Occurrence of intestinal parasites in fecal samples of dogs and cats from Mineiros, Goiás / Ocorrência de parasitas intestinais em amostras fecais de cães e gatos de Mineiros, Goiás

Gastrointestinal parasites are frequently found in domestic animals, with important role in animal and public health. Among gastrointestinal parasites of dogs and cats Toxocara spp. and Ancylostoma spp. are reported as the most common parasites found in dogs and cats in the world caunsing digestive damage, including death, and with great importance in public health causing visceral larva migrans and cutaneous larva migrans respectively. This study aimed verify the occurrence of gastroenteric parasites in dogs and cats from Mineiros, Goiás, in association with epidemiological aspects. In total, 103 fecal samples (93 from dogs and 10 from cats) from April 2017 to July 2018 were collected by spontaneous defecation and processed for search of eggs and oocysts by the Willis (adapted) technique. Toxocara spp. was the most frequent parasite identified in dogs, with 34.41% frequency (32/93 samples), followed by Ancylostoma spp. (11.83%, 11/93 samples) and Cystoisospora spp. (1.07%, 1/93 samples). Fecal samples from cats, showed a similar result, being Toxocara spp. the most frequent parasite (40%, 4/10 samples), followed by Ancylostoma spp. (20%, 2/10 samples) and Cystoisospora spp. (20%, 2/10 samples). Young animals were 10% more positive for parasites comparing to elderly and adult animals (odds ratio=1.1), as well as animals with access outdoors 20% more parasitized (odds ratio=1.2). The study showed the most common gastrintesinal parasites of dogs and acts from Mineiros, Goiás.(AU)

Abordagem clínico-cirúrgica em cão com corpo estranho linear extenso / Clinical-surgical approach in dog with extensive linear strange body

Na rotina da clínica médica de pequenos animais, o corpo estranho é uma ocorrência relativamente comum, sobretudo quando se trata de animais jovens, de pequeno a médio porte ou apetite exagerado e grande curiosidade. Casos de corpos estranhos lineares são particularmente mais complexos que outros tipos de corpos estranhos devido à área que acabam por acometer ser de maior extensão e assim resultam em casos mais graves com maior processo inflamatório com acometimento das populações bacterianas da microbiota local. Quando acometem a região entérica, o corpo estranho linear pode desenvolver quadros de intussuscepção. A sintomatologia pode ser ampla, incluindo desde sinais característicos do trato gastrointestinal, como vômito e falta de apetite, até sintomas mais sistêmicos como febre, apatia e desordens inflamatórias. O diagnóstico deve incluir anamnese, exames físico e clínico, observação do estado geral do animal, histórico e informações relevantes e fatores predisponentes como raça e idade podem ser importantes para o caso. Exames de imagens e laboratoriais auxiliam no diagnóstico e tem papel fundamental para estadiar o tempo de acometimento e precisar o local em que o corpo estranho está situado no trato gastroentérico. Este trabalho tem como objetivo relatar um caso de corpo estranho linear excepcional devido à sua extensão de aproximadamente 30 metros e à complexidade da técnica cirúrgica de sua remoção que associou uma gastrotomia e quatro enterotomias. Apesar da complexidade da intervenção cirúrgica, o resultado e prognóstico observado no animal foi positivo, com rápida recuperação pós-cirúrgica.

In the routine of the small animal medical clinic, the foreign body is a relatively common occurrence, especially when it comes to young animals, from small to medium size or exaggerated appetite and great curiosity. Cases of linear foreign bodies are particularly more complex than other types of foreign bodies due to the area that they end up being of greater extent and thus result in more severe cases with a greater inflammatory process affecting the bacterial populations of the local microbiota. When they affect the enteric region, the linear foreign body may develop intussusception. The symptoms can be wide ranging, ranging from signs characteristic of the gastrointestinal tract, such as vomiting and poor appetite, to more systemic symptoms such as fever, apathy and inflammatory disorders. The diagnosis must include anamnesis, physical and clinical examinations, observation of the animal's general condition, history and relevant information and predisposing factors such as breed and age may be important for the case. Imaging and laboratory tests assist in diagnosis and have a fundamental role in staging the time of onset and specifying the location where the foreign body is located in the gastroenteric tract. This work aims to report a case of an exceptional linear foreign body due to its extension of approximately 30 meters and the complexity of the surgical technique of its removal that associated a gastrotomy and four enterotomies. Despite the complexity of the surgical intervention, the result and prognosis observed in the animal was positive, with rapid post-surgical recovery.

Abordagem clínico-cirúrgica em cão com corpo estranho linear extenso / Clinical-surgical approach in dog with extensive linear strange body

Na rotina da clínica médica de pequenos animais, o corpo estranho é uma ocorrência relativamente comum, sobretudo quando se trata de animais jovens, de pequeno a médio porte ou apetite exagerado e grande curiosidade. Casos de corpos estranhos lineares são particularmente mais complexos que outros tipos de corpos estranhos devido à área que acabam por acometer ser de maior extensão e assim resultam em casos mais graves com maior processo inflamatório com acometimento das populações bacterianas da microbiota local. Quando acometem a região entérica, o corpo estranho linear pode desenvolver quadros de intussuscepção. A sintomatologia pode ser ampla, incluindo desde sinais característicos do trato gastrointestinal, como vômito e falta de apetite, até sintomas mais sistêmicos como febre, apatia e desordens inflamatórias. O diagnóstico deve incluir anamnese, exames físico e clínico, observação do estado geral do animal, histórico e informações relevantes e fatores predisponentes como raça e idade podem ser importantes para o caso. Exames de imagens e laboratoriais auxiliam no diagnóstico e tem papel fundamental para estadiar o tempo de acometimento e precisar o local em que o corpo estranho está situado no trato gastroentérico. Este trabalho tem como objetivo relatar um caso de corpo estranho linear excepcional devido à sua extensão de aproximadamente 30 metros e à complexidade da técnica cirúrgica de sua remoção que associou uma gastrotomia e quatro enterotomias. Apesar da complexidade da intervenção cirúrgica, o resultado e prognóstico observado no animal foi positivo, com rápida recuperação pós-cirúrgica.(AU)

In the routine of the small animal medical clinic, the foreign body is a relatively common occurrence, especially when it comes to young animals, from small to medium size or exaggerated appetite and great curiosity. Cases of linear foreign bodies are particularly more complex than other types of foreign bodies due to the area that they end up being of greater extent and thus result in more severe cases with a greater inflammatory process affecting the bacterial populations of the local microbiota. When they affect the enteric region, the linear foreign body may develop intussusception. The symptoms can be wide ranging, ranging from signs characteristic of the gastrointestinal tract, such as vomiting and poor appetite, to more systemic symptoms such as fever, apathy and inflammatory disorders. The diagnosis must include anamnesis, physical and clinical examinations, observation of the animal's general condition, history and relevant information and predisposing factors such as breed and age may be important for the case. Imaging and laboratory tests assist in diagnosis and have a fundamental role in staging the time of onset and specifying the location where the foreign body is located in the gastroenteric tract. This work aims to report a case of an exceptional linear foreign body due to its extension of approximately 30 meters and the complexity of the surgical technique of its removal that associated a gastrotomy and four enterotomies. Despite the complexity of the surgical intervention, the result and prognosis observed in the animal was positive, with rapid post-surgical recovery.(AU)

