Epididymal primary mast cell tumor in a dog

Background: In the literature, there are a few descriptions of epididymis neoplasia in domestic animals, especially considering primary tumors. In the few reports found in literature, the lesions were a consequence of the invasion of testicular or paratesticular neoplasia, as a papillar carcinoma in a dog's and a bull's epididymis, and mesenchymal tumors - fibrome/ fibrosarcoma, leiomyoma/leiosarcome. On the other hand, mast cell tumors are the second most prevalent neoplasia in dogs in Brazil, affecting especially the skin. The aim of this report is to describe for the first time a low malignancy mast cell tumor in a mixed-breed dog's epididymis, without metastasis or recurrence in a 2-year follow-up period. Case: A 10-year-old male mixed-breed dog was presented for pre-surgical evaluation for elective orchiectomy. In the physical examination, an increase in the volume of approximately 2 cm with an irregular appearance was identified on palpation in the cranial pole of the left testis. In the trans surgical period, an increase in testicular volume (4 cm long x 2 cm wide) was observed, with a firm consistency in the region of the vas deferens with macroscopic changes in the region. The testis was sectioned, and the fragments were sent for histopathological evaluation in 10% buffered formaldehyde. There was a fairly cellular circumscribed neoplastic infiltrate, distributed in a sheet and separated by fibrovascular stroma, and rounded neoplastic cells with a moderate amount of basophilic cytoplasmic granulation, and discrete anisocytosis and anisokaryosis. The nuclei were rounded with vesicular chromatin with 1 or 2 distinct nucleoli. No mitosis figures were observed in 10 high power fields (400x). Few eosinophils were distributed throughout the neoplastic cell population. Immunohistochemistry demonstrated immunostaining for KIT protein with perimembranous staining in 95% of neoplastic mast cells, giving a KIT 1 pattern. There was no positive nuclear staining for Ki67 in any cell of the histological sections examined. A grade II mast cell tumor (low grade of malignancy) was diagnosed. After diagnosis, the animal underwent radiographic evaluation of the chest and abdominal ultrasound, and a new physical inspection in search of nodules, plaques, skin lesions, or subcutaneous masses. There were no metastases in the thorax and abdominal cavity, nor physical alterations, and it can be inferred that the epididymis was the primary site of the mast cell tumor. After 2 years of orchiectomy, there were no recurrences, and no chemotherapy treatment was performed. Discussion: Extracutaneous mast cell tumors are uncommon in animals, but have been reported in oral and nasal mucosa, nasopharynx, larynx, trachea, intestine, visceral lymph nodes, spleen, liver, spinal cord, intestine, ureter, conjunctiva, lung and more recently in tear gland of the third eyelid. However, in the authors' assessment, this is the first description of mast cell tumor in the epididymis in dogs. The diagnosis was established by histopathological examination, which revealed a grade II epididymal mast cell tumor and immunohistochemical evaluation (KIT and Ki-67) as being of low aggressiveness. The diagnosis of a primary tumor was confirmed since the staging was established after the histopathological diagnosis, involving chest radiography, abdominal ultrasound, cutaneous evaluation in search of nodules, plaques, cutaneous and subcutaneous lesions, and did not reveal other abnormalities or metastases not identified in the preoperative evaluation. In addition, immunostaining with KIT and Ki-67 reaffirmed the low degree of malignancy and the potential for metastases, which can be observed by the asymptomatic follow-up of the patient 2 years after the surgical excision.

Solid iridociliary carcinoma in a dog

Background: Iridociliary epithelial tumors (ICETs) originate from the iris epithelium or ciliary body. They comprise ciliary body adenoma, carcinoma, pleomorphic adenocarcinomas, medulloepitheliomas, and other primitive neuroectodermal tumors. They are the second most common primary intraocular tumors in dogs and have already been reported in sheep and humans. In dogs, they occur more frequently in middle-aged to elderly animals, and the Labrador and Golden Retriever seem to be more predisposed breeds. This study aimed to describe the clinical and pathological aspects of solid iridociliary carcinoma in a dog. Case: A 3-year-old Poodle bitch was treated for discomfort in the left eyeball region, increased intraocular pressure and moderate buphthalmia. A direct ophthalmological examination was performed without equipment, and a mass was visualized in the posterior chamber, distorting the pupillary cleft. We opted for unilateral enucleation and forwarded the material for histological analysis. Macroscopically, the eyeball measured 3.4 cm (anteroposterior) x 2.6 cm (vertical), with a brownish mass that occupied the entire anterior chamber and part of the posterior chamber. Histologically, there was a neoformation in the ciliary body and iris pigment epithelium, partially well-delimited and densely cellular. The neoplasm was organized into predominantly solid formations interspersed with a discrete amount of blood vessels, rare bundles of fibrous stroma, and amorphous eosinophilic material forming membranes that were positive for PAS. Sections of the neoplasm were subjected to immunohistochemistry using anti-cytokeratin AE1/AE3, anti-S100 protein, anti-vimentin, and anti-Ki-67. Positive cytoplasmic immunostaining for cytokeratin and S-100 was observed. Only 45.6% of cells were positive for Ki-67 (500 cells). No immunostaining was observed for vimentin. Discussion: The diagnosis of solid iridociliary carcinoma was based on the histological features and positive immunostaining for cytokeratin AE1/AE3 and protein S100. Iridociliary carcinomas present positive immunostaining for cytokeratin, whereas adenomas and normal iridociliary epithelium do not present this immunostaining. Moreover, the high rate of cell proliferation was indicative of malignant neoplasia, as observed by the high mitotic count and high positivity for Ki-67. The S100 protein helped in the diagnosis of ICETs, as the iridociliary epithelium showed positive staining for this protein. Some histological features are important to consider in the diagnosis of iridociliary tumors in dogs, such as noninvasive growth in the posterior chamber, pigment epithelium, and thick homogeneous membranes on the cell surface. Furthermore, the presence of positive PAS membranes favors the diagnosis of iridociliary epithelial tumors. ICETs must be differentiated from melanocytomas, anterior uveal melanoma, medulloepitheliomas, and metastatic and pleomorphic carcinomas. The histological characteristics, especially the presence of PAS-positive membranes, associated with the immunohistochemical profile of neoplasm cells, help differentiate the ICETs from these tumors. In general, the prognosis is poor for eyeball and vision maintenance in canine iridociliary tumors, and scleral invasion is associated with a higher recurrence rate.

Peripheral nerve sheath tumor in the upper eyelid in a dog

Background: Peripheral nerve sheath tumors are most commonly found on the head and neck regions of both dogs and people. Schwannomas are rarely observed in ophthalmic areas. When they occur, ocular Schwannomas are usually located in the orbit, uveal tract and conjunctiva. The occurrence of uveal schwannoma, a subset of PNST has been well documented in the veterinary literature. PNST has never been observed in the eyelids of dogs. Therefore, the present report aimed to describe the surgical treatment and outcome of a PNST located in the upper eyelid of a dog. Case: A 9-year-old, spayed female mixed-breed dog was referred for evaluation of a large mass involving the right upper eyelid for a duration of approximately one month. The inspection revealed sero-sanguinolent discharge and an oval-shaped mass occupying more than 70% of the right upper eyelid. A presumptive diagnosis of eyelid neoplasia was considered most likely. Excision of the entire mass with a 2 cm margin was performed. The third eyelid and dorso-medial bulbar conjunctiva were also removed. Upper eyelid reconstruction was performed based on a similar technique previously described in cats (lip-to-lid flap). As a result, neoplastic spindle cells exhibited immunoreactivity for S100 and intense cytoplasmic staining for vimentin, supporting the diagnosis of schwannoma. Fifteen days later, the margins of the subdermal pattern flap were healed and skin sutures were removed. On the last follow-up, 9 months post-surgery, the dog was visual, and the flap was well incorporated and covered the ocular surface. Ten months later, another large mass arising from the right inferior palpebral conjunctiva was observed. Once ultrasound revealed orbital invasion exenteration combined with orbitectomy were performed, and the defect was covered with an auricular axial pattern flap. The second tumor had the same histological and immunohistochemical characteristics of the first mass. Both tumors expressed Ki67; however, the PI in the second mass was higher (7.9%) than the first (3.4%). Discussion: Reported eyelid neoplasms in dogs include adenomas and adenocarcinomas of the meibomian glands, melanomas, fibroma, fibrosarcoma, histiocytoma, mastocytoma, lipomas, papillomas, and squamous cell carcinomas. To the author's knowledge, however, this is the first case description of a PNST affecting the eyelid in a dog. The histologic distinction between PNSTs and other spindle cell tumors, including myxosarcoma, fibrosarcoma, leiomyosarcoma, hemangiopericytoma, and melanoma can be challenging and requires immunohistochemical stainin. S100 is an acidic protein that identifies various nervous tissue cells, including Schwann cells, and the majority of canine PNSTs diffusely express this molecule. As in the case presented here, neoplastic cells of different ocular and adnexal structures were also positive for S100 and vimentin in all PNSTs previously reported in the veterinary literature. This is the first report of PNST affecting the eyelid in a dog. The lip-to-lid flap is a feasible technique to reconstruct the upper eyelid following wide surgical removal of a tumor in dogs. However, the authors suggest radical surgery combining orbitectomy, exenteration and a miocutaneous flap if PNST is diagnosed in the eyelids of dogs. They also caution once recurrence is possible and can be more aggressive.(AU)

Bartholins gland adenoma in a Saanen goat / Adenoma de glândula de Bartholin em cabra da raça Saanen

