Initial development of upland rice inoculated and co-inoculated with multifunctional rhizobacteria / Desenvolvimento inicial de arroz de terras altas inoculado e coinoculado com rizobactérias multifuncionais

Inoculation and co-inoculation of upland rice with multifunctional rhizobacteria can promote plant growth, especially the root system. Thus, this study aimed to evaluate the effect of inoculation and co-inoculation with Azospirillum sp. and Bacillus sp. in the early development of upland rice. The experiment was conducted using a completely randomized design with 4 treatments and 10 replications, totaling 40 plots. The treatments were: 1) Ab-V5 (Azospirillum brasilense), 2) BRM 63573 (Bacillus sp.), 3) co-inoculation of Ab-V5 + BRM 63573, and 4) control (without rhizobacteria). Inoculation and co-inoculation with the multifunctional rhizobacteria Ab-V5 and BRM 63573 provided positive effects on the initial development of upland rice. Inoculation with isolate BRM 63573 had significant effects on root length, shoot, and total biomass, while inoculation with isolate Ab-V5 had significant effects on root length and production of root and total biomass. Co-inoculation treatment had significant effects on variables such as diameter, volume, total surface, root biomass, and total biomass. The control treatment (without multifunctional rhizobacteria) had the worst results for most of the analyzed variables.

A inoculação e coinoculação do arroz de terras altas com rizobactérias multifuncionais pode promover o crescimento das plantas, especialmente do sistema radicular. Assim, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da inoculação e coinoculação com Azospirillum sp. e Bacillus sp. no desenvolvimento inicial do arroz de terras altas. O experimento foi conduzido em delineamento inteiramente casualizado com 4 tratamentos e 10 repetições, totalizando 40 parcelas. Os tratamentos foram: 1) Ab-V5 (Azospirillum brasilense), 2) BRM 63573 (Bacillus sp.), 3) coinoculação de Ab-V5 + BRM 63573 e 4) controle (sem rizobactérias). A inoculação e coinoculação com as rizobactérias multifuncionais Ab-V5 e BRM 63573 proporcionaram efeitos positivos no desenvolvimento inicial do arroz de terras altas. A inoculação com o isolado BRM 63573 teve efeitos significativos no comprimento da raiz, parte aérea e biomassa total, enquanto a inoculação com o isolado Ab-V5 teve efeitos significativos no comprimento da raiz e produção de raiz e biomassa total. O tratamento com coinoculação teve efeitos significativos em variáveis como diâmetro, volume e superfície total de raiz e biomassa de raiz e total. O tratamento controle (sem rizobactérias multifuncionais) apresentou os piores resultados para a maioria das variáveis analisadas.

Bradyrhizobium and Azospirillum co-inoculation associated with cobalt and molybdenum application in the soybean crop / Co-inoculação de Bradyrhizobium e Azospirillum associadas a aplicação de cobalto e molibdênio na cultura da soja

ABSTRACT: Co-inoculation between bacteria of the genera Bradyrhizobium and Azospirillum can enhance the nodulation and promote the development of the soybean [Glycine max (L.) Merrill] root system, contributing to the increase in grain yield, in addition to the reduction in production costs and contamination of natural resources. Cobalt (Co) and molybdenum (Mo) use can also favor biological nitrogen fixation. The research evaluated the co-inoculation effect of bacteria associated with the Co and Mo application in soybean crop. The randomized blocks design was employed, in a 2 x 6 factorial scheme, presence and absence of Co and Mo and five ways of using the products Bradyrhizobium and Azospirillum, plus control, with four replications. The treatments were formed by the control (not inoculated + 20 kg N ha-1); seed inoculation with Bradyrhizobium (100 mL ha-1) + 20 kg N ha-1; seed inoculation with Bradyrhizobium (100 mL ha-1) and three treatments applying Bradyrhizobium + Azospirillum in furrow, in different doses. Height of insertion of the first pod, total number of pods and grains per plant, weight of 100 grains and grain yield were evaluated. Inoculation of Bradyrhizobiumjaponicum associated with co-inoculation of Azospirillumbrasilense via foliar and Co and Mo, provided increases in the number of pods per plant, number of grains per pod and weight of 100 grains, reflecting increases in grain yield.The use of Co and Mo, on average, increased soybean yield by 10%, resulting in an average yield of 4,904 kg ha-1.

RESUMO: A co-inoculação entre bactérias do gênero Bradyrhizobium e Azospirillum pode potencializar a nodulação e promover o desenvolvimento do sistema radicular da soja [Glycine max (L.) Merrill], contribuindo com o aumento na produtividade de grãos, além da redução nos custos de produção e contaminação dos recursos naturais. A utilização de cobalto (Co) e molibdênio (Mo), também pode favorecer a fixação biológica de nitrogênio. O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito da co-inoculação de bactérias associadas a aplicação de Co e Mo na cultura da soja. O delineamento utilizado foi de blocos casualizados, em esquema fatorial 2 x 6, na presença e ausência de Co e Mo e cinco formas de utilização dos produtos Bradyrhizobium e Azospirillum, mais controle, com quatro repetições. Os tratamentos foram formados pela testemunha (não inoculada + 20 kg de N ha-1); inoculação com Bradyrhizobium na semente (100 mL ha-1) + 20 kg de N ha-1; inoculação de sementes com Bradyrhizobium (100 mL ha-1) e três tratamentos aplicando Bradyrhizobium + Azospirillum em sulco em diferentes doses. Foram avaliados altura de inserção da primeira vagem, número total de vagens e grãos por planta, massa de 100 grãos e produtividade de grãos. A inoculação de Bradyrhizobium japonicum associado a co-inoculação de Azospirillum brasilense via foliar e ao Co e Mo, proporcionou incrementos no número de vagens por planta, número de grãos por vagem e massa de 100 grãos, refletindo acréscimos na produtividade de grãos. O uso de Co e Mo, em média, aumentou o rendimento da soja em 10%, resultando numa produtividade média de 4904 kg ha-1.

Soybean extracts can improve plant development

ABSTRACT: Microbial biodiversity of an environment can contribute to plant growth and increase crop yield. Plant extracts from soybean (Glycine max (L.) Merrill) were investigated on soybean plants grown after inoculation with these extracts. Soil samples were collected from two important Brazilian soybean-growing regions to produce the extracts used in the experiments. The extracts were produced with material collected from aboveground biomass and rhizosphere of soybean plants cultivated in a controlled greenhouse (phase 1). The extracts produced in phase 1 were applied in a sequential experiment (phase 2). Phase 2 was conducted to examine the plant microbiome after the microbial alteration process in the greenhouse through seed inoculation with the extracts produced previously. Samples of aboveground biomass were collected to determine root dry matter and crop yield. Bacterial 16S rRNA sequences were processed to determine the final microbial content of soybean. The inoculated treatments had lower species diversity; however, the phyla Firmicutes and Bacteroidetes were more abundant in the treatments than in the non-inoculated treatment. The soybean plant stem in the inoculated treatment also had a positive response to enrichment of the bacterial classes Betaproteobacteria, Bacilli and Flavobacteria. Inoculation affected the microbial composition of soybean plants. The alteration of microbiome changes revealed differences for crop yield between the inoculated and non-inoculated treatments, with up to 93.5 % higher crop yields per plant according to the extract applied.