Infecção pelo vírus da diarreia viral bovina em rebanhos de corte de propriedades da cidade de Uruguaiana/RS / Virus infection of bovine viral diarrhea in beef herds farms in the city of Uruguaiana/RS

O Pestivirus é o agente patológico da diarreia viral bovina (BVD), responsável por grandes perdas econômicas para o setor produtivo da bovinocultura, pois a infecção por esse vírus (BVDV) é frequentemente associada a várias patologias gastroentéricas e/ou respiratórias, doença hemorrágica e problemas reprodutivos. O presente estudo buscou determinar a ocorrência de anticorpos contra o vírus da diarreia viral bovina (BVDV) em gado não vacinado, proveniente de duas propriedades localizadas no Município de Uruguaiana/RS, através da prova de ELISA. Foram coletadas 66 amostras de soro de animais em duas propriedades de criação de corte em sistema de manejo extensivo. Tais amostras foram submetidas ao teste de ELISA para a pesquisa de anticorpos contra BVD. Os testes realizados resultaram em 39 amostras soropositivas, 19 negativas e 8 suspeitas para anticorpos contra o BVD. A soroprevalência positiva foi de 59,10%, o que confirma a presença do agente causador da BVD no rebanho avaliado. Os resultados obtidos demonstram que há taxas preocupantes de disseminação do BVDV no rebanho bovino avaliado. Para o sucesso do controle e prevenção da BVD, deve-se adequar o manejo dos rebanhos através da implantação de programas de saúde adaptados para evitar a introdução da infeção no rebanho, identificação e eliminação de animais PI e vacinação de animais reprodutores, além de levantamento sorológico prévio dos animais destinados à reprodução, tais ações são de suma importância para o controle sanitário e produtivo do setor.

The Pestivirus is the pathological agent of the bovine viral diarrhea (BVD), responsible for the great economical losses to the productive sector of bovine culture, since (BVDV) infection is frequently associated to innumerous pathologies and/or respiratory pathologies, hemorrhagic disease and reproductive issues. The present study aimed to determine the occurrence of antibodies against the bovine viral diarrhea virus (BVDV) in non-vaccinated cattle, from two properties located in the city of Uruguaiana/RS, through the ELISE test. Sixty – six animal serum samples were collected and two cutting – off properties under an extensive management system. These samples were submitted to the ELISA test for antibodies against BVD. The tests performed resulted in 39 seropositive samples, 19 negative and 8 suspected antibodies to BVD. The positive seroprevalence was 59.10%, which confirms the presence of the BVD causal agent in the evaluated herd. The results show that there are worrying rates of dissemination of BVDV in the evaluated cattle herd. For the success of BVD control and prevention, the management of herds should be adapted through the implementation of health programs adapted to avoid the introduction of infection in the herd, identification and elimination of PI animals and vaccination of breeding animals, in addition to a serological survey animals for reproduction, such actions are of paramount importance for the sanitary and productive control of the sector.

Infecção pelo vírus da diarreia viral bovina em rebanhos de corte de propriedades da cidade de Uruguaiana/RS / Virus infection of bovine viral diarrhea in beef herds farms in the city of Uruguaiana/RS

O Pestivirus é o agente patológico da diarreia viral bovina (BVD), responsável por grandes perdas econômicas para o setor produtivo da bovinocultura, pois a infecção por esse vírus (BVDV) é frequentemente associada a várias patologias gastroentéricas e/ou respiratórias, doença hemorrágica e problemas reprodutivos. O presente estudo buscou determinar a ocorrência de anticorpos contra o vírus da diarreia viral bovina (BVDV) em gado não vacinado, proveniente de duas propriedades localizadas no Município de Uruguaiana/RS, através da prova de ELISA. Foram coletadas 66 amostras de soro de animais em duas propriedades de criação de corte em sistema de manejo extensivo. Tais amostras foram submetidas ao teste de ELISA para a pesquisa de anticorpos contra BVD. Os testes realizados resultaram em 39 amostras soropositivas, 19 negativas e 8 suspeitas para anticorpos contra o BVD. A soroprevalência positiva foi de 59,10%, o que confirma a presença do agente causador da BVD no rebanho avaliado. Os resultados obtidos demonstram que há taxas preocupantes de disseminação do BVDV no rebanho bovino avaliado. Para o sucesso do controle e prevenção da BVD, deve-se adequar o manejo dos rebanhos através da implantação de programas de saúde adaptados para evitar a introdução da infeção no rebanho, identificação e eliminação de animais PI e vacinação de animais reprodutores, além de levantamento sorológico prévio dos animais destinados à reprodução, tais ações são de suma importância para o controle sanitário e produtivo do setor.(AU)

The Pestivirus is the pathological agent of the bovine viral diarrhea (BVD), responsible for the great economical losses to the productive sector of bovine culture, since (BVDV) infection is frequently associated to innumerous pathologies and/or respiratory pathologies, hemorrhagic disease and reproductive issues. The present study aimed to determine the occurrence of antibodies against the bovine viral diarrhea virus (BVDV) in non-vaccinated cattle, from two properties located in the city of Uruguaiana/RS, through the ELISE test. Sixty six animal serum samples were collected and two cutting off properties under an extensive management system. These samples were submitted to the ELISA test for antibodies against BVD. The tests performed resulted in 39 seropositive samples, 19 negative and 8 suspected antibodies to BVD. The positive seroprevalence was 59.10%, which confirms the presence of the BVD causal agent in the evaluated herd. The results show that there are worrying rates of dissemination of BVDV in the evaluated cattle herd. For the success of BVD control and prevention, the management of herds should be adapted through the implementation of health programs adapted to avoid the introduction of infection in the herd, identification and elimination of PI animals and vaccination of breeding animals, in addition to a serological survey animals for reproduction, such actions are of paramount importance for the sanitary and productive control of the sector.(AU)

Pitiose canina: uma doença despercebida na clínica de pequenos animais / Canine pythiosis: an unnoticed disease in the small animal clinic

A pitiose é uma doença granulomatosa decorrente da infecção pelo oomiceto Pythium insidiosum. Essa enfermidade tem recebido grande atenção devido à ampla distribuição do patógeno, sintomatologia variável, dificuldade no diagnóstico e necessidade de seleção de uma terapia apropriada. O presente trabalho objetivou realizar uma revisão de literatura a respeito da pitiose na espécie canina, alertando o médicoveterinário em considerar tal enfermidade na rotina da clínica de pequenos animais. Para a manutenção do ciclo no ambiente, o P. insidiosum necessita de umidade e com temperatura elevada. Não se verifica transmissão direta entre animais ou zoonótica. No Brasil há um considerável volume de estudos da pitiose em cães,principalmente nas regiões Sul e Sudeste. Frequentemente os animais afetados são machos, de grande porte, com idade inferior a três anos. Essa doença Apresenta-se sob as formas gastrintestinal e cutânea, sendo a primeira a mais frequente. A avaliação histopatológica pode representar a única ferramenta para o diagnóstico, poisrotineiramente as amostras encontram-se fixadas em formol, o que inviabiliza o seu envio para a cultura. Asterapias utilizadas apresentam resultados variados e incluem combinação de antifúngicos sistêmicos, cirurgia e imunoterapia. Torna-se essencial a inclusão da pitiose na diferenciação de determinadas enfermidades cutâneas e/ou gastroentéricas que acometem os cães. Essa doença infecciosa não deve ser considerada incomum na práticada clínica veterinária, pois o que provavelmente ocorre é um subdiagnóstico, seja pela ausência de suspeita clínica ou a falta de direcionamento das amostras teciduais para laboratórios especializados