Tumors affecting Bartholins gland are considered rare in human medicine; there are few reports in the veterinary literature, with descriptions occurring only in cows. This article described the clinical and pathological findings associated with Bartholins gland adenoma in a goat. Clinically, a 7-year-old pregnant Saanen goat presented bilateral enlargement of the vulva that did not regress spontaneously after parturition. Grossly, these vulvar masses were multilobulated, contained cystic areas from which oozed a whitish fluid. Histopathology revealed an adenoma characterized by the proliferation of irregularly shaped neoplastic epithelial cells that formed tubular to glandular-like structures. These neoplastic cells demonstrated moderate anisokaryosis and evident nucleoli. The intratumoral proliferation index (PI) was estimated by immunoreactivity with the protein ki-67. Further, the glandular-like structures produced a Periodic Acid-Schiff positive secretion. A diagnosis of Bartholins gland adenoma was established due to the anatomic location of the neoplastic growths, the histopathological features, and the PI of the tumor.(AU)

Tumores que afetam a glândula de Bartholin são considerados raros em humanos e há poucos relatos na medicina veterinária, sendo descrito somente em vacas. Este artigo descreve os achados clínicos e patológicos associados ao adenoma na glândula de Bartholin em uma cabra. O animal da raça Saanen, com sete anos de idade e gestante apresentava aumento de volume bilateral na região da vulva, que não regrediu após o parto. Macroscopicamente, a massa era multilobulada, com presença de vários cistos preenchidos por uma secreção esbranquiçada. A histopatologia revelou um adenoma, caracterizado por proliferação de células epiteliais de formato irregular que formavam estruturas tubulares semelhantes à glândulas. Estas células neoplásicas apresentavam anisocariose moderada e nucléolos evidentes. O índice de proliferação celular intratumoral (PI) foi estimado por imunorreatividade à proteína ki-67. Além disso, a secreção produzida por essas estruturas do tipo glandular, foi positiva na coloração do Ácido Periódico-Schiff. O diagnóstico de adenoma da glândula de Bartholin foi estabelecido pela localização anatômica dos tumores neoplásicos, características histopatológicas e à PI do tumor.(AU)

Effects of ovarian pathologies and uterine inflammations on adenomyosis in bitches

Background: Adenomyosis is a non-neoplastic condition, characterized by the presence of endometrial glands or cells in the myometrium. Adenomyosis is defined by post-operative microscopic examination of uterine tissue and a rarely seen infertility problem in bitches. The process of transformation of healthy uterus into adenomiotic uterus is still a mystery. We aimed to determine role of ovarian pathologies and uterine inflammations on pathogenesis of uterine adenomyosis in bitches.Cases: After ovariohysterectomy, the uteri were fixed and processed by routine methods. Sections were stained with HematoxylinEosin, Massons trichrome and Periodic-Acid-Schiff and immunohistochemically; with p53 protein, Ki-67, α-smooth-muscle actin, cytokeratin-CK 8, 14, 19 antibodies, estrogen and progesterone receptors by Avidin-Biotin-Complex-Peroxidase method. Histopathologically, 7 of the collected tissue samples (n = 38) were diagnosed as adenomyosis. There were unilateral (n = 6) or bilateral (n = 1) adenomyosis in which endometrial glands had broken through the myometrium, and in some cases there were fibromyoma, inflammation, papillary hyperplasia and cysts in glands. Vaginal fibroma, fibromyoma and benign mix tumor (n = 1), simple carcinoma (n = 3), carcinosarcoma (n = 3) in mammary gland were determinated histopathologically. In addition to these findings, follicular cysts (n = 4), parovarian cyst (n = 1), adenocarcinoma and Rete ovarii adenoma were diagnosed in some ovaries. The CK 19 was scored at endometrial glands (n = 2) positively and also, muscle fibers were stained positively with α-smooth-muscle actin antibody (n = 7).Discussion: Adenomyosis is an infertility problem in adult dogs and is hard to detect with routine gynecological examinations. Adenomyosis can be seen unaccompanied by other gynecological problems such as endometritis or leiomyomas, while mammary tumors with adenomyosis have been previously reported in women and in only one case of a bitch.[...](AU)

Effects of ovarian pathologies and uterine inflammations on adenomyosis in bitches

Background: Adenomyosis is a non-neoplastic condition, characterized by the presence of endometrial glands or cells in the myometrium. Adenomyosis is defined by post-operative microscopic examination of uterine tissue and a rarely seen infertility problem in bitches. The process of transformation of healthy uterus into adenomiotic uterus is still a mystery. We aimed to determine role of ovarian pathologies and uterine inflammations on pathogenesis of uterine adenomyosis in bitches.Cases: After ovariohysterectomy, the uteri were fixed and processed by routine methods. Sections were stained with HematoxylinEosin, Masson’s trichrome and Periodic-Acid-Schiff and immunohistochemically; with p53 protein, Ki-67, α-smooth-muscle actin, cytokeratin-CK 8, 14, 19 antibodies, estrogen and progesterone receptors by Avidin-Biotin-Complex-Peroxidase method. Histopathologically, 7 of the collected tissue samples (n = 38) were diagnosed as adenomyosis. There were unilateral (n = 6) or bilateral (n = 1) adenomyosis in which endometrial glands had broken through the myometrium, and in some cases there were fibromyoma, inflammation, papillary hyperplasia and cysts in glands. Vaginal fibroma, fibromyoma and benign mix tumor (n = 1), simple carcinoma (n = 3), carcinosarcoma (n = 3) in mammary gland were determinated histopathologically. In addition to these findings, follicular cysts (n = 4), parovarian cyst (n = 1), adenocarcinoma and Rete ovarii adenoma were diagnosed in some ovaries. The CK 19 was scored at endometrial glands (n = 2) positively and also, muscle fibers were stained positively with α-smooth-muscle actin antibody (n = 7).Discussion: Adenomyosis is an infertility problem in adult dogs and is hard to detect with routine gynecological examinations. Adenomyosis can be seen unaccompanied by other gynecological problems such as endometritis or leiomyomas, while mammary tumors with adenomyosis have been previously reported in women and in only one case of a bitch.[...]

Comparação de duas classificações histopatológicas com o padrão de imuno-marcação para KIT, a avaliação da proliferação celular e com a presença de mutações no c-KIT de mastocitomas cutâneos caninos / Comparison of two histopathological classifications with pattern of immunostaining KIT, evaluation of cell proliferation and the presence of mutations in c-KIT canine cutaneous mast cell tumors

A graduação histopatológica é o método de eleição para prever o comportamento biológico do mastocitoma e, atualmente, são utilizados os métodos de Patnaik e de Kiupel para dividi-los em graus de malignidade. O objetivo do presente trabalho foi comparar as duas classificações histológicas com as variáveis clínicas, os marcadores imuno-histoquímicos e com a presença de mutações para verificar as características que estão mais relacionadas entre si e com os piores prognósticos. Foram avaliados 61 animais, levando em consideração o sexo, a raça, a idade, a localização tumoral, o grau tumoral pelas classificações de Patnaik e Kiupel, a infiltração de eosinófilos, a marcação do KIT e do Ki-67 e a presença de mutação. As variáveis foram correlacionadas utilizando os testes de qui-quadrado, teste de Fisher, teste de verossimilhança e o teste de risco relativo. Os animais idosos foram os mais acometidos, enquanto os animais sem raça definida e os das raças Boxer, Labrador e Pinscher foram aqueles com maior predisposição ao desenvolvimento tumoral. A localização e a idade estão associadas ao grau tumoral. Os tumores em cabeça, pescoço e região genital têm 10 vezes mais chance de serem classificados como de alto grau (RR=10,667; IC95% 1,909-59,615, p=0,004) e os idosos oito vezes mais chance (RR=8,00; IC95% 0,955-67,009; p=0,029). Os tumores de grau II e os de baixo grau foram os mais encontrados e as duas classificações histológicas demonstram correlação muito significativa entre si (p<0,001). A concentração do infiltrado eosinofílico não demonstrou correlação significativa com nenhuma das classificações histológicas. O padrão KIT foi dependente da localização tumoral (p=0,015), já que os tumores genitais, na cabeça e no pescoço possuíam 18 vezes mais chance de apresentarem padrão citoplasmático (RR=18,571; IC95% 1,954-176,490; p=0,003), e das classificações de Patnaik (p=0,001) e Kiupel (p<0,001), sendo que os tumores de alto grau têm 36 vezes mais chance de apresentarem padrão citoplasmático (RR=36,00, IC95% 4,35-297,948; p<0,001). A marcação do Ki-67 demonstrou dependência da localização (p=0,024). A presença de mutação no exon 11 do domínio justamembrana não demonstrou associação com nenhuma das variáveis clínicas, das classificações histológicas, da concentração de eosinófilos e do padrão KIT. A presença da mutação foi correlacionada significativamente apenas ao Ki-67 (p=0,010). Os resultados obtidos sugerem que a localização é a variável clínica mais relacionada ao prognóstico e que apenas a classificação de Kiupel associada à imuno-histoquímica são eficientes para avaliar o comportamento tumoral.(AU)

