retorno aos valores basais de hematócrito ocorreu de forma significativa 12 horas após o procedimento cirúrgico em G10, e após oito horas em G5, mostrando uma tendência à hemodiluição mais persistente em G10.(AU)

Despite the beneficial goals of fluid therapy administered during surgery, volume overload can cause deleterious effects, such as alterations on hematimetric parameters. Thus, the objective of this paper was to evaluate two different cristaloid infusion rates during the surgical period and its effects on the 24-hour post-surgical period. Two groups of six animals each were used in the present study, one received 10mL/kg/h (G10) of 0,9% sodium chloride solution and the other 5mL/kg/h (G5) of the same solution. Packed cell volume (PCV) was evaluated in 10 different times during the 24 hours following surgery. The results did not show significant differences between groups, but they showed a major tendency of hemodilution in G10. A significant decrease of PCV was observed after induction of anesthesia. Decrease of PCV after the end of surgery in both groups was also observed, and the return to PCV basal values was observed 12 hours after the procedure in G10 and after eight hours in G5, showing a tendency of prolonged hemodilution in G10.(AU)

IMUNIZAÇÃO ORAL PARA INCREMENTO DA RESPOSTA IMUNOLÓGICA NO CONTROLE DA INFECÇÃO POR Mycoplasma hyopneumoniae EM SUÍNOS

Mycoplasma (M.) hyopneumoniae é o principal patógeno da pneumonia enzoótica suína (PES). Seu controle é desafiador e requer estratégias alternativas à vacinação convencional. Este estudo teve como objetivo desenvolver uma vacina oral contra M. hyopneumoniae utilizando uma sílica mesoporosa nanoestruturada (SBA-15) como adjuvante, e comparar seu efeito com uma vacina comercial intramuscular (IM) (CV). Cinquenta leitões livres de M. hyopneumoniae, com 24 dias de idade, constituíram cinco grupos iguais para diferentes protocolos de imunização, consistindo de uma imunização CV e/ou oral (OI). Os leitões controle não receberam nenhuma forma de imunização. Todos os leitões foram desafiados com M. hyopneumoniae cepa 232 no D49 pela via traqueal. Semanalmente, foram avaliadas a resposta de anticorpos IgA no trato respiratório e a quantificação de DNA bacteriano excretado pela via nasal, e quinzenalmente avaliou-se a IgG sérica. Os leitões foram eutanasiados aos 28 (D77) e 56 (D105) dias pós-infecção. Lesões pulmonares foram avaliadas macroscopicamente; fragmentos de pulmão e fluido broncoalveolar (BALF) foram coletados para estimativa das cargas bacterianas por qPCR e exame histopatológico. Todos os protocolos de imunização induziram redução nas lesões pulmonares macroscópicas Mycoplasma-like. Respostas de IgA anti-M. hyopneumoniae, a expressão da citocina IL-4 e uma expressão mais baixa de IL-8 foram induzidas por vacinas CV e OI, enquanto IgG foi induzida apenas por CV. A imunização oral usando sílica como um carreador adjuvante pode ser viável no controle da infecção por M. hyopneumoniae.

Mycoplasma (M.) hyopneumoniae is the main pathogen of porcine enzootic pneumonia (PEP). Its controlling is challenging, and requires alternative strategies. This study aimed to develop an oral vaccine against M. hyopneumoniae using a nanostructured mesoporous silica (SBA-15) as an adjuvant, and compare its effect with an intramuscular (IM) commercial vaccine (CV). Fifty 24 day-old M. hyopneumoniae-free piglets composed five equal groups for different immunization protocols, consisting of a CV and/or oral immunization (OI). Control piglets did not receive any form of immunization. All piglets were challenged with M. hyopneumoniae strain 232 on D49 by tracheal route. IgA antibody response in the respiratory tract, bacterial shedding and serum IgG were evaluated. The piglets were euthanized on 28 (D77) and 56 (D105) days post-infection. Lung lesions were macroscopically evaluated; lung fragments and bronchoalveolar fluid (BALF) were collected for estimation of bacterial loads by qPCR and/or histopathology examination. All immunization protocols induced reduction on Mycoplasma-like macroscopic lung lesions. IgA Ab responses anti-M. hyopneumoniae, the expression of IL-4 cytokine and a lower expression of IL-8 were induced by CV and OI vaccines, while IgG was induced only by CV. Oral immunization using silica as a carrier-adjuvant can be viable in controlling M. hyopneumoniae infection

DETECÇÃO MOLECULAR DE CIRCOVÍRUS SUÍNO 3 EM FLUÍDO ORAL DE SUÍNOS EM FASE DE TERMINAÇÃO NO OESTE DE SANTA CATARINA

A suinocultura nacional tem evoluído de forma contínua há décadas, melhorando índices reprodutivos, zootécnicos, de biosseguridade e bem-estar animal. Da mesma forma, a intensificação do confinamento dos animais favoreceu a transmissão de agentes infeciosos, resultando em desafios sanitários. Os vírus estão entre os principais desafios para manutenção da sanidade das granjas de suínos. Um dos principais, se não o principal agente patogênico na suinocultura é o circovírus suíno 2 (PCV2). Em 2015, um novo circovírus foi descrito em suínos com quadro clínico de circovirose, incluindo inflamação multissistêmica e problemas reprodutivos. Devido as similaridades estruturais dos vírions e a doença relacionada, este agente foi denominado circovírus suíno 3 (PCV3). Desde então, diversos estudos têm demonstrado o potencial patogênico deste agente, assim como a ampla distribuição deste vírus em suínos domésticos e selvagens em diversos países. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi realizar o diagnóstico e sequenciamento molecular de PCV3 em suínos em fase de terminação de granjas no oeste de Santa Catarina, importante região produtora de suínos no Brasil. As amostras foram obtidas através de coleta de fluido oral (FO), amostra de alta qualidade e utiliza um processo não invasivo e que leva em consideração o comportamento natural dos suínos. Foram acessadas amostras de 110 granjas de fase de terminação, de animais clinicamente saudáveis com idade aproximada de 100 dias. Utilizando cordas, pools de FO de 110 granjas (um pool por baia contendo 12 animais cada), contemplando desta forma uma amostragem de 1.320 suínos. As amostras foram processadas e o DNA viral foi extraído e submetido a PCR. Um total de 79 dos 110 pools (72%) foram positivos na PCR para PCV3. A sequência parcial de nucleotídeos do gene do capsídeo (ORF2) de cinco amostras foi obtida e submetidos ao banco de dados GenBank. Quando realizada a análise filogenética utilizando sequências de amostras brasileiras e de países da Europa e Ásia, fica evidente a diversidade entre as sequências obtidas. Os resultados deste estudo demonstram que o PCV3 está amplamente distribuído no oeste de Santa Catarina, maior produtor de suínos do Brasil.