Pythiosis is a granulomatous infectious disease caused by the oomycete Pythium insidiosum. This disease has received great attention due to the pathogen wide distribution, variable symptoms, difficulty in clinical diagnosis and need for appropriate therapy selection. This study aimed to perform a literature review about the pythiosis in dogs, prompting a veterinarian to consider this disease in the small animal clinic routine. For the maintenance of the cycle in the environment, P. insidiosum requires water accumulation and high temperature. There is neither direct transmission among animals nor zoonotic. In Brazil, there is a considerable amount of study on pythiosis in dogs, especially in the South and Southeast regions. Often affected animals are male, large, and below three years of age. The disease shows up under the gastrointestinal and in skin forms, being the first the most common. Histopathology may represent the only tool for the diagnosis, since samples are routinely fixed in formalin, making their culture unfeasible. The therapies used have varied results and include systemic antifungal drug combination, surgery, and immunotherapy. Pythiosis should be included in the differentiation of certain skin and/or gastroenteric ailments that affect dogs. This infectious disease should not be considered unusual in the veterinary clinic practice. What may really occur is an underdiagnosis either by absence of clinical suspicion or lack of direction of the tissue samples to specialized laboratories

Pitiose canina: uma doença despercebida na clínica de pequenos animais / Canine pythiosis: an unnoticed disease in the small animal clinic

A pitiose é uma doença granulomatosa decorrente da infecção pelo oomiceto Pythium insidiosum. Essa enfermidade tem recebido grande atenção devido à ampla distribuição do patógeno, sintomatologia variável, dificuldade no diagnóstico e necessidade de seleção de uma terapia apropriada. O presente trabalho objetivou realizar uma revisão de literatura a respeito da pitiose na espécie canina, alertando o médicoveterinário em considerar tal enfermidade na rotina da clínica de pequenos animais. Para a manutenção do ciclo no ambiente, o P. insidiosum necessita de umidade e com temperatura elevada. Não se verifica transmissão direta entre animais ou zoonótica. No Brasil há um considerável volume de estudos da pitiose em cães,principalmente nas regiões Sul e Sudeste. Frequentemente os animais afetados são machos, de grande porte, com idade inferior a três anos. Essa doença Apresenta-se sob as formas gastrintestinal e cutânea, sendo a primeira a mais frequente. A avaliação histopatológica pode representar a única ferramenta para o diagnóstico, poisrotineiramente as amostras encontram-se fixadas em formol, o que inviabiliza o seu envio para a cultura. Asterapias utilizadas apresentam resultados variados e incluem combinação de antifúngicos sistêmicos, cirurgia e imunoterapia. Torna-se essencial a inclusão da pitiose na diferenciação de determinadas enfermidades cutâneas e/ou gastroentéricas que acometem os cães. Essa doença infecciosa não deve ser considerada incomum na práticada clínica veterinária, pois o que provavelmente ocorre é um subdiagnóstico, seja pela ausência de suspeita clínica ou a falta de direcionamento das amostras teciduais para laboratórios especializados(AU)

Pythiosis is a granulomatous infectious disease caused by the oomycete Pythium insidiosum. This disease has received great attention due to the pathogen wide distribution, variable symptoms, difficulty in clinical diagnosis and need for appropriate therapy selection. This study aimed to perform a literature review about the pythiosis in dogs, prompting a veterinarian to consider this disease in the small animal clinic routine. For the maintenance of the cycle in the environment, P. insidiosum requires water accumulation and high temperature. There is neither direct transmission among animals nor zoonotic. In Brazil, there is a considerable amount of study on pythiosis in dogs, especially in the South and Southeast regions. Often affected animals are male, large, and below three years of age. The disease shows up under the gastrointestinal and in skin forms, being the first the most common. Histopathology may represent the only tool for the diagnosis, since samples are routinely fixed in formalin, making their culture unfeasible. The therapies used have varied results and include systemic antifungal drug combination, surgery, and immunotherapy. Pythiosis should be included in the differentiation of certain skin and/or gastroenteric ailments that affect dogs. This infectious disease should not be considered unusual in the veterinary clinic practice. What may really occur is an underdiagnosis either by absence of clinical suspicion or lack of direction of the tissue samples to specialized laboratories(AU)

Clinical effectiveness of autohemotherapy as an adjunct treatment of canine parvovirus

Background: Canine parvovirus is highlighted among the gastroenteric diseases that are common medical occurrences in small animals due to its clinical evolution. Although the treatment is often successful, the success rate has remained unchanged over the years, reflecting a clear need for searching more efficient protocols in order to reduce hospitalization, treatment cost and increase survival rates. Autohemotherapy efficacy has been demonstrated for several diseases and identified as a stimulating tool and immune mediator. Thus, the objective of this research was to determine the clinical effectiveness of autohemotherapy as an adjunct in the treatment of dogs suffering from parvovirus. Materials, Methods & Results: Twenty dogs suffering from parvovirus, diagnosed via immunochromatography, were distributed (n = 10) into two groups: autohemotherapy (GAHT) and control (GCO). Both groups were treated with the appropriate support therapy for hemorrhagic gastroenteritis (GHE), while the dogs of the GAHT group were also treated with the adjunct autohemotherapy (AHT). The AHT consisted of the administration of blood collected by jugular venipuncture, without anticoagulant, immediately injected in equal proportion in the semitendinosus and semimembranosus muscle region. The blood volume injected was based on animal weight:...(AU)

Clinical effectiveness of autohemotherapy as an adjunct treatment of canine parvovirus

Background: Canine parvovirus is highlighted among the gastroenteric diseases that are common medical occurrences in small animals due to its clinical evolution. Although the treatment is often successful, the success rate has remained unchanged over the years, reflecting a clear need for searching more efficient protocols in order to reduce hospitalization, treatment cost and increase survival rates. Autohemotherapy efficacy has been demonstrated for several diseases and identified as a stimulating tool and immune mediator. Thus, the objective of this research was to determine the clinical effectiveness of autohemotherapy as an adjunct in the treatment of dogs suffering from parvovirus. Materials, Methods & Results: Twenty dogs suffering from parvovirus, diagnosed via immunochromatography, were distributed (n = 10) into two groups: autohemotherapy (GAHT) and control (GCO). Both groups were treated with the appropriate support therapy for hemorrhagic gastroenteritis (GHE), while the dogs of the GAHT group were also treated with the adjunct autohemotherapy (AHT). The AHT consisted of the administration of blood collected by jugular venipuncture, without anticoagulant, immediately injected in equal proportion in the semitendinosus and semimembranosus muscle region. The blood volume injected was based on animal weight:...

