Molecular docking studies and evaluation of the antiretroviral activity and cytotoxicity of the species Lafoensia pacari Saint-Hilaire / Estudos de docking molecular e avaliação da atividade antirretroviral e citotoxicidade da espécie Lafoensia pacari Saint-Hilaire

Interest in antiviral plant species has grown exponentially and some have been reported to have anti-HIV properties. This research aims to perform the bio-guided phytochemical fractionation by antiretroviral activity of Lafoensia pacari stem barks. This in vitro experimental study involved the preparation of plant material, obtention of ethanolic extract, fractionation, purification, identification and quantification of fractions, acid-base extraction, nuclear magnetic resonance, HIV-1 RT inhibition test and molecular docking studies. From the bio-guided fractionation by the antiretroviral activity there was a higher activity in the acetanolic subfractions, highlighting the acetate subfraction - neutrals with 60.98% of RT inhibition and ellagic acid with 88.61% of RT inhibition and absence of cytotoxicity. The macrophage lineage cytotoxicity assay showed that the chloroform fraction was more toxic than the acetate fraction. The analysis of the J-resolved spectrum in the aromatic region showed a singlet at 7.48 and 6.93 ppm which was identified as ellagic acid and gallic acid, respectively. The 5TIQ enzyme obtained better affinity parameter with the ellagic acid ligand, which was confirmed by the HSQC-1H-13C spectra. Gallic acid was also favorable to form interaction with the 5TIQ enzyme, being confirmed through the HSQC-1H-13C spectrum. From the PreADMET evaluation it was found that ellagic acid is a promising molecule for its RT inhibition activity and pharmacokinetic and toxicity parameters.

O interesse por espécies vegetais com ação antiviral tem crescido exponencialmente e algumas tem sido relatadas como possuídoras de propriedades anti-HIV. Essa pesquisa tem como objetivo realizar o fracionamento fitoquímico biodirecionado pela atividade antirretroviral das cascas do caule da espécie Lafoensia pacari. Trata-se de um estudo experimental in vitro e a metodologia envolve preparo do material vegetal, obtenção do extrato etanólico, fracionamento, purificação, identificação e quantificação das frações, extração ácido-base, ressonância magnética nuclear, teste de inibição da TR do HIV-1 e estudos de docking molecular. A partir do fracionamento biodirecionado pela atividade antirretroviral verificou-se uma maior atividade nas subfrações acetanólica. Com destaque para a subfração acetanólica neutros com 60,98% de inibição de TR e o ácido elágico com 88,61% de inibição de TR e ausência de citotoxicidade. Verificou-se com o teste de citotoxicidade em linhagem de macrófagos que a fração clorofórmica foi mais tóxica que a fração acetanólica. A análise do espectro J-resolvido na região aromática apresentou um simpleto em 7.48 e 6.93 ppm que foram identificados como ácido elágico e ácido gálico respectivamente. A enzima 5TIQ obteve melhor parâmetro de afinidade com o ligante ácido elágico que foi confirmado pelos espectros HSQC-1H-13C. O ácido gálico mostrou-se também favorável a formar interação com a enzima 5TIQ, sendo confirmado através do espectro HSQC-1H-13C. Através da avaliação do PreADMET verificou-se que o ácido elágico é uma molécula promissora pela sua atividade de inibição da TR e parâmetros farmacocinéticos e de toxicidade.

Serological survey of Neospora caninum and Toxoplasma gondii in shelter-housed cats infected with feline immunodeficiency virus, Brazil / Inquérito sorológico para Neospora caninum e Toxoplasma gondii em um abrigo de gatos infectados com o vírus da imunodeficiência felina, Brasil

Felines play a leading role in the epidemiology of Toxoplasma gondii infection, but there is scarce information about the epidemiology of Neospora caninum, particularly in feline immunodeficiency virus (FIV)-infected cats. Cats seropositive to T. gondii do not usually show symptoms unless they are immunosuppressed, such as FIV-infected cats. The same relationship remains poorly known for N. caninum, although it has been associated with neurological disorders in HIV-infected people. Since FIV-infected cats are prone to develop encephalitis of unknown etiology, this study aimed to evaluate the presence of specific antibodies to T. gondii and N. caninum in a shelter for stray cats naturally infected with FIV. A total of 104 serum samples from cats living in a shelter, located in São Paulo city (Brazil), was assessed for T. gondii and N. caninum specific antibody by indirect fluorescent-antibody test (IFAT). Of the 104 cats, 25 (24%) were infected with FIV and, aside from these, 8 (32%) had antibodies against T. gondii (titers from 16 to 128). Only 1 (4%) of the FIV-infected cats had antibodies against N. caninum, which was the first record of coinfection. Among the FIV-naïve cats, 11 (14%) were positive for T. gondii(titers from 16 to 256) and only 1 (1.2%) had antibodies against N. caninum. Serologically positive reactions to T. gondii and N. caninum were not correlated with age or sex (p>0.05), and there was no correlation between FIV and the occurrence of anti-T. gondii or anti-N. caninum antibodies (p>0.05). Further studies encompassing larger cat populations from different origins and locations are essential to clarify the prevalence of T. gondii and N. caninum antibodies in FIV-positive cats.(AU)

Os felinos têm um papel importante na epidemiologia da infecção por Toxoplasma gondii, mas pouco se sabe sobre a epidemiologia da infecção por Neospora caninum em gatos, particularmente em gatos infectados com o vírus da imunodeficiência felina (FIV). Gatos soropositivos para Toxoplasma gondii geralmente não apresentam sintomas a não ser que estejam imunossuprimidos, como gatos infectados com FIV. A mesma relação ainda é pouco conhecida para N. caninum, embora tenha sido associada a distúrbios neurológicos em pessoas infectadas pelo HIV. Considerando que gatos infectados com FIV são propensos a desenvolver encefalite de etiologia desconhecida, o presente estudo teve como objetivo avaliar a presença de anticorpos específicos para T. gondii e N. caninum em gatos infectados com FIV. Um total de 104 amostras de soro de gatos residentes em um abrigo na cidade de São Paulo, Brasil, foram avaliadas para a presença de anticorpos contra T. gondii e N. caninum pelo teste de imunofluorescência indireta (RIFI). Dos 104 gatos, 25 (24%) estavam infectados com FIV e destes 8, (32%) tinham anticorpos contra T. gondii (titulação entre 16 e 128). Apenas 1 (4%) dos gatos infectados com FIV apresentava anticorpos contra N. caninum, sendo este o primeiro registro dessa coinfecção. Entre os gatos não infectados com FIV, 11 (14%) foram positivos para T. gondii (titulação entre 16 e 256) e apenas 1 (1,2%) tinha anticorpos contra N. caninum. A reação sorologicamente positiva para T. gondii e N. caninum não foi correlacionada com a idade ou sexo (p> 0,05), nem houve correlação entre FIV e ocorrência de anticorpos para T. gondii ou N. caninum(p> 0,05). Estudos subsequentes abrangendo populações maiores de gatos de diferentes origens e locais são essenciais para esclarecer a prevalência de anticorpos contra T. gondii e N. caninum em animais acometidos por FIV.(AU)

Inflammation and kidney involvement in human viral diseases caused by SARS-CoV-2, HIV, HCV and HBV

Inflammation is closely related to renal diseases. This is particularly true for renal diseases caused by infections as in viral diseases. In this review, we highlight the inflammatory mechanisms that underlie kidney dysfunction in SARS-CoV-2, human immunodeficiency (HIV), hepatitis C (HCV), and hepatitis B (HBV) infections. The pathophysiology of renal involvement in COVID-19 is complex, but kidney damage is frequent, and the prognosis is worse when it happens. Virus-like particles were demonstrated mostly in renal tubular epithelial cells and podocytes, which suggest that SARS-CoV-2 directly affects the kidneys. SARS-CoV-2 uses the angiotensin-converting enzyme 2 receptor, which is found in endothelial cells, to infect the human host cells. Critical patients with SARS-CoV-2-associated acute kidney injury (AKI) show an increase in inflammatory cytokines (IL-1β, IL-8, IFN-γ, TNF-α), known as cytokine storm that favors renal dysfunction by causing intrarenal inflammation, increased vascular permeability, volume depletion, thromboembolic events in microvasculature and persistent local inflammation. Besides AKI, SARS-CoV-2 can also cause glomerular disease, as other viral infections such as in HIV, HBV and HCV. HIV-infected patients present chronic inflammation that can lead to a number of renal diseases. Proinflammatory cytokines and TNF-induced apoptosis are some of the underlying mechanisms that may explain the virus-induced renal diseases that are here reviewed.(AU)

Inflammation and kidney involvement in human viral diseases caused by SARS-CoV-2, HIV, HCV and HBV