National swine farming has evolved continuously for decades, improving reproductive, zootechnical, biosecurity and animal welfare rates. Likewise, the intensification of the animals' confinement favored the transmission of infectious agents, resulting in health challenges. Viruses are among the main challenges for maintaining the health of pig farms. One of the main, if not the main pathogenic agent in swine farming is the porcine circovirus 2 (PCV2). In 2015, a new circovirus was described in pigs with a clinical condition of circovirus associated disease, including multisystemic inflammation and reproductive failure. Due to the virion structure similarities and related disease, this agent was named porcine circovirus 3 (PCV3). Since then, several studies have demonstrated the pathogenic potential of this agent, as well as the worldwide distribution of this virus in domestic and wild pigs, including Brazil. Thereby, the objective of this study was to perform the molecular diagnosis of PCV3 in finishing swine of farms in Western Santa Catarina State. The samples were obtained through the collection of oral fluid (OF), a non-invasive process based on the natural behavior of swine. Samples from 110 finishing swine farms were accessed from clinically healthy animals. Using ropes, pools of FO from 110 farms (one pool per pen contain 12 animals each), contemplating a sampling of 1,320 swine. Together, the 110 farms housed approximately 74,805 pigs at the time of collection. The samples were processed and the viral genome was extracted and subjected to PCR. A total of 79 out of 110 pools (72%) were positive for PCV3 by PCR. The nucleotide sequence of the capsid gene (ORF2) from five samples was obtained and submitted to the GenBank database. When phylogenetic analysis was performed using sequences from Brazilian samples and from countries in Europe and Asia, the diversity between the sequences obtained in the present study was observed. The results of this study demonstrate that PCV3 is widely distributed in Western Santa Catarina, the largest pork producer in Brazil.

GENETIC VARIABILITY OF NEW BRAZILIAN PCV2D STRAINS AND THEIR RELATION TO COMMERCIAL VACCINES

No presente estudo 246 amostras clínicas oriundas de granjas de suínos comerciais nas regiões sul, sudeste e centr-oeste do Brasil, previamente vacinadas contra PCV2 e que apresentavam sinais clínicos compatíveis com PCVD foram submetidas para genotipagem de PCV2. O tipo de material enviado para diagnóstico foram amostras de fluido oral, soro e pool de órgãos linfoides. Das amostras analisadas, 106 (43.09% - 106/246) foram genotipadas, sendo 75.47% (80/106) identificadas como PCV2d e 22.64% (24/106) identificadas como PCV2b. Em 2/106 (1.89%) amostras foram verificadas co-infecção de PCV2b e PCV2d. Não houve detecção do genótipo PCV2a nas amostras analisadas. Dentre as amostras clínicas analisadas, o fluido oral obteve um maior número de amostras genotipadas (40/106-37.74%), seguido de pool de órgãos linfóides e soro, com o mesmo número de amostras genotipadas (33/106- 31.13%). Adicionalmente, 51 amostras clínicas brasileiras coletadas em 2019 foram enviadas para sequenciamento genético do gene ORF2, que codifica a proteína do capsídeo viral (Cap). Destas, 25 apresentaram boa qualidade para análise, sendo 8 genotipadas como PCV2b e 17 como PCV2d, confirmando que no Brasil, como descrito mundialmente, houve o aumento do genótipo PCV2d. Para analisar a distribuição temporal dos genótipos e flutuação mundial dos genótipos desde 1993 à 2019, 3,544 sequencias disponíveis no GenBank foram analisadas, demonstrando um considerável aumento do genótipo PCV2d a partir de 2006, sendo hoje, o genótipo mais prevalente no mundo. Para estimar a variabilidade da Cap protein de nossas sequencias de PCV2d, comparamos nossas amostras com outras 1,300 sequencias de PCV2d disponíveis no GenBank. Com o objetivo de avaliar a possível pressão vacinal sobre o o genótipo PCV2d, separamos as sequencias em 4 grupos: (1) Pre vacinação (PreVacD) - sequencias de amostras coletadas antes de 2006; (2) Pós vacinação (PosVacD) - sequencias de amostras coletadas entre 2007 e 2020; (3) sequencias de suínos selvagens ou de vida livre(WboarD) que não sofreram pressão vacinal; e (4) nossas sequencias de PCV2d (TestD), analisadas no presente estudo.. Devido às possíveis falhas vacinais observadas nas granjas de suínos comerciais no Brasil, as amostras de PCV2d sequenciadas no presente estudo foram comparadas com as sequencias da ORF2 disponíveis de três vacinas comercias utilizadas no Brasil, uma contendo o genótipo PCV2b e duas contendo o genótipo PCV2a. Grande parte dos resíduos de aminoácidos que se encontram dentro de regiões de epítopo são conservadas, sugerindo uma boa reação cruzada entre as amostras vacinais e as amostras de PCV2d analisadas. Contudo, em alguns resíduos de aminoácidos em sítios antigênicos, essencias para ligação de anticorpos e, consequentemente, neutralização viral, foram detectadas mutações entre as sequencias de PCV2d e as sequencias vacinais. Este resultado sugere que estas mutações possam ter importancia em relação à resposta. Porém, mais estudos devem ser realizados para elucidar essas questões, principalmente a implementação de processos de vigilância de genótipos de Circovirus suínos tipo 2 circulantes no Brasil.