ASPECTOS EPIDEMIOLÓGICOS, CLÍNICO-PATOLÓGICOS E GENÉTICOS DE PARVOVÍRUS CANINO TIPO 2 (CPV-2) NO RIO GRANDE DO SUL, BRASIL

O parvovírus canino tipo 2 (CPV-2) é um dos agentes mais importantes de gastroenterite em cães. O CPV-2 tem se caracterizado por rápida evolução genética, principalmente devido a mutações no gene da proteína principal do capsídeo (VP2), que está envolvida na ligação dos vírions a receptores celulares, além ser alvo de anticorpos neutralizantes. Mutações no gene da VP2 foram responsáveis pelo surgimento de variantes virais (CPV-2a, 2b e 2c) que podem produzir manifestações clínico-patológicas e imunológicas diferentes das manifestações clássicas. Assim, este estudo teve por objetivos descrever os aspectos epidemiológicos, clínicos e patológicos de casos de doença gastroentérica associada com a infecção pelo CPV-2c, e analisar a sequência completa do gene da VP2 de amostras de CPV-2 obtidas de cães com parvovirose clínica no Rio Grande do Sul, Brasil. Foram incluídos casos/amostras provenientes da região Metropolitana de Porto Alegre e da região central do RS. O primeiro trabalho descreve os achados epidemiológicos e clinico-patológicos de 24 casos de parvovirose causados por CPV-2c, seguido de sequenciamento e análise parcial da sequência da VP2. Na maioria dos casos foram relatados sinais e/ou lesões sugestivas de enterite por parvovírus, como diarreia, vômitos, hemorragia na membrana serosa do intestino delgado, granulação segmentar difusa, atrofia das vilosidades, necrose e fusão de criptas, metaplasia escamosa e sincícios epiteliais. Porém, alguns casos apresentaram características distintas das apresentações clássicas, como a variada coloração das fezes (avermelhada e/ou amarelada, marrom-claro, marrom-alaranjada ou amarronzada), amplo envolvimento do intestino delgado (8/20), presença de edema pulmonar (7/24), convulsões (3/24), além do acometimento de animais adultos (4/24) e vacinados (12/24). O isolamento dos vírus em cultivo celular produziu resultados positivos em 58,3% (14/24) dos casos. O sequenciamento de nucleotídeos revelou uma alta identidade de nucleotídeos na VP2 (99,4-100%), assim como a presença de ácido glutâmico no resíduo 426 da VP2, o que caracterizou as amostras como CPV-2c. No segundo estudo, 38 amostras de fezes ou segmentos intestinais de cães com gastroenterite foram submetidos à detecção do CPV-2, sequenciamento e análise molecular do gene da VP2. Pela análise dos aminoácidos 87, 101, 297, 300, 305 e 426 foram identificadas 20 amostras como CPV-2c, quatro como CPV-2b, 11 como New CPV-2a, dois como New CPV-2b e um como CPV-2-like. As amostras de CPV-2c se caracterizaram por uma alta similaridade de aminoácidos na VP2. As amostras de New CPV-2a e NewCPV-2b foram caracterizados pela presença de alanina no resíduo 297 (Ser297Ala), e as sequências de New CPV-2a também apresentaram as mutações Phe267Tyr, Tyr324Ile e Thr440Ala, que estão associadas ao desenvolvimento da doença em cães vacinados. A amostra SV726/15 foi classificada como CPV-2-like por conter algumas mutações semelhantes às do CPV-2 original, como Leu, Thr, Ala e Asp nos resíduos 87, 101, 300 e 305, respectivamente. Tais mutações em variantes CPV-2-like sugerem uma re-emergência e/ou evolução de CPV-2 a partir de cepas vacinais. Na análise filogenética, as variantes agruparam com as respectivas cepas de referência, em geral, de acordo com as mudanças nos aminoácidos. Os resultados obtidos nesses trabalhos demonstram que o CPV-2c circula nas populações de cães do RS, podendo induzir manifestações clínico-patológicas diferentes da apresentação clássica de parvovirose. Além disso, a análise molecular de amostras de CPV-2 do RS demonstrou a alta diversidade no gene da VP2 dos vírus circulantes na população canina no sul do Brasil, com o consequente surgimento de novas variantes.

Canine parvovirus type 2 CPV-2 is considered the most important agent of enteritis in dogs. CPV-2 has undergone a rapid genetic evolution, mainly due to mutations in the major capsid protein (VP2) gene, whose product is involved in the binding of the virions to cellular receptors and is a major target for neutralizing antibodies. Mutations in VP2 were responsible for the emergence of viral variants (CPV-2a, 2b and 2c) that may induce distinct clinical-pathological manifestations in the host. Thus, this study aimed to describe the epidemiological, clinical and pathological aspects of cases of gastroenteric disease associated with CPV-2c infection and to analyze the complete sequence of the VP2 gene of CPV-2 samples obtained from dogs with clinical parvovirosis in Rio Grande do Sul, Brazil. The first study describes the the epidemiological and clinico-pathological findings of 24 cases of gastroenteritis by CPV-2, followed by partial nucleotide sequencing and analysis of VP2. Signs and/or lesions suggestive of parvovirus enteritis were reported in most cases, including diarrhea, vomiting, small intestinal serous membrane hemorrhage, diffuse segmental granulation, villous atrophy, crypt necrosis and fusion, squamous metaplasia and epithelial synechia. However, some cases presented aspects distinct from classical parvovirosis, such as feces/diarrhea collor (reddish and/or yellowish, light brown, brownish or brownish), extensive involvement of the small intestine (8/20), presence of pulmonary edema (7/24), seizures (3/24), involvement of adult dogs (4/24) and vaccinated animals (12/24). Virus isolation in cell culture was achieved from 58.3% (14/24) of the samples. Nucleotide sequencing revealed a high nucleotide identity in VP2 (99.4-100%), as well as the presence of glutamic acid at residue 426, characterizing the isolates as CPV-2c. In the second study, 38 fecal samples or intestinal segments of dogs with gastroenteritis were submitted to CPV-2 detection and sequence analysis of VP2. Analysis of amino acids 87, 101, 297, 300, 305 and 426 allowed for the identification of 20 isolates/viruses as CPV-2c, four as CPV-2b, 11 as New CPV-2a, two as New CPV-2b and one as CPV- like. CPV-2c sequences were characterized by high amino acid similarity. New CPV-2a and New CPV-2b genomes were characterized by an alanine at residue 297 (Ser297Ala), but only the New CPV-2a sequences showed the Phe267Tyr, Tyr324Ile and Thr440Ala mutations that are associated with the development of the disease in vaccinated dogs. The SV726/15 virus was classified as CPV-2-like since it harbored some mutations similar to the original CPV-2, such as Leu, Thr, Ala and Asp at residues 87, 101, 300 and 305, respectively. Such mutations in CPV-2-like indicate a re-emergence and/or evolution of CPV-2 from vaccine strains. At phylogenetic analysis, the variants grouped together with the respective reference strains, in general, according to the changes observed in amino acids sequences. The results obtained in these studies demonstrate that CPV-2c circulates in dog populations from RS, often inducing epidemiological and clinic-pathological manifestations distinct of the classical parvovirosis. Furthermore, sequence analysis of CPV-2 samples demonstrates the high diversity in the VP2 gene of viruses circulating in the canine population in southern Brazil with the consequent emergence of new variants.