Agave angustifolia bulbil growth in different substrates, with doses of fertigation and inoculation with Azospirillum brasilense / Crescimento de bulbos de Agave angustifolia em diferentes substratos, com doses de fertirrigação e inoculação com Azospirillum brasilense

ABSTRACT: There is little information about the production of agave plants in the nursery, so this research assessed the growth in the nursery of Agave angustifolia plants originating from inflorescence bulbils, subjected to different substrates, fertigation doses, and inoculation with Azospirillum brasilense. The bulbils were established for two months in a 50% peat-50% perlite substrate. One hundred and eighty plants were individually transferred to 3.8 dm3 pots for evaluation in an experiment with three factors: 1) type of irrigation: 1.1) water, or 1.2) fertigation with Steiner's nutrient solution (NS), NS-50%, or 1.3) NS-100%; 2) inoculation with Azospirillum brasilense, 2.1) inoculated plants, 2.2) non-inoculated plants; 3) substrate, mixtures of bovine manure (BM) + sand (S) in different proportions, Mix1: 75% BM + 25% S; Mix2: 25% BM + 75% S; Mix3: 50% BM + 50% S. Morphological characteristics were quantified for one year. The largest plants were those that were in substrates with 50% BM, and were fertirrigated with NS-100% and inoculated with Azospirillum brasiliense. The smallest plants were those established a in a substrate with the lowest manure content, irrigated with only water and without inoculation, which was respectively 71.6 and 54.10 cm high, 21 and 15.6 leaves, 76.6 and 62.2 mm in stem diameter, 84.4 and 59.8 cm in rosette diameter.

RESUMO: Existem poucas informações sobre a produção de agave em viveiro, portanto o objetivo deste trabalho foi avaliar o crescimento em viveiro de Agave angustifolia provenientes de bulbilhos de inflorescência, submetidos a diferentes substratos, doses de fertirrigação e inoculação com Azospirillum brasilense. Os bulbilhos foram estabelecidos por dois meses em substrato 50% turfa-50% perlita. Cento e oitenta plantas foram transferidas individualmente para vasos de 3,8 dm3 para avaliação em um experimento com três fatores: 1) tipo de irrigação: 1.1) água ou 1.2) fertirrigação com solução nutritiva de Steiner (NS), NS-50% ou 1.3 ) NS-100%; 2) inoculação com Azospirillum brasilense, 2.1) plantas inoculadas, 2.2) plantas não inoculadas; 3) substrato, misturas de esterco bovino (BM) + areia (S) em diferentes proporções, Mix1: 75% BM + 25% S; Mix2: 25% BM + 75% S; Mix3: 50% BM + 50% S. As características morfológicas foram quantificadas por um ano. As maiores plantas foram aquelas que estavam em substrato com 50% de BM, foram fertirrigadas com NS-100% e inoculadas com Azospirillum brasiliense, enquanto as menores foram aquelas estabelecidas em substrato com menor quantidade de esterco, irrigado apenas com água e sem inoculação, que tinham respectivamente, 71,6 e 54,10 cm de altura, 21 e 15,6 folhas, 76,6 e 62,2 mm de diâmetro do caule, 84,4 e 59,8 cm de diâmetro de roseta.

Agave angustifolia bulbil growth in different substrates, with doses of fertigation and inoculation with Azospirillum brasilense / Crescimento de bulbos de Agave angustifolia em diferentes substratos, com doses de fertirrigação e inoculação com Azospirillum brasilense

There is little information about the production of agave plants in the nursery, so this research assessed the growth in the nursery of Agave angustifolia plants originating from inflorescence bulbils, subjected to different substrates, fertigation doses, and inoculation with Azospirillum brasilense. The bulbils were established for two months in a 50% peat-50% perlite substrate. One hundred and eighty plants were individually transferred to 3.8 dm3 pots for evaluation in an experiment with three factors: 1) type of irrigation: 1.1) water, or 1.2) fertigation with Steiner's nutrient solution (NS), NS-50%, or 1.3) NS-100%; 2) inoculation with Azospirillum brasilense, 2.1) inoculated plants, 2.2) non-inoculated plants; 3) substrate, mixtures of bovine manure (BM) + sand (S) in different proportions, Mix1: 75% BM + 25% S; Mix2: 25% BM + 75% S; Mix3: 50% BM + 50% S. Morphological characteristics were quantified for one year. The largest plants were those that were in substrates with 50% BM, and were fertirrigated with NS-100% and inoculated with Azospirillum brasiliense. The smallest plants were those established a in a substrate with the lowest manure content, irrigated with only water and without inoculation, which was respectively 71.6 and 54.10 cm high, 21 and 15.6 leaves, 76.6 and 62.2 mm in stem diameter, 84.4 and 59.8 cm in rosette diameter.

Existem poucas informações sobre a produção de agave em viveiro, portanto o objetivo deste trabalho foi avaliar o crescimento em viveiro de Agave angustifolia provenientes de bulbilhos de inflorescência, submetidos a diferentes substratos, doses de fertirrigação e inoculação com Azospirillum brasilense. Os bulbilhos foram estabelecidos por dois meses em substrato 50% turfa-50% perlita. Cento e oitenta plantas foram transferidas individualmente para vasos de 3,8 dm3 para avaliação em um experimento com três fatores: 1) tipo de irrigação: 1.1) água ou 1.2) fertirrigação com solução nutritiva de Steiner (NS), NS-50% ou 1.3 ) NS-100%; 2) inoculação com Azospirillum brasilense, 2.1) plantas inoculadas, 2.2) plantas não inoculadas; 3) substrato, misturas de esterco bovino (BM) + areia (S) em diferentes proporções, Mix1: 75% BM + 25% S; Mix2: 25% BM + 75% S; Mix3: 50% BM + 50% S. As características morfológicas foram quantificadas por um ano. As maiores plantas foram aquelas que estavam em substrato com 50% de BM, foram fertirrigadas com NS-100% e inoculadas com Azospirillum brasiliense, enquanto as menores foram aquelas estabelecidas em substrato com menor quantidade de esterco, irrigado apenas com água e sem inoculação, que tinham respectivamente, 71,6 e 54,10 cm de altura, 21 e 15,6 folhas, 76,6 e 62,2 mm de diâmetro do caule, 84,4 e 59,8 cm de diâmetro de roseta.