In the present study, 246 clinical samples from commercial pig farms located in the south, southeast and central-west regions of Brazil previously vaccinated against PCV2 and showing clinical signs compatible with PCVD were submitted for PCV2 genotyping. The type of material sent for diagnosis were samples of oral fluid, serum and lymphoid organs pool. Of the analyzed samples, 106 (43.09% - 106/246) were genotyped, with 75.47% (80/106) identified as PCV2d and 22.64% (24/106) as PCV2b. In 2/106 (1.89%) samples, coinfection of PCV2b and PCV2d was observed. There was no detection of the PCV2a genotype in the analyzed samples. Among the analyzed clinical samples, oral fluid obtained the greater number of genotyped samples (40/106- 37.74%), followed by pool of lymphoid organs and serum, with the same number of genotyped samples (33/106-31.13%) . Additionally, 51 Brazilian clinical samples collected in 2019 were sent for genetic sequencing of the ORF2 gene, widely used for genomic/protein analysis, which encodes for the viral capsid protein (Cap). Of these, 25 had good quality for analysis, and 8 were genotyped as PCV2b and 17 as PCV2d, corroborating many other publications around the world that demonstrated the increase of the PCV2d genotype. To analyze the temporal distribution of genotypes and fluctuation of genotypes from 1993 to 2019 worldwide, 3,544 sequences available in GenBank were analyzed, demonstrating a considerable increase in the PCV2d genotype since 2006, today the most prevalent genotype in the world. To estimate the Cap protein variability of our PCV2d sequences, our results were compared to other 1,300 PCV2d sequences available in GenBank. In order to assess the possible pressure of the vaccine against the PCV2d genotype population infection, four groups of samples were defined: (1) Prevaccination (PreVacD) - sequences from samples collected before 2006; (2) Post-vaccination (PosVacD) - sequences of samples collected between 2007 and 2020; (3) sequences from wild or feral pigs (WboarD) that were not vaccinated, and (4) our PCV2d sequences (TestD) analyzed in the present study. Due to possible vaccine failures observed in commercial pig farms in Brazil, the PCV2d sequenced samples in the present study were compared to the ORF2 amino acid sequences available from three commercial vaccines used in Brazil, one containing the PCV2b genotype and 2 containing the PCV2a genotype. Most of the amino acid residues found within epitope regions were conserved, suggesting a good cross-reaction between vaccines and the analyzed PCV2d samples. However, in some amino acid residues in antigenic sites essential for antibody binding and consequently viral neutralization, mutations were detected in PCV2d sequences and in vaccine sequences. This result may suggest that these mutations might be involved in the vaccine immune response. However, further studies must be carried out to elucidate these aspects, especially the implementation of surveillance processes of Porcine Circovirus type 2 genotypes circulating in Brazil.

Extramedullary plasmacytoma in a captive collared peccary (Pecari tajacu) / Plasmocitoma extramedular em cateto criado em cativeiro (Pecari tajacu)

An extramedullary plasmacytoma case in a captive collared peccary (Pecari tajacu) is reported. The animal, a female aging three years old, had a medical history of diffusely distributed skin and mucocutaneous junction lesions, associated with swollen lymph nodes. Clinical examination and complementary exams (complete blood count, biochemical analysis, skin scraping to search mites and fungal culture) were performed. Thirty days after examination, the animal died. At necropsy, multiple consistent nodules, aseptic pustules and swollen lymph nodes were found. On histological exams of the skin and oral mucosa, we observed a large number of round cells forming masses organized in nests, sheets, and cords of cells in a well-vascularized fibrovascular tissue. Neoplastic plasma cells infiltrated between the fibers and the lamina propria of smooth muscle. Spaces among the cell masses were filled with some eosinophil and fluid. Most of the cells were well differentiated, presenting a perinuclear clear zone. In some points, the cells were pleomorphic. The plasma cells presented eccentric, basophilic and spherical nuclei, showing a dense to organized chromatin with distinct nucleoli. Binucleate cells were observed, but multinucleated giant cells were rare. Oral mucosa and lymph nodes tested by immunohistochemical analyses were positive for Mb-1, with a multifocal distribution. In regard to Bcl-2, the neoplastic cells were intermittent weakly positive. So, an extramedullary plasmacytoma was diagnosed in the collared peccary considering the location, the histopathological and immunohistochemical findings.(AU)

Um caso de plasmocitoma extramedular em cateto criado em cativeiro (Pecari tajacu) está sendo relatado. O animal, uma fêmea com três anos de idade, apresentou um histórico médico de lesões de pele, envolvendo junção mucocutânea e de aumento de linfonodos. Exame clínico e exames complementares (hemograma completo, análise bioquímica, raspado de pele para pesquisa de ácaros e cultura fúngica) foram realizados. Após 30 dias, o animal morreu. Na necropsia, verificou-se a presença de múltiplos nódulos, pústulas assépticas e aumento dos linfonodos. Na pele e mucosa oral, histologicamente as massas consistiam em ninhos, lençóis e cordões de células redondas, e um estroma fibrovascular bem vascularizado. Os plasmócitos foram observados infiltrados entre as fibras e músculo liso da lâmina própria. Espaços contendo eosinófilos, fluido e células livres estavam presentes na massa. A maioria das células estava bem diferenciada, com uma zona perinuclear clara, mas algumas células demonstraram-se pleomórficas. Os plasmócitos apresentavam núcleo excêntrico, redondo, basófilo, e pontilhado, com cromatina variando de densa a grosseiramente organizada e nucléolos distintos. O citoplasma finamente granular de anfifílico para basofílico. As células foram interpretadas como plasmócitos neoplásicos. Células binucleadas foram observadas e células gigantes multinucleadas eram raras. Na imunohistoquímica de tecidos da mucosa oral e de linfonodos observou-se positividade moderada e multifocal para Mb-1. As células tumorais revelaram positividade fraca e intermitente para Bcl-2. Com base na localização, achados histopatológicos e imuno-histoquímicos, um plasmocitoma extramedular foi diagnosticado.(AU)

Extramedullary plasmacytoma in a captive collared peccary (Pecari tajacu) / Plasmocitoma extramedular em cateto criado em cativeiro (Pecari tajacu)