Inflammation is closely related to renal diseases. This is particularly true for renal diseases caused by infections as in viral diseases. In this review, we highlight the inflammatory mechanisms that underlie kidney dysfunction in SARS-CoV-2, human immunodeficiency (HIV), hepatitis C (HCV), and hepatitis B (HBV) infections. The pathophysiology of renal involvement in COVID-19 is complex, but kidney damage is frequent, and the prognosis is worse when it happens. Virus-like particles were demonstrated mostly in renal tubular epithelial cells and podocytes, which suggest that SARS-CoV-2 directly affects the kidneys. SARS-CoV-2 uses the angiotensin-converting enzyme 2 receptor, which is found in endothelial cells, to infect the human host cells. Critical patients with SARS-CoV-2-associated acute kidney injury (AKI) show an increase in inflammatory cytokines (IL-1β, IL-8, IFN-γ, TNF-α), known as cytokine storm that favors renal dysfunction by causing intrarenal inflammation, increased vascular permeability, volume depletion, thromboembolic events in microvasculature and persistent local inflammation. Besides AKI, SARS-CoV-2 can also cause glomerular disease, as other viral infections such as in HIV, HBV and HCV. HIV-infected patients present chronic inflammation that can lead to a number of renal diseases. Proinflammatory cytokines and TNF-induced apoptosis are some of the underlying mechanisms that may explain the virus-induced renal diseases that are here reviewed.(AU)

Complying with the HIV test algorithm for diagnosing children aged from 1 to 18 months born to HIV–positive mothers / Cumprimento do algoritmo para o diagnóstico do HIV em crianças de 1 a 18 meses nascidas de mães HIV positivas

The evolution of the epidemic of HIV in Brazil has especially affected women, and the control of mother-to-child transmission of HIV (MTCT) has been a new challenge to be faced. This study assessed the compliance with the algorithm recommended by the Ministry of Health (MH) for diagnosing the children born to HIV-positive mothers, followed-up in the Regional Central Laboratory of the Instituto Adolfo Lutz of São José do Rio Preto-X, and to evaluate the occurrence of mother-to-child transmission. This cross-sectional descriptive study collected data on the CD4+ T-cell count and viral load System for Controlling Laboratory Examinations (SISCEL) and System for Hospital Management (SIGH) from January 2009 to December 2014. In this period, 265 children were registered, being 141 (53.2%) male and 124 (46.8%) female; and only 217 (81.9%) complied with the algorithm recommended by the MH. The mean prevalence of MTCT was 5.9%. Despite the efforts exerted by the MH, the HIV algorithm noncompliance still occurs, and the vertical transmission rate is higher than 2%. These data reinforce the need to intensify the surveillance, to improve the information and the follow-up of pregnant women, and to rescue those responsible who do not strictly comply with the algorithm proposed by the MH.(AU)

A epidemia do HIV no Brasil tem afetado de maneira especial as mulheres e trouxe, como um novo desafio a ser enfrentado, o controle da transmissão vertical (TV) do HIV. O objetivo deste estudo foi de avaliar o cumprimento ao algoritmo preconizado pelo Ministério da Saúde(MS) no diagnóstico de crianças nascidas de mães HIV positivas, acompanhadas no Centro de Laboratório Regional Instituto Adolfo Lutz de São José do Rio Preto-X, e avaliar a ocorrência de TV. Foram coletados dados do Sistema de Informação e Gestão Hospitalar (SIGH) e do Sistema de Controle de Exames Laboratoriais da Rede Nacional de Contagem de Linfócitos T CD4+ e Carga Viral (SISCEL) no período de janeiro de 2009 a dezembro de 2014. Foram cadastradas265 crianças, 141 (53,2%) eram do sexo masculino e 124 (46,8%) feminino. Destas, 217 (81,9%) completaram o algoritmo preconizado pelo MS. A média da prevalência de TV foi de 5,9%. Apesar dos esforços do MS, há descumprimento no algoritmo e a taxa de TV é maior que a meta de 2%. Os dados reforçam a necessidade de intensificar a vigilância, melhorar a informação e acompanhamento de gestantes e resgate dos responsáveis que não cumprem o algoritmo do MS.(AU)

Complying with the HIV test algorithm for diagnosing children aged from 1 to 18 months born to HIV–positive mothers / Cumprimento do algoritmo para o diagnóstico do HIV em crianças de 1 a 18 meses nascidas de mães HIV positivas

The evolution of the epidemic of HIV in Brazil has especially affected women, and the control of mother-to-child transmission of HIV (MTCT) has been a new challenge to be faced. This study assessed the compliance with the algorithm recommended by the Ministry of Health (MH) for diagnosing the children born to HIV-positive mothers, followed-up in the Regional Central Laboratory of the Instituto Adolfo Lutz of São José do Rio Preto-X, and to evaluate the occurrence of mother-to-child transmission. This cross-sectional descriptive study collected data on the CD4+ T-cell count and viral load System for Controlling Laboratory Examinations (SISCEL) and System for Hospital Management (SIGH) from January 2009 to December 2014. In this period, 265 children were registered, being 141 (53.2%) male and 124 (46.8%) female; and only 217 (81.9%) complied with the algorithm recommended by the MH. The mean prevalence of MTCT was 5.9%. Despite the efforts exerted by the MH, the HIV algorithm noncompliance still occurs, and the vertical transmission rate is higher than 2%. These data reinforce the need to intensify the surveillance, to improve the information and the follow-up of pregnant women, and to rescue those responsible who do not strictly comply with the algorithm proposed by the MH.

A epidemia do HIV no Brasil tem afetado de maneira especial as mulheres e trouxe, como um novo desafio a ser enfrentado, o controle da transmissão vertical (TV) do HIV. O objetivo deste estudo foi de avaliar o cumprimento ao algoritmo preconizado pelo Ministério da Saúde(MS) no diagnóstico de crianças nascidas de mães HIV positivas, acompanhadas no Centro de Laboratório Regional Instituto Adolfo Lutz de São José do Rio Preto-X, e avaliar a ocorrência de TV. Foram coletados dados do Sistema de Informação e Gestão Hospitalar (SIGH) e do Sistema de Controle de Exames Laboratoriais da Rede Nacional de Contagem de Linfócitos T CD4+ e Carga Viral (SISCEL) no período de janeiro de 2009 a dezembro de 2014. Foram cadastradas265 crianças, 141 (53,2%) eram do sexo masculino e 124 (46,8%) feminino. Destas, 217 (81,9%) completaram o algoritmo preconizado pelo MS. A média da prevalência de TV foi de 5,9%. Apesar dos esforços do MS, há descumprimento no algoritmo e a taxa de TV é maior que a meta de 2%. Os dados reforçam a necessidade de intensificar a vigilância, melhorar a informação e acompanhamento de gestantes e resgate dos responsáveis que não cumprem o algoritmo do MS.

CARACTERIZAÇÃO CLÍNICA, EPIDEMIOLÓGICA E LABORATORIAL DOS PACIENTES HIV EM INÍCIO DE TERAPIA ANTIRRETROVIRAL NO HOSPITAL UNIVERSITÁRIO DO TOCANTINS, 2019.

A infecção pelo HIV configura-se como uma problemática contemporânea de destaque na saúde pública. O comportamento da infecção do HIV na região Norte do Brasil contrasta com outras regiões, apresentando tendências de elevação do número de casos novos e óbitos anualmente. O objetivo do estudo foi caracterizar e descrever os pacientes que iniciaram o uso de terapia antirretroviral atendidos no Hospital de Doenças Tropicais da Universidade Federal do Tocantins (HDT-UFT), situado no município de Araguaína, Norte do estado do Tocantins, no ano 2019. Trata-se de um estudo epidemiológico com caráter: retrospectivo, documental, transversal, descritivo e com abordagem quantitativa. No período verificou-se que 119 pacientes iniciaram o uso de terapia antirretroviral (TARV), dos quais 98 pacientes foram incluídos neste estudo, foram excluídos 21 pacientes por não atenderem os critérios de inclusão. O estudo demonstrou predominância de indivíduos do sexo masculino (74,5%), solteiros (72,2%) com faixa etária de 18 a 39 anos (75,5%). A escolaridade predominante foi para o Ensino Médio Completo (38,1%), sendo observado o vínculo empregatício formal em (56,9%). Os integrantes da pesquisa residiam em três diferentes estados: Tocantins (93,9%), Pará (5,1%) e Maranhão (1,0%) e a maioria em zona urbana (96,9%). O modo de transmissão do HIV foi (100%) sexual e com a categoria de exposição predominante heterossexual (59,3%). A mediana da carga viral no início da TARV foi de 18.733 cópias/ml. A mediana da contagem de LT-CD4+, importante célula de defesa humana, no momento do início da TARV foi de 347cél/mm3, evidenciando que 51,02% do total das Pessoas Vivendo com HIV (PVHIV) foram diagnosticados de forma tardia. Não houve associação entre as características epidemiológicas e a contagem de LT-CD4+. Do total de participantes analisados, 53,1% apresentavam pelo menos uma intercorrência clinica registrada no início da TARV. Referente aos parâmetros dos exames laboratoriais, foi observada uma menor média nos participantes com contagem de LT-CD4+ < 350 cél/mm3. Destaca-se uma Infecção Sexualmente Transmissível (IST) associada ao marcador sorológico da sífilis com 26% dos testes reagentes. Com base nas características descritas a partir dos dados obtidos, evidencia-se que serão necessárias ações que visem o diagnóstico oportuno para HIV e outras infecções sexualmente transmissíveis a fim de evitar que os pacientes cheguem aos serviços de saúde em fases avançadas de deterioração imunológica e/ou com a presença de coinfecções.