Soybean extracts can improve plant development

Microbial biodiversity of an environment can contribute to plant growth and increase crop yield. Plant extracts from soybean (Glycine max (L.) Merrill) were investigated on soybean plants grown after inoculation with these extracts. Soil samples were collected from two important Brazilian soybean-growing regions to produce the extracts used in the experiments. The extracts were produced with material collected from aboveground biomass and rhizosphere of soybean plants cultivated in a controlled greenhouse (phase 1). The extracts produced in phase 1 were applied in a sequential experiment (phase 2). Phase 2 was conducted to examine the plant microbiome after the microbial alteration process in the greenhouse through seed inoculation with the extracts produced previously. Samples of aboveground biomass were collected to determine root dry matter and crop yield. Bacterial 16S rRNA sequences were processed to determine the final microbial content of soybean. The inoculated treatments had lower species diversity; however, the phyla Firmicutes and Bacteroidetes were more abundant in the treatments than in the non-inoculated treatment. The soybean plant stem in the inoculated treatment also had a positive response to enrichment of the bacterial classes Betaproteobacteria, Bacilli and Flavobacteria. Inoculation affected the microbial composition of soybean plants. The alteration of microbiome changes revealed differences for crop yield between the inoculated and non-inoculated treatments, with up to 93.5 % higher crop yields per plant according to the extract applied.

Immune response dynamics of recent and chronic small ruminant lentivirus infection in the male reproductive system / Dinâmica da resposta imunológica da infecção recente e crônica por lentivírus de pequenos ruminantes no sistema reprodutor de machos

The objective of this study was to analyze the immune responses of bucks to small ruminant lentivirus (SRLV) with a focus on the reproductive system of males with recent and chronic infection. A total of 12 bucks were selected, six seronegative and six seropositive with chronic natural infection for more than 18 months (chronic infection group). After selecting the animals, the six seronegative males were intravenously inoculated with caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV)-Co viral strain at a titer of 10-5,6 TCID50/mL. After viral inoculation, this group was called the recent infection group and was monitored weekly with the chronically infected group for 180 days with blood serum and seminal plasma Western Blot (WB) analysis. Of the animals with chronic SRLV infection, 18.94% (50/264) showed anti-SRLV antibodies in at least one of the samples, and 81.06% (214/264) were negative. Anti-SRLV antibodies were detected in 27.27% (36/132) of the blood serum samples from this group, while 10.60% (14/132) were reactive in the seminal plasma WB test. The animals inoculated with CAEV-Co became seropositive after the third week of viral inoculation. In this group, 31.06% (41/132) of seminal plasma samples had anti-SRLV antibodies, and of these, 70.73% (29/41) coincided with blood serum results. Of the remaining 29.27% (12/41), the seminal plasma sample of only three animals (RIA2, RIA3, and RIA5) had anti-SRLV antibodies. One of the animals with a recent infection presented anti-SRLV antibodies only in seminal plasma samples, possibly due to virus compartmentalization. Intermittent viral shedding was observed in both biological samples, regardless of the infection stage. The immune response in bucks with recent SRLV infection is more significant than in chronically infected animals. Regardless of the stage of infection, there is a fluctuation in antibody levels, therefore, this creates a risk of false-negative samples when performing the diagnosis.

O objetivo desse estudo foi analisar a resposta imunológica aos lentivírus de pequenos ruminantes (LVPR) com enfoque no sistema reprodutor de machos com infecção recente e crônica. Para isso, foram selecionados 12 reprodutores caprinos, sendo seis soronegativos e seis soropositivos com infecção natural crônica há mais de 18 meses (grupo com infecção crônica). Após seleção dos animais, os seis machos soronegativos foram inoculados com a cepa viral do vírus da artrite encefalite caprina (CAEV)-Co, título 10-5,6 TCID50/mL, por via intravenosa. A partir da inoculação viral este agrupamento passou a ser denominado de grupo com infecção recente e juntamente com o grupo com infecção crônica foram acompanhados, semanalmente por 180 dias, com análise dos testes de Western Blot (WB) no soro sanguíneo e plasma seminal. Nos animais com infecção crônica para LVPR, 18,94% (50/264) apresentaram anticorpos anti-LVPR em pelo menos uma das distintas amostras, e 81,06% (214/264) tiveram resultados negativos. Das amostras de soro sanguíneo do referido grupo, em 27,27% (36/132) detectou-se anticorpos anti-LVPR, enquanto que no plasma seminal 10,60% (14/132) foram reagentes no teste de WB. Nos animais inoculados com o CAEV-Co, ocorreu a soroconversão após a terceira semana da inoculação viral. Nesse grupo, 31,06% (41/132) das amostras de plasma seminal tiveram anticorpos anti-LVPR, sendo que dessas 41, 70,73% (29/41) coincidiram com resultado das amostras de soro sanguíneo. Nos 29,27% (12/41) restante, houve a detecção somente no plasma seminal e eram amostras provenientes de três animais (AIR2, AIR3 e AIR5). Em um dos animais com infecção recente, só foi identificado anticorpos anti-LVPR em amostras de plasma seminal, possivelmente em função da compartimentalização do vírus. Intermitência viral foi observada em ambas as amostras biológicas, independentemente do estágio de infecção. Conclui-se que a resposta imunológica em reprodutores com infecção recente LVPR é mais acentuada do que em animais cronicamente infectados. E, independentemente do estágio da infecção há uma flutuação nos níveis de anticorpos, sendo, portanto, um fator de risco, em virtude da existência de amostras falso-negativo ao realizar o diagnóstico.

Fowl Aviadenovirus E associated with hepatitis-hydropericardium syndrome in broiler breeders / Síndrome da hepatite-hidropericárdio por Aviadenovirus e em reprodutores de corte

ABSTRACT: Fowl aviadenovirus (FAdV) is an important pathogen in the global poultry industry and the etiology of inclusion body hepatitis-hydropericardium syndrome (HHS) in chickens. Since the 1990s, several outbreaks of HHS have occurred in poultry producing areas, including South America. The coinfection of FAdV and chicken anemia virus (CAV) may markedly impact the incidence of HHS. This study describes an outbreak of HHS in coinfection with CAV in industrial broiler breeders and characterizes the FAdV isolate. The three-week-old male broiler breeders had pale bone marrow, enlarged and yellowish liver, splenomegaly, and atrophied thymus; one chicken was also found with hydropericardium. Virus isolation was performed in SPF chicken embryos of liver and thymus. Tissues of the naturally infected chickens and the inoculated embryos were evaluated by PCR and histopathology. All affected chickens and inoculated embryos were positive for FAdV and CAV. The inoculated embryos had enlarged, greenish and hemorrhagic livers, and 30% died within 7 days of inoculation. Phylogenetic analysis of the FAdV isolate hexon gene partial sequence enabled grouping with E species. The E species has recently become a relevant species in several countries. The association of FAdV with CAV in breeders is of further concern due to both being capable of vertical transmission. Within the last decade, a worldwide upsurge of HHS in broiler breeders owing to failed biosecurity has occurred. In this episode, the failure on biosecurity may have enabled challenge with both FAdV and CAV, with pathological synergism. The CAV-impaired adaptive immunity may have benefited the FAdV infection.