An extramedullary plasmacytoma case in a captive collared peccary (Pecari tajacu) is reported. The animal, a female aging three years old, had a medical history of diffusely distributed skin and mucocutaneous junction lesions, associated with swollen lymph nodes. Clinical examination and complementary exams (complete blood count, biochemical analysis, skin scraping to search mites and fungal culture) were performed. Thirty days after examination, the animal died. At necropsy, multiple consistent nodules, aseptic pustules and swollen lymph nodes were found. On histological exams of the skin and oral mucosa, we observed a large number of round cells forming masses organized in nests, sheets, and cords of cells in a well-vascularized fibrovascular tissue. Neoplastic plasma cells infiltrated between the fibers and the lamina propria of smooth muscle. Spaces among the cell masses were filled with some eosinophil and fluid. Most of the cells were well differentiated, presenting a perinuclear clear zone. In some points, the cells were pleomorphic. The plasma cells presented eccentric, basophilic and spherical nuclei, showing a dense to organized chromatin with distinct nucleoli. Binucleate cells were observed, but multinucleated giant cells were rare. Oral mucosa and lymph nodes tested by immunohistochemical analyses were positive for Mb-1, with a multifocal distribution. In regard to Bcl-2, the neoplastic cells were intermittent weakly positive. So, an extramedullary plasmacytoma was diagnosed in the collared peccary considering the location, the histopathological and immunohistochemical findings.(AU)

Um caso de plasmocitoma extramedular em cateto criado em cativeiro (Pecari tajacu) está sendo relatado. O animal, uma fêmea com três anos de idade, apresentou um histórico médico de lesões de pele, envolvendo junção mucocutânea e de aumento de linfonodos. Exame clínico e exames complementares (hemograma completo, análise bioquímica, raspado de pele para pesquisa de ácaros e cultura fúngica) foram realizados. Após 30 dias, o animal morreu. Na necropsia, verificou-se a presença de múltiplos nódulos, pústulas assépticas e aumento dos linfonodos. Na pele e mucosa oral, histologicamente as massas consistiam em ninhos, lençóis e cordões de células redondas, e um estroma fibrovascular bem vascularizado. Os plasmócitos foram observados infiltrados entre as fibras e músculo liso da lâmina própria. Espaços contendo eosinófilos, fluido e células livres estavam presentes na massa. A maioria das células estava bem diferenciada, com uma zona perinuclear clara, mas algumas células demonstraram-se pleomórficas. Os plasmócitos apresentavam núcleo excêntrico, redondo, basófilo, e pontilhado, com cromatina variando de densa a grosseiramente organizada e nucléolos distintos. O citoplasma finamente granular de anfifílico para basofílico. As células foram interpretadas como plasmócitos neoplásicos. Células binucleadas foram observadas e células gigantes multinucleadas eram raras. Na imunohistoquímica de tecidos da mucosa oral e de linfonodos observou-se positividade moderada e multifocal para Mb-1. As células tumorais revelaram positividade fraca e intermitente para Bcl-2. Com base na localização, achados histopatológicos e imuno-histoquímicos, um plasmocitoma extramedular foi diagnosticado.(AU)

Histological aspects of the mucosa of the spermaceti chamber of a dwarf sperm whale / Aspectos histológicos da mucosa da câmera do espermacete de cachalote-anão

The sound producing apparatus of the dwarf sperm whale (Kogia sima) presents a complex anatomic structure composed of melon, spermaceti, phonic lips, vocal cap, case, papillae, spermaceti chamber and other airspaces, as well as facial muscles involved in sound production. The spermaceti chamber rests on the caudal portion of the premaxilla, with part of its mucosa covered with spherical/oval-shaped structures (approximately 1 to 2 mm in diameter), compatible with vesicles (previously referred to as "papillae"). Macroscopical examination revealed whitish, firm, widely and irregularly distributed vesicular mucosa on the premaxillary portion of the spermaceti chamber of a K. sima specimen stranded on the coast of Santos (southeastern Brazilian coast). Upon microscopic examination, walls of connective tissue with abundant type I collagen forming vesicles with an internal space or cavity filled with a small amount of eosinophilic substance compatible with mucoproteic fluid were observed. The base of such vesicles presented glands within the connective tissue, probably responsible for fluid production. This study describes the histology of the mucosa of the spermaceti chamber of a K. sima specimen and characterizes the glands associated with fluid production.(AU)

O sistema de produção sonora do cachalote-anão (Kogia sima) apresenta uma complexa estrutura anatômica composta por melão, espermacete, lábios fônicos, "vocal cap", "case", papilas, câmara do espermacete e outros espaços aéreos, além de músculos faciais envolvidos na produção sonora. A câmara do espermacete localiza-se na porção caudal da pré-maxila, apresentando parte de sua mucosa recoberta por estruturas esférico-ovaladas de aproximadamente 1 a 2 mm de diâmetro, compatíveis com vesículas (previamente denominadas "papilas"). Ao exame macroscópico de um espécime de K. sima encalhado no litoral de Santos (sudeste da costa brasileira), foi identificada mucosa esbranquiçada e firme ao corte, ampla e irregularmente distribuída na porção pré-maxilar da câmara do espermacete. Ao exame microscópico foram observadas vesículas compostas por abundante tecido conectivo de colágeno tipo I, dando origem a um espaço interno ou cavidade, contendo pequena quantidade de substância eosinófila, compatível com fluido mucoprotêico. Estruturas glandulares foram observadas em tecido conjuntivo na base das vesículas, provavelmente responsáveis pela produção do fluido observado no interior das mesmas. Esse estudo caracteriza histologicamente a mucosa da câmara do espermacete de um espécime de K. sima e as glândulas relacionadas a sua produção secretória.(AU)

Histological aspects of the mucosa of the spermaceti chamber of a dwarf sperm whale / Aspectos histológicos da mucosa da câmera do espermacete de cachalote-anão

The sound producing apparatus of the dwarf sperm whale (Kogia sima) presents a complex anatomic structure composed of melon, spermaceti, phonic lips, vocal cap, case, papillae, spermaceti chamber and other airspaces, as well as facial muscles involved in sound production. The spermaceti chamber rests on the caudal portion of the premaxilla, with part of its mucosa covered with spherical/oval-shaped structures (approximately 1 to 2 mm in diameter), compatible with vesicles (previously referred to as “papillae”). Macroscopical examination revealed whitish, firm, widely and irregularly distributed vesicular mucosa on the premaxillary portion of the spermaceti chamber of a K. sima specimen stranded on the coast of Santos (southeastern Brazilian coast). Upon microscopic examination, walls of connective tissue with abundant type I collagen forming vesicles with an internal space or cavity filled with a small amount of eosinophilic substance compatible with mucoproteic fluid were observed. The base of such vesicles presented glands within the connective tissue, probably responsible for fluid production. This study describes the histology of the mucosa of the spermaceti chamber of a K. sima specimen and characterizes the glands associated with fluid production.(AU)