HIV infection is a prominent contemporary issue in public health. The behavior of HIV infection in the Northern region of Brazil contrasts with other regions, showing an upward trend in the number of new cases and deaths annually. The aim of the study was to characterize and describe patients who started using antiretroviral therapy treated at the Hospital for Tropical Diseases of the Federal University of Tocantins (HDT-UFT), located in the municipality of Araguaína, North of the state of Tocantins, in 2019. This is an epidemiological study with a retrospective, documentary, cross- sectional, descriptive and quantitative approach. In the period, it was found that 119 patients started using antiretroviral therapy (ART), of which 98 patients were included in this study, 21 patients were excluded for not meeting the inclusion criteria. The study showed a predominance of male individuals (74.5%), single (72.2%) aged 18 to 39 years (75.5%). The predominant education was for Complete High School (38.1%), with formal employment in (56.9%). The members of the survey lived in three different states: Tocantins (93.9%), Pará (5.1%) and Maranhão (1.0%) and the majority in urban areas (96.9%). The mode of HIV transmission was (100%) sexual and with the predominantly heterosexual exposure category (59.3%). The median viral load at the start of ART was 18,733 copies/ml. The median count of LT-CD4+, an important human defense cell, at the time of initiation of ART was 347cell/mm3, showing that 51.02% of all People Living with HIV (PLHIV) were diagnosed late. Not there was an association between epidemiological characteristics and LT-CD4+ count. Of the total number of participants analyzed, 53.1% had at least one clinical complication recorded at the beginning of ART. Regarding the parameters of laboratory tests, a lower mean was observed in participants with LT-CD4+ count < 350 cells/mm3. A Sexually Transmitted Infection (STI) associated with the serological marker of syphilis stands out, with 26% of the reagent tests. Based on the characteristics described from the data obtained, it is evident that actions aimed at timely diagnosis for HIV and other sexually transmitted infections will be necessary in order to prevent patients from reaching health services in advanced stages of immunological deterioration and/ or with the presence of coinfections.

TRATAMENTO ANTIRRETROVIRAL DO PACIENTE HIV/AIDS: VARIÁVEIS QUE INFLUENCIAM A ADESÃO

A AIDS (do inglês Acquired Immunodeficiency Syndrom) é uma epidemia generalizada com cerca de 38 milhões de pessoas no mundo infectadas pelo vírus. No Brasil, até junho de 2019, tem-se registrado 966,058 pessoas vivendo com HIV/aids. O Estado do Rio Grande do Sul destaca-se no ranking das 100 cidades com mais de 100 mil habitantes com 12 cidades com os maiores índices de detecção de HIV (Vírus da Imunodeficiência Humana), sendo Porto Alegre, a 11ª entre as demais cidades do ranking. O início da terapia antirretroviral (TARV), preconizada pela Organização Mundial de Saúde (OMS) se dava a partir das manifestações clínicas do paciente, sendo a contagem de linfócitos TCD4+ e a carga viral os indicadores efetivos para a conduta medicamentosa. A partir de 2015, a OMS passou a recomendar o início de tratamento imediato para todas as pessoas diagnosticadas com o vírus HIV e a adoção do esquema terapêutico 3 em 1 (Tenofovir, Lamivudina e Efavirenz). Diversos estudos contribuem para demonstrar que o início precoce da TARV e adesão adequada estão associados a menores taxas de mortalidade, morbidade e diminuição da transmissão viral, auxiliando a controlar a disseminação da epidemia mundial. Entretanto, ainda que esta medida tenha contribuído para a adesão ao tratamento por conta da redução dos efeitos adversos, bem como a facilidade de administração em dose fixa combinada, inúmeros problemas têm sido relacionados à adesão ao tratamento pelos portadores de HIV/aids. Na esfera pública, dentre os principais podem ser citados a ineficiência observada nos serviços prestados pelo sistema de saúde (dificuldade quanto ao monitoramento dos pacientes a partir do sistema de notificações e realização de exames periódicos, disponibilidade e dispensação dos medicamentos, entre outros). Do mesmo modo, tanto os efeitos colaterais e as dificuldades inerentes ao uso da TARV quanto variáveis sócio econômicas e principalmente, comportamentais, têm sido apontados como relevantes para os resultados observados quanto à disseminação do vírus nas populações. Diante da complexidade de elementos que constituem a adesão a tratamentos desta natureza, faz-se necessário reconhecer e estabelecer as variáveis que contribuem para a efetividade ou ineficiência dos tratamentos preconizados para esta doença. Nesse sentido, o presente trabalho estabeleceu variáveis que possam influenciar a adesão ao tratamento, sob três aspectos principais: a efetividade do sistema de saúde, a 6 recuperação imunológica em decorrência da medicação e o contexto comportamental dos indivíduos As análises foram conduzidas a partir de coleta de dados de 678 pacientes de dois Serviços de Atendimento Especializado (SAE de Novo Hamburgo e SAE de Viamão), definidos como pontos de coleta por conta das notificações dos altos índices de infecção pelo vírus nestas regiões. O período de coleta de dados definido considerou a atendimento à normativa da OMS quanto ao uso da TARV de forma compulsória a partir do diagnóstico de infecção, independentemente dos resultados clínicos, compreendendo os anos de 2015 à 2017.Os dados relativos à carga viral e linfócitos TCD4+ , bem como a dispensação de medicamentos, comorbidades e demais dados epidemiológicos foram obtidos a partir de prontuários físicos, eletrônicos e dos Sistemas de Monitoramento do Ministério da Saúde (MS) (SISCEL Sistema de Monitoramento Clínico e SINAN Sistema Nacional de Agravos e Notificações). A fim de observar a influência do atendimento dispensado pelos profissionais de saúde responsáveis no SAE de Novo Hamburgo, bem como as percepções destes relativas à gestão do controle da epidemia, foram aplicados o questionário CEAT-HIV para PVHA (Pessoas Vivendo com HIV/aids) para 181 pacientes usuários do SAE, um questionário para 10 funcionários dos SAE e o questionário QualiAids (para gestores). Os dados avaliados indicam que o comportamento do indivíduo, adesão medicamentosa insuficiente e o serviço de saúde influenciam a adesão ao tratamento. Os resultados obtidos pelo presente estudo visam contribuir para a elaboração de indicadores que permitam o entendimento sobre quais variáveis atribuem maior valor ao processo de adesão ao tratamento, a fim de subsidiar estudos para o aprimoramento de políticas que atendam às necessidades individuais e coletivas frente à epidemia do HIV/aids, com especial foco na adesão ao tratamento na região sul do Brasil.

AIDS (Acquired Immunodeficiency Syndrom) is a widespread epidemic of the nearly 38 million people worldwide have been infected with virus. In Brazil, until June 2019, 966,058 people living with HIV / AIDS. The state of Rio Grande do Sul stands out in the ranking of 100 cities with more than 100 thousand inhabitants with 12 cities with the highest rates of detection of HIV (Human Immunodeficiency Virus), with Porto Alegre being the 11th among the other cities in the ranking. The initiation of antiretroviral therapy (ART), recommended by the World Health Organization (WHO), was based on the clinical manifestations of the patient, with the TCD4 + lymphocyte count and viral load being the effective indicators for medication management. From 2015, the WHO began to recommend the beginning of immediate treatment for all people diagnosed with the HIV virus and the adoption of the 3-in-1 therapeutic scheme (Tenofovir, Lamivudine and Efavirenz). Several studies contribute to demonstrate that the early onset of ART and adequate adherence are associated with lower rates of mortality, morbidity and decreased viral transmission, helping to control the spread of the worldwide epidemic. However, even though this measure has contributed to adherence to treatment due to the reduction of adverse effects, as well as the ease of oral administration, numerous problems have been related to adherence to treatment by people with HIV / AIDS. In the public sphere, among the main ones can be cited the inefficiency observed in the services provided by the health system (difficulty in monitoring patients from the notification system and conducting periodic examinations, availability and dispensing of medications, among others). Likewise, both the side effects and the difficulties inherent to the use of HAART and socioeconomic and, mainly, behavioral variables, have been pointed out as relevant to the results observed regarding the spread of the virus in populations. In view of the complexity of elements that constitute adherence to treatments of this nature, it is necessary to recognize and establish the variables that contribute to the effectiveness or inefficiency of the treatments recommended for this epidemic. In this sense, the present study established variables that can influence adherence to treatment, under three main aspects: the effectiveness of the health system, the immune recovery due to medication and the behavioral context of individuals 8 The analyzes were conducted based on data collection from 678 patients from two Specialized Care Services (SAE de Novo Hamburgo and SAE de Viamão), defined as collection points due to notifications of the high rates of infection by the virus in these regions. The defined data collection period considered complying with WHO regulations regarding the use of ART on a compulsory basis from the diagnosis of infection, regardless of clinical results, comprising the years 2015 to 2017. Data on viral load and lymphocytes TCD4 +, as well as the dispensing of medications, comorbidities and other epidemiological data were obtained from physical and electronic medical records and the Monitoring Systems of the Ministry of Health (MS) (SISCEL - Clinical Monitoring System and SINAN - National System of Diseases and Notifications). In order to observe the influence of the care provided by the responsible health professionals in the SAE of Novo Hamburgo, as well as their perceptions regarding the management of the control of the epidemic, the CEAT-HIV questionnaire for PLWHA (People Living with HIV / AIDS) was applied for 181 patients using SAE, a questionnaire for 10 SAE employees and the QualiAids questionnaire (for managers). The evaluated data indicate that the individual's behavior, insufficient medication adherence and the health service influence treatment adherence. The data obtained by the present study aim to contribute to the development of indicators that allow an understanding of which variables attribute greater value to the treatment adherence process, in order to support studies for the improvement of policies that meet individual and collective needs in the face of the epidemic. HIV / AIDS, with a special focus on adherence to treatment in southern Brazil.