ATUAÇÃO DO COMEPRAZOL E RANITIDINA SOBRE O SANGUE OCULTO GASTROINTESTINAL EM CÃES COM DOENÇA RENAL CRÔNICA

Lima, Charles Silva de. Ação do omeprazol e ranitidina no controle do sangramento gastrointestinal em cães com doença renal crônica. 2018. Dissertação (Mestrado em Ciência Animal) Universidade de Franca, Franca - SP. A doença renal crônica (DRC) é definida como a presença de anormalidades estruturais e/ou funcionais de um ou ambos os rins e que pode apresentar repercussões sistêmicas, incluindo os distúrbios gastroentéricos. Frequentemente hemorragias aparentes ou ocultas identificadas nas fezes, são sinais de lesões neste sistema. O objetivo deste estudo foi determinar ação do omeprazol e ranitidina no controle do sangramento gastrointestinal em cães com DRC. Utilizou-se 30 cães, sendo 10 hígidos que compuseram o grupo controle (GC) e 20 com DRC, 11 diagnosticados segundo critérios da IRIS, que foram distribuídos em dois grupos: 10 12 receberam omeprazol (GO) e 10 ranitidina (GR), por 14 dias consecutivos. 13 Colheram-se amostras de fezes para realização de PSO fecal, empregando-se as 14 técnicas de benzidina e guaiac. Os testes foram realizados em três momentos com 15 intervalo de 7 dias (0, 7 e 14). A técnica de benzidina foi mais sensível na detecção 16 da PSO fecal que o Guaiac. Observou-se redução significativa no escore de sangue 17 oculto fecal no tratamento com omeprazol (GO) avaliado pelo teste de benzidina (P= 18 0,049) e baixa resposta ao uso da ranitidina ao final do tratamento (P= 0,017 e r= 19 0,726). Concluiu-se que o omeprazol reduz sangramento oculto gastrointestinal em 20 cães com DRC. Palavras-chave: caninos, nefropatia, sangramento gastrointestinal, teste de triagem.

Lima, Charles Silva de. Action of omeprazole and ranitidine in the control of gastrointestinal bleeding in dogs with chronic kidney disease. 2018. Dissertation (Master in Animal Science) - University of Franca, Franca - SP. Chronic kidney disease (CKD) is defined as estructural and/or functional abnormalities presented in one or both kidneys that can present systemic repercussions, including gastroenteric disturbances. Frequently, apparent or occult 8 haemorrhages identified in feces are injuries signs in renal system. The aim of this 9 study was to determinate the action of omeprazole and ranitidine in the control of 10 gastrointestinal bleeding in dogs with CKD. A total of 30 dogs were used: 10 control 11 group (GC) and 20 with CKD, diagnosed according to IRIS criteria, which were 12 subdivided into two groups: 10 received omeprazole (GO) and 10 ranitidine (GR) for 13 14 consecutive days. Feces samples were collected for benzidine and guaiac OGIB test. The evaluation was performed with 7 days interval (0, 7 and 14). The benzidine technique was more sensitive in detecting OGIB than Guaiac. There was a significant reduction in OGIB in GO evaluated by the benzidine test (P = 0.049) and low response to ranitidine treatment (P = 0.017 and r = 0.726). This study suggests that omeprazole reduce occult gastrointestinal bleeding in dogs with CKD. Keywords: dogs, nephropathy, gastrointestinal bleeding, screening test.

Diversidade antigênica de isolados brasileiros de pestivírus HoBi-like

O vírus da diarreia viral bovina (BVDV) é um dos principais patógenos de bovinos, está distribuído mundialmente e causa grandes perdas econômicas na pecuária bovina. O gênero Pestivirus, da família Flaviviridae, é composto por quatro espécies virais: os vírus da diarreia viral bovina 1 e 2 (BVDV-1 e BVDV-2), o vírus da doença da fronteira dos ovinos (BDV) e o vírus da peste suína clássica (CSFV). Uma quinta espécie de pestivírus está sendo proposta (pestivírus atípicos bovino, HoBi-like ou BVDV-3), devido às suas diferenças genéticas e antigênicas em relação às espécies de BVDV já descritas. Estes vírus foram originalmente identificados em soro fetal bovino de origem brasileira e, posteriormente, isolados de animais infectados em vários países. Este trabalho relata uma caracterização antigênica de oito isolados brasileiros do vírus HoBi-like, oriundos de animais infectados persistentemente (PI) e de casos de doença gastroentérica (2007 a 2015). A análise filogenética baseada na região não traduzida 5 (UTR) agrupou esses vírus com outros vírus HoBi-like de origem europeia e asiática. Testes de reatividade com anticorpos monoclonais (mAbs) indicaram variabilidade na glicoproteína E2 entre os vírus Hobi-like e diferenças significativas das glicoproteínas homólogas do BVDV-1 e BVDV-2. Análise da relação antigênica com base em títulos neutralizantes, utilizando-se antissoros específicos, revelou que os vírus HoBi-like são antigenicamente muito diferentes do BVDV-1 e, em menor grau, do BVDV-2. Os ensaios de neutralização cruzada entre pares de vírus HoBi-like e seus respectivos antissoros indicaram a existência de variabilidade antigênica entre esses vírus, mesmo para vírus isolados do mesmo rebanho em diferentes ocasiões. Além disso, a identificação de um isolado HoBi-like com baixa semelhança antigênica com os outros isolados indica a existência potencial de subgrupos antigênicos entre esses vírus. Finalmente, soro de cordeiros imunizados com vacinas BVDV comerciais mostrou atividade neutralizante baixa ou indetectável contra isolados HoBi-like. Estes resultados indicam diferenças antigênicas importantes entre isolados de BVDV e vírus HoBi-like brasileiros e a existência de variabilidade antigênica dentro desse grupo de pestivírus. Esses achados ampliam o conhecimento sobre a diversidade antigênica de vírus HoBi-like e reforçam a necessidade de sua inclusão em vacinas de BVDV atuais.

