Resumo
Background: Poisoning of animals due to toxic plants is found in Brazil and other countries. One of the known toxic plantsin Brazil, with the active ingredient sodium fluoroacetate (SF), is Palicourea marcgravii. Dehalogenases that inactivatethe fluor-carbon bonds are enzymes found in microorganisms and may prevent intoxication. This study evaluated the occurrence of rumen microorganisms naturally resistant to SF.Materials, Methods & Results: Two samples of rumen fluid of cattle from the Experimental Farm of Federal University ofMato Grosso fed with Brachiaria sp. were obtained via fistula in flasks. An aliquot of 2 mL was placed in a microtube andcentrifuged at 9000 g for 1 min. Then, the sample was inoculated into 2 tubes, one containing 100 µL of clarified rumenfluid in 2 mL of modified liquid culture medium (0.1% ammonium sulfate, 0.1% potassium phosphate monobasic, 0.05%sodium phosphate dibasic, 0.01% magnesium sulfate, 0.01% yeast extract, pH 7.0) and 0.4% of SF and the other samplecontaining 2 mL of liquid culture medium and 100 µL of clarified rumen fluid. The 2 samples were incubated at 40°C for24 h. Dilutions were performed under the same conditions every 24 h until the attainment of microorganisms resistant toSF, and the finaldilution containing 50 µL of each sample was plated in the middle containing SF (0.4%) and incubated at40°C for 24 h for the isolation of bacteria. The bacterial colonies resistant to SF were identified by morphological methods, stained, and subjected to DNA extraction sequencing using the universal primers 27f and 1492r (16S rDNA) for theidentification of the bacterial genus using Blast DNA identity analysis. These bacteria were cultured with and without SF(0.4%), and the presence of fluoride ions was detected by an ion-selective electrode (fluoride) during incubation for 0, 30,60, 90, and 120 min. Two resistant microorganisms were isolated, one was a Gram-positive coccus and the other was aGram-positive rod...
Assuntos
Animais , Bovinos , Fluoracetatos , Intoxicação por Plantas/imunologia , Intoxicação por Plantas/veterinária , Plantas Tóxicas/imunologia , Rubiaceae , Rúmen/microbiologiaResumo
Background: Poisoning of animals due to toxic plants is found in Brazil and other countries. One of the known toxic plantsin Brazil, with the active ingredient sodium fluoroacetate (SF), is Palicourea marcgravii. Dehalogenases that inactivatethe fluor-carbon bonds are enzymes found in microorganisms and may prevent intoxication. This study evaluated the occurrence of rumen microorganisms naturally resistant to SF.Materials, Methods & Results: Two samples of rumen fluid of cattle from the Experimental Farm of Federal University ofMato Grosso fed with Brachiaria sp. were obtained via fistula in flasks. An aliquot of 2 mL was placed in a microtube andcentrifuged at 9000 g for 1 min. Then, the sample was inoculated into 2 tubes, one containing 100 µL of clarified rumenfluid in 2 mL of modified liquid culture medium (0.1% ammonium sulfate, 0.1% potassium phosphate monobasic, 0.05%sodium phosphate dibasic, 0.01% magnesium sulfate, 0.01% yeast extract, pH 7.0) and 0.4% of SF and the other samplecontaining 2 mL of liquid culture medium and 100 µL of clarified rumen fluid. The 2 samples were incubated at 40°C for24 h. Dilutions were performed under the same conditions every 24 h until the attainment of microorganisms resistant toSF, and the finaldilution containing 50 µL of each sample was plated in the middle containing SF (0.4%) and incubated at40°C for 24 h for the isolation of bacteria. The bacterial colonies resistant to SF were identified by morphological methods, stained, and subjected to DNA extraction sequencing using the universal primers 27f and 1492r (16S rDNA) for theidentification of the bacterial genus using Blast DNA identity analysis. These bacteria were cultured with and without SF(0.4%), and the presence of fluoride ions was detected by an ion-selective electrode (fluoride) during incubation for 0, 30,60, 90, and 120 min. Two resistant microorganisms were isolated, one was a Gram-positive coccus and the other was aGram-positive rod...(AU)
