Genetic similarity between APEC and Escherichia coli strains isolated from Guaruba guarouba in a survey on healthy captive psittacine birds / Similaridade genética entre APEC e cepas de Escherichia coli isoladas de Guaruba guarouba em um estudo com psitacídeos hígidos de cativeiro

The role of psittacine birds as a reservoir of avian pathogenic Escherichia coli (APEC) is not known but would be helpful in understanding the human animal interface, since the enteric microbiota of these birds consists of Gram positive bacteria. The aim of this study was to identify the presence of APEC in feces of clinically healthy Guaruba guarouba. To do this, we isolated and analyzed E. coli from cloacal fecal samples taken from 87 psittacine birds from six zoologic parks, three commercial breeders and one conservation breeder. Of the 87 birds examined, 46 (52.87%) presented E. coli in feces. The presence of the following eight virulence genes was determined by the polymerase chain reaction (PCR): irp2, iucD, iss, vat, cvi/cva, tsh, astA, and papC, and 29 (63.04%) of 46 E. coli isolates tested were positive at least one of the eight genes studied. The frequency of virulence genes observed in isolates of E. coli were 32.6% (15/46) irp2, 26% (12/46) iucD, 19.5% iss (9/46), 17.4% vat (8/46), 17.4% cvi/cva (8/46), 8.7% tsh (4/46), 4.4% astA (2/46) and 0% papC (0/46). The isolates were grouped in 13 genotypic profiles according to virulence gene combinations, but only 2 isolates were classified as APEC, with the pattern iuc, iss, cvi/cva, irp + and iuc, iss, cvi/cva, irp, tsh, vat +. This study reveals the presence of APEC in clinically healthy captive G. guarouba, suggesting that these psittacine birds may act as reservoir for pathogenic microorganisms. Epidemiological studies are needed to determine the relevance of this species as a reservoir and the implications for conservation of endangered species G. guarouba.(AU)

O papel dos psitacídeos como reservatório de Escherichia coli patogênicas para aves (APEC) não é conhecido, mas será útil para a compreensão da interface humano-animal, uma vez que a microbiota entérica destas aves é composta por bactérias Gram-positivas. O objetivo deste estudo foi identificar a presença de APEC em fezes de Guaruba guarouba clinicamente saudáveis. Para isso, foram isoladas e analisadas E. coli presentes em fezes cloacais coletadas de 87 psitacídeos, alojados em seis zoológicos, três criatórios comerciais e um criatório conservacionista. Das 87 aves examinadas, 46 (52,87%) apresentaram E. coli nas fezes. A presença de oito genes de virulência foi determinada pela reação em cadeia pela polimerase (PCR): irp2, iucD, iss, vat, cvi/cva, tsh, astA, e papC, e 29 (63,04%) dos 46 isolados foram positivos para pelo menos um dos oito genes estudados. A frequência dos genes de virulência observada nos isolados de E. coli foi 32.6% (15/46) irp2, 26% (12/46) iucD, 19.5% iss (9/46), 17.4% vat (8/46), 17.4% cvi/cva (8/46), 8.7% tsh (4/46), 4.4% astA (2/46) e 0% papC (0/46). Os isolados foram agrupados em 13 perfis genotípicos de acordo com combinações de genes de virulência, mas apenas duas amostras foram classificadas como APEC, com o perfil iuc, iss, cvi/cva, irp + e iuc, iss, cvi/cva, irp, tsh, iuc, iss, +. Este estudo revela a presença de APEC em aves de cativeiro (G. guarouba) clinicamente saudáveis, sugerindo que estes psitacídeos possam atuar como reservatórios de micro-organismos patogênicos. Estudos epidemiológicos são necessários para determinar a relevância desta espécie como reservatório e as implicações para a conservação da espécie ameaçada G. guarouba.(AU)

Estudo endócrino-reprodutivo, não invasivo de ararajubas, Guaruba guarouba (Gmelin, 1788), mantidas em cativeiro / Endocrine-reproductive non-invasive study in golden conures, Guaruba guarouba (Gmelin, 1788), kept in captivity

