Aspergilose sistêmica em potro (Equus caballus) / Systemic aspergillosis in a foals - Equus caballus

O gênero Aspergillus compreende espécies de fungos saprotróficos, globalmente distribuídos, sendo os Aspergillus seção Fumigati conhecidos por causarem doença em humanos e animais imunocomprometidos. Os sinais clínicos dependem do sistema acometido, podendo apresentar febre branda, cólicas intensas, pneumonias, micose de bolsa gutural, e, ocasionalmente, lesões no sistema nervoso central. O presente trabalho objetiva relatar os sinais clínicos, os achados de necropsia e a histologia de um caso de aspergilose sistêmica em um potro de oito meses de idade. O animal apresentava refluxo enterogástrico, peristaltismo aumentado, fezes pastosas, dor abdominal e desidratação intensa. O quadro clínico evoluiu para óbito e o cadáver foi encaminhado para a necropsia. Macroscopicamente, havia sufusões e equimoses na serosa do trato gastrointestinal e ulcerações na mucosa do intestino delgado. No pulmão, havia nódulos multifocais, esbranquiçados e firmes que, ao corte, apresentavam-se císticos, com revestimento interno vinhoso e friável. O coração exibia áreas esbranquiçadas multifocais no miocárdio e os rins continham nódulos avermelhados nas regiões cortical e medular. No encéfalo, havia áreas multifocais amareladas e hemorrágicas com bordos avermelhados. Microscopicamente, observaram-se áreas multifocais de necrose com infiltrado inflamatório granulomatoso no intestino, pulmão, encéfalo, miocárdio e nos rins. Hifas fúngicas intralesionais e intravasculares foram observadas no encéfalo e no pulmão. Estruturas de fenótipo compatível com Aspergillus fumigatus foram observadas na cultura fúngica. Amostras encaminhadas para virologia apresentaram-se positivas para Herpesvírus Equino (HVE) tipo 1 e 4. O diagnóstico de aspergilose sistêmica foi determinado pelo histórico clínico, imunossupressão, achados macroscópicos, histológicos, isolamento do fungo e à infecção concomitante por HVE.

The Aspergillus genus comprises globally distributed species of saprotrophic fungi, with the Aspergillus section Fumigatus known to cause diseases in humans and immunocompromised animals. Clinical signs depend on the affected system, exhibiting mild fever, severe colic, pneumonia, guttural bag mycosis and occasionally lesions in the central nervous system. The present work aims to report the clinical signs, necropsy findings and histology of a case of systemic aspergillosis in an eight-months-old foal. The animal had enterogastric reflux, increased peristalsis, pasty feces, abdominal pain and severe dehydration. The condition evolved to death and the cadaver was sent for necropsy. Macroscopically, there were suffusions and ecchymosis in the serosa of the gastrointestinal tract and ulcerations in the mucosa of the small intestines. In the lung, there were multifocal, whitish and firm nodules that were cystic when cut with a friable winey internal lining. The heart had whitish multifocal areas in the myocardium and the kidneys contained reddish nodules in the cortical and medullary regions. In the brain there were yellowish and hemorrhagic multifocal areas with reddish borders. Microscopically, multifocal areas of necrosis with granulomatous inflammatory infiltrate were observed in the intestine, lung, brain, myocardium and kidneys. Intralesional and intravascular fungal were observed in the brain and lung. Structures with phenotype compatible with Aspergillus fumigatus were observed in the fungal culture. In virology, samples were positive for equine herpesvirus (HVE) types 1 and 4. The diagnosis of systemic aspergillosis was determined due to the clinical history, immunosuppression, macroscopic and histological findings, fungal isolation and concomitant HVE infection.