Histopathological classification is the method of choice to predict the biological behavior of mast cell tumor. Currently, the methods of Patnaik and Kiupel are used to divide them into degrees of malignancy. The objective of this study was to compare the two histological grades with clinical, immunohistochemical markers and the presence of mutations to evaluate the characteristics that are more related to each other and with the worst prognosis. Sixty-one dogs were evaluated, taking into account sex, race, age, tumor location, tumor grade by grades Patnaik and Kiupel, infiltration of eosinophils, pattern KIT, Ki-67 and the presence of mutation . The variables were correlated using the chi-square test, Fisher's exact test, verisimilitude test and relative risk test. The older dogas were the most affected, while animals mixed breed, Boxer breeds, Labrador and Pinscher were those with greater predisposition to tumor development. The tumor location and age are associated with tumor grade. The tumors in the head, neck and genital area are 10 times more likely to be classified as high-grade (RR=10,667; 95% CI 1.909 to 59.615, p=0.004) grau and old-aged eight times more likely (RR=8.00, 95% CI 0.955 to 67.009, p=0.029). The grade II tumors and the low degree were the most frequent and the two histological scores showed very significant correlation (p<0.001). The concentration of eosinophilic infiltration showed no significant correlation with any of the histological scores. The standard KIT was dependent on tumor location (p=0.015), genital tumors, head and neck had 18 times more likely to have cytoplasmic pattern (RR=18.571, 95% CI 1.954 to 176.490, p=0.003), and Patnaik (p=0.001) and Kiupel (p<0.001) ratings. The high grade tumors are 36 times more likely to have cytoplasmic pattern (RR 36.00, 95% CI 4.35-297.948 p<0.001). The marking of the Ki-67 showed a dependence on the location (p=0.024). The presence of mutation in exon 11 of the juxtamembrane domain showed no association with any of the clinical variables of the histological scores, the concentration of eosinophils and KIT standard. The presence of the mutation was significantly correlated only to the Ki-67 (p=0, 010). The results suggest that the location is the clinical variable most related to prognosis and that only Kiupel classification associated with immunohistochemistry are efficient to assess tumor behavior.(AU)

Comparação de duas classificações histopatológicas com o padrão de imuno-marcação para KIT, a avaliação da proliferação celular e com a presença de mutações no c-KIT de mastocitomas cutâneos caninos / Comparison of two histopathological classifications with pattern of immunostaining KIT, evaluation of cell proliferation and the presence of mutations in c-KIT canine cutaneous mast cell tumors

A graduação histopatológica é o método de eleição para prever o comportamento biológico do mastocitoma e, atualmente, são utilizados os métodos de Patnaik e de Kiupel para dividi-los em graus de malignidade. O objetivo do presente trabalho foi comparar as duas classificações histológicas com as variáveis clínicas, os marcadores imuno-histoquímicos e com a presença de mutações para verificar as características que estão mais relacionadas entre si e com os piores prognósticos. Foram avaliados 61 animais, levando em consideração o sexo, a raça, a idade, a localização tumoral, o grau tumoral pelas classificações de Patnaik e Kiupel, a infiltração de eosinófilos, a marcação do KIT e do Ki-67 e a presença de mutação. As variáveis foram correlacionadas utilizando os testes de qui-quadrado, teste de Fisher, teste de verossimilhança e o teste de risco relativo. Os animais idosos foram os mais acometidos, enquanto os animais sem raça definida e os das raças Boxer, Labrador e Pinscher foram aqueles com maior predisposição ao desenvolvimento tumoral. A localização e a idade estão associadas ao grau tumoral. Os tumores em cabeça, pescoço e região genital têm 10 vezes mais chance de serem classificados como de alto grau (RR=10,667; IC95% 1,909-59,615, p=0,004) e os idosos oito vezes mais chance (RR=8,00; IC95% 0,955-67,009; p=0,029). Os tumores de grau II e os de baixo grau foram os mais encontrados e as duas classificações histológicas demonstram correlação muito significativa entre si (p<0,001). A concentração do infiltrado eosinofílico não demonstrou correlação significativa com nenhuma das classificações histológicas. O padrão KIT foi dependente da localização tumoral (p=0,015), já que os tumores genitais, na cabeça e no pescoço possuíam 18 vezes mais chance de apresentarem padrão citoplasmático (RR=18,571; IC95% 1,954-176,490; p=0,003), e das classificações de Patnaik (p=0,001) e Kiupel (p<0,001), sendo que os tumores de alto grau têm 36 vezes mais chance de apresentarem padrão citoplasmático (RR=36,00, IC95% 4,35-297,948; p<0,001). A marcação do Ki-67 demonstrou dependência da localização (p=0,024). A presença de mutação no exon 11 do domínio justamembrana não demonstrou associação com nenhuma das variáveis clínicas, das classificações histológicas, da concentração de eosinófilos e do padrão KIT. A presença da mutação foi correlacionada significativamente apenas ao Ki-67 (p=0,010). Os resultados obtidos sugerem que a localização é a variável clínica mais relacionada ao prognóstico e que apenas a classificação de Kiupel associada à imuno-histoquímica são eficientes para avaliar o comportamento tumoral.(AU)

Histopathological classification is the method of choice to predict the biological behavior of mast cell tumor. Currently, the methods of Patnaik and Kiupel are used to divide them into degrees of malignancy. The objective of this study was to compare the two histological grades with clinical, immunohistochemical markers and the presence of mutations to evaluate the characteristics that are more related to each other and with the worst prognosis. Sixty-one dogs were evaluated, taking into account sex, race, age, tumor location, tumor grade by grades Patnaik and Kiupel, infiltration of eosinophils, pattern KIT, Ki-67 and the presence of mutation . The variables were correlated using the chi-square test, Fisher's exact test, verisimilitude test and relative risk test. The older dogas were the most affected, while animals mixed breed, Boxer breeds, Labrador and Pinscher were those with greater predisposition to tumor development. The tumor location and age are associated with tumor grade. The tumors in the head, neck and genital area are 10 times more likely to be classified as high-grade (RR=10,667; 95% CI 1.909 to 59.615, p=0.004) grau and old-aged eight times more likely (RR=8.00, 95% CI 0.955 to 67.009, p=0.029). The grade II tumors and the low degree were the most frequent and the two histological scores showed very significant correlation (p<0.001). The concentration of eosinophilic infiltration showed no significant correlation with any of the histological scores. The standard KIT was dependent on tumor location (p=0.015), genital tumors, head and neck had 18 times more likely to have cytoplasmic pattern (RR=18.571, 95% CI 1.954 to 176.490, p=0.003), and Patnaik (p=0.001) and Kiupel (p<0.001) ratings. The high grade tumors are 36 times more likely to have cytoplasmic pattern (RR 36.00, 95% CI 4.35-297.948 p<0.001). The marking of the Ki-67 showed a dependence on the location (p=0.024). The presence of mutation in exon 11 of the juxtamembrane domain showed no association with any of the clinical variables of the histological scores, the concentration of eosinophils and KIT standard. The presence of the mutation was significantly correlated only to the Ki-67 (p=0, 010). The results suggest that the location is the clinical variable most related to prognosis and that only Kiupel classification associated with immunohistochemistry are efficient to assess tumor behavior.(AU)

Imuno-expressão de COX-2, caspase3, Ki67e survivin em tumor venéreo transmissível canino / COX-2, caspase 3, Ki67 and survivin immunoexpresion in canine transmissible venereal tumor / Imunoexpresión de COX-2, caspase 3, ki67 y survivin en tumor venéreo transmisible canino

O tumor venéreo transmissível (TVT) é uma neoplasia de células redondas de aspecto plasmocitóide ou linfocitóide. O tumor apresenta várias particularidades. Nos últimos anos, tem-se evidenciado aumento progressivo de tumores com elevados porcentuais de agressividade e variável resposta à quimioterapia, inclusive resistência; desta forma, tentar predizer este comportamento torna-se importante para auxiliar decisões quanto ao prognóstico e manejo do tumor antes e durante a terapia. Sabendo-se que a utilização da survivina, bem como da caspase-3, do Ki-67 e da COX-2 são importantes para auxiliar no prognóstico, no manejo do paciente e na monitoração da doença durante e após a terapia, este trabalho visou observar em TVTs diferenças na expressão dos imunomarcadores acima citados. Para tal, foi utilizada a técnica de imunocitoquímica em preparações citológicas de 30 tumores de cães atendidos no Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP, Campus de Botucatu e os dados analisados pelo teste de spearman (p<0,05). A positividade da survivina variou de 96,15 a 100% em 200 células contadas por amostra, sendo sua principal localização citoplasmática. A marcação pelo anticorpo anti-caspase-3 nos 30 casos de TVT foi baixa, variando de 0 a 6,5% de positividade em 200 células contadas. Em 21 casos, foi possível observar marcação pelo Ki-67, e houve uma média de positividade de 15,57%. Finalmente, em todos os casos houve expressão de COX-2 com valores que variaram de 90,66 a 100% de positividade em 200 células contadas, exceto por um caso que apresentou 24,5% de positividade. Em conclusão, é possível que o emprego destes marcadores no TVT possa auxiliar no estabelecimento de um tratamento diferenciado, pelo que recomendamos, avaliar sua expressão comparando com o tipo de resposta à terapia.

Transmissible venereal tumor is a neoplasm of round cell plasmocitoide and linfocitoide aspect. The tumor present several particularities, for example, in the recent years has been evidenced a progressive increase of tumor with high percentages of aggressiveness and different response to chemotherapy, including resistance. Research this comportment to predict this behavior becomes important to aid decision as to the prognosis and management of the tumor before and during therapy. It is know that the use of the survivin, caspase-3, Ki67 and COX-2 are important to aid prognosis, the patient management and monitoring the tumor during and after therapy. This study aimed to identify differences in the expression of the above mentioned immunomarkers in TVT. For this purpose, the technique of immunocytochemistry on cytological preparations of 30 tumors of dogs examined at the Veterinary Hospital FMVZ-UNESP, Botucatu was used and the date analyzed by the spearman test (p<0,05). The survivin positivity ranged from 96.15 to 100% in 200 cells counted per sample, and its main cytoplasmic localization. The labeling by the anti-caspase-3 in 30 cases of TVT was low, ranging from 0 to 6.5% positivity in 200 cells counted. In 21 cases it was observed by Ki 67 labeling and there was an average of 15 57% positivity. Finally, in all cases there was expression of COX-2 with values ranging from 90.66 to 100% positivity in 200 cells counted, except for one case which showed 24.5% positivity. In conclusion, it is possible that the use of these markers in the TVT may assist in establishing a differential treatment, and we recommend, evaluate its expression compared with the type of response to therapy.