Comparison of laboratorial tests for the diagnosis of human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) and type 2 (HTLV-2) in HIV-1 infected patients / Comparação de testes laboratoriais para o diagnóstico de infecção por vírus linfotrópicos de células T humanas do tipo 1 (HTLV-1) e tipo 2 (HTLV-2) em pacientes infectados por HIV-1

The present study aimed at investigating the best algorithm definition to be employed for diagnosing the human T lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) and type 2 (HTLV-2) in HIV-1 infected/Aids patients. Blood samples of 1,608 HIV-1 infected patients from the AIDS Reference Center (CRT DST/AIDS-SP) were tested for the presence of HTLV-1/2 antibodies using two screening assays (EIA Murex HTLV-I+II, and Gold ELISA HTLV-I/II), and confirmed by two Blots [HTLV Blot 2.4 (Western Blot WB) and INNO-LIA HTLV I/II (Line ImmunoAssay - LIA)], and one molecular assay (pol real-time PCR). The screening tests detected 51(Murex) and 49 (Gold ELISA) reagents sera. WB , confirmed 23 HTLV-1, 12 HTLV-2, six HTLV, and nine showed HTLV indeterminate profiles. LIA confirmed 24 HTLV-1, 20 HTLV-2, and six HTLV. PCR detected 18 HTLV-1- and 12 HTLV-2-infected blood samples. By using any confirmatory assay, 50 patients confirmed HTLV infection: 25 HTLV-1 (1.55 %), 21 HTLV-2 (1.31 %) and four HTLV (0.25 %). The sensitivity of LIA, WB and PCR assays were 96 %, 76 % and 60 %, respectively. By considering the assays cost as the sole variable, the best testing algorithm for diagnosing HIV-1/HTLV-coinfection in HIV-1 infected patient was the use of PCR followed by LIA technique(AU)

O presente estudo pesquisou o melhor algoritmo de testes laboratoriais para efetuar o diagnóstico de infecção por vírus linfotrópicos de células T humanas dos tipos 1 (HTLV-1) e 2 (HTLV-2) em pacientes HIV-1 positivos. Amostras de sangue de 1.608 pacientes do CRT DST/Aids-SP foram analisadas quanto à presença de anticorpos específicos usando-se dois ensaios de triagem (EIA Murex HTLV-I+II e Gold ELISA HTLV-I/II), dois confirmatórios [HTLV Blot 2.4 (Western Blot WB) e INNO-LIA HTLV I/II (Line ImmunoAssay - LIA)] e um molecular (PCR em tempo real pol). Na triagem foram detectados 51(Murex) e 49 (Gold ELISA) soros reagentes. Pelo WB, 23 soros confirmaram infecção por HTLV-1, 12 HTLV-2, seis HTLV e nove apresentaram perfis indeterminados. O LIA detectou 24 soros HTLV-1 positivos, 20 HTLV-2 e seis HTLV. A PCR evidenciou segmento pol de HTLV-1 em 18 e HTLV-2 em 12 amostras de sangue. Pelos testes confirmatórios, em 50 pacientes foi confirmada a infecção por HTLV: 25 HTLV-1 (1,55 %), 21 HTLV-2 (1,31 %) e quatro HTLV (0,25 %). As sensibilidades do LIA, WB e PCR foram de 96 %, 76 % e 60 %, respectivamente. Considerando-se apenas o custo, o melhor algoritmo diagnóstico para população infectada pelo HIV-1 foi o uso da PCR seguida do LIA(AU)

OCORRÊNCIA E CARACTERIZAÇÃO MOLECULAR DE Cryptosporidium spp E Giardia duodenalis EM PACIENTES ATENDIDOS NO SISTEMA PÚBLICO DE SAÚDE

Os protozoários Cryptosporidium e Giardia são importantes etiologias zoonóticas de diarreia. Diferentes métodos de diagnóstico aplicados a esses protozoários em diferentes populações resultam em variações nas estimativas de ocorrência e dificulta uma melhor compreensão da complexa epidemiologia. Estes protozoários são descritos em diversos ambientes no Brasil e a utilização de métodos moleculares possibilita uma melhor caracterização da ocorrência, e a epidemiologia molecular permite identificar o impacto da transmissão zoonótica na epidemiologia destes parasitas. A presente tese teve como objetivo caracterizar a ocorrência Cryptosporidium e Giardia em pacientes atendidos no sistema público de saúde, no município de Londrina, PR. No primeiro estudo, amostras de fezes foram coletadas de 54 pacientes internados em um hospital de referência para doenças infecciosas; dados de idade, sexo, endereço, afecção que levou ao internamento, tempo de internação e histórico clínico também foram coletados. Cryptosporidium e Giardia foram diagnosticados pela PCR para o gene 18S rRNA. Dos pacientes avaliados 68,51% (37/54) eram portadores da infecção pelo HIV, sendo que 81,08% (30/37) destes manifestavam a Síndrome da Imunodeficiência Adquirida (AIDS); Cryptosporidium foi identificado em dois pacientes (3,07%; 02/54) e Giardia em três (5,55%; 03/54), todos os pacientes positivos manifestavam a AIDS. A análise por sequenciamento genético revelou Cryptosporidium suis em um paciente, não foi possível a caracterização no outro, e confirmou Giardia duodenalis nos três pacientes positivos. No segundo estudo, amostras de fezes encaminhadas por unidades básicas de saúde, foram coletadas, totalizando 112 amostras, 102 da área urbana e 10 de distritos do município. Dados dos pacientes (idade, sexo e endereço) também foram coletados. Foi realizado o diagnóstico para Cryptosporidium e Giardia por PCR para o gene 18SrRNA, as amostras positivas foram caracterizadas pelos genes TPI, Beta-giardin e GDH para Giardia e 18S rRNA para Cryptosporidium. No total, 19,64% (22/112) foram positivas para Giardia; a ocorrência em pacientes do sexo feminino foi de 20,33% e em pacientes do sexo masculino de 18,86%; quanto aos grupos etários, a menor ocorrência foi de 14,28% (1/7) no grupo de 0-/5 anos. A caracterização molecular foi possível em nove amostras e revelou a presença de assemblage B em todas, uma das quais como subassemblage BIII e outra como BIV no gene TPI e uma como BIV no gene GDH. Uma amostra foi positiva para Cryptosporidium hominis (0,89% - 01/112). Conclui-se que Giardia pode ser um importante protozoário em pacientes com AIDS em locais endêmicos e esta é a primeira descrição de Cryptosporidium suis em humanos no Brasil. Foi identificada uma alta frequência de Giardia em pacientes da atenção primária à saúde; isolados pertencentes ao assemblage B, subassemblages BIII e BIV, estão presentes em quadros diarreicos na região. Cryptosporidium ocorre em baixa frequência nesses pacientes e há ciclo antroponótico na região.

Cryptosporidium and Giardia are important etiologies of zoonotic diarrhea. Different diagnostic methods applied to these protozoa in different populations result in variations in occurrence estimates and makes difficult a better understanding of the complex epidemiology in general. These protozoa are described in different environments in Brazil and the use of molecular methods allows a better characterization of the occurrence, and molecular epidemiology allows to identify the impact of zoonotic transmission in these parasites epidemiology. The present thesis aimed to characterize the occurrence of Cryptosporidium and Giardia in patients attended in the public health system, in Londrina, PR. In the first study, stool samples were collected from 54 patients admitted to a reference hospital for infectious diseases; data on age, sex, address, condition leading to hospitalization, length of stay and medical history were also collected. Cryptosporidium and Giardia were diagnosed by PCR for the 18S rRNA gene. 68.51% (37/54) of the patients evaluated had HIV infection, with 81.08% (30/37) having acquired immunodeficiency syndrome (AIDS); Cryptosporidium was identified in two patients (3.07%; 02/54) and Giardia in three (5.55%; 03/54), all positive patients manifested AIDS. Genetic sequencing analysis revealed Cryptosporidium suis in one patient and confirmed Giardia duodenalis in the three positive patients. In the second study, stool samples sent by basic health units were collected, totaling 112 samples, 102 from urban areas and 10 from districts. Patient data (age, sex and address) were also collected. Diagnosis was made for Cryptosporidium and Giardia by PCR for the 18SrRNA gene, positive samples were characterized by the TPI, Beta-giardin and GDH genes for Giardia and 18S rRNA for Cryptosporidium. In total, 19.64% (22/112) were positive for Giardia; occurrence in female patients was 20.33% and in male patients, 18.86%; regarding the age groups, the lowest occurrence was 14.28% (1/7) in the 0-/5 years group. Molecular characterization was possible in nine samples and revealed the presence of assemblage B in all of them, one as a subassemblage BIII and the other as BIV in the TPI gene and one as BIV in GDH gene. One sample was positive for Cryptosporidium hominis (0.89% - 01/112). Giardia can be an important protozoan in AIDS patients in endemic regions and this is the first description of Cryptosporidium suis in humans in Brazil. A high frequency of Giardia has been identified in primary health care patients; isolates belonging to assemblage B, subassemblages BIII and BIV, are present in diarrheal patients in the region. Cryptosporidium occurs in low frequency in these patients and there is an anthroponotic cycle in the region.