O sistema de produção sonora do cachalote-anão (Kogia sima) apresenta uma complexa estrutura anatômica composta por melão, espermacete, lábios fônicos, “vocal cap”, “case”, papilas, câmara do espermacete e outros espaços aéreos, além de músculos faciais envolvidos na produção sonora. A câmara do espermacete localiza-se na porção caudal da pré-maxila, apresentando parte de sua mucosa recoberta por estruturas esférico-ovaladas de aproximadamente 1 a 2 mm de diâmetro, compatíveis com vesículas (previamente denominadas “papilas”). Ao exame macroscópico de um espécime de K. sima encalhado no litoral de Santos (sudeste da costa brasileira), foi identificada mucosa esbranquiçada e firme ao corte, ampla e irregularmente distribuída na porção pré-maxilar da câmara do espermacete. Ao exame microscópico foram observadas vesículas compostas por abundante tecido conectivo de colágeno tipo I, dando origem a um espaço interno ou cavidade, contendo pequena quantidade de substância eosinófila, compatível com fluido mucoprotêico. Estruturas glandulares foram observadas em tecido conjuntivo na base das vesículas, provavelmente responsáveis pela produção do fluido observado no interior das mesmas. Esse estudo caracteriza histologicamente a mucosa da câmara do espermacete de um espécime de K. sima e as glândulas relacionadas a sua produção secretória.(AU)

Histological aspects of the mucosa of the spermaceti chamber of a dwarf sperm whale / Aspectos histológicos da mucosa da câmera do espermacete de cachalote-anão

The sound producing apparatus of the dwarf sperm whale (Kogia sima) presents a complex anatomic structure composed of melon, spermaceti, phonic lips, vocal cap, case, papillae, spermaceti chamber and other airspaces, as well as facial muscles involved in sound production. The spermaceti chamber rests on the caudal portion of the premaxilla, with part of its mucosa covered with spherical/oval-shaped structures (approximately 1 to 2 mm in diameter), compatible with vesicles (previously referred to as “papillae”). Macroscopical examination revealed whitish, firm, widely and irregularly distributed vesicular mucosa on the premaxillary portion of the spermaceti chamber of a K. sima specimen stranded on the coast of Santos (southeastern Brazilian coast). Upon microscopic examination, walls of connective tissue with abundant type I collagen forming vesicles with an internal space or cavity filled with a small amount of eosinophilic substance compatible with mucoproteic fluid were observed. The base of such vesicles presented glands within the connective tissue, probably responsible for fluid production. This study describes the histology of the mucosa of the spermaceti chamber of a K. sima specimen and characterizes the glands associated with fluid production.

O sistema de produção sonora do cachalote-anão (Kogia sima) apresenta uma complexa estrutura anatômica composta por melão, espermacete, lábios fônicos, “vocal cap”, “case”, papilas, câmara do espermacete e outros espaços aéreos, além de músculos faciais envolvidos na produção sonora. A câmara do espermacete localiza-se na porção caudal da pré-maxila, apresentando parte de sua mucosa recoberta por estruturas esférico-ovaladas de aproximadamente 1 a 2 mm de diâmetro, compatíveis com vesículas (previamente denominadas “papilas”). Ao exame macroscópico de um espécime de K. sima encalhado no litoral de Santos (sudeste da costa brasileira), foi identificada mucosa esbranquiçada e firme ao corte, ampla e irregularmente distribuída na porção pré-maxilar da câmara do espermacete. Ao exame microscópico foram observadas vesículas compostas por abundante tecido conectivo de colágeno tipo I, dando origem a um espaço interno ou cavidade, contendo pequena quantidade de substância eosinófila, compatível com fluido mucoprotêico. Estruturas glandulares foram observadas em tecido conjuntivo na base das vesículas, provavelmente responsáveis pela produção do fluido observado no interior das mesmas. Esse estudo caracteriza histologicamente a mucosa da câmara do espermacete de um espécime de K. sima e as glândulas relacionadas a sua produção secretória.

Detecção de Enterobacteriaceae e avaliação do perfil de resistência aos antimicrobianos de cepas isoladas a partir de fluido oral de suínos

ALVES, V. B. A. Detecção de Enterobacteriaceae e avaliação do perfil de resistência aos antimicrobianos de cepas isoladas a partir de fluido oral de suínos. 2020. 56 f. Dissertação (Mestrado) Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de São Paulo, Pirassununga, 2020. O monitoramento de doenças na suinocultura é muito importante para manter o bem-estar animal e aumentar a produtividade. O fluido oral tem sido apresentado como uma amostra biológica alternativa para a detecção de patógenos e anticorpos. Apesar de muitos estudos descreverem o uso dessa amostra para detecção de agentes virais, pouco tem sido aplicado para o monitoramento de doenças bacterianas de importância na saúde pública. Este trabalho avaliou o isolamento de Escherichia coli e Salmonella enterica subsp. enterica através do fluido oral de suínos, assim como avaliou o perfil de resistência das cepas isoladas e a presença de genes de toxinas de E. coli enterotoxigênica (ETEC), em cinco granjas comerciais de ciclo completo do Estado de São Paulo. Não houve resultados de isolamento de Salmonella enterica subsp. enterica através dos protocolos de cultura, assim como não houve detecção de genes de Salmonella spp. por PCR convencional. Não houve diferença entre os isolamentos de E. coli realizados através de fezes e fluido oral (P>0,05), e os mesmos obtiveram resistência à antimicrobianos importantes para a saúde humana. Sugere-se assim que o fluido oral possa ser utilizado como amostra biológica para a monitoria sanitária de E. coli, e ressalta-se a importância do monitoramento do perfil de resistência de cepas isoladas como indicadores do impacto do uso de antimicrobianos nas produções animais.