RESUMO: Adenovírus aviário (FAdV) é um importante patógeno na indústria avícola global e a etiologia da síndrome da hepatite por corpúsculo de inclusão-hidropericárdio (SHH) em galinhas. Desde a década de 1990, vários surtos de SHH foram descritos em todas as áreas de produção de aves, incluindo na América do Sul, e a coinfecção entre FAdV e vírus da anemia das galinhas (CAV) pode ser agravante para todos os aspectos da SHH. Objetiva-se descrever um surto de SHH em matrizes de frangos corte, caracterizar a estirpe de FAdV envolvida e destacar a coinfecção com CAV. Foram avaliados machos reprodutores de corte com três semanas de idade, com medula óssea pálida, fígado aumentado e amarelado e esplenomegalia, timo atrofiado e um com hidropericárdio. Fígado e timo foram coletados para isolamento do vírus em embriões de galinhas SPF, PCR e histopatologia. Todas as aves acometidas e embriões inoculados foram positivos para FAdV e CAV. Os embriões inoculados tiveram óbito de 30% em até sete dias após a inoculação e alterações hepáticas por fígados esverdeados e aumentados. A análise filogenética de FAdV com base em parte da sequência do gene que codifica a proteína hexon revelou identidade com a espécie E, que se tornou disseminada em vários países. A coinfecção de FAdV e CAV resulta em maior intensidade de lesões, maior morbidade e mortalidade e em reprodutores tem alta relevância epidemiológica, em razão da transmissão vertical de ambos e da ampla distribuição geográfica das progênies infectadas. Na última década, ocorreu um aumento mundial na ocorrência de SHH em frangos de corte relacionado a falhas em biosseguridade, especialmente em reprodutores, condição que pode ter ocorrido neste episódio. A presença de FAdV e CAV em reprodutores é motivo para preocupação por reflexos negativos à imunidade e viabilidade das progênies.

In vitro germination and reserve mobilization of Vriesea friburgensis Mez / Germinação in vitro e mobilização de reservas de Vriesea friburgensis Mez

Studies on the germination and establishment of plants are key pieces to understanding the reproductive success of plants. This work aimed to describe in vitro germination and reserve mobilization in the bromeliad Vriesea friburgensis through morphological, histochemical, and biochemical analysis. The conditions used in this study for the in vitro germination are adequate. From the third day of in vitro inoculation, a uniform germination of 98% was obtained, exhibiting a high physiological quality of the seeds and a high potential to produce seedlings (94%). There is early reserve mobilization, which began in the imbibition phase. The accumulated reserves in the endosperm cytoplasm are degraded by hydrolytic enzymes provided by the aleurone layer. It is possible that compounds in the cell walls of the endosperm contribute to a lesser extent in mobilization. Additionally, it was observed that starch accumulation in the cotyledon increases when the seedling has formed. Results from this study provide insights for future studies on ecology, seed technology, and conservation in this species. This study contributes to the limited knowledge of the dynamics of reserves during germination and seedling establishment in Bromeliaceae. To the best of our knowledge, this is the first study with this approach in the genus Vriesea.

Estudos sobre germinação e estabelecimento de plantas são peças-chave para entender o sucesso reprodutivo das plantas. Este trabalho teve como objetivo descrever a germinação in vitro e a mobilização de reservas na bromélia Vriesea friburgensis por meio de análises morfológicas, histoquímicas e bioquímicas. As condições utilizadas neste estudo para a germinação in vitro são adequadas. A partir do terceiro dia de inoculação in vitro, obteve-se germinação uniforme de 98%, apresentando alta qualidade fisiológica das sementes e alto potencial de produção de plântulas (94%). Há uma mobilização precoce de reservas, iniciada na fase de embebição. As reservas acumuladas no citoplasma do endosperma são degradadas por enzimas hidrolíticas fornecidas pela camada de aleurona. É possível que compostos nas paredes celulares do endosperma contribuam em menor grau na mobilização. Além disso, observou-se que o acúmulo de amido no cotilédone aumenta com a formação da plântula. Os resultados deste estudo fornecem informações para estudos futuros sobre ecologia, tecnologia de sementes e conservação desta espécie. Este estudo contribui para o conhecimento limitado da dinâmica das reservas durante a germinação e estabelecimento de plântulas em Bromeliaceae. Até onde sabemos, este é o primeiro estudo com esta abordagem no gênero Vriesea.

Composição de cana-de-açúcar para alimentação animal em função da aplicação de bactérias diazotróficas / Composition of sugarcane for animal feeding with the application of diazotrophic bacteria

A cana-de-açúcar pode ser empregada na alimentação animal devido ao seu alto rendimento de matéria seca. No entanto, há muitas recomendações para evitar o emprego como alimento para animais de bom potencial genético, pois apresenta baixo teor proteico e de minerais, bem como e fibra de baixa qualidade. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da aplicação de uma mistura de cinco bactérias diazotróficas (Gluconacetobacter diazotrophicus; Herbaspirillum seropedicae; Herbaspirillum rubrisubalbicans; Paraburkholderia tropica; Nitrospirillum amazonense) e da adubação nitrogenada sobre a produção, maturação e composição químico-bromatológica de cinco variedades de cana-de-açúcar com potencial para serem empregadas na alimentação animal. Os tratamentos foram formados conforme a combinação dos cinco genótipos de cana-de-açúcar (RB867515, RB966928, RB106814, RB106818 e RB106819) com quatro condições de inoculação e adubação nitrogenada em cobertura. Os teores de sólidos solúveis totais foram determinados dos 180 dias após o transplante até a colheita do experimento, onde foi avaliada a produtividade e a amostragem de material foi coletada para as avaliações químico-bromatológicas: matéria seca, nitrogênio acumulado, proteína bruta, fibra em detergente neutro, fibra em detergente ácido, holocelulose, celulose, hemicelulose, lignina, extrativos totais e cinzas. De acordo com os resultados deste estudo, conclui-se que a aplicação de bactérias diazotróficas de forma isolada ou em conjunto com a adubação nitrogenada, aumenta a produtividade e os sólidos solúveis totais, antecipando a maturação, além de melhorar a composição químico-bromatológica das plantas de cana-de-açúcar.