Bovine viral diarrhea virus (BVDV) is a major pathogen of bovine herds and it is distributed globally, causing important economic losses to the cattle industry. The genus Pestivirus of the family Flaviviridae is composed by four viral species: bovine viral diarrhea virus 1 and 2 (BVDV-1 and BVDV-2), border disease virus (BDV) and classical swine fever virus (CSFV). A fifth species has been proposed (atypical pestiviruses, HoBi-like pestiviruses or BVDV-3), due to their genetic and antigenic differences in relation to BVDV species. These viruses were originally identified in fetal bovine serum from Brazilian origin and, subsequently, isolated from diseased animals in several countries. Herein we performed an antigenic characterization of eight Brazilian HoBi-like viruses isolated from persistently infected (PI) animals and from gastroenteric disease (2007 to 2015). Phylogenetic analysis based on the 5 unstranslated region (UTR) clustered these viruses with other HoBi-like viruses from European and Asiatic origin. Monoclonal antibody (mAb) binding indicated variability in the Hobi-like virus glycoprotein E2 and significant differences from the homologous BVDV-1 and BVDV-2 glycoprotein. Analysis of antigenic relatedness based on virus-neutralizing titers using virus-specific antisera revealed that HoBi-like viruses are antigenically very different from BVDV-1 and, to a lesser extent, from BVDV-2. Cross-neutralizing assays between pairs of HoBi-like viruses and their respective antisera indicated the existence of antigenic variability among these viruses, even for viruses isolated from the same herd in different occasions. Moreover, the identification of a HoBi-like isolate with low antigenic similarity with the other isolates indicates the potential existence of antigenic subgroups among HoBi-like virus isolates. Finally, sera of lambs immunized with commercial BVDV vaccines showed low or undetectable neutralizing activity against HoBi-like isolates. These results indicate significant antigenic differences between BVDV genotypes and Brazilian HoBi-like viruses and the existence of antigenic variability within this atypical group of pestiviruses. These findings extend the knowledge about the antigenic diversity of HoBi-like viruses and reinforce the need for their inclusion in current BVDV vaccines.

Características da cinomose em cães naturalmente infectados em Belo Horizonte (2012-2014): aspectos clínico-neurológicos e sua correlação com a carga viral e apoptose encefálicas

A cinomose canina é uma das principais doenças infecciosas que resulta em altas taxas de morbidade e mortalidade em cães vacinados e não vacinados. Neste estudo, foram realizados dois experimentos com objetivo de avaliar as características da infecção pelo vírus da cinomose canina, a quantificação e correlação da carga viral e da expressão gênica de proteínas apoptóticas no sistema nervoso central e suas relações com as manifestações neurológicas em cães naturalmente infectados na região de Belo Horizonte, MG, Brasil entre 2012 a 2014. No primeiro, realizou-se um estudo clínico e epizootiológico com 90 cães naturalmente infectados pelo vírus da cinomose canina em Belo Horizonte atendidos no Hospital Veterinário da Escola de Veterinária da UFMG. Observou-se que a doença foi mais frequente em animais adultos (1-6 anos de idade) e não vacinados, não ocorrendo diferença nas categorias sexo e época do ano entre os animais infectados. Os sinais extraneurais e neurais foram variados, com predomínio de manifestações gastrentérica e respiratória e mioclonia e déficit motor, respectivamente. Os valores hematológicos de 44 cães revelaram predomínio de anemia arregenerativa e linfopenia e baixa ocorrência de corpúsculos de Sinegaglia-Lentz. Amostras do fluido cérebro-espinhal de 16 cães revelaram predomínio de proteinorraquia associada à pleocitose linfocítica. Além disso, 100% dos animais com sinais neurológicos foram positivos para o teste de imunocromatografia para pesquisa de antígenos com amostras do fluido cérebro-espinhal. O contrário ocorreu com amostras de swab conjuntival, em que apenas 67% dos animais com sinais neurológicos foram positivos, contraindicando, por isso, sua utilização nessa fase da doença. No segundo experimento realizou-se a quantificação e correlação da apoptose neural e da carga viral no lobo frontal, hipocampo e cerebelo pela PCR em tempo real de 21 cães naturalmente infectados pelo vírus e se estes relacionavam-se aos sinais neurológicos manifestados. A avaliação da expressão gênica dos fatores pró (Bax, caspase-3, caspase-8) e anti-apoptóticos (Bcl-2) demonstrou que o vírus da cinomose canina induziu a morte celular por apoptose no hipocampo, tanto pela via intrínseca como extrínseca, e no cerebelo, pela via intrínseca (p<0,05). A carga viral no cerebelo foi maior comparado ao lobo frontal e hipocampo. No entanto, não houve diferença estatística entre as cargas virais das três regiões encefálicas acometidas (p>0,05). Não houve correlação significativa entre a expressão gênica dos fatores apoptóticos e a carga viral entre as regiões encefálicas (p>0,05), sequer associação aos sinais neurológicos manifestados. Conclui-se que não existe correlação, positiva ou negativa, entre a quantidade de vírus, a expressão gênica dos fatores da apoptose no encéfalo e os sinais neurológicos de cães naturalmente infectados pelo vírus da cinomose canina.

Canine distemper is one of the most important infectious diseases in vaccinated and non vaccinated dogs with high rates of morbidity and mortality. Is this study, two experiments were performed to evaluate canine distemper virus infection characteristics, genetic apoptotic proteins expression and virus load quantification and correlation and the relation with neurological signs in Belo Horizonte, MG, Brasil, between 2012-2014. The first evaluated the epizootiological pattern of dogs naturally infected with canine distemper in the Veterinary Hospital of UFMG. It was observed that the disease is more frequent in adult (1-6 years old) and in non-vaccinated dogs, without statistic difference in sex or season of the year between infected animals. The extraneural and neural signs were varied, with a predominance of gastroenteric and respiratory manifestations and myoclonus and motor deficit, respectively. Haematological indices of 44 dogs revealed, in most cases, nonregenerative anemia, lymphopenia e low counts of Sinegaglia-Lentz corpuscles. Analysis of cerebrospinal fluid in 16 dogs showed that, in most cases, protein levels increasead associated with lymphocytic pleocytosis. The immunochromatography test with cerebrospinal fluid samples was positive in 100% in animals with neurological signs being very useful in identifying the illness. Conversely, samples of conjunctival scrapings were not as useful in infection identification because only 67% of animals with neurological sigs were positive. In the second experiment, we quantified and correlate neural apoptosis and viral load in the frontal lobe, hippocampus and cerebellum by real time PCR of 21 naturally infected dogs with canine distemper. We also evaluate the relation between this factors and neurological signs. Gene expression of anti (Bcl-2) and pró-apoptotic (Bax, caspase-3, caspase-8) factors showed that canine distemper virus induces apoptosis in the hippocampus, by the extrinsic and intrinsic pathways, and in cerebellum, by an intrinsic pathway (p<0,05). Despite the higher viral load in cerebellum, there was no statistical difference in the amount of viral load among the three brain regions (p>0,05). There was also no significant correlation between gene expression of apoptotic factors and viral load in the evaluated brain regions (p>0,05), neither possible association with neurological signs too. We concluded that there is no correlation, positive or negative between virus load, apoptosis genetic expression in the brain and neurological signs in natural distemper canine virus infection in dogs

Perfil genotípico e antigênico de amostras do vírus da diarréia viral bovina isoladas no Rio Grande do Sul (2000-2010) / Genotypic and antigenic profile of bovine viral diarrhea virus isolates from Rio Grande do Sul, Brazil (2000-2010)