Assuntos
Animais , Bovinos , Rúmen/microbiologia , Fluoracetatos , Rubiaceae , Plantas Tóxicas/imunologia , Intoxicação por Plantas/imunologia , Intoxicação por Plantas/veterináriaResumo
This paper describes the development and validation of an analytical methodology for determining the concentration of fluoride in water used for the preparation of dialysis solutions, by means of potentiometry with ion selective electrode. The investigated validation parameters were: selectivity, homoscedasticity, linearity, limit of detection, limit of quantification, reliability of measurement and precision. The optimized conditions of analysis were: HOAc/-OAc/NaCl/CDTA buffer (pH = 5.0 ± 0.1), in ratio of 10:1 (sample/buffer); concentrations of the standard solutions in the analytical curve: 0.05-0.80 mg/L. The evaluated method exhibited suitable validation parameters with detection and quantification limits equal to 0.020 and 0.050 mg/L, respectively. Also, an electronic spreadsheet was developed and validated for monitoring the quality of analytical curve of the methodology that calculates the decision limit to 0.20 mg/L.(AU)
Este trabalho descreve o desenvolvimento e validação de metodologia analítica para determinar a concentração de fluoreto em água empregada para a preparação de soluções de diálise, por meio de potenciometria com eletrodo íon seletivo. Os parâmetros de validação investigados foram: seletividade, homoscedasticidade, linearidade, limite de detecção, limite de quantificação, veracidade de medição e precisão. As condições otimizadas de análise foram: tampão HOAc/-OAc/NaCl/CDTA (pH = 5,0 ± 0,1), na proporção 10:1 (amostra/tampão); concentrações das soluções-padrão da curva analítica: 0,05 a 0,80 mg/L. O método avaliado exibiu parâmetros de validação adequados com limites de detecção e de quantificação, respectivamente, de 0,020 e 0,050 mg/L. Ademais, foi também desenvolvida e validada uma planilha eletrônica para efetuar o monitoramento da qualidade da curva analítica do método que calcula o limite de decisão para 0,20 mg/L.(AU)
Assuntos
Fluoretos/química , Microbiologia da Água , /análise , Potenciometria , Eletrodos Seletivos de Íons , Água/análiseResumo
A conservação de forragem via ensilagem é um processo bem conhecido e, disseminado, no mundo todo. Entretanto os métodos laboratoriais para avaliar silagens apresentam distinções entre os grupos de pesquisa. Nesse contexto, foram comparados procedimentos utilizados para avaliar carboidratos solúveis em água (CSA) e, também , métodos para determinar nitrogênio amoniacal (N-NH3) em silagens, com o objetivo de otimizar a rotina analítica em laboratórios de conservação de forragens. As amostras utilizadas foram coletadas em diferentes silos, constituindo quatro classes de silagens com diferentes perfis de fermentação: milho (n = 20), amendoim forrageiro (n = 20), capim elefante (n = 20) e cana-de-açúcar (n = 20). No primeiro experimento, as silagens foram submetidas à avaliação dos CSA por meio dos seguintes métodos: f enol ácido sulfúrico (FAS), antrona e fenol com extração em água (FEA). No segundo experimento, elas foram submetidas à determinação de N-NH3, por meio dos seguintes métodos: eletrodo íon seletivo de amônia (ISE), f enol-hipoclorito (FH), kit comercial ureia 500 (marca: doles) e AOAC (Association of Official Analytical Chemists). Os dados foram submetidos à análise de variância e as médias comparadas pelo teste t Student a 10% de probabilidade. Os métodos antrona e FAS apresentaram valores semelhantes (P > 0,10) de CSA em todas as amostras avaliadas. Contudo o método FAS mostrou-se mais prático e preciso (coeficiente de variação médio: CVM = 0,07%), o qual também apresentou menor custo por amostra na determinação dos CSA das silagens avaliadas em relação ao método da antrona (R$ 3,80 no FAS e R$ 5,16 na antrona). O método FEA superestimou (P < 0,10) os valores de CSA, nas amostras de silagem de amendoim forrageiro, capim elefante e cana-de-açúcar, mas não houve diferença (P > 0,10) nos valores de CSA das silagens de milho. Portanto, para esta classe de silagem, o método FEA pode ser utilizado em substituição