El tumor venéreo transmisible (TVT) es una neoplasia de células redondas de aspecto plasmocitóide o linfocitoide. El tumor presenta varias particularidades, por ejemplo, en los últimos años se ha evidenciado aumento progresivo de tumores con elevados porcentajes de agresividad y variable respuesta a la quimioterapia, inclusive resistencia; desta forma, intentar predecir este comportamiento se torna importante para auxiliar decisiones relacionadas con el pronóstico y manejo del tumor antes y durante de la terapia. Se sabe que la utilización de la survivina, así como la caspasa-3, del Ki-67 y de la COX-2, son importantes para auxiliar el pronóstico, manejo del paciente y elmonitoramiento de un tumor durante la terapia, así, este trabajo busco identificaren TVTs la diferencia en la expresión de losinmunomarcadores citados. Para ello, fue utilizada la técnica de inmunocitoquímica en preparaciones citológicas de 30 tumores de caninos atendidos en el Hospital Veterinario de la FMVZ-UNESP, Campus Botucatu y los datos análizados a través del test de spearman (p<0,05). La positividad de la survivina vario de 96,15 %a 100% en 200 células contadas. La marcación anti-caspasa -3 en los 30 casos de TVT fue baja variando de 0% a 6,5%. En 21 casos fue posible observar marcación por el Ki67, y hubo una media de positividad de 15,57%. Finalmente, en todos los casos hubo expresión de COX-2 con valores que variaron de 99,66 % a 100% de positividad en 200 células contadas, excepto por un caso que presento 24,5 % de positividad. En conclusión, es posible que el empleo de estos marcadores en TVT puedan auxiliar el establecimiento de un tratamiento diferenciado, por lo que recomendamos, evaluar su expresión comparada con el tipo de respuesta a la terapia.

NEOPLASIAS MELANOCÍTICAS UVEAIS EM CÃES E GATOS: ASPECTOS MORFOLÓGICOS E IMUNO-HISTOQUÍMICOS

As lesões mais frequentes envolvendo o bulbo ocular são de natureza neoplásica e as melanocíticas são as mais comuns na úvea dos cães e na íris dos gatos. Podem ser classificadas como melanocitomas (benignas) e melanomas (malignas). Para melhor compreensão do comportamento biológico de neoplasias melanocíticas uveais em cães e gatos, foram utilizadas ferramentas histológicas e imuno-histoquímicas em 32 bulbos oculares, 27 de cães e cinco de gatos. As neoplasias dos bulbos oculares destes animais foram classificadas em benignas (19/27 - cães) ou malignas (8/27 - cães; 5/5 - gatos), e a localização das estruturas oculares envolvidas foi descrita. Determinaram-se, também, os tipos celulares destas neoplasias, os quais foram denominados como epitelioides, fusiformes e mistas, bem como tipos especiais, como de células balonosas, células gigantes multinucleadas e células em anel de sinete. Além disso, foram caracterizadas porcentagem de células com melanina, intensidade de melanina nas células, anisocitose e anisocariose, índice mitótico, presença de inflamação e necrose intratumoral, invasão vascular e desenvolvimento de glaucoma secundário à neoplasia. Para a confirmação da origem melanocítica, foi realizada imuno-histoquímica com os anticorpos anti-PNL2 (29/32) e anti-melan-A (3/3). O índice proliferativo foi verificado, utilizando-se o anticorpo anti-Ki-67, que variou de 2,8 a 12% em melanocitomas de cães, com média de 6,45 ± 4,1 e de 15,8 a 70% em melanomas de cães, com média de 38,3 ± 25,21. Os melanomas em gatos tiveram variação do índice proliferativo de 10,8 a 30,4%, com média de 18,96 ± 7,36. Também foi avaliado o índice apoptótico, utilizando o anticorpo anticaspase-3, que variou de 3,8 a 50% em melanocitomas de cães, com média de 16,62 ± 13,26 e de 30 a 84% em melanomas de cães, com média de 58,04 ± 24,25. Nos gatos, o índice apoptótico variou de 3,6 a 92%, com média de 23,16 ± 38,62. A proteína BAP1, cujo padrão de marcação poderia refletir a agressividade tumoral, similar ao relatado para neoplasias oculares melanocíticas em seres humanos, foi também avaliada, e todas as neoplasias uveais do presente estudo foram imunomarcadas. As características histológicas e imuno-histoquímicas encontradas nas neoplasias melanocíticas uveais em cães e gatos deste estudo ampliaram o conhecimento sobre o uso destas ferramentas como fatores prognósticos; entretanto, recomenda-se mais estudos com acompanhamento da sobrevida do animal após o diagnóstico

The most frequent lesions involving the eye are of neoplastic nature and melanocytic lesions are the most common in the uvea of dogs and in the iris of cats. They can be classified as melanocytomas (benign) and melanomas (malignant). For a better understanding of the biological behavior of uveal melanocytic neoplasms in dogs and cats, histological and immunohistochemical tools were applied to 32 eyes, 27 from dogs and five from cats. The ocular neoplasms of these animals were classified as benign (19/27 - dogs) or malignant (8/27 - dogs; 5/5 - cats), and the location of the involved ocular structures was described. The cell types of these neoplasms were also determined, including epithelioid, spindle and mixed, as well as special types, such as balloon cells, multinucleated giant cells and signet rings cells. In addition, the percentage of cells with melanin, the intensity of melanin within the cells, anisocytosis and anisokaryosis, the mitotic index, the presence of intratumoral inflammation and necrosis, vascular invasion and the development of secondary glaucoma were determined. To confirm the melanocytic origin, immunohistochemistry was performed with anti-PNL2 (29/32) and anti-melan-A (3/3) antibodies. The proliferative index in dogs was verified using the antiKi-67 antibody, which varied from 2.8 to 12% in melanocytomas, with an average of 6.45 ± 4.1 and from 15.8 to 70% in melanomas, with an average of 38.3 ± 25.21. The proliferative index for cats varied from 10.8 to 30.4%, with an average of 18.96 ± 7.36. The apoptotic index was also evaluated for both species, using the anti-caspase-3 antibody. For dogs, the apoptotic index varied from 3.8 to 50% in melanocytomas, with an average of 16.62 ± 13.26 and from 30 to 84% in melanomas, with an average of 58.04 ± 24.25. For cats, the apoptotic index ranged from 3.6 to 92%, with an average of 23.16 ± 38.62. The BAP1 protein, the marking pattern of which might influence tumor aggressiveness as reported for melanocytic ocular neoplasms in humans, was also evaluated in all uveal neoplasms in the present study. The histological and immunohistochemical characteristics found in uveal melanocytic neoplasms in dogs and cats in this study expanded the knowledge about the use of these tools as prognostic factors; however, further studies with animal survival follow-up after diagnosis are recommended

GÉRMEN DE MILHO INTEGRAL EXTRA GORDO EM SUBSTITUIÇÃO AO MILHO MOÍDO EM DIETAS PARA OVINOS

Avaliou-se o efeito da substituição do milho moído por gérmen de milho integral extra gordo (0; 25; 50; 75 e 100% na matéria seca - MS) sobre o consumo e a digestibilidade aparente da MS e dos nutrientes, comportamento ingestivo, dinâmica ruminal, balanço hídrico, parâmetros ruminais e sanguíneos e eficiência de utilização de nitrogênio. Cinco ovinos machos castrados, fistulados no rúmen, com peso corporal médio de 67,56 + 9,13kg foram distribuídos em delineamento experimental Quadrado Latino 5x5. Os consumos de matéria MS e nutrientes não foram influenciados pelos níveis de substituição, exceto o consumo de extrato etéreo (EE), que aumentou linearmente (0,018; 0,032; 0,050; 0,073 e 0,075 kg/dia, respectivamente); enquanto os coeficientes de digestibilidade aparente de proteína bruta (PB) e EE aumentaram linearmente. Os tempos despendidos com ruminação, alimentação e ócio e as eficiências de alimentação e ruminação em função dos consumos de MS e fibra em detergente neutro (FDN) não foram influenciados. O balanço hídrico não foi alterado, com exceção da excreção de água via fezes, que reduziu linearmente (0,487; 0,423; 0,398; 0,364 e 0,373 kg/dia, respectivamente). Não houve efeito dos níveis de substituição no pool de MS, FDN e fibra em detergente neutro indigestível (FDNi), porém, o pool de EE aumentou linearmente (13,0; 17,42; 22,19; 23,3 e 25,1g, respectivamente). As taxas passagem (Kp), ingestão (Ki) e digestão (Kd) da MS e FDN, e a taxa de passagem (Kpi) da FDNi não foram influenciadas. O pH ruminal não foi influenciado pelos níveis de substituição, mas ao longo dos horários de coleta apresentou comportamento quadrático, com valor mínimo estimado em 5,91; 3,38 horas após a alimentação. Não houve efeito no nitrogênio amoniacal (NAR) em função dos níveis de substituição, porém foi observado efeito linear decrescente em função dos horários de coleta (20,3; 21,6; 16,2; 13,4 e 12,1 mg/dL, respectivamente), apresentando interação entre os níveis de substituição e tempo de coleta. Foi observado comportamento quadrático para o acetato, com concentração máxima de 60,26 mmol/L no nível de 32,05%, e efeito linear decrescente para o butirato (9,5; 10,3; 10,0; 8,6 e 6,1 mmol/L), em função da substituição. As concentrações de acetato e propionato, relação de acetato:propionato e o total de ácidos graxos de cadeia curta apresentaram comportamento quadrático em função dos horários de coleta, com máxima de 58,19; 23,25; 2,57 e 90,49 mmol/L, estimada às 3,34; 3,43; 3,60 e 3,34 horas após a alimentação, respectivamente. Não houve efeito (P>0,05) dos níveis de substituição sobre eficiência de utilização do nitrogênio, No entanto, foi observado efeito linear decrescente do nitrogênio excretado nas fezes (6,27; 5,63; 5,26; 5,24 e 4,72 g/dia, respectivamente). Além disso, foi observado que colesterol e triglicerídeos aumentaram linearmente, com valores médios de 67,45 e 15,34 mg/dL, respectivamente; enquanto os níveis de glicose e frutosamina não foram influenciados. Os níveis de substituição do milho moído por gérmen de milho integral extra gordo (GMIEG) não influenciam negativamente as variáveis avaliadas. Sendo assim, recomenda-se a substituição total do milho moído por GMIEG.

