Behavioral and physiological performance of different gilt breeds during lactation

We evaluated the maternal behavior, physiology, and reproductive performance of both Damin (Min-pig × Large White) and Large White gilts to identify the advantages hybrid sows offer with regard to stress relieve and improvement of the welfare level of sows during late lactation. First-parity Damin gilts (n = 40) and firstparity Large White gilts (n = 40) were farrowed in individual pens. Video surveillance was used to monitor the occurrence of lateral recumbency and compare it to other postures, such as ventral recumbency, defecation, urination, tail posture, sham-chewing, and bar-biting behaviors. Monitoring was conducted from 07:00 to 09:00 h and from 13:00 to 15:00 h on days 3 and 6 of each week from the third to the fifth week postparturition. In addition, the concentrations of tumor necrosis factor-α, interleukin-6, and salivary α-amylase were assessed. During the fourth week postpartum, Damin gilts showed a higher frequency of postural changes from lateral recumbency to other postures and less ventral recumbency, sham-chewing, and bar-biting behavior compared with Large White gilts. However, no significant differences were found between Damin and Large White gilts with regard to urination, defecation, tail wagging, and "tail low" behaviors. The concentrations of serum interleukin-6, salivary α-amylase, and serum tumor necrosis factor-α were higher in Damin gilts than in Large White gilts during the fifth week postpartum. Damin gilts partly achieve lower stress levels during late lactation and better animal welfare than purebred Large White gilts.(AU)

Serum levels of soluble interleukin-2 receptor (sIL-2R) and cancer antigen 125 (CA 125) in dogs diagnosed with cutaneous lymphoma / [Níveis séricos do receptor solúvel de interleucina-2 (sIL-2R) e antígeno do câncer 125 (CA 125) em cães diagnosticados com linfoma cutâneo]

Marcadores sorológicos são rotineiramente utilizados na prática clínica para o estadiamento de linfomas e para a determinação de seu prognóstico em humanos. No entanto, pouco se sabe sobre sua utilização em cães, mesmo os linfomas sendo neoplasias com alta prevalência nessa espécie. No presente estudo, as concentrações séricas do receptor solúvel de interleucina-2 (sIL-2R) e do antígeno do câncer 125 (CA 125) foram mensurados em 10 cães saudáveis e em 15 cães com linfoma cutâneo, utilizando-se o kit ELISA canino e a leitura em um Stat Fax modelo 2100 (sIL-2R), bem como o kit ELISA humano e a leitura pelo ELISYS UNO humano (CA 125). Os resultados mostraram que não houve diferença significativa (P<0,05) nas concentrações dos marcadores entre os grupos. Além disso, os resultados não apontaram significância clínica no estadiamento tumoral e estabelecimento do prognóstico em cães diagnosticados com linfoma cutâneo.(AU)

Light-emitting diode stimulates radiodermatitis recovery

Purpose To evaluate the effect of light-emitting diode (LED) in an experimental model of radiodermatitis. Methods Ten male Wistar rats weighing 200250 g were analyzed. Radiation was delivered in a single dose (20 Gy with Strontium-90 dermatological plaques), two areas per animal. After 15 days, they were divided into two groups: control group (n = 5) and LED group (n = 5), which was treated during 21 days later (LED 660 nm, 10 min in alternate days). The endpoints were radiodermatitis scale, histological analysis HE, Picrius Sirius and the gene expression of interleukin-10 (IL-10) and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9). Results The LED group showed a higher number of dermal appendages (p = 0.04) and angiogenesis(p = 0.007), a tendency towards higher IL-10 (p = 0.06) and an increase in MMP-9 (p = 0.004) when compared to the control group. Conclusions This study suggested that the use of LED for radiodermatitis increased skin regeneration.(AU)

Parecoxib mitigates lung ischemia-reperfusion injury in rats by reducing oxidative stress and inflammation and up-regulating HO-1 expression

ABSTRACT Purpose: To investigate the protective effect of parecoxib against lung ischemia-reperfusion injury (LIRI) in rats and the mechanism. Methods: Thirty rats were divided into sham-operated, LIRI and LIRI+parecoxib groups. LIRI model (ischemia for 60 min, followed by reperfusion for 120 min) was constructed in LIRI and LIRI+parecoxib groups. In LIRI+parecoxib group, 10 mg/kg parecoxib was given via femoral vein 15 min before ischemia beginning. At the end of the reperfusion, blood gas analysis, lung wet to dry mass ratio measurement, lung tissue biochemical determination and heme oxygenase-1 (HO-1) protein expression determination were performed. Results: Compared with LIRI group, in LIRI+parecoxib group the oxygenation index was significantly increased, the alveolar-arterial oxygen partial pressure difference was significantly decreased, the lung wet to dry mass ratio was significantly decreased, the lung tissue malondialdehyde content was significantly decreased, the lung tissue superoxide dismutase and myeloperoxidase activities were significantly increased, the lung tissue tumor necrosis factor α and interleukin 1β levels were significantly decreased, and the lung tissue HO-1 protein expression level was significantly increased (all P < 0.05). Conclusions: Parecoxib pretreatment can mitigate the LIRI in rats by reducing oxidative stress, inhibiting inflammatory response and up-regulating HO-1 expression in lung tissue.

Preconditioning with L-Ala-Gln reduces the expression of inflammatory markers (TNF-alpha, NF-kbeta, IL-6 and HO-1) in an injury animal model of cerebrovascular ischemia in Meriones unguiculatus (gerbils)

Purpose. To evaluate the neuroprotective effect of L-alanyl-glutamine in a gerbil model of brain ischemia-reperfusion injury based on immunohistochemical quantification of pro-inflammatory and cell activation biomarkers (TNF-α, NF-κB, IL-6 and HO-1).. Methods. Male gerbils weighing 100-180 g were pretreated with either 0.75 g/kg L-Ala-Gln (n=18) or 2.0 mL saline (n=18) administered i.v. 30 minutes before the bilateral ligation of the common carotid artery during 15 min and then the ligation was removed. Under anesthesia with urethane, brain tissue was harvested at 0 min (T0), 30 min (T30) and 60 min (T60) after reperfusion. The tissue was embedded in 10% formalin overnight and 4-μm sections were prepared for immunostaining with monoclonal antibodies. Immunostained cells were counted by optical microscopy. The statistical analysis used mean values based on 4 sections.. Results. The pretreatment with L-Ala-Gln animal group 1 demonstrated significantly lower levels of TNF-α, NF-κB and IL-6. On the other hand, the levels of HO-1 were significantly higher, suggesting a protective role in model of brain ischemia-reperfusion injury.. Conclusion. These findings suggest a protective effect of L-Ala-Gln by decreasing levels of TNF-alpha, IL-6 and NF-κB and Increasing levels of HO-1.(AU)

Efeito do hipotireoidismo materno na expressão espaço-temporal de mediadores imunológicos e população de células natural killers na decídua e na glândula metrial de ratas / Effect of maternal hypothyroidism on the spatiotemporal expression of immunological mediators and population of Natural Killers cells in decidua and metrial gland of rats

Estudou-se o efeito do hipotireoidismo materno na expressão espaço-temporal de mediadores imunológicos e na população de células natural killers (NK) na decídua e na glândula metrial de ratas durante a gestação. Avaliou-se a detecção imunoistoquímica de interferon γ (IFNγ), do fator inibidor de migração (MIF), da interleucina 15 (IL15), do óxido nítrico sintase induzível (iNOS), a marcação com lectina DBA para evidenciação das células NK uterinas DBA+ e a expressão gênica de Ifnγ e Nos2. O hipotireoidismo aumentou o iNOS aos sete dias, a IL15 e o MIF aos 10 e 12 dias, o IFNγ e o MIF aos 14 DG e a expressão dos transcritos gênicos para iNos aos 12 e 19 dias e para Ifnγ aos 14 DG. O hipotireoidismo reduziu a imunomarcação de MIF e lectina DBA aos sete dias, lectina DBA aos 10 e 14 DG, IFNγ aos 12 dias, e a expressão de Ifnγ aos 10 e 19 DG e de iNOS aos 12, 14 e 19 DG, bem como reduziu seus transcritos gênicos aos 10 e 14 DG. Conclui-se que o hipotireoidismo compromete o perfil imunológico na interface materno-fetal ao longo da gestação, particularmente por reduzir o fator anti-inflamatório iNOS e a população de células uNK DBA+.(AU)