AVALIAÇÃO DE POLIMORFISMOS EM GENES QUE INFLUENCIAM A DIFERENCIAÇÃO E FUNÇÃO DAS CÉLULAS T REGULATÓRIAS E SUA RELAÇÃO COM A INFECÇÃO PELO HIV

A susceptibilidade à uma infecção pode estar relacionada a diversos fatores, dentre eles, a diversidade genética do hospedeiro tem demonstrado contribuir para o sucesso do estabelecimento de uma infecção, assim como, contribuir para progressão da doença. Polimorfismos em genes responsáveis em manter o equilíbrio imune como o FOXP3 e o CTLA4, podem estar relacionados tanto com a susceptibilidade à infecção pelo HIV quanto à variação de tempo de progressão à doença. Para avaliar a associação de polimorfismos nestes genes com a susceptibilidade à infecção pelo HIV e com a progressão à aids foram genotipadas 356 amostras de sangue periférico de pacientes HIV positivos e 325 amostras controle através de qPCR utilizando sondas TaqMan®. Quando as frequências alélicas foram comparadas entre o grupo controle e o grupo HIV-positivo, estratificados pela etnia, foi observado diferenças significativas para os SNPs rs3761548 e rs2280883 de FOXP3. Diante dos resultados foi observado que a estratificação pela etnia teve uma importante influência nas análises, visto que as populações possuem diferença nas frequências polimórficas, e devem ser consideradas em análises nas quais a população possui um baixo grau de miscigenação. Na análise de susceptibilidade foi observado que o alelo T do rs2280883 aproximou-se de uma significância estatística (95% IC = 0,3-1,1; Odds Ratio = 0,56; p = 0,09), e não deve ser descartado a possibilidade deste alelo influenciar na susceptibilidade a infeção pelo HIV em homens eurodescendentes. Em conclusão, o rs2280883 deve ser avaliado em outras populações para a confirmação dos resultados. Nossos dados fornecem insights para mais investigações a respeito de polimorfismos em FOXP3 e Tregs e a susceptibilidade ao HIV.

The infection susceptibility may be related to several factors, among them, the host genetic diversity has shown to contribute to the establishment success of the infection, as well as contribute to the disease progression. Polymorphisms in genes responsible for maintaining the immune balance, such as FoxP3 and CTLA4, may be related to both the HIV infection susceptibility and the time variation in disease progression. To evaluate polymorphisms association in these genes with HIV infection susceptibility and AIDS progression was genotyped 356 peripheral blood samples of HIV-positive patients and 325 control samples through QPCR using assay TaqMan®. When the allelic frequencies were compared between the control group and HIV-positive group, stratified by ethnicity, significant differences were observed for the rs3761548 and rs2280883 SNPs of FoxP3. In view of the results, it was observed that the stratification by ethnicity had an important influence on the analyses, since the populations have a difference in polymorphic frequencies, and should be considered in analyses in a population who has a low degree of miscegenation. In the susceptibility analysis, it was observed that T allele of the rs2280883 approached a statistical significance (CI = 0.05; p = 0.09), and the possibility of this allele influencing HIV infection susceptibility should not be discarded. In conclusion, rs2280883 should be evaluated in other populations to confirm the results. Our data provide insights for further investigations into FoxP3 and Tregs polymorphisms and HIV infection susceptibility.

Epidemiology of HIV/HCV co-infection in patients attended at an university hospital school at in Catanduva, São Paulo - Brazil / Epidemiologia da coinfecção por HIV/HCV em um hospital escola de Catanduva, São Paulo - Brasil

The prevalence of Hepatitis C Virus (HCV) among HIV-positive was determined in this investigation. The study was conducted at Emilio Carlos Hospital, Catanduva, São Paulo, Brazil. A retrospective study on clinical-laboratory, epidemiological and socio-demographic data of 600 patients treated at a teaching hospital of tertiary level was performed from January 2004 to December 2007. The prevalence of coinfection with HIV/HCV was 11.6 % (n = 70), predominantly in male patients (71.4 %) and mean age of 43.2 years, and 57.1 % of Caucasian ethnicity and low educational level (44.3 %). The transmission of HIV/ HCV by parenteral route in men, and by sexual contact in women was statistically significant (p = 0.0005). The use of injectable illicit drugs was also significant for males (p = 0.0208). The prevalence of HCV was 14.3 % for subtype 1a and 11.4 % for 3a subtype. Despite the prevalence of co-infection in the city of Catanduva be lower than the national average, this situation is still a major problem in this population, even with the availability of TARV, requiring strategies for its control and prevention by public health authorities.(AU)

Determinou-se a prevalência do vírus da hepatite C (HCV) em pacientes soropositivos para o vírus da imunodeficiência humana (HIV). O estudo foi realizado no Hospital Emílio Carlos, Catanduva, Estado de São Paulo, Brasil. Foi efetuado estudo retrospectivo de dados clínico-laboratoriais, epidemiológicos e sociodemográficos de 600 pacientes atendidos em um hospital escola de nível terciário, no período de janeiro de 2004 a dezembro de 2007. A prevalência de a coinfecção HIV/HCV foi de 11,6 % (n = 70), com predomínio no sexo masculino (71,4 %) e média de idade de 43,2 anos, sendo 57,1 % da etnia caucasóide e 44,3 % de baixo nível de escolaridade. A transmissão do HIV/HCV pela via parenteral nos homens e via sexual nas mulheres foi estatisticamente significante (p = 0,0005). O uso de drogas ilícitas injetáveis foi também significante para o sexo masculino (p = 0,0208). A prevalência do HCV foi de 14,3 % do subtipo 1a e 11,4 % do 3a. Apesar de a prevalência da coinfecção no município de Catanduva ser inferior à média nacional, esta situação é ainda um problema importante nesta população, mesmo com a disponibilidade da TARV, necessitando-se de estratégias de controle e prevenção pelas autoridades públicas de saúde.(AU)

Hepatitis B virus surface antigen seroconversion in HIV-infected individual after pegylated interferon-alpha treatment: a case report

Hepatitis B virus (HBV) infects from 6 to 14% of HIV-infected individuals. Concurrent HIV/HBV infection occurs due to the overlapping routes of transmission, particularly sexual and parenteral. HIV-infected patients that have acute hepatitis B have six times greater risk of developing chronic hepatitis B, with higher viral replication, rapid progression to end-stage liver disease and shorter survival. The coinfection is also associated with poor response to hepatitis B treatment with interferon-alpha and increased liver toxicity to the antiretroviral therapy. Herein, we describe the case of a 35-year-old man who engages in sex with men and presented with newly diagnosed HIV-1, serological markers for acute hepatitis B and progression to chronic hepatitis B infection (HBsAg+ > 6 months, high alanine aminotransferase levels and moderate hepatitis as indicated by liver biopsy). Lacking indication of antiretroviral treatment (CD4 768 cells/mm 3 ), he was treated with pegylated-interferon alpha2b (1.5 mg/kg/week) by subcutaneous injection for 48 weeks. Twelve weeks after treatment, the patient presented HBeAg seroconversion to anti-HBe. At the end of 48 weeks, he presented HBsAg seroconversion to anti-HBs. One year after treatment, the patient maintained sustained virological response (undetectable HBV-DNA). The initiation of antiretroviral therapy with nucleosides and nucleotides is recommended earlier for coinfected individuals. However, this report emphasizes that pegylated interferon remains an important therapeutic strategy to be considered for selected patients, in whom the initiation of HAART may be delayed.(AU)

Mapeamento e distribuição dos isolados do complexo Mycobacterium tuberculosis provenientes de casos de tuberculose bovina em Moçambique