The effect of replacing ground corn with extra fat whole corn germ (0; 25; 50; 75 and 100% in dry matter - DM) was evaluated on consumption and apparent digestibility of DM and nutrients, ingestive behavior, rumen dynamics, water balance, ruminal and blood parameters and nitrogen utilization efficiency. Five male sheep, castrated in the rumen, with an average body weight of 67.56 + 9.13 kg were distributed in a 5x5 Latin Square experimental design. The consumption of MS matter and nutrients were not influenced by the substitution levels, except the consumption of ether extract (EE) which increased linearly (0.018; 0.032; 0.050; 0.073 and 0.075 kg/day, respectively) while the coefficients of apparent digestibility of crude protein (CP) and EE increased linearly. The time spent on rumination, feeding and leisure and the efficiency of feeding and rumination according to the consumption of DM and neutral detergent fiber (NDF) were not influenced. The water balance was not altered, except for the excretion of water via feces, which decreased linearly (0.487; 0.423; 0.398; 0.364 and 0.373 kg/day, respectively). There was no effect of the substitution levels in the pool of DM, NDF and indigestible neutral detergent fiber (NDFi), however, the EE pool increased linearly (13.0; 17.42; 22.19; 23.3 and 25, 1g, respectively). Passage (Kp), intake (ki) and digestion (kd) rates of MS and NDF, and NDFi passage rate (Kpi) were not influenced. The substitution levels did not influence the ruminal pH, but over the collection times, it showed a quadratic behavior, with a minimum value estimated at 5.91, 3.38 hours after feeding. There was no effect on ammoniacal nitrogen (NAR) due to the substitution levels, however, a decreasing linear effect was observed depending on the collection times (20.3; 21.6; 16.2; 13.4 and 12.1 mg/dL, respectively), showing interaction between the replacement levels and collection time. Quadratic behavior was observed for acetate, with a maximum concentration of 60.26 mmol/L at the level of 32.05% and a decreasing linear effect for butyrate (9.5; 10.3; 10.0; 8.6 and 6.1 mmol/L), depending on the replacement. The concentrations of acetate and propionate, acetate: propionate ratio and the total of short-chain fatty acids showed a quadratic behavior according to the collection times, with a maximum of 58.19; 23.25; 2.57 and 90.49 mmol/L, estimated at 3.34; 3.43; 3.60 and 3.34 hours after feeding, respectively. There was no effect (P> 0.05) of substitution levels on nitrogen utilization efficiency; however, a decreasing linear effect of nitrogen excreted in the faces was observed (6.27; 5.63; 5.26; 5.24 and 4.72 g / day, respectively). In addition, it was observed that cholesterol and triglycerides increased linearly, with mean values of 67.45 and 15.34 mg / dL, respectively, while glucose and fructosamine levels had no effect. The levels of substitution of ground corn with extra fat whole corn germ (GMIEG) do not negatively influence the variables evaluated. Therefore, it is recommended that GMIEG be replaced entirely with ground corn.

Avaliação histológica, histoquímica e imuno-histoquímica de mastocitomas cutâneos em cães

O mastocitoma é o tumor mesenquimal cutâneo mais prevalente do cão. Na região de Santa Maria, RS, este neoplasma corresponde a 20% dos tumores malignos de pele diagnosticados na rotina laboratorial. O diagnóstico clínico-patológico pode ser realizado através da citologia, exame histopatológico e imuno-histoquímico. A técnica de imuno-histoquímica é empregada para diferenciar tumores biologicamente mais agressivos de tumores menos agressivos. Entretanto, alguns dos imunomarcadores atualmente disponíveis sofrem influência pela fixação em formol, interferindo nos resultados. O principal objetivo deste estudo foi avaliar em mastocitomas cutâneos caninos a interferência do formol na imunomarcação para a proteína KIT e a proteína Ki67 em quatro tempos de fixação pré-estabelecidos (24, 48, 72 e 96h). Foram utilizados ainda, dois sistemas de amplificação para determinar possíveis diferenças na detecção para cada um dos dois anticorpos estudados. Este estudo foi dividido em duas partes: um estudo retrospectivo, analisando amostras de tecidos de 25 casos de biópsias sem conhecimento do tempo de fixação; e um estudo prospectivo, analisando amostras de tecidos de 12 casos com tempos de fixação conhecidos. Em ambos os estudos foram aplicados dois sistemas de graduação histológica (Patnaik e Kiupel), a coloração especial de azul de toluidina e a imuno-histoquímica para as proteínas KIT e Ki67. Adicionalmente, no estudo prospectivo, foram testados dois sistemas de amplificação para a proteína Ki67 (biotinilado e não biotinilado) e a técnica de AgNOR (contagem das regiões organizadoras nucleolares argirofílicas). Foi observado que a fixação por até 96h não interferiu na avaliação imuno-histoquímica para a proteína KIT. Porém, para a proteína Ki67, houve marcada interferência quando a fixação foi superior a 24h. Ambos os sistemas de amplificação utilizados mostraram resultados satisfatórios. Porém, não houve diferenças e/ou melhora nos resultados da imunomarcação para o Ki67, quando comparados os dois sistemas de amplificação. A utilização adicional do método histoquímico de AgNOR, para avaliar a taxa de proliferação celular, é sugerida quando o tempo de fixação do neoplasma for desconhecido ou superior a 24h.

Mast cell tumors (MCTs) is the most prevalent cutaneous mesenchymal tumor of the dog. In the region of Santa Maria, RS, this neoplasm corresponds to 20% of the malignant skin tumors diagnosed in the laboratory routine. The clinical-pathological diagnosis can be made through cytology, histopathological examination and immunohistochemistry. The immunohistochemical technique is used to differentiate biologically more aggressive tumors from less aggressive tumors. However, some of the currently available immunomarkers are influenced by formalin fixation, interfering with the results. The main objective of this study was to evaluate the interference of formaldehyde in the immunostaining of KIT protein and Ki67 protein in four pre-established fixation times (24, 48, 72 and 96h) in MCTs. Two amplification systems were also used to determine possible differences in detection for each one of the antibodies studied. This study was divided into two parts: a retrospective study, analyzing tissue samples from 25 cases of biopsies without knowledge of fixation time; and a prospective study, analyzing tissue samples from 12 cases with known fixation times. In both studies, two histological grading systems (Patnaik and Kiupel), the special staining of toluidine blue and the immunohistochemistry for KIT and Ki67 proteins were applied. Additionally, in the prospective study, two amplification systems (biotinylated and not biotinylated) for the Ki67 protein and the AgNOR technique (counting of the argirophilic nucleolar organizing regions) were tested. It was observed that the fixation for up to 96h did not interfere in the immunohistochemical evaluation for the KIT protein. However, for Ki67 protein, there was marked interference when the fixation was greater than 24h. Both amplification systems showed satisfactory results. However, there were no differences and/or improvement in the results of immunostaing for Ki67 when compared the amplification systems. The additional useof the AgNOR method to evaluate the rate of cell proliferation is suggested when the fixation time of the neoplasm is unknown or greater than 24 hours.

Relação da expressão de fatores de crescimento celular (IGF-1) e (SCF) com fatores prognósticos e o alvo da rapamicina em mamíferos (m-TOR) em mastocitomas cutâneos caninos / IGF-1 and SCF protein expression in cutaneous mast cell tumors in dogs and relation to prognostic factors and mammalian target of rapamycin (m-TOR)

O mastocitoma cutâneo (MTC) é a neoplasia maligna mais comum na pele dos cães e seu comportamento biológico é muito variável. Dentre os fatores prognósticos estudados nos MTCs, a classificação histopatológica, o índice proliferativo e o padrão de expressão doc-KIT são os que apresentam uma associação mais relevante com o provável prognóstico deste tumor. O objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão proteica de fator de crescimento semelhante à insulina tipo 1 (IGF-1), fator de célula tronco (SCF) e sua relação com o receptor tirosina quinase (c-KIT), alvo da rapamicina em mamíferos (m-TOR), grau histológico, índice proliferativo pelo KI-67e o número de figuras de mitose (IM) com dados clínicos de cães com MTCs . Foram utilizadas 133 amostras de MTCs, provenientes de 133 cães, dispostas em lâminas de microarranjo de tecidos (TMA). A técnica de imuno-histoquímica foi utilizada para a avaliação destas proteínas. Observou-se associação entre SCF e, a graduação histopatológica proposta em 2011, índice mitótico, proliferação celular (KI-67), escore de IGF-1, local da lesão, idade dos animais e padrão imuno-histoquímico do receptor c-KIT. A relação de dependência também foi observada entre IGF-1 e o porte dos animais, IM, m-TOR e c-KIT. A expressão de SCF teve relacção com a agressividade dos MTCs caninos, uma vez que foi mais freqüente em MTCs com c-KIT citoplasmático. A relação entre a expressão de IGF-1, SCF, c-KIT e m-TOR pode estar associada à integralização de suas vias de ação. A expressão de IGF-1 está associada à MTCs em cães de porte grande.(AU)