ao FAS pois, no método FEA, a extração dos CSA é realizada apenas em água, gerando economia de reagente (menos R$ 0,47 por amostra em relação ao FAS, que utiliza extração em etanol 80%). Quanto aos valores de N-NH3, o método utilizado como padrão foi o ensaio de FH, pois se mostrou mais prático, preciso (CVM = 1,58%) e econômico (R$ 0,05 por amostra). O método AOAC apresentou valores semelhantes (P > 0,10) ao FH, mas foi menos prático, de menor precisão (CVM = 5,85%) e maior custo (R$ 2,46 por amostra). O método ISE seria ainda mais prático que o FH, entretanto superestimou (P < 0,10) os valores de NNH3 das amostras e mostrou-se oneroso (R$ 2,27 por amostra). Sendo assim, no presente estudo, verificou-se que os métodos mais indicados, para determinar CSA e N-NH3 em silagens de milho, amendoim forrageiro, capim elefante e cana de açúcar, seriam, respectivamente: FAS e FH, visto que são métodos de maior precisão e eficácia, baixo custo e de fácil execução de protocolo, otimizando a rotina laboratorial na determinação dessas duas variáveis de extrema importância na avaliação da qualidade da fermentação no silo.
The forage conservation by ensilage is a well-known process, widespread throughout the world. However, laboratory methods for evaluating silages present differences between research groups. In this context, procedures used to evaluate water soluble carbohydrates (WSC) and methods to determine ammonia nitrogen (N-NH3) were compared with the objective of optimizing the analytical routine in forage conservation laboratories. The samples used were collected from different silos, constituting four classes of silages with different fermentation profiles: corn silage (n = 20), forage peanut silage (n = 20), elephant grass silage (n = 20) and sugarcane silage (n = 20). In the first experiment, the samples were submitted to WSC evaluation, using the following methods: phenol-sulfuric acid (PSA), anthrone and phenol with water extraction (PWE). In the second experiment, the samples were submitted to N-NH3 determination, using the following methods: ammonia ion-selective electrode (ISE), phenol-hypochlorite (PH), doles® commercial kit and AOAC (Association of Official Analytical Chemists). The data were submitted to analysis of variance and the means were compared by the Student t test at 10% of probability. The anthrone and PSA methods presented similar values (P > 0.10) for WSC in all the samples evaluated. However, the PSA method proved more practical and precise (mean coefficient of variation: MCV = 0.07%). This method also presented the lowest cost per sample for the determination of WSC in the evaluated silages, when compared to anthrone (R$ 3.80 in the FAS e R$ 5.16 in the a nthrone). The PWE method overestimated (P < 0.10) the WSC values in the samples of forage peanut, elephant grass and sugarcane silages. However, there was no difference in the WSC values (P > 0.10) of corn silages. Therefore, for this silages class, the PWE method can be used in substitution for PSA, given that, for the PWE method, the extraction of WSC is done only in water, generating reagent economy (R$ 0.47 less per sample in relation to PSA, which uses 80% ethanol extraction). Regarding the values for N-NH3, the standard method was the PH method, given its practicality, precision (MCV = 1.58%) and economy (R$ 0.05 per sample). The AOAC method presented values similar (P > 0.10) to the PH method, but was less practical, less precise (MCV = 5.85%) and with higher cost per sample (R$ 2.46). The ISE method would be even more practical than PH, however, it overestimated (P < 0.10) the NNH3 values of the samples e proved to be expensive (R$ 2.27 per sample). Thus, in the present study, it was verified that the methods most indicated to determine WSC and N -NH3 in corn, forage peanut, elephant grass and sugarcane silage were respectively: PSA and PH methods, given that they present greater precision and efficacy, low cost, and have easier protocols execution, optimizing the laboratory routine for the determination of these two variables of extreme importance in the evaluation silo fermentation quality.