Aspergilose sistêmica em potro (Equus caballus) / Systemic aspergillosis in a foals - Equus caballus

O gênero Aspergillus compreende espécies de fungos saprotróficos, globalmente distribuídos, sendo os Aspergillus seção Fumigati conhecidos por causarem doença em humanos e animais imunocomprometidos. Os sinais clínicos dependem do sistema acometido, podendo apresentar febre branda, cólicas intensas, pneumonias, micose de bolsa gutural, e, ocasionalmente, lesões no sistema nervoso central. O presente trabalho objetiva relatar os sinais clínicos, os achados de necropsia e a histologia de um caso de aspergilose sistêmica em um potro de oito meses de idade. O animal apresentava refluxo enterogástrico, peristaltismo aumentado, fezes pastosas, dor abdominal e desidratação intensa. O quadro clínico evoluiu para óbito e o cadáver foi encaminhado para a necropsia. Macroscopicamente, havia sufusões e equimoses na serosa do trato gastrointestinal e ulcerações na mucosa do intestino delgado. No pulmão, havia nódulos multifocais, esbranquiçados e firmes que, ao corte, apresentavam-se císticos, com revestimento interno vinhoso e friável. O coração exibia áreas esbranquiçadas multifocais no miocárdio e os rins continham nódulos avermelhados nas regiões cortical e medular. No encéfalo, havia áreas multifocais amareladas e hemorrágicas com bordos avermelhados. Microscopicamente, observaram-se áreas multifocais de necrose com infiltrado inflamatório granulomatoso no intestino, pulmão, encéfalo, miocárdio e nos rins. Hifas fúngicas intralesionais e intravasculares foram observadas no encéfalo e no pulmão. Estruturas de fenótipo compatível com Aspergillus fumigatus foram observadas na cultura fúngica. Amostras encaminhadas para virologia apresentaram-se positivas para Herpesvírus Equino (HVE) tipo 1 e 4. O diagnóstico de aspergilose sistêmica foi determinado pelo histórico clínico, imunossupressão, achados macroscópicos, histológicos, isolamento do fungo e à infecção concomitante por HVE.(AU)

The Aspergillus genus comprises globally distributed species of saprotrophic fungi, with the Aspergillus section Fumigatus known to cause diseases in humans and immunocompromised animals. Clinical signs depend on the affected system, exhibiting mild fever, severe colic, pneumonia, guttural bag mycosis and occasionally lesions in the central nervous system. The present work aims to report the clinical signs, necropsy findings and histology of a case of systemic aspergillosis in an eight-months-old foal. The animal had enterogastric reflux, increased peristalsis, pasty feces, abdominal pain and severe dehydration. The condition evolved to death and the cadaver was sent for necropsy. Macroscopically, there were suffusions and ecchymosis in the serosa of the gastrointestinal tract and ulcerations in the mucosa of the small intestines. In the lung, there were multifocal, whitish and firm nodules that were cystic when cut with a friable winey internal lining. The heart had whitish multifocal areas in the myocardium and the kidneys contained reddish nodules in the cortical and medullary regions. In the brain there were yellowish and hemorrhagic multifocal areas with reddish borders. Microscopically, multifocal areas of necrosis with granulomatous inflammatory infiltrate were observed in the intestine, lung, brain, myocardium and kidneys. Intralesional and intravascular fungal were observed in the brain and lung. Structures with phenotype compatible with Aspergillus fumigatus were observed in the fungal culture. In virology, samples were positive for equine herpesvirus (HVE) types 1 and 4. The diagnosis of systemic aspergillosis was determined due to the clinical history, immunosuppression, macroscopic and histological findings, fungal isolation and concomitant HVE infection.(AU)