Cutaneous mast cell tumor (MCT) is one of the most common neoplasms in the skin of dogs and express variable biological behavior. Among the MTC aspects studied, histological classification, proliferative index and protein expression of c-KIT show the most defined connection with the tumor prognostic. The aim of this study was to evaluate the protein expression of insulin-like growth factor type 1 (IGF-1), steam cell factor (SCF) and theit relationship with tyrosine kinase receptor (c-KIT), mammalian target of rapamycin (m-TOR), histological classification (KI-67), proliferative and mitotic index and epidemiological data in MTCs. In this study 133 MTC samples from 133 animals were used, arranged in tissue microarray (TMA) slides. The TMA was used for evaluation the proteins. An association was observed between SCF and histological grade proposed in 2011, mitotic index, cell proliferation, IGF-1, lesion site, age of the animals, and immunohistochemical pattern c-KIT receptor. The dependence relationship was also observed between IGF-1 and animal size, mitotic index, m-TOR and c-KIT. The SCF protein expression was related to canine MTCs aggressiveness, since it is more frequent in MCTs with c-KIT cytoplasmic. The relationship between the expression of IGF-1, SCF, c-KIT e m-TOR can be associated with the integration of its actions ways. The IGF-1 expression is associated with large dog breeds MTCs.(AU)

Ki-67 expression score correlates to survival rate in gastrointestinal stromal tumors (GIST) / Escore de expressão de Ki-67 correlaciona-se com taxa de sobrevida em tumores estromais gastrointestinais (GIST)

PURPOSE: To evaluate the immunohistochemical expression of p16, Ki-67, p53 and Bcl-2 proteins in gastrointestinal stromal tumors (GIST); to assess the possible association between these variables and clinical and histopathological factors of cancer; and to check for prognostic value of these variables (survival and recurrence). METHODS: A sample of 55 patients treated surgically for GIST in three hospitals was studied. The surgically excised tumors were confirmed as GIST by KIT, vimentin, desmin S100 protein, CD117, 1A4 and CD34 assessment in paraffin blocks. RESULTS: Only 9 (16%) cases of GIST were positive for p53, p16 was positive among 43.6%; 80% of GISTs showed staining for Bcl-2. The proliferative index (expressed as the proportion of positive cells) assessed by immunohistochemical expression of Ki-67 was high in 49% of cases. Elevated Ki-67 scores were associated to high histological grade (p=0.0026) and mitosis index, MI (p=0.0001). High Ki-67 index was associated to death. Expression of p53, p16 and Bcl-2 did not correlate to morphological or clinical variables. CONCLUSIONS: Ki-67 immunohistochemical evaluation should be included in preoperative evaluation of GIST biopsies or surgical specimens as a prognostic tool for clinical staging; and all other proteins studied (Bcl-2, p53 and p16) did not play a role in GIST metabolic or carcinogenic process, remaining without prognostic value.(AU)

OBJETIVO: Avaliar a expressão imunoistoquímica de p16, Ki-67, p53 e Bcl-2 proteínas em tumores gastrointestinais estromais (GIST); determinar a possível associação entre essas variáveis e fatores clínicos e histopatológicos de câncer, e para verificar o valor prognóstico destas variáveis (sobrevivência e recorrência). MÉTODOS: Uma amostra de 55 pacientes tratados cirurgicamente para GIST em três hospitais foi estudada. Os tumores extirpados cirurgicamente foram confirmados como GIST por KIT, vimentina, proteína desmina S100, CD117, 1A4 e avaliação de CD34 em blocos de parafina. RESULTADOS: Apenas nove (16%) casos de GIST foram positivos para p53, p16 foi positiva em 43,6%, 80% dos GIST apresentaram coloração para Bcl-2. O índice proliferativo (expresso como a proporção de células positivas), avaliado pela expressão imunoistoquímica de Ki-67, foi elevado em 49% dos casos. Escores de Ki-67 elevados foram associados com alto grau histológico (p=0,0026) e índice de mitose, MI (p=0,0001). Alto índice de Ki-67 foi associado à morte. Expressão da p53, p16 e Bcl-2 não se correlacionou com as variáveis morfológicas ou clínicas. CONCLUSÕES: A avaliação imunoistoquímica de Ki-67 deve ser incluída na avaliação pré-operatória de biópsias ou peças cirúrgicas de GIST como uma ferramenta prognóstica para o estadiamento clínico, e todas as outras proteínas estudadas (Bcl-2, p53 e p16) não desempenharam um papel no processo metabólico ou carcinogênico em GIST, mantendo-se sem valor prognóstico.(AU)

Propostas terapêuticas para o mastocitoma canino baseadas em fatores prognósticos clínicos, anátomo-patológicos, imuno-histoquímicos e genéticos

Essa tese teve como objetivo avaliar a eficiência de fatores prognósticos e de diferentes abordagens terapêuticas do mastocitoma canino, considerando à elevada incidência e heterogeneidade de apresentação clínica e comportamento biológico dessa neoplasia, consituindo um guia para prognóstico e tratamento. Foram incluídos cães referenciados ao Hospital Veterinário (Universidade Federal de Minas Gerais, Brasil) e Queen's Veterinary School Hospital (University of Cambridge, Reino Unido), com diagnóstico histopatológico de mastocitoma. Foram avaliados fatores prognósticos clínicos, anátomo-patológicos, imuno-histoquímicos e genéticos, resultando na realização de cinco estudos distintos. O estudo 1 (n = 62) demonstrou elevada taxa de resposta aos glicocorticóides (64,5%), no tratamento de doença mensurável, e evidenciou o impacto negativo no prognóstico, na ausência de resposta a esses fármacos. No estudo 2 (n = 149), foi avaliada a importância dos diferentes fatores prognósticos, com a proposta de uma modificação no estadiamento clínico preconizado pela Organização Mundial de Saúde, definição de novos valores de corte para o índice mitótico e percentual de Ki-67. O estudo 3 (n = 98) evidenciou o benefício da quimioterapia em dose maxima tolerada, no controle do mastocitoma de alto risco, enquanto o estudo 4 (n = 21), demonstrou elevada eficácia da radioterapia adjuvante no controle, a longo prazo, de mastocitomas de risco intermediário. Por fim, ficou demonstrada, no estudo 5 (n = 31), a eficácia dos inibidores tirosina-quinase em pacientes com risco elevado, no tratamento de doença mensurável, inoperável, mas também no cenário adjuvante, embora o uso de glicocorticóides e agentes antineoplásicos possa comprometer essa resposta.

The objective of this thesis was to evaluate the effectiveness of prognostic factors and different therapeutic approaches towards canine mast cell tumour, considering its high incidence and heterogeneity in clinical presentation and biological behavior, representing a guideline for prognosis and treatment. It included dogs referred to the Veterinary Hospital (Universidade Federal de Minas Gerais, Brazil) and Queen's Veterinary School Hospital (University of Cambridge, United Kingdom), with histological diagnosis of mast cell tumour. Evaluated prognostic factors included clinical, histological, immunohistochemical and genetic features, resulting in five distinct studies. Study 1 (n = 62) demonstrated a high response rate to glucocorticoids (64.5%) in the treatment of measurable disease, and showed a negative impact on prognosis in the absence of response to these drugs. In study 2 (n = 149), the importance of different prognostic factors was evaluated, with a proposal of a modification for the World Health Organization´s recommended clinical staging, definition of new cut-off values for mitotic index and Ki-67. Study 3 (n = 98) showed the benefit of chemotherapy at maximum tolerated dose, in the control of high-risk mast cell tumours, while the study 4 (n = 21) demonstrated a high efficacy of adjuvant radiotherapy in the long-term control, of mast cell tumours of intermediate risk. Finally, it was demonstrated in the study 5 (n = 31), the effectiveness of tyrosine kinase inhibitors in patients at high risk, in the treatment of gross, unresectable disease, but also in the adjuvant setting, although the use of glucocorticoids and antineoplastic agents may compromise such response.

Efeito do ambiente endócrino peri-ovulatório na qualidade do ambiente uterino em vacas de corte: regulação no metabolismo das poliaminas, estresse oxidativo e proliferação celular

O objetivo do presente trabalho foi comparar os efeitos dos distintos ambientes endócrinos peri-ovulatórios na proliferação celular, no metabolismo das poliaminas e no ambiente redox do útero bovino durante o diestro inicial. Para isso, controlou-se farmacologicamente o crescimento do folículo objetivando induzir a ovulação de folículos de maior diâmetro (grupo folículo grande-CL grande, FG-CLG) ou de menor diâmetro (grupo folículo pequeno-CL pequeno, FP-CLP). Trinta vacas multíparas Nelore, foram pré-sincronizadas, metade destes animais foram destinados para o grupo FG-CLG e receberam uma dose de prostaglandina F2 (PGF) e um dispositivo de progesterona, juntamente com benzoato de estradiol no D10. No momento da retirada dos dispositivos de progesterona (entre D1,75 e D2,5) todos os animas receberam uma dose de PGF. A ovulação foi induzida com acetato de buserelina (D0). O que diferiu entre os tratamentos foi que os animais do grupo FP-CLP não receberam uma dose de PGF no D10 e o momento da retirada dos dispositivos foi entre D1,25 e o D1,5. No D7 um subgrupo dos animais foi abatido e amostras de endométrio e lavado uterino foram coletadas para as análises laboratoriais. Os animais do grupo FG-CLG apresentaram no D0 um folículo 1,2 vezes maior e estradiol 2,3 vezes maior em relação ao FP-CLP. Consequentemente, as vacas do FG-CLG desenvolveram CL maiores (1,6 vezes) e mais pesados (1,4 vezes) o que proporcionou no D7 concentrações de P4 1,5 vezes maior em relação ao FP-CLP. Primeiramente, uma análise do transcriptoma endometrial foi realizada e indicou que processos celulares como proliferação, composição de matrix extracelular, processos metabólicos e processos de oxirredução foram afetados pelo modelo experimental. Para avaliar a condição proliferativa e/ou apoptótica endometrial análises de imunomarcação foram realizadas (Ki-67, marcador de proliferação e caspase 3 ativada, marcador de apoptose). O número de células positivas para Ki-67 no epitélio luminal foi 4,1 vezes maior no FP-CLP, porém não houve diferença na marcação da caspase 3 ativada. No epitélio glandular tanto o ki-67 (1,4 vezes) como a caspase 3 ativada (2,6) estavam aumentados no grupo FG-CLG. Em relação à síntese das poliaminas não houve diferença entre os grupos nas concentrações das poliaminas e abundância dos transcritos e proteína das enzimas de síntese. Por outro lado, foi detectada uma forte associação entre a expressão do gene SAT1 com o gene ODC1 (r2: 0,73; P<0,01) e também entre os genes AZIN1 e AMD1 (r2: 0,61; P<0,01). Quanto ao ambiente redox não houve diferença entre os tratamentos no lavado uterino mas no endométrio, no grupo FP-CLP, houve redução da atividade das enzimas Catalase (0,5 vs 0,79 U/mg proteína; P<0,01), glutationa peroxidase (2,0 vs 2,43 nmol NADPH/min/mg proteína; P<0,01), aumento da atividade da Superóxido dismutase (44,77 vs 37,76 U; P=0,04) e da peroxidação lipídica (28,5 vs 17,43 nmol/MDA/mg proteína; P<0,001), mas sem alterar as quantidades da espécies reativas. De acordo com os resultados obtidos, pode-se concluir que o ambiente endócrino peri-ovulatório regula a proliferação endometrial mas sem alterar a via de síntese das poliaminas e modula também o ambiente redox uterino.