Resumo
Values of sodium, ionized calcium, potassium and chloride obtained by ion-selective electrode method, from serum and blood samples of healthy cats, were compared. Serum ionized calcium value was lower (5.2mg/dl) than blood ionized calcium (5.4mg/dl), and serum potassium (4.47mmol/l) and serum chloride (117.2mmol/l) values were higher than blood potassium (3.94mmol/l) and blood chloride (115mmol/l).
Assuntos
Animais , Gatos , Cloretos/sangue , Cálcio/sangue , Eletrodos Seletivos de Íons/veterinária , Potássio/sangue , Sódio/sangue , Biomarcadores , GatosResumo
Values of sodium, ionized calcium, potassium and chloride obtained by ion-selective electrode method, from serum and blood samples of healthy cats, were compared. Serum ionized calcium value was lower (5.2mg/dl) than blood ionized calcium (5.4mg/dl), and serum potassium (4.47mmol/l) and serum chloride (117.2mmol/l) values were higher than blood potassium (3.94mmol/l) and blood chloride (115mmol/l).(AU)
Assuntos
Animais , Gatos , Sódio/sangue , Cálcio/sangue , Potássio/sangue , Cloretos/sangue , Eletrodos Seletivos de Íons/veterinária , Biomarcadores , GatosResumo
Avaliou-se a concentração sérica de cálcio ionizado, pelo método eletrodo íon-seletivo, em 40 cães sadios, para compará-la aos valores obtidos por meio do cálcio ionizado estimado em que se considerou a metade do valor do cálcio total mensurado pelo método colorimétrico e corrigido pela albumina. Não foi observada diferença do cálcio ionizado entre os dois métodos e observou-se baixa correlação entre os métodos (r= 0,328).(AU)
Serum ionized calcium concentrations were evaluated by ion-selective electrode method in 40 healthy dogs and compared to ionized calcium estimates obtained considering the half value of corrected total calcium, measured by colorimetric method. No difference was observed between ionized calcium obtained by both methods and low correlation was estimated (r= 0.328) between the methods.(AU)
Assuntos
Animais , Cálcio/análise , Eletrodos Seletivos de Íons , CãesResumo
Water is an important source of fluoride intake and considering the mineral water consumption increase, and of the prevalence of dental fluorosis, this study evaluated the concentration of fluoride in bottled mineral water, and compared to those values reported on the packaging label. Thirty-nine mineral water samples from different brands were purchased at several supermarkets, ; grocery stores, and highly frequented restaurants in São José do Rio Preto, SP. The fluoride concentration was determined on duplicate analysis, using a potentiometer with selective-ion electrode. The concentration of fluoride ranged from 0.05 to0.82 mg/L, and no significant difference was observed between the values reported on the labels and those found in the present investigation in samples from the majority of brands. In spite of the fluoride contents found to be safe for not causing a risk for dental fluorosis, there was no significant preventive meaning for tooth cavity. The levels of fluoride in analyzed bottled mineral water samples were in conformity with the specific legislation in force.
A água é importante fonte de ingestão de flúor e considerando-se o aumento no consumo de água mineral e da prevalência de fluorose dentária, o presente estudo teve o objetivo de avaliar a concentração de flúor na água mineral engarrafada comercializada, comparando-a aos valores declarados no rótulo da embalagem. Foram adquiridas 39 amostras água mineral de diferentes marcas disponíveis em diversos supermercados, mercearias e lanchonetes de grande circulação do município de São José do Rio Preto, em 2008. A concentração de flúor foi determinada por análise em duplicata, utilizando-se potenciômetro com eletrodo íon-seletivo. A concentração de flúor variou entre 0,05 e 0,82 mg/L, com diferenças pouco significativas entre os valores estipulados nos rótulos da maioria das marcas de água mineral e aqueles determinados na presente investigação. Os valores de flúor encontrados nas amostras analisadas mostram ser livres de risco em causar fluorose dental, porém em teor sem indicativo de ação preventiva anticárie. Os teores de flúor nas amostras de água mineral analisadas estavam em conformidade com a legislação específi ca vigente.