O estudo endócrino-reprodutivo com o uso da extração e dosagem de metabólitos de esteroides em excretas tem sido proposta como uma ferramenta extremamente útil por não ser invasiva e permitir estudos longitudinais com grande número de coletas de amostras sem produzir estresse, além de ser viável em psitacídeos. Assim, este estudo objetivou descrever e comparar as concentrações de metabólitos de glicocorticoides, testosterona, estrógeno e progesterona em excretas de ararajubas em diferentes categorias reprodutivas, com o uso de técnicas não invasivas, além de validar fisiologicamente os ensaios para dosagens desses metabólitos em excretas da espécie. Para isso, foram utilizadas 24 (vinte e quatro) ararajubas, das quais foram coletados excretas durante diferentes fases reprodutivas, sendo: sem atividade reprodutiva, em atividade de incubação de ovos e em atividade de postura de ovos. Além disso, foram feitos desafios com aplicação de ACTH e GnRH, para validação dos ensaios. Como resultados, obtivemos picos de concentração de metabólitos de glicocorticoides após aplicação de ACTH e picos de concentração de metabólitos de testosterona nos machos após aplicação do GnRH, validando fisiologicamente os ensaios para mensurar estes metabólitos hormonais; os ensaios para mensurar metabólitos de estrógeno e progesterona foram validados biologicamente. Foram observados valores semelhantes de metabólitos de glicocorticoides entre as diferentes categorias reprodutivas, porém diferentes nos metabólitos de testosterona, estrógeno e progesterona, com valores maiores durante postura (testosterona e estrógeno), e maiores na postura com relação aos animais sem atividade reprodutiva (progesterona)

The endocrine and reproductive study using the extraction and quantification of metabolites of steroids in excreta has been proposed as an extremely useful tool for being non-invasive and allow longitudinal studies with large numbers of samples collected without producing stress, and is feasible in parrots. Thus, this study aimed to describe and compare the concentrations of metabolites of glucocorticoids, testosterone, estrogen and progesterone in the excretes golden conures in different reproductive categories, with the use of non-invasive techniques, and validate physiologically assays for determination of these metabolites in the excreta species. For this, we used 24 (twenty four) golden conures, which excreta were collected during different reproductive phases, as follows: no reproductive activity, activity in the incubation of eggs and egg-laying activity. Additionally, challenges were performed with application of ACTH and GnRH for validation tests. We observed peak concentrations of glucocorticoid metabolites after administration of ACTH and peak concentrations of metabolites of testosterone in males after application of GnRH, physiologically validating assays to measure these hormone metabolites; tests to measure metabolites of estrogen and progesterone were biologically validated. Values of glucocorticoid metabolites were similar between different reproductive categories, but between metabolites of testosterone, estrogen and progesterone were different, with higher values during posture (testosterone and estrogen), and higher in posture toward animals without reproductive activity (progesterone)

Avaliação sanitária de Psittaciformes em cativeiro no estado de Minas Gerais, no período de 2010-2012