Sugarcane can be used in animal feed due to its high dry matter yield. However, there are many recommendations to avoid its use as food for animals with good genetic potential, since it has a low contents of protein and minerals, as well as fiber of low quality. Therefore, this work aimed to evaluate the effects of applying a mixture of five diazotrophic bacteria (Gluconacetobacter diazotrophicus; Herbaspirillum seropedicae; Herbaspirillum rubrisubalbicans; Paraburkholderia tropica; Nitrospirillum amazonense) and nitrogen fertilization on the production, maturation, and chemical-bromatological composition of five sugarcane varieties with potential to be used in animal feed. The treatments were formed according to the combination of the five sugarcane genotypes (RB867515, RB966928, RB106814, RB106818, and RB106819) with four conditions of inoculation and nitrogen fertilization in coverage. The levels of total soluble solids were determined from 180 days after transplantation until the harvest of the experiment, where productivity was evaluated and the sample material was collected for chemical-bromatological evaluations: dry matter, accumulated nitrogen, crude protein, neutral detergent fiber, acid detergent fiber, holocellulose, cellulose, hemicellulose, lignin, total extracts, and ashes. According to the results of the present study, it is concluded that the application of diazotrophic bacteria alone or in conjunction with nitrogen fertilization, increases productivity and total soluble solids, anticipating maturation, in addition to improving the chemical-bromatological composition of sugarcane plants.

Fowl Aviadenovirus E associated with hepatitis-hydropericardium syndrome in broiler breeders / Síndrome da hepatite-hidropericárdio por Aviadenovirus e em reprodutores de corte

Fowl aviadenovirus (FAdV) is an important pathogen in the global poultry industry and the etiology of inclusion body hepatitis-hydropericardium syndrome (HHS) in chickens. Since the 1990s, several outbreaks of HHS have occurred in poultry producing areas, including South America. The coinfection of FAdV and chicken anemia virus (CAV) may markedly impact the incidence of HHS. This study describes an outbreak of HHS in coinfection with CAV in industrial broiler breeders and characterizes the FAdV isolate. The three-week-old male broiler breeders had pale bone marrow, enlarged and yellowish liver, splenomegaly, and atrophied thymus; one chicken was also found with hydropericardium. Virus isolation was performed in SPF chicken embryos of liver and thymus. Tissues of the naturally infected chickens and the inoculated embryos were evaluated by PCR and histopathology. All affected chickens and inoculated embryos were positive for FAdV and CAV. The inoculated embryos had enlarged, greenish and hemorrhagic livers, and 30% died within 7 days of inoculation. Phylogenetic analysis of the FAdV isolate hexon gene partial sequence enabled grouping with E species. The E species has recently become a relevant species in several countries. The association of FAdV with CAV in breeders is of further concern due to both being capable of vertical transmission. Within the last decade, a worldwide upsurge of HHS in broiler breeders owing to failed biosecurity has occurred. In this episode, the failure on biosecurity may have enabled challenge with both FAdV and CAV, with pathological synergism. The CAV-impaired adaptive immunity may have benefited the FAdV infection.

Adenovírus aviário (FAdV) é um importante patógeno na indústria avícola global e a etiologia da síndrome da hepatite por corpúsculo de inclusão-hidropericárdio (SHH) em galinhas. Desde a década de 1990, vários surtos de SHH foram descritos em todas as áreas de produção de aves, incluindo na América do Sul, e a coinfecção entre FAdV e vírus da anemia das galinhas (CAV) pode ser agravante para todos os aspectos da SHH. Objetiva-se descrever um surto de SHH em matrizes de frangos corte, caracterizar a estirpe de FAdV envolvida e destacar a coinfecção com CAV. Foram avaliados machos reprodutores de corte com três semanas de idade, com medula óssea pálida, fígado aumentado e amarelado e esplenomegalia, timo atrofiado e um com hidropericárdio. Fígado e timo foram coletados para isolamento do vírus em embriões de galinhas SPF, PCR e histopatologia. Todas as aves acometidas e embriões inoculados foram positivos para FAdV e CAV. Os embriões inoculados tiveram óbito de 30% em até sete dias após a inoculação e alterações hepáticas por fígados esverdeados e aumentados. A análise filogenética de FAdV com base em parte da sequência do gene que codifica a proteína hexon revelou identidade com a espécie E, que se tornou disseminada em vários países. A coinfecção de FAdV e CAV resulta em maior intensidade de lesões, maior morbidade e mortalidade e em reprodutores tem alta relevância epidemiológica, em razão da transmissão vertical de ambos e da ampla distribuição geográfica das progênies infectadas. Na última década, ocorreu um aumento mundial na ocorrência de SHH em frangos de corte relacionado a falhas em biosseguridade, especialmente em reprodutores, condição que pode ter ocorrido neste episódio. A presença de FAdV e CAV em reprodutores é motivo para preocupação por reflexos negativos à imunidade e viabilidade das progênies.

Urochloabrizantha and corn or sorghum silage integrated production: agronomic evaluation, fermentation losses, and aerobic stability of silage / Produção integrada de silagem de Urochloabrizantha e silagem de milho ou sorgo: avaliação agronômica, perdas de fermentação e estabilidade aeróbia da silagem

The present study evaluated germination, production, and morphological composition of Urochloabrizantha intercropped with corn and sorghum; and silage fermentation losses and aerobic stability of intercrop silage using microbial inoculant. Twenty experimental parcels (5.0 × 3.6 m) were used in a blocked randomized design to evaluate four treatments obtained from a 2 × 2 factorial arrangements: I) crop material (corn vs. sorghum) and II) Brachiaria (U. brizantha) establishment (present vs. absent). Corn- and sorghum-brachiaria integrated systems showed similar brachiaria germination, forage yield, and morphological composition. There was no crop and brachiaria interaction effect on the variables related to corn and sorghum plants and the total productivity. Brachiaria decreased the stem diameter and increased the population of maize and sorghum plants. However, it did not affect systems productivity. Microbial inoculation did not affect corn silage effluent losses and reduced sorghum silage effluent losses. In corn silage, brachiaria did not affect gas losses, while in sorghum silage, brachiaria increased the gas losses. Total losses were higher in sorghum silage than in corn silage, which resulted in a lower DM recovery. The treatments did not affect the pH of the silage after aerobic exposure. However, brachiaria increased silage temperature evaluated at 32 and 40 hours after aerobic exposure. Thus, corn or sorghum consortium has similar brachiaria morphological composition and productivity. Moreover, in intercropped silage, brachiaria increases effluent losses and reduces silage aerobic stability.

O presente estudo tem por objetivo avaliar a germinação, produção e composição morfológica de Urochloabrizantha consorciada com milho e sorgo, perdas de fermentação da silagem e estabilidade aeróbia da silagem consorciada com inoculante microbiano. Vinte parcelas experimentais (5.0 × 3.6 m) foram usadas em um delineamento em blocos casualizados para avaliar quatro tratamentos em arranjo fatorial 2 x 2: I) Cultura (milho vs. sorgo) e II) Estabelecimento da Brachiaria (U. brizantha) (presente vs. ausente). Os sistemas integrados milho e sorgo-brachiaria apresentaram germinação, produção de forragem e composição morfológica semelhante. Não houve efeito da interação cultura e braquiária sobre as variáveis relacionadas às plantas de milho e sorgo e a produtividade total. A brachiaria diminuiu o diâmetro do caule e aumentou a população de plantas de milho e sorgo. No entanto, não afetou a produtividade dos sistemas. A inoculação microbiana não afetou as perdas de efluente da silagem de milho e reduziu as perdas de efluente da silagem de sorgo. Na silagem de milho, a brachiaria não afetou as perdas de gás, enquanto na silagem de sorgo, a brachiaria aumentou as perdas de gás. As perdas totais foram maiores na silagem de sorgo do que na silagem de milho, o que resultou em menor recuperação da MS. Os tratamentos não afetaram o pH da silagem pós exposição aeróbia. Contudo, a brachiaria aumentou a temperatura da silagem 32 e 40 horas após exposição aeróbia. Portanto, os consórcios milho e sorgo-brachiaria apresentam composição morfológica e produtividade semelhantes. Além disso, na silagem consorciada, a brachiaria aumenta as perdas por efluentes e reduz a estabilidade aeróbia.