A tuberculose bovina (bTB) é um problema sanitário importante em Moçambique e ainda a espera de uma ação organizada por parte dos Serviços Veterinários Oficiais. O presente estudo teve por objetivo investigar e mapear os genótipos de Mycobacterium bovis circulantes no país e paralelamente maximizar a utilização de abatedouros como fonte de informação epidemiológica da bTB. Durante o período de outubro de 2016 a abril de 2017 foram colhidas um total de 90 amostras de lesões sugestivas de tuberculose bovina nos abatedouros Municipais de Maputo e Maxixe e dois abatedouros privados da província de Maputo. Essas amostras, juntamente com outras 10, disponibilizadas pelo Laboratório Central de Veterinária e 72 do banco de amostras de Faculdade de Veterinária de Moçambique foram processadas para isolamento, identificação e discriminação molecular (MIRU-VNTR e spoligotyping) de micobactérias. Nos abatedouros foram coletados dados para calcular as prevalências de carcaças com lesões sugestivas de tuberculose e foi estimada em 0,63% e 80% das carcaças condenadas por tuberculose apresentaram lesões compatíveis com generalização da infecção. Foram obtidos 104 isolados identificados como gênero Mycobacterium, dos quais 80 foram compatíveis com o MTBC e 10 MNT. Destes 80 MTBC, 70 foram identificados como M. bovis. O MIRU-VNTR discriminou os 70 isolados de M. bovis em 47 perfis, agrupados em 3 complexos clonais e cinco singletons. Dos 24 loci estudados, os que apresentaram maiores polimorfismos foram MIRU 960, 2996 e QUB-4052. Em relação ao spoligotyping, foram identificados cinco perfis, dos quais o mais prevalente foi o SB0961, seguido do SB0140, SB2306, SB2481 (novo) e SB1099. Dos 70 isolados submetidos a análises dos complexos clonais africano 1, africano 2, europeu 1 e europeu 2, foram detectados apenas 18,5% de europeu. O distrito de Machanga foi o que apresentou maior diversidade de isolados e o Govuro maior número de isolados de M. bovis. Quando comparados as técnicas, o MIRU-VNTR apresentou maior poder de discriminação em relação ao spoligotyping. O complexo clonal europeu 1 está relacionado com o SB0140 que por sua vez é característico de isolados do Reino Unido e de países que tiveram trocas comerciais de bovinos com o país, incluindo os circunvizinhos a Moçambique e de onde há registros da importação de animais para Moçambique. A não identificação precisa dos complexos clonais dos spoligotyping SB0961, SB2306, SB2481 relacionados, podem ser derivados do BCG, que é sugestivo de evolução clonal própria de Moçambique e os complexos clonais até hoje existentes não são suficientes para discriminar os isolados de Moçambique. Embora os dados de abatedouros sugeriram que a prevalência da tuberculose bovina em Moçambique está entre as mais baixas dos países africanos, a predominância de carcaças com lesões generalizadas significa alto risco de exposição de animais e humanos, sobretudo das populações rurais que têm estreito contato com esses animais. Esse risco é ampliado em função da alta prevalência de humanos que vivem com HIV/AIDS no país. Assim, recomenda-se que Moçambique estruture programa de controle da doença nos animais e métodos de diagnóstico que detectem a infecção por M. bovis na população humana.

Bovine tuberculosis (bTB) is a major sanitary problem in Mozambique and awaits organized action by the Official Veterinary Services. The aim of this work was to investigate and map the circulating Mycobacterium bovis genotypes in the country and to maximize the use of slaughterhouses as a source of epidemiological information for bTB. During the period from October 2016 to April 2017, a total of 90 samples with lesions suggestive of bovine tuberculosis were collected from Maputo and Maxixe Municipal abattoirs and two private abattoirs from the province of Maputo. These samples, together with 10 others provided by the Central Veterinary Laboratory and 72 from the Veterinary Faculty sample bank were processed for isolation, identification and molecular discrimination (MIRU-VNTR and spoligotyping) of mycobacteria. Samples collected in the slaughterhouses were analyzed by calculating the prevalence of carcasses with lesions suggestive of bTB, which was estimated at 0.63% and 80% of carcasses condemned for tuberculosis presented lesions compatible with generalized infection. A total of 104 isolates were identified as M. bovis as Mycobacterium genus were obtained, of which 80 were compatible with MTBC and 10 MNT. Of these 80 MTBC, 70 were identified as M. bovis. The MIRU-VNTR discriminated the 70 isolates of M. bovis in 47 profiles, grouped in 3 clonal complexes and 5 singletons. Of the 24 loci studied, the ones with the highest polymorphisms were MIRU 960, 2996 and QUB-4052. In relation to spoligotyping, five profiles were identified; SB0961 was the most prevalent, being SB0961, followed by SB0140, SB2306, SB2481 (new) and SB1099. Of the 70 isolates submitted to analyzes of the clonal complexes African 1, African 2, European 1 and European 2, only 18.5% of European complex were detected. Machanga district presented the greatest diversity of isolates, while Govuro district had largest number of isolates of M. bovis. The MIRU-VNTR presented greater power of discrimination in relation to spoligotyping. The European clonal complex 1 was related to SB0140 which in turn is characteristic of isolates from the United Kingdom and from countries that have had commercial trade in cattle with UK including those surrounding Mozambique and where there are records of imports of animals for Mozambique. The precise identification of the clonal complexes of the SB0961, SB2306 and SB2481 related spoligotypings subject to the BCG derivatives, is suggestive of the clonal evolution of Mozambique and that the clonal complexes to date are not sufficient to discriminate against the isolates from Mozambique. Although data from slaughterhouses suggested that the prevalence of bovine tuberculosis in Mozambique is among the lowest in African countries, the predominance of carcasses with generalized lesions means a high risk of animal and human exposure, especially of rural populations that have close contact with these animals. This risk is amplified due to the high prevalence of people that living with HIV/AIDS in the country. Thus, it is recommended that Mozambique structure a disease control program in animals and diagnostic methods that detect M. bovis infection in the human population.

Avaliação dos múltiplos ciclos de congelamento e descongelamento na estabilidade dos soros para a detecção de anticorpos anti-HIV / Assessing the effect of multiple freeze-thaw cycles on the stability of serum samples for anti-HIV antibody detection

No presente estudo foi investigado o impacto dos múltiplos ciclos de congelamento e descongelamento na estabilidade das amostras de soro estocadas a -20 °C quanto à reatividade de anticorpos anti-HIV. As amostras analisadas foram provenientes de painéis de soros (constituídos de amostras anti-HIV positivo e negativo), produzidos no Centro de Imunologia Instituto Adolfo Lutz (IAL), os quais têm sido material de referência para o preparo de amostras do controle de qualidade interno de testes imunodiagnósticos de HIV/Aids. A avaliação da estabilidade dos soros foi efetuada por meio de ELISA/EIA, Western blot e imunofluorescência indireta, em amostras submetidas a 11 consecutivos ciclos de congelamento e descongelamento, que variaram de 7 a 60 ciclos. Nenhum efeito estatisticamente significante na reatividade dos anticorpos específicos foi observado. Portanto, o procedimento de congelamento e descongelamento, em até 60 ciclos, não causou efeitos adversos na reatividade das amostras de soro positivas para detecção de anticorpos anti-HIV, sem ocorrência de reações falso-negativas, tampouco de resultados falso-positivos em amostras negativas para HIV.(AU)

The present study investigated the impact of multiple and consecutive freeze-thaw cycles on the reactivity of anti-HIV antibodies in stored serum samples by using different methodologies for detecting the specific antibodies. The analyzed sera were part of serum panels (comprised of anti-HIV positive and negative samples), produced at the Center of Immunology Instituto Adolfo Lutz, which have been the reference specimens for producing internal quality assurance sera of HIV/Aids immunodiagnostic assays. After performing every step of 11 consecutive and multiple freeze-thaw cycles procedure (varying from 7 to 60 cycles), the HIV antibody reactivity in the respective sera was evaluated by means of EIA/ELISA, Western blot and indirect immunofluorescence methodologies. No statistically significant effect on the specific antibody reactivity was found in sera after completing the freeze-thaw process up to 60 cycles. Neither false-negative reactions in HIV antibody positive sera, nor false-positive results in HIV-negative samples were detected.(AU)

Toxoplasmose aguda em pacientes HIV/aids no extremo sul do Brasil

A infecção por Toxoplasma gondii em indivíduos imunossuprimidos pelo HIV pode evoluir para doença oportunista. A neurotoxoplasmose tende a ser a forma mais prevalente, levando a quadros mais ou menos graves, a depender do grau de imunossupressão. Este trabalho objetivou analisar os aspectos clínico-epidemiológicos da toxoplasmose aguda em pacientes HIV/aids atendidos no Serviço de Assistência Especializada da Faculdade de Medicina da Universidade Federal de Pelotas. Os dados foram coletados através da análise de prontuários de todos os pacientes que estiveram em tratamento no período de 1998 a 2016, após a implantação do uso da terapia antirretroviral (HAART). A prevalência de toxoplasmose aguda foi de 3,65%. Destes, os índices foram de 77,6% para neurotoxoplasmose, 13% para toxoplasmose ocular e 9,3% para títulos elevados de IgG. Hemiparesia e diminuição de acuidade visual foram os sinais clínicos mais comuns de neurotoxoplasmose e toxoplasmose ocular, respectivamente. Foram constatados como fatores de risco para o desenvolvimento de infecção aguda por T. gondii, através do modelo de regressão logística: níveis baixos de linfócitos T CD4+ (OR=6,65), baixa relação CD4/CD8 (OR=8,03), uso irregular de antirretrovirais (OR=2,83; IC95%=2,34 -12,73) e o não uso dos mesmos (OR=1,13). Os resultados indicam a frequência de infecção aguda por T.gondii entre esses pacientes, com lesões predominantemente neurológicas, e que sua ocorrência está diretamente relacionada ao não uso ou uso inadequado da terapia específica antirretroviral, que resulta em grave imunossupressão, permitindo a agudização da infecção pelo protozoário, até então latente.