SOROEPIDEMIOLOGIA DE AGENTES VIRAIS DE EQUINOS DE VAQUEJADA NA REGIÃO DE MOSSORÓ/RN

Foram coletadas amostras de equinos de vaquejada, em atividade, machos e fêmeas, das raças Quarto de Milha e Paint Horse, com idade variando entre 2 e 15 anos, criados nas zonas rural e urbana do município de Mossoró, localizado na região Oeste do estado do Rio grande do Norte. Os testes foram realizados em 132 amostras de soro para anticorpos contra estomatite vesicular (EV) e arterite viral equina (AVE), 118 para encefalomielite leste e oeste (EEL/EEO), 114 para herpesvírus tipo 1 (HVE-1) e 61 para influenza equina (IE). Na análise das amostras a técnica utilizada variou de acordo com a enfermidade pesquisada; anticorpos contra EV (frente as cepas virais Ribeirão e Alagoas), arterite viral equina, HVE-1 e EEL/EEO foram pesquisados pela técnica de soroneutralização em culturas de células da linhagem Vero (EV, verificar HVE-1 e EEL/EEO); e a pesquisa para IE tipo-2 (H3N8) foi realizada pela técnica de inibição da hemaglutinação. Foram obtidos os seguintes resultados das amostras testadas: para AVE não houve animais positivos (n=132), para EV obteve-se 39 (29,55%) animais positivos para o tipo Alagoas e 6 (4,54%) animais para o tipo Ribeirão (n=132), com relação às encefalomielites, anticorpos contra EEL e EEO (n=118) estiveram presentes em 13 (11,01%) e 1 (0,84%), respectivamente; para HVE-1 foram encontrados 22 (19,29%) equinos positivos (n=114). Quanto às variáveis, histórico de doenças respiratórias e reprodutivas, as mesmas foram estatisticamente significativas (p=0.02) em relação à presença de anticorpos contra HVE-1. A AVE não está presente entre os equinos de vaquejada em Mossoró/RN, para outras viroses pesquisadas (EV, IE, HVE-1, EEL e EEO) há evidências de atividade viral nas populações de equinos de Mossoró, e sinais clínicos respiratórios e reprodutivos podem ser sugestivos de infecção por HVE-1.

Samples of horses of vaquejada were collected in activity, male and female, breed Quarter Horse and Paint Horse, aged between 2 and 15, from rural and urban areas of the city of Mossoró, located in the West region of Rio Grande do Norte state. Tests were performed on 132 serum samples for antibodies to vesicular stomatitis (EV) and equine viral arteritis (AVE) 118 for encephalomyelitis east and west (EEL/EEO) 114 for herpesvirus type 1 (HVE-1) and 61 to equine influenza (IE). Techniques used varied according to the studied disease; antibodies against EV (Ribeirão and Alagoas), equine viral arteritis, HVE-1 and EEL / EEO been researched by virus neutralization test in Vero cell cultures (EV, verify HVE-1 and EEL/EEO; and search for the IE type 2 (H3N8) was performed by inhibition of hemaglutination technique. The following results of the samples tested were obtained: for AVE no positive animals (n = 132) for EV was obtained 39 (29.55%) positive animals Alagoas type and 6 (4.54%) for the animals Ribeirao type (n = 132) with respect to encephalomyelitis, antibodies against and EEO EEL (n = 118) were present in 13 (11.01%) and 1 (0.84%), respectively; for EHV-1 were found 22 (19.29%) positive horses (n = 114). Regarding historical variable respiratory and reproductive diseases, it was statistically significant (p=0.02) for the presence of antibodies against EHV-1. The AVE is not present among the equine vaquejada in Mossoró/RN, for other surveyed viruses (EV, IE, EHV-1, EEL and EEO) there is evidence of viral activity in populations of equine Mossoro, and respiratory clinical signs and reproductive may be suggestive of infection by EHV-1.

Inquérito sorológico da infecção por herpesvírus equino no Estado de Minas Gerais / Serological survey of equine herpesvirus infection in Minas Gerais state

Os herpesvírus equinos tipo 1 (HVE-1) e 4 (HVE-4) são agentes causadores de diferentes formas de doença em cavalos, das quais as mais comuns são a rinopneumonite, o abortamento, a mortalidade perinatal e a mieloencefalopatia herpética equinas, que causam grandes perdas econômicas. Tem sido descrita mundialmente, havendo poucos estudos no Brasil. O objetivo do presente trabalho foi estudar a ocorrência e a distribuição da infecção por herpesvírus equinos (HVE) em equídeos criados em dez Delegacias Regionais do Estado de Minas Gerais: Almenara, Bambuí, Curvelo, Governador Valadares, Montes Claros, Oliveira, São Gonçalo do Sapucaí, Teófilo Otoni, Unaí e Viçosa. Foi utilizada a técnica de soroneutralização em microplacas com o intuito de detectar anticorpos soro neutralizantes. Das amostras analisadas, 17,6% (145/826) foram soropositivas para o HVE, sendo 18,7% (140/749) cavalos soropositivos, 6,8% (5/73) muares soropositivos e nenhum asinino soropositivo (0/4). Conclui-se que o HVE-1 encontra-se amplamente disseminado no Estado de Minas Gerais, pois todas as regiões estudadas apresentaram animais sororreagentes ao HVE-1. Observou-se maior ocorrência de anticorpos contra o HVE em animais adultos, indicando assim o potencial desses animais como fonte de infecção para os potros. (AU)