Resumo
O antibiótico hidrogenofumarato de tiamulina pode ser determinado quantitativamente através de eletrodos seletivos. Esses eletrodos podem ser construídos com membranas de PVC, copolímero etileno/acetato de vinila (EVA) com os pares iônicos tetrafenilborato de tiamulina e fosfotungstato de tiamulina. A maioria dos eletrodos seletivos preparados apresentou resposta nernstiana na faixa de concentração de 1,0 x 10 a 1,0 x 10 mol/L de hidrogenofumarato de tiamulina e, em alguns casos, até 1,0x10 mol/L. Os limites de detecção encontrados foram da ordem de 10 a 10 mol/L. Esses eletrodos foram utilizados na determinação do teor de tiamulina em formulações de uso veterinário e na forma pura. Os resultados obtidos foram comparados estatisticamente com aqueles obtidos pelos métodos comumente utilizados, cromatografia líquida de alto desempenho para as formulações e titulação em meio não-aquoso para tiamulina na forma pura. Dependendo da composição da formulação contendo hidrogenofumarato de tiamulina, a determinação do teor deste antibiótico pode ser feita por potenciometria direta sem tratamento prévio da amostra. Mas, em alguns casos, isso não foi possível, sendo necessário processo de extração seguido de determinação com o eletrodo seletivo. Os métodos analíticos apresentaram boa correlação. Dependendo das condições de análise, a estimativa de desvio padrão das determinações utilizando eletrodos seletivos é menor do que aquele obtido com cromatografia líquida de alto desempenho. As vantagens da análise utilizando eletrodos seletivos são que, como essas medições são por potenciometria direta,o custo das análises é menor quando comparado com cromatografia liquida de alto desempenho, as respostas são obtidas rapidamente, o equipamento utilizado não é caro nem sofisticado e o pessoal envolvido não requer treinamento especializado. Com o uso de potenciômetros movidos à bateria, é possivel realizar análises utilizando eletrodos seletivos à tiamulina no campo, abrindo ampla gama de aplicações para esses eletrodos, possibilitando, entre outros, a realização de estudos de estabilidade de formulações e acompanhamento do tratamento dos animais
The antibiotic tiamulin hydrogen fumarate can be assayed by using ion-selective electrodes. These electrodes can be made with membranes of PVC or ethylene/vinyl acetate copolymer (EVA) with the ionic pairs tiamulin tetraphenylborate and tiamulin phosphotungstate. Most of the ion-selective electrodes prepared showed nernstian response in the range from 1,0 x 10 to 1,0 x 10mol/L of tiamulin hydrogen fumarate and, in same cases, even down to 1,0 x 10 mol/L. The detection limits were found at the range of 10 mol/L to 10 mol/L. These ion-selective electrodes were used in the assay of tiamulin in veterinary preparations and in the bulk. The results were statisticaIly compared to those from the methods usuaIly employed to the assay of tiamulin, high-performance liquid chromatography in the case of veterinary preparations and non-aqueous titration for bulk tiamulin. Depending on the components of the veterinary formulation, the assay of tiamulin hydrogen fumarate can be made by direct potentiometry without previous treatment of the samples. But in some cases an extraction step was necessary before the determination with ion-selective electrodes. The anaIytical methods showed good correlation. According to the analytical procedure, the standard deviation in the ion-selective electrode methods is lower than that obtained with high-performance liquid chromatography. With the use of the ion-selective electrode methods it is possible to conduct the analysis by direct potentiometry with lower cost than with high- performance liquid chromatography. The responses are fast obtained, the equipment involved is neither expensive nor sophisticated and the analysts do not need an speciaIized training. Using portable potentiometers it is possible to conduct the analysis by ion- selective electrodes in the field. This fact yields a lot of possibilities to the application of these electrodes. It will be possible to study the stability of the veterinary formulations and to survey the animaIs therapy