The goal of this study was to evaluate the effect of maternal hypothyroidism on the spatiotemporal expression of immunological mediators and population of Natural Killers cells in decidua and metrial gland of rats. Interferon gamma (IFNγ), migration inhibitory factor (MIF), interleukin 15 (IL15), inducible nitric oxide synthase (iNOS), and DBA-Lectin labeling for evidence of uNK DBA+ cells in decidua and genetic expression of Ifnγ and iNos by real-time RT-PCR were evaluated. Hypothyroidism increased protein expression of iNOS at 7 days, IL15 and MIF at 10 and 12 days, IFNγ and MIF at 14 DG in the decidua and/or metrial gland and the gene transcripts for iNOS at 12 and 19 days and for Inf at 14 DG. In addition, hypothyroidism reduced the protein expression of MIF and DBA-Lectin at 7 days, DBA-Lectin at 10 and 14 DG, IFNγ at 12 days, and the gene transcript to Ifnγ at 10 and 19 DGs. Hypothyroidism also reduced the protein expression of iNOS at 12, 14 and 19 DG and reduced its gene transcripts at 10 and 14 DGs. It is concluded that hypothyroidism compromises the immunology profile at the maternal-fetal interface throughout pregnancy, particularly by reducing the anti-inflammatory factor iNOS and population of uNK DBA+ cells.(AU)

Efeito do hipotireoidismo materno na expressão espaço-temporal de mediadores imunológicos e população de células natural killers na decídua e na glândula metrial de ratas / Effect of maternal hypothyroidism on the spatiotemporal expression of immunological mediators and population of Natural Killers cells in decidua and metrial gland of rats

Estudou-se o efeito do hipotireoidismo materno na expressão espaço-temporal de mediadores imunológicos e na população de células natural killers (NK) na decídua e na glândula metrial de ratas durante a gestação. Avaliou-se a detecção imunoistoquímica de interferon γ (IFNγ), do fator inibidor de migração (MIF), da interleucina 15 (IL15), do óxido nítrico sintase induzível (iNOS), a marcação com lectina DBA para evidenciação das células NK uterinas DBA+ e a expressão gênica de Ifnγ e Nos2. O hipotireoidismo aumentou o iNOS aos sete dias, a IL15 e o MIF aos 10 e 12 dias, o IFNγ e o MIF aos 14 DG e a expressão dos transcritos gênicos para iNos aos 12 e 19 dias e para Ifnγ aos 14 DG. O hipotireoidismo reduziu a imunomarcação de MIF e lectina DBA aos sete dias, lectina DBA aos 10 e 14 DG, IFNγ aos 12 dias, e a expressão de Ifnγ aos 10 e 19 DG e de iNOS aos 12, 14 e 19 DG, bem como reduziu seus transcritos gênicos aos 10 e 14 DG. Conclui-se que o hipotireoidismo compromete o perfil imunológico na interface materno-fetal ao longo da gestação, particularmente por reduzir o fator anti-inflamatório iNOS e a população de células uNK DBA+.(AU)

The goal of this study was to evaluate the effect of maternal hypothyroidism on the spatiotemporal expression of immunological mediators and population of Natural Killers cells in decidua and metrial gland of rats. Interferon gamma (IFNγ), migration inhibitory factor (MIF), interleukin 15 (IL15), inducible nitric oxide synthase (iNOS), and DBA-Lectin labeling for evidence of uNK DBA+ cells in decidua and genetic expression of Ifnγ and iNos by real-time RT-PCR were evaluated. Hypothyroidism increased protein expression of iNOS at 7 days, IL15 and MIF at 10 and 12 days, IFNγ and MIF at 14 DG in the decidua and/or metrial gland and the gene transcripts for iNOS at 12 and 19 days and for Inf at 14 DG. In addition, hypothyroidism reduced the protein expression of MIF and DBA-Lectin at 7 days, DBA-Lectin at 10 and 14 DG, IFNγ at 12 days, and the gene transcript to Ifnγ at 10 and 19 DGs. Hypothyroidism also reduced the protein expression of iNOS at 12, 14 and 19 DG and reduced its gene transcripts at 10 and 14 DGs. It is concluded that hypothyroidism compromises the immunology profile at the maternal-fetal interface throughout pregnancy, particularly by reducing the anti-inflammatory factor iNOS and population of uNK DBA+ cells.(AU)

Suppresses of Astragalus Polysaccharide on E. coli-Induced Injured Intestinal Microvascular through TLR4-NF-B Signal Pathways in Chickens

To investigate the hypothesis that APS can attenuate E. coli-induced microvascular dysfunction in chicken intestine, 60 0-day old male chickens were divided into three groups with 5 replications of 4 chicks. Chicken in the APS group were treated with 15 mg APS daily while the others were given 0 mg APS for 6 days. Then all 7-day old chicken were injected intraperitoneally by E. coli, except for the chicken in the control group. After 4 h, all chickens intestinal samples were collected to detect gene expressions involved in inflammatory factors and adhesion molecules. Results showed that APS attenuated the signs of edema and hemorrhage in 7-day old chicken intestinal mucosa which were induced by E. coli injection. Consistently, APS significantly reduced the increasing mRNA levels of inflammatory factors such as Tumor necrosis factor-a (TNF-a), interleukin (IL) -1 and inducible nitric oxide synthase (iNOS) (p 0.05), the same results were observed in vascular adhesion molecules such as E-selectin, intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1). Moreover, we observed that APS supplementation in water suppressed significantly (p 0.05) the decline of reparative factors such as epithelial growth factor (EGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) in E. coli injected group. Furthermore, supplementation with APS substantially blocked (p 0.05) the increase in Toll-like receptor-4 (TLR4) and Nuclear factor (NF)-B mRNA abundance (p=0.087) induced by E. coli infection. This study indicated that microvascular injured chicken intestine induced by E. coli would be attenuated with feeding APS, and the mechanism of repairing were probably mediated through TLR4-NF-B signal pathways.(AU)

Suppresses of Astragalus Polysaccharide on E. coli-Induced Injured Intestinal Microvascular through TLR4-NF-B Signal Pathways in Chickens

To investigate the hypothesis that APS can attenuate E. coli-induced microvascular dysfunction in chicken intestine, 60 0-day old male chickens were divided into three groups with 5 replications of 4 chicks. Chicken in the APS group were treated with 15 mg APS daily while the others were given 0 mg APS for 6 days. Then all 7-day old chicken were injected intraperitoneally by E. coli, except for the chicken in the control group. After 4 h, all chickens intestinal samples were collected to detect gene expressions involved in inflammatory factors and adhesion molecules. Results showed that APS attenuated the signs of edema and hemorrhage in 7-day old chicken intestinal mucosa which were induced by E. coli injection. Consistently, APS significantly reduced the increasing mRNA levels of inflammatory factors such as Tumor necrosis factor-a (TNF-a), interleukin (IL) -1 and inducible nitric oxide synthase (iNOS) (p 0.05), the same results were observed in vascular adhesion molecules such as E-selectin, intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1). Moreover, we observed that APS supplementation in water suppressed significantly (p 0.05) the decline of reparative factors such as epithelial growth factor (EGF) and basic fibroblast growth factor (bFGF) in E. coli injected group. Furthermore, supplementation with APS substantially blocked (p 0.05) the increase in Toll-like receptor-4 (TLR4) and Nuclear factor (NF)-B mRNA abundance (p=0.087) induced by E. coli infection. This study indicated that microvascular injured chicken intestine induced by E. coli would be attenuated with feeding APS, and the mechanism of repairing were probably mediated through TLR4-NF-B signal pathways.

Campylobacter Jejuni Increases Transcribed Il-1 B and Causes Morphometric Changes in the Ileal Enterocytes of Chickens

Campylobacteriosis is a worldwide foodborne zoonosis disease caused by Campylobacter jejuni. This microorganism is considered a commensal bacterium in chicken hosts. C. jejuni produces epithelial cell modifications and induces a cytokine gene transcription innate immunity repertoire. In the present study, we describe the invasiveness, morphological cellular modifications, and transcript level expressions of innate immune cytokines from C. jejuni-inoculated chicken ileum explants. C. jejuni was internalized by epithelial ileum cells at 15 minutes postinoculation (p.i.) and was detected intracellularly for 4hs (p.i.). Inoculated explants displayed significant increases in cell height. C. jejuni induced a significant elevation of Transforming Growth Factor Beta 3 (TGF-b3) and Interleukin-1b (IL-1b) transcripts. In conclusion, C. jejuni is internalized in explanted epithelial ileum cells, produces morphological cell modifications, and induces gene transcription of both anti-inflammatory and pro-inflammatory cytokines.