Equine herpesvirus type 1 (EHV-1) and 4 (EHV-4) are major pathogens affecting horses, and cause respiratory disease, abortion, perinatal mortality and neurological disease, bringing economical losses. This infection has been reported worldwide, but there are only a few studies in Brazil. The present study was undertaken in order to evaluate the occurrence and distribution of equine herpesviruses (EHV) infection in equids from ten regions of Minas Gerais State: Almenara, Bambuí, Curvelo, Governador Valadares, Montes Claros, Oliveira, São Gonçalo do Sapucaí, Teófilo Otoni, Unaí and Viçosa. To detect antibodies against EHV virus neutralization test in microplates was used. We found 17.6% (145/826) positive animals for EHV. 18.7% (140/749) positive horses, 6.8% (5/73) positive mules and none positive (0/4) donkeys. All ten regions studied showed animals reagents to EHV. The results suggest that EHV is widespread in equids of Minas Gerais State. It was observed a higher occurrence of antibodies against EHV in adult animals, indicating the potential of these animals as source of infection for foals. (AU)

Detection of equine herpesvirus 1 DNA in a single embryo and in horse semen by polymerase chain reaction

The genome of one equine embryo and three equine semen specimens collected from a Brazilian farm were tested by polymerase chain reaction (PCR) for the presence of EHV-1 and EHV-4-specific timidine kinase (TK) sequences. The PCR detected specific EHV-1 TK gene sequences in all samples tested. The peripheral blood leukocytes (PBL) of the embryo donor mare also was amplified by EHV-1 TK primers. Infectious virus was not recovered from any specimens. The animals did not show any clinical signal of EHV-1 or EHV-4 infections. EHV-4 was not detected in the studied specimens. The results indicate that PCR was more sensitive than virus isolation in cell culture for detecting EHV-1 in semen of carrier horses.

O genoma das amostras de um embrião e semen de três eqüinos, coletados em uma fazenda brasileira, foram testados para a presença de seqüências específicas dos genes da timidina kinase (TK) de herpesvírus eqüino-1 (HVE-1) e herpesvírus eqüino-4 (HVE-4) por meio de reação em cadeia da polimerase (PCR). A PCR detectou seqüências específicas do gene de TK de HVE-1 em todas as amostras testadas. O DNA template extraído de leucócitos periféricos da égua doadora do embrião também foi amplificado pelos pares de primers designados para TK do HVE-1. Vírus infeccioso não foi isolado desses espécimes. Os resultados indicaram que o PCR foi mais sensível do que o método de isolamento em cultura de células para a detecção do HVE-1 em sêmen de cavalos portadores.

Própolis e natação na prevenção da aterogênese e hipertrofia ventricular esquerda de camundongos hipercolesterolêmicos