Psitacídeos do gênero Amazona, com duas espécies ameaçadas de extinção (A. rhodocorytha e A. vinacea) e duas espécies de psitacídeos mais comuns (A. aestiva e Ara ararauna), todas originárias de cativeiro em Minas Gerais, foram examinados para etiologias previstas no Programa Nacional de Sanidade Avícola (PNSA). Foram também estudadas a síndrome da dilatação do proventrículo (PDD) (Bornavírus aviário, ABV), clamidiose (Chlamydophila psittaci), vírus da doença do bico e das penas dos psitacídeos (BFDV), ecto e endoparasitoses. A amostragem totalizou duzentas e dezesseis (216) aves, sendo cento e quarenta e cinco (145) A. aestiva (67,2%), vinte e uma (21) A. vinacea (9,7%), dez A. rhococorytha (4,6%) e quarenta (40) A. ararauna (18,5%). O período de coleta das amostras biológicas foi iniciado no dia 24-05-2011 e encerrado em 23-08-2011. Durante o mesmo período, aves psitacídeas em óbito foram encaminhadas para avaliações necroscópicas no Setor de Doenças das Aves da UFMG e examinadas, incluindo dois exemplares de cuiu-cuiú (Pionopsitta pileata), quatro papagaios de peito roxo (Amazona vinacea), duas maracanãs (Primolius maracana), uma arara vermelha (Ara macao), uma ararajuba (Guaruba guarouba), um papagaio do espírito santo (Amazona rhodocorytha), uma maracanã-açu (Ara severa), uma maritaca verde (Pionus maximiliani), uma maritaca roxa (Pionus fuscus), duas maritacas de cabeça roxa (Pionus mesntrus), e um lóris arco-íris (Trichoglossus haematodus). Para PDD (ABV), tecidos de 17 psitacídeos com lesões macroscópicas características, foram submetidos à histopatologia, imuno-histoquímica (IHQ) e RT-PCR, confirmados dois em IHQ e quatro em RT-PCR. Para as doenças preconizadas pelo PNSA, embora reagentes emsoro-aglutinação rápida em placa (SAR), 11,57% (25/216) para Mycoplasma gallisepticum (MG) e 17,12% (37/216) para Salmonella Pullorum (SP)/S. Gallinarum (SG), todas foram não reagentes em soroaglutinação lenta (SAL) para SP/SG e inibição da hemaglutinação (IH) para MG e Mycoplasma synoviae (MS), indicando negatividade sorológica. Não foram também encontrados títulos de anticorpos para o vírus da doença de Newcastle (APMV-1) por IH. Nos exames coproparasitológicos de flutuação e de microscopia direta, observou-se uma ocorrência de endoparasitismo em 2,77% (6/216) do total das aves avaliadas. Ovos de Ascaris sp em um A. vinacea; ovos de Tricurídeos, provavelmente do gênero Capillaria sp. encontrados em duas A. ararauna; e oocistos de coccidia não esporulados em três A. aestiva. Para C. psittaci, foram testadas 216 amostras de pools de swab cloacal e fenda palatina, sendo destas 11 amostras (5,09%) positivas pela técnica de PCR. Entre as 11 amostras positivas, oito (3,70%) foram de A. aestiva, uma (0,46%) de A. rhodocorytha, uma (0,46%) de A. vinacea, e uma (0,46%) de A. ararauna. Para BFDV, foram testadas por PCR, 63 amostras de sangue de aves com falhas na plumagem, obtendo-se duas amostras positivas (3,17%), um A. aestiva e uma A. ararauna. Com presente trabalho detectou-se a ocorrência da síndrome da dilatação de proventrículo, demonstrada pela identificação do genoma do ABV em tecidos dos psitacídeos com sinais e lesões sugestivas, sendo o primeiro caso comprovado no país. Foi comprovada a existência de C. psittaci e BFDV em plantéis hígidos em Minas Gerais, bem como algumas parasitoses. Não foram detectados anticorpos para as etiologias (APMV-1, MG, MS, SG, SP) preconizadas no PNSA

Parrots of genera Amazona and Ara, held in captivity in Minas Gerais, including two endangered species (Amazona rhodocorytha and Amazona vinacea) and the common species Amazona aestiva and Ara ararauna, were studied. The etiologies of diseases investigated were recommended by the National Poultry Health Program (PNSA), and the etiologies of other major diseases, such as Chlamydophila psittaci, psittacine beak and feather disease virus (BFDV), ecto endoparasitoses, and the proventricular dilatation disease (PDD) (avian Bornavirus, ABV) were investigated. Based on plate agglutination test (PAT), 11.6% (25/216) of birds were positive for Mycoplasma gallisepticum (MG) and 17.1% (37/216) were positive for Salmonella Pullorum (SP) / S. Gallinarum (SG), although all shown negative by slow agglutination test (SAT) for SP / SG and negative by hemagglutination inhibition (HI) for MG and Mycoplasma synoviae. No antibody titers were found for Newcastle disease virus by IH. In fecal examinations by flotation and direct microscopy on wet preparation (saline), endoparasitism was detected in 2.8% (6/216). Ascaris sp. was detected in one A. vinacea, eggs of Trichuridae nematode, probably Capillaria sp., were found in two Ara ararauna. Non-sporulated oocysts of coccidia were found in three parrots (A. aestiva). For C. psittaci 11 (5.1%) samples were tested positive (11/216) in pools of cloacal and palate cleft swabs by PCR, including eight (3.7%) A. aestiva, one (0.46%) A. rhodocorytha, one (0.46%) A. vinacea, and one (0.46%) Ara ararauna. Considering BFDV, 63 blood samples from birds with feather loss were tested by PCR, resulting in one A. aestiva and one Ara ararauna positive for BFDV DNA (3.17%). PDD was evaluated in 17 parrots with typical lesions, by histopathology, immunohistochemistry (IHC) for ABV antigens and RT-PCR for ABV RNA, revealing two positive by IHC and four positive by RT-PCR, being for the first time confirmed in Brazil