Campylobacter Jejuni Increases Transcribed Il-1 B and Causes Morphometric Changes in the Ileal Enterocytes of Chickens

Campylobacteriosis is a worldwide foodborne zoonosis disease caused by Campylobacter jejuni. This microorganism is considered a commensal bacterium in chicken hosts. C. jejuni produces epithelial cell modifications and induces a cytokine gene transcription innate immunity repertoire. In the present study, we describe the invasiveness, morphological cellular modifications, and transcript level expressions of innate immune cytokines from C. jejuni-inoculated chicken ileum explants. C. jejuni was internalized by epithelial ileum cells at 15 minutes postinoculation (p.i.) and was detected intracellularly for 4hs (p.i.). Inoculated explants displayed significant increases in cell height. C. jejuni induced a significant elevation of Transforming Growth Factor Beta 3 (TGF-b3) and Interleukin-1b (IL-1b) transcripts. In conclusion, C. jejuni is internalized in explanted epithelial ileum cells, produces morphological cell modifications, and induces gene transcription of both anti-inflammatory and pro-inflammatory cytokines.(AU)

PROBIOTICS FOR BROILERS EXPOSED TO HEAT STRESS FROM 15 DAYS OF AGE

O setor avícola demanda aditivos alternativos à antibióticos que possam ser utilizados como melhoradores de desempenho. Portanto, um experimento foi conduzido para avaliar os efeitos de probióticos sobre o desempenho, saúde intestinal e status redox de frangos de corte expostos a estresse por calor a partir dos 15 dias de idade. Foram utilizados 720 frangos Cobb-500 distribuídos em oito tratamentos (dietas), avaliados em seis repetições de 15 frangos cada, sendo: dieta basal (DB) sem antibiótico e probiótico (T1); DB suplementada com bacitracina de zinco (T2), DB suplementada com probiótico comercial de Bacillus subtilis DSM 17299 (T3); DB suplementada com probióticos não-comerciais de Lactococcus lactis NCDO 2118, Lactobacillus delbrueckii CNRZ 327, Escherichia coli CEC15 ou Saccharomyces boulardii (T4, T5, T6 e T7, respectivamente) e DB suplementada com a associação dos quatro probióticos não-comerciais (T8). O consumo de ração (CR), ganho de peso (GP) e conversão alimentar (CA) foram determinados no período de 1 a 42 dias de idade dos frangos. Aos 42 dias de idade avaliou-se: rendimento de carcaça e cortes, deposição de gordura abdominal, temperatura cloacal, peso e comprimento do intestino, atividade das enzimas mieloperoxidase e peroxidase eosinofílica no jejuno, histomorfometria do jejuno, expressão gênica no jejuno (ocludina, zonulina, interleucina-8, colecistoquinina, grelina e proteína de choque térmico-70) e fígado (proteína de choque térmico-70), além da mensuração do teor de malondialdeído (MDA) e atividade da superóxido dismutase (SOD) no intestino, fígado e sangue. Os frangos alimentados com a dieta T1 exibiram menor (P < 0,05) GP e peso vivo ao abate, além de pior CA (P < 0,05). Entretanto, as dietas contendo um ou o blend de probióticos resultaram em melhor GP, CA e peso vivo ao abate, semelhante ao observado para os frangos do grupo T2. A maior (P < 0,05) temperatura cloacal foi determinada nos frangos do grupo T6. Houve maior produção (P < 0,05) de MDA no fígado dos frangos dos grupos T1 e T7 e menor (P < 0,05) no grupo T3. No sangue, o teor de MDA foi maior (P < 0,05) nos frangos do T4 e menor (P < 0,05) no grupo T5. A dieta T8 resultou em maior (P < 0,05) atividade sérica da SOD, enquanto que as dietas T1 e T5 resultaram em menor (P < 0,05). Não houve efeito (P > 0,05) das dietas experimentais para os demais parâmetros avaliados. Conclui-se que frangos de corte desafiados por estresse por calor a partir dos 15 dias de idade e alimentados com dieta basal sem antibiótico e probiótico exibem pior desempenho. Entretanto, todos os probióticos não- comerciais avaliados, suplementados isoladamente ou como blend, mostraram-se eficientes em melhorar o desempenho dos frangos em magnitude semelhante ao observado quando a dieta contém o antibiótico bacitracina de zinco ou o probiótico comercial Bacillus subtilis DSM17299.

The poultry sector demands alternative additives to antibiotics that can be used as performance enhancers. Therefore, an experiment was conducted to evaluate the effects of probiotics on performance, intestinal health and redox status of broilers exposed to heat stress from 15 days of age. A total of 720 Cobb-500 broilers were distributed in eight treatments (diets), evaluated in six replicates of 15 broilers, as follows: basal diet (BD) without antibiotic and probiotic (T1); BD supplemented with zinc bacitracin (T2), BD supplemented with a commercial probiotic of Bacillus subtilis DSM 17299 (T3); BD supplemented with non-commercial probiotic of Lactococcus lactis NCDO 2118, Lactobacillus delbrueckii CNRZ 327, Escherichia coli CEC15 or Saccharomyces boulardii (T4, T5, T6 and T7, respectively), and BD supplemented with the association of the four non-commercial probiotics (T8). Feed intake (FI), weight gain (WG) and feed conversion (FC) were determined in the period from 1 to 42 days of age. Carcass and cuts yield, abdominal fat deposition, cloacal temperature, weight and length of intestine, activity of myeloperoxidase and eosinophilic peroxidase enzymes in the jejunum, jejunal histomorphometry, gene expression in the jejunum (occludin, zonulin, interleukin-8, cholecystokinin, ghrelin and heat shock protein-70) and liver (heat shock protein-70), in addition to malondialdehyde (MDA) level and superoxide dismutase (SOD) activity were measured in the intestine, liver and blood of broilers at 42 days old. Broilers fed diet T1 exhibited lower (P < 0.05) WG and live weight at slaughter, in addition to worse FC (P < 0.05). However, diets containing one or the probiotics blend resulted in better WG, FC and live weight at slaughter, similar to that observed for broilers of the T2 group. The highest (P < 0.05) cloacal temperature was determined in broilers of the T6 group. There was higher (P < 0.05) hepatic MDA concentration in the broilers of the T1 and T7 groups, and lower concentration (P < 0.05) in group T3. In blood, the MDA content was higher (P < 0.05) in the T4 group and lower (P < 0.05) in the T5 group. The T8 diet resulted in higher (P < 0.05) serum SOD activity, while diets T1 and T5 resulted in lower (P < 0.05). There was no effect (P > 0.05) of the experimental diets for the other evaluated parameters. It is concluded that broilers challenged by heat stress from 15 days of age and fed diet without antibiotic and probiotic exhibit worse performance. However, all non- commercial probiotics evaluated, supplemented alone or as a blend, were shown to be efficient in improving broiler performance in a similar magnitude to that observed when the diet contains the antibiotic zinc bacitracin or the commercial probiotic of Bacillus subtilis DSM17299.

Parâmetros metabólicos, inflamatórios e de saciedade de gatos obesos alimentados com dieta com adição de beta-glucanos

RISOLIA, L.W. Parâmetros metabólicos, inflamatórios e de saciedade de gatos obesos alimentados com dieta com adição de beta-glucanos. 2021. 104 f. Tese (Doutorado em Ciências) Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2021. Beta-glucanos são polissacarídeos que podem melhorar diversas alterações metabólicas e de saciedade consequentes à obesidade. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da inclusão de 0,06% de beta-glucanos na dieta de gatos obesos em parâmetros do metabolismo de carboidratos e lipídeos, indicadores de resistência insulínica, citocinas inflamatórias, parâmetros de saciedade e coeficiente de digestibilidade aparente (CDA) dos nutrientes. Nove gatos diagnosticados com obesidade não-induzida [(grupo obeso OB) escore de condição corporal (ECC) 8-9 /9] e nove gatos não obesos [(Grupo controle CO) ECC 5/9] foram alimentados por 15 dias (T0) com a dieta controle (0,0% de beta-glucanos) e depois por 90 dias (T90) com a dieta teste (0,06% de beta-glucanos). Amostras de sangue foram coletadas em T0 e T90 para avaliação do índice HOMA (insulina basal x glicemia basal/22,5), concentrações plasmáticas de triglicerídeos, colesterol e lipoproteínas (por método enzimático-colorimétrico e cromatografia líquida para separação rápida de proteínas FPLC), anandamida (por ELISA), frutosamina (por ensaio colorimétrico cinético), amilina, interleucina 10 (IL-10), grelina e peptídeo semelhante ao glucagon 1 (GLP-1) (por reação em cadeia de polimerase em tempo real quantitativo). A composição corporal também foi avaliada no início e final do estudo pelo método de diluição de isótopos de deutério. Foram utilizados sete gatos do centro de pesquisa para a determinação do CDA das dietas, pelo método de coleta total de fezes. Para avaliar a comparação entre os grupos e o efeito da dieta foi realizado teste de ANOVA com medidas repetidas no tempo. Quando houve diferença entre as médias foi realizado o teste de Tukey. Para a análise de consumo de beta-glucanos, digestibilidade e resultados da análise de expressão gênica, os dados foram analisados por análise de variância e, valores de P<0,05 foram considerados significativos. O grupo CO consumiu mais beta-glucanos do que o OB e em T90, foi observado aumento de massa muscular em CO e OB sem alteração da gordura corporal. Não houve diferença nas concentrações de frutosamina e anandamida entre os grupos antes e após o consumo da dieta Teste. O grupo OB apresentou maior concentração de colesterol e triglicerídeos em VLDL (%; mg/dL), maior índice HOMA e maior concentração de insulina do que o CO, independente da dieta. O grupo CO apresentou maior concentração de triglicérides em LDL (%; mg/dL) e em HDL (%), independente da dieta. Em T0, o grupo CO apresentou maior concentração de colesterol total (TCOL) do que o OB. Em T90, o grupo OB apresentou aumento de TCOL e em LDL (%; mg/dL) além de redução de colesterol em HDL. Não houve variação na expressão gênica de amilina, GLP-1, grelina e IL-10 entre os grupos. A inclusão de beta-glucano não alterou o CDA dos nutrientes após o consumo do alimento Teste pelos dois grupos. Concluise que com a dose utilizada no presente estudo, o consumo de beta-glucanos não proporciona melhora dos parâmetros do metabolismo de carboidratos, lipídeos, inflamação, saciedade e não altera o CDA dos nutrientes.