O processo inflamatório, a disfunção do endotélio e o estresse oxidativo no ambiente cardiovascular decorrente das dislipidemias são as condições que promovem e sustentam a aterosclerose e a hipertrofia cardíaca. O presente estudo verificou o efeito da própolis isolada e da sua associação com a natação na dislipidemia, na hipertrofia ventricular esquerda e na aterogênese de camundongos hipercolesterolêmicos que já recebiam dieta hiperlipídica. Foram utilizados 40 camundongos LDLr-/- alimentados com dieta hiperlipídica (20% de gordura total, 1,25% de colesterol e 0,5% de ácido cólico) ad libitum por 75 dias. Os animais foram divididos em 4 grupos (n=10): grupo hiperlipídico (HL), sedentário, submetido ao estresse aquático; grupo hiperlipídico + natação (HL NAT), submetido a um protocolo de natação (1 hora por dia, 5 vezes por semana) a partir do 16º dia do experimento; grupo hiperlipidico/própolis (HL PRO), sedentário, submetido ao estresse aquático e que recebeu própolis via oral (70 µL do extrato alcoólico de própolis a 85,71% todos os dias da semana) a partir do 16º dia do experimento; grupo HL NAT PRO, submetido a um protocolo de natação (1 hora por dia, 5 vezes por semana) a partir do 16º dia do experimento e que recebeu própolis via oral (70 µL do extrato alcoólico de própolis a 85,71% todos os dias da semana) a partir do 16º dia do experimento. Após os 75 dias de experimento, os animais foram pesados e anestesiados. O sangue foi coletado e foram realizadas as análises laboratoriais de colesterol total e frações, e triglicerídeos. Após a toracotomia, o coração e a artéria aorta foram removidos. O coração foi pesado e dissecado, o ventrículo esquerdo isolado, calculou-se a razão entre peso ventricular (mg) e peso animal (g), e, em seguida, foi processado histologicamente. Lâminas do ventrículo e aorta foram coradas com hematoxina e eosina (HE) e picrosírius red para análise histológica e histoquímica; outras lâminas foram tratadas imunohistoquimicamente com anticorpos antiproteína pró-inflamatória (CD40L) para avaliar o processo inflamatório. Os animais HL apresentaram dislipidemia severa, aterogênese e hipertrofia ventricular esquerda associada a uma diminuição dos níveis séricos da lipoproteína de alta densidade (HDL) e consequente desenvolvimento de processo anti-inflamatório cardiovascular caracterizado pelo aumento da expressão CD40L no ventrículo esquerdo e na aorta. A natação e a própolis separadas e/ou associadas preveniu a hipertrofia ventricular esquerda (HVE), a aterogênese, a inflamação ventricular e arterial, diminuindo a expressão de CD40L e aumentando os níveis plasmáticos da HDLc. A própolis isolada ou associada com uma atividade física regular é benéfica na proteção cardiovascular por ação anti-inflamatória

Infecção experimental em cavalos pelo herpesvírus eqüino tipo 1: aspectos clínicos e detecção do agente pela reação em cadeia pela polimerase / Experimental infection in horses with equine herpesvirus 1: evaluation of clinical signs and detection of virus by polymerase chain reaction

Dez cavalos adultos clinicamente saudáveis foram inoculados por via intranasal com a estirpe A4/72 do herpesvírus eqüino tipo 1 (HVE-1). Com o intuito de estudar o efeito da dose infectante na severidade da rinopneumonite, os animais foram distribuídos em dois grupos experimentais: (a) grupo I (106,6 DICT50) e (b) grupo II (5×106,6 DICT50). Nos primeiros dez dias após a inoculação viral, todos os cavalos apresentaram manifestações de infecção respiratória leve e restrita às vias aéreas anteriores. Poucos animais desenvolveram leucopenia sangüínea envolvendo linfócitos (n=4) e neutrófilos (n=2). Somente em um houve aumento na contagem dos neutrófilos no lavado broncoalveolar (LBA). Apesar de possuírem elevados títulos de anticorpos neutralizantes antes da inoculação, alguns cavalos apresentaram soroconversão após o desafio viral. Esse padrão de resposta humoral foi determinado pelo aumento da dose infectante. O HVE-1 não foi isolado a partir das secreções nasais de nenhum animal. Entretanto, o DNA viral foi detectado pela reação em cadeia pela polimerase (PCR) nas células mononucleares sangüíneas entre o terceiro e o oitavo dias pós-inoculação (d.p.i.) em todos os animais, indicando a ocorrência de viremia. Além disso, a prova de PCR detectou o vírus nas amostras de LBA a partir do nono d.p.i. no grupo II, demonstrando que a disseminação do HVE-1 pelo trato respiratório após o desafio viral foi dose-dependente. Com base nos resultados obtidos, foi possível concluir que a PCR é uma técnica com alta sensibilidade para o diagnóstico do HVE-1, capaz de detectar a presença do DNA viral mesmo quando não ocorre a constatação do agente pelos métodos tradicionais