Isolados do vírus da diarréia viral bovina (BVDV) apresentam grande diversidade genética e antigênica, o que pode dificultar o diagnóstico e a formulação de vacinas. O presente trabalho apresenta um perfil genotípico e antigênico de 20 amostras do BVDV isoladas no Estado do Rio Grande do Sul entre 2000 e 2010. As amostras foram oriundas de uma variedade de condições clínicas, que incluíam doença respiratória ou gastroentérica aguda ou crônica, lesões cutâneas, abortos, animais com crescimento retardado, além de animais persistentemente infectados (PI). A maioria das amostras (19 ou 95 por cento) pertence ao biótipo não-citopático (NCP); enquanto um isolado apresentou uma mistura de vírus NCP e citopático (CP). O sequenciamento e análise filogenética de uma região de 270 nucleotídeos da região 5' não-traduzida do genoma viral permitiu identificar 9 isolados de BVDV-2 (45 por cento) e 8 isolados de BVDV-2 (40 por cento). Três amostras não agruparam filogeneticamente com nenhum dos genótipos, sendo classificados como pestivírus atípicos. Não foi possível associar os genótipos ou subgenótipos com as condições clínicas e, tanto os BVDV-1 quanto os BVDV-2 estavam envolvidos em diferentes síndromes clínico-patológicas. Análise de reatividade com um painel de 19 anticorpos monoclonais (AcMs) revelou uma variabilidade marcante na glicoproteína principal do envelope (E2) entre vírus do mesmo genótipo, e sobretudo, entre vírus de genótipos diferentes. Testes de neutralização viral (SN) com anti-soro de cepas de referência de BVDV-1 e BVDV-2 frente às amostras isoladas revelaram níveis variáveis de reatividade cruzada entre vírus do mesmo genótipo, e reatividade muito baixa ou ausente entre vírus de genótipos diferentes. Esses resultados indicam uma frequência semelhante de BVDV-1 e BVDV-2 na população estudada, confirmam a marcante variabilidade antigênica e reforçam a necessidade de se incluir vírus dos dois genótipos nas vacinas. Finalmente, indicam a presença de pestivírus atípicos circulantes na população bovina do RS.(AU)

Field isolates of bovine viral diarrhea virus (BVDV) display a high genetic and antigenic diversity that may difficult diagnosis and vaccine formulation. The present study presents a genetic and antigenic characterization of 20 BVDV isolates from Rio Grande do Sul, Brazil (2000-2010). The isolates were associated with a variety of clinical conditions that included respiratory or gastroenteric disease, skin lesions, abortions, animals with retarded growth, and persistently infected (PI) animals. Most isolates (19 or 95 percent) belong to the non-cytopathic biotype (NCP), one isolate (5 percent) had a mixture of viruses NCP and cytopathic (CP). Nucleotide sequencing of a region of 270 nucleotides of the 5' untranslated region of the viral genome followed by phylogenetic analysis identified nine isolates of BVDV-2 (45 percent), eight BVDV-1 (40 percent). Three isolates were not classified in any genotype and were classified as atypical pestiviruses. It was not possible to associate genotypes or subgenotypes with clinical conditions: both BVDV-1 and BVDV-2 were involved in different clinico - pathological syndromes. Analysis of reactivity with a panel of 19 monoclonal antibodies (mAbs) revealed a marked variability in the major envelope glycoprotein (E2/gp53) among viruses of the same genotype, but especially among viruses from different genotypes. Virus neutralization assays (VN) with antisera of BVDV-1 and BVDV-2 reference strains against the isolates revealed variable levels of cross-reactivity between viruses of the same genotype, and lack or very low reactivity between viruses of different genotypes. These results indicate a similar frequency of BVDV-1 and BVDV-2 in the cattle population of Rio Grande do Sul, confirm the remarkable antigenic diversity of BVDV and reinforce the need to include viruses of genotypes BVDV-1 and BVDV-2 in vaccines. In addition, these results indicate the circulation of atypical pestiviruses in the cattle population of RS.(AU)

Estudo retrospectivo do perfil clínico e epidemiológico de cães com sarna demodécica / Retrospective study of the clinical-epidemiological profile of dog with demodicosis

A demodiciose canina é uma doença parasitária, inflamatória, caracterizada pela presença de umaumento na contagem da população de Demodex canis que ocorre por falha na imunidade celular, geneticamente programada ou por doenças que comprometam a imunocompetência do paciente. Avaliou-se o perfil de pacientes com sarna demodécica, tratados com moxidectina e atendidos em uma clínica particular especializada em dermatologia, na cidade de São Paulo, entre 2008 e 2013.Foram atendidos 51 pacientes, dentre esses 54,9%, eram fêmeas e 45,1% machos. Os cães de raça definida totalizaram 88,2% dos animais e, destes, 50,98% possuíam pelame longo. Grande parte dos animais (85%) apresentou prurido e infecção bacteriana secundária concomitante. A ocorrência de efeitos colaterais à moxidectina foi relatada por 23,5% dos proprietários, sendo os sintomas gastroentéricos os mais frequentes. (AU)

Canine demodicosis is an inflammatory parasitic disease, characterized by the presence of an increased population of Demodex canis. The disease may be due to the lymphocytes failure in react to theparasite infection, to genetic disorders or to secondary. It was evaluated 51 dogs treated with moxidectin in a Veterinary Clinic, localizated in São Paulo in the period 2008-2013. 54.9% were females and 45.1% males. The pure breed dogs totaled 88.2% of the animals, of these, 50.98% had long haircoat. The occurrence of side effects reported by owners was 23.5% of cases, gastroenteric symptoms being the most common. (AU)

Estudo retrospectivo do perfil clínico e epidemiológico de cães com sarna demodécica / Retrospective study of the clinical-epidemiological profile of dog with demodicosis

A demodiciose canina é uma doença parasitária, inflamatória, caracterizada pela presença de umaumento na contagem da população de Demodex canis que ocorre por falha na imunidade celular, geneticamente programada ou por doenças que comprometam a imunocompetência do paciente. Avaliou-se o perfil de pacientes com sarna demodécica, tratados com moxidectina e atendidos em uma clínica particular especializada em dermatologia, na cidade de São Paulo, entre 2008 e 2013.Foram atendidos 51 pacientes, dentre esses 54,9%, eram fêmeas e 45,1% machos. Os cães de raça definida totalizaram 88,2% dos animais e, destes, 50,98% possuíam pelame longo. Grande parte dos animais (85%) apresentou prurido e infecção bacteriana secundária concomitante. A ocorrência de efeitos colaterais à moxidectina foi relatada por 23,5% dos proprietários, sendo os sintomas gastroentéricos os mais frequentes.

Canine demodicosis is an inflammatory parasitic disease, characterized by the presence of an increased population of Demodex canis. The disease may be due to the lymphocytes failure in react to theparasite infection, to genetic disorders or to secondary. It was evaluated 51 dogs treated with moxidectin in a Veterinary Clinic, localizated in São Paulo in the period 2008-2013. 54.9% were females and 45.1% males. The pure breed dogs totaled 88.2% of the animals, of these, 50.98% had long haircoat. The occurrence of side effects reported by owners was 23.5% of cases, gastroenteric symptoms being the most common.