RISOLIA, L.W. Metabolic, inflammatory and satiety parameters of obese cats fed a diet with the addition of beta glucans. 2021. 104 f. Tese (Doutorado em Ciências) Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2020. Beta-glucans are polysaccharides capable of improving many satiety and metabolic alterations related to obesity. The aim of the present study was to evaluate the effects of the addition of 0.06% of beta-glucans in the diet of obese cats in parameters of carbohidrates and lipids metabolism, insuin resistance indicators, pro-inflamatory citokines, satiety parameters and nutrients aparent digestibility coefficient (ADC). For that, nine client owned cats with non induced obesity [(obese group - OB) body condition score (BCS) 8-9/9] and nine client owned lean cats [(Control Group - CO) BCS 5/9] were fed for 15 days (T0) with a control diet (0,0% of beta-glucans) and then for 90 days (T90) with a test diet (0.06% of beta-glucans). Blood samples were collected at T0 and T90 in order to evaluate the HOMA index (basal insulin x basal glucose/22.5), triglycerides, cholesterol and lipoproteins (through enzymatic - colorimetric method and fast protein liquid chromatography - FLPC), anandamide (through ELISA), fructosamine (through kinetic colorimetric assay), amylin, interleukin 10 (IL-10), ghrelin and glucagon-like peptide-1 (GLP-1) (through quantitative real time polymerase chain reaction). The body composition was also evaluated at the beginning and at the end of the study through deuterium isotope dilution technique. The ADC test was carried out with 7 cats from the research center through total feces collection. In order to evaluate the comparison between the groups, a repeated measures ANOVA test was performed. When differences between the averages occurred, the Tukey test was run. For the beta-glucans consumption, digestibility and gene expression results analysis, the data were analyzed through the variance analysis. The CO group consumed more beta-glucans than the OB and at T90 it was observed muscle mass (MM) gain in CO and OB without any change in body fat. There wasn't any difference in fructosamine and anandamide between the groups before and after the consumption of the experimental diet. The OB group presented more cholesterol and triglycerides in VLDL (%; mg/dL), HOMA index and insulin than in CO, regardless of the diet. The CO group presented more triglycerides in LDL (%; mg/dL) and in HDL (%), regardless of the diet. At T0, the CO group had more total cholesterol than the OB group. At T90, the OB group showed an increase in total and LDL cholesterol (%; mg/dL) in addition to a reduction in HDL cholesterol. There was no variation in amylin, GLP-1, ghrelin and IL-10, nor in the nutrient CDA after consumption of beta-glucans. It is concluded that with the dose used in this study, the consumption of beta-glucans does not improve the parameters of carbohydrate metabolism, lipids, inflammation, satiety and does not change the ADC of nutrients.

Suplementação dietética com -glucano potencializa a expressão de genes do sistema imune em tilápias-do-nilo vacinadas

A produção de peixes está crescendo mais a cada ano e com isso surgem problemas com estresse causados pela qualidade da água e resistência a microrganismos. Substâncias bioativas podem influenciar nas respostas do sistema imune de peixes, nos últimos anos o -glucano está sendoestudado por modular parâmetros imunes, ampliando a resistência contra enfermidades. Assim,o experimento buscou avaliar se a suplementação na dieta com -glucano juntamente com a vacinação potencializa o efeito prolongado da resposta imune de tilápia do Nilo (Oreochromis niloticus)frente a um desafio imunológico com bactéria de S. agalactiae inativada nos genes das interleucina 1 beta (IL-1), interleucina 6 (IL-6),interleucina 10 (IL-10), fator de necrose tumoral (TNF-), imunoglobulina M (IgM), proteínas de choque térmico de 70 kilodaltons (Hsp70), lisozima (Lys) e C3 do complemento em baço e em rim cranial.. O experimento foi realizado em um delineamento inteiramente casualizado com 11 tratamentos, em três tempos de amostragem (15, 30 dias após a vacinação e 15 dias após o desafio). Ao final dos 15 dias de alimentação houve a vacinação comercial contra S. agalactiae nos peixes do tratamento 3 e 4. Além da vacinação, no grupo 3 houve a alteração da dieta controle para a dieta com -glucano. Ao final dos 30 dias depois da vacinação, todos os peixes de todos os tratamentos foram desafiados combactéria de S. agalactiae inativada. Os resultados mostraram que,a dieta com -glucano associado com à vacinação e ao desafio com microrganismos S. agalactiae inativados, mostraram ter grande eficiência na expressão dos genes no rim cranial principalmente nas citocinas e também a IgM no baço. Observou-se que os genes obtiveram sua expressão mais alta após os 30 dias de vacinação e quase todos os genes foram expressos em maior quantidade no rim cranial do que no baço, com exceção do IgM que teve sua maior expressão no baço. Portanto, pode-se afirmar que o -glucano tem potencial adjuvante para vacina contra S. agalactiae, podendo atuar no controle e na prevenção de estreptococoses

The production of exotic fish is increasing more each year and with that comes along problems like stress due to density, water quality and resistance to microorganisms. Since bio-active substances can influence the responses of the immune system of fish, in recent years -glucan has been extensively studied for modulating immune parameters, increasing resistance against diseases. Therefore, the experiment expected to see if the supplementation in the diet with -glucan together with vaccination enhances the prolonged effect of the immune response in the face of a challenge with inactivated S. agalactiae bacteriafacing an immunological challenge with inactivated S. agalactiae bacteria in the genes of interleukin 1 beta (IL-1), interleukin 6 (IL-6), interleukin 10 (IL-10), necrosis factor tumor (TNF-), immunoglobulin M (IgM), 70 kilodalton heat shock proteins (Hsp70), lysozyme (Lys) and complement C3 in spleen and cranial kidney.The experiment was carried out in a completely randomized design with 11 treatments, in three feeding times (15, 30 days after vaccination and 15 days after the challenge). At the end of the 15 days of feeding, there was a commercial vaccination against S. agalactiae in fish from treatment 3 and 4. In addition to vaccination, in group 3 there was a change from the control diet to the -glucan diet. At the end of 30 days after vaccination, all fish from all treatments were challenged with inactivated S. agalactiae bacteria. The results showed that, the - glucan diet associated with vaccination and the challenge with inactivated S. agalactiae microorganisms, showed to be highly efficient in the expression of genes in the cranial kidney, mainly in cytokines and also in the spleen IgM. It was possible to observe that the genes obtained their highest expression after the 30 days of vaccination and almost all genes were expressed in greater quantity in the cranial kidney than in the spleen, with the exception of IgM which had its greatest expression in the spleen. Therefore, it can be said that -glucan may have adjuvant potential for vaccine against S. agalatiea, being able to act in the control and prevention of streptococci

Prevalência de dor crônica em felinos com sarcoma de aplicação submetidos a tratamento cirúrgico associados ou não a terapia antineoplásica com fosfoetanolamina sintética (FO-S)