Ten clinically healthy adult horses were inoculated intranasally with the A4/72 strain of equine herpesvirus 1 (EHV-1). The animals were divided into two experimental groups in order to study the influence of the infective dose in the severity of rhinopneumonitis: (a) group I (106,6 TCID50) and (b) group II (5×106,6 DICT50). In the first ten days after the inoculation, they showed signs of a mild, self-limiting upper respiratory tract infection. Very few animals developed transient blood leukopenia, involving lymphocytes (n=4) as well as neutrophils (n=2). Only one horse had an increase in the neutrophils count of the bronchoalveolar lavage (BAL) samples. In spite of the presence of neutralizing antibodies before the trial, seroconversion was observed in some horses. The pattern of antibody response was determined by the increase of the challenge exposure. The virus was not isolated from nasal swabs of any horse. However, the EHV-1 was detected through the polymerase chain reaction (PCR) from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of all horses in the experiment within the third to the eighth day after the inoculation that illustrated the viremia. In addition, the PCR assay also detected the virus in BAL samples starting on the ninth day after the experimental infection of group II. For that reason, the dissemination of the EHV-1 throughout the respiratory tract after virus exposure was dose-dependent. Based on the results obtained from this study, it can be affirmed that the PCR is a highly effective technique in detecting the EHV-1. It may be used in circumstances where traditional methods are not efficient due to the fact that it provides an enhanced diagnostic procedure for underdiagnosed diseases

Estudo da freqüência de ocorrência de anticorpos anti-Neospora spp. em eqüinos com e sem distúrbios reprodutivos

O objetivo deste trabalho foi verificar a existência de associação entre a presença de anticorpos séricos anti-Neospora spp. e a apresentação de história recente de falhas reprodutivas em fêmeas da espécie eqüina. Foram analisadas 1106 amostras de soro de eqüinos pertencentes ao banco de soros do Laboratório de Raiva e Encefalites Virais do Instituto Biológico, sendo que 500 amostras eram de soros enviados com solicitação de diagnóstico de infecção por Herpesvírus Eqüino tipo 1 (HVE-1), e as outras 606, de soros encaminhados para sorodiagnóstico de Anemia Infecciosa Eqüina. O primeiro grupo constituía-se de soros provenientes de 483 fêmeas que apresentavam história recente de distúrbios reprodutivos e de soros de 17 machos reprodutores provenientes de rebanhos nos quais havia casos clínicos de distúrbios reprodutivos nas fêmeas contactantes. O segundo grupo era constituindo de soros de animais que necessitavam de sorodiagnóstico para Anemia Infecciosa eqüina e era constituído de amostras de 325 soros de fêmeas e 281 soros de machos. Nenhum animal deste grupo apresentava sintoma clínico de qualquer natureza, condição atestada pela assistência médico–veterinária responsável por cada animal na ocasião da solicitação do exame. Para determinar a presença de anticorpos anti-Neospora spp., foi empregada a Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI), adotando-se como ponto de corte a diluição de 1:50. No grupo de animais com problemas reprodutivos, a freqüência de animais positivos foi de 15,4% (77/500) enquanto no grupo de animais clinicamente sadios a freqüência encontrada foi de 6,1% (37/606). Considerando apenas os resultados das fêmeas de ambos os grupos, entre os 483 animais do grupo de animais com problemas reprodutivos, 15,1% (73/483) eram sororeagentes, enquanto no grupo animais clinicamente sadios, 5,8% (19/325) das éguas eram sororeagentes. Utilizando-se o teste ?2 com nível de significância de 5%, foi possível detectar associação entre freqüência de animais soropositivos e ocorrência recente de distúrbios reprodutivos, tanto na análise de todos os animais, quanto na análise somente das fêmeas. Os resultados encontrados neste estudo sugerem que a ocorrência de distúrbios reprodutivos em fêmeas eqüinas esteja associada à infecção por agentes pertencentes ao gênero Neospora, indicando que a possibilidade destes agentes, e mais especificamente do Neospora caninum participarem na gênese de abortamentos deva ser investigada