Toxoplasma gondii infection in HIV-immunocompromised individuals may progress to opportunistic diseases. Neurotoxoplasmosis tends to be the most prevalent form leading to more or less severe immunosuppression, depending on the degree of immunosuppression. This study aimed to analyze the clinical and epidemiological aspects of acute toxoplasmosis in HIV/AIDS patients who have been treated at the Specialized Assistance Service in the School of Medicine in Federal University of Pelotas. Data were collected through the medical records analysis of all patients who underwent treatment from 1998 to 2016, after the implementation of antiretroviral therapy (HAART). The prevalence of acute toxoplasmosis was 3.65%. From them, the rates were 77.6% for neurotoxoplasmosis, 13% for ocular toxoplasmosis and 9.3% for increased IgG titers. Hemiparesis and decreased visual acuity were the most common clinical signs of neurotoxoplasmosis and ocular toxoplasmosis, respectively. Low CD4 +T lymphocytes (OR=6.65), low CD4/CD8 ratio (OR=8.03), irregular use of antiretrovirals (OR=2.83, 95% CI=2.34-12.73) and non-use (OR=1.13) have been found as risk factors for the development of acute toxoplasmosis using a logistic regression model. The findings show the frequency of clinical toxoplasmosis among the patients with predominantly neurological lesions, and occurrence of them is directly related to the inadequate use or non-use at all of specific antiretroviral therapy, which leads to severe immunosuppression, allowing exacerbation of infection by the protozoan, latent until then.

SOROPREVALÊNCIA DE ZOONOSES COM IMPORTÂNCIA EM SAÚDE PÚBLICA EM PESSOAS VIVENDO COM HIV/AIDS

O interesse pelo estudo das zoonoses, enfermidades comuns aos humanos e aos animais, aumentou acentuadamente nos últimos anos, sugerindo maior integração, conhecimento e relacionamento entre profissionais da área da saúde. Dentre estas zoonoses a brucelose, a toxoplasmose, a leptospirose e a doença de Chagas (DC) têm elevada importância veterinária e para a saúde pública, pela gravidade e potencial letalidade com que se apresentam em humanos. Atenção especial deve ser dada às pessoas vivendo com HIV/aids (PVHA), pois a imunossupressão à que estão sujeitas pode agravar ainda mais o seu quadro clínico, fato que gera necessidade de diagnósticos mais eficientes para essas infecções. Com o objetivo de determinar o perfil sorológico destas zoonoses em PVHA, atendidos no Serviço de Ambulatório Especializado de Infectologia Domingos Alves Meira (SAEI-DAM), entidade pertencente ao complexo de assistência da Faculdade de Medicina de Botucatu UNESP, bem como relacionar aos hábitos, comportamentos e fatores de risco de exposição a essas doenças, além da obtenção de dados referentes ao grau de conhecimento em relação às zoonoses estudadas. Foram analisadas 236 amostras de soro desses pacientes para a presença de anticorpos antiBrucella abortus, que mostraram-se negativas para todas as amostras. Para leptospirose quatro (1,69%) amostras foram positivas, para a toxoplasmose 154 (65%) amostras positivas, sendo 146 (94,8%) somente para anticorpos da classe IgG, dois (1,3%) somente para a classe IgM e seis (3,9%) para as duas classes de imunoglobulinas anti-Toxoplasma gondii. Para doença de Chagas encontrou-se quatro (1,69%) das amostras positivas para anticorpos anti Trypanosoma cruzi. Para neurotoxoplasmose e toxoplasmose ocular encontraram-se 21 (8,89%) e seis (2,54%) respectivamente de pacientes diagnosticados.

The interest in the study of zoonoses, common diseases to humans and animals, has increased sharply in recent years, suggesting greater integration, knowledge and relationships among health professionals. Among these zoonoses, brucellosis, toxoplasmosis, leptospirosis and Chagas' disease (DC) are of high veterinary and public health importance due to the seriousness and potential lethality that they present in humans. Special attention should be given to people living with HIV / AIDS (PLWHA), since the immunosuppression to which they are subject may further aggravate their clinical condition, which generates a need for more efficient diagnoses for these infections. The objective of this study was to determine the serological profile of these zoonoses in PLWHA treated at the Domingos Alves Meira Specialized Ambulatory Service (SAEI-DAM), an entity belonging to the assistance center of Botucatu Medical School - UNESP, as well as to relate to the habits, behaviors and risk factors of exposure to these diseases, besides obtaining data regarding the degree of knowledge regarding the zoonoses studied, 236 serum samples of these patients were analyzed for the presence of anti-Brucella abortus antibodies, which showed Negative for all samples. For leptospirosis, four (1.69%) samples were positive for toxoplasmosis, with 154 (65%) positive samples, 146 (94.8%) only for IgG class antibodies, two (1.3%) for IgM class and six (3.9%) for the two classes of anti-Toxoplasma gondii immunoglobulins. For Chagas disease, four (1.69%) of the samples positive for anti-Trypanosoma cruzi antibodies were found. For neurotoxoplasmosis and ocular toxoplasmosis, 21 (8.89%) and 6 (2.54%) respectively of diagnosed patients were found.

Anal cancer precursor lesions in HIV-positive and HIV-negative patients seen at a tertiary health institution in Brazil / Lesoes precursoras do cancer anal em pacientes HIV-positivos e HIV-negativos atendidos numa instituicao de saude terciaria no Brasil

Purpose: To investigate the prevalence of anal squamous intraepithelial lesions (ASIL) or anal cancer in patients attended at the Tropical Medicine Foundation of Amazonas. Methods: 344 patients consecutively attended at the institution, in 2007/2008, were distributed in the following strata according to presence/abscense of at risk conditions for anal cancer: Group 1 _ HIV-positive men-who-have-sex-with-men (101); Group 2 _ HIV-positive females (49); Group 3 _ patients without any at risk condition for anal cancer (53); Group 4 _ HIV-positive heterosexual men (38); Group 5 _ HIV-negative patients, without anoreceptive sexual habits, but with other at risk conditions for anal cancer (45); Group 6 _ HIV-negative men-who-have-sex-with-men (26); and Group 7 _ HIV-negative anoreceptive females (32). The histopathological results of biopsies guided by high-resolution anoscopy were analyzed by frequentist and bayesian statistics in order to calculate the point-prevalence of ASIL/cancer and observe any eventual preponderance of one group over the other. Results: The point-prevalence of ASIL for all the patients studied was 93/344 (27 percent), the difference between HIV-positive and negative patients being statistically significant (38.3 percent versus 13.5 percent; p < 0.0001). The prevalence of ASIL for each one of the groups studied was: Group 1 = 49.5 percent, Group 2 = 28.6 percent, Group 3 = 3.8 percent, Group 4 = 21.1 percent, Group 5 = 11.1 percent, Group 6 = 30.8 percent and Group 7 = 18.8 percent. Standard residual analysis demonstrated that ASIL was significantly prevalent in patients of Group 1 and high-grade ASIL in patients of Group 2. The odds for ASIL of Group 1 was significantly higher in comparison to Groups 2, 3, 4, 5 and 7 (p < 0.03). The odds for ASIL of Groups 2, 4 and 6 were significantly higher in comparison to Group 3 (p < 0.03). Conclusions: In the patients studied, ASIL (low and/or high-grade) tended to be significantly more prevalent in HIV-positive patients. Nonetheless, HIV-negative anoreceptive patients also presented great probability to have anal cancer precursor lesions, mainly those of the male gender.(AU)

Objetivo: Investigar a prevalencia de lesoes intraepiteliais escamosas anais (ASIL) ou cancer anal em pacientes atendidos na Fundacao de Medicina Tropical do Amazonas. Metodos: 344 pacientes consecutivamente atendidos na instituicao, em 2007/2008, foram distribuidos nos seguintes estratos conforme a presenca/ausencia de fatores de risco para o cancer anal: Grupo 1 _ homens-que-fazem-sexo-com-homens HIV-positivos (101); Grupo 2 _ mulheres HIV-positivas (49); Grupo 3 _ pacientes sem condicao de risco para o cancer anal (53); Grupo 4 _ homens heterossexuais HIV-positivos (38); Grupo 5 _ pacientes HIV-negativos, sem habitos sexuais anorreceptivos, mas com outras condicoes de risco para o cancer anal (45); Grupo 6 _ homens-que-fazem-sexo-com-homens HIV-negativos (26); e Grupo 7 _ mulheres HIV-negativas, com habitos sexuais anorreceptivos (32). Os resultados histopatologicos das biopsias anais dirigidas pela colposcopia anal foram analisados por meio de estatistica frequentista e bayesiana para a determinacao da prevalencia-ponto de ASIL/cancer e verificar eventual preponderancia estatistica de um grupo sobre o outro. Resultados: A prevalencia-ponto de ASIL para todos os pacientes estudados foi de 93/344 (27 por cento), sendo significativa a diferenca entre HIV-positivos e negativos (38,3 por cento versus 13,5 por cento; p < 0,0001). A prevalencia de ASIL para cada um dos grupos estudados foi: Grupo 1 = 49,5 por cento, Grupo 2 = 28,6 por cento, Grupo 3 = 3,8 por cento, Grupo 4 = 21,1 por cento, Grupo 5 = 11,1 por cento, Grupo 6 = 30,8 por cento e Grupo 7 = 18,8 por cento. A analise de residuos demonstrou prevalencia significante de ASIL para o Grupo 1 e de ASIL de alto-grau para o Grupo 2. A razao-de-chances do Grupo 1 para ASIL foi significantemente maior em comparacao com os Grupos 2, 3, 4, 5 e 7 (p < 0,03). A razao-de-chances para ASIL dos Grupos 2, 4 e 6 foi significantemente maior em comparacao com o Grupo 3 (p < 0.03). Conclusoes: Nos pacientes estudados, ASIL (baixo e/ou alto-grau) foi significantemente mais prevalente em pacientes HIV-positivos. Entretanto, pacientes HIV-negativos anorreceptivos tambem apresentaram grande probabilidade de possuir as lesoes, especialmente os do genero masculino.(AU)