A abordagem cirúrgica agressiva e radical de sarcoma felino por aplicação (SFA) é primordial para um prognóstico favorável, mas cirurgias extensas com associação de terapia adjuvantes é descrito como fator predisponentes ao desenvolvimento de dor crônica em humanos. Diante da escassez de estudos sobre o tema o presente trabalho avaliou a prevalência de dor crônica e implicações clínicas em felinos com SFA submetidos a tratamento cirúrgico associados ou não a terapia antineoplásica com fosfoetanolamina sintética. Foram recrutados 20 gatos para estudo clínico transversal, sendo 10 gatos submetidos ao tratamento de sarcoma (grupo S) previamente e 10 animais saudáveis (grupo C). Para todos os animais foi aplicado escala analógica visual (EAVtutor e vet), questionários de qualidade de vida (QV- WSAVA e QV-felinos), mensuração de alodinia tátil e térmica, mensuração de limiar dolorosa com Monofilamentos de Semmes-Weinstein (M.SW) e mensuração sérica de interleucina 6 (IL-6) e magnésio total (Mg). Para o grupo S, foi realizado levantamento de possíveis preditores para a instalação de dor crônica pós-operatoria persistente (DCPO) e complicações tardias apresentadas. O grupo S apresentou escore médio para EAV-tutor e EAV-vet de 2,1±3,1 a 2,5±2,5 , enquanto o grupo C apresentou EAV-tutor e EAV-vet de 0 ±0, observando-se diferença significativa em ambos as avaliações entre os grupos, sendo S>C (p = 0,0867) e (p = 0,0001), respectivamente. 3 animais apresentarem tanto EAV-tutor quanto EAV-vet > 4, indicando dor moderada. Não foi observado diferença quando avaliado QV-WSAVA e QV-felinos entre os grupos, todavia houve forte correlação entre EAV-Vet e QV-felinos (r= -0,69) e moderada entre EAV-Vet e QV-WSAVA (r = 0,57). Na avaliação de alodinia tátil e térmica não houve diferença entre os grupos. Já o limiar dolorosa avaliado com M.SW os animais do grupo S apresentaram resposta positiva na média de 32±94,37 gramas(g) e grupo C com 300 ± 0 g, observando-se significativa diferença entre os grupos (C > S, p = 0,0001). Não foi observado diferença entre níveis séricos de IL-6 e Mg entre os grupo. As alterações comportamentais de lambedura e agressividades mostraram serem achados significativos com OR =100 e OR =15, entre os grupos respectivamente. 9 E margens cirúrgicas extensas e dor pré-operatória foram os fatores para DCPO mais frequentes nos animais do grupo S de forma significativa (p=0). Conclui-se que os felinos do grupo S manifestaram alterações compatíveis com a presença de dor, tais como mudanças comportamentais como lambedura e agressividade, da mesma forma que menor limiar doloroso ao teste com M.SW. Cerca de 30% dos animais do grupo S caracterizaram-se como portadores de dor crônica ou DCPO apresentando dor de intensidade moderada, assim como beneficiaram-se de uso prolongado de medicações adjuvantes. Todavia mais estudos são necessários para avaliar o papel da terapia multimodal na prevenção de DCPO em felinos submetidos ao tratamento cirurgico.

The aggressive and radical surgical approach of feline sarcoma by application (FISS) is fundamental for a favorable prognosis, but extensive surgeries with adjuvant therapies is described as a predisposing factor for the development of chronic pain in humans. Given the lack of studies on the topic, the present study evaluated the prevalence of chronic pain and clinical implications in cats with FISS underwent surgical treatment associated or not with synthetic phosphoethanolamine antineoplastic therapy. Twenty cats were recruited for a cross-sectional clinical study, with 10 cats previously underwent treatment for sarcoma (group S) and 10 healthy animals (group C). For all animals were performed visual analog scale (tutor and veterinary VAS), quality of life questionnaires (QVWSAVA and QV-feline), assessment of tactile and thermal allodynia, measurement of painful threshold with Semmes-Weinstein monofilaments (M.SW) and evaluation of interleukin 6 (IL-6) and serum total magnesium (Mg). For group S, a survey of possible predictors for the emergence of persistent postoperative chronic pain (PPP) and late complications presented, was performed. Group S presented mean score for tutor VAS and veterinary VAS from 2.1 ± 3.1 to 2.5 ± 2.5, while group C presented VAS-tutor and VAS-vet of 0 ± 0, observing a significant difference in both evaluations between groups, (p = 0.0867) and (p = 0.0001) for S> C, respectively. Three animals had VAS-tutor and VAS-Vet> 4, indicating moderate pain. There was no difference in the QoL-WSAVA and feline QoL assessment between the groups; however, there was a strong correlation between VAS-Vet and feline QoL (r = -0.69) and moderate between VAS-Vet and QoL. WSAVA (r = 0.57) In the assessment of tactile and thermal allodynia, there was no difference between the groups. For the painful threshold assessed with M.SW, animals of group S presented positive response on average with 32 ± 94.37 g and group C with 300 ± 0 g, with significant difference between groups (C> S, p = 0, 0001). No difference was observed between serum IL-6 and Mg levels between groups. Behavioral changes such as licking and aggressiveness were significant findings with OR = 100 and OR = 15, respectively. And extensive surgical margins and preoperative pain were the most 11 frequent factors for PPP in group S animals significantly (p = 0). It was concluded that the cats of group S showed alterations compatible with the presence of pain, such as behavioral changes of licking and aggressiveness, as well as lower painful threshold to the M.SW test. About 30% of the animals in group S were characterized as having chronic pain or PPP with moderate to severe pain and benefiting from prolonged use (> 48 weeks) of adjuvant medications. However, further studies are needed to evaluate the role of multimodal therapy in preventing PPP in cats undergoing surgical treatment.

Efeitos da dexametasona como adjuvante à ropivacaína no bloqueio dos nervos femoral e isquiático em cães submetidos à cirurgia de joelho

A ruptura do ligamento cruzado cranial em cães é muito comum e na maioria das vezes a correção é cirúrgica. Como procedimentos ortopédicos podem ser extremamente dolorosos, é importante que o planejamento anestésico seja adequado, utilizando, por exemplo, técnicas de anestesia regional. Dentre estas, estão o bloqueio dos nervos femoral e isquiático. Em seres humanos é muito frequente a associação de adjuvantes aos anestésicos locais em bloqueios perineurais, com o objetivo de prolongar os bloqueios e analgesia dos pacientes. Porém, não existem estudos publicados em medicina veterinária que utilizem a dexametasona para este fim. Sendo assim, este trabalho teve o objetivo de avaliar o uso deste adjuvante pela via perineural no bloqueio dos nervos femoral e isquiático, em cães submetidos à osteotomia de nivelamento de platô tibial (TPLO). Os animais incluídos foram divididos de forma randômica em 2 grupos. O grupo ropivacaína + solução fisiológica (RS) recebeu bloqueio dos nervos femoral e isquiático com 0,1 ml/kg de ropivacaína 0,5% associado a solução salina nos dois pontos de aplicação, e o grupo ropivacaína + dexametasona (RD) recebeu o mesmo bloqueio de nervos periféricos, com 0,1 ml/kg de ropivacaína 0,5%, associada a 0,1 mg/kg de dexametasona por ponto de aplicação. Os bloqueios foram guiados por ultrassonografia e eletroneuroestimulação. Para avaliação de dor foram utilizadas as Escalas Reduzida de Glasgow (GCMPS-SF) e Analógica Visual (EAV). O resgate analgésico foi interpretado como necessário com escores iguais ou superiores a 5 na GCMPS-SF e 4 na EAV. Os resultados obtidos foram submetidos a análise estatística, a qual foi realizada por meio de testes paramétricos e não paramétricos. Não houve diferença estatística para o tempo de duração do bloqueio sensitivo entre o grupo RS (395,50±35,11 minutos) e o grupo RD (410,58±28,57 minutos), assim como para o bloqueio motor (365,25±38,77 e 415,50±29,14, respectivamente). Houve diferença estatística entre os grupos RD e RS para as variáveis ENV em T7 (1,58±0,19 e 0,83±0,16, respectivamente) e T8 (1,25±0,18 e 0,5±0,15, respectivamente), e Glasgow (1,49±0,16 e 0,89±0,13, respectivamente) porém clinicamente irrelevantes. Como conclusão, durante as oito horas de avaliação, a dexametasona não prolongou a duração da ropivacaína para os bloqueios dos nervos femoral e isquiático. Ainda, a dexametasona não reduziu incidência de náusea e vômito no período pós-operatório.