Viability of Toxoplasma gondii in cattle semen cryopreserved with different concentrations of cryoprotectant / Viabilidade do Toxoplasma gondii em sêmen de bovino criopreservado em diferentes concentrações de crioprotetores

ABSTRACT: Toxoplasma gondii can be eliminated in bovine semen. Cryopreserved semen is often used due to the fact that artificial insemination in dairy and beef cattle provides benefits in terms of production. However, little is known regarding the viability and infectivity of T. gondii tachyzoites in cryopreserved bovine semen. In the present study, cattle semen negative for T. gondii were contaminated with 1 x 106 tachyzoites (RH strain) and cryopreserved with and without different cryoprotectants, such as DMSO (concentrations of 2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% and 10.0%) and glycerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% and 10.0%), followed by freezing in liquid nitrogen (-196°C). After 24 hours, the samples were thawed and inoculated in 10 mice per cryoprotectant concentration. The mice were evaluated for clinical signs of toxoplasmosis (rough coat, diarrhea, hypoactivity and sudden death) as well as serum titers of IgM and IgG and the presence of tachyzoites in the peritoneal lavage. The results revealed that T. gondii remained infective in all samples. Clinical signs of toxoplasmosis were observed in the mice beginning with the 6th day post-inoculation (DPI) and 100% lethality was found between the 7th and 9th DPI. Viable tachyzoites were recovered from peritoneal exudate of dead mice (except for the control group), with higher mean of tachyzoite counts in the intraperitoneal lavage for 5% DMSO (±3.32 x 106), 8% DMSO (±3.53 x 106), 3% glycerol (±4.75 x 106), 7.5% glycerol (±6.26 x 106) and the absence of cryoprotectant (±3.11 x 106). Seroconversion occurred in the treated groups, with titers of IgG from 1:16 to 1:128 and IgM from 1:16 to 1:512. T. gondii viability and infectivity were maintained in cattle semen during 24 hours of cryopreservation at -196°C with and without cryoprotectant. However, further studies are necessary to determine whether cryopreserved semen contributes to the spread of toxoplasmosis through artificial insemination.

RESUMO: Sabe-se que Toxoplasma gondii pode ser eliminado no sêmen bovino. A inseminação artificial em bovinos leiteiros e de corte proporcionou avanços e benefícios nas produções e para isso o sêmen criopreservado é frequentemente utilizado. No entanto, pouco se sabe sobre a viabilidade e infectividade dos taquizoítos de T. gondii em sêmen bovino criopreservado. Para isso o sêmen bovino, negativo para T. gondii, foi contaminado com 1x106 taquizoítos (cepa RH), criopreservados com ou sem diferentes crioprotetores como DMSO (2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% e 10.0%) e Glicerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% e 10.0%) e congelados em nitrogênio líquido (-196°C). Após 24 horas, essas amostras foram descongeladas e inoculadas em 10 camundongos por diluente de concentração de crioprotetor. Os camundongos foram avaliados quanto a sinais clínicos de toxoplasmose (pele áspera, diarreia, hipoatividade e morte súbita), títulos séricos de IgM e IgG e presença de taquizoítos no lavado peritoneal. Os resultados mostraram que T. gondii se manteve infectante em todas as amostras, inclusive naquelas sem crioprotetor. Sinais clínicos de toxoplasmose foram observados nos camundongos a partir do 6º dia pós-inoculação (DPI) e 100% de letalidade foi verificada entre o 7º ao 9º DPI. Nos camundongos mortos, exceto no grupo controle, taquizoítos viáveis foram recuperados do exsudato peritoneal, com maior média de taquizoítos quantificados na lavagem intraperitoneal para DMSO a 5% (±3.32x106), 8% (±3.53x106) e glicerol 3% (±4.75x106), 7,5% (±6.26x106) e livre de crioprotetor (±3.11x106). A soroconversão ocorreu nos grupos tratados com títulos de IgG (1:16 a 1:128) e IgM (1:16 a 1:512). A viabilidade e infectividade do T. gondii no sêmen bovino durante as 24 horas de criopreservação a -196°C foram mantidas com ou sem crioprotetor. No entanto, mais estudos são necessários para verificar se o sêmen criopreservado contribui para a disseminação da toxoplasmose na inseminação artificial.

Comparison of the alcohol content obtained in the fermentation of dwarf cavendish bananaand its peel for the purposes of brandy production / Comparação do teor alcóolico obtido na fermentação de banana nanica e de sua casca para fins de produção de aguardente

Brandy is one of the most consumed alcoholic beverages in Brazil, being produced with sweet vegetables, cereals, sugar cane and fruits that have fermentable sugars. This drink is confused with cachaça, from which it is distinguished by the alcoholic degree and typically Brazilian productivity. Banana stands out in Brazil and in the world as the second fruit in productivity, behind only orange, being an accessible raw material for the production of brandy. This processing is advantageous due to the rapid ripening of this fruit, which can often make it impossible to fresh to the consumer. This study aimed to carry out the fermentation through the inoculation of the yeast Saccharomyces cerevisiaeseparately for pulp and skins of Dwarf Cavendish bananas to verify the alcohol content produced. The banana pulp brandy reached an alcohol content of 39,5° GL, within the stipulated by the current legislation, the peel, however, did not allow adequate alcohol levels (7,5° GL). It is concluded that the pulp of Dwarf Cavendish banana is viable for the production of brandy.(AU)

A aguardente é uma das bebidasalcoólicasmais consumidasno Brasil, sendo produzida comvegetais doces, cereais, cana-de-açúcar e frutas que possuemaçúcares fermentescíveis. Esta bebida é confundida com a cachaça, da qual é diferenciadapelo grau alcoólicoe produtividade tipicamente brasileira. Abanana possui destaque no Brasil e no mundo como a segunda fruta em produtividade,atrás apenas da laranja, sendo uma matéria-prima acessível para a produção de aguardenteem razão do processo de amadurecimento rápido,o que acaba muitas vezes por inviabilizar a venda in naturapara o consumidor. Este estudo objetivou realizar a fermentação através da inoculação da levedura Saccharomyces cerevisiaeseparadamente para mostosdapolpa e cascas de bananas nanicapara verificar o teor alcóolico produzido. A aguardente de polpa de bananaatingiu teor alcoólicode 39,5° GL, dentro do estipulado pela legislação vigente, a casca, contudo, não permitiuníveis alcóolicos adequados(7,5°GL). Conclui-se que a polpa da banana nanica é viável para a produção de aguardente.(AU)