Morphometric analysis of dendritic cells from anal mucosa of HIV-positive patients and the relation to intraepithelial lesions and cancer seen at a tertiary health institution in Brazil / Análise morfométrica das células dendríticas da mucosa anal de pacientes HIV-positivos e relação com as lesões intraepiteliais e o câncer numa instituição de saúde terciária no Brasil

PURPOSE: To morphometrically quantify CD1a+ dentritic cells and DC-SIGN+ dendritic cells in HIV-positive patients with anal squamous intraepithelial neoplasia and to evaluate the effects of HIV infection, antiretroviral therapy and HPV infection on epithelial and subepithelial dendritic cells. METHODS: A prospective study was performed to morphometrically analyze the relative volume of the dendritic cells and the relationship between anal intraepithelial neoplasia and cancer in HIV-positive patients from the Tropical Medicine Foundation of Amazonas, Brazil. All patients were submitted to biopsies of anorectal mucosa to perform a classic histopathological and immunohistochemical analysis, employing antibodies against CD1a and DC-SIGN for the morphometric quantification of dendritic cells. RESULTS: HIV-negative patients displayed a CD1a DC density significantly higher than that of HIV-positives patients (3.75 versus 2.54) (p=0.018), and in patients with severe anal intraepithelial neoplasia had correlated between DC CD1a density with levels of CD4 + cells (p: 0.04) as well as the viral load of HIV-1 (p: 0.035). A not significant rise in the median density of CD1a+ DC was observed in the HIV positive/ HAART positive subgroup compared to the HIV positive/ HAART negative subgroup. The CD1a+ DC were also significantly increased in HIV-negative patients with anorectal condyloma (2.33 to 3.53; p=0.05), with an opposite effect in HIV-positive patients. CONCLUSIONS: Our data support an enhancement of the synergistic action caused by HIV-HPV co-infection on the anal epithelium, weakening the DC for its major role in immune surveillance. Notoriously in patients with severe anal intraepithelial neoplasia, the density of CD1a+ epithelial dendritic cells was influenced by the viral load of HIV-1.(AU)

OBJETIVO: Quantificar morfometricamente as células dendríticas DC CD1a+ e DC DC-SIGN+ em pacientes HIV positivos portadores de neoplasia escamosa intraepitelial anal e avaliar os efeitos da infecção pelo HIV, da terapia antirretroviral e da infecção pelo HPV sobre as células dendríticas epiteliais e subepiteliais. MÉTODOS: Um estudo prospectivo foi realizado para analisar morfometricamente o volume relativo das células dendríticas e as relações entre neoplasia intraepitelial anal e o câncer em pacientes HIV positivos da Fundação de Medicina Tropical do Amazonas, Brasil.Todos os pacientes foram submetidos a biópsia da mucosa retal para realizar uma análise clássica histopatológica e imunohistoquímica utilizando anticorpos contra anti-CD1a e anti-DC-SIGN, para a quantificação morfométrica das células dendríticas. RESULTADOS: Os pacientes HIV negativos apresentaram densidade das DC CD1a+ significativamente maior do que a dos pacientes HIV positivos (3,75 versus 2,54) (p:0,018), e os pacientes com severa apresentaram correlação das DC CD1a com os níveis de células TCD4(p:0,04) assim como a carga viral do HIV-1 (p:0,035). Observamos no subgrupo HIV-positivo/HAART positivo elevação não significativa na mediana da densidade das DC CD1a+ em relação ao grupo HIV-positivo/HAART negativo. As DC CD1a+ também se elevaram nos pacientes HIV negativo portadores de condiloma anorretal(2,33 para 3,53; p:0,05), com efeito inverso nos pacientes HIV positivos. CONCLUSÕES: Nossos dados confirmam a potencialização da ação sinérgica representada pela coinfecção HIV-HPV sobre o epitélio anal, fragilizando as DC em sua função primordial de vigilância imune. Notoriamente nos pacientes com neoplasia intraepithelial anal grave, a densidade das DC CD1a+ epiteliais sofreu influência da carga viral do HIV-1.(AU)

DETERMINAÇÃO DA ESTRUTURA PRIMÁRIA E ANÁLISE DO POTENCIAL BIOTECNOLÓGICO DE UMA LECTINA DA ALGA MARINHA VERMELHA Amansia multifida J.V. LAMOUROUX

Os oceanos guardam 50% da biodiversidade do planeta sendo o maior reservatório de compostos bioativos. As algas marinhas participam de um grupo diversificado de organismos que são fonte de uma gama de compostos bioativos com aplicação diversificada para benefício humano. Dentre esses compostos estão as lectinas, (glico) proteínas ubíquas com pelo menos um domínio não catalítico que se ligam específica e reversivelmente a carboidratos podendo aglutinar células e/ou glicoconjugados. Estudos com lectinas de algas, embora ainda recentes quando comparados a lectina de outros organismos, mostram que essas proteínas possuem uma ampla possibilidade de aplicação biotecnológica. A AIDS, o câncer, e também infecções causadas por bactérias resistentes a antibióticos são problemas de saúde pública que matam centenas de milhares de pessoas anualmente, e as lectinas de algas, têm atraído atenção especial com relação a estudos com atividades antivirais, contra células cancerígenas e antibióticas. Por outro lado, estudos investigando a atividade antioxidante de lectinas é pouco explorado havendo apenas um estudo com lectina de alga relatado até o momento. O objetivo desse trabalho foi determinar a estrutura primária da lectina de Amansia multifida (AML) através da combinação das técnicas de espectrometria de massas, Degradação de Edman e clonagem de cDNA, bem como avaliar o potencial biotecnológico da AML através de ensaios de atividade contra células de câncer colorretal, vírus HIV-I e HIV-II, atividade antioxidante e formação de biofilmes bacterianos. A estrutura primária da AML, associada às suas características físico-químcas, comprovou que ela é mais uma integrante da família OAAH que possui quatro domínios repetidos na sua sequência de aminoácidos além de um sítio de ligação a carboidrato conservado e com alta identidade com os das lectinas da família OAAH. A AML foi capaz de reduzir a viabilidade celular de células de câncer colorretal e de reduzir o número de células viáveis de S. aureus e E.coli. Apresentou atividade contra vírus HIV em concentrações 0,77 µM para HIV-1 e 2,08 µM para HIV-2 com células de linfócitos T, e EC50 foi de 1,55 µM para -1 em células SUPT1 co-cultivadas com HUT78. Este trabalho também é o primeiro relato de atividade antioxidante de uma lectina de alga marinha vermelha.

Fifty percent of the biodiversity of the world are in the oceans. The seaweeds are a diverse group of organisms that are the source of bioactive compounds with diverse application for human benefit. Among these compounds are lectins, ubiquitous proteins or glycoproteins with at least one non-catalytic domain binding reversibly to a specific mono- or oligosaccharides. Studies with algae lectin, although still recent when compared to lectins from other organisms, show that these proteins have a wide possibility of biotechnological applications. AIDS, cancer as well infections caused by antibiotic-resistant bacteria are public health problems that kill hundreds of thousands of people each year, lectins from algae have been shown proteins with highly potent activity because of their specificity to carbohydrates high mannose. Because of that, algae lectins have attracted particular attention with regard to studies of antiviral activities, against cancer cells and antibiotic. Furthermore, studies researching antioxidant activity of lectins are underexplored with only one reported with this property. The aim of this study was to determine the primary structure of the Amansia multifida lectin (AML) by combining mass spectrometry, Edman degradation and molecular biology, evaluate its antioxidant activity, biotechnological potential of AML against cancer cells, HIV-I and HIV- II and against growth of bacterial biofilms. The sequence when compared to databases (NCBI) showed homology to lectins belonging to the family OAAH. The results have shown that AML is a protein of OAAH family with four repeated domains in its aminoacid sequence as well as a conserved carbohydrate binding site with high identity with the lectins of OAAH family. AML is the first lectin from red marine alga with antioxidant activity, capable to reduce cell viability of colon cancer cells, it also reduces the number of viable cells of S. aureus and E. coli, and exhibit activity at micromolar concentrations against HIV-I and HIV-II virus.