This work aimed to compare the effects of the different periovulatory endocrine milieu on the several molecular pathways: as cellular proliferation, polyamine metabolism and redox environment of the bovine uterus during the early diestrus. For this, we controlled pharmacologically the follicular growth to induce the ovulation of larger follicle (Large Follicle-Large Corpus lutem group LF-LCL) or smaller follicle (Small follicle-Small Corpus luteum group SF-SCL). Thirty multiparous Nelore cows were synchronized. Fifteen cows were assigned for each group. On the LF-LCL, the cows received a dose of prostaglandin F2 (PGF), a progesterone device and an estradiol benzoate on D10. On the time of progesterone device was withdraw (between D1.75 e D2.5) all the animals received a dose of PGF. The ovulation was induced with buserelin acetate (D0). The unique difference between the groups was that animals of SF-SCL did not received a dose of PGF on D10 and the progesterone device withdraw was between D1.25 e o D1.5. On D7 a subset of animals was slaughtered and the endometrial and uterine washings samples were collected for laboratorial analyses. On D0 the animals of LF-LCL had a 1.2 times larger follicles and 2.3 times higher levels of estradiol than animals of SF-SCL. Firstly, an endometrial transcriptome analyses was realized and suggested that several cellular processes as proliferation, metabolic processes and oxi-reduction processes were affected by experimental model. To evaluate the proliferative and/or apoptotic condition, endometrial immunohistochemistry analyses were realized (ki-67, proliferation marker and caspase 3 activated, apoptose marker). The number of Ki-67 positive cells in the luminal epithelium was 4.1 times higher on SF-SCL. However, there was no difference in caspase 3 activated analyses. On the glandular epithelium both ki-67 (1.4) and caspase 3 activated (2.6) were increased on LF-LCL. About polyamine synthesis pathway there was no difference in polyamines levels and gene and protein expression of synthesis enzymes between the groups. In other hand, it was detected a strong association between SAT1 gene expression and ODC1 gene expression (r2: 0.73; P<0.01) and also between AZIN1 and AMD1 gene expression (r2: 0.61; P<0.01).

Avaliação citológica e histopatológica de linfonodos regionais em cães portadores de mastocitomas de graus 1, 2 ou 3 e sua importância na determinação da sobrevida

Mastocitomas são neoplasias muito prevalentes em cães, e podem ser classificados em graus 1, 2 ou 3 de acordo com características morfológicas. O objetivo deste projeto foi investigar a presença de metástases de mastocitomas caninos de graus 1, 2 ou 3 em linfonodos regionais, procurando correlaciona-las ao intervalo livre de doença e à sobrevida dos animais. Para isto, avaliamos os parâmetros clínicos dos animais e das neoplasias em 57 cães portadores de mastocitoma cutâneo, registrando-se a porcentagem dos casos que apresentaram metástases, o grau histológico da neoplasia e a sobrevida dos animais. Realizou-se análise citológica dos linfonodos regionais previamente ao procedimento cirúrgico e posteriormente estes linfonodos foram excisados junto com a neoplasia primária, independentemente do resultado da citologia. Os tumores foram graduados por histopatologia e submetidos à análise imunoistoquímica com c-kit e Ki-67. Os linfonodos foram avaliados por histopatologia, por análise histoquímica e por imunoistoquímica com c-kit. Foi realizada comparação entre o diagnóstico citológico e histopatológico dos linfonodos quanto à presença de metástases e entre fatores prognósticos associados à neoplasia e a presença de metástase em linfonodo. A citologia demonstrou ser um bom exame na detecção de metástase em linfonodo de cães portadores de mastocitoma cutâneo, e foram observadas células metastáticas em 36 casos (36/46). Na análise histológica dos linfonodos, observamos um maior índice de metástase nos animais diagnosticados com mastocitomas de grau 3, segundo a graduação de Patnaik, e com mastocitomas de alto grau, segundo a graduação de Kiupel. No entanto, não encontramos uma associação significativa entre a presença de metástase em linfonodo e o grau histológico da neoplasia. O grau histológico associou-se à sobrevida independentemente da presença de metástase em linfonodo. Não houve associação entre o padrão de expressão da proteína KIT na neoplasia com a presença de metástase em linfonodo, nem a sobrevida. A utilização da imunoistoquímica em linfonodos metastáticos com c-kit foi um método eficaz, com predomínio do mesmo padrão de marcação da proteína KIT na neoplasia primária e no linfonodo. A expressão de Ki-67 na neoplasia correlacionou-se à presença de metástase em linfonodo e à uma menor sobrevida e intervalo livre de doença nos animais que apresentavam mastocitomas com índice de Ki-67 acima de 23. Na análise da sobrevida, não observamos diferença na sobrevida, nem no intervalo livre de doença, comparando-se os animais que apresentavam metástase em linfonodo e aqueles que não apresentavam, entretanto o índice de óbito e de progressão da doença neste estudo foram baixos. O intervalo livre de doença e sobrevida média não foram alcançados ao final do estudo. Os resultados sugerem que a presença de metástase em linfonodo não deve ser considerada como um fator prognóstico independente em cães diagnosticados com mastocitoma cutâneo, uma vez que outros fatores prognósticos, bem como a utilização de tratamentos adjuvantes, podem interferir de forma significativa na evolução destes pacientes.

Mast cell tumors are very prevalent in dogs, and can be classified in grades 1, 2 or 3 according to morphological characteristics.The aim of this study was to investigate the presence of metastases in regional lymph nodes of grade 1, 2 or 3 canine mast cell tumors, and correlate its presence to the disease-free interval and survival of the animals. For this, we evaluated the clinical parameters of animals and tumors in 57 dogs with cutaneous mast cell tumor, registering the percentage of cases with metastasis, histological grade of the tumor and survival of the animals. Cytological analysis of regional lymph nodes were performed prior to surgery and then these lymph nodes were excised along with the primary tumor, regardless of the result of cytology. The tumors were graded by histopathology and submitted to immunohistochemical analysis with c-kit and Ki-67. The lymph nodes were evaluated by histopathology, histochemistry and immunohistochemistry with c-kit. We compared the cytological and histopathological diagnosis of lymph nodes for the presence of metastases and compared prognostic factors associated with the primary tumor and the presence of metastasis in lymph node. Cytology proved to be a good method in detecting lymph node metastasis in dogs with cutaneous mast cell tumors and metastatic cells were observed in 36 cases (36/46). In the histological analysis of the lymph nodes, we observed a higher rate of metastasis in animals diagnosed with grade 3 mast cell tumors, according to the Patnaik grading system, and with high-grade mast cell tumors, according to the Kiupel grading system. However, we have not found a significant association between the presence of metastasis in lymph nodes and the histological grade of the tumors. Histological grade associated with survival independent of the presence of lymph node metastasis. In addition, there was no association between the pattern of KIT protein expression in the primary tumor and lymph node metastasies or survival. The use of immunohistochemistry in metastatic lymph nodes with c-kit is an effective method, with prevalence of the same KIT pattern in primary tumor and lymph node. The expression of Ki-67 in the primary tumor correlated with lymph node metastasis, survival and disease-free-time, and it was observed in animals in which mast cell tumors had a Ki-67 index higher than 23. In survival analysis, we observed no difference in survival or in disease-free interval, comparing the animals with lymph node metastasis and those who did not had, though the death rate and disease progression in this study were low. The disease-free interval and median survival were not reached at the end of the study. The results suggest that the presence of lymph node metastasis should not be considered as an independent prognostic factor in dogs diagnosed with cutaneous mast cell tumors, since other prognostic factors, as well as the establishment of adjuvant treatment, can interfere significantly with the progression of these patients.