Impact of yeast on the characteristics of Sauvignon Blanc wines from the Campanha Gaúcha Region / Impacto de leveduras nas características de vinhos Sauvignon Blanc da Região da Campanha Gaúcha

The objective of this work was to evaluate the effect of different commercial strains of Saccharomyces cerevisiae on the characteristics of Sauvignon Blanc wines produced in the Campanha Gaúcha region. The must obtained by mechanical destemming and crushing was treated with 150 mg L of potassium metabisulfite and pectolitic enzymes and subject to enzymatic hidrolisis and débourbage for 24h00 at 4°C. The must was divided into glass fermenters of 4,6 L, in triplicate for each of the four treatments, which were defined by the inoculation of 25g hL-1 of dry yeast: T1 - Zymaflore X5® (Laffort, Bordeaux, France); T2 - AWRI 796 (AB Biotek, Sydney, Australia); T3 - Maurivim PDM (AB Biotek, Sydney, Australia); T4 - 50% Zymaflore X5® + 50% AWRI 796. The wines were analyzed, regarding: ethanol; reducing sugars; total acidity; volatile acidity; pH; dry matter; and ash. The most significant differences were observed in: ethanol; reducing sugars; pH; dry matter. Among the treatments inoculated with single strains, T1 showed higher ethanol and lower reducing sugars content. T3 presented results similar to T1. T2 resulted in higher content of reducing sugars and consequently lower ethanol levels. The mixed fermentation (T4) achieved the lowest levels of reducing sugars among the treatments. It suggests that mixed fermentations could be an alternative to produce drier wines.(AU)

O objetivo do trabalho foi avaliar o efeito de leveduras Saccharomyces cerevisiae comerciais nas características de vinhos Sauvignon Blanc, da região da Campanha Gaúcha, Brasil. Após desengace e esmagamento das uvas, o mosto foi sulfitado (150 mg L de metabissulfito de potássio), submetido a 24h00 de débourbage. Após, o mosto foi dividido em garrafões de vidro de 4,6 L, para realização da fermentação alcoólica, em triplicata. Os tratamentos constituíram-se pela inoculação de 25 g hL-1leveduras desidratadas: T1 - Zymaflore X5® (Laffort, Bordeaux, França); T2 - AWRI 796® (AB Biotek, Sydney, Austrália); T3 - Maurivin PDM® (AB Biotek, Sydney, Austrália), T4 - 50% Zymaflore X5® + 50% de AWRI 796®. As variáveis analisadas nos vinhos foram: etanol; açúcares redutores; acidez total; acidez volátil; pH; extrato seco; cinzas. As diferenças mais significativas foram observadas para: etanol; açúcares redutores; pH; extrato seco. Dentre os tratamentos com inoculação de cepas únicas, T1 apresentou maior graduação alcoólica e baixo teor de açúcares redutores. T3 apresentou resultados semelhantes a T1. T2 apresentou menor graduação alcoólica e maior teor de açúcares redutores. T4 apresentou os níveis mais baixos de açúcares redutores dentre os tratamentos. Isso sugere que a inoculação de mais de uma cepa pode ser uma alternativa para produzir vinhos mais secos.(AU)

Comparative study of symbiotic activity of legumes when using Risotorphin and Epin-extra / Estudo comparativo da atividade simbiótica de leguminosas em uso de Risotorfina e Epin-extra

In a vegetation experiment with soybean plants of the Svapa and Mageva varieties and in a field experiment with bean plants of the Geliada and Shokoladnitsa varieties, we studied the effect of pre-sowing treatment of the seeds of these plants with Rizotorfin and Epin-extra on the nitrogenase activity of the nodules of these plants and their ultrastructure. Analysis of the ultrastructure of the nodule tissue of beans and soybeans was carried out in the flowering phase. It was found that the highest indices of the mass and number of nodules and the activity of nitrogenase in them were found in bean plants of the Heliada cultivar when the seeds were treated with Epin-extra against the background of inoculation with Rizotorfin, where the largest area of symbiosomes, volutin and their number was noted in the nodules. Beans of the Shokoladnitsa variety showed the protective effect of Rizotorfin. In the nodules of soybean plants of the Svapa variety, the seeds of which were treated with Epin-extra against the background of inoculation with Rizotorfin, the presence of a large number of symbiosomes, bacteroids, volutin inclusions with a larger area and a minimum number of inclusions of poly-ß-hydroxybutyric acid (PHB) was noted, and the highest indicators of symbiotic activity. Soybean plants of the Mageva variety showed the protective effect of Rizotorfin. The efficiency of the symbiotic system was determined by the number and weight of nodules and the activity of the nitrogenase enzyme.

Em um experimento de vegetação com plantas de soja das variedades Svapa e Mageva e em um experimento de campo com plantas de feijão das variedades Geliada e Shokoladnitsa, o efeito do tratamento pré-semeadura das sementes dessas plantas com Rizotorfin e Epin-extra sobre a atividade nitrogenase dos nódulos dessas plantas e sua ultraestrutura foi examinado. A análise da ultraestrutura do tecido do nódulo de feijão e soja foi realizada na fase de floração. Dessa forma, constatou-se que os maiores índices de massa, número de nódulos e a atividade da nitrogenase foram encontrados em plantas de feijão da cultivar Heliada quando as sementes foram tratadas com Epin-extra no contexto da inoculação com Rizotorfina, em que o maior área de simbiossomas, volutina e seu número foi anotado nos nódulos. O feijão da variedade Shokoladnitsa mostrou o efeito protetor do Rizotorfin. Nos nódulos de plantas de soja da variedade Svapa, cujas sementes foram tratadas com Epin-extra no contexto da inoculação com Rizotorfin, a presença de um grande número de simbiossomas, bacteróides, inclusões de volutina com uma área maior e um número mínimo de inclusões de ácido poli-ß-hidroxibutírico (PHB) foi notado, bem como os indicadores mais altos de atividade simbiótica. As plantas de soja da variedade Mageva apresentaram o efeito protetor do Rizotorfin. A eficiência do sistema simbiótico foi determinada pelo número e peso dos nódulos e pela atividade da enzima nitrogenase.