ALVES, V. B. A. Detection of Enterobacteriaceae and evaluation of the antimicrobial resistance profile of isolated strains from swines oral fluid. 2020. 56 p. M.Sc. Dissertation Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Universidade de Sao Paulo, Pirassununga, 2020. The screening of diseases in swine production is very important to maintaining animal welfare and increasing productivity. The oral fluid has been shown as an alternative biological sample for detecting pathogens and antibodies. Although many studies have described the utilization of this sample for viral agents, little has been applied in monitoring bacteria diseases of public health importance. This study tested the isolation of Escherichia coli and Salmonella enterica subsp. enterica from pigs oral fluid, and evaluated the antimicrobial resistance profile of the isolated strains, as well as the presence of virulence genes of enterotoxigenic E. coli (ETEC) from five swine farms in the state of Sao Paulo, Brazil. There was no isolation of Salmonella enterica subsp. enterica through the protocols tested, neither there was detection of Salmonella spp. genes through conventional PCR. There was no difference when comparing the isolation of E. coli from feces and oral fluid (P>0,05), and the isolates showed resistance to important antimicrobial formulas in human health. We suggest that oral fluid can be used as a biological sample for the detection of E. coli, and we highlight the importance of monitoring the resistance of isolated strains as an indicator of antimicrobial usage in animal husbandry.

Fisiologia comparada do fluido oral e suas principais aplicações clínicas / Comparative physiology of fluid oral and main clinical applications / Fisiología comparada del fluido oral y sus principales aplicaciones clínicas

O fluido oral é um líquido incolor e viscoso que resulta da combinação entre a saliva e os transudatos da cavidade oral, transudato da mucosa oral e fluido crevicular gengival. A saliva é secretada pelas glândulas salivares, enquanto o transudatos da cavidade oral tem origem nos capilares da mucosa e nos tecidos gengivais. O uso do fluido oral é assegurando por uma ampla base de investigações científicas na medicina humana e veterinária. Vários patógenos podem ser avaliados pela reatividade de anticorpos e ou identificação de antígenos. Além disso, o procedimento de coleta é simples, não invasivo e garante uma amostragem sistemática nos diagnósticos clínicos e em pesquisas. Por conseguinte, as informações relacionadas à secreção e composição, bem como os mecanismos de transporte dos componentes do fluido oral são de grande valor. Objetivou-se com este trabalho realizar uma revisão de literatura sobre o fluido oral, enfatizando o processo de secreção, composição, mecanismos de transporte de substâncias, bem como suas aplicações clínicas e principais limitações nos seres humanos e nos animais domésticos.(AU)

The oral fluid is a colorless and viscous liquid that results from the combination of saliva and transudates of oral cavity, oral mucosal transudate and gingival crevicular fluid. Saliva is secreted from the salivary glands, while the transudates of oral cavity as its origin in capillary mucosa and gingival tissues. The use of oral fluid is thereby ensuring a broad base of scientific research in human and veterinary medicine. Several pathogens can be assessed by reactivity or identification of antibodies and antigens. Furthermore, the collection procedure is simple, noninvasive and provides a systematic sampling in clinical diagnostics and in research. Therefore, the information related to the secretion and composition as well as the transport mechanisms of the oral fluid components are of great value. The aim of this work is make a critical review of the oral fluid, emphasizing the process of secretion and composition, transport mechanisms of the substances present in the plasma to the oral cavity and its clinical applications and major limitations in humans and domestic animals.(AU)

El fluido oral es un líquido incoloro y viscoso que resulta de la combinación entre la saliva y los trasudados de la cavidad oral, trasudado de la mucosa oral y fluido crevicular gingival. La saliva es secretada por las glándulas salivales, mientras el trasudado de la cavidad oral tiene origen en los capilares de la mucosa y en los tejidos gingivales. El uso del fluido oral es garantizado por una amplia base de investigaciones científicas en la medicina humana y veterinaria. Varios agentes patógenos pueden ser evaluados por la reactividad de anticuerpos y/o la identificación de antígenos. Además, el procedimiento de recogida es simple, no invasivo, y asegura un muestreo sistemático en los diagnósticos clínicos y en la investigación. Por lo tanto, las informaciones relacionadas con la secreción y composición, así como los mecanismos de transporte de los componentes del fluido oral son importantes. El objetivo de este estudio fue realizar una revisión de la literatura sobre el fluido oral, destacando el proceso de secreción, composición, mecanismos de transporte de sustancias, así como sus aplicaciones clínicas y principales limitaciones en los seres humanos y en los animales domésticos.(AU)

DETECÇÃO DO Circovírus suíno, Mycoplasma hyopneumoniae e Actinobacillus pleuropneumoniae ENVOLVIDOS NO COMPLEXO RESPIRATÓRIO SUÍNO NO ESTADO DE PERNAMBUCO