Caracterização preliminar de amostras do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) isoladas no Brasil

This article reports the preliminary characterization of 19 Brazilian bovine viral diarrhea virus (BVDV) isolates, regarding the biological, antigenic and molecular properties. Eleven viruses were isolated from bovine fetuses, six were obtained from blood of animals from herds with reproductive problems, and two were isolated from clinical cases of gastroenteric disease. The clinical cases affected young animals and were characterized by diarrhea, oronasal and digestive erosions and ulceration, and occasional digestive bleeding and vulvar petechial hemorrhage. Sixteen isolates (84.2%), including those obtained from fetuses and clinical cases, were of the non-cytopathic (ncp) biotype. Replication of three isolates (15.8%) in tissue culture was characterized by appearance of cellular vacuolation and progressive destruction of the monolayers. Analysis of these isolates after cloning revealed a mixed population of cytopathic (cp) and non-cytopathic viruses. Analysis of viral polypeptides by SDS-PAGE followed by "Western immunoblot" revealed the production of the non-structural protein NS3/p80 in cells infected with the cp viruses. In contrast, generation of NS3/p80 was not observed in cells infected with the ncp isolates, which only expressed the precursor polypeptide NS23/p125. Analysis of reactivity with a panel of 15 monoclonal antibodies (MAbs) revealed a marked antigenic variability among the isolates, mainly in the envelope glycoprotein E2/gp53. Although one MAb to this glycoprotein recognized 18 isolates (94.7%), the other nine E2/gp53 MAbs recognized zero to 57.9% of the isolates. The marked antigenic diversity observed among the brazilian BVDV isolates may have important implications on diagnosis and immunization strategies.

O presente artigo relata a caracterização inicial de 19 amostras do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) isoladas no Brasil, com relação a aspectos biológicos, antigênicos e moleculares. Onze amostras foram isoladas de fetos bovinos, seis foram obtidas do sangue de animais clinicamente saudáveis de rebanhos com problemas reprodutivos e duas amostras foram isoladas de casos clínicos de enfermidade gastrentérica. Os casos de doença entérica afetaram animais jovens e cursaram com diarréia, às vezes sanguinolenta, erosões e ulcerações na mucosa oronasal e do trato digestivo, e eventualmente hemorragias digestivas e petéquias na vulva. Dezesseis amostras (84,2%), incluindo aquelas isoladas de fetos e dos casos clínicos, pertencem ao biotipo não-citopático (ncp). A replicação de outras três amostras (15,8%), foi caracterizada pelo aparecimento de vacuolização e destruição progressiva do tapete celular. A análise das amostras que produziram citopatologia, após clonagem, revelou tratar-se de populações mistas composta de vírus citopáticos (cp) e não-citopáticos. A análise de polipeptídeos virais através de SDS-PAGE seguida de "Western-immunoblot" revelou a produção da proteína não-estrutural NS3/p80 em células infectadas com as amostras cp. Em contraste, não se evidenciou a geração da NS3/p80 em células infectadas com as amostras ncp que produziram apenas o polipeptídeo precursor NS23/p125. A subsequente análise de reatividade frente a um painel de 15 anticorpos monoclonais (AcMs) revelou uma diversidade antigênica marcante entre os isolados, sobretudo na glicoproteína E2/gp53. Embora um AcM contra essa glicoproteína reagiu com 18 isolados (94,7%), outros nove AcMs anti-E2/gp53 reconheceram entre zero e 57,9% das amostras brasileiras. A grande variabilidade antigênica detectada entre as amostras brasileiras do BVDV pode ter importantes implicações para o diagnóstico e estratégias de controle e imunização contra o vírus.

Análise do genoma de isolados citopáticos do vírus da diarréia viral bovina (bvdv) para rearranjos genômicos associados com a expressão da proteína ns3 / Analysis of cytopathic isolates of bovine viral diarrhea virus (bvdv) for genomic rearrangements associated with expression of the protein ns3

Bezerros nascidos persistentemente infectados (PI) com o biótipo não citopático (ncp) do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) freqüentemente desenvolvem uma doença gastroentérica fatal, chamada de Doença das Mucosas (DM). Dos animais afetados pela DM é possível isolar o vírus original não-citopático (BVDVncp) e um vírus antigenicamente idêntico, porém citopático (BVDVcp). Os BVDVcps são gerados a partir do vírus original ncp por diversos mecanismos genéticos, que resultam na expressão da proteína não-estrutural NS3 como uma proteína individual. Em contrapartida, os BVDVncp expressam somente a proteína precursora NS2-3, que contém a seqüência da NS3 no seu terço carboxi-terminal. Este trabalho relata a investigação dos mecanismos genéticos associados com a expressão da NS3 em 41 isolados citopáticos de BVDV. Uma estratégia de RT-PCR foi delineada para detectar inserções no gene da NS2-3 e/ou duplicações no gene da NS3, dois mecanismos freqüentes de expressão da NS3. Amplificação do genoma dos 41 isolados por RT-PCR revelou a presença de inserções no gene da NS2-3 em três isolados, de tamanho similar a inserção presente na cepa de BVDVcp NADL. O seqüenciamento da inserção de um isolado revelou uma seqüência de 296 nucleotídeos, com uma região central de 270 nucleotídeos altamente homóloga (98%) com a inserção da cepa NADL, que corresponde a uma seqüência do gene celular J-Domain. Outro isolado de BVDVcp contém uma duplicação do gene da NS3 na direção 3 da sua posição original. Em 37 isolados cp não foram detectadas inserções na NS2-3 ou duplicações da NS3. Esses resultados demonstram que a clivagem da NS2-3 sem a presença de inserções de RNA ou duplicações do gene da NS3 parecem ser mecanismos frequentes de expressão da proteína NS3 e citopatologia no BVDV

Calves born persistently infected (PI) with non-cytopathic bovine viral diarrhea virus (ncpBVDV) frequently develop a fatal gastroenteric illness called mucosal disease (MD). From animals affected by MD, both the original virus (ncpBVDV) and an antigenically identical, yet cytopathic virus (cpBVDV) can be isolated. Cytopathic BVDVs are originated from the ncp counterparts by diverse genetic mechanisms, all leading to the expression of the non-structural polypeptide NS3 as a discrete protein. In contrast, ncpBVDVs express only the large precursor polypeptide, NS2-3, which contains the NS3 sequence within its carboxy-terminal half. The investigation of the mechanism leading to NS3 expression in 41 cpBVDV isolates is reported. An RT-PCR strategy was designed to detect insertions within the NS2-3 gene and/or duplication of the NS3 gene two common mechanisms of expression of NS3. RT-PCR amplification revealed insertions in the NS2-3 gene of three cp isolates, being the inserts similar in size to that present in the cpBVDV NADL strain. Sequencing of one such insert revealed a 296 nucleotide sequence, with a central core of 270 putative aminoacid sequence highly homologous (98%) to the NADL insert, a sequence corresponding to the cellular J-Domain gene. Another cpBVDV isolate contained a duplication of the NS3 gene downstream from the original locus. In contrast, no detectable NS2-3 insertions nor NS3 gene duplications were observed in the genome of 37 cp isolates. These results demonstrate that cleavage of NS2-3 without bulk RNA insertions nor NS3 gene duplications seems to be a frequent mechanism leading to NS3 expression and BVDV cytopathology