Immunodetecção de marcadores de prognóstico em neoplasias mamárias de gatas: correlação dos padrões classificados

As neoplasias mamárias em gatas representam o terceiro tipo neoplásico mais frequente nesta espécie. A maioria destas neoplasias são malignas, e exibem alto potencial metastático. Devido a isto, e a escassez de trabalhos referentes ao prognóstico de gatas com câncer de mama, foram avaliados em 32 amostras de neoplasia mamária de gatas, a expressão imuno- histoquímica de alguns marcadores de prognóstico. As amostras foram segregadas em grupos seguindo os parâmetros de classificação da organização mundial de saúde em carcinomas tubulopapilares, cribriformes e sólidos e de acordo com o método de Nottighan modificado em graus I, II e III. Os cortes histológicos foram submetidos a processamento imuno-histoquímico para avaliação da expressão da metaloproteinase 9 (MMP-9), do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), da proteína de proliferação celular Ki- 67 e de linfócitos TCD3+, CD79+ e macrófagos, afim de se avaliar os diferentes padrões de classificação. Os resultados da marcação imuno- histoquímica foram avaliados com auxílio de um sistema de análise de imagem computadorizada para determinar a porcentagem da área imunomarcada. Em relação à classificação morfológica observou-se diferença significativa entre a densidade de linfócitos TCD3+ entre os grupos. Durante a análise nas amostras segregadas de acordo com a gradação histológica verificou-se diferença significativa entre a imunomarcação da MMP-9, entre a intensidade de infiltração de células TCD3+ e uma tendência de variação na proteína Ki-67. Observamos também correlação positiva entre os níveis de expressão da MMP-9 e da Ki-67, da MMP-9 e células TCD3, e da proteína Ki-67 com as células TCD3. Desta forma concluímos que classificação histológica dos carcinomas de mama em gatas não é um bom parâmetro para determinação do prognóstico da doença...

The mammary tumors in cats represent the third most common tumor type in the species. Most of these are malignant neoplasms exhibit a high metastatic potential. Because of this and the lack of studies regarding the prognosis for cats with breast cancer were evaluated 32 samples of breast cancer in cats. These samples were grouped according to morphological and histological classification, and the sections were submitted to immunohistochemical processing to evaluate the expression of metalloproteinase 9 (MMP-9), the vascular endothelial growth factor (VEGF) protein of cell proliferation Ki-67 and CD3 + T lymphocytes, and CD79 + macrophages in order to evaluate differences in the different grading standards. The results of immunohistochemical marking were evaluated by using a system of computerized image analysis to assess the percentage of area immunomarked. Regarding the morphological classification showed a significant difference between the amount of T lymphocytes CD3 + between the groups. During analysis the samples segregated according to histologic grading there was significant difference between the immunostaining of MMP-9, between the intensity of infiltration of T cells CD3 + and a tendency of variation in the Ki-67 protein. We also observed a positive correlation between the expression levels of MMP-9 and Ki-67, MMP-9 and TCD3 cells, and Ki-67 protein in cells T CD3+. Thus we conclude that histologic classification of breast carcinomas in cats is not a good parameter for determining the prognosis of the disease when evaluated together with the levels of immunohistochemical expression of MMP- 9, VEGF and Ki67. The best best parameters for determining the prognosis was observed when the histological grade was considered . The higher was the proliferative index determined by the positivity of Ki-67 protein from neoplastic cells, the greater...

Expressão de fator de crescimento semelhante à insulina (IGF-1), alvo da rapamicina em mamíferos (M-TOR), fator de célula tronco (SCF) e receptor C-KIT (CD117) em mastocitomas cutânios caninos em lâminas de arranjo de matriz tecidual (TMA)

O mastocitoma cutâneo (MTC) canino é uma neoplasia maligna constituída por mastócitos, que corresponde a aproximadamente 11% das neoplasias cutâneas do cão. A classificação histopatológica em três graus de malignidade, proposta por Patnaik et al. (1984) para os MTCs é o principal fator prognóstico. Recentemente, uma nova classificação com dois graus de malignidade foi proposta (KIUPEL et al., 2011) e parece trazer menor discordância na graduação. Neste estudo foram avaliadas as expressões proteicas de SCF, IGF-1, m-TOR e c-KIT através da técnica de imunoistoquímica (IHQ) em MTCs caninos em busca de novos fatores prognósticos. Analisaram-se as relações entre estas quatro proteínas e, entre IGF-1 e SCF com fatores prognósticos como o grau histológico, índice mitótico e proliferação celular, além de dados epidemiológicos como idade, gênero, porte físico e localização da lesão. Foram utilizadas 133 amostras de MTCs de 133 cães dispostas em lâminas de microarranjo de tecidos (TMA). A associação estatística foi observada entre a expressão de SCF e grau histológico de acordo com Kiupel et al. (2011), índice mitótico, proliferação celular pelo KI-67, localização da Iesão, idade, c-KIT e IGF-1. A expressão do fator de crescimento IGF-1 teve relação com o índice mitótico, o porte físico dos animais e a expressão de c-KIT e m-TOR. A expressão de SCF está relacionada ao padrão aberrante de expressão do seu receptor c-KIT. Com base nas relações observadas podemos concluir que as proteínas IGF-1, m-TOR, SCF e c-KIT interagem no desenvolvimento dos MTCs caninos e que cães de porte grande e gigante apresentam maior expressão de IGF-1, corroborando com maior incidência de MTCs nestas raças

The canine mast cell tumor (MTC) is a malignant neoplasm composed of mast cells, which corresponds to approximately 11% of cutaneous neoplasms of the dog. The histopathological classification in three grades of malignancy, proposed by Patnaik et al. (1984), for MTCs is the main prognostic factor. Recently, a new classification with two malignancy degrees was suggested (KIUPEL et al., 2011) and seems to bring less disagreement in diagnosis. We carried out the study evaluating the protein expression of SCF, IGF-1, m-TOR and c-KIT by immunohistochemical technique (IHC) in canine MTCs searching new prognostic factors. We analyzed the relationships between these four proteins, and between IGF-1 and SCF with prognostic factors such as histological grade, mitotic index and cell proliferation, as well as epidemiological data such as age, gender, physical size and location of the lesion. Were used 133 samples of canine MTCs. The statistical association was observed between the expression of SCF and histological grade according to Kiupel et al. (2011), mitotic index, cell proliferation by Ki-67, Iesion location, age, c-KIT and IGF-1. The growth factor IGF-1 expression was related to mitotic index, the animals physical size and the m-TOR expression. The SCF expression is related to the aberrant pattern of expression of its c-KIT receptor. The association between the IGF-1 expression and the animal size was observed, and seems to interact with the m-TOR co-expression. Based on the observed relationships we can conclude that IGF-1, m-TOR, SCF and c-KIT proteins interacts on the development of canine MTCs, and large and giant-sized animals show higher expression of IGF-1, confirming increased incidence of MTCs on these races

Avaliação imuno-histoquímica do marcado de proliferação celular KI-67 em glandula perianal normal e em neoplástica de cães

A causa dos tumores da glândula perianal é desconhecida, entretanto eles podem ser modulados por influência de hormônios gonadais, basicamente a testosterona, uma vez que há uma alta prevalência (até 95%) de regressão da forma benigna dessa neoplasia após a castração dos machos. A proteína Ki-67 foi descrita pela primeira vez em 1983 é uma proteína nãohistona, que não é expressa em células na fase G0, mas que pode ser detectada nas fases ativas do ciclo celular, G1, S, G2 e mitose Verificou-se que o Ki-67 está associado com a proliferação celular, estando a população de células tumorais positivas ao Ki-67 correlacionada com a evolução clínica da doença. Foram estudados 42 casos de neoplasias da glândula perineal, sendo 15 adenomas, 15 epiteliomas, 12 carcinomas. Foram utilizadas 13 amostras de tecido de glândula perianal normal, como controle. De cada animal foram obtidas informações como: sexo, idade, raça, presença de outras neoplasias, se castrado ou não, se em caso de fêmea havia o uso de anticoncepcional, tempo de evolução, recidiva e tempo de sobrevida. Dos 42 casos de neoplasias de glândulas perianais, 34 (80,95%) foram provenientes de cães machos e 8 (19,05%) de fêmeas. A média de idade dos machos com a neoplasia foi de 9,8 anos, e das fêmeas 7,4 anos, sendo que para os dois sexos a idade variou de 5 a 15 anos. Em relação às raças, 11 (26,19%) eram S.R.D. (sem raça definida), 9 (21,42%) Poodle, 4 (9,52%) Cocker Spaniel e Husky Siberiano. O histórico de diagnóstico de outras neoplasias, foi constatado em 23,80% dos animais deste estudo. Em relação à castração, 32 (94,11%) dos machos não eram castrados e apenas 8 (19,05%) fêmeas eram. O tempo de evolução da neoplasia apresentou média de 1,2 anos. Histórico de recidiva da neoplasia foram relatados em 14 animais, sendo maior...

The cause of perianal gland tumors is unknown, though they may be modulated by the influence of gonadal hormones, primarily testosterone, since there is a high prevalence (up to 95%) of regression of the benign tumor after males castration. Protein Ki-67 was first described in 1983, and it is a nonhistone protein, which is not expressed in G0 phase cells, but can be detected in the active phases of the cell cycle, G1, S, G2 and mitosis. It was found that Ki-67 is associated with cell proliferation, and the population of tumor cells positive for Ki-67 correlated with clinical outcome. In this present work we studied 42 cases of perineal gland neoplasms, being 15 adenomas, 15 epitheliomas and 12 carcinomas. We used 13 tissue samples of normal perianal gland as control. From each animal we obtained information such as gender, age, race, presence of other malignancies, neutering status, whether if there were female contraceptive use, duration, recurrence and survival time. Of the 42 cases of perianal gland neoplasms, 34 (80.95%) were from males and eight dogs (19.05%) females. The males average age with cancer was 9.8 years and 7.4 years for females and for both sexes aged between 5 and 15 years. In regard to race, 11 (26.19%) were no breed, 9 (21.42%) were Poodle, and 4 (9.52%) were Siberian Husky and Cocker Spaniels. The history of diagnosis of other cancers, was found in 23.80% of the animals in this study. In relation to castration, 32 (94.11%) of males were not castrated and only 8 (19.05%) were females. The progression of the tumor showed an average of 1.2 years. History of recurrence of cancer were reported in 14 animals, and was higher (66.66%) for carcinomas. Ki-67 staining revealed that the carcinomas showed higher proliferation rate (9.87%) compared to groups of epitheliomas...