O objetivo deste trabalho foi pesquisar a circulação dos agentes etiológicos envolvidos no Complexo Respiratório Suíno (CRS), tais como o Circovírus suíno 2 (PCV2), Mycoplasma hyopneumoniae (M. hyopneumoniae) e Actinobacillus pleuropneumoniae (A. pleuropneumoniae) por meio do ELISA, bem como detectar pela qPCR o Circovírus suíno (PCV) no fluido oral, sangue, fragmentos de pulmão e de linfonodo mediastínico em suínos abatidos em Pernambuco. Foram coletadas amostras biológicas de animais na fase de terminação, clinicamente saudáveis, sem histórico de vacinação para os agentes estudados e destinados ao abate comercial. As amostras foram provenientes de sete municípios Camaragibe, São Lourenço da Mata, Paudalho, Lagoa do Carro, João Alfredo, Gravatá e Caruaru distribuídos nas mesorregiões Metropolitana, Zona da Mata e Agreste. Realizou-se o teste ELISA para detecção de anticorpos anti-PCV2 (N=471), anti-M. hyopneumoniae (N=472), anti-A. pleuropneumoniae (N=153) no soro, além da PCR quantitativa (qPCR) para detecção do PCV em amostras de fluido oral (N=60), sangue (N=24), fragmentos do pulmão (N=23) e do linfonodo mediastínico (N=23). Os resultados do ELISA revelaram que 97,2% das amostras de soro foram reagentes para o PCV2, 81,8% positivas para o M. hyopneumoniae e 40,5% positivas para o A. pleuropneumoniae. Todos os municípios de origem dos animais foram positivos/reagentes para todos os três agentes. Houve uma frequência relativamente maior (43,7%) de animais que apresentaram-se concomitantemente positivos/reagentes contra o M. hyopneumoniae/PCV2 e negativos para o A. pleuropneumoniae. Todos os animais apresentaram-se positivos/reagentes para pelo menos um dos agentes estudados, sendo o PCV2 aquele que apresentou maior frequência de reagentes na presença de outro agente positivo (89,4%). Houve também correlação positiva, baixa (rs=0,146) e significativa (p<0,05) entre os valores do ELISA nos animais positivos para M. hyopneumoniae e reagentes para o PCV2. O resultado da qPCR para detecção do PCV revelou que 86,6% das amostras de fluido oral apresentaram-se com carga viral negativa, 10% com carga viral muito baixa e 3,33%, carga viral baixa. Somente 8,69% dos fragmentos de linfonodo apresentaram-se positivos para o PCV, enquanto que o pulmão, 26,08%. Todas as amostras de sangue foram negativas para a presença do DNA do PCV, porém, nos mesmos animais, todas as amostras de soro foram reagentes contra o PCV2. Os suínos produzidos nos municípios amostrados e pertencentes às mesorregiões pernambucanas: Metropolitana, Zona da mata e Agreste encontram-se expostos aos agentes PCV2, M. hyopneumoniae e A. pleuropneumoniae em algum momento da fase de criação, sendo o PCV2 o agente mais amplamente distribuído e associado às coinfecções nos animais pesquisados. Sugere-se que ocorra uma relação sinérgica entre o PCV2 e o M. hyopneumoniae nas coinfecções. A ocorrência de dois ou mais agentes respiratórios em um mesmo animal revela uma necessidade urgente de controle e redução dos fatores de riscos associados aos patógenos, uma vez que as coinfecções geralmente estão associadas a sinais clínicos mais severos do CRS e, portanto, maiores perdas econômicas. A utilização do fluido oral como amostra biológica incita a necessidade de aprofundamento nos estudos comparando os diferentes métodos de coleta, processamento, armazenamento e extração do DNA desse tipo de amostra.

The aims of the present study are to investigate the circulation of etiological agents such as Porcine circovirus 2 (PCV2), Mycoplasma hyopneumoniae (M. hyopneumoniae) and Actinobacillus pleuropneumoniae (A. pleuropneumoniae), responsible for Porcine Respiratory Disease Complex (PRDC) through ELISA test, as well as to detect Porcine circovirus (PCV) through qPCR in samples of oral fluid, blood, lung and in lymph node fragments of pigs slaughtered in Pernambuco State. Biological samples of clinically healthy finishing pigs bred for commercial slaughter, without history of vaccination, were collected in order to find the herein investigated agents. The biological samples were collected in seven counties, namely: Camaragibe, São Lourenço da Mata, Paudalho, Lagoa do Carro, João Alfredo, Gravatá and Caruaru. These counties are distributed in three mesoregions in Pernambuco State: Metropolitan, Forest Zone and Agreste. ELISA was carried out to assess anti-PCV2 (N=471), anti-M. hyopneumoniae (N=472) anti-A antibodies and pleuropneumoniae (N=153) in serum samples. Quantitative PCR (qPCR) was also performed to detect PCV in oral fluid (N=60), blood (N=24), lung (N=23) and lymph node samples (N=23). Based on ELISA results, 97.2% of all serum samples were reactive to PCV2, 81.8% were positive to M. hyopneumoniae and 40.5% were positive to A. pleuropneumoniae. The counties of origin of all animals were positive/reactive to the three analyzed agents. There was a relatively higher frequency (43.4%) of animals who were simultaneously positive/reactive against M. hyopneumoniae/PCV2 and negative to A. pleuropneumoniae. All animals were positive/reactive to at least one of the assessed agents. PCV2 recorded the highest frequency of reagents in the presence of other positive agents (89.4%). There was positive, low (rs=0.146) and significant (p<0.05) correlation between ELISA values in positive M. hyopneumoniae and PCV2-reactant animals. Based on the qPCR results recorded for PCV detection, 86.6% of all oral fluid samples presented negative viral load, 10% of them showed very low viral load and the remaining 3.33% had low viral load. Only 8.69% of the collected lymph node fragments were positive to PCV, whereas 26.08% of lung samples was positive to it. All blood samples were negative to PCV DNA, but all serum samples were reactive to PCV2 in these same animals. Pigs bred in the sampled counties in the mesoregions of Pernambuco State (Metropolitan, Forest Zone and Agreste) were exposed to PCV2, M. hyopneumoniae and A. pleuropneumoniae at some point in the breeding phase. PCV2 was the most widely distributed agent and it was associated with co-infections in the assessed animals. This finding suggests synergistic relationship between PCV2 and M. hyopneumoniae in coinfections. The occurrence of two or more respiratory agents in the same animal revealed the urgent need of controlling and reducing risk factors associated with pathogens, since coinfections are often associated with severe clinical signs of PRDC and, consequently, with greater economic losses. The use of oral fluid as biological sample triggers the need of further studies to compare different DNA collection, processing, storage and extraction methods for this sample type.

Alterações na articulação temporomandibular de equinos

Atualmente não há descrição da associação de maloclucões com patologias na articulação temporomandibular dos equinos. Os estudos apenas estabelecem associação da idade com alterações em exames de imagem e biomarcadores inflamatórios da articulação. O objetivo deste trabalho foi estudar animais de diferentes idades com presença de maloclusões e determinar sua associação com alterações articulares. Foram utilizados 19 equinos, totalizando 38 articulações analisadas. Os animais foram divididos em grupos com idade inferior a cinco anos (8 animais); entre cinco e 10 anos (6 animais) e acima de 10 anos (5 animais). Os animais foram submetidos a exame físico da cavidade oral e da articulação temporomandibular, avaliação de temperatura superficial, ultrassonografia, radiografia e análise de fluido sinovial. Foram feitas comparações entre os grupos e associação entre maloclusões dentárias e idade, maloclusões e alterações na articulação, idade e características do fluido sinovial, além de idade e tipos de alterações radiográfica e ultrassonográfica. Os dados foram descritos em frequência e médias, com frequências de ocorrência das alterações avaliadas por meio do teste de qui-quadrado ou teste exato de Fisher quando apropriado. Para as características do fluido em animais com alterações nos exames de imagem, foi utilizada análise de variância ajustada para modelo misto com comparação de médias por meio do teste T. Os resultados demostraram alterações de imagem da articulação temporomandibular em todos os grupos estudados, com maior prevalência de alterações no grupo de animais acima de 10 anos, com mudanças nas características citológicas do fluido sinovial relacionadas à idade e o estágio de alteração no tecido sinovial. Houve uma associação da presença de degrau nos dentes pré-molares e molares com alterações radiográficas (p<0,05). O perfil de alteração nos exames radiográficos e ultrassonográficos desses animais foram indicativos de osteoartrite. Os achados corroboram com a descrição de que a idade tem relação com alterações em exames de imagem.