Avaliação do estado sanitário de Ararajubas (Guaruba guarouba) mantidas em cativeiro no Estado de São Paulo - Brasil / Health Assessment of Golden conure (Guaruba guarouba) kept in captivity on São Paulo State - Brazil

A Ararajuba (Guaruba guarouba) é um psitacídeo de médio porte, endêmico do Bioma Amazônico, que se encontra em perigo de extinção devido, principalmente, à perda de habitat e ao tráfico de animais. Poucos trabalhos científicos foram desenvolvidos para avaliar as condições sanitárias dessas aves mantidas em cativeiro, visando à reintrodução da espécie na natureza. Este estudo teve por objetivo avaliar o estado sanitário das aves mantidas em Zoológicos e Criadouros do Estado de São Paulo, por meio de avaliações hematológica, microbiológica e parasitológica. Foram colhidas amostras de 87 indivíduos mantidos em seis Parques Zoológicos, três Criadouros Comerciais e um Criadouro Conservacionista, obtendo-se como resultados da avaliação hematológica: valor médio do volume globular (Ht%): 46,12; valor médio de proteína total sérica (g/dL): 3,55; valor médio de hemoglobina (g/dL): 12,68; valor médio do número de hemácias (x 106 mm3): 3,52; valor médio do número dos leucócitos totais (x103/mm3): 13,41; valor médio do número de trombócitos (/mm3): 26.029,4; valor médio do VCM (fL): 133,3; valor médio do HCM (pg): 36,58; valor médio do CHCM (g/L) : 27,65; valor médio de heterófilos (%):56.62; valor médio de linfócitos (%): 42,22; valor médio de monócitos (%): 0,9; valor médio de eosinófilos (%):0,04; valor médio de basófilos (%): 0,20. Quanto à análise microbiológica, não houve isolamento de Salmonella spp. na microbiota intestinal, porém, houve crescimento de Escherichia coli em 50% dos animais. No exame parasitológico, todos os animais foram negativos tanto para a pesquisa de endoparasitas intestinais como para hemoparasitas. O soro obtido da centrifugação do sangue e a papa de hemácias foram armazenados para futuras pesquisas

The Ararajuba or Golden conure (Guaruba guarouba) is a medium-sized parrot, endemic to the Amazon biome and threatened of extinction primarily due to habitat loss and poaching. Few scientific studies have examined the health conditions of these birds kept in captivity, which will be essential to future reintroduction efforts. This study aimed to evaluate the health status of Ararajubas maintained in zoos and private breeders in São Paulo state, Brazil, through haematological, microbiological and parasitological evaluations. Samples were obtained from 87 individuals held at six Parks Zoos, three Commercial Breeders and one Conservation Breeder. Average haematological results: packed cell volume 46.12%, total serum protein 3.55 g/dL, haemoglobin 12.68 g/dL, erythrocytes 3.52 x 106 cells/mm3, Leukocytes 13.41 x 103 cells/mm3, thrombocytes 26.03 x 103 cells/mm3, Mean Corpuscular Volume 133.3 fL, Mean Corpuscular Haemoglobin 36.58 pg, Mean Corpuscular Haemoglobin Concentration 27.65 g/dL, heterophils 56.62%, lymphocytes 42.22%, monocytes 0.9%, eosinophils 0.04%, basophils 0.20%. Microbiological cultures: Escherichia coli could be isolated from 50% of the cloacal swabs and Salmonella spp. was not isolated in none. Parasitology: all animals were negative for both intestinal parasites and haemoparasites. Plasma and erythrocytes obtained by centrifugation were stored for future research