Inhibition of mycelial growth, conidial germination, and Botrytis cinerea Pers: Fr colonization in begonia with biocompatible products

This study evaluated the effects of potassium and sodium carbonate and bicarbonate, Bacillus subtilis (Cohn, 1872) QST-713, Bacillus pumilus (Meyer & Gottheil, 1901) QST-2808, and crude and roasted coffee oils on the inhibition of mycelial growth and conidial germination in Botrytis cinerea Pers.: Fr and the colonization of begonia (Begonia elatior Hort. ex Steud) leaf discs by B. cinerea inoculated before, simultaneously and after with these alternative products. The assays were carried out using the Baladin begonia cultivar. The inhibition of B. cinerea mycelial growth and conidial germination was proportional to increases in the concentration of all the products. The inhibition of conidial germination was directly proportional to the concentrations of B. pumilus QST-2808 and B. subtilis QST-713. Coffee oils were less efficient in inhibiting germination than the other products. The crude and roasted coffee oils, potassium and sodium carbonates and bicarbonates, and B. pumilus and B. subtilis sprayed 24 h before, simultaneously, or 24 h after pathogen inoculation inhibited the colonization of begonia leaf discs by B. cinerea. The positive results for the suppression of B. cinerea by the alternative products tested herein merit scrutiny. There is a pressing need to evaluate these products in the management of gray mold, as the severity of this disease is usually high under favorable conditions in greenhouses.

Inoculation of corn seeds with Azospirillum brasilense in different temperatures

Growth-promoting bacteria Azospirillum brasilense, used as an inoculant in corn culture, can be severely affected by the exposure temperature, with a lethal effect above 35°C, when cultivated alone under laboratory conditions. Such effects may limit the associative interaction between plant-bacteria, with reduced inoculation efficiency, resulting in a lower growth rate of the plant and an increase in oxidative stress. Thus, the objective of the research was to evaluate the efficiency of the inoculation process with A. brasilense in seeds and in the initial growth of seedlings of two corn cultivars submitted to different temperatures. Were utilized corn hybrids seed Syn 488 and Syn 505. The experimental design was completely randomized in a 2 x 4 factorial scheme (with and without inoculation of A. brasilense x 4 sowing temperatures: 20, 25, 30, and 35ºC), with four replications. The inoculation efficiency in corn seedlings submitted to different temperatures was evaluated through the following tests: germination, first count, seedling length and dry weight. In addition, responses at the biochemical level of the interaction (temperatures x inoculation) for the content of photosynthetic pigments and hydrogen peroxide (H2O2), antioxidant enzymes and lipid peroxidation were evaluated. The inoculation with A. brasilense changed the morphological and biochemical responses of corn seedlings, and the inoculation process was efficient for all temperatures tested. The best results were under temperatures 25, 30, and 35°C. Plant and bacteria when exposed to temperature conditions (30°C inoculated) showed a significant increase in plant biomass and activity of antioxidant enzymes.(AU)

ISOLATION AND AMPLIFICATION OF Anaplasma marginale IN CHICKEN EMBRYO FIBROBLAST CELL CULTURE / ISOLATION AND AMPLIFICATION OF Anaplasma marginale IN CHICKEN EMBRYO FIBROBLAST CELL CULTURE

Anaplasma marginale is an important agent for animal livestock, its presence in herds of cattle, sheep and goats leads to losses for Brazilian agribusiness. The present study aimed to describe an isolation technique for A. marginale, using chicken embryo fibroblast (CEF) cell culture. For this, blood and tick samples were collected from 5 calves, between 2 and 3 months of age, which due to anemia, jaundiced mucous membranes and prostration, were considered supposedly infected with A.marginale. For the diagnosis, DNA extraction and PCR was performed from the blood and tick samples collected. All the tick and blood samples were positive in the PCR test. Additionally, ticks were crushed with the aid of a blender for inoculation in CEF cell culture. After inoculation, the cultures were kept at 37ºC and 5% CO2 for 15 days. The cell supernatant of cell cultures were again analyzed by PCR and by the technique Wrighte stain to confirm A. marginale isolation. Cell cultures were positive in PCR and the presence of the agent was demonstrated by Wrighte stain. Therefore, using CEF cell culture was possible to isolate and amplify the A. marginale in a concentration of 1.3 x 107.2 bodies per ml. The CEF cells are undemanding, easy to maintain and they are an option for isolation and production of A. marginale in the laboratory condition.

Anaplasma marginale (A. marginale) is a worldwide pathogen that infects a variety ofruminants, but mostly cattle. The present study aimed to describe an isolation technique for A. marginale, using chicken embryo Þ broblast (CEF) cell culture. Blood and tick samples were collected from 5 calves from 2 to 3 months old, which were considered to be infected with A.marginale due to anemia, jaundiced mucous membranes, and prostration. DNA extractionand PCR were performed for diagnosis using blood and tick samples. All tick and blood samples tested positive in PCR. Additionally,ticks were crushed with the aid of a blender for inoculation in CEF cell culture. After inoculation, the cultures were kept at 37ºC and 5%CO2 for 15 days. The cell supernatant of cell cultures was again analyzed using PCR and Wright stain method to conÞ rm A. marginaleisolation. Cell cultures tested positive in PCR, and the presence of the agent was demonstrated by Wright stain. Therefore, by using CEFcell culture it was possible to isolate and amplify the A. marginale in a concentration of 1.3x 107.2 bodies per mL. The CEF cells are undemanding and easy to preserve; they are anoption for isolation and production of A. marginale under laboratory conditions.

Wooden sticks for plaque streaking and microbiological inoculation might be more cost- effective, but is its large scale use feasible? Quality control methods and proof of concept

Abstract The loop is a material classically used in the laboratory for the purpose of plate streaking and handling biological materials. However, metal loops techniques might be time consuming, considering the amount of time spent to guarantee its cooling process through each inoculation. Furthermore, plastic loops may also represent environmental issues during its production and discard process and can also represent higher costs for the laboratory. Thus, in situations of limited resources, even the simplest materials can be restricted due to logistical and budgetary issues, especially in developing countries. Inspired by demands like these, facing an occasional shortage of supply of laboratory plastic handles, we hereby present a quality control for sterilization methods and cost-effectiveness studies towards the use of wooden sticks in a Latin American country and we discuss the possibility of the large-scale use of this technique.

Resumo A alça calibrada é um material usado classicamente em laboratório para fins de inoculação em placas e manuseio de materiais biológicos. No entanto, as técnicas de alças metálicas podem consumir muito tempo, considerando a quantidade de tempo gasto para garantir seu processo de resfriamento a cada inoculação. Além disso, alças de plástico também podem representar questões ambientais durante o processo de produção e descarte e também podem representar custos mais altos para o laboratório. Assim, em situações de recursos limitados, até os materiais mais simples podem ser restringidos devido a questões logísticas e orçamentárias, especialmente nos países em desenvolvimento. Inspirados por demandas como essas, diante de uma escassez ocasional de suprimentos de alças de plástico de laboratório, apresentamos um controle de qualidade para métodos de esterilização e estudos de custo-efetividade para o uso de varas de madeira em um país latino-americano e discutimos a possibilidade de grande uso em escala dessa técnica.