Cruciate ligament rupture in dogs is a really common disease in the clinical routine, and in the majority of cases surgery is required. It is known that orthopedic procedures can be extremely painful, requiring suitable anesthetic planning. There are many techniques that can be used in these cases, like femoral and sciatic blocks. In humans, adjuvants are frequently used in peripheral blocks, however there are few studies in veterinary medicine assessing dexamethasone as an adjuvant. Thus, the aim of this study was to evaluate the use of perineural dexamethasone femoral and sciatic blocks for tibial plateau levelling osteotomy (TPLO) surgery. The animals were randomized into two groups. In the ropivacaine + saline solution (RS) group the nerve block was performed with 0.1 ml.kg-1 of 0.5% ropivacaine and saline solution in each application point, and in the ropivacaine + dexamethasone (RD) group it was performed with 0.1 ml.kg-1 of 0,5% ropivacaine and 0.1 mg.kg-1 dexamethasone in each application point. In both groups the blocks were guided by ultrasound and electrostimulation. Pain assessment was performed with Glasgow Composite Measure Pain Scale - Short Form (GCMPS SF) and Visual Analog Scale (VAS), and the rescue analgesia was admninistered when pain scales indicate greater than or equal to 5 and 4 in each scale, respectively. The obtained results, were submitted to statistical analysis, which was carried out by means of parametric and non-parametric tests. There was no statistical difference in duration of sensory block between RS group (395,50±35,11 minutes) and RD group (410,58±28,57 minutes), as well as for motor block (365,25±38,77 and 415,50±29,14 minutes, respectively). There was a statistical difference between RD and RS group for ENV scores as T7 (1,58±0,19 and 0,83±0,16, respectively) and T8 (1,25±0,18 and 0,5±0,15, respectively), and Glasgow scores (1,49±0,16 and 0,89±0,13, respectively) but clinically irrelevant. In conclusion, during the eight hours of evaluation, dexamethasone did not prolong the duration of ropivacaine for femoral and sciatic blocks. Furthermore, dexamethasone did not reduce the incidence of nausea and vomiting in the postoperative period.

CONCENTRADO AUTÓLOGO DE PLAQUETAS NA OSTEOARTROSE INDUZIDA EM COELHOS: AVALIAÇÕES ARTROSCÓPICA, MACROSCÓPICA, HISTOLÓGICA E IMUNO-HISTOQUÍMICA DA ARTICULAÇÃO FÊMOROTÍBIO-PATELAR

Este estudo teve como objetivo avaliar o efeito do concentrado autólogo de plaquetas (CAP) na osteoartrose (OA) induzida experimentalmente em coelhos, através da avaliação histológica, imuno-histoquímica e artroscópica, e simultaneamente, determinar as concentrações plasmáticas do fator de crescimento transformador 1 (TGF-1) e do fator de crescimento derivado das plaquetas (PDGF). Foram utilizados 30 coelhos machos, adultos jovens, saudáveis, da raça Nova Zelândia, com massa corporal média de 3,0kg, submetidos à ruptura do ligamento cruzado cranial (LCCr) (M1) por vídeo artroscopia para a indução da OA. Aos 21 dias depois da ruptura, os coelhos foram submetidos à reconstituição do ligamento (M2) por vídeo artroscopia e foram divididos em dois grupos de acordo com o tratamento: O grupo controle, que recebeu 0,5 ml de solução Ringer Lactato por via intra-articular e o grupo CAP, que recebeu 0,5 ml de concentrado autólogo de plaquetas por via intra-articular. As injeções intra-articulares dos tratamentos foram realizadas imediatamente após a reconstituição do ligamento, aos 15 e aos 30 dias após a reconstituição. Cinco coelhos de cada grupo foram eutanasiados aos 15 dias após a reconstituição (M3), outros cinco aos 30 (M4), e os restantes cinco coelhos de cada grupo aos 60 dias (M5) após a reconstituição. Nesses mesmos momentos, foram feitas avaliações artroscópicas para avaliar a evolução do processo degenerativo e a resposta aos tratamentos aplicados e antes de cada procedimento, foram coletados dois ml de sangue da artéria auricular central e depositados em tubos contendo EDTA e posteriormente acondicionadas em eppendorfes estéreis em duas alíquotas iguais para fazer a dosagem de TGF-1 e PDGF respectivamente. Nos M3, M4 e M5, depois da eutanásia dos animais, foram coletados fragmentos da cápsula sinovial e da cartilagem articular para a avaliação histológica e imuno-histoquímica. Foi observado na avaliação histológica que os animais que receberam o CAP apresentaram, significativamente, (p<0,05) menor inflamação sinovial, menor proliferação celular e menor degradação da matriz extra celular (MEC) quando comparados com os coelhos que receberam Ringer Lactato. Na avaliação imuno-histoquímica os animais que receberam o CAP apresentaram, significativamente, menor expressão (p<0,05) de interleucina 1 (IL-1), de fator de necrose tumoral (TNF), da proteína morfogenética 2 (BMP-2) e, significativamente, maior expressão de PDGF na membrana sinovial quando comparados com os coelhos que receberam Ringer Lactato, e na cartilagem dos animais desse mesmo grupo, expressão, significativamente (p<0,05) menor, de IL-1 e de TNF e maior expressão de BMP-2 e PDGF quando comparados com os animais do grupo controle. Na avaliação artroscópica foi observado nos animais que receberam o CAP melhora significativa (p<0,05) na inflamação da membrana sinovial, menor formação de cordões fibrosos e menos fibrilação da cartilagem. Finalmente, na avaliação da concentração dos fatores de crescimento, não foram observadas diferenças estatisticamente significativas (p>0,05) nas concentrações de TGF-1 em nenhum dos momentos avaliados após as aplicações do CAP, e foi observado diferença estatisticamente significativa na concentração plasmática do PDGF no M5 nos animais do grupo CAP quando comparado com os animais do grupo controle. Segundo os resultados deste experimento, conclui-se que o CAP é capaz de controlar o processo inflamatório que acontece durante a OA melhorando a sinovite presente na cápsula sinovial ao tempo que diminui a degradação da cartilagem articular. Adicionalmente, esse composto biológico regula a síntese e secreção de citocinas inflamatórias e aumenta a liberação do PDGF.

This study aimed to evaluate the effect of autologous platelet concentrate (APC) on osteoarthritis (OA) experimentally induced in rabbits, through histological, immunohistochemical and arthroscopic evaluation, and simultaneously determine plasma concentrations of the transforming growth factor 1 (TGF -1) and platelet-derived growth factor (PDGF). The study used 30 male rabbits, young, healthy, New Zealand breed, with an average body mass of 3.0 kg, and submitted to rupture of the cranial cruciate ligament (CrCL) (M1) by video arthroscopy to induce OA. At 21 days after the rupture, the rabbits were submitted to ligament replacement (M2) by video arthroscopy and were divided into two groups according to the treatment: The control group, which received 0.5 ml of the Ringer Lactate solution by intra-articular injections and the CAP group, which received 0.5 ml of autologous platelet concentrate by intra-articular injections. The intra-articular injections of the treatments were performed immediately after the ligament replacement, at 15 and 30 days after the replacement. Five rabbits from each group were euthanized at 15 days after replacement (M3), another five at 30 (M4), and the remaining five rabbits from each group at 60 days (M5) after replacement. At those same moments, arthroscopic evaluations were carried out to assess the evolution of the degenerative process and the response to the treatments applied and before each procedure, two ml of blood from the central auricular artery were collected and deposited in tubes containing EDTA and later stored in sterile eppendorfs in two equal aliquots to measure TGF-1 and PDGF respectively. In M3, M4 and M5, after euthanasia of the animals, fragments of the synovial capsule and articular cartilage were collected for histological and immunohistochemical evaluation. It was observed in the histological evaluation that the animals that received the CAP had significantly (p <0.05) less synovial inflammation, less cell proliferation and less degradation of the extracellular matrix (ECM) when compared to the rabbits that received Ringer Lactate. In the immunohistochemical evaluation, the animals that received the CAP showed lower secretion (p <0.05) of interleukin 1 (IL-1), tumor necrosis factor (TNF), morphogenetic protein 2 (BMP-2) and greater secretion of PDGF in the synovial membrane when compared to the rabbits that received Ringer Lactate, and in the cartilage of the animals of that same group, significantly lower (p <0.05) IL-1 and TNF secretion and greater BMP-2 synthesis and secretion and PDGF when compared to animals in the control group. In the arthroscopic evaluation, a significant improvement (p <0.05) in inflammation of the synovial membrane, less formation of fibrous cords and less fibrillation of the cartilage was observed in the animals that received CAP. Finally, when assessing the concentration of growth factors, there were no statistically significant differences (p> 0.05) in TGF-1 concentrations in any of the moments evaluated after CAP applications, and a statistically significant difference in plasma concentration was observed of PDGF in M5 in CAP group animals when compared to control group animals. According to the results of this experiment, it is concluded that the CAP is able to control the inflammatory process that occurs during OA, improving the synovitis present in the synovial capsule while decreasing the degradation of the articular cartilage. Additionally, this biological compound regulates the synthesis and secretion of inflammatory cytokines and increases the release of PDGF.