There is currently no description of the association of malocclusions with pathologies in the temporomandibular joint of horses. Studies have demonstrated an association of age with alterations in imaging examinations and inflammatory biomarkers of the joint. The objective of this study was to study animals of different ages with presence of malocclusions and to determine their association with joint alterations. Eighteen equines were used, totaling 38 analyzed joints. The animals were divided into groups less than five years old (8 animals); between 5 and 10 years (6 animals) and over 10 years (5 animals). The animals were submitted to physical examination of the oral cavity and the temporomandibular joint, evaluation of superficial temperature, ultrasonography, radiography and analysis of synovial fluid. Comparisons were made between the groups and the association between dental malocclusion and age, malocclusion and joint changes, age and synovial fluid characteristics, as well as age and types of radiographic and ultrasonographic changes. Data were described in frequency and means, with frequencies of occurrences of the changes assessed by chi-square test or Fisher's exact test when appropriate. For the fluid characteristics in animals with alterations in the imaging tests, adjusted variance analysis was used for mixed model with comparison of means by means of the T test. The results demonstrated temporomandibular joint image changes in all studied groups, with a higher prevalence of changes in the group of animals older than 10 years, with changes in cytological characteristics of synovial fluid related to age and stage of synovial tissue alteration. There was an association between the presence of a step in the premolar and molar teeth with radiographic changes (p <0.05). The alteration profile in the radiographic and ultrasound examinations of these animals were indicative of osteoarthritis. The findings corroborate the description that age is related to changes in imaging tests.

Orientações para o diagnóstico de influenza em suínos / Guidelines for diagnosis of swine influenza

Este trabalho descreve a colheita adequada de amostras, as técnicas/procedimentos disponíveis para o diagnóstico de influenza A em suínos, assim como os resultados e suas respectivas interpretações, para auxiliar médicos veterinários de campo na identificação dessa doença. Em suínos vivos, as amostras adequadas são: secreção nasal, fluido oral e sangue (soro). Para suínos mortos, colher preferencialmente amostras de pulmão com consolidação cranioventral. Secreção nasal e fragmentos de pulmão refrigerado são utilizados para detectar partícula viral viável (isolamento viral - IV) ou ácido nucleico viral (RT-PCR convencional e RT-PCR em tempo real). As amostras não devem ser congeladas, pois o vírus é inativado a -20°C. A caracterização molecular dos isolados é feita pela análise filogenética obtida pelo sequenciamento de DNA. O soro é utilizado para a detecção de anticorpos (Acs) por meio do teste da inibição da hemaglutinação e ELISA. O fluido oral pode ser utilizado para detecção de anticorpo (ELISA) ou de vírus. Fragmentos de pulmão fixados em formol a 10% são examinados microscopicamente para identificar pneumonia broncointersticial e para detecção de antígeno viral pela imuno-histoquímica (IHQ). Para o sucesso do diagnóstico, as amostras devem ser colhidas de suínos que estão preferencialmente na fase aguda da doença, para aumentar as chances de detecção viral. As melhores opções para o diagnóstico de influenza A em suínos vivos são RT-PCR e isolamento viral de amostras de swab nasal ou fluido oral. Pulmão para análise por RT-PCR, isolamento viral ou IHQ é a amostra de escolha em suínos mortos. Testes sorológicos têm valor diagnóstico limitado e são utilizados apenas para determinar o estado imune do rebanho, não indicando doença clínica, pois os Acs são detectados 7-10 dias pós-infecção (fase subaguda). O diagnóstico de influenza é importante para avaliar o envolvimento desse agente no complexo de doença respiratória suína. Além disso, o isolamento do vírus influenza é essencial para o monitoramento dos principais subtipos circulantes em uma determinada região ou país, assim como para a detecção de novos rearranjos virais, já que influenza é considerada uma zoonose.(AU)

This article is intended to describe the adequate sample collection, the laboratory procedures/techniques, the expected results and their interpretation for diagnosis of influenza infection in swine, serving as a support for field veterinarians. In live pigs, the samples to be taken are nasal secretions, oral fluids and blood. For dead pigs, preference should be given to samples of cranioventral lung consolidation. Nasal discharge and chilled lung fragments are used for detection of virus (virus isolation - VI) or viral nucleic acids (conventional RT-PCR and real-time RT-PCR). Samples should not be frozen, because the virus is inactivated at -20°C. Molecular characterization of isolates is performed by phylogenetic analysis of gene sequences obtained by DNA sequencing. Serum is used for the detection of antibodies using hemagglutination inhibition (HI) test and ELISA. Oral fluid may be used for either antibody (ELISA) or viral detection. Fragments of lung fixed in 10% formaldehyde are used for histopathological analysis to identify bronchointerstitial pneumonia, and for immunohistochemistry (IHC) for antigens. For a successful diagnosis, sampling should be preferably performed in the acute phase of the disease to improve chances of virus detection. The best options to perform the diagnosis of influenza A in a swine herd are RT-PCR and VI from nasal swabs or oral fluid in live pigs and/or lung tissue for RT-PCR, VI or IHC in dead pigs. Serological tests are of very limited diagnostic value and are useful only to determine the immune status of the herd, not indicating clinical disease, because antibodies are detected after 7-10 days post infection (subacute phase). The diagnosis of influenza is important to evaluate the involvement of this agent in the complex of respiratory diseases in pigs. Furthermore, the isolation of influenza virus is essential for monitoring the main subtypes circulating in a given region or country, as well as for the detection of potential new viral reassortants, because influenza is considered a zoonosis.(AU)