ESTIMULAÇÃO COMBINADA DE IL-12 E IL-15 PROMOVE A RESPOSTA IMUNE CELULAR EM CÃES COM LEISHMANIOSE VIA IFN-y

A Leishmaniose Visceral (LV) é causada nas Américas, pelo protozoário intracelular obrigatório Leishmania infantum e os cães domésticos são os principais reservatórios urbanos do parasita e em áreas endêmicas, o aumento da LV em humanos tem sido associado ao aumento da infecção canina. Os atuais medicamentos disponíveis para a Leishmaniose Canina (CanL) não são completamente eficientes e meses após o tratamento a maioria dos cães apresentam recidiva, indicando a necessidade de buscar formas alternativas de tratamento. Na CanL, cães desenvolvem uma resposta imune celular (Th1) ineficiente para combater o parasita e a estimulação das vias de citocinas em células de defesa com proteínas recombinantes, tem o potencial de se tornar parte de métodos imunoterapêuticos eficazes. Neste estudo, as citocinas recombinantes caninas (IL-12, IL-2, IL-15 e IL-7) e o receptor solúvel de IL-10R1 (sIL-10R1), com atividade antagonista, foram avaliadas pela primeira vez em combinações (IL-12/IL- 2, IL-12/IL-15, IL-12/sIL-10R1, IL-15/IL-7) ou isoladamente (sIL-10R1) quanto à capacidade imunomodulatória em células mononucleares do sangue periférico (sigla em inglês PBMC) de cães com leishmaniose. Todas as combinações de proteínas recombinantes testadas mostraram melhorar a resposta linfoproliferativa. Além disso, as combinações de IL-12/IL-2 e IL-12/IL-15 promoveram a diminuição na expressão da proteína Programed Cell Death 1 (PD-1) nos linfócitos. Estas mesmas combinações de citocinas e IL-12/sIL-10R1 induziram a produção de IFN-y nas PBMCs. Além disso, a combinação de IL-12/IL-15 aumentou expressão de Tbet nos linfócitos. Esses achados estimulam o uso de IL-12 e IL-15 em futuros estudos in vivo com o objetivo de obter a polarização da resposta imune celular em cães com leishmaniose, o que pode contribuir para o desenvolvimento de um tratamento efetivo contra a CanL.

Visceral Leishmaniasis (LV) is caused in the Americas by the obligate intracellular protozoan Leishmania infantum and domestic dogs are the major urban reservoirs of the parasite and in endemic areas, and increase LV in humans has been associated with increased canine infection. The current medications available for Canine Leishmaniasis (CanL) are not completely effective and months after treatment most dogs present with relapse, indicating the necessity to looking for alternative forms of treatment. In CanL, dogs develop an ineffective cellular immune response (Th1) to combat the parasite. Then, the stimulation of cytokine pathways in defense cells with recombinant proteins, has the potential to become part of effective immunotherapeutic methods. In this study, the canine recombinant cytokines (IL-12, IL-2, IL-15 and IL-7) and the soluble receptor of IL-10R1 (sIL-10R1) with antagonistic activity, were evaluated for the first time in combinations IL-12/IL-2, IL-12/IL-15, IL- 12/sIL-10R1, IL-15/IL-7) or alone (sIL-10R1) for their immunomodulatory capacity in peripheral blood mononuclear cells (PBMC) from dogs with leishmaniasis. All combinations of recombinant proteins tested were shown to improve lymphoproliferative response. Further, combinations of IL-12/IL-2 and IL-12/IL-15 promoted decrease in programmed cell death protein 1 (PD-1) expression in lymphocytes. These same combinations of cytokines and IL-12/casIL-10R1 induced IFN-y production in PBMC. Furthermore, the combination of IL-12/IL-15 led to an increased T-bet expression . These findings encourage the use of IL-12 and IL-15 in future in vivo studies aiming to get polarization of cellular immune response in dogs with leishmaniasis, that may contribute to development of an effective treatment against CanL.

RESPOSTA DE VACAS LEITEIRAS À SUPLEMENTAÇÃO COM BACTÉRIAS E LEVEDURAS

Avaliou-se o efeito de um aditivo líquido contendo uma combinação de microrganismos viáveis de bactérias láticas, bactérias formadoras de esporos e leveduras (S. cerevisiae) cultivadas em consórcio (CBL; Global Saúde, Brasil/SCD Probiotics, EUA) sobre a digestão, o consumo, o desempenho na lactação, a temperatura corporal e a resposta imune de vacas leiteiras. Vinte e seis vacas Holandesas (185 ± 141 dias em lactação) foram alimentadas individualmente com uma dieta de padronização por 14 dias e os tratamentos Controle ou CBL (3,5 mL/kg de matéria seca da dieta total) por 56 dias, em um delineamento em blocos casualizados ajustado para covariável e com estrutura de medidas repetidas ao longo do tempo. O CBL aumentou o consumo de matéria seca (CMS. 23,5 vs. 22,5 kg/d. P < 0,01) e tendeu a aumentar a produção de leite (30,0 vs. 29,4 kg/d. P = 0,06) e lactose (+ 60 g/d. P = 0,09). O leite corrigido para energia/CMS foi reduzido pelo CBL (1,25 vs. 1,31. P = 0,02). A concentração de sólidos no leite e o rendimento não diferiram (P 0,28). As vacas alimentadas com CBL tenderam a ter maiores valores de ECC (3,02 vs. 2,91. P = 0,08), mas o PV não diferiu (641 kg, P = 0,27). O CBL tendeu a reduzir a digestibilidade do trato total da MO não-fibrosa (81,2 vs. 84,1%. P = 0,08) enquanto que as digestibilidades do amido (90,7%) e FDN (48,4%) não diferiram (P 0,20). A proporção molar de butirato no líquido ruminal tendeu a ser reduzida por CBL (9,4 vs. 10,4%. P = 0,06) assim como a concentração total de protozoários (P = 0,10). A relação acetato/propionato (3,1. P = 0,89) e a produção microbiana do rúmen estimada pela excreção urinária diária de alantoína (P = 0,21) não diferiram. O CBL reduziu a proporção de consumo diário de manhã (35,1 vs. 40,4%. P = 0,02), aumentou a proporção no período da tarde (45,9 vs 41,9%. P = 0,03). Comportamentos de ruminação e ingestão não diferiram (P 0,16). O CBL reduziu o N-ureico no sangue às 09:00 h (21,2 vs. 25,1 mg/dL. P = 0,01) e tendeu a reduzir em 16:30 h (20,1 vs. 23,1 mg/dL. P = 0,06) e 23:00 h (17,9 vs. 20,6 mg/dL, P = 0,09), mas não afetou a N-ureico do leite (18,6 mg/dL, P = 0,47). O aumento da produção de leite e do CMS induzidos por CBL foram associados ao aumento da temperatura corporal. As temperaturas retais foram aumentadas pelo CBL às 09:00 h (38,3 vs. 38,1°C. P <0,01), 15:30 h (38,8 vs. 38,5°C. P = 0,01) e 22:00 h (38,5 vs. 38,2°C. P = 0,02). A frequência de vacas com temperatura retal 39,2°C às 15:30 h foi de 18,2% no CBL e 6,3% no CTL (P < 0,01). A temperatura da pele tendeu a ser aumentada por CBL às 09:00 h (34,1 vs. 33,8°C. P = 0,10) e foi aumentada às 22:00 h (35,1 vs. 34,7°C. P = 0,02). A sudorese nas semanas 4 (90,4 vs. 66,9 g/m2/h. P = 0,05) e 5 (103,9 vs. 72,1 g/m2/h. P = 0,01) foi aumentada pelo CBL. O tempo gasto deitado foi reduzido pelo CBL (742 vs. 813 min/d. P = 0,04). A taxa respiratória não diferiu (P 0,34). A imunidade em resposta a uma vacina contra vírus/leptospirose no d 36 (D0) foi avaliada. A interleucina-4 no soro tendeu a ser reduzida por CBL no D0 (779 vs. 859 pg/mL. P = 0,10) e não diferiu nos dias 7 (D7) e 14 (D14) relativamente à vacinação (P 0,26). A interleucina-12 foi reduzida por CBL em D7 (611 vs. 709 pg/mL, P = 0,02), mas não diferiu no D0 e D14 (P 0,27). Interferon gama e interleucina-10 não diferiram (P 0,20). Em D0, a concentração de monócitos como proporção de leucócitos tendeu a ser aumentada por CBL (3,8 vs. 5,7%. P = 0,10). A CCS do leite foi aumentada pela CBL (49.500 vs. 67.000 células/mL. P = 0,03). O CBL induziu maior aumento no CMS do que na produção de leite, diminuindo a eficiência alimentar, e teve efeitos menores na digestibilidade e no perfil de fermentação ruminal. O aumento do CMS e da produção de leite induzida pelo CBL foi associado ao aumento da temperatura corporal e da sudorese, pequenas alterações nos marcadores de imunidade e aumento do CCS do leite de vacas com baixa CCS.

The effect of a liquid additive containing a combination of viable microorganisms of lactic acid bacteria, spore forming bacteria and yeasts (S. cerevisiae) grown in a consortium (CBL; Global Health, Brazil/SCD Probiotics, USA) on the digestion, consumption, lactation performance, body temperature and the immune response of dairy cows. Twenty-six Holstein cows (185 ± 141 lactating days) were fed individually with a standardized diet for 14 days and Control or CBL treatments (3.5 mL/kg dry matter total diet) for 56 d, in a covariate adjusted randomized block design with repeated measures over time. The CBL increased DMI (23.5 vs 22.5 kg/d. P < 0.01) and tended to increase the yields of milk (30.0 vs 29.4 kg/d. P = 0.06) and lactose (+ 60 g/d. P = 0.09). Energy-corrected milk/DMI was reduced by CBL (1.25 vs 1.31. P = 0.02). Milk solids concentration and yield did not differ (P 0.28). Cows fed CBL tended to have higher BCS (3.02 vs 2.91. P = 0.08), but BW did not differ (641 kg. P = 0.27). The CBL tended to reduce the total tract digestibility of the non-fibrous OM (81.2 vs 84.1%. P = 0.08) whereas starch (90.7%) and NDF (48.4%) digestibilities did not differ (P 0.20). Molar proportion of butyrate in ruminal fluid tended to be reduced by CBL (9.4 vs 10.4%, P = 0.06) as well as total protozoa concentration (P = 0.10). The acetate to propionate ratio (3.1. P = 0.89) and the ruminal microbial yield estimated by the daily urinary allantoin excretion (P = 0.21) did not differ. The CBL reduced the proportion of daily intake in the morning (35.1 vs 40.4%. P = 0.02), increased the proportion in the afternoon (45.9 vs 41.9%. P = 0.03). Rumination and ingestion behaviors did not differ (P 0.16). The CBL reduced blood urea-N at 0900 h (21.2 vs 25.1 mg/dL. P = 0.01) and tended to reduce at 1630 h (20.1 vs 23.1 mg/dL. P = 0.06) and 2300 h (17.9 vs 20.6 mg/dL. P = 0.09), but did not affect milk urea-N (18.6 mg/dL. P = 0.47). The increase in milk yield and DMI induced by CBL was associated to increased body temperature. Rectal temperatures were increased by CBL at 0900 h (38.3 vs 38.1°C. P < 0.01), 1530 h (38.8 vs 38.5°C. P = 0.01), and 2200 h (38.5 vs 38.2°C. P = 0.02). The frequency of cows with rectal temperature > 39.2°C at 1530 h was 18.2% on CBL and 6.3% on CTL (P < 0.01). Skin temperature tended to be increased by CBL at 0900 h (34.1 vs 33.8°C. P = 0.10) and was increased at 2200 h (35.1 vs 34.7°C. P = 0.02). Sweating rates in weeks 4 (90.4 vs 66.9 g/m2/h. P = 0.05) and 5 (103.9 vs 72.1 g/m2/h. P = 0.01)) were increased by CBL. Time spent laying down was reduced by CBL (742 vs 813 min/d. P = 0.04). Respiratory rate did not differ (P 0.34). Immunity in response to a virus/leptospirosis vaccine on d 36 (D0) was evaluated. Interleukin 4 in serum tended to be reduced by CBL on D0 (779 vs 859 pg/mL. P = 0.10) and did not differ on days 7 (D7) and 14 (D14) relative to vaccination (P 0.26). Interleukin 12 was reduced by CBL on D7 (611 vs 709 pg/mL. P = 0.02), but did not differ on D0 and D14 (P 0.27). Interferon gamma and Interleukin 10 did not differ (P 0.20). At D0, the concentration of monocytes as a proportion of leukocytes tended to be increased by CBL (3.8 vs 5.7%. P = 0.10). Milk SCC was increased by CBL (49,500 vs 67,000 cells/mL. P = 0.03). The CBL induced a greater increase in DMI than in milk yield, decreasing feed efficiency, and had minor effects on digestibility and ruminal fermentation profile. The increase in DMI and milk yield induced by CBL was associated to increased body temperature and sweating rate, minor alterations in immunity markers, and increased milk SCC of cows with low SCC.

EFEITO DA SUPLEMENTAÇÃO MINERAL INJETÁVEL NO SISTEMA IMUNE DE VACAS LEITEIRAS NO PERÍODO PÓS-PARTO

Objetivou-se com este trabalho avaliar o uso da suplementação mineral injetável nos parâmetros metabólicos, resposta imunológica, composição e qualidade do leite de vacas leiteiras no período pós-parto. Foram utilizadas doze vacas holandesas primíparas prenhas, com peso médio de 450±50 kg/PV e com aproximadamente 26±1 meses, divididas em dois grupos: seis animais suplementados com complexo mineral injetável e seis animais no grupo controle. Foi aplicado 10 ml do complexo mineral (magnésio, fósforo, potássio, selênio e cobre) via subcutânea em três momentos: 20 dias pré-parto, no dia do parto e 20 dias pós-parto. O leite foi coletado a cada quinze dias pós-parto até os sessenta dias de lactação (dias 15, 30, 45 e 60) para análise da composição e qualidade. O soro sanguíneo foi coletado nos dias 3, 15, 30, 45 e 60 pós-parto, sendo que nessas amostras foram mensurados os níveis de corpos cetônicos (BHB), proteínas totais, glicose, albumina, globulina, enzimas catalase (CAT) e superóxido dismutase (SOD), espécie reativa do oxigênio (ERO´s) e citocinas ((fator de necrose tumoral (TNF), interleucina 1 (IL-1) e interleucina 6 (IL-6)). Os animais suplementados com minerais apresentaram menores quantidades de contagem de células somáticas (CCS) (P<0,05) nos dias 30, 45 e 60 do experimento, sem alterar a composição centesimal do leite. Nesse mesmo período, também foi verificado nesses animais menores níveis de BHB quando comparado ao grupo controle (P<0,05). A suplementação também interferiu positivamente no status oxidante/antioxidante, onde as vacas suplementadas tiveram menores níveis de ERO´s e maior atividade da enzima SOD (P<0,05). Os níveis de proteínas totais, globulinas e citocinas foram maiores (P<0,05) nas vacas suplementadas com complexo minerais que provavelmente foram consequências da maior atividade do sistema imunológico. Portanto, concluiu-se que a suplementação mineral subcutânea provavelmente melhorou a capacidade do sistema imune e minimizou o estresse oxidativo em vacas leiteiras durante o período de lactação, com efeito benéfico a saúde da glândula mamaria e consequentemente redução da CCS.

The aim of this study was to evaluate the use of injectable mineral supplementation on metabolic parameters, immunological response, composition and milk quality of dairy cows in the postpartum period. Twelve pregnant, primiparous Holstein cows, weighing 450 ± 50 kg/BW and approximately 26 ± 1 months, were separated into two groups: six animals supplemented with injectable mineral complex and six animals in the control group. 10 mL of the mineral complex (magnesium, phosphorus, potassium, selenium, and copper) was applied subcutaneously at three times: 20 days prepartum, at term and 20 days postpartum. The milk was collected every fifteen days postpartum up to sixty days in milk (days 15, 30, 45 and 60) for analysis of composition and quality. The serum was collected on days 3, 15, 30, 45, and 60 postpartum to evaluate the ketone bodies (BHB), total protein, glucose, albumin, globulin, catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD), reactive oxygen species (ROS's), and cytokines ((tumor necrosis factor (TNF), interleukin 1 (IL-1) and interleukin 6 (IL-6).) Mineral-supplemented animals had lower somatic cell counts (P<0.05) on days 30, 45 and 60, without changes in the centesimal composition of milk. In the same period, these animals had lower levels of ketone bodies when compared to the control group (P<0.05). Supplementation also interfered positively with oxidant/antioxidant status, in which supplemented cows had lower ROS levels and increased SOD activity (P<0.05). The levels of total proteins, globulins and cytokines were higher (P<0.05) in cows supplemented with mineral complex, probably because of the activity of the immune system. Subcutaneous mineral supplementation probably improved the ability of the immune system and minimized oxidative stress in dairy cows during the lactation period, with effect to in health status of mammary gland and, consequently, to the reduction in SCC.